UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN

MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA

FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO
Fecha: Abril de 2011

Cdigo: GRL-006

Versin: 4.0

INFORMACIN BSICA
NOMBRE DE LA PRCTICA:
Hidrlisis de Carbohidratos.

PRCTICA No.

ASIGNATURA: Bioqumica.
TEMA DE LA PRCTICA: Biomolculas.
LABORATORIO A UTILIZAR: Laboratorio de Bioqumica.
CONTENIDO DE LA GUA
OBJETIVOS
Reconocer la reaccin de hidrlisis cida de polisacridos y disacridos como el almidn, la celulosa y
la sacarosa.
Detectar la formacin de monosacridos como producto de la hidrlisis cida de los polisacridos y los
disacridos estudiados, por medio de pruebas qumicas.
INTRODUCCIN
El trmino carbohidrato es usado para nombrar una gran cantidad de polihidroxialdehdos y polihidroxicetonas
que por condensacin polimrica forman molculas denominadas disacridos o polisacridos. El almidn de
los alimentos, el azcar de cocina, la celulosa de la madera, el algodn y el papel son algunos ejemplos de
carbohidratos que comnmente conocemos.
Los carbohidratos generalmente se clasifican en monosacridos, disacridos o polisacridos. Los
monosacridos son azucares simples como la glucosa y la fructosa que no se pueden convertir por hidrlisis en
molculas ms pequeas, en cambio los disacridos o polisacridos son azucares complejos formados por dos
o ms monosacridos, por ende cuando son hidrolizados pueden producir este tipo de azucares.
En esta prctica de Laboratorio se hidrolizara almidn, sacarosa y celulosa por medio de la adicin de cido
diluido, el estudiante estar en capacidad de comprobar la formacin de los monosacridos correspondientes
por medio de la adicin del reactivo de Fehling.
MARCO TERICO
1. LOS CARBOHIDRATOS
La sacarosa (azcar comn) sintetizada en las plantas, es un producto intermedio de la fotosntesis, en la que
la energa de la luz del sol es reunida y usada para la sntesis de glucosa de CO2 y H2O (Cooper, 2000). Los
carbohidratos representan aproximadamente un 50% de la biomasa presente en el planeta, lo que los hacen
las biomolculas ms abundantes sobre la superficie terrestre. stas son muy importantes porque conforman
la estructura del material biolgico, juegan un papel importante en el reconocimiento molecular y son la
principal forma metablica de almacenamiento de energa. Usualmente, menos del 1% de la luz del sol
disponible es convertida en energa qumica potencial por fotosntesis, pues la energa del sol es almacenada
en los enlaces qumicos de los componentes estructurales de los carbohidratos. Si esta biomasa es procesada
eficientemente, ya sea qumica o biolgicamente, extrayendo la energa almacenada en los enlaces qumicos,
la energa producida se combinar con el oxgeno presente, oxidando el carbono y produciendo CO 2 y H2O,
este proceso es cclico, pues el CO2 producido estar disponible para producir nuevamente biomasa. El hombre
desde sus inicios ha sacado provecho de la energa almacenada en los enlaces qumicos de la biomasa, por
medio de la quema de combustibles y el consumo de plantas para la nutricin (McKendry, 2002).

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Versin: 4.0

1.1 LA SACAROSA
La sacarosa es un disacrido formado por glucosa y fructosa (Figura 1) se une por un enlace glicosdico el cual
bloquea los dos enlaces de los grupos carbonilo, en consecuencia este azcar es no reductor y por tanto no
se oxida dando resultados negativos al reaccionar con el reactivo de Fehling. La sacarosa se puede hidrolizar
(incorpora una molcula de agua) por diferentes medios, ya sean por accin de la enzima invertasa presente
en la saliva y el tracto digestivo o por accin de cidos diluidos como el cido clorhdrico. Al hidrolizarse, la
sacarosa produce un equivalente de glucosa y otro de fructosa esta mezcla se conoce como azcar invertida
(Biogeo_OV, 2011).
OH

Sacarosa

O H

(Dglucopiranosil Dfructofuransido)

H
OH

HO
H

OH
O

OH

O
HO

Glucosa

Fructosa
H

HO

OH

Figura 1. Estructura de la sacarosa.

1.2 EL ALMIDN
Es un polisacrido muy abundante en las semillas, frutos y tubrculos. Est formado por molculas de -Dglucosa, en la molcula de almidn se puede distinguir dos fracciones: La amilosa, que es insoluble en agua
fra y en la que la glucosa se enlaza por las uniones 1,4- - glicosdicas, y la otra fraccin denominada
amilopectina (Figura 2), ste es un polmero soluble en agua fra cuyas ramificaciones 1,6- -glucosdicas se
presentan aproximadamente cada 25 unidades de glucosa.

Figura 2. Fragmento de la molcula del almidn correspondiente a amilopectina, la unidad encerrada en el crculo
corresponde a la glucosa. Tomado de Biogeo_OV (Biogeo_OV, 2011)
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Versin: 4.0

El almidn se digiere en la boca y en el estmago por medio de las enzimas glicosidasas, las cuales hidrolizan
selectivamente los enlaces -glicosdicos, estas enzimas catalizan la hidrlisis de estos enlaces y liberan las
molculas de glucosa. La hidrlisis del almidn tambin se puede llevar a cabo por accin del calor y un cido
en medio acuoso dando como resultado la formacin de unidades de glucosa.
La celulosa es otro polisacrido de gran importancia que consta de miles de unidades de D-glucosa que se
enlazan por uniones 1,4-b-glicosdicas como las de la celobiosa (Figura 3). La molculas de celulosa pueden
interactuar por enlaces de hidrgeno, formando una macroestructura, que es la responsable de la resistencia
y rigidez caractersticas de las plantas, por ejemplo en el pasto, las hojas y el algodn (Nelson, 1993) (Stryer,
1995)

OH

6
5

O
H

OH
3

1
2

OH

OH

H
H

H
1

OH

OH

O O

OH
3

1
2

OH

OH

Figura 3. Estructura de la celulosa donde se observa los enlaces 1,4-glucosa

La celulosa puede ser degradada por diferentes compuestos, entre los cuales se encuentra el cido sulfrico,
cuya accin depende de la concentracin y duracin del contacto. Si el cido se usa concentrado y fro aumenta
el volumen y produce una sustancia parecida a la fcula y al engrudo de almidn. Cuando sta, se vierte en
mucha agua separa unos copos incoloros que dan una coloracin azul al tratarse con lugol (solucin de yodo),
llamndose por esta razn amiloide. Si contacto del cido sulfrico con la celulosa es corto la capa amiloide
solo se forma en la superficie, propiedad que es aprovechada para la fabricacin de papel pergamino (Stryer,
1995)
CONSULTA PREVIA
1. Cul es la diferencia del enlace qumico entre las glucosas que conforman el almidn y la celulosa?
Explique sealando las diferencias en los dibujos de los respectivos enlaces qumicos (1,0/5,0).
DIBUJO ENLACE GLUCOSAS EN EL ALMIDN

EXPLICACIN:

DIBUJO ENLACE GLUCOSAS EN LA CELULOSA

EXPLICACIN:

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2. Complete la siguiente reaccin de hidrlisis de la sacarosa (1,0/5,0)

OH
HO

O H

H
OH

H
H

HO

OH

OH

Sacarosa

OH

Complete la reaccin de hidrlisis del almidn (1,0/5,0)

OH

OH

OH

O H

OH

H
H

OH

O
H

OH

Almidn

4.

HO

O
H

3.

OH

Para qu se hidrolizan los disacridos y polisacridos en el organismo? (1,0/5,0)

______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

RIESGOS Y SEGURIDAD (1,0/5,0)

REACTIVO

PELIGROS

CONSEJOS DE PRECAUCIN

Frases H

Frases P

cido Clorhdrico

cido Sulfrico

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Hidrxido de
Sodio
(Presente en reactivo
de Fehling B)

Lugol de Gram

Sulfato de Cobre II
(Presente en reactivo
de Fehling A)

METODOLOGA
1. Ingreso de los estudiantes a la prctica (Cada uno debe tener sus elementos de bioseguridad: Guantes,
Tapabocas y bata).
2. Entrega y revisin de consulta previa.
3. Presentacin de Quiz sobre los objetivos, introduccin, marco terico y consulta previa.
4. Retroalimentacin de consulta previa, la cual incluye aclaracin en las posibles dudas que tengan los
estudiantes.
5. Explicacin del procedimiento por parte del docente.
6. Entrega de material laboratorio.
7. Desarrollo de la prctica.
8. Puesta en comn de los resultados obtenidos, posibles causas de error y conclusiones.
9. Realizacin y entrega del Informe de Laboratorio.
10. Entrega y revisin del material de Laboratorio.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR
MATERIALES Y EQUIPOS

1
1
1
1
8
1
1
5
5
8
1

Beaker de 400 mL
Beaker de 250 mL
Pinza para tubo de ensayo
Vidrio de Reloj
Tubos de ensayo
Gradilla
Probeta 50 mL
Pipeta Graduada de 5 mL
Pipeteadores
Pipetas Pasteur
Plancha de Calentamiento

REACTIVOS

2 mL
10 mL
10 mL
3 mL
2 mL
4 mL
10 mL
1g
5 mL

MATERIALES ESTUDIANTE

cido Sulfrico concentrado Elementos de Bioseguridad

HCl 10%
1 Encendedor o fsforos
Almidn 1%
1 Marcador Sharpie
NaOH 10%
1 Pao absorbente
Lugol
Felhing A y B
Sacarosa 50%
Algodn
Agua destilada
Papel Indicador Universal

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PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. CONSULTA DE EQUIPO ESPECIALIZADO.

Usar elementos de proteccin bata, tapabocas, guantes y gafas como requisitos mnimos de seguridad al
ingresar al laboratorio.
NUNCA corra o juegue en el Laboratorio, puede ocasionar un accidente.
EN LO POSIBLE, no saque de la cabina los reactivos que emitan vapores peligrosos.
Nunca pipetear con la boca. Utilice los pipeteadores.
No utilizar la misma pipeta para varios reactivos ya que los contamina.
Dejar el lugar de trabajo limpio, seco y organizado.
Lavar cuidadosamente todo el material al iniciar y al finalizar la prctica.
Al emplear la plancha de calentamiento tenga precaucin de que el cable NO toque superficies
calientes.
NUNCA coloque material de vidrio caliente sobre superficies fras.

PROCEDIMIENTO A UTILIZAR
HIDRLISIS DE ALMIDN
Tubo de Ensayo
5 mL Almidn al 1%
3 mL HCl al 10%
Calentar en Bao de Maria
1 Calentar por 5 min.

Rotular como Sln AH

PRUEBAS AL ALMIDN HIDROLIZADO

PRUEBA DE FEHLING

PRUEBA DE LUGOL
Vidrio de Reloj

Tubo 1

Tubo 2

2 mL Sln AH
1 gota Sln AH

1 gota Almidn 1%

0.5 mL Fehling A
0.5 mL Fehling B

2 gotas de Lugol

Observar Coloracin

2 mL Almidn 1%

0,5 mL NaOH
3M

Bao de Maria, 100C

Observar Coloracin

1 Agitar los tubos.

2 La aparicin de una coloracin Oscura indica la presencia de ALMIDN.
4 La aparicin de una coloracin precipitado Rojo Ladrillo indica la presencia de AZCARES REDUCTORES.

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HIDRLISIS DE LA SACAROSA
Tubo 2

Tubo 1

2 mL Sacarosa al 50%

Tubo 3
2 mL Sacarosa al 50%

2 mL Sacarosa al 50%

2 mL Agua Destilada

2 mL NaOH 10 %

1 Bao de Mara 70C

1 Bao de Mara 70C

2 mL HCl 10 %

1 Bao de Mara 70C

1 mL NaOH 10%

0,5 mL de Fehling A
0,5 mL de Fehling B
Bao de Mara, 100C
Observar Coloracin

1 Calentar por 5 min.

3 Aparicin de precipitado Rojo Ladrillo es positiva para Azcares Reductores.

HIDRLISIS DE LA CELULOSA

PRUEBA DE FEHLING A LA CELULOSA

Beaker 250 mL

Tubo 1

Tubo 2

2 mL Sln CH

0,2g Algodn
1 mL H2SO4

0,5g Algodn

1 mL NaOH 10%

10 mL Agua Destilada

0.5 mL de Fehling A
0.5 mL de Fehling B

Bao de Mara, 70C, 15min

Bao de Mara, 100C, 5min
Rotular como Sln CH

Observar Coloracin

1 Adicionar gota a gota por la paredes del beaker.

2 Aparicin de precipitado Rojo Ladrillo es positiva para Azucares Reductores.

BIBLIOGRAFA
Biogeo_OV. (2011). http://www.educastur.es/. Obtenido de
http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2bch/B1_BIOQUIMICA/t13_GLUCIDOS
Cooper, G. (2000). Books: NCBI. Obtenido de http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9861/
McKendry, P. (2002). faculty.washington.edu: University of Washington. Obtenido de
http://faculty.washington.edu/stevehar/Biomass-Overview.pdf
Nelson, D. L. (1993). Lehninger Principles of Biochemistry. Worth Pubs.
Stryer, T. (1995). Bioqumica. Revert S.A.
ELABOR

REVIS

Firma:
Firma:
Nombre: Profesores Laboratorio de Nombre: Lic Alba Chaparro
Bioqumica
Fecha: Julio 2012
Fecha: Enero de 2013

APROB
Firma:
Nombre: Ing. Claudia Fernndez
Fecha: Enero de 2013
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INFORME DE LABORATORIO
ESTUDIANTES:

GRUPO:

NOTA:

CARRERA:
Formule tres objetivos que desee cumplir con la prctica de laboratorio.(0,5/5,0)
(Deben realizarse durante la prctica)

1. ______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

2. ______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

3. ______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

Elabore un Mapa conceptual del tema a tratar en la Prctica de Laboratorio (0,5/5,0).

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RESULTADOS
1.

Completar las siguientes tablas con los resultados obtenidos (1,0/5,0)

LUGOL
MUESTRA

OBSERVACIONES

FEHLING
RESULTADO
(+) o (-)

OBSERVACIONES

RESULTADO
(+) o (-)

ALMIDN SIN
HIDROLIZAR

ALMIDN
HIDROLIZADO

FEHLING
MUESTRA

OBSERVACIONES

RESULTADO
(+) o (-)

SACAROSA
CON AGUA

SACAROSA
CON NaOH

SACAROSA
CON HCL

FEHLING
MUESTRA

OBSERVACIONES

RESULTADO
(+) o (-)

ALGODN

ALGODN
HIDROLIZADO

CUESTIONARIO
1.

A Qu se debe la diferencia de color al realizar la prueba del lugol con el almidn hidrolizado y con el
almidn sin hidrolizar? (0,3/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
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2.

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Versin: 4.0

A Qu se debe la diferencia de color al realizar la prueba de Fehling con el almidn hidrolizado y con el
almidn sin hidrolizar? (0,3/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

3.

Con cul prueba se detect la hidrolisis de un polisacrido y por qu esta prueba permite determinar que
realmente se llev a cabo la reaccin? (0,3/5,0)
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

4.

Cul es la accin que ejercen el cido y el hidrxido sobre la sacarosa? (0,3/5,0)

______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

5.

Qu le sucede al algodn cuando est en contacto con el cido sulfrico? (0,3/5,0)

______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS:

Mencione y explique dos razones por las cuales no se producira la hidrlisis de los carbohidratos estudiados
en esta prctica (0,5/5,0):
Razn 1: __________________________________________________________________________________________
Explicacin:________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Razn 2: __________________________________________________________________________________________
Explicacin:________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________

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CONCLUSIONES (0,5/5,0)
1.
2.
3.

______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

APLICACIN PROFESIONAL DE LA PRCTICA REALIZADA (0,25/5,0)

__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFA UTILIZADA (0,25/5,0)

__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
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