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com Experiment zur S aureabsonderung der Wurzel Protokoll 2011-05-13 Universit at Bremen Botanik bei Uwe Nehls

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1.1

Einleitung
N ahrstobedarf

Eine lebende Panze besteht zu 90% (Gewichtsprozent) aus Wasser. Einen groen Teil der Trockenmasse machen die Nichtmetalle Kohlensto, Sauersto, Wassersto, Sticksto, Schwefel und Phospor aus, welche wegen ihres groen Bedarfes als Makroelemente bezeichnet werden. Daneben liegen auch noch zahlreiche, meist metallische Elemente in geringeren Mengen in ionischer Form vor. Sie werden u ber die Wurzel aufgenommen und je nach Bedarfsmenge in Mikro- und Spurenelemente eingeteilt. Allerdings werden auch Sticksto, Schwefel und Phosphor als ionische Verbindung u ussen in N ahrl osungen ber die Wurzel aufgenommen. Makroelemente m im Bereich von einigen Gramm pro Liter verf ugbar sein, Mikroelemente nur im Bereich von Milligramm pro Liter, Spurenelemente in noch wesentlich geringeren Mengen. 1

1.2

Abgabe von H+ , Aufnahme von N ahrstoen

Bei h oheren Panzen erfolgt die Aufnahme von N ahrsalzen durch die Wurzel. In dem Bereich nahe der Wurzel, der Rhizosph are, nden zahlreiche chemische Wechselwirkungen statt. 2 Die Panze scheidet Protonen, Kohlens aure und organische S auren aus. Die in den Wurzelhaaren der Rhizodermis durch Protonenpumpen abgegebenen H+ spielen hierbei eine zentrale Rolle. Durch die Ans auerung der Rhizosp are werden: einerseits an das Substrat adsorbierten Ionen im Rahmen eines Ionenaustausches mobilisiert. andererseits Ionen durch das entstehende, elektrische Ungleichgewicht leicht aufgenommen (sekund ar aktiver Transport). So f uhrt zum Beispiel die Aufnahme von NH4+ zu einer starken H+ -Abgabe oder OH -Aufnahme. Bei 3 NO 3 ist es genau umgekehrt. Ionen k onnen entweder durch Symport mit Protonen (im Falle von Anionen) aufgenommen werden oder durch Antiport (Kationen). Um die Wurzelober ache
Stowechselphysiologie der Panzen: Physiologie und Biochemie des Prim ar- und Sekund arstowechsels Gerhard Richter Georg Thieme Verlag, 1998 - 583 Seiten, Tabelle Seite 52 2 Peter Schopfer, Panzenphysiologie, Axel Brennicke, 7. Auage, Spektrum ab Seite 305 bis 306 3 Peter Schopfer, Experimentelle Panzenphysiologie, Springer-Verlag, Seite 205 - 206
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kann ein pH von 5 gemessen werden, welcher ausreichend ist, um Ionen auszutauschen. Die Stowechselprozesse sind auf den Bereich der Wurzelhaare beschr ankt, in der der Austausch durch eine groe Ober ache erleichtert sind. Die Wurzelhaarzone liegt etwa 5 20 mm hinter der Spitze der jeweiligen Wurzel. 4

1.3

Wurzelanatomie und N ahrstoeitung

Prozesse zur N ahrstoaufnahme nden in erster Linie in den Wurzelhaaren statt, die f ur die Versorgung der Panzen mit N ahrstoen verantwortlich sind. Diese Ausst ulpungen dienen dazu, die Ober ache der Wurzel zu erh ohen und damit die Diffusionrate zu erh ohen. Eine Ans auerung des Bodens ist somit besonders in diesem Bereich zu erwarten. Auerdem ist in der Zone um die Kalyptra eine Protonenabgabe zu erwarten, da diese Schleim abgibt, der unter anderem dazu dient, die Eigenschaften des Bodens zu ver andern. Man w urde also speziell in diesen beiden Bereichen eine starke Verf arbung des Agars erwarten und in den sonstigen Wurzelbereichen keine oder nur eine schwache Rotf arbung.

1.4

Indikator

Die S aureabsonderung der Wurzel soll nachgewiesen werden, indem zum Agar der Indikator Lackmus zugegeben wird. Die ist ein aus Flechten gewonnener, blauvioletter Farbsto, der oberhalb eines pH von 6.8 blau ist, unterhalb jedoch rot. Ist nun der pH des Agars im Normalfall gr oer als 6.8 und die Ans auerung der Rhizosph are so stark, dass der pH unter 6.8 sinkt, so andert der Indikator seine Farbe von blau nach rot. Auf diese Weise ist eine Ans auerung der Rhizosph are messbar, wenn der Indikator einen passenden Umschlagspunkt besitzt.

1.5

resultierende Fragestellung

Das Ziel ist es, die S aureabsonderung der Wurzel sichtbar zu machen. Da N ahrstoe u ber einen l a ngeren Zeitraum verf u gbar sind und Wurzelhaare konstant Protonen sekretieren, ist auerdem ein konstantes Anwachsen einer Verf arbung zu erwarten. Die Frage ist also, ob eine Verf arbung des Agars eintritt und ob diese konstant zunimmt.

Material und Methoden

Der Versuch wurde gem a des zugrunde liegenden Protokolls durchgef uhrt.5

Ergebnisse

Bereits nach 10 Minuten war eine deutliche F arbung um die Wurzeln herum erkennbar. Diese nahm am Anfang noch konstant zu und war nach jeweils weiteren 10 Minuten fortlaufend st arker zu erkennen.
Peter Schopfer, Panzenphysiologie, Axel Brennicke, 7. Auage, Spektrum Seite 305 bis 306 5 Allgemeine Botanik: Stuktur und Funktion der Panzen, Praktikumsskript Botanik I, Universit at Bremen 2010
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Doch auch wenn die Rotf arbung nach 80 Minuten sehr gro achig und intensiv ausgepr agt zu sehen war, war der Kontrast zwischen dem Zustand zu 40 Minuten und 80 Minuten nicht mehr so stark wie zu Beginn des Versuches in einem gleich groen Zeitraum. Unterschiedlich starke F arbung in unterschiedlichen Bereichen der Wurzel konnte nicht beobachtet werden.

Diskussion

Die relativ kontinuierlich st arker werdende Rotf arbung des Agars um die Wurzel best atigte die Vermutung einer S aureabgabe der Wurzel. Die rote Farbe ist ein Indikator f ur einen pH-Abfall. W are dieser Prozess nicht aktiv von der Panze verursacht worden, sondern z.B. durch eine Besch adigung des Wurzelgewebes und einen Austritt sauren Zellinhaltes, bspw. beim Ausgraben aus dem Substrat, w are der pH-Wert schlagartig abgefallen. Somit kann man auf einen aktiven, von der Panze verursachten Prozess schlieen. Der Prozess der Protonenabgabe kann als konstant vermutet werden. Zwar ist die Ausdehnung der Verf arbung im Verlaufe des Versuchs langsamer geworden, dazu muss man allerdings bedenken, dass die Fl ache um die Wurzel, wie in einem Zylinder, bei gr oerer Entfernung quadratisch w achst. Somit ist bei konstanter Protonenabsonderung auch ein immer langsameres Anwachsen des roter Bereich zu erwarten. Ein a urde allerdings auch eine langsam sinkenden hnliches Ergebnis w Protonenabsorption hervorrufen. Welcher der beiden F alle nun tats achlich vorliegt, m usste in einem weiteren Experiment bestimmt werden. Jedoch konnte nicht wie erwartet eine unterschiedlich starke F arbung von unterschiedlichen Wurzelbereichen beobachtet werden. Es ist nicht sicher, ob diese nur nicht beobachtet werden konnten oder die gesamte Wurzel gleichm aig Protonen abgibt. Problematisch waren sowohl die relativ grobe Beobachtung wie auch die wirr u achlich Protonen nur von bereinander liegenden Wurzelbereiche. Ob tats Wurzelhaaren abgegeben werden, m usste ebenfalls in einem weiteren Experiment mit anderem Versuchsaufbau gekl art werden.

Abbildungen

Abbildung 1: Wurzeln des Erbsenkeimling (Pisum sativum, Fabaceae) in Agar direkt nach dem Einbetten

Abbildung 2: 10 Minuten nach dem Einbetten, das Agar beginnt sich um die Wurzel herum zu verf arben

arbung des Agars Abbildung 3: 20 Minuten nach dem Einbetten, die Verf schreitet fort

Abbildung 4: 40 Minuten nach dem Einbetten

Abbildung 5: 80 Minuten nach dem Einbetten