Fraccionamiento Granulomtrico de Materia orgnica de suelos bajo Pastura, Labranza Convencional y Siembra Directa

Publicado el: 12/06/2012 Calificacin: Autor: Cecilia Videla, Guillermo Studdert, Hernn Eduardo Echeverria (Unidad Integrada FCA-UNMdP - INTA, Balcarce, Argentina); Paulo CO Trivelin, Jos A Bendasolli (CENA - USP, Piracicaba-SP, Brasil) Introduccin La enorme complejidad de la materia orgnica (MO) y su importancia en la fertilidad del suelo han promovido una gran cantidad de estudios orientados a conocer su naturaleza y relaciones con los procesos productivos en sistemas agrcolas. Los fraccionamientos de la MO del suelo basados en fracciones definidas fsicamente se estn utilizando intensamente para interpretar la dinmica de la MO del suelo ya que se ha comprobado que los fraccionamientos qumicos tienen poca explicabilidad en estudios agronmicos porque tanto los cidos hmicos como los flvicos tienen tasas de reciclaje muy bajas (Anderson y Paul, 1984) por lo que no estn involucrados en los procesos a corto plazo que determinan la productividad de un cultivo. Tambin es desconocida la importancia de esas fracciones en los grandes procesos del suelo, tales como la agregacin y la mineralizacin de la MO (Feller y Beare, 1997). Las asociaciones de la MO con los constituyentes minerales del suelo, principalmente arcillas minerales son muy importantes, ya que regulan la mineralizacin y el almacenaje de MO (Greenland, 1965a, 1965b). Es reconocida la relacin entre la dinmica de la MO con la textura y la estructura del suelo, por lo cual, conseguir una cuantificacin de la MO ligada a las fracciones granulomtricas, permite mejorar el poder explicativo de los fraccionamientos. En los ltimos aos, el reconocimiento de los efectos perjudiciales del laboreo sobre las propiedades fsicas, qumicas y biolgicas del suelo, ha conducido a la adopcin creciente de prcticas de manejo que diminuyen el disturbio del suelo. En Argentina, la superficie bajo siembra directa (SD) alcanz 11 millones de ha en 2001 (AAPRESID, 2001); por lo que hay gran inters en estudios sobre dinmica de nutrientes bajo este sistema. La SD en general aumenta la cantidad de N activo del suelo y de C y N de la biomasa microbiana, produciendo una estratificacin de estas fracciones en el perfil del suelo (Doran, 1987; Follet y Schimel, 1989; Alvarez et al., 1998). La inclusin de pasturas en las rotaciones agrcolas produce recuperacin de suelos degradados por laboreo; en el SE de Buenos Aires se ha verificado que una pastura de 3 a 4 aos despus de un ciclo agrcola de 6 a 7, aumenta la MO hasta un nivel prximo al original (Studdert et al., 1997), aunque es posible que ya en los primeros aos de pastura ocurra un aumento en disponibilidad de N debido a la contribucin vegetal a fracciones lbiles fcilmente mineralizables. Los objetivos del presente trabajo fueron: a) ajustar la tcnica para fraccionar la materia orgnica y b) analizar el efecto de los sistemas de manejo del suelo (labranza convencional, siembra directa y pastura) sobre la distribucin por tamao de partculas de la materia orgnica de un suelo sometido durante 23 aos a laboreos de tipo convencional. Se presupone que los efectos del laboreo sobre la distribucin de la materia orgnica alteran slo las fracciones ms lbiles, es decir las de mayor tamao, ya que las menores estaran fsicamente protegidas (Kristensen et al., 2000) y por lo tanto, no resultaran alteradas por el manejo.

Materiales y Mtodos Sitio experimental. El experimento se realiz en el campo Experimental del INTA Balcarce (37 45 S, 58 18 W, 130 m sobre o nivel del mar, precipitacin media anual 870 mm, temperatura media anual 13,7C). El rea est ubicada sobre un complejo de suelos Paleudol petroclcico - Argiudol tpico, sometidos a rotaciones agrcolas bajo labranza convencional (arado de rejas, rastra de discos) durante 17 aos (desde 1976 a 1993). A partir de 1994 se instalaron tres manejos: Labranza Convencional (LC), Siembra Directa (SD) y pastura (P), en un diseo en bloques al azar con 3 repeticiones. Algunas propiedades del suelo son: pH (relacin -1 -1 -1 suelo:H2O 1: 2,5) 6,3, CIC 33,1 cmol(+) kg , arcilla 265 g kg , limo 337 g kg , P disponible, Bray y Kurtz I 22 -1 -1 -1 mg kg , C orgnico 27,1 g kg , N total 2,87 g kg .

En diciembre de 2000 se tomaron muestras de suelo compuestas en las parcelas LC, SD y P, de 0-10 y 1020 cm, se secaron al aire, se tamizaron por 2 mm y se almacenaron hasta su anlisis. Los contenidos de C -1 orgnico de estas muestras fueron 26,2, 26,8 y 28,2 g C kg , para LC, SD y P, respectivamente. Ajuste metodolgico. El principal objetivo metodolgico de un fraccionamiento fsico es alcanzar la mxima dispersin del suelo (separacin de arena, limo y arcilla) con una mnima alteracin de la MO asociada. Debido a que el mtodo utilizado en este trabajo fue inicialmente desarrollado para suelos tropicales (Gavinelli et al.,1995) y, a la naturaleza diferente de los agentes cementantes en suelos templados (mayor predominio de cationes bivalentes, Ca y Mg y arcillas de tipo 2:1), se decidi realizar algunas pruebas para confirmar si el mtodo era adecuado para dispersar las partculas sin desnaturalizar la MO. Para dicho ajuste, se utiliz el suelo del tratamiento Pastura (P) de 0-10 cm de profundidad. Para comprobar la calidad del fraccionamiento debida al agente dispersante, se compararon la distribucin de la fraccin mineral del suelo con la MO destruida por calentamiento con agua oxigenada (H 2O2) vs. a) dispersin en agua (30 g de suelo en 100 mL de agua desionizada) y b) dispersin con hexametafosfato de sodio (30 g de suelo en 100 mL de HMP 0,5 %). Todas las pruebas fueron realizadas por triplicado, agitando la suspensin a 50 rpm 2 h con 3 perlas de vidrio de 10 mm de dimetro. Antes de la agitacin, se dej la suspensin en refrigerador por 16 h para favorecer la posterior ruptura de agregados durante la agitacin como consecuencia de la contraccin ocasionada por la baja temperatura. Despus de la agitacin, la suspensin se tamiz por 200 y 50 m y se lav con pulverizador de gota fina con agua desionizada. La fraccin > 200 m fue separada en liviana (L) y pesada (P) por flotacin en agua. El suelo que pas por la malla de 50 m fue sometido a ultrasonido durante 4 a 8 m. La duracin del tratamiento fue regulada para alcanzar una dispersin adecuada (verificada por observacin al microscopio ptico). Posteriormente, la suspensin fue tamizada por 20 m, secada hasta peso constante a 60C en estufa con circulacin de aire, pesada y molida. En cada fraccin separada fue determinado C total (como las muestras no contenan CaCO3, C total se considera igual al C orgnico), N total 13 y d C en un espectrmetro de masas Europa Scientific Ltda. (Krewe, UK) acoplado a un analizador de C y N. El d C es una expresin de la abundancia natural de un istopo relativa a un material de referencia del laboratorio calibrado contra un patrn internacional; se expresa en unidades por mil () y se calcula a travs de la siguiente ecuacin: d C = 1000 (Rmuestra - Restndar) / Restndar donde: Rmuestra es la relacin del istopo pesado ( C) al liviano ( C) medido en la muestra y Restndar es la relacin equivalente para el estndar (carbonato fsil Bellemnitella american de la formacin Peedee de Carolina del sur, USA, abreviado a PDB) (Boutton, 1996). Existe una discriminacin isotpica de las plantas al CO2 durante la fotosntesis, debida a las propiedades bioqumicas de las enzimas que fijan C y al proceso de difusin que controla la entrada de CO2 a las hojas. Esta discriminacin es variable entre las plantas terrestres, las que se agrupan en 3 tipos de ciclos fotosintticos (C 3, C4 o CAM). Esta diferencia es mucho mayor que los pequeos cambios que ocurren durante la descomposicin de la MO en el suelo, por lo que el C orgnico retiene la marcacin de la vegetacin que le dio origen, permitiendo conocer y datar cambios en la vegetacin (Balesdent y Mariotti, 1996). Fraccionamiento de las muestras. Las muestras de las parcelas bajo P, LC y SD, de las profundidades de 0-10 y 10-20 cm fueron fraccionadas segn los resultados del ajuste anteriormente descripto. Se pesaron 30 g de suelo seco al aire y se tamizaron por 2 mm, se dejaron 16 h en heladera con 100 mL HMP 0,5 %. Se agitaron 2 h a 50 rpm y posteriormente se tamizaron po r 200 y 50 m. Las fracciones retenidas en cada tamiz fueron lavadas y secadas en estufa con circulacin de aire a 60C. La fraccin menor de 50 m fue sometida a ultrasonido y posteriormente tamizada por 20 m. Despus de secadas, las fracciones fueron pe sadas y molidas para la determinacin de C y N total con un analizador de C y N ANCA -SL acoplado a un espectrmetro de masas Europa Scientific Ltda. (Krewe, UK). Las fracciones de suelo fueron expresadas en -1 -3 Mg ha , utilizando densidades aparentes de 1,10, 1,19, 1,27 Mg m de 0-10 cm y de 1,12, 1,16, 1,25 Mg m 3 para P, SD y LC de10-20 cm, respectivamente, las que fueron medidas por el mtodo del cilindro. Se separaron las siguientes fracciones: >200L: fraccin retenida en el tamiz de 200 m y separada por flotacin en agua, constituida fundamentalmente por restos de races y plantas, >200P: fraccin retenida en el tamiz de 200 m y que sediment al suspenderse en agua, constituida fundamentalmente por partculas de arena,
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200-50L: fraccin retenida en el tamiz de 50 m y separada por flotacin en agua, constituida fundamentalmente por material orgnico que no es reconocible al microscopio ptico, 200-50P: fraccin retenida en el tamiz de 50 m y que sedimenta rpidamente al suspenderse en agua, de naturaleza organo-mineral, 50-20: fraccin retenida en el tamiz de 20 m despus de sometida a ultrasonido a 240 watts de potencia, tambin de naturaleza organo-mineral, <20: fraccin que pas por el tamiz de 20 m y que incluye partculas minerales de tamao limo y arcilla, microagregados organominerales muy estables y materia orgnica amorfa, humificada y fuertemente ligada a las partculas minerales. Resultados y discusin Ajuste metodolgico. La destruccin de MO con H2O2 para obtener las fracciones minerales en cada tamao granulomtrico no fue completamente efectiva, ya que se observ que en la fraccin <20 m quedaron pequeas cantidades de C (Fig. 1). Es conocido que la materia orgnica que est formando microagregados con coloides inorgnicos est muy protegida y por esto es menos oxidada por H 2O2, pero an no se conoce el significado biolgico de esta susceptibilidad a la oxidacin con H 2O2 (Van Veen y Kuikman, 1990). Se considera que esta materia orgnica es altamente resistente al ataque de los microorganismos y, por lo tanto, su aporte de nutrientes por mineralizacin es pequeo. Asimismo, no es esperable que estas fracciones sean alteradas por el manejo del suelo, por lo que igualmente se utilizaron los datos de esta distribucin granulomtrica para verificar la eficiencia de recuperacin de los mtodos de fraccionamiento examinados.

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Figura 1. Distribucin de la masa, nitrgeno y carbono total en las fracciones despus de la destruccin de la materia orgnica con H2O2. Las recuperaciones acumuladas de masa de suelo, N y C fueron satisfactorias en general, pero el tratamiento dispersado en agua produjo las mayores recuperaciones (Tabla 1). El tratamiento con HMP tuvo mayor variabilidad que el tratamiento con agua, principalmente en los valores de C y N total, lo que podra relacionarse a las bajas concentraciones de N y C en algunas fracciones separadas o an a la posibilidad de prdidas de N por volatilizacin de NH3 originadas en el aumento de pH ocasionado por el HMP.

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Con H2O no se alcanzaron niveles adecuados de dispersin, en todas las fracciones, excepto en la de 50-20mm, se observaron diferencias significativas en la distribucin de la fraccin mineral con respecto al suelo con la materia orgnica destruida (Fig. 2) obtenindose un coeficiente de correlacin relativamente bajo (r=0,46).
Con H2O como dispersante, se observ que una gran masa de suelo de las fracciones >200, 200-50 y 5020mm no fue dispersada, por lo que se encontraron mayores masas en comparacin con el suelo con la MO destruida con H2O2, mientras que la fraccin <20 mm fue subestimada, ya que parte de ella qued formando agregados de mayor tamao.

Figura 2.Distribucin de la masa de la fraccin mineral del suelo con la materia orgnica destruida (H2O2), y los dispersos con agua (H2O) y hexametafosfato de sodio (HMP). Las letras indican diferencias significativas entre tratamientos a nivel p<0,005, para cada tamao de fraccin. HMP consigui dispersar adecuadamente los agregados, lo que se comprueba a travs de la correlacin de masas de la fraccin mineral con este mtodo y la de aqul con la MO destruida con H2O2 (r=0.97), y se traduce en ausencia de diferencias entre las fracciones minerales de estos dos tratamientos (Fig. 2).
Al analizar la distribucin de C y N en las fracciones del suelo dispersado con HMP, se observa una gran cantidad de C y N en las fracciones de menor tamao. El 72 % del N se encuentra en la fraccin <20 m, en cuanto que el C se acumula tambin en la fraccin entre 200-50 m (Fig. 3). Esta gran concentracin de N justifica las bajas tasas de mineralizacin de estos suelos, ya que la MO ligada a fracciones de tamao limo y arcilla constituye complejos altamente humificados, difciles de mineralizar (Edwards yBremner, 1967).

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Figura 3. Distribucin del nitrgeno, carbono y 13C en las fracciones del suelo dispersado con HMP. Para el suelo disperso con HMP se encontraron 13C prximos a 20 en la fraccin <20 m y de 27 en la fraccin ms gruesa. El 13C de la fraccin <20 m es similar a los valores caractersticos de estos suelos en la condicin original, ya que fueron desarrollados bajo una vegetacin de pradera mezcla de especies C3 y C4 (Andriulo, 1995). La disminucin de 13C con el aumento del tamao de las fracciones, es un reflejo de la historia agrcola del suelo, con la inclusin de una mayor proporcin de cultivos de especies de metabolismo C3 como trigo, girasol, soja, las que discriminan en contra del 13CO2 (Boutton, 1996). En base a los resultados anteriores: niveles de recuperacin de masa, C y N dentro del rango aceptable (Gavinelli et al., 1995) y distribucin de fraccin mineral con buena correlacin con la distribucin del suelo con MO destruida con H2O2, se considera que el mtodo de dispersin con HMP es adecuado para el fraccionamiento granulomtrico de un suelo templado, por lo que se realizaron los fraccionamientos de las muestras con este agente dispersante. Fraccionamiento de las muestras. La distribucin de la masa de suelo present grandes variaciones en respuesta al manejo al que fue sometido el suelo en las fracciones de mayor contenido orgnico: >200L y 200-50L, tanto de 0-10 como de 10-20 cm (Fig. 4). Esta diferencia en masa se debe a acumulacin de MO. En 6 aos desde el comienzo del experimento, P produjo una acumulacin de MO, principalmente en las fracciones de

mayor tamao, mientras que SD mostr una tendencia similar, aunque con valores menores y no significativos estadsticamente.
P present fracciones livianas en los tamaos >200 y 200-50 mayores que LC y SD de 0-10 cm, mientras que de 10-20 cm estas diferencias no fueron significativas, y hubo una tendencia a mayor acumulacin de MO en LC que en SD (Fig. 4). Las fracciones >200P y 200-50P, constituidas principalmente por minerales, no tuvieron respuesta al manejo, como era de esperar ya que el manejo no altera la composicin de los minerales del suelo. En las fracciones 50-20 y <20 m SD present diferencias significativas con respecto a P, tratndose de fracciones organo-minerales donde se encontrara principalmente materia orgnica altamente humificada y resistente a la degradacin (Tisdall y Oades, 1982) por lo que es difcil comprender el motivo de estas diferencias originadas en el manejo del suelo en tan corto perodo de tiempo. En la profundidad de 10-20 cm, las diferencias fueron menores entre tratamientos, slo en la fraccin 200-50L aparecieron diferencias a favor de P (Fig. 4). De 0-10 cm, P present mayor contenido de C y N que SD y LC en las fracciones >200L y 200-50L, y de N en la fraccin menor que 20 m, no habiendo diferencias entre SD y LC (Tabla 2). Las fracciones >200P y 20013 50P, constituidas principalmente por fraccin mineral, no presentaron diferencias en C, N ni en C. Slo en 13 la fraccin 200-50L el tratamiento P present un C ms negativo que SD y LC, seguramente como consecuencia de la composicin botnica de P, con predominio de Festuca arundincea y Trifolium repens, ambas especies con metabolismo C3 (Tabla 2). De 10-20 cm las fracciones pesadas (>200 y 200-50) no presentaron diferencias en ninguna de las variables. Las relaciones C/N fueron ms altas en las fracciones de mayor tamao, disminuyendo hacia las de menor tamao, pero no se detectaron diferencias originadas en los tratamientos de manejo en ninguna fraccin.

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Figura 4: Distribucin de la masa de suelo despus del fraccionamiento en los tratamientos P, LC y SD a la profundidad de a) 0-10 cm y b) 10-20 cm.

Tabla 2. Carbono, nitrgeno, 13C y relacin C/N en las fracciones granulomtricas de 010 cm de un suelo sometido a diferentes manejos (P= pastura, LC= labranza convencional y SD= siembra directa). Las letras minsculas indican diferencias significativas a nivel P0,05, segn test de Tukey n=3).

Las grandes cantidades de N y C encontradas en las fracciones <50 m, en todos los tratamientos de manejo, entre 85 y 93% del C y entre 89 y 93% del N, las que poseen MO amorfa, altamente humificada y fuertemente ligada a las arcillas, con tiempos de reciclaje muy lentos (entre 20 y 40% cada 20 aos) (Feller, 1994) explican la respuesta a fertilizacin nitrogenada habitualmente encontrada en estos suelos a pesar de sus aparentemente altos contenidos de MO y Nya que el aporte por mineralizacin es bajo para los niveles de potencial de rendimiento de los hbridos y variedades cultivadas en la actualidad. Las menores proporciones de C y N en la fracciones <50 m se encontraron en P, dato verificado a travs de las mayores tasas de mineralizacin bruta del N en este tratamiento (Videla et al., 2002). Incrementos en el C orgnico de fracciones leve, media y pesada (fraccionamiento densimtrico) bajo pastura en comparacin con el mismo suelo bajo SD y LC fueron verificados tambin en suelos similares a los del presente experimento, aunque las mayores diferencias ocurrieron en las fracciones media y leve, lo que explicara la mayor mineralizacin de C encontrada (Alvarez et al., 1998). Despus de 6 aos de implementacin de este experimento, no se observaron diferencias estadsticamente significativas entre LC y SD, aunque s una tendencia a que SD acumule ms C y N en las fracciones livianas. Esa tendencia, implicara una mayor disponibilidad de la MOen las fracciones ms fcilmente mineralizables, como se puede comprobar por las diferencias en mineralizacin bruta entre SD y LC (Videla, et al., 2002). Es posible que las menores temperaturas habitualmente encontradas bajoSD respecto a LC, favorezcan el secuestro de C por parte de SD, aunque en los primeros aos de implementacin del

sistema sean pequeas y no suficientes para ser detectadas por los anlisis estadsticos.

Conclusiones El mtodo de Gavinelli et al., (1995) resulta adecuado tambin para fraccionar suelos templados. A los 6 aos de la implantacin de una pastura despus de 17 aos de ciclos agrcolas bajo labranza convencional, se observa una importante recuperacin de la MO del suelo, fundamentalmente en las fracciones de mayor tamao (>200 y de 200-50m), mientras que la siembra directa slo muestra una tendencia en este sentido.

Agradecimientos Los autores agradecen a la Sra. Sandra M. Nicoleti del Laboratorio de Biogeoqumica CENA-USP por su colaboracin en el fraccionamiento granulomtrico. Este trabajo fue financiado con fondos de los proyectos U.N.MdP (15/A107) y Fundacin Antorchas-Vite (13816-5). La primera autora es becaria del convenio CAPES (Brasil) SPU (Argentina).
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