CREATININA

10.007.00
FINALIDAD Kit destinado a la determinacin de la creatinina presente en el suero, plasma y orina. PRINCPIO DEL MTODO La creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato en medio alcalino originando un complejo de color rojo-amarillento. Se mide la velocidad de formacin de ese complejo utilizando una cintica de 2 puntos durante los perodos iniciales de la reaccin. COMPOSICIN DE LOS REACTIVOS cido pcrico 18 mmol/L. Hidrxido sdico 1,8 mmol/L, Fosfato de sodio 20 mmol/L. Azida sdica 0,095%; en concentracin de Creatinina equivalente a 2 mg/dL. La concentracin obtenida para este Patrn fue determinada usando el Patrn Primario Internacional NIST 914a. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD Estabilidad: Estable hasta la fecha de validez del kit que est impresa en el rtulo del envase. No usar reactivos cuya fecha de validez haya expirado. Conservar de 15 a 30 C. Los reactivos deben permanecer fuera de la temperatura especificada slo el tiempo necesario para la realizacin de los tests. No congelar y mantener al abrigo de la luz. MATERIAL NECESARIO NO PROVISTO Espectrofotmetro o fotmetro para lectura en 500 nm (490 - 510) con cubeta termostatizada. Bao de agua, termostatizado a 37 C. Pipetas de vidrio y/o automticas. Reloj o Cronmetro. Tubos de ensayo. CUIDADOS Y PRECAUCIONES El kit se destina slo para uso diagnstico in vitro. Las muestras a ser analizadas deben ser tratadas como material potencialmente infectivo. Utilizar los EPIs de acuerdo con las Buenas Prcticas de Laboratorio Clnico. Desechar las sobras de las reacciones de acuerdo con las Buenas Prcticas de Laboratorio Clnico (BPLC) y Programa de Gestin de Residuos de Servicio de Salud (PGRSS). Las informaciones de Descarte, Seguridad y Primeros Socorros estn descritas en la Ficha Individual de Seguridad de Productos Qumicos (FISPQ) de este producto, disponible en www.biotecnica.ind.br o por el telfono +55 (35)-3214-4646. No mezclar reactivos de lotes diferentes. No cambiar las tapas de los frascos de los reactivos, a fin de evitar contaminacin cruzada. No usar el reactivo cuando ste presente caracterstica visual en desacuerdo con el especificado en la FISPQ del producto. Evitar dejar los reactivos fuera de las condiciones de almacenamiento especificadas, cuando los mismos no estn en uso. Usar pipetas de vidrio y punteras desechables especficas para cada muestra, control, patrn/calibrador y reactivo. El nivel de agua del bao-mara debe ser superior al de los tubos de ensayo que contienen las reacciones. MUESTRA - PREPARO Y ESTABILIDAD Suero y plasma (heparina, citrato, EDTA, oxalato y fluoruro): La creatinina es estable por 4 das de 2 a 8 C. Orina: Utilizar muestra cogida en el perodo de 24 horas, no habiendo necesidad de aadir conservantes. - Mezclar cuidadosamente la orina, medir el volumen y separar una muestra alrededor de 20 mL. - Centrifugar por 10 minutos a 3000 rpm. - Diluir una alcuota de la orina centrifugada en la proporcin de 1:50 con agua purificada (cuando necesario, la dilucin de la orina deber ser alterada para obtenerse resultado dentro del intervalo operacional del mtodo). Volumen Reactivo Trabajo 1,0 mL Muestra o Patrn 100 L 3. Mezclar cuidadosamente e inserir en el puerta-cubetas termostatizado. 4. Medir la absorbancia a 500 nm (490 - 510) a los 30 seg. (A1) y a los 90 seg. (A2). PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIN/CLCULOS Clculo para Suero: Creatinina (mg/dL) = (A2 - A1 de la Muestra) x Concentracin Patrn (mg/dL) (A2 - A1 del Patrn) Ejemplo: Concentracin del Patrn = 2,0 mg/dL Absorbancia A1 de la Muestra = 0,137 Absorbancia A2 de la Muestra = 0,222 Absorbancia A1 del Patrn = 0,222 Absorbancia A2 del Patrn = 0,409 Creatinina (mg/dL) = (0,222 - 0,137) x 2 = 0,91 mg/dL (0,409 - 0,222) Con Factor de Calibracin: Factor de Calibracin = Concentracin Patrn (mg/dL) (A2 - A1 del Patrn) Creatinina (mg/dL) = (A2 - A1 de la Muestra) x Factor de Calibracin Ejemplo: Factor de Calibracin = 2 = 10,7 (0,409 - 0,222)

Creatinina (mg/dL) = (0,222 - 0,137) x 10,7 = 0,91 mg/dL Clculo para Orina: Orina (mg/24 horas) = *mg/dL x volumen urinario (em mL) 100 * valor corregido por el factor de dilucin. Creatinina en mg/kg peso/24 horas: Orina mg/kg peso /24 horas = Creatinina orina mg/ 24 horas Peso (kg) Depuracin de la Creatinina Endgena: Depuracin (mL/minuto) = U x VM S Donde: U = creatinina en la orina (mg/dL) - S = creatinina en el suero (mg/dL) VM = volumen minuto (Vol. Urinario de 24 h, en mL, dividido por 1440 minutos) 1440 minutos equivale a la cantidad de minutos en 24 horas. Atencin: La depuracin deber ser corregida para la superficie corporal del paciente. Clculo de la Superficie Corporal sin utilizacin del Nomograma: SC = P0,425 x A0,725 x 0,007184 Donde: SC = superficie corporal en m2 P = peso en Kg A = altura en cm Determinacin del Clearance: Clearance (mL/min/1,73 m2) = Depuracin(mL/min) x 1,73 Superficie corporal Ejemplo: Creatinina en la orina (mg/dL) = 120 Volumen de 24 horas = 1800 mL Creatinina en el suero (mg/dL) = 0,91 Volumen/minuto = 1800/1440 = 1,25 Peso = 70 kg Altura = 170 cm 2 Superficie corporal = 1,81 m Depuracin (mL/min) = 120 x 1,25 = 164,83 mL/min. 0,91 Depuracin (mL/min/1,73 m2) = 164,83 x 1,73 = 157,5 mL/min 1,81 A Biotcnica deja disponible en su sitio una planilla para clculo del Clearance. Acese: www.biotecnicaltda.ind.br SENSIBILIDAD Y LINEALIDAD - Sensibilidad Metodolgica: Calculado: 0,038 mg/dL Experimental: 0,041 mg/dL - Linealidad: 12 mg/dL. Para valores superiores, diluir la muestra con NaCl 150 mM (0,9%), realizar nueva dosificacin y multiplicar el resultado obtenido por el factor de dilucin. LIMITACIONES DE LA TCNICA Hemlisis, Ictericia y Lipemia - Hemoglobina > 180 mg/dL - Bilirrubina > 38 mg/dL - Triglicridos > 3500mg/dL CONTROL DE LA CALIDAD Todo laboratorio clnico debe mantener un programa de control interno de la calidad que defina claramente los objetivos, procedimientos, normas y criterios para lmites de tolerancia, acciones correctivas y registro de las actividades. Al mismo tiempo, debe ser mantenido un sistema definido para monitorear la variabilidad analtica que Revisin: 01 - 08/2011

La creatinina es estable por 4 das de 2 a 8 C. PROCEDIMIENTO TCNICO A) PREPARACIN DE LOS REACTIVOS Reactivo de trabajo Mezclar en la proporcin: 1 parte de Reactivo 1 + 1 parte del Reactivo 2. Mezclar suavemente. La estabilidad del reactivo de trabajo, es de 03 semanas, conservado en frasco plstico tapado y protegido de la luz en heladera a 2-8 C. B) PROCEDIMIENTO 1. Precalentar el Reactivo durante tres minutos a 37 C. 2. Pipetar en un tubo de ensayo:

BIOTCNICA IND.COM. LTDA. Rua Igncio Alvarenga n 96, Vila Vernica, Varginha MG BRASIL CEP: 37026-470 Tel/fax: +55 35 3214 4646 www.biotecnica.ind.br

ocurre en todo sistema de medicin. El uso de controles para avaluar la imprecisin de las determinaciones debe ser prctica rutinera en el laboratorio. Se sugiere usar un control en la faja de referencia o en el nivel de decisin y otro control con valor en otra faja de significado clnico. La aplicacin del sistema de reglas mltiplas de Westgard para avaluacin del estado de control tambin es recomendable. El laboratorio debe participar de programas de control externo de calidad a fin de verificar la exactitud de sus resultados. Se tiene como ejemplo los programas ofrecidos por la SBAC (Sociedade Brasileira de Anlises Clnicas) y SBPC (Sociedade Brasileira de Patologia Clnica). Para Calibracin y Control Interno de Calidad de Laboratorio se recomienda el uso del suero calibrador y de los sueros controles abajo: Suero Calibrador - Autocal H Suero Control Normal - Quantinorm Suero Control Patolgico - Quantialt VALORES DE REFERENCIA HOMBRES Suero o Plasma Orina
mg/dL 0,6 - 1,2 mol/L 53 - 97

aplicacin. As, para preparar reactivos y usar en las mediciones, el agua debe ser del Tipo II, con resistividad > 1 megaohms o conductividad < 1 micro siemens y concentracin de silicatos < 0,1 mg/L. Para el enjage inicial de la vidriara, el agua puede ser del Tipo III, con resistividad > 0,1 megahoms o conductividad < 10 micro siemens. En el enjage final, utilizar agua del Tipo II. Columna deionizadora con su capacidad saturada libera agua alcalina, varios iones y tambin substancias con gran poder de oxidacin o reduccin que deterioran los reactivos en pocos das o mismo horas, alterando de manera imprevisible los resultados. As, es fundamental establecer un programa de control de la calidad del agua. PRESENTACIONES Presentacin 1 R1 R2 STD R1 R2 STD 1 x 50 mL 1 x 50 mL 1 x 4 mL 1 x 250 mL 1 x 250 mL 1 x 4 mL 100 tests de 1 mL 40 cal de 100 L 500 tests de 1 mL 40 cal de 100 L

13.002.00 13.003.00 13.004.00 MUJERES

mg/dL 0,5 - 1,0 mol/L 44 - 80

Presentacin 2

mg/24 horas 1000 - 2000 800 - 1800

Creatinina en la Orina (mg/Kg/24horas) Nios 2 - 3 anos 6 - 22 Nios mayores de 3 anos 12 - 30 Adultos - Hombres 21 - 26 Adultos - Mujeres 16 - 22

Clearance (mL/minuto/1,73 m2) NIOS 70 a 140 Adulto HOMBRE 98 a 160 Adulto MUJER 95 a 150

Estos valores son nicamente para orientacin, siendo recomendable que cada laboratorio establezca su propio intervalo de referencia. Conversin para Unidad del Sistema Internacional (SI): mol/L Creatinina (mg/dL) x 88,4 = Creatinina (mol/L) CARACTERSTICAS DE DESEMPEO Repetibilidad La realizacin de 20 determinaciones de una misma muestra en un mismo da, con valores dentro de la faja de referencia mostr un Coeficiente de Variacin de 2,56%. Reproducibilidad La realizacin de 10 determinaciones de una misma muestra, analizada en das diferentes mostr un Coeficiente de Variacin de 2,92%. Especificidad Analtica La comparacin con un mtodo similar, ya validado, mostr un coeficiente de correlacin, r, igual a 0,999 a partir de muestras aleatorias obtenidas de pacientes de ambulatorio. La ecuacin de regresin obtenida fue Y = 1,0111 X - 0,0574. SIGNIFICACIN CLNICA CREATININA SRICA Se trata de un producto metablico formado por la descarboxilacin de la creatina-fosfato en el msculo, teniendo, por tanto, una relacin directa con la masa muscular. Hombres y atletas producen mayores cantidades de creatinina que nios, ancianos y mujeres en general. La disminucin de la masa muscular en el anciano debe ser considerado en la interpretacin de los resultados. La creatinina no es afectada normalmente por la dieta, pero, si cantidades excesivas de carnes son consumidas, los niveles sricos podrn sufrir aumento por un perodo de 48 horas. Con la reduccin del flujo sanguneo renal, la creatinina se eleva ms lentamente que la urea. La concentracin de creatinina solo se torna anormal cuando aproximadamente mitad o ms de nefronas hayan sido comprometidos. Niveles Aumentados Niveles Disminuidos Disminucin del flujo sanguneo renal: Baja estatura insuficiencia cardiaca congestiva, choque, deshidratacin Insuficiencia renal por decrecimos de la Desnutricin filtracin glomerular Obstruccin del trato urinario Disminucin de la masa muscular Intoxicacin por metanol Enfermedad heptica severa Terapia con metildopa, trimetoprim, hidantona, Embarazo cefalosporinas y cido ascrbico CREATININA URINARIA Es filtrada libremente por los glomrulos slo siendo reabsorbida en ciertas condiciones clnicas, como: diabetes melittus, insuficiencia cardiaca congestiva etc. La secrecin tubular de la creatinina puede ser inhibida por drogas como: cimetidina, trimetoprim y probenecide. Ejercicios severos y ingestin de altas cantidades de carne pueden causar aumentos significativos en la excrecin de creatinina, mientras la disminucin de la masa muscular en los ancianos provoca disminucin. La determinacin de la creatinina urinaria en mg/kg de peso es un parmetro indicativo del volumen correcto de la orina cogida en el perodo de 24 horas. Niveles Aumentados Niveles Disminuidos Adenoma hipofisario Distrofia muscular Diabetes mellitos Enfermedad muscular inflamatoria Enfermedades Enfermedad con disminucin de la masa infecciosas muscular Encefalitis Enfermedad renal avanzada Hipotiroidismo Hipertiroidismo - Anemia - leucemia OBSERVACIONES 1. La limpieza y secado adecuados del material usado son factores fundamentales para la estabilidad de los reactivos y obtencin de resultados correctos. El agua utilizada en la limpieza del material debe ser reciente y exenta de agentes contaminantes. La limpieza de la vidriara debe ser hecha con detergente neutro. El enjage debe ser exhaustivo siendo los ltimos con agua destilada o deionizada. 2. El agua utilizada en el laboratorio debe tener la calidad adecuada a cada

GARANTIA DE CALIDAD Antes de ser liberados para el consumo, todos los reactivos Biotcnica son testados por el Departamento de Control de Calidad. La calidad de los reactivos es asegurada hasta la fecha de validez mencionada en el envase de presentacin, desde que almacenados y transportados en las condiciones especificadas. Los datos relativos al Control de Calidad de este producto (lote impreso en las etiquetas de los frascos de reactivos) pueden ser solicitados en: sac@biotecnicaltda.com.br AUTOMACIN Este procedimiento es automatizado en la mayora de los analizadores. Los protocolos estn disponibles en www.biotecnica.ind.br SAC - SERVICIO DE ASISTENCIA AL CLIENTE Si hay dudas en la utilizacin del kit entrar en contacto con la Biotcnica a travs del telfono +55 35 3214 4646 o por el e-mail sac@biotecnicaltda.com.br REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
JAFF, M. Ueber den Niederschlag, welchen Pikrinsure in normalem Harn erzeugt und ber eine neue reaktion des kreatinins. Z. Physiol. Chem. v.10, p.391-400, 1886. FABINY, D. L.; ERTINGHAUSEN, G. Automated reaction-rate method for determination of serum creatinine with the CentrifiChem. Clin. Chem. v.17, p.696-700, 1971. BARTELS, H.; BHMER, M. Micro-determination of creatinine. Clin. Chim. Acta. v.32, p.81-85, 1971. YOUNG, D.S. Effects of drugs on clinical laboratory tests - vol. 2, 5 ed. Washington DC: AACC Press, 2000. WESTGARD, J. O. et al. A multi-rule shewhart chart quality control in clinical chemistry. Clin. Chem. v.27 p.493-501, 1981.

RESPONSABILIDAD TCNICA Dr. Gilson Srio Pizzo - CRF MG - 5310 MS 80027310193

TABLA DE SMBOLOS INTERNACIONALES SMBOLO IDIOMA

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