FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA DE QUIMICA LABORATORIO DE QUMICA APLICADA

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE LA CONCENTRACIN DEL COLESTEROL EN UNA SUSTANCIA PATRN INCOGNITA POR TRIPLICADO.
Se determin por medio del mtodo de espectrofotometra la concentracin del colesterol total en patrn de trabajo, dando como resultado la concentracin 205,00mg/dL, la desviacin relativa promedio 4ppmil, el coeficiente de variacin 0,6%, la desviacin estndar 1,25 y la incertidumbre 3. Se utiliz un espectrofotmetro marca Jenway 6320D. INTRODUCCIN: El colesterol es un componente importante de las membranas celulares1 es un lpido y un esterol, que fluye por el cuerpo por el torrente sanguneo, sin embargo el cuerpo empaqueta el colesterol y otros lpidos en pequeas partculas recubiertas de protenas, llamado lipoprotenas y de esta forma se mezcla bien con la sangre. Tiene 3 funciones principales2: ayuda a construir la pared celular externa, permite que el cuerpo produzca vitamina D y hormonas como el estrgeno y la testosterona, adems fabrica los cidos biliares que ayudan a digerir los alimentos en los intestinos. Sin el colesterol ninguna de estas funciones se podra llevar a cabo. Hay 2 tipos de lipoprotenas las de baja densidad (LDL) y las lipoprotenas de alta densidad (HDL). Las partculas LDL llevan el colesterol a las partes del cuerpo, sin embargo si hay mucha cantidad en el torrente sanguneo ests se depositan en las arterias obstruyndolas, esto podra ocasionar un infarto en el miocardio. Se puede reducir el nivel de LDL, ingiriendo menos grasas saturadas. Las HDL contienen muchas protenas, y su trabajo es absorber el colesterol sobrante de los tejidos y las clulas y lo devuelve al hgado que lo reabsorbe, se pueden aumentar su nivel realizando actividad fsica. Con la realizacin de esta prctica se pretende determinar por medio espectrofotometra la concentracin del colesterol total en un patrn trabajo con concentracin desconocida. SECCIN EXPERIMENTAL: PROCEDIMIENTO: Se realiz el experimento descrito en el Manual de Tcnicas de Laboratorio en Qumica Clnica3, sin modificacin
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Existe relacin entre el colesterol y las enfermedades cardiovasculares.

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Koolman, J. Bioqumica, texto y atlas: Ed 3. Edi. Mdica Panamericana: Madrid, Espaa, 2005, p172. 2 Mason W, Freeman, E. Colesterol. Editorial Paids: Barcelona, Espaa, 2008, p25.

Shoscinsky,K. Manual de Tcnicas de Laboratorio en Qumica ClnicaI. Catedra de Qumica Clnica. Universidad de Costa Rica: San Jos, p1-3.

alguna. RESULTADOS: Cuadro II. Clculos estadsticos obtenidos en la obtencin de la concentracin del colesterol. Dato Media Mediana Desviacin relativa promedio Coeficiente variacin Incertidumbre Desviacin estndar Valor 205,00 mg/dL 205,00 mg/dL 4 ppmil 0,6% 3 1,25

Absorbancia
Absorbancia 0.400 Absorbancia 0.300 0.200 0.100 0.000

620

580

590

600

610

630

Longitud de Onda (nm)

640

Figura 1. Espectro de absorcin realizada para obtener la longitud de onda de mayor absorcin.
0.350 0.300 Absorbancia 0.250 0.200 0.150 0.100 0.050 0.000 100 150 200 250 300 350 Concentracin (mg/dL) 400 50 y = 0.0008x - 0.029 R = 0.9727

DISCUSIN DE RESULTADOS: En la figura 1 se puede observar que a 625nm de longitud de Onda se encuentra el punto ms alto de absorbancia el cual fue de 0,305 despus de ese punto la absorbancia descendi. En la figura 2 se grfica la concentracin en mg/dL con respecto a la absorbancia, determinando la linealidad del mtodo con los instrumentos y los reactivos utilizados. En el cuadro I se resume la absorbancia y concentracin de 3 replicas tomadas durante el procedimiento. En el cuadro II, se muestra la concentracin promedio de colesterol total encontrada en el experimento, esta fue de 205mg/dL. Es deseable que una persona tenga un nivel de colesterol <200mg/dL4 de sangre, si se encuentra entre 200 y 239mg/dL est en un limite mximo, y ms de 240mg/dL 240 est en alto riesgo de padecer enfermedad. Si los niveles son altos es importante realizar una segunda prueba para
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Figura 2. Curva de calibracin realizada para obtener la concentracin del Colesterol en la sustancia incgnita. Cuadro I. Determinacin de la concentracin del patrn de trabajo del Colesterol. Absorbancia Incgnita (nm) 0,134 0,135 0,136 Concentracin Incgnita (mg/dL) 203,75 205,00 206,25

Replica 1 2 3

Williams, H. Nutricin para la salud, la condicin fsica y el deporte. Editorial Paidotribo: Barcelona Espaa, 2002, p162.

determinar los niveles de LDL y HDL en el paciente y de esta forma conocer el nivel de riesgo real y dar el tratamiento e indicaciones necesarias. Adems en el cuadro II, se pueden observar ms datos estadsticos donde se muestra la desviacin estndar de 1,25 medida del grado de proximidad de los datos en torno al valor de la media5, al ser una desviacin pequea indica que los datos estn agrupados alrededor de la media. La desviacin relativa promedio fue de 4ppmil y el coeficiente de variacin fue de 0,6% medida6 de variabilidad relativa que expresa la magnitud de la desviacin estndar como un porcentaje de la media, este indica la precisin del mtodo. Los datos obtenidos tambin demuestran la precisin del mtodo. CONCLUSIN: El colesterol es un componente importante de las membranas celulares que cumple varias funciones significativas. La espectrofotometra es un buen mtodo para determinar la concentracin de colesterol total. El experimento dio los siguientes resultados: La concentracin del colesterol total 205,00mg/dL, la desviacin relativa promedio 4ppmil, el coeficiente de variacin 0,6%, la desviacin estndar 1,25 y la incertidumbre 3.

Mongay, C. Quimiometra; Universidad de Valencia: Espaa, 2011, p27. 6 Araya, C. Estadstica para laboralista qumico, 1Ed; Universidad de Costa Rica: San Jos, Costa Rica, 2004, p23.