Carlos Mario Orrego Vsquez. M.V., M.Sc.

Refugio Nacional de Vida Silvestre Ostional (RNVSO) Area de Conservacin Tempisque (ACT), Ministerio del Ambiente y Energia (Minae), Costa Rica E-Mail: carlosmarioo@hotmail.com, carlosmarioo1@yahoo.com.mx Tel: (506) 682 0400 / 686 4970 /841 2246 Fax: (506) 686 4969

NECROPSIAS EN TORTUGAS MARINAS

GENERALIDADES La necropsia como una tcnica ms a aplicarse en la vida silvestre, permite complementar los planes de manejo en cualquier especie de la fauna, ya que se constituye en una herramienta que facilita el seguimiento de la mortalidad, como un parmetro importante para entender mejor la dinmica de las poblaciones animales. Esta tcnica en las tortugas marinas ayudar a comprender las posibles causas naturales y antrpicas de la mortalidad en estos quelonios. El valor de la necropsia depender de lo rpido que sean los hallazgos de las carcasas para realizar dicha tcnica, debido a que la autolisis postmortem enmascara los resultados. Sin embargo, la determinacin del grado de descomposicin postmortem y los valores de esta tcnica son subjetivos y se aprenden a travs de la experiencia. Toda necropsia debe realizarse tan pronto como sea posible, ideal dentro de las primeras 24 horas despus de la muerte, 48 horas despus, nicamente bajo refrigeracin. Los animales pueden ser movidos del agua a un lugar fresco (Wolke y George 1981) En general, las causas de muerte de las tortugas marinas no puede ser diagnosticada solamente a partir de observaciones macroscpicas, excepto con algunas excepciones como signos obvios de traumas por heridas de bala, laceraciones severas, hemorragias masivas y decapitaciones, pero estos pueden tambin ser producidos postmortem. La determinacin de las causas de la muerte puede requerir de anlisis y examen histo-patolgicos, en otros casos, puede ser imposible porque las causas de muerte no han sido investigadas adecuadamente. Los tejidos deben ser remitidos al laboratorio tan pronto como sea posible (Wolke y George 1981) Muestras de sangre pueden refrigerarse pero no congelarse, para estudios de hematologa y qumica sangunea, deben tomarse antes de la muerte, las tomadas postmortem pueden ser para anlisis microbiolgico. Para toxicologa y virologa pueden ser congeladas, en toxicologa se recomienda colectar muestras de hgado, rin, cerebro, mdula espinal, grasa, msculo esqueltico y huevos, si estuvieran presentes (Wolke y George 1981) Para microbiologa pueden ser almacenadas en cajas de petri debidamente rotuladas para enviar al laboratorio. En casos de evaluacin de la exposicin a los contaminantes ambientales y sustancias txicas, las muestras a colectar seran hgado, msculo, hueso y contenido estomacal. Para examinar derivados de petrleo, hidrocarburos, las muestras pueden ser almacenadas en vidrio preferiblemente y no en plstico (Wolke y George 1981) Los manuales o guas para necropsia proveen metodologas que pueden ser aplicadas en campo fuera del laboratorio como primer paso en la evaluacin de las causas de mortalidad. Para la charla de hoy nos apoyaremos en el Manual descrito por Wolke y George 1981 y en Work 2000.

El contar con tal protocolo, conformado por una serie de aspectos y procedimientos estandarizados para ser aplicados en forma sistemtica y permanente a nivel Regional, constituir una valiosa herramienta que generar informacin uniforme y confiable sobre la dinmica poblacional y el tema de la mortalidad de las tortugas. 2 INSPECCION EXTERNA Determine: Peso Longitud del caparazn Ancho del caparazn Longitud del plastrn Especifique si las medidas se hacen en lnea recta o en curva. (Se prefiere la medida en lnea recta). Describa la condicin general del cuerpo: Esto refleja tanto el estado de nutricin como el de descomposicin La descomposicin o autlisis postmorten se reconoce por: Los cambios de color en la piel, La acumulacin de sangre en reas dependientes (rigor mortis, estado 1), La produccin de gas mal oliente (putrefaccin, estado 2). Luego de un corto tiempo despus de la muerte: La piel ventral se vuelve de rosada a prpura. Conforme los cambios de postmorten avanzan, se vern lneas francas de color prpuraverdoso en crculos alrededor del cuello y las extremidades. Descomposicin avanzada: La carne se desprende del sistema esqueltico. El cadver est inflado y al insertar un cuchillo escapa gas. En estos casos los mtodos de necropsia no tienen valor porque los cambios postmorten enmascaran los eventos antemorten. El valor de la necropsia es subjetiva y se aprende por experiencia!!! 1.- ESTADO NUTRICIONAL: Se determina por inspecciones internas y externas: Caquesia o enfermedad crnica > ojos y plastrn hundidos. Piel, caparazn, plastrn > cubiertos por un nmero anormal de percebes. Reducida masa muscular en el cuello y en las extremidades. EN CASOS EXTREMOS: La cresta supraoccipital de la parte trasera de la cabeza est salida agudamente y la caparazn parece muy grande para el animal.

Estos signos son vlidos slo si la tortuga est relativamente fresca y no ha experimentado una avanzada descomposicin. 3.- CABEZA: Inspeccione cuidadosamente en busca de: Traumas Hemorragias 4.- OJOS: Examine: Anormalidades, con especial atencin a la crnea y a la esclertica. 5.- CAVIDAD ORAL Y MEMBRANAS MUCOSAS: Examine si hay: Erosiones Trauma Percebes 6.- EXTREMIDADES: Inspeccione si se presentan: Lesiones Palpe para detectar: Fracturas 7.- AREA ANAL: Examine: Si hay protrusiones Si hay exudados La consistencia de la materia fecal (Coloque una muestra de materia fecal en un vial pequeo con formalina al 10%.) Cuando sospeche que hay lesiones: Haga raspaduras o tome impresiones, squelas al aire y envelas al laboratorio. Cuando haya parsitos: Remuvalos y colquelos en una disolucin de AFA para la posterior identificacin. 3 INSPECCION INTERNA: DISECCIN Un pequeo corte se hace entre el caparazn y el plastron, tratando de cortar con cuidado el cartlago. Se sigue el orden para las siguientes incisiones (A-D, Fig. 1), luego la incisin (F, Fig.2.), incisin (G-H, Fig. 2), incisin (I-J, Fig. 2), incisin (M, Fig. 2). Revise la posicin de los rganos (Fig.3). Si el estado de descomposicin ha progresado, la grasa cubre el corazn y el punto dorso medial de la escapula, podra ser de color rojo oscuro y gelatinoso. Con frecuencia la cavidad pleuroperitoneal estar llena con fluido. Este fluido oscurece los pulmones y el tracto urogenital y puede colarse a los pulmones si son cortados por accidente.

Por lo tanto, es importante que Usted: Remueva con frecuencia este fluido (anote en el cuaderno de registro el color), inclinando al animal hacia un lado. Si tiene acceso a agua, enjuague y vace la cavidad. Si ha progresado la descomposicin: La grasa sobre el corazn y el lado dorso-medial de la escpula ser negro-rojiza y gelatinosa. An ms, los rganos principales pierden su color natural y aparecen como si estuvieran cocidos a medias. La cavidad pleuroperitoneal podra contener grandes cantidades de fluido serosanguneo de color rojo oscuro. Si estos signos son severos, los tejidos suaves no son adecuados para llevar a cabo un examen histolgico y entonces no los guarde o recoja. Sin embargo, todava podra ser posible que se pueda reunir informacin de la anatoma gruesa y sus parmetros relacionados, tales como contenido intestinal, carga de parsitos, estudio de toxicologa y caractersticas del esqueleto. Las siguientes directrices de los principios bsicos de la diseccin han sido tomados de Olafson, reportados por Van Kruningen (1971) Examine in situ cada parte de los despojos. Luego remuvalos y examnelos. Una vez que un rgano es removido, disctelo totalmente y tome secciones antes de continuar con la diseccin gruesa. Examine los despojos de afuera hacia adentro y de ventral a dorsal.

Una posible seal de ahogamiento es la presencia de una persistente espuma espesa, blanca o ligeramente rosada. Esta espuma puede ser extrada de las ventanas de la nariz presionando el cuello. Tambin puede estar dentro de la trquea, los bronquios o en cortes de los pulmones. Los pulmones estn muy expandidos y contienen un fluido acuoso. Cuando son removidos y colocados en la mesa de la autopsia, los pulmones colapsan y el fluido correr libremente. Se encuentra vmito en la trquea y en los bronquios. tejidos a recolectar: parsitos y/o tumores externos, lengua, msculo esqueltico, esfago, estmago, hgado, vescula biliar, pncreas, duodeno, yeyuno, rea ileocecal, colon, bazo, traquea, pulmones, aorta y grandes vasos, aurcula del corazn, ventrculo del corazn, testculos, ovarios, vejiga, rin, recto, cloaca, cerebro, ojos. LISTA DE MATERIALES: Tijeras Etiquetas Bolsas o frascos Lpiz Cuchillo Guantes de hule Mango de bistur Agua

Formalina Sierra Papel Cmara de fotografa Pinzas de garra Pelculas papel y diapositivas Pinzas sin garra Formato de necropsia Marcador indeleble Tapabocas Tabla para cortar Cuchillas para bistur ALGUNAS RECOMENDACIONES PARA LA NECROPSIA: Usar un delantal o ropa que se puedas cambiar despus de la necropsia, guantes y tapabocas o mascarilla. Lavar las manos bien con agua y jabn, una vez has finalizado la prctica. Evite contacto directo con la formalina, puede generar irritacin a nivel de mucosas. En la medida de lo posible enterrar los restos de la necropsia. Describir las lesiones como se observen, no imaginar lo que no se puede ver a nivel macroscpico. Tomar cortes que no excedan los 2 cm., almacenarlos en 1 frasco grande boca ancha por cada tortuga procesada, para facilitar el manejo en el laboratorio. Cubrir con la formalina al 10% en la relacin, 1 parte de muestra por 9 partes de la formalina, para que se garantice una ptima absorcin en el tejido del preservante. En caso de parsitos almacenarlos en solucin AFA hasta cubrirlos unicamente, en un frasco pequeo debidamente rotulado. Tomar muestras de cada una de las partes listadas anteriormente, tengan o no caractersticas macroscpicas importantes, en caso de que tengas un hallazgo importante macroscpico, haz un corte que incluya tejido sano y tejido patolgico. Tomar fotografas o diapositivas de todo el proceso de la necropsia (antes, durante y despus).

PREPARACION DE LA FORMALINA 10% 1. Na2HPO4 (Fosfato de sodibasico): 6,5 g NaH2PO4, H20 (Fosfato de sodio monobasico): 4,0 g Agua corriente: 900 ml 37% formaldehdo: 100 ml 2. 37% Formaldehdo: 150 ml Agua de mar: 850 ml CUIDADO!! AL MANIPULAR LA FORMALINA SIEMPRE USAR GUANTES Y TAPABOCAS, EVITAR CONTACTO ES CANCERIGENO

FORMATO PARA NECROPSIA

Nombre de quien realiza la necropsia ------------------------------- Fecha: --------Playa: ---------------------------------------------- Hora: ------------------------------------------ESPECIE: 1. Dermochelys coriacea (baula) 2. Chelonia mydas agazzissi (negra) 3. Lepidochelys olivacea (lora) 4. Eretmochelys imbricata (carey) SEXO: EDAD: 1. Hembra --------------1. Neonatos ------2. Macho---------3. Adulto-----------

2.Juvenil ---------

LONGITUD: Largo Estndar Caparazn (LSC):-------------------------------------- Ancho Estndar Caparazn (ASC):-----------------------------------CONDICIN DE LA TORTUGA ENCONTRADA: 1. Moribunda ------- 2.Fresca ----------- 3. Moderadamente descompuesta --------4.Severamente descompuesta-----5. Carcasa seca -------------- 6.Esqueleto----------DISPOSICION FINAL: 1. Tirar a la playa o a las dunas----------- 2. Pintar y dejar en la playa--------3. Sin pintar y dejar en la playa----------- 4. Enterrar en la playa o fuera------5. Salvado todo el cuerpo o parte --------- 6. Viva, liberada--------ESTADO NUTRICIONAL: 1. Obesa------ 2. Normal------------3. Flaca---------

I. EXAMEN EXTERNO: N: Normales AN: Anormales Descripcin Comentarios: Incluya color, nmero, tamao, distribucin y textura de las lesiones. CABEZA: N: -------- AN: ---------------1. Herida por redes -------- 2.Mordiscos------ 3.Lnea o cuerda pesca------ 4. Papiloma------ 5. Herida por propelas------- Comentarios: OJOS: N: --------AN: ---------------Localizacin: 1.Derecho------- 2.Izquierdo------- 3.Ambos--------Nublado----------- Ulceras-------------Papiloma---------------Otros----------------Comentarios: DESCARGAS: N: --------- AN:------------Localizacin: Ocular-------------Nasal-------------Oral-------------------Ocular: Derecho------------Izquierdo---------Bilateral-----------Color:---------------------------------------------------Comentarios: EPIBIOTA: N:---------AN:------------1. Esponjas------ 2. Percebes-------- 3. Sanguijuelas------- 4.Otros-------Comentarios: ALETAS: N:---------AN:------------Traumas 1.Necrosis---------- 2.Herida por propelas------ 3.Herida por redes----------4.Mordiscos--------- 5.Papilomas------------- 6.Lnea o cuerda pesca ---7.Otros---------Regin: Aletas Anteriores--------------Aletas Posteriores----------------Comentarios:

CAPARAZON: N:---------AN:----------Traumas 1. Herida por propelas------ 2.Heridas punzantes--------- 3.Mordiscos------Comentarios: PLASTRON: N:---------AN:------------Traumas 1.Herida por propelas------ 2.Heridas punzantes--------Comentarios:

3.Mordiscos-------

CLOACA: N:---------AN:------------1.Hinchada------ 2.Ulceras------ 3.Prolapso------ 4.Papilomas-----5.Laceraciones-----Determine sexo: Cloaca mas larga que caparazn: S---------- No----------II. EXAMEN INTERNO A. SISTEMA MSCULO-ESQUELTICO ESQUELETO Y ARTICULACIONES : N:---------AN:------------1 Fracturas------------Donde?------------2 Dislocacin----------Donde?-------------3 Deformidades--------Donde?------------Comentarios: MUSCULATURA: N:---------AN:------------Caractersticas: 1. Abscesos-------- 2.Sangre Coagulada-------- 3.Necrosis---------4. Parsitos-------- 5.Quistes-------- 6.Edemas------ 7.Otros-----Comentarios: CAVIDAD Lquido acumulado:-------------ml. Color:------------------------------Caractersticas: 1. Claro---- 2.Turbio----- 3.Cogulos----- 4.Adhesiones-----5. Material caseoso----- 6.Otros-----Comentarios: PERITONEO Caractersticas: 1. Tumor----- 2.Hemorragias-------- 3.Abscesos------- 4.Congestin------5. Granulomas------- 6.Cogulos--------- 7.Parsitos (tremtodos en arterias mesentricas)-------------B. SISTEMA RESPIRATORIO TRAQUEA-BRONQUIOS: N:---------AN:------------Caractersticas Mucosa: 1. Blanca----- 2.Hemorrgica----- 3.Serosa----- 4.Congestionada --5.Ulceras----- 6.Laceraciones------- 7.Mucoide------- 8.Turbio------ 9.Otros-------Fluidos o Espumas:-------------------- Color:--------------------- Parsitos:----------------------Comentarios: PULMONES: N:---------AN:------------Caractersticas Color: -----------------------------------------

8.Otros--------

Localizacin: Derecho---------Izquierdo------------Ambos-----------1. Craneal------- 2.Caudal------- 3.Dorsal--------4. Ventral------- 5.Medial-------Distribucin: 1.Difusa--------- 2.Focal------- 3.Multifocal-------C. SISTEMA CARDIOVASCULAR SACO PERICARDIAL N:---------AN:------------Fluido ----------ml VENTRICULO: N:---------AN:------------1.Hemorragias-------- 2.Areas plidas------Comentarios: 3.Parsitos-------

BAZO: N:---------AN:------------Dimensiones---------cm*-------------cm 1. Absceso------- 2.Masas------3.Fibrosis-----Comentarios:

Friable-------- Color: -------------------

D. SITEMA GASTROINTESTINAL HIGADO: N:---------AN:------------Dimensiones---------cm*-------------cm Color: ------------------1. Abscesos-------- 2.Masas------- 3.Necrosis----- 4.Congestin------ 5.Quistes-------Severidad de las lesiones 1. Suave------2.Graso------ 3. Fracturado---- 4.Moderado-------5.Friable-----6.Parsitos-----Comentarios: CAVIDAD ORAL Y FARINGE N: ---------AN:------------Caractersticas 1. Ulceras----- 2.Parsitos----- 3.Fracturas------ 4.Cuerpos extraos-------5. Fluidos-----6.Percebes------- Congestin-------------Comentarios: ESFAGO: N:---------AN:------------Caractersticas 1. Dilatado----- 2.Con fluidos------ 3.Parsitos-----4. Cuerpos extraos-------- 5.Perforaciones------6.Otros----Mucosa: 1. Congestionado------ 2.Necrosis-------- 3.Ulceras-----4. Hemorragias-----5.Grueso--------Color: ------------------Comentarios: ESTMAGO: N: ---------AN: ------------Caractersticas 1. Sangre coagulada------- 2.Erosiones-------- 3.Grueso-------4. Rupturas-------Ulceras 1. Suave------ 2.Focal-------- 3.Severa-------- 4.Multifocal--------5. Extensiva-----Mucosa Color: ----------PNCREAS N:---------AN:------------Caractersticas

Severo---------

1.Necrosis--------- 2.Edema------- 3.Inflado-------Comentarios: INTESTINO DELGADO: N:---------AN:------------Caractersticas 1. Vaco-------2.Parsitos------ 3.Bilis------ Otros----Color: -----------------------1. Perforaciones-------- 2.Constriccin-------- 3.Masas-------- 4.Abscesos-------5. Otro-------Comentarios: COLON: N: ---------AN: ------------Caractersticas Color: -----------------------1. Vaco-------2.Perforaciones-------5. Con gas---------6. Sin Gas------7. Hemorragias------8.Parsitos--------

3.Masas------ 4.Abscesos---------9.Otros-------

E. SISTEMA URINARIO RIONES N:---------AN:------------Dimensiones---------cm*-------------cm Color: ------------------1. Abscesos---------- 2.Masas------3.Necrosis------- 4.Congestin-----5.Quistes-------- 6.Dilatado------- 7.Clculos---------Comentarios: VEJIGA N:---------AN:------------Caractersticas Color:-----------------------1.Vacio---------- 2.Ulcerado--------Comentarios:

3.Masas------

4.Engrosada----------5.Hemorrgica--------

F. SISTEMA REPRODUCTIVO GONADAS: N:---------AN:------------Sexo: 1. Masculino----------- 2. Femenino--------Caractersticas 1.Alargadas--------2.Masas------------Comentarios: OVIDUCTOS: N: ---------AN:------------Caractersticas 1.Alargadas--------2.Masas------------Comentarios:

3.Huevos------

4.Hemorrgica---------

G. SISTEMA NERVIOSO CENTRAL : N:---------AN:------------Lesiones: 1. Cerebro-------2.Medula espinal--------Caractersticas 1. Alargados--------2.Masas------------- 3.Edemas------4. Hemorrgico--------- 5.Abscesos--------- 6.Cogulos-----Comentarios: