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Facultad de Ciencias Agropecuarias

UNJBG, Tacna-Per

EXTRACCIN Y CARACTERIZACIN DEL ACEITE ESENCIAL DE MOLLE (Schinus molle L.)


EXTRACTION AND CHARACTERIZATION OF THE ESSENTIAL OIL OF MOLLE (Schinus molle L.) Shepanie K. Llanos Arapa
RESUMEN El estudio estuvo orientado a la extraccin de aceite esencial del fruto del Schinus molle L. (molle) de la Regin Tacna, as como a la caracterizacin fsico-qumica e identificacin de los componentes principales de dicho aceite; probndose tambin su actividad antimictica ante Penicillium italicum. Los puntos de recoleccin fueron el CPM de Los Palos (Provincia de Tacna) y el distrito de Tarata (Provincia de Tarata). Se determin el contenido de humedad (18,158%), cenizas (3,785%) y protenas (5,280%) para los frutos de Los Palos; y el contenido de humedad (21,875%), cenizas (3,353%) y protenas (5,560%) para los de Tarata. El aceite esencial se obtuvo por el mtodo de destilacin por arrastre de vapor de agua, el rendimiento para el lote N 01 (Los Palos) fue 6,575% (v/p), y para el lote N 02 (Tarata) fue 7,705% (v/p). Las caractersticas fsico-qumicas del aceite esencial lote N 01 (Los Palos) fueron: ndice de refraccin (1,478), densidad (0,846 g/cm3), densidad relativa (0,847), punto de congelacin (-35C), ndice de acidez (6,023 mg KOH/g) e ndice de ster (17,008); y para el aceite esencial lote N 02 (Tarata): ndice de refraccin (1,477), densidad (0,831 g/cm3), densidad relativa (0,832), punto de congelacin (-35C), ndice de acidez (12,718 mg KOH/g) e ndice de ster (23,148). Ambos aceites se analizaron por cromatografa de gases con detector FID, se identificaron los monoterpenos: limoneno, -pineno, -pineno, -mirceno, y -felandreno. Finalmente los aceites esenciales de molle inhibieron el desarrollo del hongo Penicillium italicum. Palabras clave: Schinus molle, frutos del molle, aceites esenciales, arrastre de vapor. ABSTRACT The study was aimed at the extraction of essential oil of the Schinus molle L. fruit (molle) from Tacna Region, as well as physical-chemical characterization and identification of the main components of this oil; proving also its antifungal activity against Penicillium italicum. The collection points were the Los Palos country (Tacna Province) and Tarata district (Tarata Province). Was determined the moisture content (18,158%), ash (3,785%) and protein (5,280%) for the Los Palos fruit, and the moisture content (21,875%), ash (3,353%) and protein (5,560%) for the Tarata fruit. The essential oil was obtained by the distillation method by drag of water vapor, the yield for lot N 01 (Los Palos) was 6,575% (v/w), and for lot N 02 (Tarata) was 7,705% (v/w). The physico-chemical properties of essential oil lot N 01 (Los Palos) were: refractive index (1,478), density (0,846 g/cm3), relative density (0,847), freezing point (-35C), acid (6,023 mg KOH/g) and index ester (17,008); and for the essential oil lot N 02 (Tarata) were: refractive index (1,477), density (0,831 g/cm3), relative density (0,832), freezing point (-35C), acid (12,718 mg KOH/g) and index ester (23,148). Both oils were analyzed by gas chromatography with FID detector, the monoterpenes were identified: limonene, -pinene, pinene, -myrcene, and -phellandrene. The molle essential oils inhibited the growth of the fungus Penicillium italicum.
Keywords: Schinus molle, molle fruit, essential oils, drag of water vapor. Escuela Acadmica Profesional de Ingeniera en Industrias Alimentarias (2012)

Extraccin y caracterizacin del aceite esencial de molle (Schinus molle L.)

1. INTRODUCCIN Las plantas han sido siempre una fuente indispensable para la obtencin de productos beneficiosos en la historia de la humanidad (Bandoni et al., 2009). Las antiguas civilizaciones usaron las especies vegetales tanto para fines alimenticios, como en medicina y cosmtica. En la actualidad, se ha revalorado el campo de aplicacin de las plantas y especias aromticas, en farmacologa y biotecnologa; la investigacin cientfica le abre un nuevo espacio a los aceites esenciales, evaluando su efecto anti-infeccioso, antimictico e insecticida, por medio de pruebas in-vitro y evaluaciones en tejidos vivos. El Per es uno de los pases con mayor biodiversidad en el mundo, muchas de sus especies vegetales pueden ser aprovechadas de forma sostenible por la industria, una clara alternativa es el Schinus molle L., un rbol nativo con aplicaciones medicinales, cuyo aceite esencial presenta propiedades insecticidas, antibacterianas y antifngicas, demostradas con un amplio espectro (Chirino et al., 2001; Zeng Yueqin, 2006). El objetivo general de este trabajo, fue extraer y caracterizar el aceite esencial de los frutos del molle de la regin de Tacna (CPM de Los Palos y distrito de Tarata). Los objetivos especficos fueron, caracterizar fsico-qumicamente la materia prima; determinar la influencia del lugar de origen de la materia prima sobre el rendimiento y en las caractersticas sensoriales del aceite esencial de molle; caracterizar fsico-qumicamente los aceites extrados de acuerdo a las tcnicas de anlisis establecidas en la Norma Tcnica Peruana, y comprobar la actividad antimictica de los aceites frente a Penicillium italicum. 2. MATERIALES Y MTODOS 2.1. RECOLECCIN Y ACONDICIONAMIENTO DE LA MATERIA PRIMA Recoleccin. Las muestras vegetales para este estudio estuvieron conformadas por los frutos maduros de rboles adultos del molle (Schinus molle L.), que fueron tomados de ejemplares pertenecientes a la regin de Tacna, especficamente del Centro Poblado Menor de Los Palos (Provincia de Tacna), y del sector de andenera Chacawira (Distrito y Provincia de Tarata), formando as los lotes N 01 y N 02 respectivamente y de acuerdo al lugar de origen (Fig. N 01); la poblacin de cada lote fue de 1,5 kg aproximadamente, entre tallos, hojas y racimos de fruto.

Figura N 01.- Racimos de fruto de molle del CPM Los Palos (derecha) y del distrito de Tarata (izquierda). Fuente: Elaboracin propia (2012).
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Secado. Despus, se realiz el secado de los racimos por cuatro semanas a condiciones atmosfricas normales: temperatura ambiental (11,1 - 27,9C), humedad relativa (66 - 84%), presin atmosfrica (948,4 - 954,1 mb) y bajo sombra (SENAMHI-Tacna, 2011). Triturado. Los tallos y cualquier tipo de impureza presente fueron separados de los frutos secos del molle, stos se trituraron gruesamente en un molino manual metlico, con el fin de facilitar el desprendimiento de los aceites esenciales y su transferencia al vapor. El producto se recibi en una bandeja de plstico, luego fue pesado y codificado, donde se formaron cuatro grupos por lote, cada grupo constituy una repeticin y en cada una de ellas se usaron 100 g de frutos triturados. 2.2. EXTRACCIN DE ACEITE ESENCIAL La extraccin de aceite esencial de molle se realiz con el mtodo de arrastre con vapor de agua (Vargas y Bottia, 2008), en un destilador a escala de laboratorio con capacidad de 500 ml, en el Laboratorio de Anlisis y Composicin de los Alimentos de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann (Tacna, Per), emplendose 100 g de muestra por cada corrida de extraccin. El vapor fue inyectado mediante un distribuidor interno al destilador donde la muestra fue sometida (durante una hora) al flujo de vapor producido, as fue liberando el aceite esencial contenido formando una mezcla de vapor saturado y aceite esencial que fue arrastrada corriente arriba hacia el tope del destilador, llegando despus al serpentn interno del condensador donde la mezcla fue condensada y enfriada por efecto del intercambio de calor con el agua corriente que lo circunda, dicho lquido de refrigeracin fue inyectado al condensador con un caudal de 0,016 l/s y sali del mismo con un caudal de 0,004 l/s. A la salida del condensador se obtuvo una emulsin lquida inestable que fue recibida en un colector de vidrio volumtrico, donde ocurri la divisin de fases a causa de la diferencia de densidades entre el agua y el aceite; el agua descendi a la parte inferior horadada del colector y fue expulsada (por efectos de presin y acumulacin), mientras que el aceite esencial se mantuvo en la cima de la acumulacin de lquidos hasta finalizado el tiempo de proceso. 2.3. RECEPCIN Y ALMACENAMIENTO DE LOS ACEITES Despus de cada corrida de extraccin, se registr el volumen (ml) del aceite esencial acumulado en el colector volumtrico, de donde se retir cuidadosamente para ser almacenado en frascos de vidrio color mbar de 10 ml de capacidad. Se taparon los depsitos y fueron aislados en un lugar fresco, seco y oscuro, en este caso, el almacn de materiales perteneciente al Laboratorio de Anlisis y Composicin de Alimentos de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann (Tacna, Per). 2.4. ANLISIS FSICO QUMICOS Caracterizacin fsico-qumica de la materia prima. Se determin el tamao y estructura de los frutos enteros (con y sin exocarpio). Se emple materia prima seca, triturada y pesada para las determinaciones de: contenido de humedad por el mtodo de prdida de peso, contenido de
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cenizas mediante incineracin de la muestra, y protena bruta por el mtodo de micro kjeldahl (A.O.A.C., 2005). Caracterizacin fsico-qumica de los aceites esenciales. Se determin el rendimiento del aceite esencial para cada lote usando la relacin entre el volumen de aceite esencial obtenido y la masa de la muestra vegetal. Para las determinaciones de: ndice de refraccin, densidad y densidad relativa, ndice de acidez e ndice de ster se cumplieron con los parmetros establecidos por la Norma Tcnica Peruana, NTP-ITINTEC con cdigo ICS 71.100.60, aunque para la determinacin del punto de congelacin se realizaron modificaciones a la norma, ingresando las muestras a un tnel de congelamiento tipo industrial perteneciente al Centro de Produccin Tecnolgica Pesquera (CEPROTEP) de la Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann (Tacna, Per), por el periodo de 8 horas a -35C. Anlisis cromatogrfico. Se uso el mtodo de cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama (FID), el equipo empleado fue un Varian modelo 450GC perteneciente al Laboratorio de Qumica Inorgnica N 12 de la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional de Ingeniera (Lima, Per), teniendo al helio como gas portador (5 ml/min), las muestras fueron diluidas en hexano, inyectndose en la siguiente programacin: 70C-160C, 4C/min, a 250C de temperatura del inyector. Se determin la composicin qumica voltil de los aceites esenciales de molle registrando el tiempo de retencin de sus componentes, luego mediante estndares conocidos se determin la composicin cualitativa de cuatro de sus monoterpenos. Evaluacin sensorial. Los anlisis sensoriales del producto final se efectuaron con la participacin de un panel de degustacin semi entrenado que evaluaron: color, olor y sabor. Cada evaluacin se realiz sometiendo las muestras del lote N 01, el lote N 02 y una muestra comercial tipo patrn (de la ciudad de Lima, Per), a una prueba de comparacin mltiple mediante fichas (Wittig, 2001). Las evaluaciones se realizaron en cabinas pertenecientes al Laboratorio de Anlisis Sensorial de los Alimentos de la Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann (Tacna, Per). 2.5. PRUEBA DE ACTIVIDAD ANTIMICTICA Para evaluar la actividad antimictica del aceite esencial de molle frente a uno de los hongos ms comunes de la naranja el Penicillium italicum, se emple primero la tcnica de microcultivo por el mtodo de Ridell para identificar al microorganismo, luego se aisl al hongo en tubos de agar suero naranja (ASN) de tipo inclinado que fueron cerrados y llevados a incubacin por 24 horas a 35C. Una vez que el hongo se hubo desarrollado en la superficie del agar, se tom una suspensin de esporas para desarrollar el mtodo de agar en difusin (Cano et al., 2008), donde la siembra del hongo se hizo en cuatro placas (dos placas por lote, cada cual con su placa testigo) en el centro de las cuales se cav un pozo de 1,45 cm de dimetro aprox., en las placas A y B se depositaron 0,1 ml de aceite esencial de molle, y en las placas T (testigo) se colocaron 0,1 ml de alcohol puro de 96, luego, fueron puestas en incubacin durante ocho das a temperatura ambiente, finalizado este periodo se registr el rea del halo de inhibicin. Paralelamente, se desarroll un mtodo emprico; en cuatro placas se solidific el agar ASN, en el centro de las placas A y B se sembraron superficialmente esporas de Penicillium italicum dentro de un crculo de 1 cm aprox. de dimetro, alrededor de esta rea se dej libre una
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distancia de 0,7 cm aprox. hasta la siguiente corona que se form con 0,025 ml de aceite esencial de molle esparcido con una pipeta. De la misma forma se trabaj con las placas testigo T, con la diferencia de que en stas, en lugar de una corona de aceite esencial se esparci 0,025 ml de agua destilada. Todas las placas se taparon, sealizaron e incubaron a temperatura ambiente por ocho das. 2.6. PROCESAMIENTO ESTADSTICO DE DATOS Influencia del lugar de origen en el rendimiento del aceite esencial de molle. Para evaluar esta influencia se aplic el diseo experimental completamente aleatorizado, y se trabaj con dos tratamientos y cuatro rplicas de acuerdo al nmero de muestras tomadas, en total ocho ensayos de extraccin que representan ocho valores de rendimiento considerados. Influencia del lugar de origen en las caractersticas sensoriales del aceite esencial de molle. Se trataron los datos hallados en la evaluacin sensorial con el diseo experimental en bloque completamente aleatorizado (diseo de dos factores), donde se trabaj con el anlisis de variancia a un nivel de confianza del 95%, complementado por la prueba de Tukey. 3. RESULTADOS Y DISCUSIONES 3.1. CARACTERIZACIN FSICO-QUMICA DE LA MATERIA PRIMA Tamao y estructura. Se obtuvieron los valores promedio de altura y dimetro de los frutos maduros del molle, con exocarpio y sin exocarpio (cuadro N 01). Cuadro N 01.- Valores de altura y dimetro en centmetros del fruto del molle.
Ejemplar Altura (cm) Dimetro (cm) Frutos de Los Palos Frutos de Tarata

CE SE CE SE

0,52 0,39 0,47 0,29

0,39 0,27 0,36 0,28

Donde: CE: Con exocarpio; SE: Sin exocarpio. Fuente: Elaboracin propia (2011). Aunque los valores registrados son semejantes para los frutos de ambos lotes, son inferiores a los de la bibliografa espaola, con dimensiones de 5 a 9 mm de dimetro para cada fruto (Zeng Yueqin, 2006), estas diferencias se deben aparentemente a las condiciones geobotnicas (suelo, luz, humedad y altitud) del lugar de origen de la planta. Con respecto a la estructura, los resultados de las observaciones se resumen en el cuadro N 02. Donde constan las principales partes del fruto y la semilla; se reconocieron las mismas partes en las muestras de ambos lotes.
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Cuadro N 02.- Descripcin de las principales partes del fruto del molle.
Parte del fruto Exocarpio Tipo y estructura Delgado y quebradizo Color Rojizo a rosceo y marrn bermejo Beige

Mesocarpio

Delgado y agrietado; contiene pequeos depsitos de aceite esencial libre Poco leoso y duro; de forma globosa y hueca Testa: Muy delgada, lisa y membranosa; de forma oblonga Embrin: Ligeramente ovalada y carnosa

Endocarpio Semilla

Mostaza Crema a amarillento Amarillento

Fuente: Elaboracin propia (2011). Caracterizacin qumica del fruto. Se determin el porcentaje de humedad, cenizas y protenas de los frutos del molle para ambos lotes (cuadro N 03). Cuadro N 03.- Caractersticas qumicas del fruto del molle.
Caracterstica Humedad Cenizas Protenas Frutos Los Palos Frutos Tarata

18,158% 3,785% 5,280%

21,875% 3,353% 5,560%

Fuente: Elaboracin propia (2011). Aunque los porcentajes de humedad son relativamente altos, con respecto a otras experiencias como las de Viturro et al. (2010), donde las semillas de molle secaron hasta llegar a 6,50% de humedad, hay que considerar, que en el presente estudio ambos lotes de materia prima estuvieron conformados por frutos enteros (con exocarpo que dificulta la liberacin de agua) y que fueron deshidratados a condiciones atmosfricas normales y bajo sombra, es decir, que el secado no fue forzado. El contenido de cenizas es menor ya que el fruto esta constituido estructuralmente en su mayora de fibra vegetal. Las fuentes de protena son escasas dentro del fruto del molle, lo que se ve reflejado en los porcentajes, as pues el mesocarpio es carnoso (donde se ubican la mayor parte de protenas) pero tambin es delgado y resinoso, el exocarpio y endocarpio son principalmente fibrosos, y su semilla es muy pequea.
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3.2. CARACTERIZACIN FSICO-QUMICA DE LOS ACEITES ESENCIALES En el cuadro N 04 se resumen los valores resultantes de las evaluaciones realizadas. Cuadro N 04.- Caractersticas fsico-qumicas del aceite esencial de molle.
Caracterstica Rendimiento (V/P) ndice de refraccin Densidad Densidad (g/cm3) Densidad relativa Punto de congelacin ndice de acidez (mg KOH/g) en cido linoleico ndice de ster Metabolitos voltiles secundarios, identificados en el anlisis cromatogrfico GC-FID Caractersticas sensoriales Color Aceite esencial Los Palos Aceite esencial Tarata

6,575% 1,478 0,846 0,847 -35C 6,023 17,008


Limoneno, -pineno, -pineno, -mirceno, -felandreno Transparente, ligeramente amarillo Herbceo, penetrante y ligeramente mentolado Herbceo, persistente y ligeramente amargo

7,705% 1,477 0,831 0,832 -35C 12,718 23,148


Limoneno, -pineno, -pineno, -mirceno, -felandreno Transparente, ligeramente amarillo Herbceo, penetrante y ligeramente mentolado Herbceo, persistente y ligeramente amargo

Olor

Sabor

Fuente: Elaboracin propia (2011). Rendimiento. Los rendimientos de aceite esencial obtenidos se encuentran dentro de los rangos registrados para frutos maduros y secos, que segn Viturro et al. (2010) es de 5,3-5,6%, y segn Figmay S.R.L. va de 5-7%. ndice de refraccin. As mismo los ndices de refraccin hallados se encuentran dentro de un rango comn de 1,474 - 1,478 registrado por la bibliografa; de igual manera los valores de densidad estn dentro del rango de 0,829 2 g/cm3 - 0,844 9 g/cm3 registrado para el aceite esencial de frutos maduros de molle en Latinoamrica (Viturro et al. 2010). Punto de congelacin. A -35C los aceites esenciales presentaron un ligero enturbiamiento precedido de la sedimentacin de una cantidad muy pequea de ceras (que no se pudo cuantificar), indicando que la presencia de residuos slidos no voltiles o viscosos es muy baja en el aceite estudiado, y por tanto es necesario someter los aceites a temperaturas inferiores a -35C
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para determinar el punto de congelacin; esta propiedad ofrece una ventaja operacional al aceite esencial de molle, ya que puede participar de procesos que se efecten a muy bajas temperaturas ambientales. ndice de acidez. Los ndices de acidez hallados para las muestras se expresaron en cido linoleico, y presentaron un alto contenido de cidos grasos del tipo insaturado, lo cual los convierte en aceites no aptos para el consumo humano, segn el Codex 19-1981 (enmienda del 2009). ndice de ster. El aceite esencial del lote N 02 (Tarata) present un ndice de ster mayor que el que tuvo el lote N 01 (Los Palos), de esto se deduce que contiene menos cidos grasos libres y ms cidos esterificados que su similar de Los Palos; por ende, el aceite esencial del lote N 02 (Tarata) posee mayor cantidad de compuestos con cualidades aromticas y enlaces ster. Anlisis cromatogrfico. El anlisis de cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama (GC-FID) gener dos cromatogramas (Figs. N 02 y N 03) que registraron cinco picos los que representan a los cinco metabolitos voltiles mayoritarios presentes en los aceites esenciales de molle que son los mismos para ambos lotes, estos compuestos son del tipo monoterpeno: limoneno, -pineno, -pineno, -mirceno y -felandreno. Estos elementos pertenecen al grupo de componentes caractersticos del aceite esencial de molle peruano (Ayacucho), a excepcin del mirceno (Viturro et al. 2010).

Figura N 02.- Cromatograma de picos para la muestra de aceite esencial de molle perteneciente al lote N 01 Los Palos. Fuente: Universidad Nacional de Ingeniera (2012).

Figura N 03.- Cromatograma de picos para la muestra de aceite esencial de molle perteneciente al lote N 02 Tarata. Fuente: Universidad Nacional de Ingeniera (2012).
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Evaluacin sensorial. Las caractersticas sensoriales penetrantes a los sentidos, de gran intensidad y persistencia en el medio, y que fueron manifestadas por los aceites esenciales de molle son producto de la mezcla compleja de compuestos que posee, de cidos (linolico), steres (octanoato de metilo) y metabolitos voltiles (limoneno, -pineno, -pineno, -mirceno y -felandreno). 3.3. PRUEBA DE ACTIVIDAD ANTIMICTICA Actividad antimictica del aceite esencial de molle perteneciente al lote N 01 (Los Palos). En la prueba del mtodo de agar en difusin, la placa A (aceite LP) evidenci un halo inhibitorio para el hongo Penicillium italicum, cuya rea fue de 3,496 cm2, donde el micelio fngico no se desarroll en el rea del halo, alrededor inmediato del pozo que contena aceite esencial de molle de Los Palos, pese a que el hongo fue inoculado en toda la placa. La placa Testigo (alcohol) no present halo de inhibicin, muy por el contrario, el micelio del hongo ingres al pozo donde se haba colocado inicialmente alcohol (figura N 04).

Figura N 04: Placa A (aceite LP) present halo de inhibicin frente a Penicillium italicum (derecha). Placa Testigo (alcohol) no present halo de inhibicin frente a Penicillium italicum (izquierda). Fuente: Elaboracin propia (2011). En la segunda prueba de tipo emprica, se observ en la placa A (aceite LP) que el aro de aceite esencial de molle (Los Palos) contuvo de manera significativa el desarrollo del Penicillium italicum a comparacin de la placa Testigo (alcohol) donde el micelio fngico rebas la corona de agua destilada que se coloc alrededor del rea de inoculacin (figura N 05).

Figura N 05: Placa A (aceite LP) la corona de aceite contuvo el desarrollo del Penicillium italicum (derecha). Placa Testigo (agua) el Penicillium italicum rebas la corona de agua (izquierda). Fuente: Elaboracin propia (2011).
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Actividad antimictica del aceite esencial de molle perteneciente al lote N 02 (Tarata). En la prueba del mtodo de agar en difusin, la placa B (aceite T) present un halo de inhibicin alrededor del pozo donde se haba depositado inicialmente el aceite esencial, el rea del halo fue de 5,161 cm2, donde el Penicillium italicum no pudo desarrollarse a pesar de haber sido inoculado en toda la placa. En la placa Testigo (alcohol) el micelio se desarroll con normalidad, no se observ halo de inhibicin (figura N 06).

Figura N 06: Placa B (aceite T) present halo de inhibicin frente a Penicillium italicum (derecha). Placa Testigo (alcohol) no present halo de inhibicin frente a Penicillium italicum (izquierda). Fuente: Elaboracin propia (2011). Las observaciones para las placas trabajadas con el mtodo emprico; en donde la placa B (aceite T) present menor desarrollo miceliar del hongo alrededor de la corona de aceite de molle (Tarata), en comparacin con la placa testigo trabajada con agua destilada (figura N 07).

Figura N 07: Placa B (aceite T) la corona de aceite contuvo el desarrollo del Penicillium italicum (derecha). Placa Testigo (agua) el Penicillium italicum rebas la corona de agua (izquierda). Fuente: Elaboracin propia (2011). Es posible que la mezcla y concentracin de los componentes voltiles del aceite esencial de molle alteren la permeabilidad de la membrana plasmtica de la clula fngica. As mismo, los aceites esenciales provocan la modificacin del pH del medio impidiendo el normal desarrollo del micelio. Para explicar esta actividad biolgica es necesario considerar la gran variedad de compuestos qumicos presentes en los aceites esenciales, es muy probable que su actividad antimicrobiana no sea atribuible a un mecanismo especfico, sino a la accin combinada de varios de ellos sobre distintas localizaciones de la clula microbiana (Vero et al., 2004).
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3.4. INFLUENCIA DEL LUGAR DE ORIGEN EN EL RENDIMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL DE MOLLE El procesamiento estadstico de los datos de rendimiento resolvi aceptar la hiptesis

H:1=2, determinando que el lugar de origen (CPM de Los Palos y distrito de Tarata) de la
muestra vegetal no tiene influencia significativa sobre el rendimiento de aceite esencial de molle. Esto corrobora el estudio realizado por Viturro et al. (2010) quienes fijaron como reales factores de variabilidad para la calidad del aceite esencial de molle latinoamericano, al tiempo de extraccin, al mtodo de extraccin y a la parte extrada de la planta. 3.5. INFLUENCIA DEL LUGAR DE ORIGEN EN LAS CARACTERSTICAS SENSORIALES DEL ACEITE ESENCIAL DE MOLLE En consecuencia del procesamiento de datos, en todos los casos se acept la hiptesis

H:1=2, determinndose que no hay diferencia significativa entre el color, olor y sabor de la
muestra del aceite esencial de molle del lote N 01 (Los Palos) y el color, olor y sabor de la muestra de aceite esencial del lote N 02 (Tarata) respectivamente. 4. CONCLUSIONES 1. Los frutos maduros del molle (con exocarpio) del CPM de Los Palos poseen un tamao ligeramente mayor de altura (0,52 cm) y dimetro (0,47 cm) que los de originarios del distrito Tarata, altura (0,39 cm) y dimetro (0,36 cm). 2. Los frutos del molle provenientes del CPM de Los Palos y del distrito de Tarata poseen una estructura semejante: exocarpio delgado y quebradizo (color rojizo a rosceo y marrn bermejo), mesocarpio resinoso (delgado y agrietado de color beige), endocarpio hueco (poco leoso y duro de color mostaza), y una pequea semilla de testa muy delgada y embrin carnoso. 3. Las caractersticas fsico-qumicas de los frutos de molle del CPM de Los Palos y del distrito de Tarata definieron a la materia prima como de elevada humedad, medianamente propensa al ataque fngico, buen estado sanitario, y bajo contenido en protena bruta y cenizas. 4. Se prob la hiptesis central de la investigacin, ya que la metodologa utilizada en este trabajo permiti la extraccin eficaz del aceite esencial de molle, logrando rendimientos de 6,575% (lote N 01, Los Palos) y 7,705% (lote N 02, Tarata) coincidentes con los valores bibliogrficos de 5,3 - 5,6% (Viturro et al., 2010) y 5 - 7% (Figmay S.R.L., 2007), e incluso superiores como en el caso del aceite esencial de molle de Tarata. 5. Con el tratamiento estadstico se probaron las hiptesis: a) El lugar de origen de los frutos del molle (CPM de Los Palos y distrito de Tarata) no es un factor que influye de manera significativa sobre el rendimiento de los aceites esenciales; b) el lugar de origen de los frutos del molle no influye de manera significativa sobre las caractersticas sensoriales (color, olor y sabor) de sus aceites esenciales. 6. Las caractersticas fsico-qumicas de los aceites esenciales de molle definieron sus propiedades de calidad: son de naturaleza insaturada, con alto contenido de hidrocarburos terpnicos y componentes voltiles, no corren peligro de enturbiamiento o precipitacin de
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ceras a temperaturas mayores de -35C, se oxidan por contaminacin y contacto permanente con el oxgeno o por incidencia de los rayos solares, no son aptos para el consumo humano ya que superan el lmite de acidez de 4,0 mg de KOH/g en cido linoleico (Codex 19-1981, enmienda 2009), y el aceite esencial de Tarata contiene ms cidos esterificados que su similar de Los Palos. 7. El anlisis de cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama (GC-FID) identific cinco elementos terpnicos en la composicin de los aceites esenciales de molle de los lotes N 01 (Los Palos) y N 02 (Tarata), cuatro son monoterpenos cclicos: limoneno, -pineno, -pineno y -felandreno; y un monoterpeno acclico: el -mirceno. 8. Los aceites esenciales de molle de los lotes N 01 (Los Palos) y N 02 (Tarata) poseen color ligeramente amarillo (transparente), olor herbceo (penetrante y ligeramente mentolado), sabor herbceo (persistente y ligeramente amargo). Su olor y sabor son caractersticos de la planta del molle. 9. Se demostr in vitro, la actividad antimictica de los aceites esenciales de molle pertenecientes al lote N 01 (Los Palos) y al lote N 02 (Tarata), los cuales inhibieron el desarrollo del hongo Penicillium italicum, en las dos pruebas desarrolladas. 10. El buen porcentaje de rendimiento del aceite esencial de molle y su actividad biolgica importante, le brindan a esta especie un alto potencial para ser parte de programas de aprovechamiento, como una alternativa a futuro en pos del desarrollo sostenible de pobladores de escasos recursos en las comunidades de la regin de Tacna (Per). 5. RECOMENDACIONES 1. Optimizar el secado de los frutos del molle mediante mtodos y parmetros adecuados para reducir la humedad de la materia prima cuidando de no provocar el deterioro o prdidas excesivas en aceite esencial por efecto de la vaporizacin. 2. Realizar la extraccin del aceite esencial de molle empleando equipos especializados como el equipo Clevenger, uno de los ms adecuados para la determinacin del contenido total del aceite esencial de una planta aromtica (Cerpa, 2007); con el fin de obtener mayores rendimientos y mejor calidad del aceite. 3. Complementar este estudio con el anlisis de cromatografa de gases acoplado a un espectrmetro de masas (GC-MS), que es una tcnica ms completa y especfica que permite la separacin e identificacin de los compuestos adems de cuantificar la concentracin de los mismos (Albarracn y Gallo, 2003). 4. Debido a la creciente importancia econmica que presentan esencias en el mercado mundial, y al inters que han despertado los aceites esenciales de especies nativas en la comunidad cientfica nacional, se sugiere continuar con estudios similares a este a fin de mejorar el aprovechamiento de las especies. 5. Realizar nuevos trabajos de investigacin sobre el aprovechamiento del aceite esencial de molle en el campo alimentario y agroindustrial, teniendo como base este estudio, ya que las propiedades fisico-qumicas del aceite y la mezcla de sus componentes qumicos hacen de este un producto potencialmente industrializable.
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Llanos Arapa, S. K.

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