ARTIGO ORIGINAL / ORIGINAL ARTICLE

ANLISE HISTOMORFOLGICA DO FGADO MATERNO E FETAL DE RATAS PRENHES DESNUTRIDAS SUBMETIDAS EXPOSIO AO ETANOL
MATERNAL AND FETAL LIVER HISTOMORPHOLOGICAL ANALYSIS OF MALNOURISHED PREGNANT RATS SUBMITTED TO EXPOSURE TO ETHANOL
Juliana Almeida Domingues , Mrcia Tancredo Toledo , Suzana Guimares Moraes
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RESUMO Este projeto teve por objetivo analisar histologicamente o fgado de ratas Wistar prenhes e de sua prole, tratadas com etanol e submetidas a uma dieta hipoprotica semipurificada (6% protena) utilizada como modelo de desnutrio protico calrica e normoprotica semipurificada (18% protena). Utilizaram-se ao todo 15 (quinze) ratas prenhes, que foram divididas em cinco grupos, sendo um grupo controle, um tratado com rao normoprotica e gavagem com gua destilada, um grupo tambm tratado com rao normoprotica e gavagem com etanol, um grupo tratado com rao hipoprotica e gua destilada e um grupo tratado com rao hipoprotica e etanol. O etanol e a gua destilada foram administrados do 11 ao 16 dia de gestao, utilizou-se lcool etlico absoluto P.A. 3 g/Kg de peso corporal em gua destilada. Os animais foram sacrificados no 21 dia de gestao, no qual o fgado fetal e o materno foram dissecados e submersos em formol 10% (materno) e Bouin (fetal) para respectiva anlise histolgica. Nos grupos tratados com etanol, tanto o desnutrido quanto o nutrido, e o desnutrido tratado com gua, observaram-se alteraes histolgicas nos fgados maternos. Entre os fetos no houve alteraes histolgicas no fgado, mas observou-se alterao no peso e comprimento crnio-caudal nos grupos desnutridos (p<0,001). Neste trabalho demonstrou-se que a associao entre o etanol e a desnutrio interferiu significativamente no peso e comprimento dos fetos e provocou alteraes histolgicas no fgado materno. Descritores: lcool, desnutrio, gestao, fgado, Sndrome Alcolica Fetal. ABSTRACT This project aims to evaluate histologically the liver of pregnant Wistar rats and their offspring, treated with ethanol and subjected to a semipurified low-protein diet (6% protein), used as model of protein caloric malnutrition and semipurified normoprotein (18%). Fifteen pregnant rats were used in total and divided into five groups: one control group treated with a normal protein diet and gavage with distilled water, a group also treated with normal protein diet and gavage with ethanol, a group treated with low protein diet and distilled water and a group treated with low protein diet and ethanol. Ethanol and distilled water were administered from the 11th to 16th day of gestation, absolute ethanol PA 3 g/kg of body weight was diluted in distilled water. The animals were sacrificed on day 21 of gestation, in which the maternal and fetal liver were dissected and submerged in formaldehyde 10 % (maternal) and Bouin (fetal) to their histological analysis. In groups treated with ethanol, both the malnourished and nourished, and malnourished treated with water, we observed histological changes in maternal livers. Among fetuses, there were no histological changes in liver, but there were 9

changes in weight and craniocaudal length in the malnourished group (p<0.001). This study demonstrated that the association between ethanol and malnutrition interfered significantly in weight and length of fetuses and caused histological alterations in maternal liver. Key-words: alcohol, malnutrition, pregnancy, liver, Fetal Alcohol Syndrome.

INTRODUO O lcool uma das drogas mais utilizadas de forma abusiva.1 O consumo do lcool parece ser um dos hbitos sociais mais antigos e disseminados entre as populaes. Est associado a ritos religiosos e lhe atribuda uma variedade de efeitos, tais como calmante, afrodisaco, estimulante do apetite, euforia e outros. H relatos do uso de lcool desde a Pr-histria.2 O consumo de lcool considerado atualmente como um grave problema de sade pblica, merecendo ateno especial o consumo de lcool pelas gestantes.3 Estima-se que aproximadamente 20% das mulheres faam uso de lcool durante a gravidez.4 O lcool pode interferir na morfognese de vrios rgos e levar s alteraes fsicas, cognitivas e comportamentais permanentes eirreversveis.5 A Sndrome Alcolica Fetal (SAF) considerada um quadro patolgico que reflete manifestaes mximas do abuso de lcool durante a gestao. Est estimada em aproximadamente 2,84,6/1000 nascimentos ao ano nos Estados Unidos. Esta prevalncia sobe para 9,1/1000 se forem adicionados os casos de crianas com transtorno do desenvolvimento neurolgico relacionado com o lcool,6 caracterizando um quadro incompleto denominado Efeitos do lcool no Feto (EFA).7 O nvel mnimo de etanol que resulta em SAF ou EAF ainda no foi estabelecido.8 A severidade da SAF advm da combinao da ingesta de lcool pela me e fatores de risco, tais como quantidade e frequncia de consumo de lcool pela gestante, perodo da gestao em que a me ingeriu a substncia, idade materna e aspectos genticos, nutricionais e fsicos.9
Rev. Fac. Cinc. Md. Sorocaba, v. 11, n. 3, p. 9 - 17, 2009
1 - Ex-aluna do curso de Cincias Biolgicas - PUC-SP 2 - Professora do Depto. de Cincias Fisiolgicas - PUC-SP 3 - Professora do Depto. de Morfologia e Patologia - PUC-SP
Recebido em 2/4/2009. Aceito para publicao em 4/9/2009. Contato: Rua Sevilha, 326 Vila Hortncia 18.020-236 Sorocaba/SP Tel.: (15) 3233-2561 / (15) 9135-7383 E-mail: julianaalmeida25@hotmail.com

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Vrios estudos admitem que mesmo a exposio prnatal a baixos nveis de lcool pode afetar negativamente o desenvolvimento fetal.10 No se pode afirmar qual o nvel de segurana da ingesta de lcool durante a gestao que impea modificaes significativas no desenvolvimento feto/placentrio. Devido a este fato, recomenda-se abstinncia a mulheres tanto no perodo gestacional quanto naquelas que desejem a concepo, pois os efeitos parecem ser maiores nas fases iniciais do desenvolvimentoembrionrio.5 O etanol atravessa livremente a barreira placentria e se distribui pelo lquido amnitico, atingindo os tecidos fetais.11 A difuso passiva do lcool ocorre por gradiente de concentrao de tal maneira que os nveis materno e fetal so similares at que todo o etanol seja metabolizado.12 No entanto, a exposio fetal muito maior, pois o metabolismo e a eliminao so processos mais lentos, fazendo com que o lquido amnitico permanea impregnado de lcool no modificado (etanol) e acetaldedo (metablito do etanol).13 O etanol induz a formao de radicais livres de oxignio que so capazes de danificar protenas e lipdeos celulares, aumentando a apoptose e prejudicando a organognese.14 O lcool promove a m absoro, agrava a anorexia, estimula o hipermetabolismo, o estresse oxidativo e maior excreo urinria de micronutrientes hidrossolveis. Como consequncia, desenvolvem-se anemia, esteatose heptica, pelagra, aterosclerose e imunossupresso.Assim, o lcool pode ser causa tanto de desnutrio primria, pelo fato de deslocar os nutrientes da dieta, como de desnutrio secundria, por ser responsvel pela m absoro e agresso celular decorrentes de sua citotoxicidade direta.15 Entretanto, a deficincia nutricional associada ao etanol pode ser decorrente da reduzida absoro de nutrientes causada pela ao txica do etanol sobre o epitlio intestinal ou, ainda, ser resultado da desnutrio in utero (determinada pelo reduzido aporte de nutrientes), sendo agravada no recm-nascido pela modificao no metabolismo dos nutrientes absorvidos em razo das alteraes hepticas quedesencadeia.16 Uma das hipteses levantadas para explicar como a desnutrio protica associada com o lcool interfere no metabolismo do fgado seria que com a falta de protenas ocorre diminuio da atividade da enzima lcool-desidrogenase, principal enzima envolvida na degradao do etanol. Consequentemente, a eliminao deste retardada, expondo, portanto, os rgos-alvo por mais tempo a nveis mais elevados de etanol.17 Estudos prvios demonstraram que a associao do uso de etanol com desnutrio em animais experimentais interfere, acentuadamente, no desenvolvimento perinatal do fgado de ratos, promovendo alteraes histomorfolgicas mais significativas na populao das clulas hepticas.18 Em outros estudos, onde se analisou histologicamente o fgado de crianas que apresentavam SAF, observou-se fibrose heptica que se localizava prximo veia centro lobular e espao porta, apresentando-se iguais as patologias encontradas no fgado de adultos alcolatras.19

MATERIAIS E MTODOS Animais Neste estudo foram utilizadas quinze (15) ratas Wistar prenhes, provenientes do Biotrio do Centro de Cincias Mdicas e da Sade, Sorocaba (PUC-SP). Os animais tinham entre trs a cinco meses de idade e foram acondicionados em gaiolas mantidas em ambiente de temperatura controlada (25 2C) e expostos luz por um perodo dirio de 12 horas (7 h - 19 h). Acasalamento As fmeas foram colocadas junto aos machos da mesma linhagem e a cada manh era observada a presena de espermatozides em esfregao vaginal. Neste caso, este dia era considerado o primeiro dia de prenhez. Administrao do lcool As fmeas prenhes foram divididas em cinco grupos. A administrao do lcool ou da gua destilada em cada grupo foi feita do 11 ao 16 dia de gestao. Grupo 1 Administrao de lcool etlico absoluto P.A. 3 g/Kg de peso corporal em gua destilada, via oral, atravs de gavagem intragstrica; volume final igual a 3,8 ml, e rao normoprotica contendo 18% de protena. Grupo 2 Administrao de gua destilada, via oral, atravs de gavagem intragstrica; volume final igual a 3,8 ml, e rao normoprotica contendo 18% de protena. Grupo 3 Administrao de lcool etlico absoluto P.A. 3 g/Kg de peso corporal em gua destilada, via oral, atravs de gavagem intragstrica; volume final igual a 3,8 ml, e rao hipoprotica contendo 6% de protena. Grupo 4 Administrao de gua destilada, via oral, atravs de gavagem intragstrica; volume final igual a 3,8 ml, e rao hipoprotica contendo 6% de protena. Grupo 5 Controle; no recebeu nenhuma soluo. A dieta semipurificada ad libitum contendo 18% (normoprotica) ou 6% (hipoprotica) de protena que os animais receberam foram preparadas no Laboratrio de Nutrio e Cncer, Departamento de Fisiologia e Biofsica da Universidade Estadual de Campinas (Unicamp). O alimento foi oferecido s ratas prenhes em forma de pellets e ficaram armazenadas em geladeira no biotrio, porm o consumo alimentar dirio no foi medido nos grupos. Acomposio das dietas encontra-se na tabela 1.

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Tabela 1. Composio das dietas (g/Kg) DIETA 18% Amido Casena Dextrina Acar Fibra celulose Mistura de sais Mistura de vitaminas Cistina Colina leo de soja 1 Kg* 397,5 200 132 100 50 35 10 3 2,5 70 DIETA 6% Amido Casena Dextrina Acar Fibra celulose Mistura de sais Mistura de vitaminas Cistina Colina leo de soja 1Kg** 480,0 71,5 159 121 50 35 10 3 2,5 70

* Dieta padro para roedores de biotrio - AIN-93G. Fonte: Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC Jr. AIN-93 Purified diets for laboratory rodents: final report of theAmerican Institute of Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of theAIN-76.Arodent diet. J Nutr. 1993; 123(3):1939-51. ** Padronizada no Lab. de Nutrio e Cncer, Depto. de Fisiologia e Biofsica - UNICAMP/ Campinas.

Coleta dos fetos As ratas prenhes foram sacrificadas com a administrao intraperitoneal do anestsico hidrato de cloral no 21 dia de gestao. O tero dissecado foi transferido para uma placa de vidro. O contedo uterino foi avaliado, contabilizandose o nmero de fetos vivos, mortos e reabsorvidos. ANLISE DAS RATAS PRENHES

ANLISE DOS FETOS Os fetos ntegros foram pesados e o comprimento crnio-caudal medido, avaliando-se, assim, a possibilidade de restrio de crescimento intra-uterino. Em seguida, os fetos foram dissecados e seus fgados coletados e imersos em soluo fixadora Bouin. PROCESSAMENTO HISTOLGICO

As ratas prenhes tiveram seus teros dissecados e transferidos para uma placa de vidro, conforme procedimento supracitado. Ento, seus fgados foram dissecados e imersos em soluofixadoraformol10%,permanecendo nestapor48horas.

Os fgados das ratas e dos fetos foram processados convencionalmente, como mostrados na tabela 2.

Tabela 2. Processamento histolgico

ETAPAS 1. Fixao - em fixador simples Formol 10% (materno) e *Bouin (fetal) 2. Desidratao - em lcool etlico de concentraes crescentes, comeando com lcool a 70% e terminando com lcool absoluto. 3. Clareamento - diafanizao em xilol 4. Impregnao - pela parafina, geralmente realizada em estufa a 60C.

FINALIDADES Preservar a morfologia e a composio dos tecidos Remover a gua dos tecidos

DURAO 48 horas (materno); 24 horas (fetal).

40 minutos em cada lcool

Embebecer a pea em substncia miscvel com a parafina A parafina penetra nos vasos, nos espaos intercelulares e mesmo no interior das clulas, impregnando o tecido e tornando mais fcil a obteno dos cortes no micrtomo. Obteno de cortes

1 hora 30 minutos - parafina I e mais 30 minutos na parafina II

5. Incluso - obteno do bloco

* O fixador utilizado inicialmente foi o formol 10% ; ao analisar o fgado fetal observaram-se espaos vazios entre as clulas do tecido, ento, optou-se por outro fixador, pois desconfiavase que o material no havia sido fixado. O outro fixador utilizado foi o Bouin, que o mais indicado para fixao da medula ssea; como o fgado fetal tambm um rgo hematopoitico resolveu-se testar esse fixador, porm o resultado obtido foi o mesmo, ento, usou-se apenas o Bouin para que se pudesse padronizar o experimento.

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Aps resfriamento, os blocos contendo os tecidos inclusos foram colocados em geladeira para o seu total resfriamento por aproximadamente uma hora. Estes foram retirados da geladeira somente na hora do seccionamento, feito com navalha descartvel em micrtomo Leica RM 2245 a uma espessura de 4 m. Ento, os cortes foram estendidos em gua quente 45 C e coletados em lmina. As lminas foram colocadas em estufa a 56 C por uma hora para se retirar o excesso de parafina e a sua total fixao na lmina. COLORAES Hematoxilina e eosina Acolorao permite evidenciar o ncleo da clula que se cora pela hematoxilina em azul ou violeta e o citoplasma que se cora em cor-de-rosa (Junqueira e Carneiro, 2004). Procedimento O material foi diafanizado em xilol, desidratado em lcoois absolutos e gua; corado com hematoxilina (15 minutos), lavado em gua corrente e corado em eosina (um minuto). Masson A colorao permite evidenciar as fibras colgenas que se coram em azul, as outras estruturas se coram em vermelho. Procedimento O material foi desparafinizado, hidratado e corado com hematoxilina de Harris por 30 minutos.Aps foi lavado em gua corrente, diferenciado em lcool cido 1%, corado com fucsina cida (Ponceau) por uma hora, lavado em gua destilada, corado com azul de anilina at corar o controle, desidratado e diafanizado. Perls A colorao permite evidenciar os pigmentos de ons

ferro no tecido que se coram em azul; o citoplasma se cora em vermelho. Procedimento O material foi desparafinizado, hidratado, corado com ferrocianeto de potssio 5% (20 mL) misturado ao cido clordrico 5% (10 mL), ento, esperou-se o controle corar em azul claro, aps foi lavado em gua destilada, corado com eosina (colorao defundo) umminuto,desidratado ediafanizado. ANLISE E DOCUMENTAO DOS FGADOS EM MICROSCOPIA PTICA Os cortes histolgicos foram analisados e documentados emmicroscpio pticoNikonEclipseE800. No fgado fetal contou-se o nmero de megacaricitos; a anlise foi feita utilizando-se trs fetos de cada grupo contando cinco campos por lmina. ANLISE ESTATSTICA Os testes estatsticos, utilizados para avaliar a diferena entre os grupos em relao ao peso e comprimento crniocaudal e nmero de megacaricitos, foram feitos atravs do software PRISMA 3.0, utilizando ANOVA one-way seguido de Dunnett. RESULTADOS Anlise morfolgica materna O fgado sem alteraes composto por cordes de hepatcitos dispostos radialmente nos lbulos hepticos, entre os cordes esto os capilares sinusides, cada lbulo contm uma veia central e em cada canto deste se encontram os espaos porta que so compostos por ramos da veia porta, artria heptica e do ducto biliar.Abaixo est demonstrado o fgado materno do grupo controlecontendoumespaoporta(Figura1).

Figura 1. Imagem representativa do espao porta em ratas prenhes do grupo controle. Em A: aumento 100X, colorao HE. Em B: aumento 400X, colorao HE.

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No fgado com esteatose encontram-se pequenas gotculas lipdicas (microvesicular) no interior dos hepatcitos. No consumo crnico de lcool formam-se glbulos

macrovesiculares que deslocam o ncleo dos hepatcitos para periferia. Nas figuras abaixo est representado o fgado materno do grupo desnutrido tratado com lcool (Figura 2).

Figura 2. Imagem representativa do fgado onde observa-se um espao porta e esteatose micro e macrovesicular em ratas prenhes do grupo desnutrido tratado com lcool. Em A: aumento 100X, colorao HE. Em B: aumento 400X, colorao HE.

Na anlise dos fgados materno do grupo nutrido tratado com lcool, podem-se observar alteraes nos hepatcitos que se encontram prximos ao espao porta.

Estas clulas se apresentaram mais coradas e alongadas, com ncleo e citoplasma retrados (Figura 3).

Figura 3. Figura mostrando fgado materno do grupo nutrido tratado com lcool, onde podem-se observar alteraes morfolgicas nos hepatcitos localizados prximos ao espao porta. EmA: aumento de 100X. Em B: aumento de 400X. Colorao HE.

Nos fgados maternos do grupo desnutrido tratado com gua destilada, observou-se tumefao dos hepatcitos.

No grupo nutrido tratado com gua destilada no ocorreram modificaes histolgicas (Figura 4).

Figura 4. Figura demonstrando fgado materno. Em A: fgado materno do grupo desnutrido tratado com gua, onde observa-se tumefao nos hepatcitos. Em B: fgado materno do grupo nutrido tratado com gua destilada. Colorao HE, aumento 400X.

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Na figura 5 esto representadas as imagens dos fgados maternos de todos os grupos experimentais corados

com Masson, onde pode-se ver que no houve diferena entre estes com relao ao depsito de colgeno (Figura 5).

Figura 5. Imagens representativas dos fgados maternos corados com tricrmico de Masson, todas as imagens contm um espao porta para que se possa observar a deposio de colgeno. Em A: fgado materno do grupo nutrido tratado com gua destilada. Em B: fgado materno do grupo nutrido tratado com lcool. Em C: fgado materno do grupo desnutrido tratado com gua. Em D: fgado materno do grupo desnutrido tratado com lcool.Aumento de 100X.

Acolorao com Perls no contribuiu com as anlises. ANLISE MORFOLGICAFETAL ANLISE MACROSCPICA A) Peso fetal Atravs da anlise estatstica constatou-se que o peso fetal

do grupo desnutrido tratado com lcool (GDE) apresentou-se significativamente menor (p<0,001) quando comparado com o grupo controle. Nos grupos desnutridos observou-se que o GDE estatisticamente diferente (p<0,05) do grupo desnutrido tratado comguadestilada(GDA), apresentando oGDEumpeso menor. Entre os grupos nutridos no houve diferena estatstica com relao ao peso (p>0,05) (Figura 6).

P e s o F e ta l
5

P e s o ( g)

4 3 2 1 0 GC GNA GNE GDE

** * * **

GD A

G r u p o s E x p e r im e n t a is
Figura 6. Peso fetal (g) dos seguintes grupos experimentais: controle (GC), nutrido e gua destilada (GNA), nutrido e lcool (GNE), desnutrido e lcool (GDE) e desnutrido e gua destilada (GDA) em concentrao de 3 g/kg com volume final igual a 3,8 mL. Resultados expressos em mdia com desvio padro. ***Representa significncia estatstica com o grupo controle (p<0,001)

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B) Comprimento crnio-caudal Na anlise estatstica realizada para avaliar a diferena entre os grupos com relao ao comprimento crnio-caudal observou-se que nos grupos desnutridos, tanto os tratados

com gua como lcool e no grupo nutrido tratado com lcool, houve diferena estatstica destes quando comparados com o grupo controle. Apresentando os grupos desnutridos p<0,001 e o nutrido tratado com lcool p<0,05 (Figura 7).

C o m p r im e n t o ( c m )

C o m p rim e n to c r n io - c a u d a l
4

* ***

***

3 2

1 0 GC GNA GNE GDE GDA

G r u p o s E x p e r im e n t a is Figura 7. Comprimento crnio-caudal (cm) dos seguintes grupos experimentais: controle (GC), nutrido e gua destilada (GNA), nutrido e lcool (GNE), desnutrido e lcool (GDE) e desnutrido e gua destilada (GDA). Resultados expressos em mdia com desvio padro.***p<0,001; * p<0,05, quando comparado ao respectivo controle.

Afigura 8 representa um feto de cada grupo experimental, registrados com uma cmera digital.

Figura 8. Foto dos fetos dos seguintes grupos experimentais: grupo controle (GC); grupo nutrido tratado com gua (GNA); grupo nutrido tratado com lcool (GNE); grupo desnutrido tratado com gua destilada (GNA) e grupo desnutrido tratado com lcool (GDE).

ANLISE MICROSCPICA Atravs de anlise estatstica mostrou-se que no houve diferena entre os grupos experimentais com relao ao nmero de megacaricitos presentes no fgado fetal. 15

O fgado fetal apresenta-se com grande nmero de clulas hematopoiticas, entre elas os megacaricitos, com congesto heptica e com elementos do espao porta imaturos, que so normais nesta idade (Figura 9).

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Figura 9. Imagens representativas dos fgados fetais com 21 dias de gestao, onde pode-se observar congesto heptica, grande nmero de clulas hematopoiticas, entre estas megacaricitos. Em A: fgado fetal do grupo desnutrido tratado com gua. Em B: fgado fetal do grupo desnutrido tratado com lcool. Em C: fgado fetal do grupo nutrido tratado com gua. Em D: fgado fetal do grupo nutrido tratado com lcool. Colorao HE, aumento 400X.

DISCUSSO O consumo de lcool etlico durante a gestao considerado uma das principais causas conhecidas de retardo mental no ocidente.20 O padro de alteraes encontrados nos fetos causados pela ingesto de lcool durante a gestao so: distrbios do sistema nervoso central, retardo de crescimento pr e/ou ps-natal e dismorfias faciais caractersticas (lbio superior fino, ausncia de sulco nasolabial, fissuras palpebrais pequenas, entre outras). Este padro de alteraes foi denominado por Jones e cols. (1973)21 Fetal Alcohol Syndrome (Sndrome lcolica Fetal, SAF). Neste trabalho demonstrou-se que a associao entre o etanol e a desnutrio interferiu significativamente no peso e comprimento dos fetos. Alguns trabalhos sugerem que o baixo peso est diretamente relacionado com os efeitos txicos do lcool devido ao quadro de m absoro e m digesto causado por este. Silva e Mclean (1988)17 sugeriram que quando a desnutrio protica ocorre a diminuio da atividade enzimtica da lcool-desidrogenase, principal enzima na degradao do etanol e, consequentemente, sua eliminao retardada. A ingesto crnica de etanol leva a vrias leses hepticas, entre elas, esteatose, hepatite alcolica, cirrose e hepatocarcinoma. Dentre as inmeras doenas relacionadas ao alcoolismo crnico, a hepatopatia alcolica se destaca pela 22 sua frequncia e mortalidade. A arquitetura histolgica do fgado normal compe-se de unidades estruturais denominadas lbulos hepticos. O lbulo dispe-se ao redor de uma veia centrolobular. Em 16

algumas regies da periferia dos lbulos existe tecido conjuntivo contendo ductos biliares, vasos linfticos, nervos e vasos sanguneos. Estas regies so denominadas espaos porta. Os hepatcitos formam cordes celulares que esto radialmente dispostos no lbulo heptico. Os espaos entre os cordes contm os sinusides, onde alm das clulas endoteliais destes esto presentes tambm os macrfagos, conhecidos com clulas de Kupffer.As clulas endoteliais esto separadas dos hepatcitos por uma lmina basal descontnua e um espao subendotelial conhecido como espao de Disse, que contm microvilos dos hepatcitos e clulas armazenadoras de lipdeos denominadas clulas de Ito.23 Na anlise do fgado materno do grupo desnutrido tratado com lcool encontrou-se esteatose (degenerao gordurosa) macro e microvesicular. Esta alterao refere-se ao acmulo de triglicerdeos nos hepatcitos.24 Pode ser causada por toxinas, desnutrio protica, diabetes melito, obesidade e anxia. O lcool uma hepatotoxina que altera a funo das mitocndrias e do retculo endoplasmtico liso, inibindo, assim, a oxidao dos cidos graxos; a desnutrio protica diminui a sntese de apoprotenas, estas protenas no fgado normal formam complexos com os triglicerdeos, dando origem s lipoprotenas, que so capazes de entrar na circulao. A esteatose alcolica pode evoluir, com a continuao da ingesto etlica, para fibrose e cirrose.2 Cerca de 10% a 35% dos pacientes com esteatose desenvolvem hepatopatia alcolica e 10% a 20% cirrose.25 No fgado materno do grupo desnutrido tratado com gua destilada observou-se degenerao hidrpica (acmulo de gua, gordura e protenas que geralmente so exportadas).

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Esta alterao causada por modificaes nas membranas de organelas, especialmente de mitocndrias e de retculo endoplasmtico liso, produzidas pela peroxidao 25 lipdica. Ambas alteraes encontradas nos fgados materno dos grupos desnutridos so reversveis. O fgado fetal na anlise histolgica apresentou-se com vestgios de elementos do espao porta, congesto heptica, grande nmero de clulas hematopoiticas, entre elas megacaricitos e veia centrolobular, caractersticas normais nesta idade gestacional (21 dias). O fgado um rgo hematopoitico com componentes biliares imaturos que so identificados na juno entre o mesnquima e o parnquima do 26 fgado ao redor da veia porta no hilo heptico. Na anlise histolgica do fgado fetal tratado com lcool percebeu-se um maior nmero de megacaricitos; este resultado tambm foi encontrado em outros estudos.1 Neste trabalho pode-se verificar que o etanol modificou a arquitetura histolgica do fgado materno, e a associao deste com a desnutrio interferiram acentuadamente na arquitetura do fgado materno e no peso e comprimento fetal. Com relao ao fgado fetal observou-se um maior nmero de megacaricitos nos grupos tratados com etanol, resultado este 1 tambm encontrado em outros trabalhos. Agradecimentos orientadora Suzana e co-orientadora Mrcia.Atodos os funcionrios do Laboratrio de Patologia, em especial Rosiane e ao dr. Vanderlei, que ajudou com a anlise do material. Ao dr. Manuel de Jesus, professor da UNIFESP. Beth, funcionria do Laboratrio de Histologia.Atodos os funcionrios do Laboratrio de Bioqumica.Aos funcionrios do Biotrio. professora Eliana e aos estagirios do Laboratrio de Biomateriais. professora e s estagirias do Depto. de Fisiologia e Biofsica da Universidade EstadualdeCampinas (UNICAMP),queforneceramarao. REFERNCIAS
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