SEGUNDO CUESTIONARIO BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR DR.

JAVIER PILONI MARTINI 06 DE MARZO DEL 2013

1.- Define los siguientes trminos: La clula es la unidad anatmica, funcional y gentica de los seres vivos. La cual est constituida por tres elementos: 1. Membrana plasmtica 2. Material gentico 3. Citoplasma

Algunos de los principales organelos que se encuentran en el citoplasma son: a. Ribosomas Son los orgalenos compuestos de RNAs y protenas los cuales se asocian para formar una estructura compleja. Son tres las clases de ribosomas mas estudiadas; ribosomas de eubacterias, arqueobacterias y eucariontes. Los ribosomas de las primeras dos clases son notablemente similares en tamaos, forma y composicin, aunque los ribosomas arqueobacterianos tienen estructuras caractersticas que los distinguen de las eubacterias. Los ribosomas eucarionticos, por otra parte, son similares a los ribosomas eubaterianos en cuanto a forma. Sin embargo las tres clases estn formadas por dos subunidades de desigual tamao y en las tres clases las subunidades llevan a cabo la misma funcin de traduccin. Los ms estudiados han sido los de las eucariotas, los cuales se identifican como 70S Y 80S. (Jimnez et al., 2003) Ribosomas de eubacterias, el ms estudiado es el proveniente de E. coli, contiene aproximadamente unos 15,000 a 20,00 ribosomas, tienen un dimetro de 18 nm y

contiene aproximadamente 65% de RNA y 35% de protenas cuyas masas moleculares varian entre 6,000 y 75,000 kDa. Las dos subunidades del ribosoma se conocen como 30S
1

la pequea y 50S la subunidad grande, debido a su velocidad de sedimentacin en un campo gravitacional. Las subunidades se combianan para formar un ribosoma (monosoma) de una masa molecular de 2.5 x 10 6 kDa, un dimetro de 200 y un coeficiente de sedimentacin de 70S. La subunidad 30S es alargada y asimtrica y la subunidad 50S es ms gruesa y un poco ms corta que la subunidad 30S. La subunidad 30S contiene una molcula de RNA de 16S, compuesta de una cadena de aproximadamente 1,550 nucletidos, aunque su longitud exacta varia de especia a especie, en la que existen regiones de secuencias altamente conservadas. La subunidad 50S, por otra parte, contiene dos molculas de RNA: una grande de 23S compuesta de 2,900 a 3,000 nucletidos y otra pequea, la 5S, la cual est formada por una secuencia de 1250

nucletidos. Estas molculas de RNA ribosomal (rRNA) constituyen ms de la mitad del peso del ribosoma y tienen un papel central en las actividades catalticas del ribosoma.
,

Cuadro 1. Componentes moleculares de los ribosomas de las clulas procariontes y Eucariontes. Monosomas Procariontes Subunidades 30S 50S Eucariontes 40S 60S rRNAs 16S 23S + 5S 18S 25S + 5S + 5.8S Protenas 21 33 34 49 aproxx

Mientras que los ribosomas de las clulas eucariontas (80S) tiene una masa molecular de 4.2 x 106 kDa y est formado tambin por dos subunidades, las cuales son 40S y 60S. La subunidad pequea 40S es anloga a la subuinidad 30S del ribosoma de las eubacterias y contiene unas 33 proteinas y una solo molculas de RNA que es conocida como 18S de 1,900 nucletidos. La cadena 18 S forma una estructura tridimensional muy semejante a las del 16S, a pesar de que no hay una gran homologa entre las dos molculas a nivel de las secuencias nucleotidicas. La subuinidad 60S, contiene aproximadamente 49 molculas diferentes de protenas bsicas que al igual que las de la subunidad pequea, pueden variar en nmero, dependiendo de la especie biolgica en estudio, adems de dos protenas acidas (P1 y P2). (Jimnez et al., 2003)

Ribosoma de Eubacterias

Ribosoma de eucariontas

Figura 1: Tipos de ribosomas http://resumenes-capitulos.blogspot.mx/2011/05/ribosomas.html

b. Ncleo Es el organelo celular ms grande de las eucariotas, tiene un dimetro de aproximadamente 10 m y puede reconocerse bien con el microscopio ptico. Es el sitio de almacenamiento, replicacin y expresin de la informacin gentica. Est delimitado por la envoltura nuclear, formada por una membrana nuclear externa y otra externa. Las dos membranas nucleares tiene una doble capa y estn separadas entre por la hendidura perinuclear. El ncleo contiene casi todo el DNA de la clula (alrededor de 1% es DNA mitocondrial). Junto con las histonas y las protenas del citoesqueleto el DNA nuclear forma la cromatina, la cual durante la divisin celular se condensa en cromosomas, los cuales estn constituidos de fundamentalmente por los cidos nucleicos (ADN 9% Y ARN 1%) y las protenas (bsicas y acidas), los cromosomas son tambin visibles en el microscopio ptico. (Koolman 2004). Es esencial en el metabolismo, el crecimiento, la multiplicacin de la clula y en la transmisin de los caracteres hereditarios os. Interviene en las actividades de la clula por que contiene informacin codificada en las molculas de ADN que estn en los cromosomas; esta informacin puede traducirse de modo que la clula recibe rdenes y as regula sus actividades. Clixto et al., 2004

Figura 2: Estructura del ncleo. Fuente Calixto, 2004 y Koolman, 2004

El intercambio de materiales entre el ncleo y el citoplasma tiene lugar a travs de complejos de poros nucleares, estructuras complicadas que tensan la envoltura nuclear, los cuales estn compuestos por numerosas protenas, que forman anillos de diferentes dimetros unidos entre s. c. Retculo endoplsmico (rugoso y liso) Retculo endoplsmico liso Es el conjunto de membranas intracitoplsmicas que limitan espacios, estos son de forma y tamao variable. Entre las funciones que realiza se encuentran; tabicar el territorio celular, ser una especie de sistema circulatorio intracelular, se ocupa de la biosntesis de lpidos y la destoxificacion de frmacos y otros compuestos xenobioticos potencialmente dainos, como los plaguicidas y herbicidas. (Calixto, 2004) Retculo endoplsmico liso Organelo con ribosomas adheridos los cuales, al asociarse en cuatro o cinco, forman los polisomas. Entre sus funciones destacan; participar en la biosntesis, modificacin y transporte de materiales a travs de todo la celula. Calixto, 2004. d. Aparato de Golgi Conjunto de membranas con frecuencia paralelas entre s, las cuales se encuentran prximas al ncleo, su funcin principal es el ensamble de sustancias (lpidos y protenas) elaboradas en otros organelos, como el retculo endoplsmico y otras regiones citoplsmicas para trasportarlas a la membrana celular, donde se libera hacia el espacio intercelular. Adems en l se efectun varias actividades biosintticas, como la conversin de proprotenas en formas maduras de las protenas. Sus niveles de organizacin: Cisternas o sculos, dictiosomas y el complejo de golgi. 3 4

Figura 3: retculo endoplasmico rugoso y aparato de golgi, figura 4: retculo endoplasmico liso.

e. Lisosomas Son el estomago de la clula, su forma es variable, pueden medir de 0.2 a 2m; existen dos tipos; lisosomas primarios; son aproximadamente esfricos y no contienen partculas ni desechos de membrana visibles, lisosomas secundarios que son ms grandes y de forma irregular. Tienen una membrana limitante, en la cual hay bombas protnicas activas tipo V, cuya energa proviene del ATP, adems contiene alrededor de 40 hidrolasas distintas (ejemplo; nucleasas que degradan RNA y DNA, proteasas que degradan diversas protena y pptidos) la enzima de mayor importancia en los lisosomas es la fosfatasa acida, la funcin de las enzimas es efectuar la digestin, el pH ptimo de estas radica en 5, esto debido a la acumulacin de H+ en la membrana lisosmica. Como ya se menciono entre su funcin esta romper molculas grandes (almidones, lpidos y protenas), en molculas, ms pequeas y en digerir las partculas extraas que entran en la clula, por ejemplo, bacterias que pueden causar enfermedades o componentes que se han tornado obsoletos para la clula o el organismo. El proceso por el cual un orgnulo envejecido es degradado en un lisosoma se denomina autofagia (comerse a uno mismo), as los materiales llevados por endocitosis o fagocitosis hacia el interior de la clula tambin pueden ser degradados en los lisosomas.

Figura 6. Estructura, contenido y funciones de los lisosomas. Koolman, (2004).

f. Vacuolas Es un orgnulo celular presente en todas las clulas de plantas y hongos. Tambin aparece en algunas clulas protistas y de otros eucariotas. Las vacuolas son

compartimentos cerrados o limitados por membrana plasmtica que contienen diferentes fluidos, como agua o enzimas, aunque en algunos casos puede contener slidos. La mayora de las vacuolas se forman por la fusin de mltiples vesculas membranosas. El orgnulo no posee una forma definida, su estructura vara segn las necesidades de la clula. Las vacuolas que se encuentran en las clulas vegetales son regiones rodeadas de una membrana (monoplasto o membrana vacuolar) y llenas de un lquido muy particular llamado jugo celular. La clula vegetal inmadura contiene una gran cantidad de vacuolas pequeas que aumentan de tamao y se van fusionando en una sola y grande, a medida en que la clula va creciendo. En la clula madura, el 90 % de su volumen puede estar ocupado por una vacuola, con el citoplasma reducido a una capa muy estrecha apretada contra la pared celular. (Campbell, 2007) Entre sus funciones estn. Realizar hidrlisis es por ello que son similares a los lisosomas, es el principal almacn de iones inorgnicos como potasio y cloruro, muchas clulas vegetales utilizan sus vacuolas como sitios de eliminacin de sus productos metablicos que daaran a la clula si se acumularan en el citosol, algunas contienen pigmentos rojos y azules de los ptalos que atraen a los insectos polinizadores a las flores, tambin ayudan a proteger a la planta contra los depredadores al contener compuestos que son venenosos o de sabor desagradable para animales, as mismo interviene en el desarrollo de la planta ya que a medida que absorbe agua la clula vegetal aumenta de tamao. Habitualmente es el compartimento ms grande una clula vegetal. (Campbell, 2007)

Figura 7. Vacuola. Fuente; Campbell, 2007

g. Peroxisomas Llamados originalmente microsomas, son pequeas vesculas entre 0,15 a 1,5

m delimitadas por una membrana sencilla que usualmente contienen una fina matriz granular. Estas organelas estn presentes en todas las clulas eucariontes. Estas vesculas en su matriz contienen enzimas (oxidasas) relacionadas con diversas vas metablicas oxidativas (aminocidos, cido rico). Como producto secundario de sus procesos proporcionan un sustrato delimitado para reacciones en las cuales se genera perxido de hidrgeno (H2O2), cuya acumulacin en la clula puede resultar perjudicial, debido a su alta capacidad oxidativa inespecfica. Por ello, en los peroxisomas est presente otra enzima, la catalasa, que se encarga de catalizar la ruptura de H2O2 dando como resultado oxigeno molecular ms agua. Adems tiene un importante papel en la degradacin de los lpidos, en particular en la oxidacin de los cidos grasos de cadena larga y en la sntesis de glicerolipidos, esteres lipidicos del glicerol e isoprenoides.

Figura 8. Peroxisomas. Fuente Campbell, 2007

h. Glioxisomas Los glioxisomas son peroxisomas especializados la germinacin que es de lo que las bastante convierten los lpidos

en carbohidratos durante estos azcares sintetizados

semillas. madura

La plntula utiliza para producirlos

hasta

por fotosntesis. En los glioxisomas, los cidos grasos se hidrolizan a acetil-CoA mediante las "enzimas peroxisomales" de la -oxidacin. Adems, contienen las enzimas clave del ciclo del glioxilato ("isocitrato liasa" y "malato sintasa"). As realizan la ruptura de los cidos grasos y producen los productos intermedios para la sntesis de azcares por gluconeognesis. (http://es.wikipedia.org/wiki/Glioxisoma)

i. Mitocondria Orgnulos celulares encargados de suministrar la mayor parte de la energa necesaria para la actividad celular, actan por tanto, como centrales energticas de la clula y sintetizan ATP a expensas de los carburantes metablicos (glucosa, cidos

grasos y aminocidos). La mitocondria presenta una membrana exterior permeable a iones, metabolitos y muchos polipptidos. Eso es debido a que contiene protenas que forman poros llamados Pornas o VDAC ( canal aninico dependiente de voltaje ), que permiten el paso de molculas de hasta 10 kD y un dimetro aproximado de 20 . Las mitocondrias contienen su propio ADN y se piensa que representan organismos similares a las bacterias incorporados a la clula eucariota hace unos 700 millones de aos (incluso ya desde hace unos 1500 millones). Funcionan como sitio de liberacin de energa (despus de la gliclisis que se realiza en el citoplasma) y formacin de ATP por quimismosis. Se encuentran rodeadas por dos membranas cada una de ellas rodeadas por una doble capa de fosfolipdos con una serie de protenas. La membrana externa es lisa mientras que la interna forma una serie de repliegues: las crestas mitocondriales, la superficie donde se genera el ATP, as mismo esta divide a la mitocondria en 2 compartimentos internos, el primero es el especio intermembrana una regin estrecha entre las membranas interna y externa, el segundo es la matriz mitocondrial. Campbell, 2007

Figura 9. Mitocondria. Campbell, 2007

j.

Cloroplastos

Son un miembro de la una familia de orgnulos vegetales denominados plastidos. Los amiloplastos son plastidos incoloros que almacenan almidon (amilosa) particularmente en las rices y los tubrculos. Los cromoplastos tienen pigmentos que dan a los frutos y a las flores sus matices anaranjaddo y amarillo. Los cloroplastos contiene el pigmento verde clorofila, junto con enzimas y otras molculas que cumplen la funcin de producir hidratos de carbono mediante la fotosntesis. Estos orgnulos con forma de lentes, miden cerca de 2 m por 5 m, se encuentran en las hojas y otros rganos verdes de las plantas y en las algas. El contenido del cloroplasto est separado del sitosol por una envoltura compuesta de dos membranas separadas por un espacio intermembrana muy estrecho. Dentro del cloroplasto hay un sistema membranoso en forma de sacos aplanados e interconectados denominado tilacoides, estos se acomodan en granum (grana). El lquido encontrado por fuera de los tilaciodes es el estroma que tiene el DNA del cloroplasto.

Figura 10. Componentes del cloroplasto. http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso1998/accesit6/cloropla.html

k. Citoesqueleto El citoesqueleto es una red complicada de protenas que se entrecruzan en

el citoplasma de las clulas. El citoesqueleto est compuesto de una variedad de protenas. Estas protenas usualmente forman largas hebras retorcidas que se parecen a un cable elctrico o a los cables que sujetan los puentes. Como estos componentes hechos por el hombre, las protenas que forman el citoesqueleto son igual de fuertes como flexibles. Un tipo importante de filamento, la actina, est compuesta de hilos largos (polmeros) de la protena actina. Otros filamentos crticos del citoesqueleto son los microtbulos. Ellos tambin son polmeros, y estn compuestos de la protena tubulina. (Lodish, 2006)

Cuadro 2: Subunidades proteicas en los filamentos citoesqueleticos

Subunidad proteica Actina

PM 42,000

Ubicacin Hongos, plantas, animales

Funcin Soporte estructural, movilidad Control de anchura. Soporte para la membrana nuclear

MreB Laminas

36,000 Varios

Bacilos Plantas, animales

Desmna, queratina, vimentina, otros

Varios

Animales

Adhesin celular

Figura 11: Componentes estructurales del citoesqueleto http://bioprofe4.blogspot.mx/2011/10/elcitoesqueleto.html

l. Inclusiones celulares Sustancias qumicas presentes en el citoplasma de las clulas, generalmente

macromolculas, no rodeadas por una membrana. El glucgeno, lostriglicridos y la melanina son ejemplos tpicos de inclusiones celulares.

10

2.- Investiga ampliamente la funcin de los siguientes trminos: - Membrana citoplasmtica Se llama membrana celular o citoplasmtica a la estructura externa que delimita la clula. La membrana celular protege a la clula y regula sus intercambios con el exterior,

permitiendo el desarrollo de los procesos vitales. La estructura de la membrana consiste en una bicapa lipdica formada por fosfolpidos unidos a glcido. Entre los fosfolpidos se insertan las protenas de membrana (Calixto, 2004; Lodish, 2006). Entre las principales funciones realizadas por la membrana celular estn: A. Limita y da forma a la clula. B. Seleccionar y transportar las molculas que entran o salen de la clula y que son necesarias para mantener su actividad. C. Tiene actividad enzimtica y controla reacciones bioqumicas. D. Acta como un intercambiador que reconoce a la clula por otras clulas o por diversas sustancias.

Figura 12. Estructura de citoplasmtica.

la membrana

- Protenas de transporte Las protenas constituyen un grupo de biomoleculas caraterizado por su gran variedad estructural y enorme diversidad de funciones biologas. Debido a sus funciones, se pueden clasificar en: 1. Catlisis: 2. Reguladoras: 3. Estructural 6. Transporte: La funcin de las protenas de transporte es llevar sustancias a travs del organismo a donde sean requeridas. Protenas como la hemoglobina que lleva el oxgeno por medio de la sangre. (Lodish, 2006).
11

4. Defensiva: 5. Receptoras:

- Cdigo gentico El cdigo gentico es el juego de reglas biolgicas mediante el cual las secuencias de pares de bases nitrogenadas del ADN son producidas en sus secuencias de aminocidos correspondientes. El cdigo gentico es un cdigo de tres tripletes. Cada palabra del cdigo (codn) para un aminocido consiste en una sucesin de tres pares de base nitrogenadas. Entonces podemos decir que el ADN es un cido nucleico formado por nucletidos. Cada nucletido consta de tres elementos: A. Un azcar: desoxirribosa en este caso (en el caso de ARN o cido ribonucleico, el azcar que lo forma es una ribosa), Las bases nitrogenadas que constituyen parte del ADN son: adenina (A), guanina (G),citosina (C) y timina (T). Estas forman puentes de hidrgeno entre ellas, respetando una estricta complementariedad: A slo se aparea con T (y viceversa) mediante dos puentes de hidrgeno, y G slo con C (y viceversa) mediante 3 puentes de hidrgeno. El cdigo gentico es, entonces, la clave para la traduccin de la informacin o mensaje gentico contenido en los genes y que se ha de traspasar a las protenas, y est contenida dentro de la cadena de ADN formado por la combinacin de esas cuatro bases nitrogenadas: adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). As, se comprueba que el cdigo gentico establece la relacin existente entre las cuatro bases nitrogenadas, presentes en los nucletidos que constitutyen los cidos nucleicos, y los veinte aminocidos en que se basan las protenas. Lo misterioso del cdigo consiste en averiguar (entender, mejor dicho) cmo se establece dicha relacin. En el cdigo gentico, cada gen es un segmento del cido desoxirribonucleico (ADN) con informacin para un carcter o rasgo de un ser vivo. Al ser la molcula de ADN muy grande y llevar muchos genes en ella, el mensaje se transcribe en ARNm (cido ribonucleico mensajero), que es una molcula pequea capaz de sintetizar los aminocidos que constituyen las protenas. B. Un grupo fosfato y C. Una base nitrogenada

Figura 13. Cdigo gentico

12

- Radicales libres Son tomos, por lo general de oxigeno, altamente reactivos e inestables, que se originan cuando el alimentos es metabolizado en la clulas del cuerpo para la produccin de energa. Tambin se producen por influencias externas cuando el organismo recibe el impacto de diversos contaminantes o radiaciones. La inestabilidad de los radicales se debe a que han perdido uno de sus electrones e intentan reponerlo tomndolo de otros tomos. Esto crea una reaccin en cadena que ocasiona grandes daos a nuestras clulas, daos que se manifiestan en envejecimiento y un buen nmero de enfermedades.

http://www.saludparati.com/radicaleslibres.htm Entre sus funciones destacan http://doctorapaez.blogspot.mx/2011/12/funciones-de-losradicales-libres.html A. En el organismo mantienen en sistema inmunolgico activo. B. Promotores de especies ferrilo: son muy importantes los complejos de hierro y radicales derivados del oxgeno (especies ferrilo) en el sitio activo de algunos enzimas como en la peroxidasa y citocromo P450. C. Oxidaxin del etanol por RL. D. Reduccin de ribonucleotidos. E. Reacciones de oxidacin, carboxilacin e hidroxilacin. La mayor parte de estas sustancias derivan del anin superxido (O-2). F. Maduracin y respuesta al dao en tejidos vegetales. La maduracin hasta el envejecimiento y la respuesta al dao en tejidos vegetales est controlada por reacciones de oxidacin. G. Produccin de eicosanoides: tienen acciones muy variadas y son muy potentes, sobre todo regulan procesos fisiolgicos y juegan un papel importante en enfermedades que cursan con dao tisular e inflamacin. H. Factor endotelial de relajacin: el xido ntrico es responsable de la vasodilatacin necesaria para la regulacin de la presin del flujo sanguneo e inhibe la agregacin plaquetaria por un mecanismo dependiente de CMPC. Tiene un papel importante en el aprendizaje y la memoria, adems, puede contribuir al mecanismo de la visin, olfaccin y conducta. Tambin interviene en el sistema inmune y es capaz de inhibir el crecimiento de bacterias y hongos.

Figura 14. Estructura tipa de los radicales libres comparada con un tomo normal

13

3.- Investiga que es, como funciona y para que se usa una ultracentrifugadora Es una centrifuga (mquina que pone en rotacin una muestra para acelerar por fuerza centrfuga la decantacin o sedimentacin de sus componentes o fases (generalmente una slida y una lquida), en funcin de su densidad) de alta velocidad capaz de alcanzar hasta 90 000 rpm.; en ella puedes hacer pruebas muy precisas de laboratorio ya que es posible el centrifugado de; geles, muestras de sangre pobres en plaquetas en tiempos muy reducidos, separa partculas de bajo coeficiente de sedimentacin (microsomas, virus, macromolculas) y detecta concentraciones mnimas de sedimentos. El principio fsico en que se basa el funcionamiento de la Centrifugadora se puede ilustrar examinando el proceso de sedimentacin de un puado de arena introducido en un recipiente con agua. Al agitar la mezcla de agua y arena, la fuerza de atraccin que ejerce la tierra acta sobre los granos de arena con ms intensidad que sobre las partculas de agua, porque la masa de aquellas es mayor. Los granos de arena son atrados hacia el fondo de la vasija y cuando, despus de transcurrido cierto tiempo, el sistema llega a alcanzar el estado de reposo, se pueden distinguir en ellas dos capas bien distintas, a saber, una inferior de arena y otra superior de agua que la cubre.

Figura 15. Ultracentrifuga. http://vicinv.ujaen.es/node/544 4.- Investiga los siguientes trminos y cuando y como se utilizan: a) Cromatografa de adsorcin La adsorcin es la propiedad que tienen ciertos slidos de aumentar la concentracin en su superficie de otras sustancias. La separacin se debe a las diferencias de adsorcin de los componentes de una mezcla sobre la fase estacionaria. La fase estacionaria ha de ser un slido polar de gran superficie (adsorbente). La fase mvil puede ser un gas o un lquido dando lugar a la cromatografa gas-slido (CGS) o lquido-slido (CLS).
14

El grado de adsorcin vara segn la naturaleza y superficie especfica de los adsorbentes y naturaleza de los solutos. Los enlaces entre molculas adsorbidas y el adsorbente han de ser dbiles para que su fijacin sea reversible, las uniones son debidas a fuerzas intermoleculares (interacciones dipolo-dipolo o puentes de hidrgeno). Como regla general, las polaridades del adsorbente y de los solutos han de ser opuestas. b) Cromatografa de cambio inico La cromatografa de intercambio inico (cromatografa inica) es un proceso que permite la separacin de iones y molculas polares basadas en las propiedades de carga de las molculas. Puede ser usada en casi cualquier tipo de molcula cargada, incluyendo grandes protenas, pequeos nucletidos y aminocidos. La solucin que se inyecta es usualmente llamada muestra y los componentes separados individualmente son llamados analitos. Es usada a menudo en purificacin de protenas, anlisis de agua o control de calidad.La fase estacionaria (resina de intercambio) muestra en la superficie grupos funcionales inicos que interactan con iones de carga opuesta. Este tipo de cromatografa se subdivide a su vez en la cromatografa de intercambio catinico y cromatografa de intercambio aninico: La cromatografa de intercambio catinico retiene cationes cargados positivamente debido a que la fase estacionaria muestra un grupo funcionalcargado negativamente (SO3-, CO-2) Las resinas cuyo grupo funcional activo es (SO3-,) se consideran resinas intercambiadoras cidas fuertes, (CO-2) se consideran resinas cidas dbiles. La cromatografa de intercambio de aniones retiene aniones usando grupos funcionales cargados positivamente, como un catin de amonio cuaternariomientras que aqullas cuyo grupo funcional activo es un in carboxilato un sulfonato (R4N+). c) Cromatografa de exclusin La cromatografa de exclusin molecular (a menudo tambin llamada filtracin en gel o de tamiz molecular) es una de las tcnicas ms sencillas de las empleadas en la separacin de protenas y cidos nucleicos. Este tipo de cromatografa se realiza en columnas cilndricas rellenas con algunos de los geles que se fabrican con este fn y que pueden ser de varios tipos: dextranos con enlaces cruzados (sephadex), agarosa (sepharose, Bio-gel A), poliacrilamida (Bio-gel B), etc. Todos estos geles (fase estacionaria) se hallan constituidos por grnulos (particulas) de un material esponjoso hidratado, que contiene poros con un tamao de dimetro determinado.
15

Cuando se hace pasar una mezcla de molculas de distinto tamao, a travs de una columna de filtracin en gel; aquellas molculas con un tamao mayor que el dimetro de los poros de las particulas, slo podran moverse en su camino, a travs de la fase estacionaria, en el espacio que queda entre las partculas; y por lo tanto, no se vern retrasadas en su descenso. En cambio aquellas molculas capaces de penetrar en las partculas se vern retrasadas por la fase estacionaria; en mayor medida, cuanto menor sea su tamao. Por lo tanto, las molculas eluyen en este tipo de cromatografa por orden decreciente de tamao molecular. APLICACIONES (Cambios de buffers, Desalado,

Eliminacin de fenol de las preparaciones de cidos nuclicos, Eliminacin de compuestos de bajo peso molecular marcados, Para reacciones entre macromolculas y reactivos de bajo peso molecular, Eliminacin de productos, cofactores, inhibidores, etc. de las enzimas, Purificacin de macromolculas.y determinacin del peso molecular de las protenas.) d) Cromatografa de afinidad La cromatografa de afinidad se basa en la interaccin, especfica y reversible, que se presenta entre una partcula de inters (llamada genricamente afinante) con alguna molcula particular que va a ser inmovilizada en un soporte slido (a esta partcula se le conoce como ligando). La interaccin de estas dos molculas es similar a la que se presenta entre una enzima y su sustrato. Las matrices o soportes utilizados en cromatografa de afinidad son genenralmente geles que deben cumplir con una serie de requisitos a fin de lograr obtener el producto deseado en con menores dificultades y en mayor grado de pureza. Matrices de polisacridos Agarosa Celulosa Dextrano Matrices sintticas Poliacrilamida Vidrio

16

e) Cromatografa en capa fina La cromatografa en capa fina se basa en la preparacin de una capa, uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria consiste en un slido. La fase estacionaria ser un componente polar y el eluyente ser por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad sern los menos polares. La mezcla a analizar se deposita a una pequea distancia del borde inferior de la placa y se introduce en una cubeta que contiene la fase mvil, que asciende a lo largo de la placa por capilaridad, desplazando a los componentes de la mezcla a diferentes velocidades, lo que provoca su separacin. Cuando el frente del disolvente se encuentra prximo al extremo superior de la placa esta se saca y se visualiza. La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente desde el origen se conoce como Rf (rate factor). Rf= Distancia recorrida por el compuesto Distancia recorrida por el disolvente f) Electroforesis capilar La electroforesis capilar (EC) es una tcnica analtica que permite la separacin y cuanticacin de una amplia gama de analitos (iones, pptidos, protenas, carbohidratos, esteroides, cidos nucleicos, vitaminas, frmacos, clulas, etctera) provenientes de las diferentes reas de la biotecnologa, la industria farmacutica, la clnica, la alimentaria y la ambiental, entre otras. Parte de la versatilidad y ecacia de esta tcnica se debe a que combina elementos de otras tcnicas analticas; por ejemplo, utiliza detectores de alta sensibilidad como en la cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC) y el uso de capilares de slice fundida (SiO2), como en la cromatografa de gases (GC). Adems, estos capilares permiten la aplicacin de altos campos elctricos (100-500 V/cm) con una alta eciencia para la disipacin del calor, evitando los efectos adversos del calentamiento de Joule, y permiten la deteccin in situ, debido a la baja absorcin de la radiacin UV/vis y a la baja uorescencia. Estos capilares estn recubiertos de un polmero (poliamidas) que les conere alta exibilidad facilitando su manipulacin. Los grupos silanol (Si-OH) de la super cie del capilar a pH 3 son ionizados, por lo que la pared del capilar presentar carga negativa (Si-O-). De acuerdo con la teora de la doble capa elctrica, en la pared del capilar se formar una primera capa (capa ja) de contraiones (cationes) que son atrados por la
17

carga negativa del capilar, seguida por una segunda (capa mvil), que se compone principalmente de cationes que estn adyacentes a la capa ja y, hacia el centro del capilar, el nmero de cationes y aniones son equivalentes. Al aplicar un campo elctrico, el exceso de cationes de la capa mvil establece un ujo neto de migracin hacia el polo negativo (ctodo), generando el ujo electroosmtico, que se reere a la migracin de un lquido (solucin amortiguadora) respecto a una supercie cargada (pared del capilar) al aplicar un campo elctrico. La movilidad del ujo electroosmtico (feo) est en funcin de la viscosidad () de la solucin amortiguadora, la constante dielctrica del medio () y del potencial zeta () que se genera por la diferencia de cargas entre las capas. g) Cromatografa lquida de alto rendimiento La separacin cromatogrfica en HPLC es el resultado de las interacciones especficas entre las molculas de la muestra en ambas fases, mvil y estacionaria. Tales interacciones esencialmente no existen en la fase mvil para la cromatografa de gases. La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y ms posibilidades para la separacin. El recobro de la muestra es fcil en la HPLC. Las fracciones separadas se recolectan en forma sencilla, colocando un recipiente abierto al final de la columna. El recobro es usualmente cuantitativo (exceptuando la adsorcin irreversible en la columna) y los componentes separados son fcilmente aislados del disolvente de la fase mvil. Adicionalmente al tipo usual de compuestos orgnicos, la cromatografa lquida en columna puede manejar separaciones de compuestos inicos, productos lbiles de origen natural, materiales polimricos y compuestos polifuncionales de alto peso molecular. Es capaz de separar macromolculas y especies inicas, productos naturales lbiles, materiales polimricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase mvil lquida interactiva, otro parmetro se encuentra disponible para la selectividad, en adicin a una fase estacionaria activa. h) Cromatografa de gases La cromatografa de gases es el procedimiento comnmente utilizado en el anlisis qumico, en concreto cromatografa de gases consiste en una muestra que se vaporiza y se inyecta en la cabeza de la columna cromatografa. La muestra se transporta a travs de la columna por
18

el flujo de fase inerte, mvil gaseosa. La propia columna contiene una fase lquida estacionaria que se adsorbe sobre la superficie de un slido inerte. La cromatografa de gases se puede aplicar a gases y cualquier compuesto que pueda ser volatilizado o convertido en un derivado voltil; la cromatografa de gases tiene amplia aplicacin, en las industrias se enfoca principalmente a evaluar la pureza de los reactantes y productos de reaccin o bien a monitorear la secuencia de la reaccin, para los fabricantes de reactivos qumicos su aplicacin para la determinacin de la pureza es lo ms importante. En la investigacin es un auxiliar indispensable para diversas tcnicas de evaluacin, entre las principales estn los estudios cinticos, anlisis de adsorcin a temperatura programada, determinacin de reas especficas por adsorcin de gas y determinacin de isotermas de adsorcin. En el campo tambin pueden ser aplicados, principalmente en estudios de contaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de lagos, lagunas, ros; desechos industriales descargados en ros o lagunas. En la industria del petrleo juega una funcin primordial, por medio de la cromatografa se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, lasmezclas de gases de refinera, gases de combustin, etc. i) Electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS La electroforesis es una tcnica de separacin de molculas cargadas por migracin en un campo elctrico. Las molculas se separan en funcin de su carga elctrica, desplazndose al electrodo de carga contraria y a mayor velocidad cuanto mayor es la carga de la molcula. Uno de los mtodos de electroforesis ms comnmente aplicado para protenas es el que emplea geles de poliacrilamida (PAGE = polyacrylamide gel electrophoresis) en presencia del detergente aninico dodecilsulfato sdico (SDS). Esta tcnica es conocida como SDS-PAGE. j) Electroforesis en gel de agarosa Como ya se ha mencionado la electroforesis en gel es un mtodo que se emplea para separar macromolculas en funcin del tamao, la carga elctrica y otras propiedades fsicas. El trmino electroforesis describe la migracin de las partculas cargadas bajo la influencia de un campo elctrico. Electro se refiere a la electricidad y foresis, del griego phoros, significa trasladar. As pues, la electroforesis en gel es una tcnica consistente en aplicar corriente elctrica a las molculas para que atraviesen una placa de gel. La fuerza motriz de la electroforesis es la tensin elctrica aplicada a los electrodos en ambos extremos del gel.
19

La electroforesis en gel de agarosa es un mtodo normalizado que se utiliza para separar, identificar y purificar fragmentos de ADN. Se trata de una tcnica sencilla y rpida que permite diferenciar fragmentos de ADN que no pueden separarse adecuadamente con otros procedimientos. Por otra parte, el ADN puede localizarse en el gel tiendo con una concentracin baja de bromuro de etidio, que es un agente intercalante fluorescente que se utiliza como colorante. k) Electroforesis en gel de almidn El uso de geles como almidn, poliacrilamida y agarosa, proporciona una inestable resolucin, particularmente para protenas y cidos nucleicos. El gel de almidn consiste en una pasta de almidn de patata cuyos granos han sido disgregados por calentamiento de la disolucin tampn. Cuando interesa montar el gel horizontal, la muestra se aplica en una ranura hecha con una cuchilla, bien como una simple disolucin o bien como una pasta con granos de almidn, la ranura se precipita con cera o grasa y seguidamente se aplica el voltaje adecuado. Despus de la electroforesis el gel se corta normalmente en dos o tres capas en sentido longitudinal y se somete a distintas tinciones. Los gels de poliacrilamida han remplazado a los de almidn por tener un mejor efecto como tamiz molecular y por proporcionar el control del tamao de sus poros utilizando distintas concentraciones de los monmeros de partida. (Freifelder; 2003). 5.- Investiga las partes de una cmara de electroforesis y como funciona.

Figura 16. Partes de una cmara de electroforesis. http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/equipos.htm

20

Una vez polimerizado el gel concentrador se aplica la muestra. A. Conectar los cables de la cubeta a una fuente de corriente continua (comprobar la polaridad: rojo (+), negro (-)). B. Aplicar 80 V hasta que el frente (visible por la banda azul de bromofenol) entre en el gel separador; despus subir a 120 V. C. Cuando el frente, se acerce al extremo inferior del gel, desconectar la corriente y sacar el sandwich (tarda aproximadamente una hora y cuarto). D. Separar las placas de vidrio con ayuda de una esptula y sacar el gel (usar guantes para evitar tocar el gel con los dedos) con cuidado de no invertir su orientacin. E. Una vez finalizada la transferencia, se tie el gel de electroforesis mediante su inclusin en solucin de tincin que contiene Azul de Coomassie, cido actico, metanol durante 2 horas a temperatura ambiente. F. Posteriormente, se pasa el gel a solucin de destincin que contiene cido actico 10% y metanol 10% en agua, destiendo el gel durante toda la noche. 6.- Como se prepara un gel de poliacrilamida. Los geles de poliacrilamida son el resultado de la polimerizacin qumica de una mezcla de acrilamida y bisacrilamida. Controlando la concentracin de ambas obtenemos geles de diferente grado de reticulacin (diferente dimetro de poro). En la preparacin del gel, la polimerizacin de los monmeros de acrilamida produce cadenas lineales. Al incluir bisacrilamida, sta da lugar a puntos de ramificacin en el polmero, lo que permite formar una matriz tridimensional, dando lugar al gel de poliacrilamida. El tamao de los huecos o poros que forma la retcula del polmero depende de la concentracin de acrilamida y del grado de entrecruzamiento (es decir, de la proporcin de bisacrilamida con respecto al total). As, variando la concentracin de acrilamida y bisacrilamida en la preparacin del gel se consiguen distintos grados de porosidad y, por tanto, distintos intervalos de separacin de protenas. Tambin se aade un tampn (comnmente Tris-HCl). Adems, se aade un agente iniciador de la polimerizacn como el persulfato amnico, que al disolverse en agua genera radicales libres que transforman la acrilamida en radical libre y se inicia la polimerizacin. Tambin se aade al medio TEMED (N,N,N,N -tetrametil-etilenodiamina) como catalizador porque puede existir en forma de radical libre. Las muestras proteicas se tratan, previamente a su fraccionamiento, con SDS a 100 C. Como consecuencia de este
21

tratamiento y de la presencia posterior de SDS durante toda la separacin (tanto en el tampn de electroforesis como en la composicin del gel), las protenas se mantienen desnaturalizadas. El SDS tiene la propiedad de unirse a las cadenas polipeptdicas en una proporcin masa:masa constante (1.4 g SDS/g de protena), de modo que en el complejo SDS-protena la carga de la protena queda enmascarada por la de las mltiples molculas de SDS y sta es proporcional al tamao (n de aminocidos). Esta electroforesis es discontinua pues utiliza dos geles: Un gel concentrador con bajo grado de reticulacin y pH 6,8 (gel acumulador o stacking gel). Un gel separador con grado de reticulacin mayor con valores entre 6% y 15%, pudindose tambin utilizar gradientes de concentracin de acrilamida (gel separador). En la electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS, la separacin de protenas se hace en funcin de la masa molecular. Tanto es as que la representacin del logaritmo de la masa molecular frente a la distancia migrada obedece a una lnea recta para gran nmero de protenas. Para que esta dependencia sea correcta, es preciso romper los puentes disulfuro intra- e intercatenarios, para lo cual es frecuente aadir durante la preparacin de la muestra un agente reductor, generalmente 2-mercaptoetanol. De este modo, la masa molecular observada corresponde a la de cada subunidad de una protena, no a la protena completa, al existir una relacin lineal. Para aplicar la muestra al gel, se le suele aadir un agente que la haga ms densa, generalmente glicerina o sacarosa. Adems, para seguir el avance de la separacin, se aade un colorante, como azul de bromofenol, que sirve como referencia (tracking dye). ste tiene una movilidad mayor que la de cualquier macromolcula y, por tanto, si se aplica corriente hasta que el colorante est a poca distancia del extremo inferior del gel, se tiene la seguridad de que ninguna macromolcula se ha salido del gel por avance excesivo. Fuente de electroforesis. Bao de incubacin Cubeta de electroforesis con cristales, peines y separadores. Formador de geles Pipetas Solucin de acrilamida/bisacrilamida: Contiene 30 % acrilamida + 0.8 % bisacrilamida preparada en agua destilada Disolucin de SDS: 10 % en agua destilada Disolucin de persulfato amnico: 100 mg/mL en agua destilada TEMED (solucin comercial) Tampn del gel separador: Tris 1M; pH = 8,8 Tampn del gel acumulador: Tris 0,5 M; pH = 6,8
22

Tampn de Ruptura 5X que contiene: 2,5 ml de solucin de SDS 10%; 0,2 ml de 2-mercaptoetanol; 0,5 ml de azul de bromofenol 0,05%; 0,3 ml de tampn de electroforesis; 1 ml de glicerol y 0,5 ml de Tris 0,5 M pH 6,8. Tampn de electroforesis: contiene 14,4 g/l de glicina, 3 g/l de Tris (base) y 10 ml/l de SDS 10%. Marcadores preteidos de peso molecular Gel concentrador : 12 mL 6,25 Ml 6,25 mL 250 L 12,5 L 200 L Agua destilada Acrilamida/Bisacrilamida Tris 0,5 M pH 6,8 SDS 10% TEMED Persulfato amnico (100 mg/ 1 ml) 5,8 mL 1,65 mL 2,5 mL 100 L 6,5 L 94 L

Gel separador (7,5%) Agua destilada Acrilamida/Bisacrilamida Tris 1 M pH 8,8 SDS 10% TEMED Persulfato amnico (100 mg/1 ml)

Figura 17. Electroforesis en gel de poliacrilamida.

23

TERCER CUESTIONARIO BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR MAESTRA EN ALIMENTOS JAVIER PILONI MARTINI

1.- Investiga la composicin y funciones de los siguientes puntos en bacterias Gram positivas y negativas. Gram Positivas y negativas Composicin Se le donomina tambin limo o glicoclix. Cubre la totalidad de la superficie ms externa de la pared celular en algunas bacterias gran positivas o del exterior de la membrana externa en algunas gran negativas. Est compuesta por polmeros de polsacaridos en secuencias repetidas que se encuentran en la parte ms externa de la superficie de bacterias gram positivas como gram negativas. Contiene tambin gran cantidad de agua. (Velez 2003) Es una estructura rgida que da la forma caracterstica a la clula (coco, bacilo, espirilo) y no est presente en la clula de los mamferos, Es una estructura compleja en la que sus componentes bsicos son: El peptidoglucano el cual consiste en largas cadenas de polisacridos con pequeas cadenas peptdicas colaterales. Funcin A pesar de no ser esencial para la supervivencia de la celular, proporciona proteccin contra la desecacin y la infeccin por bacterifagos. Las bacterias encapsuladas son en general ms virulentas y se defienden mejor de la respuesta inmune del organismo hospedero, ya que las protege de la accin ltica del complemento, adems de conferirle propiedades antifagociticas. (Velez 2003) Aparte de dar la forma la pared celular tambin protege a las bacterias del aplastamiento mecnico. En grama (+) existe varias capas de peptidoglucano por lo que son ms resistentes a fuerzas fsicas externas comparado con las bacterias gran (-) debido a que estas tienen solo unas pocas capas de este compuesto. Es el lugar de accin de varios agentes antimicrobianos. Su composicin y estructura bsicas son como las de la membrana citoplasmtica, sin embargo contiene un componente importante llamado
24

Capsula

Pared celular

Membrana externa

Esta solo est presente en gram (-), se localiza en la zona ms externa de la pared celular. Es una membrana que recubre toda la superficie de la clula.

endotoxina, compuesto por lpidos, polisacridos y protenas (complejo lipopolisacridoprotena). La accin de la endotoxina se cree que desempea un papel importante en muchas enfermedades infecciosas, incluyendo peridentales, disentera, meningitis, clera, etc. (Miller y Palenik, 2000) Membrana citoplasmatic a Rodea el citoplasma, est compuesta de sustancias proteicas y de lpidos. Su estructura es parecida a la de las clulas de los mamferos. (Miller y Palenik, 2000) Entre sus funciones estn la regulacin de la entrada y salida de los materiales nutritivos y de los productos de desecho, as como el mantenimiento de la adecuada presin dentro de la clula para protegerla de un estallido, para contener las enzimas responsables de sintetizar la pared externa de la clula, para servir como lugar fsico de la unin y distribucin del ADN cromosmico formado de nuevo durante la divisin celular, para el control de la liberacin de ciertas enzimas extracelulares y para servir como lugar de muchas reacciones metablicas gracias a las cuales la clula adquiere energa para su crecimiento. (Miller y Palenik, 2000) Contiene ribosomas los cuales son los responsables de la sntesis de protenas. (Miller y Palenik, 2000)

Espacio citoplasmatic o

Esta contenido dentro de la membrana citoplasmtica y es un material viscoso. Est formado por agua, enzimas y otras protenas, carbohidratos, lpidos, cidos nucleicos, nutrientes esenciales, oxigeno y productos de desecho. (Miller y Palenik, 2000)

Fuente: Velez, et al., 2003

25

Figura 18. Diferencias entre Gram positivas contra gram negativas

2.- Investiga las caractersticas e importancia de las bacterias cido alcohol resistente y micoplasmas. Las micobacterias son unas bacterias aerobias, y no mviles, muy contagiosas, y que producen una serie de infecciones altamente prevalentes en el ser humano, entre otras, la tuberculosis y la lepra. Su nombre proviene del griego , cera, debido a los compuestos de su pared celular. Tradicionalmente se habla, a la hora de clasificar las especies, de micobacterias tpicas (Mycobacterium tuberculosis o Bacilo de Koch y Mycobacterium leprae o Bacilo de Hensen) y de atpicas (un amalgama de micobacterias que producen patologa variada, generalmente en inmunodeprimidos). La importancia de este grupo viene dada por su elevada prevalencia, especialmente en los pases en vas de desarrollo, y se calcula que alrededor de tres millones de personas al ao mueren por patologa relacionada con esta familia de bacterias.
26

Se caracterizan por: Son bacilos finos, largos e inmviles, y que poseen cido-alcohol resistencia. Esto significa que son resistentes a la decoloracin de la fucsina debido a la alta concentracin de cido miclico en la pared celular. Por esto mismo, no se pueden catalogar dentro de la clasificacin de Gram, aunque tradicionalmente se las considera Gram positivas. Su cultivo es muy variable, siendo algunas especies fcilmente adaptables al crecimiento en sustratos muy simples, mientras que otras (entre ellas M. tuberculosis y M. leprae) tienen un crecimiento muy lento (hasta 20 das), requiriendo otros medios de cultivo, comoe s el caso del Lwenstein-Jensen, con colonias secas, esfricas, rugosas y de color blanco cremoso. Son aerobias estrictas. Para su visualizacin, se utilizan tinciones especficas, como la de Ziehl-Nielsen o la de auramina (para una posterior visualizacin con inmunofluorescencia).

Este tipo de bacterias tiene gran importancia clnica por las problemas y enfermedades que causa los representantes de este gnero como las bacterias nocardiformes patgenas.

Los micoplasmas (Mycoplasma) son bacterias que carecen de pared celular. Pertenece a

la clase Mollicutes,

tienen genomas pequeos,y

tienen un bajo contenido de GC (18-40%). Existen ms de 100 especies reconocidas del

gnero Mycoplasma. Debido a la ausencia de pared celular, los micoplasmas no son sensibles a los antibiticos que bloquean la sntesis de la pared celular, como lapenicilina u otros Estos caractersticas

antibiticos betalactmicos. microorganismos exhiben

morfolgicas, metablicas y moleculares.

Figura 19. Bacteria.

27

Su importancia ha generado inters en el estudio de enfermedades humanas, ya que durante la prctica clnica diaria se relacionan con enfermedades tanto agudas como crnicas, que en ciertas ocasiones llegan a trminos fatales. Su distribucin en hospederos es diversa y se encuentran en peces, reptiles, aves, mamferos y en el humano. En este ltimo se han aislado de diversos sitios anatmicos, tanto en individuos con diferentes padecimientos como en individuos sanos. Su presencia se ha observado en tracto respiratorio y genitourinario, en complicaciones neurolgicas y en sangre. Donde ha llamado ms la atencin es su probable papel como cofactor en la progresin del sndrome de la inmunodeficiencia adquirida. (Rivera et al., 2001) 3.- Investiga ampliamente los siguientes trminos en bacterias: - Protoplastos; Son bacterias que han perdido la pared celular. Su estudio ha permitido establecer que la pared celular es indispensable para la vida bacteriana. Se originan por el tratamiento de una bacteria Grama positiva con enzimas, que degradan el peptidoglucano, produciendo entonces la perdida de la pared celular. Despus de la perdida de la pared, la bacteria sin importar su forma original, adopta la forma esfrica tpica del protoplasto. Esta estructura es muy frgil, debido a que tiene la membrana citoplasmtica, que rodea al protoplasto, tiene escasa resistencia mecnica y adems es muy susceptible a los cambios en la concentracin de solutos del medio. (Garca, 2005)

Figura 20. Proceso de elaboracin de protoplastos.

- Esferoplastos: Es una clula bacteriana desprovista de la mayor parte de su envoltura celular bacteriana mediante la adicin de una penicilina. Los esferoplastos son muy frgiles y sensibles al estrs osmtico; tanto es as que se produce su lisis celular al transferirlos a un medio hipotnico. Los esferoplastos de algunas bacterias Gram negativas han sido empleados en investigacin cientfica para dilucidar los mecanismos de accin de loscanales inicos de su membrana biolgica mediante la tcnica del patch clamp, originalmente diseada para estudiar la excitabilidad de clulas nerviosas como las neuronas. Para el anlisis de los esferoplastos bacterianos, se crecen las clulas en presencia de inhibidores de la divisin celular, de modo que crezcan pero que no se dividan. Esto acenta
28

notablemente su tamao y modifica su forma hasta estructuras bacilares. En este punto, se aade la penicilina, lo que provoca el debilitamiento de la pared y el colapso de la estructura hasta una forma esfrica ms estable (con menor proporcin superficie/volumen), forma cmodamente analizable mediante patch-clamp. Es comn que la bacteria sometida a este proceso haya sido modificada genticamente aadiendo un gen para un canal inico sobreexpresado, lo que aumenta su abundancia y facilita su anlisis.

(http://es.wikipedia.org/wiki/Esferoplasto) - Mesosomas: Un mesosoma es una invaginacin de la membrana plasmtica de las clulasprocariotas, que tiene relacin con los procesos metablicos de la clula. Al contener las enzimas necesarias para ciertos procesos metablicos, estos se producen en los mesosomas. Los ms destacables son la duplicacin y transcripcin delADN bacteriano (para la divisin o sntesis proteica), las reacciones de respiracin (gluclisis...) y fotosintticas. En algunas

clulas bacterianas la membrana celular se pliega en forma de espiral hacia el interior (invaginacin), dando origen a estas estructuras su composicin qumica es lipoproteica. Funcionan como zona para inicio de la divisin celular. Interviene en la divisin celular,
Figura 21. Mesosoma en bacteria.

repartiendo de manera equitativa el material gentico

para las dos clulas hijas. - Fimbrias o pilis Son apndices externos que no intervienen en el movimiento de las bacterias. Fimbrias: son filamentos finos de Protenas que se distribuyen sobre la superficie de la clula. Ayudan a la adherencia de las bacterias a las superficies slidas o a otras clulas y son esenciales en la virulencia de algunos patgenos (virus) (ayuda a producir
Figura 22. Fimbrias.

la

enfermedad)

Pili: son apndices celulares ligeramente mayores

29

que las fimbrias. Se utilizan para la transferencia de material gentico entre bacterias en un proceso denominado conjugacin bacteriana (es el proceso de transferencia de material gentico entre una clula bacteriana donadora y una receptora mediante el contacto directo o una conexin que las una). Los trminos fimbria y pilus (plural pili) son a menudo intercambiables, pero fimbria se suele reservar para los pelos cortos que utilizan las bacterias para adherirse a las superficies, en tanto que pilus suele referir a los pelos ligeramente ms largos que se utilizan en la conjugacin bacteriana para transferir material gentico desde la clula donadora hasta la receptora y a veces en el desplazamiento. - Flagelos Los flagelos son apndices mviles de longitud diversa que permiten el movimiento en medios lquidos. Estos apndices no tienen ninguna semejanza estructural con los flagelos en clulas eucariotas, aunque se denominen de igual forma. La fuerza motriz que desarrolla se obtiene mediante un movimiento circular en ambos sentidos a partir de la energa obtenida de una bomba de protones. Se trata de apndices largos y finos, libres por un extremo y fijados a la clula por el otro en distintas posiciones: a uno o a ambos extremos de la clula (flagelacin polar) o en distintas posiciones alrededor de la superficie celular (flagelacin pertrica). Tambin es posible observar un penacho de flagelos en uno de los extremos de la clula, que reciben el nombre de loftricos. La clasificacin sera:

1. Un flagelo en posicin polar o subpolar: flagelacin montrica. 2. Un penacho de flagelos en posicin polar: loftrica. 3. Un penacho de flagelos en ambos extremos: anftrica. 4. Flagelos repartidos por toda la superficie: pertrica. 5. Finalmente, flagelos dispuestos en posicin lateral agrupados en penachos o no. Los flagelos tienen una estructura helicoidal y estn compuestos por 50 protenas destacando la flagelina, cuya composicin es un poco excepcional, ya que es rica en aminocidos glutmico y cido asprtico, ausencia de triptfano y cistena y escasez de aminocidos bsicos como la tirosina, prolina, histidina y metionina. La estructura de los flagelos se resuelve en tres partes: el filamento de flagelina, conectado a una estructura
30

curva llamado codo o gancho y el cuerpo basal, compuesto por una estructura cilndrica que se encuentra entre las envueltas celulares (pared, membrana celular, membrana externa ) a las que se une mediante una estructura de anillos, entre los que pasa un filamento. El gancho y el cuerpo basal tienen una composicin distinta a la del filamento. En el filamento, las subunidades de flagelina se disponen en una conformacin cilndrica con un canal en su interior. La forma y la longitud de onda del flagelo estn determinadas por la estructura de la flagelina, por lo que cambios en su estructura provoca cambios en la estructura del flagelo.

Figura 23. Estructura del flagelo, y clasificacin de las bacterias segn el contenido flagelar.

- Plsmidos y tipos de plsmidos Los plsmidos son molculas circulares de ADN que se replican de manera independiente al cromosoma de la clula hospedera. De manera natural se encuentran en las bacterias en tamaos que van desde 5,000 hasta 400,000 pb. Pueden ser introducidos en las clulas bacterianas por un proceso denominado transformacin. Las clulas y el plsmido se incubas juntos a 0C en soluciones de cloruro de calcio, posteriormente se da un incremento de temperatura al medio de entre 37 y 43 C, alternativamente se puede utilizar un choque de corriente elctrica en una tcnica denominada electroporacin. Han sido empleados como vectores o vehculos de clonacin de molculas de ADN forneas que permiten el transporte y manipulacin del mismo. Hoy en da se dispone de una gran variedad de plsmidos sintticos de naturaleza modular con caractersticas diversas para lograr ya sea la clonacin de un fragmento de ADN genmico de Cadn o de PCR. Algunos tipos de plsmidos son: Plsmidos inv que confieren invasividad intestinal a microorganismos enteroinvasivos Plsmidos ent que codifican enterotoxinas
31

La codificacin de factores de resistencia a antibiticos. P. ej., la produccin de lactamasas plasmdicas.

Los plsmidos sexuales que confieren a la bacteria que los porta la capacidad para transferir informacin gentica de forma horizontal mediante la conjugacin bacteriana. Este plsmido se denomina plsmido F y es portador, entre otros, de los factores genticos responsables de la produccin del pelo F.)

Figura 24. Plsmido en batera.

- Episoma: Es un plsmido capaz de existir integrado o no en el cromosoma bacteriano. Puede replicarse en forma autnoma pero tambin pueden integrarse al cromosoma bacteriano y duplicarse junto con el resto de los genes cromosmicos. 4.- Investiga ampliamente los siguientes puntos: a) Descripcin de la membrana nuclear Tambin llamada carioteca, es la envuelta que rodea y delimita al ncleo propio de la clula eucariota. Est formada por dos membranas concntricas, as que la expresin membrana nuclear, frecuentemente usada para referirse a ella, no puede considerarse apropiada. Su funcin es separar el material gentico del citoplasma. La capa externa tiene adheridos ribosomas y se une al retculo endoplasmatico, formando el denominado sistema endomembranoso. La capa interna de la membrana nuclear tiene adherida la cromatina. Esta ltima, est compuesta por ADN y protenas y es el principal constituyente de los cromosomas. Entre las dos capas se crean canales de preoteinas denominados poros nucleares,que facilitan el transporte selectivo de sustancias entre el ncleo y el citoplasma.

32

Figura 25. Estructura general de la membrana nuclear

b) Organizacin del DNA en clulas eucariota y procariota. En clulas procariotas el DNA forma un solo cromosoma circular superespiralado bicatenario. Por lo tanto debe estar empacado de forma muy condesada para caber en el interior de la clula. Los cromosomas bacterianos estn organizados en estructuras compactas, llamadas nucleoides, resultantes de la interaccin de las protenas HU y H-NS, con la participacin de varios cationes, poliaminas (tales como la esparmina, la espermidina, la putrescina y la cadaverina), (Devlin, 2004) 9 10

Figura 26. Organizacin del DNA en procariotas, mientras que la figura 10 muestra la organizacin del DNA en clulas eucariotas.

(Devlin, 2004)
33

Mientras que en las clulas eucariotas el DNA se encuentra asociado a varias protenas para formar la cromatina. En clulas que no se dividen esta tiene apariencia amorfa y se encuentra dispersa por el nucleo. Justo antes de la divisin celular (metafase) la cromatina se organiza en estructuras compactas llamadas cromosomas. Cada cromosoma posee un centrmero que constituye el lugar de anclaje para las protenas que unen el cromosoma al huso mittico. Los telomeros son los extremos se los cromosomas lineales. Los cromosomas tambin contienen las secuencias necesarias para el inicio de la replicacin del DNA. La enorme longitud del genoma de la mayora de los eucariotas hace necesaria la divisin de la informacin gentica en numerosos dominios independientes, esto es los cromosomas. El numero de cromosomas es caracterstico de cada especie las clulas humanas contiene 46 cromosomas (cromatidas) distribuidos en 23 pares. La longitud promedio del DNA de los cromosomas es de 1.3 x 108 pb o aproximadamente 5 cm. La organizacin de los cromosomas, que posibilita que el DNA a pueda alojarse dentro de un ncleo celular con un dimetro de 10 m requiere una razn de condensacin de ms de cinco rdenes de magnitud. La distribucin del DNA nuclear en 46 cromosomas aumenta la razn de condensacin hasta 105:1. (Devlin, 2004) c) Lamina nuclear La lmina nuclear, capa fibrosa de 10 a 15 nm en la que apoya la membrana interna, est formada por protenas del tipo de los filamentos intermedios, polmeros de lmina o laminina nuclear. Ellas se unen a las protenas integrales de membrana. La fosforilacin de las laminas provoca el desensamble de la lmina nuclear causando la ruptura de la envoltura al inicio de la divisin celular. La lmina nuclear confiere estabilidad mecnica a la envoltura nuclear. Adems, al interactuar con la cromatina participa en la determinacin de la organizacin tridimensional del ncleo interfsico. Si bien la formacin de la lmina no se requiere durante los pasos iniciales, la organizacin de la envoltura es indispensable para el crecimiento posterior y el mantenimiento de su integridad. Las lminas se incorporan luego que la cisterna perinuclear rodea al ADN y se inicia el transporte entre el ncleo y el citoplasma. La composicin de la lmina se basa en protenas llamadas laminas. Los tres tipos de laminas (A, B y C) estn codificados por 3 genes distintos. Las de tipo A y C se sintetizan a partir del mismo gen, llamado LMNA, por procesamiento alternativo dando lugar a cuatro subtipos: A, A()10, C1 y C2. Las laminas de tipo B estn codificadas por dos genes distintos: LMNB1 (laminas del subtipo B1) y LMNB2 (laminas de los subtipos B2 y B3,
34

tambin por procesamiento alternativo del gen). Todas las lminas presentan un dominio globular en su extremo C-terminal y otro en el N-terminal. A travs del C-terminal, excepto las laminas C, unen una molcula llamada farnesilo (proceso denominado farnesilacin) que permite el anclaje de las laminas a la membrana nuclear interna. Esta unin permite que se formen dmeros, luego tetrmeros, protofilamentos, filamentos y por ltimo el retculo que constituye la lmina nuclear.

Figura 27. Lamina nuclear.

d) poro nuclear La envoltura nuclear aparece atravesada de manera regular por perforaciones, los poros nucleares. Estos poros no son simples orificios, sino estructuras complejas acompaadas de una armazn de protenas, que facilitan a la vez que regulan los intercambios entre el ncleo y el citoplasma. Se llama complejo del poro a cada una de esas puertas de comunicacin. Por ah salen las molculas de ARNm producidas por la transcripcin, que deben ser ledas por los ribosomas del citoplasma. Por ah salen tambin los complejos de ARNr y protenas a partir de los cuales se ensamblan en el citoplasma los ribosomas. Por los poros entran al ncleo
las protenas, fabricadas en el citoplasma por los ribosomas, que cumplen su papel dentro del ncleo.

Poro nuclear

Figura 28. Poro nuclear

35

e) Nucleoplasma o carioplasma El nucleoplasma o carioplasma es el medio interno del ncleo celular, en el se encuentran las fibras de ADN, que asociadas con protenas denominadas histonas forman hebras llamadas cromatinas y ARN conocidos como nucleolos. Es uno de los tipos de protoplasma de la clula, est envuelto y separado del citoplasma, por la membrana nuclear o envoltura nuclear (NE). Tiene apariencia de lquido viscoso, que consiste en una emulsin coloidal muy fina que rodea y separa a la cromatina y al nucleolo. Ocupa todos los espacios del compartimiento intercromatnico, que est en continuidad con los poros nucleares (NPC). Se integra con grnulos de intercromatina y pericromatina, ribo-nucleoprotena y la matriz nuclear. Nucleoplasma o carioplasma

Figura 29. Nucleoplasma o carioplasma

f) Organizacin del DNA en el ncleo En caso del DNA en clulas eucariotas, por tener una longitud grande se requiere de una condensacin. Los primeros nivelas de empaquetamiento del DNA que conducen a la formacin de fibras de 30 nm se han estudiado extensamente. La primer fase de organizacin es la formacin de la estructura en collar de cuentas, que consiste en la unin del DNA con unas protenas muy bsicas conocidas como histonas, las cuales interaccionan fuertemente con el DNA, formando complejos muy estables. La disposicin en collar de cuentas se observa cuando la cromatina se somete a condiciones de baja fuerza inica y se examina al microscopio electrnico. Las cuantas formadas por DNA enrollado sobre las histonas, estn conectadas por DNA libre. (Devlin, 2004) g) Cromatina La cromatina es el conjunto de ADN, histonas y protenas no histnicas que se encuentra en el ncleo de las clulas eucariotas y que constituye el cromosoma de dichas clulas. Las
36

unidades bsicas de la cromatina son los nucleosomas. Estos se encuentran formados por aproximadamente 146 pares de bases de longitud (el nmero depende del organismo), asociados a un complejo especfico de 8 histonas nucleosmicas (octmero de histonas). Cada partcula tiene una forma de disco, con un dimetro de 11 nm y contiene dos copias de cada una de las 4 histonas H3, H4, H2A y H2B. Este octmero forma un ncleo proteico alrededor del que se enrolla la hlice de ADN (da aproximadamente 1,8 vueltas). Entre cada una de las asociaciones de ADN e histonas existe un ADN libre llamado ADN espaciador, de longitud variable entre 0 y 80 pares de nucletidos que garantiza flexibilidad a la fibra de cromatina. Este tipo de organizacin, permite un primer paso de compactacin del material gentico, y da lugar a una estructura parecida a un "collar de cuentas". Posteriormente, un segundo nivel de organizacin de orden superior lo constituye la "fibra de 30nm" compuestas por grupos de nucleosomas empaquetados uno sobre otros adoptando disposiciones regulares gracias a la accin de la histona H1. Finalmente contina el incremento del empaquetamiento del ADN hasta obtener los cromosomas que observamos en la metafase.

Figura 30. Cromatina

h) Cromtida La cromtida es una de las unidades longitudinales de un cromosoma duplicado, unida a su cromtida hermana por el centrmero, es decir, la cromtida es toda la parte a la derecha o a la izquierda del centrmero del cromosoma.

37

Figura 31. Ubicacin de la cromatida en el cromosoma..

i) Nucleosoma Es una estructura que constituye la unidad fundamental y esencial de cromatina, que es la forma de organizacin del ADN en las clulas eucariotas. Los nucleosomas estn formados por un ncleo proteico constituido por un octmero de histonas, protenas fuertemente bsicas y muy conservadas filogenticamente. El octmero est formado por dos molculas de cada una de las histonas H2a, H2b, H3 y H4. Vindolo en un microscopio electrnico, se ve con forma de rosario o "collar de perlas", ya que est formada por la doble hlice de ADN enrollada sobre sucesivos octmeros de histonas, existiendo entre dos nucleosomas consecutivos un fragmento de ADN, ADN espaciador. Cada octmero de histonas est rodeado por 1.7 vueltas de ADN bicatenario. Otra histona (H1) se extiende sobre la molcula de ADN fuera de la parte central del nucleosoma.

El enrollamiento de la molcula de ADN en torno al nucleosoma reduce hasta en 6 veces la longitud de la cadena de ADN.

Figura 32. Nucleosoma.

38

j) Nucleolo El nuclolo es una regin del nucleoplasma. formado por cromatina y visible al microscopio ptico. Las clulas de mamferos contienen desde 1 a 5 nuclolos. Sus dimensiones varan dependiendo de la actividad de la clula y puede llegar a ser muy grande, del orden de micrmetros de dimetro. Normalmente las clulas que estn realizando una gran sntesis proteica poseen nuclolos grandes. Durante la mitosis desaparece, permitiendo a la la cromatina que lo forma reorganizarse para constituir los cromosomas. En el nuclolo se dan procesos relacionados con la generacin de los ribosomas: sntesis y maduracin del ARN ribosmico (ARNr) y ensamblaje de las subunidades ribosmicas. Morfolgicamente el nuclolo contiene distintas regiones: el centro fibrilar, donde se encuentran los genes para el ARNr, el componente fibrilar denso que rodea al centro fibrilar, donde se produce la transcripcin activa de los genes ARNr, y el componente granular donde se ensamblan las subunidades ribosmicas.

(http://webs.uvigo.es/mmegias/5-celulas/4-nucleolo.php
Figura 33. Componentes del nuclolo

k) matriz nuclear Rede de fibras que se encuentran por todo o interior do ncleo celular e anlogo do citoesqueleto celular. Constituye la estructura compleja que proporciona el soporte fsico para los procesos de replicacin, procesamiento y transporte del RNA en eucariotas. l) ciclo celular El ciclo celular es un conjunto ordenado de sucesos que conducen al crecimiento de la clula y la divisin en dos clulas hijas. Las etapas, son G1-S-G2 y M. El estado G1 quiere decir "GAP 1"(Intervalo 1). El estado S representa la "Sntesis". Este es el estado cuando ocurre la replicacin del ADN. El estado G2 representa "GAP 2"(Intervalo 2). El estado M representa la fase M, y agrupa a la mitosis o meiosis (reparto de material gentico nuclear) y citocinesis (divisin del citoplasma). Las clulas que se encuentran en el ciclo celular se denominan proliferantes y las que se encuentran en fase G 0 se llaman clulas quiescentes. Todas las clulas se originan nicamente de otra existente con anterioridad. El
39

ciclo celular se inicia en el instante en que aparece una nueva clula, descendiente de otra que se divide, y termina en el momento en que dicha clula, por divisin subsiguiente, origina dos nuevas clulas hijas. Fases del ciclo celular La clula puede encontrarse en dos estados claramente diferenciados:3

El estado de no divisin o interfase. La clula realiza sus funciones especficas y, si est destinada a avanzar a la divisin celular, comienza por realizar la duplicacin de su ADN.

El estado de divisin, llamado fase M.

Interfase Es el perodo comprendido entre mitosis. Es la fase ms larga del ciclo celular, ocupando casi el 90% del ciclo, trascurre entre dos mitosis y comprende tres etapas:

Fase G1 (del ingls Growth o Gap 1): Es la primera fase del ciclo celular, en la que existe crecimiento celular con sntesis de protenas y de ARN. Es el perodo que trascurre entre el fin de una mitosis y el inicio de la sntesis de ADN. Tiene una duracin de entre 6 y 12 horas, y durante este tiempo la clula duplica su tamao y masa debido a la continua sntesis de todos sus componentes, como resultado de la expresin de los genes que codifican las protenas responsables de su fenotipo particular. En cuanto a carga gentica, en humanos (diploides) son 2n 2c.

Fase S (del ingls Synthesis): Es la segunda fase del ciclo, en la que se produce la replicacin o sntesis del ADN, como resultado cada cromosoma se duplica y queda formado por doscromtidas idnticas. Con la duplicacin del ADN, el ncleo contiene el doble de protenas nucleares y de ADN que al principio. Tiene una duracin de unas 1012 horas y ocupa alrededor de la mitad del tiempo que dura el ciclo celular en una clula de mamfero tpica.

Fase G2 (del ingls Growth o Gap 2): Es la tercera fase de crecimiento del ciclo celular en la que contina la sntesis de protenas y ARN. Al final de este perodo se observa al microscopio cambios en la estructura celular, que indican el principio de la divisin celular. Tiene una duracin entre 3 y 4 horas. Termina cuando la cromatina empieza a
40

condensarse al inicio de la mitosis. La carga gentica de humanos es 2n 4c, ya que se han duplicado el material gentico, teniendo ahora dos cromtidas cada uno. Fase M (mitosis y citocinesis) Es la divisin celular en la que una clula progenitora (clulas eucariotas, clulas somticas clulas comunes del cuerpo-) se divide en dos clulas hijas idnticas. Esta fase incluye la mitosis, a su vez dividida en: profase, metafase, anafase, telofase; y la citocinesis, que se inicia ya en la telofase mittica. Si el ciclo completo durara 24 horas, la fase M durara alrededor de media hora (30 minutos).

Figura 34. Fases del ciclo celular.

m) divisin celular mittica La mitosis es el proceso de divisin de las clulas somticas del organismo (clulas que no van a dar lugar a las clulas sexuales). Mediante el proceso de mitosis una clula se divide y forma dos clulas hijas idnticas entre ellas y con la misma informacin gentica que portaba la clula mittica (clula que sufre la mitosis). A continuacin, estas clulas hijas volvern a sufrir un proceso de mitosis dando lugar a nuevas clulas. En el caso de los organismos unicelulares este proceso es reproductivo ya que la divisin de cada clula da lugar a dos nuevos organismos. Sin embargo, en los pluricelulares son necesarias muchas secuencias de divisiones celulares para que se forme un nuevo individuo. Adems, en los organismos pluricelulares adultos este proceso es imprescindible para reemplazar las clulas perdidas por desgaste, deterioro o muerte celular programada. Este proceso consta de cinco etapas seguidas de la divisin de la membrana celular: 1. Interfase 2. Profase 3. Metafase 4. Anafase 5. Telofase 6. Citocinesis

41

Figura 35. Fases del proceso de divisin mittica.

n) meiosis La meiosis es un proceso en el que, a partir de una clula con un nmero diploide de cromosomas (2 n), se obtienen cuatro clulas hijas haploides (n), cada una con la mitad de cromosomas que la clula madre o inicial. Este tipo de divisin reduccional slo se da en la reproduccin sexual, y es necesario para evitar que el nmero de cromosomas se vaya duplicando en cada generacin. El proceso de gametognesis o formacin de gametos, se realiza mediando dos divisiones meiticas sucesivas: 1. Primera divisin meitica. una clula inicial o germinal diploide (2 n) se divide en dos clulas hijas haploides (n). 2. Segunda divisin meitica. Las dos clulas haploides (n) procedentes de la primera fase se dividen originando cada una de ellas dos clulas hijas haploides (n). Las fases de la meiosis son:
42

PRIMERA DIVISIN MEITICA: 1. Interfase o fase de reposo. En una clula en la que hay una masa de ADN procendente del padre y otra procedente de la madre se va a iniciar una meiosis. 2. Final de la interfase. Duplicacin del ADN. 3. Profase I A. Formacin de los cromosomas. 4. Profase I B. Entrecruzamiento. Los cromosomas homlogos intercambian sectores. El ncleo se rompe. 5. Metafase I. Aparece el huso acromtico. Los cromosomas se fijan por el centrmero a las fibras del huso. 6. Anafase I. Las fibras del huso se contraen separando los cromosomas y arrastrndolos hacia los polos celulares. 7. Telofase I. Se forman los ncleos y se originan dos clulas hijas. Los cromosomas liberan la cromatina. SEGUNDA DIVISIN MEITICA 8. Profase II. Se forman los cromosomas y se rompe el ncleo. 9. Metafase II. Los cromosomas se colocan en el centro celular y se fijan al huso acromtico. 10. Anafase II. Los cromosomas se separan y son llevados a los polos de la clula. 11. Telofase II. Se forman los ncleos. Los cromosomas se convierten en cromatina y se forman las clulas hijas, cada una con una informacin gentica distinta. En los individuos machos, la gametognesis recibe el nombre de espermatognesis y tiene lugar en los rganos reproductores masculinos. En los individuos hembras, la gametognesis recibe el nombre de ovognesis y se realiza en los rganos reproductores femeninos.

43

o) gen, funcin y composicin Un gen es un segmento corto de ADN. Los genes le dicen al cuerpo cmo producir protenas especficas. Hay aproximadamente 30,000 genes en cada clula del cuerpo humano. Juntos, estos genes constituyen el material hereditario para el cuerpo humano y la forma como funciona. La composicin gentica de una persona se llama genotipo. Los genes estn compuestos de ADN. Las hebras de ADN conforman parte de los cromosomas. Los cromosomas tienen pares apareados de una copia de un gen especfico. El gen se presenta en la misma posicin en cada cromosoma. Los rasgos genticos, como el color de los ojos, son dominantes o recesivos:

Los rasgos dominantes son controlados por un gen en el par de cromosomas. Los rasgos recesivos requieren que ambos genes en el par de genes trabajen juntos.

Muchas caractersticas personales, como la estatura, son determinadas por ms de un gen. Sin embargo, algunas enfermedades, como la anemia drepanoctica, pueden ser ocasionadas por un cambio en un solo gen.

44

Bibliografa

Calixto F. R., Herrera R. l., Hernndez G. V. D. (2004). Biologa 1. Editorial progreso. Campbell, N. A. (2007). Biologa. Editorial Mdica Panamericana. Argentina. Pp. 108 Devlin, M. T. (2004). Bioqumica. Libro de texto con aplicaciones clnicas. Cuarta edicin. Editorial Revert S. A. PP: 66-67 Freilfelder, D. (2003). Serie de biologa fundamental, tcnicas de bioqumica y biologa molecular. Editorail Reverte S. A. pp. 240-241. Garca, V. (2005). Introduccin a la microbiologa. Editorial UNED. Pp: 48. http://doctorapaez.blogspot.mx/2011/12/funciones-de-los-radicales-libres.html http://es.wikipedia.org/wiki/Esferoplasto http://es.wikipedia.org/wiki/Glioxisoma http://vicinv.ujaen.es/node/544 http://www.saludparati.com/radicaleslibres.htm http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/equipos.htm Jimnez, L. F. Merchant H. (2003). Biologa Celular y Molecular. Editorial Leticia Geona Figueroa. Pp: 612. Koolman Jan (2004). Bioqumica y texto Atlas. Editorial medica Panamericana. Argentina. Pp: 208 Lodish, H. (2006). Biologa Celular y molecular. Editorial Mdica Panamericana. 5ta edicin. Pp: 170-178

45

Miller, H. C., Palenik, CH. J. 2000 control de la infeccin y manejo de materiales peligrosos para el equipo de profesionales de salud dental. Segunda edicin. Editorial Harcourt. Pp: 10-11 Rivera, T. J. A, Cedillo, R. L. Ma. Vega, B. M. (2001). Micoplasma y su importancia mdica. Velez. A. H., Rojas, W. M., Borrero, R. J. Restrepo M. J. (2003) Fundamentos de medicina, Enfermedades infecciosas. Sexta edicin. Editorial: Fondo editorial CIB. Pp:382

46