PROCESOS BIOLGICOS

ING. JIMY OBLITAS

Reacciones Biolgicas
P
i
= Producto i (extracelular)
P
i
= Producto i (extracelular)
2
S
i
= Sustrato i (extracelular)
s
i
= Sustrato i (intracelular)
p
i
= Producto i (intracelular)
X
i
= Biomasa (protenas,
DNA, lpidos, etc.)
Modelos No
Estructurados
Modelos
Estructurados
No segregado "CAJA NEGRA"
Segregado CASO REAL
S
i
= Sustrato i (extracelular)
X= Biomasa (composicin nica)
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
o
1
S
1
+o
2
S
2
+o
3
S
3
+ ... X + |
1
P
1
+ |
2
P
2
+ |
3
P
3
+...
P
i
= Producto i (extracelular)
|
i
= coeficientes estequiomtricos de los P
i
, mol
i
-
El signo de los coeficientes estequiomtricos de los sustratos se asume negativo
+
El signo de los coef. esteq.de los productos y de la biomasa se asume positivo
3
S
i
= Sustrato i (extracelular)
X= Biomasa (composicin nica)
o
i
= coeficientes estequiomtricos de los S
i
, mol
i
= coeficiente estequiomtrico de X, mol
x
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
o
1
S
1
+o
2
S
2
+o
3
S
3
+ ... + |
1
P
1
+ |
2
P
2
+ |
3
P
3
+ ... X
o
2
o
3
|
1
|
2
|
3
S
1
+ S
2
+
S
3
+ ...
o
X + P +
o
1
P
2
+ P
3
+...
o o o o
1 1 1 1 1 1
S
1
+ Y
S S
S
2
+ Y
S S
S
3
+ ... Y
S
X + Y
S P
P
1
+ Y
S P
P
2
+ Y
S P
+... P
3
X
1 2 1 3 1 1 1 1 2 1 3
Y: Coeficiente de Rendimiento
Y
ij
: Moles de la especie i / moles de la especie j
1
Y
ij
=
Y
ji
4
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Relacin entre velocidades de reaccin expresadas en
funcin de distintas especies
S
1
+ Y
S S
S
2
+ Y
S S
S
3
+ ... Y
S
X + Y
S P
P
1
+ Y
S P
P
2
+ Y
S P
P
3
+...
X
1 2 1 3 1 1 1 1 2 1 3
Reaccin nica nica velocidad de reaccin (r)
En el balance de masa por componente usamos r
j
!!
QUE RELACIN EXISTE ENTRE LAS r
j
??
r
s
1
r
s
i
r
P
i
r
X
r = = = = X s
1
x s
1

1

i

i
P
i
s
1
P
i
s
1
5
r
s
i
= Y
s
1
s
i
r
s
1
r = Y r
r = Y r
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Unidades y Signos
Recordemos: r
j
(mol
j
/ litro min)
-
+ +
= Y
s s
=
o
r
s
r
s
1
o
1 1 1
+
r
P
= Y
s P
r
s
=
o
1
6
|
i
i 1 i 1
1
mol P
i
=
mol P
i
l min mol S
1
r
s
mol S
1
l min

r
X
= Y
s X
r
s
=
1
mol X
=
mol X
l min mol S
1
r
s
mol S
1
l min
o
i
i 1 i 1
1
mol S
i
=
mol S
i
l min mol S
1
r
s
mol S
1
l min
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Unidades y Signos. BIOMASA
+
Velocidad de crecimiento de biomasa
comnmente conocida:
1
1
(h
-1
); (min
-1
)
X

X = Y
s
r
s
=
o
r
s
X
1 1 1
1
mol X mol X mol S
1
=
l min mol S
1
l min 7
r = X
mol X
=
1
l min min
mol X
l
r = Y r =

X s
1
X s
1
o
mol X
=
mol X
l min mol S
1
r
s
mol S
1
l min
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Relaciones de velocidades de reaccin
Para qu me sirve conocer las relaciones
velocidades?:
entre distintas
Conociendo la velocidad de reaccin de un
componente, puedo estimar la de las dems
especies que intervienen en la reaccin
8
Determinacin de los coeficientes estequiomtricos.
El primer paso es formular la reaccin. Debo conocer cuales son los sustratos, cuales son
los productos y la composicin de la biomasa (en base seca). Por ejemplo:
o
1
C
6
H
12
O
6
+ o
2
O
2
+ o
3
NH
3
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ |
1
CO
2
+ |
2
H
2
O
BIOMASA
Sacchromyces
cerevisae
PRODUCTOS
SUSTRATOS
9
FC, glucosa FO, Oxgeno FN, amonaco
gaseoso
Coeficientes a determinar!
Composicin de Biomasa (base seca).
Microorganismo Composicin elemental
Candida utilis
Klebsiella aerogenes
Saccharomyces cerevisiae
Escherichia coli
Pseudomonas fluorescens
Aerobacter aerogenes
Penicillium chrysogemun
Aspergillus niger
Promedio
CH
1.83
O
0.46
N
0.19
CH
1.75
O
0.43
N
0.22
CH
1.82
O
0.58
N
0.16
CH
1.94
O
0.52
N
0.25
P
0.025
CH
1.93
O
0.55
N
0.25
P
0.021
CH
1.83
O
0.55
N
0.26
P
0.024
CH
1.64
O
0.52
N
0.16
CH
1.72
O
0.55
N
0.17
CH
1.8
O
0.5
N
0.2
Composicinrazonable; siempre y cuando no haya
limitaciones extremas de la FN
10
Habitualmente se determinan los
porcentajes de C, H, N y las cenizas
(que contienen P y S); el contenido
de oxgeno se evala por diferencia.
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Determinacin de los coeficientes estequiomtricos.
Balances Elementales
o
1
C
6
H
12
O
6
+ o
2
O
2
+ o
3
NH
3
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ |
1
CO
2
+ |
2
H
2
O
Paso 1. Divido por o
1
C
6
H
12
O
6
+ Y
S1S2
O
2
+ Y
S1S3
NH
3
Y
S1X
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ Y
S1P1
CO
2
+ Y
S1P2
H
2
O
Paso 2. Planteo los balances por componentes C, H, O y N
Balance
Balance
Balance
Balance
de
de
de
de
C
O
H
N
6+Y
S1X
+ Y
S1P1
=0
6+ 2Y
S1S2
+0.46Y
S1X
+ 2Y
S1P1
Y
S1P2
=0 +
12+3Y
S1S3
+1.70 Y
S1X
+2Y
S1P2
=0
Y
S1S3
+ 0.17Y
S1X
=0
4 ecuaciones y 5 incgnitas. NO PUEDE RESOLVERSE!
Se necesita obtener al menos un rendimiento experimental
11
Determinacin de los coeficientes estequiomtricos.
Supongamos que es posible medir el coeficiente de respiracin o respiratory
quotient (RQ). Como expresamos el RQ?
o
1
C
6
H
12
O
6
+ o
2
O
2
+ o
3
NH
3
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ |
1
|
1
CO
2
+ |
2
H
2
O
|
1
o
1
o
2
Y
S1P1
RQ = -1.033 = = =
o
2
Y
S1S 2
o
1
Balance
Balance
Balance
Balance
Info Exp
de
de
de
de
C
O
H
N
6+Y
S1X
+ Y
S1P1
=0
6+ 2Y
S1S2
+0.46Y
S1X
+ 2Y
S1P1
Y
S1P2
=0 +
12+3Y
S1S3
+1.70 Y
S1X
+2Y
S1P2
=0
Y
S1S3
Y
S1P1
+ 0.17Y
S1X
=0
+ 1.033Y
S1S2
=0
12
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Determinacin de los coeficientes estequiomtricos.
Supongamos que es posible medir el coeficiente de respiracin o respiratory
quotient (RQ). Como expresamos el RQ?
o
1
C
6
H
12
O
6
+ o
2
O
2
+ o
3
NH
3
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ |
1
|
1
CO
2
+ |
2
H
2
O
|
1
o
1
o
2
Y
S1P1
RQ = -1.033 = = =
o
2
Y
S1S 2
o
1
Balance
Balance
Balance
Balance
Info Exp
de
de
de
de
C
O
H
N
6+Y
S1X
+ Y
S1P1
=0
6+ 2Y
S1S2
+0.46Y
S1X
+ 2Y
S1P1
Y
S1P2
=0 +
12+3Y
S1S3
+1.70 Y
S1X
+2Y
S1P2
=0
Y
S1S3
Y
S1P1
+ 0.17Y
S1X
=0
+ 1.033Y
S1S2
=0
13
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Determinacin de los coeficientes estequiomtricos.
Balance de
Balance de
Info Exp
C
N
6+Y
S1X
+ Y
S1P1
=0
Y
S1P1
=-6- Y
S1X
=-4.0728
Y
S1S3
Y
S1P1
+ 0.17Y
S1X
=0
+ 1.033Y
S1S2
=0
Y
S1S3
=-0.17Y
S1X
=+0.3276
Y
S1S2
=-Y
S1P1
/ 1.033
Y
S1S2
=(6+Y
S1X
)/1.033
=+3.9427
Balance de H 12+3Y
S1S3
+1.70 Y
S1X
+2Y
S1P2
=0
12+3(-0.17Y
S1X
)+1.70 Y
S1X
+2Y
S1P2
=0
12+1.19 Y
S1X
+2Y
S1P2
=0
Y
S1P2
=-6-0.595Y
S1X
=-4.8533
Balance de O 6+ 2Y
S1S2
+0.46Y
S1X
+ 2Y
S1P1
Y
S1P2
=0 +
6+ 2 (6+Y
S1X
)/1.033 +0.46Y
S1X
+ 2 (-6- Y
S1X 1
)+ (-6-0.595Y
S1X
)=0
6+11.6167+ 1.93611Y
S1X
+0.46Y
S1X
-12-2
6+11.6167+ 1.93611Y
S1X
+0.46Y
S1X
-12-2
-0.3833-0.19889 Y
S1X
=0
Y
S1X
=-1.9272
Y
S1X 1
Y
S1X 1
-6-0.595Y
S1X
=0
-6-0.595Y
S1X
=0
14
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra
Determinacin de los coeficientes estequiomtricos.
Y
S1X
= -1.9272
Y
S1P1
= -4.0728
Y
S1S2
= +3.9427
Y
S1P2
= -4.8533
Y
S1S3
= +0.3276
C
6
H
12
O
6
+ Y
S1S2
O
2
+ Y
S1S3
NH
3
C
6
H
12
O
6
+ 3.94 O
2
+ 0.33 NH
3

Y
S1X
CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ Y
S1P1
CO
2
+ Y
S1P2
H
2
O
1.93 CH
1.70
O
0.46
N
0.17
+ 4.07 CO
2
+ 4.85H
2
O
Aunque los coeficientes de rendimiento tienen signo, en la reaccin todos ellos
suelen ponerse como valores positivos.
15
Estequiometra asumiendo el modelo Caja Negra

Dados los balances elementales, si el nmero de incgnitas

es mayor a 4, entonces se requerir informacin
experimental.

El rendimiento Y
s1H20
o cualquier otro que este relacionado
con el agua NO es recomendable medir. Las reacciones
biolgicas se llevan a cabo en medios lquidos, de modo que
el agua metablica generada ser mucho menor que la
existente en el medio de cultivo, de manera que pueden
existir grandes errores experimentales en la determinacin.
No todos los rendimientos conducen a una solucin del
sistema lineal de ecuaciones generado por los balances de
masa.

Biorreactores BATCH VOLUMEN CONSTANTE

BALANCES GENERALES
S
1
+ ... X + Y
S
P
1
+ ... Y
S
Balance para un Sustrato
X P
1 1 1
Muerte
Mantenimiento
Balance para la biomasa
X
o
P
X
P
1
Balance para un Producto
t
Producto asociado al crecimiento mixto
o
dP
1
= Y X + o X
dt
XP
1
|
dX
= X |X
dt
m
dS
1
= Y X mX
dt
XS
1
Biorreactores BATCH VOLUMEN CONSTANTE
RENDIMIENTO VERDADERO Y OBSERVADOS
NO Muerte
NO Mantenimiento
Pasociado al crecimiento
Balance para un Sustrato
1
1
0
2
XS
1
XS
1
X
1

XS
1
dt
Balance para la biomasa
1 1
2
= X
3
Balance para un Producto
1 1
2
3
1
X = Y
XP
dP
dt
1
(P P
0
)
(X X
0
)
= Y
XP
1
dX
dt
dS
1
= Y X
S
dS
}
dS
1
1
= Y
S
1
= Y
dX
}
dX
X
0
(S S
0
)
(X X
0
)
= Y
XS
1
Biorreactores BATCH VOLUMEN CONSTANTE
RENDIMIENTO VERDADERO Y OBSERVADOS
NO Muerte
SI Mantenimiento
Balance para un Sustrato
1
1
XS
1
XS
1
X
2
1
XS
1
dt
S
1
S
1
m
= Y
Balance para la biomasa
XS
1
0
2
dt
Balance para un Producto
No da un valor CONSTANTE!!!!!!
3

XP
1
dt
dP
1
= Y X
dX
= X
dS
1
= Y X mX
S
1
dS
}
dS
1
0
1
= Y
S
= Y
dX
}
dX
X
0
(
0
)
(X X )
BATCH. RENDIMIENTO VERDADERO Y OBSERVADOS. Ejemplo 2
Valor de rendimiento
aprox. cte
Y
XS
1
EL CONSUMO DE S PARA
MANTENIMIENTOES DESPRECIABLE!
S vs X, CORRELACION LINEAL!
Tiempo,
h
X, Kg/m
3
S, Kg/m
3
(X-X
0
), Kg/m
3
(S-S
0
),
Kg/m
3
(S-S
0
)/(X-X
0
)
0 0.2 25 0 0
1 0.47 24.41 0.27 -0.59 -2.19
1.5 1 23.28 0.8 -1.72 -2.15
2 2.1 20.9 1.9 -4.1 -2.16
2.5 4.42 15.8 4.22 -9.2 -2.18
3 9.4 5.2 9.2 -19.8 -2.15
3.5 11.7 0 11.5 -25 -2.17
BATCH. Ejemplo 3
Se han reportado datos de crecimiento de thermoanaerobacter ethanolicus bajo un
PH=7 y usando glucosa como sustrato, dando cido lctico como producto.
El cido lctico es un producto asociado al crecimiento?
Determine
max
.
Time [h]
Glucosa (G)
[g/L]
Acido
Lctico (AL)
[g/L]
X, [g/L]
0 19.5 0.45 0.01
13 16.88 3.88 0.41
14 14.85 4.94 0.54
16 13.11 6.98 0.92
18 10.4 8.98 0.99
19 8.91 10.3 1.05
20 7.75 10.83 1.15
22 5.18 12.57 1.3
24 3.64 14.58 1.35
37 0.25 16.03 0.69
BATCH. Ejemplo 3 (cont.)
Escala logartmica
Crecimiento exponencial 4
Primeros puntos!!!!
BATCH. Ejemplo 3
En la fase exponencial:
ln = ln
0
X + X
max
t
0.00
-0.50
-1.00
-1.50
-2.00
-2.50
-3.00
-3.50
-4.00
-4.50
-5.00
0 5 10 15 20

max
= 0.284 h
y = 0.2838x - 4.6003
R = 0.9999
Tiempo, h
l
n
X
1
Time [h]
Glucosa (G)
[g/L]
Acido
Lctico (AL)
[g/L]
X, [g/L] ln(X)
0 19.5 0.45 0.01 -4.61
13 16.88 3.88 0.41 -0.89
14 14.85 4.94 0.54 -0.62
16 13.11 6.98 0.92 -0.08
BATCH. Ejemplo 3
25
y = -11.586x + 21.074
20
R = 0.9379
1 1
X
0
)
= Y
XS
1
15
(X
10
5
0
y = 0.0973x + 0.0633 0 0.2 0.4 0.6 0.8
x
1 1.2 1.4 1.6
1.4
R = 0.9603
1.2
1
0.8
P
1
P
1
0.6
0.4
X X
1
0.2
0
0 2 4 6 8
x
10 12 14 16
s
P
(
0
)
(
0
)
= Y
XP
(S S
0
)
1.6
SEDIMENTACIN
Concentracin inicial: X
oi
=25 kg/m
3
Altura inicial: h
0
= 34.5 cm
Concentracin inicial: X
oi
= kg/m
3
Altura inicial: h
0
=34.5cm
Concentracin inicial: X
oi
=kg/m
3
Altura inicial: h
0
= 34.5cm
Con los datos experimentales de h y t construir
las Tablas y la grfica h = (t) para cada una
de las concentraciones ensayadas.
A partir de las pendientes anteriores se
buscan los valores de la velocidad de
sedimentacin inicial, a partir de la
pendiente de la curva h = t) para tiempo t
= 0. A partir de estos datos se construye:
Los datos de la Tabla anterior se
ajustan a la ecuacin lnv=a+bXi
lo que permite encontrar los
valores de los parmetros a y b
de esta ecuacin.
a= 6.826
b= 0.034
TERMINEN SU INFORME