FACULTAD DE INGENIERA QUMICA BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGA INDUSTRIAL E.A.P.

DE INGENIERA QUMICA INDUSTRIAL LABORATORIO N6

ACTIVIDADES ENZIMTICAS
PRESENTADO A: Ing. VILA CARHUALLANQUI, Gladys Por: ATENCIO APONTE, Lissett S. CASTRO HUAMAN,Jhon R. HERRERA HUISA, Brabgy I. HUARE SOLIS, Luis E.

ALUMNOS DEL V SEMESTRE SECCIN A

HUANCAYO PER 2012

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I.

INTRODUCCIN

Las enzimas son protenas complejas que producen un cambio qumico especfico en todas las partes del cuerpo. Pueden ayudar a descomponer los alimentos que consumimos para que el cuerpo los pueda usar. La coagulacin de la sangre es otro trabajo de las enzimas. Las enzimas son necesarias para todas las funciones corporales. Se encuentran en la boca (saliva), el estmago (jugo gstrico), los lquidos intestinales, la sangre y en cada rgano y clula del cuerpo, realizan los procesos fisiolgicos, producidos por los organismos vivos. Sin enzimas, no sera posible la vida que conocemos, las enzimas llevan a cabo funciones definitivos relacionadas con salud y la enfermedad. Las enzimas son protenas que ayudan a que las reacciones qumicas ocurran con mayor rapidez. Sin enzimas nuestros cuerpos se detendran en seco.Las enzimas son muy importantes para el ser humano.

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II.

RESUMEN

Para el desarrollo del laboratorio de ACTIVIDADES ENZIMTICAS. Tuvimos tres experimentos: El primero consisti en observar la accin digestiva de la amilasa salival, el segundo fue el reconocimiento de la enzima catalasa en tejidos, hicimos esta prueba con el perxido de hidrgeno y el ltimo experimento consisti en observar la actividad cataltica de la catalasa. Para ello preparamos nuestros materiales; tambin desinfectamos las mesas. Llegamos a la conclusin que las enzimas son protenas altamente especializadas que tienen como funcin la catlisis o regulacin de la velocidad de las reacciones qumicas que se llevan a cabo en los seres vivos. Para tener un mejor funcionamiento. III. GENERAL: Identificar actividades enzimticas en muestras biolgicas. ESPECIFICOS: Conocer la accin digestiva de la Amilasa Salivar. Reconocer la enzima catalasa en los tejidos. Reconocer la actividad cataltica de la catalasa, mediante la temperatura y el tiempo OBJETIVOS

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IV. 4.1 LAS ENZIMAS

FUNDAMENTO TERICO

Son molculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones qumicas, siempre que sean termodinmicamente posibles: Una enzima hace que una reaccin qumica que es energticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actan sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimticas. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece slo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una clula determina el tipo de metabolismo que tendr cada clula. A su vez, esta sntesis depende de la regulacin de la expresin gnica. Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energa de activacin (G) de una reaccin, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reaccin.

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En una reaccin catalizada por enzima (E), los reactivos se denomina sustratos (S) , es decir la sustancia sobre la que acta la enzima. El sustrato es modificado qumicamente y se convierte en uno o ms productos (P). Como esta reaccin es reversible se expresa de la siguiente manera:

4.2 ESPECIFIDAD: Las molculas del sustrato se unen a un sitio particular en la superficie de la enzima, denominada sitio activo, donde tiene lugar la catlisis. La estructura tridimensional de este sitio activo, donde solo puede entrar un determinado sustrato (ni siquiera sus ismeros) es lo que determina la especificidad de las enzimas. El acoplamiento es tal que E. Fisher (1894) enunci: "el sustrato se adapta al centro activo o cataltico de una enzima como una llave a una cerradura". 4.3 CLASES DE ENZIMAS: El nombre de las enzimas es el del sustrato + el sufijo: -asa. Los nombres de las enzimas revelan la especificidad de su funcin: Oxido-reductasas: catalizan reacciones de oxido-reduccin, las que implican la ganancia (o reduccin) o prdida de electrones (u oxidacin). Las ms importantes son las deshidrogenasas y las oxidasas Transferasas: transfieren grupos funcionales de una molcula a otra. Ej.: quinasas; transfieren fosfatos del ATP a otra molcula. Hidrolasas: rompen varios tipos de enlaces introduciendo radicales -H y -OH. Liasas: adicionan grupos funcionales a los dobles enlaces. Isomerasas: convierten los sustratos ismeros unos en otros. Ligasas o Sintasas: forman diversos tipos de enlaces aprovechando la energa de la ruptura del ATP. Ej: polimerasas

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4.4 MECANISMO DE ACCION ENZIMTICA: Una enzima, por s misma, no puede llevar a cabo una reaccin, su funcin es modificar la velocidad de la reaccin, entendindose como tal la cantidad de producto formado por unidad de tiempo. Tal variacin se debe a la disminucin de la energa de activacin Ea; en una reaccin qumica, la Ea es la energa necesaria para convertir los reactivos en formas moleculares inestables denominadas especies en estado de transicin, que poseen mayor energa libre que los reactivos y los productos.

La variacin de energa como funcin de una coordenada de reaccin muestra la estabilizacin del estado de transicin cuando dicha reaccin es llevada a cabo por una enzima. 4.5. COMO REALIZA ESTA ACCIN UNA ENZIMA:

o Orienta a los sustratos: parte de la energa de activacin se utiliza para que los sustratos roten y se enfrenten con los tomos correctos para formar los enlaces. o Agregan cargas a los sustratos: las cadenas laterales (R) de los aminocidos de las enzimas pueden participar directamente haciendo a los sustratos qumicamente ms reactivos.

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o Inducen la deformacin en el sustrato: cuando una sustancia se une al sitio activo, la enzima puede causar que los los enlaces se estiren, ponindolo en un estado de transicin inestable. o Cambio de forma de la enzima al unirse al sustrato: el modelo de llavecerradura de Fisher fue actualizado cuando se descubri que las enzimas son flexibles y sus sitios activos pueden cambiar (expandirse) para acomodarse a sus sustratos. Este cambio de forma causado por la unin al sustrato se denomina ajuste inducido. En la Hexoquinasa puede observarse este ajuste inducido, con el sustrato (glucosa) y sin l. El ajuste inducido alinea las cadenas laterales reactivas del sitio activo de la enzima con los sustratos.

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V.

PARTE EXPERIMENTAL EXPERIMENTO N1

HIDRLISIS ENZIMTICA DEL ALMIDN POR LA SALIVA: ACCIN DIGESTIVA DE LA AMILASA SALIVAR MATERIALES Y REACTIVOS 2 Tubos de ensayo Pipeta Propipeta Solucin de almidn al 2% Lugol Vaso de precipitacin de 250 mL Cocinilla

PROCEDIMIENTO Primero se hace un tubo patrn con 2mL de una disolucin de almidn al 2% y unas gotas de disolucin de yodo (Lugol). Observar el resultado. Despus se calienta suavemente el tubo hasta que la mezcla pierda el color. Dejar enfriar el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos. Anotar lo sucedido. Colocar en un segundo tubo 2mL de la disolucin de almidn y una cierta cantidad de saliva, mezclar bien la saliva con al disolucin y calentar muy suavemente durante unos segundos. Aadir unas gotas de lugol. Anotar los resultados.

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EXPERIMENTO N2 RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASA EN TEJIDOS MATERIALES Y REACTIVOS PROCEDIMIENTO Poner en varios tubos de ensayo previamente numerados distintos tejidos. Aadir 5mL de agua oxigenada a cada tubo y anotar lo que sucede. Explicar lo ocurrido y ordenar los tejidos segn su actividad. Repetir el proceso anterior, pero hervir anes los tejidos durante diez minutos, y explicar los resultados. Tubos de ensayo Pipeta Goteros Gradilla Cocinilla Vaso de precipitacin Tejidos vegetales y animales

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EXPERIMENTO N3 ACTIVIDAD CATALCA DE LA CATALASA MATERIALES Y REACTIVOS Tubos de ensayo grande Goteros Gradilla Termmetro Tapn Muestra de tejido animal

PROCEDIMIENTO En un tubo de ensayo se coloca un trozo de hgado y 10mL de agua oxigenada. Se cierra el tubo con un tapn, que se deja algo flojo para el escape de los gases producidos en al reaccin, en cuyo centro exista u orificio por el cual se pueda introducir un termmetro. As hemos hecho un calormetro. Se anota la temperatura ambiente, que se toma como temperatura inicial de la reaccin, y despus se va anotando las variaciones de temperatura que se producen en el interior del calormetro cada treinta segundos durante un periodo de cinco minutos. Hacer la grafica y explicar resultados.

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RESULTADOS EXPERIMENTO N1 HIDRLISIS ENZIMTICA DEL ALMIDN POR LA SALIVA: ACCIN DIGESTIVA DE LA AMILASA SALIVAR La enzima -amilasa, presente en la saliva, inicia la degradacin del almidn, la principal fuente de carbohidratos de la dieta humana. Esta enzima hidroliza al azar los enlaces (14) que unen residuos de glucosa en el almidn, a excepcin de los enlaces cercanos a los extremos y a los puntos de ramificacin de las cadenas. La reaccion de lugol es positiva.

EXPERIMENTO N2 RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASA EN TEJIDOS Hicimos la prueba con tejidos de zanahoria, nabo y carne .La enzima catala que contiene cada uno de estos tejidos descompone al perxido de hidrogeno en agua y oxgeno. Observamos que la carne lo descompone ms rpido, luego el nabo y el mas lento fue la zanahoria.Es el mismo orden al calentar.

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EXPERIMENTO N3 ACTIVIDAD CATALCA DE LA CATALASA

TIEMPO (seg.) TEMPERATURA(C )

20 24 30 24 40 24.1 60 24.3 .LA TEMPERATURA AMBIENTE ES 18

ACTIVIDA DE LA CATALASA
24.35 24.3 24.25 TEMPERATURA 24.2 24.15 24.1 24.05 24 23.95 23.9 0 20 40 TIEMPO 60 80 Series1 Linear (Series1) y = 0.008x + 23.8 R = 0.9333

Como se observa en la grfica la accin cataltica de la catalasa es directamente proporcional a la temperatura; cuando comienza a reaccionar no hay mucho desprendimiento de energa.

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CONCLUSION EXPERIMENTO N1 HIDRLISIS ENZIMTICA DEL ALMIDN POR LA SALIVA: ACCIN DIGESTIVA DE LA AMILASA SALIVAR La amilasa es un enzima hidrolasa que tiene la funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del componente -Amilosa en el almidn para formar azcares simples.Al hacer la prueba de lugol la reaccin es positiva porque encontramos la presencia de glcidos;lo notamos en el cambio de color. EXPERIMENTO N2 RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASA EN TEJIDOS La catalasa solo se encuentra en tejidos vegetales y animales. En este experimento pudimos ordenarlos segn su accin cataltica .El mas rpido es el tejido animal, seguido por el nabo y por ltimo la zanahoria.

EXPERIMENTO N3 ACTIVIDAD CATALCA DE LA CATALASA La catalasa se activa a una temperatura de 0 - 65 C, porque el perxido de hidrgeno inactiva la Catalasa, como sta a su vez cataliza rompiendo la molcula (H2O2), es difcil establecer la relacin actividad/temperatura, sin embargo la actividad inicial no hay mucho desprendimiento de energa ,mientras que cuando ya casi llega al final de la reaccin hay mas desprendimiento de energa

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BIBLIOGRAFA Bioqumica de Harper Qumica Chang Bioqumica - Horton, H. Robert; Moran, Laurence A; Ochs Raymond S; Rawn, J. David; Scrimgeour K. Gray - Mxico, D.F: Prentice-Hall Hispanoamericana, 1995 Qumica - Sienko, Michell J; Plane, Robert A - Madrid: Aguilar, 1967

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ANEXOS

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