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Las enzimas La Enzima Como Unidad Fundamental De Vida Cada clula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que comporta continuos cambios en su estado bioqumico, en la base de la cual estn las enzimas, que tienen el poder de catalizar, facilitar, y agilizar determinados procesos sintticos y analticos. Los propios genes son reguladores de la produccin de las enzimas; por tanto, genes y enzimas pueden considerados como las unidades fundamentales de la vida. La formacin de los prtidos, los glcidos y los lpidos es un ejemplo tpico: Son a la vez degradados y reconstruidos por otras reacciones enzimticas, produciendo energa a una velocidad adecuada para el organismo, sin el gasto energtico que exigen los mtodos qumicos de laboratorio. Importancia biomedica de las enzimas Sin enzimas, no sera posible la vida que conocemos. Igual que la biocatlisis que regula la velocidad a la cual tienen lugar los procesos fisiolgicos, las enzimas llevan a cabo funciones definitivos relacionadas con salud y la enfermedad. En tanto que, en la salud todos los procesos fisiolgicos ocurren de una manera ordenada y se conserva la homeostasis, durante los estados patolgicos, esta ltima puede ser perturbada de manera profunda. Caracteristicas de las enzimas Desde el punto de vista qumico, las enzimas estn formadas de carbono (C), Hidrgeno (H), oxigeno (O), Nitrgeno (Ni), y Azufre (S) combinados, pero siempre con peso molecular bastante elevado y comn propiedades catlicas especificas. Su importancia es tal que puede considerarse la vida como un "orden sistemtico de enzimas funcionales". Las enzimas, en los sistemas biolgicos constituyen las bases de las complejas y variadas reacciones que caracterizan los fenmenos vitales. La fijacin de la energa solar y la sntesis de sustancias alimenticias llevadas a cabo por los vegetales dependen de las enzimas presentes en las plantas. Los animales, a su vez, estn dotados de las

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enzimas que les permiten aprovechar los alimentos con fines energticos o estructurales; las funciones del metabolismo interno y de la vida de relacin, como la locomocin, la excitabilidad, la irritabilidad, la divisin celular, la reproduccin, etc.

Modifican la velocidad de los cambios promovidos por ellas. Determinan que sustancias particulares, de preferencia a otras distintas son las que van a sufrir los cambios.

Impulsan dentro de los distintos cambios posibles que pueda seguir una sustancia, cual de ellos en especial, ser el utilizado.

Las enzimas representan las sustancias encargadas de graduar la velocidad de una reaccin determinada en el interior de las clulas; como en las diversas clulas se realizan infinidad de reacciones, ya que en una de ellas se encuentran varios miles de sustancias, se deduce, tambin, la presencia de varios miles de enzimas. Es posible, por lo tanto, que la mayor parte de esta estructura protenica celular est formada por enzimas, encargadas de las diversas funciones de sntesis, degradacin, oxidacin, etc. caractersticas de la actividad vital de los distintos organismos. La estructura enzimtica Por su estructura y composicin qumica puede afirmarse que el origen de las enzimas esta vinculando al origen de las sustancias proteicas. Al hablar del origen de la vida se ha citado el xito de los experimentos realizados en el laboratorio para la produccin de aminocidos; estos aminocidos son los que precisamente constituyen la base del edificio proteico. Tambin en el laboratorio se ha intentado la sntesis de protenas a partir de aminocidos. La sede de las enzimas es el citoplasma. Los cloroplastos vegetales contienen una amplia gama enzimas encargadas de la funcin cloroflica, proceso que a travs de reacciones qumicas complejas y encadenadas transforman compuestos inorgnicos, como el agua, y el anhdrido carbnico, en sustancias complejas adecuadas para ser entre otras cosas el alimento fundamental de los animales.

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Naturaleza qumica de las enzimas Existen numerosas razones para afirmar que las enzimas son proteinas. La ms importantes son las siguientes: a. El anlisis de las enzimas obtenidas en forma ms pura, criatalizada, demuestra que son protenas. b. Las enzimas son inactivadas a altas temperaturas y, en geeral, la cintica de la desnaturalizacin trmica de las enzimas da resultados muy parecidos a los de la desnaturalizacin trmica de las protenas; por ejemplo el Q10 de la mayora de las reacciones qumicas es de 2 a 3, y, en el casod e las enzimas, a temperaturas elevadas, alrededor de 60 a 70 C, la actividad neta aumeta varios cientos, como sucede con la velocidad de la desnaturalizacin trmica de las protenas. c. Las enzimas son activadas en unas zona muy restringida de pH, y presenta un punto ptimo de ph donde su actividad es mayor. Las protenas en su punto isoelctrico, muestran propiedades parecidas desde el punto de vista de viscosidad, solubilidad, difucin, etc., que resulta del todo similares a las propiedades de este tipo que muestran las enzimas. d. Todos los agentes que desnaturalizan a las protenas tambin destruyen o inactivan a las enzimas, ya sea el calor, los cidos fuertes, o los metales pesados que puedesn combinarse con ellas. e. Los problemas de solubilidad y de precipitacin son comunes a las protenas y las enzimas; en general, son solubles en agua o soluciones salinas, insolubles en alcohol, precipitan con determinadas concentraciones de sales neutras, etc. Composicin qumica de las enzimas Los conocimientos sobre la composicin qumica de las enzimas constituyeron materia de numerosas controversias hasta 1926, cuando J.B Sumner (18871955) consigui cristalizar la ureasa, enzima que transforma la urea en anhdrido carbonico y amoniaco, y demostrar que era una sustancia proteica. A, partir de entonces fueron aisladas otras enzimas en forma pura, cristalina, y

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el anlisis demostraba siempre la presencia de una proteina, simple o conjugada. Cuando los analisi qumicos demuestran que la enzima es una protena conjugada, pueden distinguirse en los dos partes bien diferenciados:

El grupo prosteico (Coenzima) La proteina (Apoenzima) algunas enzimas oxidantes fue observada la presencia de la

En

promoporteinas, en las cuales el grupo prosptico esta representado por un compuesto que contiene Fe y otro elemento, el cual desmpea un papel importante en la combinacin de la proteina con el sustrato; otras veces este grupo prosttico es derivada de vitaminas (como la vitamina B); 4en muchos casos resulta facil de separar de la molcula proteica.

Solo protenas, que difieren entre si por la secuencia con que los aminocidos estn combinados, como la ureasa y las enzimas digestivas (la pepsina y la tripsina)

Los conjugados, separados en dos entidades qumicas bien definidas: la coenzima y la apoenzima.

Despus del descubrimiento de Sumner, el nmero de la enzimas y el estudio de sus actividades qumicas proporcionaron un notable impulso en la enzimologa, y la gran cantidad de las enzimas que rpidamente se acumulaban determinaron la necesidad de utilizar una clasificacin o nomenclatura para evitar errores y facilitar la comprensin de futuros investigadores. Nomenclatura y clasificacion de las enzimas Cien aos atrs solo se conocian enzimas, muchas de estas, catalizaban la hidrlisis de enlaces covalentes. Algunas enzimas, de manera especial las que fueron descubiertas en un principio, recibieron nombres ligados mas bien a su sitio de procedencia anatmica que no siguen ninguna regla ni sistema; tal es el caso de la ptialina de la saliva, que ataca al almidn de la pepsina del estmago y de la tripsina del pncreas, que atacan protenas; de la renina, que cuagula la leche; de la papaina, enzima proteoltica que se encuentra en la

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papaya y de las catepsinas, tambin proteasas, que se encuentran en las clulas. Las enzimas relacionadas con la cuagulacin de la sangre, como son la trombina, la plasmina, el plasmingeno, etc. reciben tambin nombres sistematizados. a continuacin solo se presenta principios generales del sistema IUB: 1. Las reacciones y las enzimas que las catalizan se dividen en 6 clases principales, cada una con 4 a 13 subclases. 2. El nombre de la enzima tiene 2 partes: la primera es el nombre del o los sustratos; la segunda, con terminacion asa, indica el tipo de reaccin catalizada. 3. Informacin adicional, si es necesario aclarar la reaccion, puede seguir el parentesis. Por ejemplo: la enzima que cataliza L-malato + NAD= = piruvato + CO2 NADH + H= , se denomina como 1.1.1.37 Lmalato:NAD+ oxidorreductasa (descarboxilante). 4. Cada enzima tiene un numero clave (E.C.) que caracteriza al tipo de reaccion segn la clase (primer digito), subclase (segundo digito) y subclase (tercer digito). El cuarto digito es para la enzima especifica. Asi, E.C. 2.7.1.1 denota la clase 2 (una transferasa), subclase 7 (transferencia de fosfato), sub-clase 1 (una funcion alcohol como aceptor de fosfato). El ultimo digito denota a la enzima hexocinasa o ATP: D-hexosa-6-fosforotransferasa, enzima que cataliza la

transferencia de fosfato desde el ATP al grupo hidroxilo de carbono 6 de la glucosa. Estos seis grupos son los siguientes: 1. Oxidoreductasas 2. Transferasas 3. Hidrolasas 4. Isomerasa 5. Liasas Estas reacciones enzimticas se desarrollan en dos tiempos: en el primero se forma un complejo intermedio con potencia energtica muy alta-, en el segundo

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utilizan la energa obtenida para realizar la reaccin de sntesis. Grupo 1. Oxidoreductasas Accion Catalizan oxidorreduccin. reacciones Tras la ejemplos de Dehidrogenasas accin Aminooxidasa Deaminasas

catlica quedan modificados en su grado de oxidacin por lo que debe ser transformados antes de volver a Catalasas actuar de nuevo.

2. Transferasas

Transfieren

grupos

activos Transaldolasas Transcetolasas Transaminasas

(obtenidos de la ruptura de ciertas molculas)a receptoras. otras Suelen sustancias actuar en

procesos de interconversiones de azucares, de aminocidos, etc 3. Hidrolasas Verifican reacciones de hidrlisis con Glucosidasas la consiguiente obtencin de Lipasas Peptidasas

monmeros a partir de polmeros. Suele ser de tipo digestivo, por lo que normalmente actan en primer Esterasas lugar Fosfatasas sobre determinadas Isomerasas de

4. Isomerasas

Actan

molculas obteniendo de ellas sus azcar ismeros de funcin o de posicin. Suelen actuar en procesos de Mutasas Epimerasas

interconversion

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5. Liasas Realizan la degradacin o sntesis Aldolasas (entonces se llaman sintetasas) de los enlaces denominados fuertes sin ir acoplados a sustancias de alto valor energtico. 6. Ligasas Realizan la degradacin o sntesis Carboxilasas de los enlaces fuertes mediante el acoplamiento a sustancias ricas en energa como los nucleosidos del ATP Partes del sistema enzimatico Los sistemas enzimticos en general, estn formados por la enzima propiamente dicha (apoenzima), el sustrato o los sustratos un grupo proteico ( o coenzimas) y sustancias activadoras. Apoenzima: concepto del centro activo La apoenzima es la enzima propiamente dicha, de naturaleza proteica formada por cadenas de polipptidos, con peso molculas elevado, no dializable y termolbil. Las estudiadas analticamente hasta ahora, han sido, por razones tcnicas de peso molecular bajo, 12 a 24 000, tienen una sola cadena polipeptdica (ribonucleasa, papaina, tripsina, pepcina, etc.) excepto uno o dos casos (a quimotripsina y aldolasa) que tienen dos. El anlisis de los aminocidos que componen a diversas enzimas demuestran que tienen una estructura similar a la de cualquier protena; existen, de hecho unos cuantos casos en los que se ha determinado su secuencia completa, es decir, el orden en el que estn dispuestos todos ellos en la cadena. Teniendo en cuenta estos hechos, se deduce, por lo tanto, que la actividad de la enzima depende en parte de la disposicin o arreglos de los aminocidos y grupos prostticos en determinada regin de la Peptidosintetasas Decarboxilasas

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protena. Los aminocidos que componen a las protenas pueden tener moderadas actividades catalticas, aunque de ninguna manera

comparable en su magnitud, cuando se les considera en forma aislada, a las que muestran la gran molcula proteica. Coenzima y grupos prostticos Aparte del sustrato, cuya transformacin ser condicionada por la enzima, existe otra parte del sistema enzimtico, de peso molculas bajo y por lo tanto dializable, termostable y en general, no protica, adherida de mas o menos laxa a la apoenzima y a la cual se le llama grupo prosttico, si est muy intimanente ligada a la apoenzima como es el caso del ncleo porfirnico de numerosas oxidasas o la estructura flavnica de la deshidrogenasa succnica o coenzima cuando la unin es dbil y se separan fcilmente, como por ejemplo el DPN y el TPN que asisten a las funciones de varias deshidrogenasas. Es muy grande la importancia del grupo prosttico o de la coenzima desde el punto de vista funcional pues suelen ceder y recibir alternadamente parte de los productos de la reaccin. Muchas enzimas requieren una coenzima Muchas enzimas que catalizan la transferencia de grupos y otras reacciones requieren, adems de su sustrato, una segunda molcula orgnica conocida como coenzima sin la cual son inactivas. Para distinguirlas de iones metlicos activadores y de las enzimas mismas, las coenzimas se definen como compuestos orgnicos termoestable, de peso molecular bajo, requeridas para la actividad de las enzimas. La mayor parte de las coenzimas se unen a las enzimas por fuerza no covalentes. Las que forman enlace covalentes con las enzimas se denominan tambin grupos prostticos.

Las coenzimas pueden considerarse como segundo sustrato

La coenzima puede considerarse como un segundo sustrato o cosustrato por dos razones. En primer lugar, los cambios qumicos en la coenzima compensa exactamente a los que realizan en el sustrato. Por ejemplo, en las reacciones o oxidorreduccin (deshidrogenasa), una molcula de sustrato es oxidasa y una

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molcula de coenzima es reducida.

Las coenzimas funcionan como reactivos en la transferencia de grupos

Las reacciones bioqumicas de transferencia de grupo del tipo. DG+A=AG+D En la cual un grupo funcional, G es transferido de una molcula denadora, D-G, a una molcula aceptora, A, por lo general comprende la participacin de una coenzima como ltimo aceptor (por ejemplo, reacciones de dehidrogenacin) o como portador intermediario del grupo (por ejemplo, reacciones de

transaminacin). El esquema siguiente muestra el ltimo concepto. D-H CoE A-G D CoE-G A Aunque estos sugiere la formacin de un complejo sencillo CoE-G, durante el curso de la reaccin global, pueden intervenir varios complejos intermediarios CoE-G en una reaccin particular (por ejemplo, transaminacin). Cuando el grupo transferido es el hidrgeno, es costumbre representar slo la "mitad izquierda de la reaccin": D-H CoE D CoE-H Que esto representa en realidad slo un caso especial de la transferencia general de grupos puede apreciarse mejor en trminos de las reacciones que ocurren en las clulas intactas. Se pueden representar de las siguientes manera: D-H CoE A-H D CoE-H A

Las coenzimas pueden clasificarse de acuerdo al grupo cuya transferencia facilitan

Basndose en este concepto podra clasificarse a las coenzimas como sigue:

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Para la transferencia de grupos distintos del hidrgeno:

Fosfatos de azcares CoASH Pirofosfato de tiamina. Fosfato de piridoxal Coenzimas del folato Biotina Coenzimas de cobamida (B12) cido lipoico Para la transferencia del hidrgeno: NAD+, DADP+ FMN, FAD. cido lipoico Coenzima Q.

Las enzimas son catalizadores estereoespecficos Casi todos los sustratos forman por lo menos tres enlaces con las enzimas. Esta adherencia en tres puntos pueden conferir asimetra a una molcula por otro lado simtrica. La figura * muestra una molcula de sustrato, representada como un tomo de carbono que tiene tres grupos diferentes, prximos a adherirse en tres puntos a un sitio de la enzima. Si el sitio puede ser alcanzado slo desde un lado y nicamente los tomos complementarios y los silios pueden interactuar (ambos suposiciones vlidas para las enzimas reales), la molcula se unir slo en una forma. La reaccin misma puede estar confinada a los tomos unidos en los sitios 1 y 2 an, cuando los tomos 1 y3 sean idnticos. Girando mentalmente la molcula de sustrato en el espacio, ntese que puede adherirse en tres puntos a un costado del sitio planar con una sola orientacin. Especificidad enzimtica Los distintos grupos de enzimas muestran variaciones considerables en su grado de especificidad. Algunas de ellas muestran requerimientos estrictos tanto para el sustrato (o los sustratos si se trata de reacciones bimoleculares)

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como para el tipo de unin qumica sobre el que van a actuar; pequeos cambios en cualquiera de ellos bastn para inactivar la reaccin; tal es el caso de la mayora de las enzimas. En otras ocaciones, la deshidrogenasa alcohlica, que funciona con DPN como coenzima, es absolutamente especfica para el DPN, pero pude actuar sobre diversos alcoholes aparte del etlico que es su sustrato caracterstico. Preparacin y purificacin de las enzimas Aun cuando se sabe que las propiedades de las enzimas in situ puden ser muy diferentes a las de las enzimas puras estudiadas en el laboratorio, est plenamente justificada la necesidad de tener preparaciones puras para hacer el estudio qumico completo de su actividad. En la actualidad se han cristalizado o purificado de manera adecuada cerca de unas 200 enzimas (del posible total de unas 5000 ) y quizas en los prximos aos aumente de modo considerable este nmero. Para extraer las enzimas de las clulas que las contienen, a menudo es necesario dividir finamente el tejido, por medio de un homogeneizador o una licuadora; los tratamientos ms enrgicos comprenden la molienda del tejido con arena el empleo de vibraciones ultrasnicas, los procesos alternados de congelamiento y descongelamiento, la autolsis , el desecado con calor o el emmpleo de solventes como la caetona, el ter y el tolueno. El desecado con acetona y la produccin de los llamados polvos acetnicos constituyen un excelente ejemplo de rotura de la menbrana celualr y la obtencin de un material rico en enzimas y de fcil concervacin. Cuando las enziams estn asociadas a lpidos, como sucede con als enzimas mitocondriales, es ventajoso el tratamiento con sustancias de tipo detergente o con butanol que disgregan la estructura lipoprotica y permiten la salida de las enzimas. Isoenzimas Al hacer el estudio electrofortico del suero humano normal y hacer un revelado de la actividad de la deshidrogenasa lctica se encontr distribuida en cinco bandas diferentes; se lleg as al concepto que es posible que en un tipo de tejido existan diversas y mltiples formas moleculares de una enzima, a las

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que se denominan isoenzimas. Son por lo tanto protenas con actividad cataltica que favorece la misma reaccin pero que pueden distinguirse por alguna caracterstica fsica, estructural, inmunolgica, etc. En el ejemplo antereior sus diferencias se rejistraron en la velocidad de migracin electrofortica. En otras ocaciones la diferencia eside en las propiedades cinticas; por ejemplo, existen dos deshidrogensas mlicas que catalizan la misma reaccin; sin embargo, actuan de modo distinto cuando se les pone en contacto con los anlogos artificiales del DPN y, adems, una es de origen mitocondrial, la otra se encuentra en el sobrenadante celular. Cinetica de las reacciones enzimaticas Aunque las leyes generales de la catlisis debieran ser vlidas para las enzimas, el hecho de que stas sean sustancias complejas, de alto peso molecular, de tamao coloidal y de composicin difcil de precisar, impide la aplicacin de dichas leyes de una manera estricta; por ejemplo, su tamao coloidal puede causar fenmenos de adsorcin o diversas reacciones debidas a sus numerosas cargas elctricas. No obstante, los factores que afectan la velocidad de la reaccin enzimtica son los ya sealados a propsito de las reacciones qumicas en general, como la temperatura y las concentraciones de las sustancias reaccionantes que, en este caso particular, son la enzima el sustrato. Adems intervienen el PH medio donde se realiza la reaccin, la presencia de los productos de la reaccin, y otros factores secundarios como las radiaciones y los efectos xido reductores. Relaciones entre la enzima y el sustrato. Es universalmente aceptado, que la enzima, como todo catalizador, participa de una manera activa en la reaccin. Existen pruebas experimentales de esta situacin cuando menos para algunos. Accin de inhibidores. Si a un sistema enzimtico se aaden sustancias que impidan la realizacin de la actividad propia de la enzima, se dice que el sistema ha sido inhibido, y la sustancia usada con estos fines se denomina inhibidor. Muchos inhibidores son agentes que desnaturalizan a las enzimas, ya que

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stas son molculas protenicas, susceptibles a una diversidad de agentes, especialmente qumicos, como aniones complejos o metales pesados, Zn ++, Pb ++, Ag ++, etc. A menudo estos agentes que impiden la actividad enzimtica actan sobre casi todas las enzimas, lo que demuestra que su accin no es especfica, sino que afectan a tosa molcula protenica . Tal es el caso de los inhibidores de sufhidrilos, -SH, los cuales forman parte de una gran variedad de enzimas. Otras sustancias bloquean especficamente

determinadas reacciones enzimticas y su especificidad es tal, que slo cierto sustrato y cierta enzima son los susceptibles. Inhibicion por competencia En este caso el inhibidor no permite la formacin del complejo enzima sustrato normal, ya que se forma un complejo enzima inhibidor ; una vez que el inhibidor ocupa el lugar activo de la enzima, el complejo enzima inhibidor, no se separa, en vista de que la enzima no tiene accin sobre el inhibidor y, por lo tanto, queda bloqueada la parte activa de la enzima. El sustrato no puede entrar al lugar activo, que est ocupado por el inhibidor y, de esta manera, se impide la accin enzimtica. El ejemplo clsico de inhibicin competitiva es el de la enzima deshidrogenasa succnica que, en presencia de cido succnico en cido fumrico, reduciendo, simultneamente, al acceptor de H. Diversas sustancias parecidas al cido succnico, como el cido malnico, el oxlico y el glutrico, se pueden combinar con la enzima e impiden su accin sobre el cido succnico. Inhibicion por no competencia Cuando las sustancias inhibidoras actan independientemente de la calidad del sustrato natural presente, se trata de inhibicin por no competencia. En este caso, el inhibidor bloquea loas sitios activos de la enzima de modo irreversible ; en ocasiones se trata de la desnaturalizacin de la enzima, como cuando se aaden aniones o cationes que precipitan las protenas. Hay enzimas que contienen iones metlicos indispensables para su actividad y que son susceptibles a la accin inespecfica de agentes que afectan dichos iones; tal es el caso de las enzimas con hierro que son intoxicadas por medio

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del cianuro o el H2S. De la misma manera, la adicin de oxalato a un sistema puede precipitar el calcio o el magnesio, e impedir la actividad de enzimas que los requieren. Antagonismo metaboloco (antimetabolitos) Las enzimas pueden ser inhibidas por diversos compuestos, especialmente los que presentan una estructura parecida al sustrato natural, como expres en el caso del cido malnico y el cido succnico con respecto a la deshidrogenasa succnica. Esta inhibicin se denomina metabolitos las sustancias presentes o producidas en el curso del metabolismo celular, y antimetabolitos las sustancias parecidas a aqullos, y que impiden su aprovechamiento y utilizacin ; en general, se trata de sustancias que compiten, a nivel enzimtico, en vista de su parecido estructural, con los metabolitos naturales. Numerosos hongos, actinomicetos, bacterias, etc., producen sustancias que muestran actividad contra otros microorganismos. Estas sustancias se han denominado antibiticos y, en principio, se deben considerar como

antimetabolitos que impiden, por razones de competencia , el crecimiento de determinadas formas microbianas. En medicina ha resultado del mayor inters el aislamiento y la actividad de los antibiticos, ya que en ciertas condiciones se usan para reprimir el desarrollo de grmenes patgenos para los seres humanos. El estudio de los antimetabolitos probablemente se inici al observar que numerosas bacterias podan crecer en un medio que tuviera sulfanilamida, que normalmente es un inhibidor de su crecimiento, siempre que se aadieran grandes cantidades de cido p-aminobenzoico, una vitamina necesaria para la nutricin celular. En vista del parecido estructural entre las dos molculas, la sulfanilamida y el cido p-aminobenzoico, se acept que los fenmenos de inhibicin tenan una base estructural. Entre los antibiticos, existen algunos de gran utilidad teraputica, como la penicilina, aislada de diversos hongos Penicillium ; la estreptomicina, proveniente de cultivos de Streptomyces griseus, y las tetracilinas, sustancias

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que tienen amplio campo de accin de diversas infecciones producidas por bacterias grampositivas o gramnegativas. Qumicamente, son sustancias complejas formadas por distintos grupos :por ejemplo, la estreptomicina contiene glucosamina, estreptosa y estreptidina. Algunos antibiticos son pptidos, de tipo bsico, aislados de bacterias, tales como la gramicidina y las tirocidinas. Un ejemplo peculiar de antibitico producido por el hongo Pemicillium notatum es la notatina, idntica a la enzima glucosa oxidasa que ataca a la glucosa permitiendo su conversin a gluconolactona y cido glucnico ; es posible que de esta manera ejerza su accin de antibitico. Muchos antimetabolitos suelen intervenir de modo especfico a nivel de las coenzimas o de los grupos prostticos, cuando stos son del tipo de las vitaminas. Se trata, por lo tanto, en estos casos, de antivitaminas , muy comunes en las del grupo B. As, la tiamina modificada en su estructura qumica para formar piritiamina o oxitiamina, no participa en los procesos de descarboxilacin. El cido piridn 3 sulfnico impide la accin de la vitamina natural parecida a l, o cido nicotnico y perturba numerosas reacciones de deshidrogenacin. La piridoxina es antiorganizada por la desoxipiridoxina y la biotina, de la misma manera, por la destiobiotina. Se han preparado numerosas sustancias parecidas a las bases pricas y pirimidnicas con la finalidad de bloquear los sistemas de formacin de protena, que dependen de la presencia de cidos nucleicos que contienen dichas bases, en el interior de la clulas; estos trabajos se han planeado para deprimir la velocidad de desarrollo de clulas cancerosas. Entre las sustancias obtenidas en fechas recientes se puede sealar el grupo del 5 fluorouracilo, que produce inhibicin tumoral por el siguiente mecanismo, que puede ser comn a un gran nmero de sustancias con estas propiedades : en el tumor falta la enzima que destruye el antimetabolito, en este caso el 5 fluorouracilo, el cual se vuelve muy agresivo hacia el tumor ya que no es degradado por l; en cambio, dicha sustancia es menos txica para el tejido normal que s est en posibilidad de destruirlo. Inhibicion alosterica De gran importancia en el fenmeno de la actividad enzimtica es el hecho de

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que, en las protenas, pueden existir dos (o cuando menos dos) sitios diferentes desde el punto de vista estereo- especfico y que, adems, estn en lugares distintos. Un de estos sitios es el centro activo, donde el sustrato es atacado para dar origen a los productos de la reaccin y por lo tanto donde reside el aspecto funcional de la protena. El otro sitio denomina sitio alostrico y en l puede acomodarse de manera complementaria - pero reversible alguna sustancia llamada efector alostrico ; al efectuarse esta unin se produce una alteracin discreta de la estructura de la protena, la transicin alostrica, que modifica la actividad biolgica de la protena, porque altera la distancia, las propiedades del sitio activo. Es muy importante que el efector alostrico normal no tiene relacin qumica o metablica alguna con el sustrato de dicha enzima y que su accin tan especfica se debe a que altera de tal modo la conformacin de la protena que modifica su centro activo. El efecto alostrico se ha estudiado de manera especial en bacterias, pero ocurre tambin en animales superiores. En un principio se reconoci como un efecto inhibidor que, por su caractersticas, fue denominado "por retroalimentacin" o "por producto final" . En rigor, en las bacterias, es la regla que el metabolito formado al final de un camino metablico, resulte un poderoso inhibidor de su propia sntesis. Parte de la explicacin de este efecto (pg. 535) se debe a que dicho metabolito inhibe especficamente a una sola enzima localizada en el camino metablico que forma a dicha sustancia, y de manera curiosa, la enzima sensible al metabolito final es la primera de este camino metablico. En un ejemplo de camino A B C D E, siendo E el metabolismo final, ste inhibira a la primera enzima la que forma B a partir de A. En este captulo en que se estudia la regulacin metablica se analizan con detalle algunos de estos ejemplos y las reacciones qumicas individuales afectadas. La inhibicin alostrica demuestra la alta especializacin de las enzimas que reconocen tanto al sustrato como al inhibidor, siendo muy especficas para ambos. Como qumicamente el sustrato y el efector alostrico son muy distintos, se acepta que la unin con la enzima debe efectuarse en sitios diferentes, lo que ha

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demostrado con mutantes bacterianas no sensibles al efector alostrico . Adems, no hay interaccin directa entre el sustrato y el inhibidor puesto que los sitios receptores estn muy separados. Enzimas: regulacion de actividades La regukacion del metabolismo logra la homeostacia La regulacin de la actividad enzimtica contribuye en gran parte a preservar la homeostasia que, mantiene un entorno intracelular e intraorgnico

relativamente constante en presencia de fluctuaciones amplias en al medio ambiente externo, como cambios de temperatura, presencia o ausencia de agua o tipos especficos de alimentos. Como conservar la homeostasia Las concentraciones locales de sustrato , comparticin de enzimas y secrecin como proenzimas o cimogenos ( como por ejemplo la quimiotripsina ) sin actividad cataltica contribuyen a la regulacin de los procesos metablicos . Adems , las alteraciones rpidas y mnimas en la actividad cataltica de enzimas reguladas clave tienen funciones importantes en la canalizacin selectiva de metabolitos hacia uno u otro proceso metablico . Las enzimas reguladoras Tienden a ser aquellas que catalizan una reaccin temprana nica ( con frecuencia la primera ) de una secuencia determinada de reacciones metablicas . La actividad cataltica de las enzimas reguladas puede modularse por ejemplo ,cambios repetidos entre estados bajo y alto de actividad cataltica ; cuando no hay sntesis protenica nueva ni degradacin protenica . La modulacin se logra cuando matabolitos especficos se unen en forma covalente y no covalente, a la enzima regulada en general a sitios ( alostricos ) bastantes separados del sitio cataltico . Tres mecanismos generales regulan la actividad enzimatica Por ejemplo el flujo neto de carbono en una reaccin catalizada en una

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reaccin enzimtica podra ser influido 1. Cambiando la cantidad absoluta de enzima presente. 2. Alterando el tamao del conjunto de sustancias reaccionantes distintas de la enzima. 3. Alterando la eficacia cataltica de la enzima (estas tres opciones son utilizadas e casi todas las formas de vida). La modulacin de actividad enzimtica por cambios en la conformacin del sitio cataltico puede incluir la alteracin de Km para un sustrato de Vmax para la reaccin global o para efectos sobre los dos, Km y Vmax. A menudo las curvas de saturacin de sustrato para la inhibicin alostrica son sigmoideas, por ende la ecuacin de Michaelis Menten no se aplica.

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Bibliografia I. Rodwel. et alli Bioquimica de Harper, 13 ed., s.d. II. Laguna, Jose Bioquimica, 2 ed., Facultad de Medicina, UNAM, Mexico D.F., Fournier S.A., 1969. Tema : Enzimas Curso : Qumica Ao:1999 Resumen: trata de las enzimas, que tienen el poder de catalizar, facilitar, y agilizar determinados procesos sintticos y analticos de la vida , contiene la evolucion de la enzimologia caracteriasticas como actuan en el organismo , etc

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