Rev Esp Med Legal.

2011;37(2):59-66
Publicacin Oficial
de la

asOciacin naciOnal

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MdicOs fOrenses

medicina legal
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revISta eSpaola de

medIcINa legal
volumen Nmero abril-Junio 2011

37

Fundada en 1974

edItorIal
el mdico forense como garante de los derechos humanos

orIgINal
determinacin de un eje hipottico en registros incompletos. Su utilidad para la individualizacin de las marcas de mordeduras humanas

artcUlo eSpecIal
determinacin de drogas de abuso en pelo )

caSo mdIco-ForeNSeS
ectopic tubular pregnancy in post tubectomy death

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gua prctica de evaluacin medicoforense de alegaciones de maltratos y tortura

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drogas emergentes: una perspectiva medicolegal

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muerte sbita inexplicada en la epilepsia: implicaciones en patologa forense

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paludismo como causa de muerte sbita

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ARTCULO ESPECIAL

Determinacin de drogas de abuso en pelo

Ana Mara Bermejo Barrera* y Mara Jess Tabernero Duque
Instituto Universitario de Medicina Legal, Facultad de Medicina, Santiago de Compostela, La Corua, Espaa Recibido el 7 de febrero de 2011; aceptado el 23 de febrero de 2011

PALABRAS CLAVE
Pelo; Drogas de abuso; Alcohol etlico

Resumen La determinacin de drogas de abuso en pelo es hoy en da una tcnica habitual implantada en los laboratorios de toxicologa forense que siguen las recomendaciones propuestas por la Society of Hair Testing en el ao 2004. Es una muestra biolgica alternativa de fcil recogida, difcil adulteracin, que no necesita condiciones especiales de conservacin y, adems, permite demostrar consumos anteriores a la toma de muestra. Es por ello que sus aplicaciones son cada da numerosas, incluida la posibilidad de determinacin de marcadores de consumo crnico de alcohol etlico. No obstante, los mtodos analticos no estn an estandarizados por lo que ha de realizarse una correcta interpretacin de resultados y tener en cuenta las limitaciones que esta muestra biolgica presenta. 2011 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Publicado por Elsevier Espaa, S.L. Todos los derechos reservados.

KEYWORDS
Hair; Drugs of abuse; Ethyl alcohol

Determination of drugs of abuse in hair Abstract The determination of drugs of abuse in hair is now a routine technique in forensic toxicology laboratories following the Society of Hair Testing recommendations in 2004. It is an alternative biological sample that is, easily obtained, difficult to adulterate, does not require special storage conditions, and, furthermore, it demonstrates shows consumption prior to obtaining a blood or urine sample. For this reason, its applications are increasing in number, including the possibility of determining markers of chronic ethyl alcohol use. However, the analytical methods are not yet standardized; therefore, a correct interpretation of results must be performed, and the limitations of this biological sample must be taken into account. 2011 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Published by Elsevier Espaa, S.L. All rights reserved.

* Autor para correspondencia. Correo electrnico: anamaria.bermejo@usc.es (A.M. Bermejo Barrera).

0377-4732/$ - see front matter 2011 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Publicado por Elsevier Espaa, S.L. Todos los derechos reservados.

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A.M. Bermejo Barrero y M.J. Tabernero Duque

Tabla 1 Tiempo de aparicin y desaparicin de las drogas Matriz Plasma Saliva Orina Sudor Pelo Aparicin 1-2 h 1-2 h 2-4 h 2-4 h 1 semana Desaparicin Menos 24 h 24-26 h 3-6 das 3-6 das Hasta 1-2 aos

Introduccin
La investigacin toxicolgica de drogas de abuso en distintas matrices biolgicas ha sido siempre objeto de estudio y se ha desarrollado enormemente en los ltimos aos. La sangre y la orina han sido, a lo largo del tiempo, las muestras biolgicas ms utilizadas para el anlisis de drogas de abuso. La incorporacin de las drogas en estos fluidos es bien conocida y el anlisis y la interpretacin de resultados se han convertido ya en hbito en los laboratorios de toxicologa. Sin embargo, en las ltimas dcadas se han comenzado a utilizar las muestras alternativas, que ofrecen muchas ventajas frente a las muestras convencionales. Esto ha sido posible por el desarrollo reciente de tcnicas analticas de alta sensibilidad, que permiten la utilizacin de estas matrices, en las que, generalmente, se dispone de poca cantidad de muestra y con bajas concentraciones de txico, pero que son ms fciles de recoger y difciles de adulterar. Tras la absorcin de una droga, la distribucin, el metabolismo y las vas de excrecin justifican la aparicin secuencial de esta y sus metabolitos en diferentes tejidos y fluidos. Las propiedades fisicoqumicas de la droga y del fluido biolgico pueden ser utilizadas para racionalizar la aparicin de la droga en un fluido corporal o compartimento corporal. El pKa, la liposolubilidad, enlace a protenas y la composicin de los fluidos biolgicos determinan en gran medida en qu fluidos la droga est presente. En general, la eleccin de muestra biolgica que analizar est condicionada por una serie de factores: 1. Recogida de muestra. 2. Anlisis propiamente dicho. 3. Interpretacin de resultados. En cuanto a la recogida de muestra, se valorar: la invasividad, el riesgo de infeccin, la facilidad y rapidez de recogida, la necesidad de tener personal especializado para la toma, la facilidad de adulteracin, la posible contaminacin, as como el volumen de muestra recogida. En relacin con el anlisis, su finalidad cualitativa o cuantitativa, la ventana de deteccin, la concentracin/acumulacin de droga en la muestra, la estabilidad de la droga, la necesidad de almacenamiento especial, el pretratamiento, as como la posibilidad de interferencias, disponibilidad de tcnicas analticas, la rapidez de anlisis y el requerimiento de personal especializado, son tambin condicionantes en la eleccin de la muestra biolgica que analizar. Por ltimo, la interpretacin de resultados es tambin un determinante, en relacin con los posibles efectos farmacolgicos y el indicador de uso reciente de droga (horas), exposicin a corto plazo (das), exposicin a largo plazo (semanas), sin olvidar en algunos casos la validez medicolegal del anlisis cuando esta es importante. Es importante, adems, conocer los tiempos de aparicin y desaparicin de las drogas de las diferentes muestras biolgicas (tabla 1), sobre todo de aquellas de gran utilidad en toxicologa clnica y forense. Actualmente el principal obstculo al uso de toda la variedad de matrices alternativas est representado por la ausencia de mtodos de anlisis universalmente aceptados y estandarizados. As, el pelo y las matrices queratnicas,

en general, estn adquiriendo relevancia dentro de las muestras biolgicas, existiendo ya materiales de referencia y valores de corte a que atenerse. Por el contrario, muestras como la saliva o el sudor estn an en fase de estudio, aunque la SAHMSA (Substance Abuse Mental Health Service Administration) haya establecido una gua y valores de corte tambin para estas dos muestras.

Muestras biolgicas alternativas

Estas muestras presentan muchas ventajas frente a las convencionales como, principalmente, la facilidad de recogida, la dificultad de adulteracin y las diferentes ventanas de deteccin que presentan. Dichas ventanas, como puede verse en la figura 1, van desde pocas horas hasta aos, por lo que, segn la finalidad de nuestro anlisis, la eleccin de la muestra puede ser diferente. Dentro de las muestras biolgicas alternativas, el pelo ha comenzado ya a utilizarse como muestra biolgica en los aos sesenta-setenta para evaluar la exposicin a metales como el arsnico o el mercurio, al pensar que en dicha muestra estos compuestos seran almacenados por algn tiempo, por lo que su utilizacin era ms recomendable que la de la sangre o la orina. Aos ms tarde, comienzan a realizarse anlisis de compuestos orgnicos, entre ellos las drogas de abuso. Baumgartner (1979)1 public un trabajo sobre la determinacin de herona en pelo por radioinmunoensayo y, a partir de ese momento, comenz a utilizarse todo tipo de tcnicas analticas para este tipo de determinaciones. En 1995 se fund la Society of Hair Testing (SOHT), que ha establecido las lneas que deben seguirse en los anlisis de pelo, desde la recogida de la muestra, como su preparacin y anlisis propiamente dicho, estableciendo adems valores de cut-off de referencia tanto para los procedimientos de cribado como los de confirmacin. De hecho, en la actualidad es utilizado para determinacin de todo tipo de xenobiticos (drogas, frmacos, hormonas, contaminantes ambientales, etc.) en ciencias forenses, toxicologa clnica, etc. Hoy en da es la muestra no convencional cuya utilizacin se ha implantado ms en los laboratorios de toxicologa, al presentarse como una muestra alternativa a la orina para el anlisis de drogas de abuso, principalmente cuando esta no es vlida por haber transcurrido demasiado tiempo tras el ltimo consumo. La muestra de pelo permite demostrar consumo de drogas en momentos anteriores a la toma de muestra, ya que

Determinacin de drogas de abuso en pelo

Pelo Sudor Orina Saliva Sangre N. das 0,1 1 10 100 1.000 De 1 semana hasta aos 2-3 das 2-3 das 24 horas 24 horas

61 tallo del crecimiento del pelo. Adems, llegan tambin desde el sudor y las secreciones de las glndulas sebceas y apocrinas que rodean al folculo piloso, y por esta va se incorporan ya en el pelo definitivo. Esto explicara uno de los motivos de la gran variabilidad que existe en las concentraciones detectadas en el pelo entre individuos que consumen la misma dosis, debido a la gran variabilidad individual que existe en este tipo de secreciones. Por ltimo, no se puede dejar de mencionar el tercer mecanismo de incorporacin, la contaminacin externa, sobre todo en el caso de las drogas que se consumen por va inhalatoria o en las personas que manipulan grandes cantidades de droga3. Esta va ha de tenerse en cuenta siempre para evitar dar un falso resultado positivo. Por ello se recomienda un riguroso lavado de la muestra antes del anlisis. Una vez incorporadas, quedan retenidas en funcin de factores que dependen del pelo (cutcula, mdula, color) y factores que dependen de la droga (estructura qumica, lipofilia, afinidad por la melanina, capacidad de penetracin por la membrana). El efecto de la melanina sobre la incorporacin de las drogas al pelo fue objeto de estudios por numerosos autores4,5, demostrndose que, en general, las concentraciones de droga son ms altas en los pelos pigmentados. En efecto, se ha sealado que las drogas establecen un enlace con la melanina que facilita su retencin6,7. Nakahara (1992)8 dise un modelo experimental para estudiar la capacidad incorporativa de las drogas en el pelo (ICR), estudiando la relacin existente entre la concentracin de droga en sangre y en el pelo. Los resultados obtenidos han servido para clasificarlas en tres grupos segn sea su ICR: alto, medio o bajo. En esta clasificacin, sustancias como la cocana, con un ICR alto, son retenidas con facilidad en el pelo, al contrario de lo que ocurre con otras sustancias como el metabolito hidroxilado del cannabis, que por sus propiedades fisicoqumicas tiene dificultad para incorporarse a la matriz queratnica. Una vez incorporadas las drogas al pelo permanecen almacenadas en l sin sufrir alteraciones durante un tiempo,

Figura 1 Ventanas de deteccin de diferentes muestras biolgicas.

en ella aparecen las drogas a los 7-10 das tras el consumo y ah permanecen retenidas indefinidamente. Esto es debido a las propiedades que tiene el pelo de almacenar, sin metabolizar, las diferentes sustancias que llegan a l transportadas por la sangre o el sudor, representando una alternativa al anlisis de orina y de sangre cuando ha transcurrido demasiado tiempo desde el ltimo consumo. Es importante destacar, adems, la facilidad de toma de muestra, as como el hecho de que no necesita condiciones especiales de almacenamiento y conservacin. El anlisis de pelo no debe considerarse excluyente del de la orina, sino ms bien como una prueba complementaria, aunque el resultado cuantitativo que proporciona sirve para evaluar la severidad y el modelo individual de consumo, cosa que no ocurre con los resultados obtenidos en la orina. El mecanismo por el que las drogas se incorporan al pelo es bien conocido ya desde hace algunas dcadas. El modelo multicompartimental propuesto por Henderson (fig. 2) es hoy en da el ms aceptado2. Segn este modelo, las drogas llegan al pelo por varias vas: primero desde la sangre que irriga el folculo piloso, por lo que la droga se incorpora al

Pelo Superficie de la piel Glndulas sudorparas Pelo definitivo Glndulas sebceas y apocrinas

Contaminacin externa

Zona queratgena Zona de sntesis del pelo

S a n g r e

P i e l

Figura 2 Mecanismo de incorporacin de las drogas al pelo.

62 siempre y cuando el pelo no haya recibido tratamientos cosmticos. En este caso, la estabilidad de las drogas en la matriz queratnica est afectada. Asi, Martins et al9 demostraron la disminucin en la concentracin de compuestos anfetamnicos en pelos que previamente haban sido decolorados en comparacin con aquellos que no haban recibido ningn tratamiento cosmtico. Estudios similares han sido publicados para otras drogas10. Adems, se ha demostrado tambin que algunos tratamientos cosmticos producen interferencias analticas que pueden dificultar la deteccin de las drogas. Este es el caso del Minoxidil, que impide la deteccin de los derivados trimetilsilados de la cocana y sus metabolitos11. Los diferentes tipos de pelo que se encuentran en el cuerpo humano han sido propuestos para el anlisis de drogas; no obstante, las diferencias en la biologa de cada uno de ellos han de ser consideradas para una correcta interpretacin de los resultados analticos. En general, el pelo del cuero cabelludo es el que se analiza con ms frecuencia por ser el ms fcil de recoger y tener mayor grado de crecimiento, aunque es el ms expuesto a contaminacin externa y su integridad fisiolgica est ms alterada por los posibles tratamientos cosmticos que sobre l se realizan. El vello pbico y el axilar tambin se analizan a menudo; en estos tipos de pelo, la contaminacin por secreciones de las glndulas sudorparas apocrinas y sebceas es mayor. No obstante, en algunos casos es necesario recogerlos por tener una velocidad de crecimiento mucho ms lenta que el pelo del cuero cabelludo y, por lo tanto, su anlisis proporciona una informacin ms prolongada en el tiempo, aunque en este caso el anlisis secuencial no es posible. Los resultados obtenidos analizando los diferentes tipos de pelo no son comparables, ya que se ha demostrado en numerosos estudios que el vello pbico es el que almacena mayor cantidad de drogas, debido a su lenta velocidad de crecimiento12,13 y a la posibilidad de contaminacin externa por la orina.

A.M. Bermejo Barrero y M.J. Tabernero Duque mticos previos y, por supuesto, la zona del cuerpo donde se ha recogido la muestra. Las condiciones de almacenamiento no deben alterar la muestra, por ello, se recomienda almacenar las muestras en una habitacin oscura a temperatura ambiente. En los casos post mrtem, el pelo debe ser recogido antes de empezar la autopsia, a fin de evitar posible contaminacin por otras muestras biolgicas. La contaminacin externa es considerada una de las principales limitaciones del anlisis del pelo y, por ello, debe ser eliminada completamente o minimizada aplicando diversos mtodos:  Eliminado fuentes de contaminacin externa en el propio laboratorio. Utilizando valores apropiados de cut-off.  Realizando mltiples lavados con disolventes orgnicos o disoluciones acuosas.  Conservando el lquido del ltimo anlisis para realizar eventuales anlisis. La desintegracin o digestin del pelo y la extraccin de las sustancias son diferentes para cada laboratorio, pero ha de asegurar que no produce alteraciones en el patrn metablico de cada sustancia. Anlisis de cribado y confirmacin. Los primeros pueden efectuarse despus de la validacin de un mtodo analtico que permita la correcta identificacin de los analitos, con un cut-off que no d falsos resultados negativos. En lo que respecta a los anlisis de confirmacin, que generalmente se basan en mtodos espectrofotomtricos, deben ser tambin validados y los resultados de positividad dados segn los criterios recomendados por las sociedades cientficas aceptadas internacionalmente. Valores de corte (cut-off). Se han establecido valores de corte, a partir de los cuales un resultado debe considerarse positivo para los diferentes tipos de drogas. As:  Opiceos: se considera positivo a partir de 0,2 ng/mg en los anlisis de cribado y 0,2 ng/mg para cada sustancia en los anlisis de confirmacin. Adems, debe diferenciarse el uso de herona con el de codena o morfina, lo que nicamente se consigue con la identificacin de la 6-monoacetilmorfina (MAM).  Cocana: en este caso el punto de corte es de 0,5 ng/mg para las tcnicas de cribado y 0,5 ng/mg para la cocana y 0,05 ng/mg para cada uno de sus metabolitos en las tcnicas de confirmacin. En este caso, al menos uno de sus metabolitos debe ser identificado (benzoilecgonina, ecgonina metilster, cocaetileno o norcocana).  Anfetaminas: se considera positivo a partir de 0,2 ng/mg en las tcnicas de cribado y 0,2 ng/mg de cada anfetamina en las tcnicas de confirmacin.  Cannabis: 0,1 ng/mg se considera el valor mnimo detectable en los mtodos analticos de cribado, y los mismos valores para el THC en las tcnicas de confirmacin, mientras que para su metabolito el THC-COOH, 0,2 pg/ mg es la cantidad mnima detectable. La identificacin de este ltimo, aunque sea a bajas concentraciones, es imprescindible para poder establecer un consumo de cannabis.

Recomendaciones de la SOHT
La Society of Hair Testing (SOHT, 2004)14, tras diversas reuniones con diferentes laboratorios, ha llegado a un consenso para establecer unas guas para el anlisis de esta matriz biolgica con recomendaciones que afectan a varios aspectos: Recogida, transporte y conservacin. La correcta recogida de pelo es fundamental para la realizacin del anlisis. La muestra se debe recoger de la zona occipital y cortarse lo ms cerca posible de la raz, en una cantidad suficiente (200 mg, el dimetro de un lpiz), sealizando los extremos proximal y distal. Si se solicita un anlisis secuencial, el mechn de pelo se debe coger con una cinta adhesiva antes del corte. El pelo de eleccin es el del cuero cabelludo, pero si no est disponible, se recurre a otras partes del cuerpo, como se ha mencionado anteriormente. Adems, es importante el envo de la muestra con la informacin necesaria para cada caso, anotando la longitud, el color y la posibilidad de aplicacin de tratamientos cos-

Determinacin de drogas de abuso en pelo Controles de calidad internos. En el caso del pelo, no es fcil al no poseer materiales de referencia. Como alternativa, muestras positivas y negativas deben ser tratadas y analizadas conjuntamente con muestras reales para garantizar la calidad del anlisis. Controles de calidad externos. El laboratorio debe participar en controles interlaboratorios que reciben autnticos estndar de pelo para analizar conjuntamente con sus muestras habituales. Recomendaciones similares han sido publicadas por la SAMSHA (Substance Abuse and Mental Health and Service Administration)15 que ha establecido normas para la recogida de muestra y valores de cut-off.

63 traron la presencia de cocana en pelo de sujetos tras algn perodo de abstinencia, por lo que se deben establecer con cautela los perodos de consumo/abstinencia. Cuando no se dispone de muestra de cabello, se puede recurrir a otros tipos de pelo del cuerpo (pubis, axila, etc.), pero teniendo en cuenta la diferente biologa de cada uno de ellos. Los mecanismos y tiempos de acumulacin de los xenobiticos en estas matrices no estn todava aclarados, por ello se deben interpretar en este caso los resultados analticos con muchsima cautela. No se tiene la certeza, adems, de la ventana de deteccin de las diferentes drogas en estas muestras, considerada quiz hasta 2 aos, ni las relaciones entre la sustancia madre y sus metabolitos, que probablemente son diferentes que en el cabello. No se puede establecer una correlacin entre dosis consumida y concentracin detectada, ya que existe una gran variabilidad individual en la retencin de las drogas en el pelo, como ya se mencion anteriormente. Tampoco se ha establecido la dosis mnima detectable, por lo que un negativo no siempre excluye un consumo y el resultado cuantitativo del anlisis slo indica la severidad del consumo. En los ltimos aos, todos estos aspectos han sido recogidos por Musshoff y Burkhard19, que han estudiado las dificultades que a veces supone la interpretacin correcta de los resultados en los anlisis de pelo.

Interpretacin de resultados
La principal ventaja del anlisis de pelo es su capacidad de proporcionar informacin sobre un perodo preferentemente largo, adems de acumular la sustancia inalterada en mayor concentracin que sus metabolitos. La acumulacin de la sustancia madre permite no slo distinguir el consumo de herona del de morfina o codena, a travs de la identificacin de la MAM, sino tambin el uso ilcito de anfetaminas de sustancias que se pueden metabolizar a compuestos similares, como ocurre con la fenetilina, la selegilina, el clobenzorex, etc. El patrn metablico permitir distinguir diferentes situaciones y diferentes consumos que pueden producir el mismo metabolito. De hecho, la SOHT ha establecido unas relaciones mnimas de concentracin entre sustancia madre y su metabolito para dar un resultado positivo y excluir la contaminacin externa (MAM/morfina > 1,3; BEG/cocana > 0,05 y presencia de THC-COOH para confirmar uso de cannabis). A pesar de los esfuerzos efectuados para establecer criterios universales para dar un resultado de positividad, se deben considerar ciertos artefactos analticos que puedan alterar la relacin de los metabolitos. No siempre la relacin entre la concentracin de la sustancia madre y sus metabolitos entra en los criterios de positividad establecidos, aun tratndose de consumidores habituales. Un estudio publicado por Cairns et al16 en 2004 ha puesto de manifiesto tal aseveracin al analizar el pelo de 75 consumidores habituales de cocana, donde BEG/cocana no se ajustaba a lo establecido por la SOHT, detectndose, sin embargo, la presencia de norcocana y cocaetileno, que indicaban un consumo previo de la droga. De hecho, se considera que cuando la concentracin de cocana en el pelo es superior a 2 ng/mg, este criterio no es vlido. Adems, es necesario excluir la contaminacin externa persistente debida a contactos con la droga en mbitos de trabajo17. Por otro lado, la utilizacin de valores de corte (cut-off) adecuados para evitar dar falsos resultados positivos por contaminacin externa puede acarrear el riesgo de dar falsos resultados negativos, aun disponiendo hoy en da de tcnicas analticas de alta sensibilidad que permitiran detectar valores mucho ms bajos al cut-off. La interpretacin del resultado analtico debe ser efectuada considerando numerosas variables, especialmente cuando se trata de anlisis forenses. Asi, Felli et al18 demos-

Aplicaciones del analisis de pelo

Las principales aplicaciones del anlisis de pelo son aquellas derivadas de la amplia ventana de deteccin de las sustancias en la matriz queratnica. Al ser una muestra biolgica de fcil recogida y que no necesita condiciones especiales de conservacin, los estudios epidemiolgicos a gran escala son realizados sobre esta matriz. De hecho, han sido publicados numerosos estudios a este respecto, desde control de consumo de sustancias de abuso en poblacin universitaria20 hasta control de consumo de cocana durante la gestacin a travs del anlisis del pelo del recin nacido y del propio vello pbico materno21-23. Entre las mltiples aplicaciones que tiene el anlisis de pelo, el seguimiento de pacientes sometidos a curas de deshabituacin es una de las ms importantes, ya que se puede controlar de manera secuencial el cumplimiento teraputico. De la misma forma, es de gran utilidad en las ejecutorias penales, sustituyendo de esta forma los frecuentes anlisis de orina. Es utilizado, adems, para demostrar consumos habituales de drogas de abuso en sujetos que han pasado a disposicin judicial y cuya responsabilidad penal puede ser modificada por su condicin de drogodependiente. En este caso, el mdico forense es el encargado de la toma de muestra y determina la necesidad de la realizacin de la prueba como medio diagnstico para constatar tal adiccin. Los anlisis de pelo tambin pueden ser utilizados en el mbito laboral para controlar el consumo de sustancias de abuso por los trabajadores. Es tambin utilizado con frecuencia en procedimientos civiles relativos a la custodia de hijos con el fin de controlar el consumo de drogas por parte de alguno de los progenito-

64 res. De hecho, ya han sido publicados trabajos que ponen de manifiesto la utilidad de esta muestra biolgica para este fin2,25. En los ltimos aos ha comenzado a utilizarse esta muestra biolgica para demostrar la administracin de sustancias depresoras (benzodiacepinas, GHB, ketamina, etc.) a ancianos con fines criminales26 o en casos de agresiones sexuales27. En este caso ha llegado a determinarse la sustancia despus de una nica dosis administrada tras el paso de un breve perodo. Para tal fin, ha de tenerse en cuenta que deben pasar al menos 4 semanas para la toma de muestra del pelo, para dar tiempo a que las sustancias se depositen en la queratina en crecimiento y, adems, recoger una cantidad de muestra suficiente para realizar el anlisis de drogas en secciones seriadas del cabello.

A.M. Bermejo Barrero y M.J. Tabernero Duque En la prctica, en la mayora de los laboratorios forenses slo uno de los dos marcadores es determinado, particularmente el etilglucurnido. Sin embargo, recientemente se ha demostrado que el uso combinado de la determinacin de los dos marcadores mejora la sensibilidad del diagnstico del abuso de alcohol etlico. Aun as, se ha demostrado tambin que no hay proporcionalidad entre la dosis diaria consumida de alcohol y la concentracin de FAEE y etilglucurnido en el pelo, al igual que ocurre con las drogas de abuso, debido a variaciones interindividuales sumadas a los posibles errores analticos inevitables. Por todo ello, siempre existir la posibilidad de falsos positivo o negativo, posibilidad que disminuye si se utilizan los dos marcadores conjuntamente. Ambos se forman por diferentes vas metablicas del etanol y se incorporan al pelo por distintas vas, se eliminan del pelo por los tratamientos cosmticos en diferente cantidad (los FAEE son lipoflicos y el etilglucurnido, hidroflico), y adems se determinan por diferentes mtodos analticos. Por ello, el uso combinado de ambos es lo ms recomendable. Recientemente, las recomendaciones de la SOHT al respecto han sido cuestionadas por algunos autores por las razones anteriormente expuestas43.

Diagnstico del abuso de alcohol

Si bien durante mucho tiempo el anlisis del pelo solamente se relacionaba con las drogas de abuso, en los ltimos aos ha comenzado a utilizarse para la determinacin de marcadores directos de consumo de alcohol etlico. Existen varios tipos de marcadores de consumo de alcohol etlico dentro de los cuales los marcadores de estado son los ms importantes y los que se estn utilizando actualmente. Estos pueden ser directos o indirectos. Los marcadores directos son principalmente aquellos derivados de sus propios procesos metablicos, siendo los ms importantes el etilglucurnido, los steres etlicos de los cidos grasos (FAEES) y el cocaetileno, que ya desde hace algn tiempo han comenzado a determinarse en muestras de pelo28-30. Por el contrario, los marcadores indirectos son aquellos derivados de las alteraciones que el etanol produce en el organismo (VCM, CDT, GGT, etc.). En la actualidad han sido ya publicados numerosos mtodos analticos para la determinacin del etilglucurnido en pelo, utilizando tcnicas como la LC-MS31-35 o la GC-MS36-38. Por el contrario, para la determinacin de FAEES en pelo la microextraccin en fase slida acoplada a la GC-MS ha sido el mtodo ms utilizado39-41. Igualmente, se ha demostrado en numerosos estudios que la determinacin de estos dos compuestos es una poderosa herramienta para monitorizar la abstinencia y distinguir entre bebedores sociales y abusivos. En 2009 la Society of Hair Testing ha publicado los valores de cut-off para el etilglucurnido y FAEE para distinguir a los bebedores sociales de los consumidores crnicos. Los valores propuestos para el cuero cabelludo han sido de 30 pg/mg para el etilglucurnido y 0,5 ng/mg para la suma de los 4 FAEE (etilmiristato, etilpalmitato, etiloleato y etilestearato). A pesar de los numerosos estudios realizados hasta la fecha, la interpretacin de resultados no est tan clara como en el caso de las drogas de abuso. De hecho, la abstinencia total no puede ser demostrada ya que existen pequeas concentraciones de FAEE en el pelo de abstemios y nios y se han visto casos de bebedores moderados en los que el etilglucurnido no fue detectado en el pelo. Lo que s es cierto es que la presencia de etilglucurnido en el pelo y el aumento en la concentracin de FAEE excluye la abstinencia.

Limitaciones del anlisis del pelo

El anlisis de esta muestra biolgica, que ha comenzado a utilizarse de forma extensiva en las ltimas dcadas, no est exento de limitaciones que han de tenerse en cuenta. Todava hoy falta la total comprensin de los mecanismos de acumulacin de las drogas en el pelo y la estandarizacin de los mtodos analticos necesarios, as como la correcta interpretacin de resultados. Los primeros problemas pueden surgir cuando la recogida de la muestra no es adecuada (por ejemplo, longitud inadecuada del mechn). La muestra debe ir acompaada de la mxima informacin posible, incluyendo datos de la historia clnica, el propsito de la investigacin, sospecha de drogas y tiempo de consumo, etc. Adems, la posibilidad de dar un falso positivo por contaminacin externa siempre existe si el proceso de lavado de la muestra no ha sido suficientemente riguroso44. Se ha demostrado en sucesivas ocasiones que la correlacin existente entre dosis consumida y concentracin detectada es limitada debido a las diferencias interindividuales que existen en relacin con los procesos metablicos y picos plasmticos, as como de la propia incorporacin de las drogas en el pelo, su pigmentacin y su estado fsico. Por todo ello, se aconseja que cada laboratorio, que utiliza sus propios mtodos analticos, sea el encargado de realizar estadsticas entre sus casos.

Conclusiones
El pelo es una muestra biolgica alternativa de gran utilidad hoy en da en el campo de la pericia medicolegal, pero los resultados obtenidos en el anlisis han de interpretarse con suma cautela por la cantidad de parmetros que pueden afectarlo.

Determinacin de drogas de abuso en pelo

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