FOSFOENOLPIRUVATO CARBOXIQUINASE (PEPCK)

Sara Rezende Thamires de Oliveira

Bioqumica II Wagner Coelho Tecn. em Produo de Frmacos 3 perodo

Introduo

Gliconeognese

PEPCarboxicinase

Concluso

Super Expresso Gnica

Metabolismo Energtico

INTRODUO
A PEPCK

converte oxaloacetato em PEP, dependente de GTP como doador de grupo fosforila. celular varia: mitocondrial (PEPCK-M) e citoslica (PEPCK-C)

A localizao

INTRODUO
Enzima

com potencial Cataplertico

INTRODUO
PEPCK-C

tem papel no metabolismo intermedirio, que est presente no fgado, rim e tecido adiposo branco e est envolvido na gliconeognese.
enzima tambm est presente em tecidos de mamferos, incluindo o intestino delgado, o clon, a glndula mamria, glndula supra renal, o pulmo e msculo.
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Esta

GLICONEOGNESE

Sntese de glicose no estado alimentado

Trs reaes irreversveis da gliclise so contornadas

Primeira

reao

de

contorno
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GLICONEOGNESE
Converso

do piruvato em fosfoenolpiruvato (PEP), requerendo um aporte de energia livre.

pela converso do piruvato em um intermedirio, o oxaloacetato. processo requer duas enzimas:
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Obtido

Piruvato-carboxilase PEP-carboxicinase (PEPCK)

GLICONEOGNESE

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PEP-CARBOXICINASE
PEPCK

ocorre em muitas espcies, e a sequncia de aminocidos distinta para cada uma:

Animais Plantas Bactrias

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PEP-CARBOXICINASE
Regulao

em animais:

O glucagon eleva indiretamente a expresso de PEPCKC por aumentar os nveis de AMPc (atravs de ativao de adenililciclase) no fgado, o que consequentemente conduz fosforilao.
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PEP-CARBOXICINASE
O cortisol passa atravs da membrana lipdica
das clulas hepticas e, em seguida, liga-se a um receptor de glicocorticides (GR), que dimeriza o complexo de cortisol e GR, que passa para o ncleo onde se liga ao elemento de resposta a glicocorticides (GRE) e produz mais PEPCK.
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METABOLISMO ENERGTICO
Papel

da PEPCK-C no msculo esqueltico, tendo importncia no metabolismo energtico total, centrando no potencial de gerao de alanina.
Com tcnicas de istopos in vivo, demonstra-se que gliconeognese, no gliclise, era a fonte principal de glicerol.
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SUPER EXPRESSO GNICA

No

tecido adiposo, a PEPCK enzima-chave

da gliconeognese. Em ratos, 95% citoslica e 5% mitocondrial, o que permite a realizao de estudos por meio da verificao da atividade total da enzima, sem a necessidade de separar a frao mitocondrial.
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SUPER EXPRESSO GNICA

Introduziu-se

quantidades acima do normal de PEPCK no gene que domina a formao do esqueleto dos ratos
ndice de atividade dos ratos aditivados com PEPCK-C chega a ser sete vezes superior ao dos restantes

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SUPER EXPRESSO GNICA

A

sobre-expresso de PEPCK-C no msculo esqueltico conduz a uma taxa maior de gliceroneognese no tecido e a acumulao de triacilglicerol. Isto resulta no aumento da oxidao dos cidos graxos no tecido e a subsequente estimulao da sntese mitocondrial. O aumento de mitocndrias, bem como a disponibilidade de cidos graxos no msculo, so responsveis pela hiperatividade observada nos ratinhos

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SUPER EXPRESSO GNICA

Uma

anlise dos nveis de hormnios e citocinas no sangue dos ratos PEPCKC mus observa-se nveis muito baixos de insulina e leptina, em comparao aos animais normais. elevado nvel de atividade tambm resulta no aumento da sensibilidade insulina e o recrutamento de GLUT-4 para a superfcie da clula.

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SUPER EXPRESSO GNICA

A razo para o prolongamento da capacidade reprodutiva em camundongos fmeas e mudanas de comportamento no clara.
Doses fortificadas do enzima PEPCK-C repe os nveis energticos no corpo dos mamferos e aumenta a sua longevidade A razo para o prolongamento da capacidade reprodutiva em camundongos fmeas e mudanas de comportamento no clara.

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DIABETES MELLITUS TIPO

O

nvel de glicose no sangue elevado, pois as clulas so resistentes ao da insulina.

pela insulina

Regulao

Sntese

de glicose
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Tiazolidinedionas

SUPER EXPRESSO GNICA

Procedimentos Experimentais:
Em

primeiro lugar, foi avaliada a capacidade de ratos com e sem PEPCKC mus para concorrer distncia.
segundo lugar, determinou o VO2 max.

Em Em

terceiro lugar, foi determinado a velocidade mxima que os ratinhos podiam correr at exausto.

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SUPER EXPRESSO GNICA

Gerao de ratos PEPCK-C:

A Um promotor do gene da actina humano, foi ligado ao DNA do rato PEPCK-C.

B, uma ilustrao de duas cpias do transgene integrado no genoma da clula hospedeira. C, uma representao esquemtica para gerar ratos PEPCK. -C mus utilizados no estudos.

D, uma transferncia de RNAm de ratos PEPCKC no msculo esqueltico.

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SUPER EXPRESSO GNICA

Caractersticas Metablicas:
Diferena

na concentrao de lactato no sangue, aps o momento de exausto. ratos PEPCK-C mus dependem de cidos graxos como fonte de energia. Os ratinhos de controle se movem rapidamente, a partir do metabolismo do cido g. para a utilizao de glicognio muscular como combustvel.

Os

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ANLISE HISTOLOGICA

Relao entre os nveis de PEPCK-C no msculo e a concentrao de triglicerdeos. Camundongos PEPCKCmus, foram analisados por hematoxilina e eosina, tendo altas concentraes de lipdios em comparao com os controles. Fornece energia necessria para sustentar o seu extraordinrio nvel de atividade.
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CONCLUSO
notvel que a sobre-expresso de uma enzima envolvida numa via metablica deve resultar em uma profunda alterao no fentipo do rato, como um fator de transcrio ou co-reguladores da transcrio. Um dos mais notveis diferenas fisiolgicas causadas pela sobre-expresso de PEPCK-C foi o aumento de 40% em VO2 mx. Um terceiro papel possvel de PEPCK-C no msculo esqueltico sintetizar msculo esqueltico e depsitos de triglicrideos considervel para apoiar o metabolismo de energia.

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BIBLIOGRAFIA
KRIEGLER,S. 2011. Diabetes. Disponvel em http://www.pepck-and-the-ketogenicdiet.com/Diabetes.html. CANDOSO, M.A. 2007. Super ratos genticos mais fortes . Disponvel em http://www.dn.pt/inicio/interior.aspx?content_id=988 088&page=-1 HANSON, R. 2007. Overexpression of the Cytosolic form of PEPCKC im skeletal muscle inthe mouse. HANSON, R. 2007. Born to run: the story of 32 PEPCKC mouse.

OBRIGADA PELA ATENO!

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