EFEITOS DA RADIAO ULTRAVIOLETA EM CLADONIA VERTICILLARIS (RADDI) FR.

, COLETADO DE SOLOS DE SALOPE

Iwelton Madson Celestino Pereira1; Waldeciro Colao2
Estudante do Curso de Graduao em Geografia Bacharelado CFCH - UFPE; E-mail: madson85@hotmail.com, 2Docente/pesquisador do Depto de Energia Nuclear CTG UFPE. E-mail: Wcolaco@ufpe.br.
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Sumrio: Formados a partir de uma simbiose entre fungos e algas (ou cianobactrias) os liquens so encontrados nos mais diversos ambientes do nosso planeta. Por este motivo, eles so alvos de estudos nas mais diversas reas do conhecimento. Contudo, pouco se tem estudado acerca da sua capacidade de resistncia radiao ultravioleta (UV). Assim, neste trabalho, objetivou-se avaliar doses de UV limites, s quais o lquen Cladonia verticillaris (Raddi) Fr. pode ser submetido sem sofrer danos a sua estrutura. Para tal, amostras do material liqunico (coletadas no municpio de Salo - PE) foram submetidas a diferentes doses de radiao UVB. As amostras do material irradiado (1,0g e 300mg) foram periodicamente coletadas para a extrao dos fenis e determinao dos teores de clorofila e de feofitina, que foram posteriormente quantificados. Neste contexto, transcorridos 30 dias da exposio radiao UVB, pde-se perceber que todas as doses administradas evidenciaram picos de produo de fenis, revelando que os teores de clorofila e feofitina permaneceram equiparados durante todo o perodo em estudo. Os resultados sugerem que, para fins de extrao, o tempo (ps-irradiao) mais adequado, seja o de 30 dias. Neste panorama pode-se entender que a radiao UVB interfere significativamente na fisiologia do lquen. Palavras-chave: fenis; lquen; radiao; ultravioleta INTRODUO Os liquens esto inseridos no reino Fungi, mesmo tendo sua estrutura formada a partir de uma associao entre fungos e algas (ou cianobactrias). Isso ocorre porque mais de 95% do volume de sua estrutura composto pelo micobionte (alga ou cianobactria). Conforme Xavier et al. (2006), aproximadamente 20% das espcies de fungos hoje conhecidas encontram-se de alguma forma associadas um micobionte. ento que, definir os liquens ainda bastante difcil e impreciso. Muito da problemtica de se definir os liquens vem do fato de que dificilmente as pessoas conseguem afastar de suas mentes que essas estruturas biolgicas no constituem um grupo taxonmico e, portanto, no podem ser definidas da maneira como se faz em Taxonomia (XAVIER FILHO et al., 2006, p. 25). A radiao solar de extrema importncia para a vida dos fotossintetizantes (vegetais), uma vez que, a partir da absoro da luz do sol realizam o processo de fotossntese (fundamental para a sua nutrio e sobrevivncia). Diversos estudos mostram que espcies diferentes de liquens possuem diferentes pontos de tolerncia exposio aos raios ultravioleta (UV), variando desde doses baixas at as mais elevadas (XAVIER FILHO et al., 2006). Pesquisas tambm revelam a capacidade do lquen de resistir radiao UV, graas a substncias cristalizadas na superfcie do seu talo (RANCAN et al., 2002). As substncias produzidas pelos liquens so amplamente usadas na indstria. A este exemplo podem ser citados alguns ramos que se utilizam dos liquens para sua produo, como as indstrias txteis, bactericidas,

farmacuticas e de perfumaria. um fato amplamente discutido que as espcies de liquens habitantes de zonas com alta intensidade de iluminao podem mostrar colorao marrom, negra (XAVIER FILHO et al., 2006). Esta colorao pode estar ligada produo de pigmentos, como a clorofila e a feofitina. Este ltimo, por exemplo, tem uma colorao amarronzada, que propicia uma menor absoro de luz, a qual, por sua vez, pode ser entendida como um mecanismo de proteo por parte do lquen. O lquen C. verticillaris (Raddi) Fr. pertence famlia Cladoniaceae (MARCELLI, 2006). uma espcie endmica do Brasil, podendo ser encontrada em toda a costa leste do pas (PEREIRA, 1998). Alvo de diversos estudos, esta espcie utilizada como biomonitora h muito tempo, em especial pelo Grupo de Liquenologia Aplicada da Universidade Federal de Pernambuco. Contudo, no Brasil, pouco se tem estudado acerca da sensibilidade destes organismos radiao solar e de sua capacidade de resistncia UVB. Assim, torna-se de fundamental importncia entender a capacidade de resistncia dos liquens a doses elevadas de radiao UVB. Isto, porque, em virtude dos altos nveis de devastao ambiental, estas espcies se tornam cada vez mais vulnerveis e colocam em risco a sobrevivncia de outras espcies que deles dependem direta ou indiretamente. MATERIAL E MTODOS O material liqunico foi coletado do municpio de Salo-PE, localizado na mesorregio do Agreste Pernambucano, microrregio de Garanhuns, a uma altitude de 1086m, nas latitudes e longitudes de 09 25' S e 36 79' W, respectivamente. A escolha do municpio se deu pela apresentao de uma flora liqunica consideravelmente abundante e a presena elevada da espcie C. verticillaris (Raddi) Fr. em natureza. Coletaram-se amostras do material liqunico de aproximadamente 270g. Estas foram acondicionadas em sacos de papel e levadas para o Laboratrio de Microbiologia de Solos, do Departamento de Energia Nuclear da Universidade Federal de Pernambuco (DEN/UFPE), onde secaram temperatura ambiente. Aps limpeza o material foi exposto a diferentes doses de radiao UVB, nos tempos de 16, 48, 96, 144, 192 e 240 minutos. Para esse procedimento de irradiao, utilizou-se uma lmpada TL 20W/01 RS, Philips, de emisso de raios UVB, colocada a 20cm sobre o material, segundo metodologia usada por Rancan et al. (2002). O material era borrifado trs vezes por semana com gua deionizada (2,5 mL/por vez). Amostras do material foram coletadas aos 15, 30, 60, 90,120 e 150 dias (contados a partir da montagem do experimento). Para extrao dos pigmentos (clorofila e feofitina), utilizou-se 300mg de lquen (pesado em balana de preciso), que foram cortados com tesoura, depositados em tubos de ensaio envolvidos em papel alumnio, infusos em 8,0ml de acetona 80%, deixados no escuro por 24 horas (CCERES, 1996) e posteriormente filtrados. Aps filtragem os extratos resultantes foram levados ao laboratrio de Bioqumica de Produtos Naturais, no Centro de Cincias Biolgicas (CCB) da UFPE e submetidos a leituras em espectrofotmetro, nos comprimentos de onda de 536, 645, 663 e 666nm. Para a anlise dos fenis, extraiu-se 1 (um) grama do material liqunico, que foi macerado, depositado em tubos de ensaio, infuso em 10 (dez) mL de ter, clorofrmio e acetona a 100%, com um intervalo de 24 horas entre cada infuso. Antes da troca do reagente os extratos dos tubos de ensaio foram filtrados e depositados em tubos de vidro e deixados para secagem. Aps a secagem, o extrato foi levado ao Laboratrio de Bioqumica de Produtos Naturais, no CCB/UFPE, onde foi removido das paredes do tubo e diludos em acetona a 100%, para leitura em espectrofotmetro, nos comprimentos de onda de 254, 310 e 366nm, conforme metodologia utilizada por Vasconcelos (2009). Os resultados obtidos das leituras foram aplicados em frmulas matemticas para

determinao dos teores de clorofila, feofitina e fenis, gerando grficos que podem ser observados nos resultados do presente trabalho. RESULTADOS E DISCUSSO Aps anlise dos extratos liqunicos foi possvel observar que o lquen C. verticillaris (Raddi) Fr. responde de forma significativa irradiao com UVB. Quando se observa o grfico referente aos teores de clorofila e de feofitina (Figura 9) pode-se perceber que a feofitina mostrou-se constantemente superior, contudo sem grande disparidade, o que sugere que o fotobionte no sofreu grande degradao e que sua capacidade de fotossintetizar no foi comprometida.

Figura 9: Grfico dos teores de clorofila e feofitina.

Quando se observa os valores referentes a anlise dos fenis liqunicos pode-se entender que as concentraes dos cidos protocetrricos e fumaprotocetrricos (Grficos 10 e 11, respectivamente) revelaram-se, em alguns momentos, consideravelmente aumentadas, o que sugere uma resposta irradiao sob condies laboratoriais.

Figura 10: Grfico das concentraes em mg/mL, do cido protocetrarico Figura 11: Grfico das concentraes em mg/mL, do cido fumaprotocetrarico

Assim, os aumentos nas concentraes dos fenis produzidos pelo lquen estudado (aos 30 dias aps a irradiao), associados s concentraes de clorofila e feofitina, podem corroborar capacidade de proteo do fotobionte (alga ou cianobacteria) pelo micobionte (fungo) a partir dos fenis produzidos em seu talo, como sugere Rancan et al. (2002). Ao observar o leve aumento da feofitina em detrimento da clorofila, possvel aceitar que isso ocorre como uma forma de proteo luminosidade, como fazem os liquens de reas descampadas, com alta incidncia luminosa, como aponta Xavier Filho et al. (2006). Ao observar os grficos referentes aos fenis (Figuras 10 e 11), pode-se perceber que, aps a coleta aos 30 dias, os teores diminuram consideravelmente. Contudo, voltaram a aumentar

nos meses posteriores, o que pode sugerir uma tendncia de mximo, queda e posterior ascendncia at um novo mximo ou estabilidade, que s pode ser corroborada por estudo de durao mais elevada. CONCLUSES Neste contexto, pode-se entender que o lquen C. verticillaris (Raddi) Fr. bastante sensvel s mudanas de intensidade luminosa e mostrou-se adaptvel s dosagens utilizadas neste estudo, deixando claro que para fins de extrao comercial dos fenis liqunicos o melhor perodo (ps-irradiao) o de 30 dias. Para entender a evoluo da resposta da espcie ao longo do tempo torna-se recomendvel um novo estudo com maior tempo de coleta, bem como a extrao dos fenis corticais do lquen coletado, para mensurar quanto dos valores acima referidos esto cristalizados na superfcie do talo. Assim, graas a estes resultados, possvel entender como o lquen em estudo responde radiao UVB. Tambm, possibilitar a utilizao desta radiao para potencializar a extrao de fenis, que por ventura possam interessar a indstria e ao desenvolvimento de novas pesquisas, sem que haja a necessidade de coleta de grandes quantidades de material. AGRADECIMENTOS Em primeiro lugar agradeo a Deus, tambm ao Cnpq, por financiar toda a pesquisa, UFPE pela estrutura, ao Prof. Waldeciro Colao pela pacincia ao orientar, a Pedro Paulo pelo companheirismo e carinho, aos professores(as) Eugenia Pereira, Helena Barros, Talitha Vasconcelos. Aos amigos: Andrezza Karla, Sidney Santana e outros. REFERNCIAS CCERES, M. E. S. Biomonitoramento ativo e passivo da qualidade do ar atmosfrico na cidade do Recife PE. Monografia de Bacharelado, Curso de Cincias Biolgicas, Universidade Federal de Pernambuco, 1996. MARCELLI, M. P. Fungos liquenizados. In: XAVIER-FILHO, L.; LEGAZ, M. E.; CORDOBA, C. V.; PEREIRA, E. C. G. Biologia de liquens. Rio de Janeiro: mbito Cultural, 2006. 25-74 pp. PEREIRA, E. C. Produo de metablicos por espcies de Cladoniaceae (lquen) a partir de imobilizao celular. Tese de Doutorado. Universidade Federal Rural de Pernambuco, 1998. 240 p. RANCAN, F.; ROSAN S.; BOEHM, K.; FERNANDEZ, E.; HIDALGO, M. E.; QUIHOT, W.; RUBIO, C.; BOEHM, F.; PIAZENA, H.; OLTMANNS, U. Protection against UVB irradiation by natural filters extracted from lichens. Journal of photochemistry and photobiology, n. 68, pp. 133-139, 2002 VASCONCELOS, T. L. Influncia do fsforo na produo de substncias transformadoras do solo sob Cladonia verticillaris (Raddi) Fr. Dissertao de Mestrado. Universidade Federal de Pernambuco, 2009. 74 p. XAVIER-FILHO, L.; LEGAZ, M. E.; CORDOBA, C. V.; PEREIRA, E. C. G. Biologia de liquens. Rio de Janeiro: mbito Cultural, 2006. 624 p.