Reconocimiento de alcaloides Los alcaloides son bases nitrogenadas, las cuales pueden convertirse en sus respectivas sales mediante

la adicin de un cido diluido y formar precipitados al reaccionar con los reactivos especficos para alcaloides como : Mayer y Dragendorff. Obtencin del extracto: tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco macerar en un mortero y adicionar un volumen suficiente de cido clorhdrico al 5%, calentar al bao mara durante 10 minutos, enfriar y filtrar. Prueba cualitativa: colocar en dos tubos de ensayo aproximadamente 0.5 ml del filtrado cido y agregar a uno de los tubos 2 gotas del reactivo de Dragendorff y al otro tubo 2 gotas del reactivo de Mayer. Si se observa turbidez o precipitado en ambos tubos se considera como prueba presuntiva de la presencia de alcaloides. Reconocimiento de quinonas Obtencin del extracto: pesar 0,5 g de material vegetal en polvo en un beaker de 100 ml, adicionar 20 ml de etanol al 95% y calentar en bao mara durante 5 minutos hasta ebullicin, filtrar en caliente, Hidrlisis: tomar 5 ml del filtrado y adicionar 3 ml de H 2 SO 4 al 10%, calentar en bao mara durante 15 minutos hasta ebullicin, enfriar la muestra. Extraccin con tolueno: adicionar 5 ml de tolueno al extracto previamente hidrolizado, agitar suavemente sin emulsionar, utilizando la cabina de extraccin. Prueba cualitativa: tomar 2 ml de la fase orgnica en un segundo tubo de ensayo, adicionar 1 ml de la solucin previamente preparada de hidrxido de sodio al 5% en amonaco al 2%. La aparicin de un color rojo cereza en la capa acuosa indica presencia de quinonas en la muestra. Reconocimiento de compuestos fenlicos y taninos Obtencin del extracto: tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco, macerar en un mortero hidratando la muestra para facilitar el rompimiento de los tejidos, pasar la muestra completamente macerada a un beaker y adicionar cantidad suficiente de agua para cubrir la muestra, calentar en bao mara de 10 minutos y filtrar en caliente.

Prueba cualitativa: tomar 1 ml del filtrado en un tubo de ensayo y adicionar 2 gotas de solucin de tricloruro frrico (FeCl 3 al 1%). La aparicin de un color verde, azul o negro es prueba positiva para compuestos fenlicos. En un segundo tubo de ensayo tomar 1 ml del filtrado y agregar unas gotas de la solucin de gelatina-sal, si se presenta turbidez o formacin de precipitado es prueba presuntiva de la presencia de taninos en la muestra. Reconocimiento de saponinas Obtencin del extracto: tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco y macerar en un mortero, adicionar suficiente cantidad de agua que cubra la muestra, filtrar a travs de gasa. Prueba cualitativa: pasar 4 ml del filtrado a un tubo de ensayo y agitar vigorosamente durante un minuto, si se forma abundante espuma que permanece estable durante 5 minutos es prueba presuntiva de la presencia de saponinas en la muestra. Reconocimiento de esteroides y/o triterpenoides Obtencin del extracto: en un beaker limpio y seco, tomar una pequea cantidad de material vegetal seco y molido, adicionar diclorometano en cantidad suficiente hasta que cubra la muestra (realice esta prueba bajo campana extractora de gases) agitar con varilla de vidrio para realizar una mejor extraccin, posteriormente filtrar sobre sulfato de sodio anhidro. Prueba cualitativa (Ensayo de Lieberman Burchard): en un tubo de ensayo limpio y seco tomar 1 ml del filtrado orgnico y agregar por la pared del tubo 1 ml de anhdrido actico y con precaucin 1-2 gotas de cido sulfrico concentrado. La aparicin de coloraciones: verdes, azules, rojas o violeta es prueba positiva para esteroides y/o triterpenoides en la muestra. Reconocimiento de flavonoides, leucoantocianidinas y cardiotnicos: Obtencin del extracto: macerar en un mortero aproximadamente 10 g del material vegetal finamente picado, adicionar suficiente cantidad de etanol, calentar al bao mara durante 5 minutos, enfriar y filtrar. Prueba cualitativa para flavonoides (Ensayo de Shinoda): tomar un 1 ml del filtrado etanlico en un tubo de ensayo, agregar varias limaduras de magnesio y por la pared del tubo dejar caer

lentamente HCl concentrado (37%). La aparicin de colores: naranja, rojo, violeta rosado, indican es prueba presuntiva de la presencia de flavonoides en el material vegetal. Prueba cualitativa para leucoantocianidinas: tomar 2 ml del filtrado en un tubo de ensayo y adicionar 1 ml de cido clorhdrico concentrado (37%). Calentar en bao mara durante 15 minutos. La aparicin de coloraciones rojas es prueba presuntiva de la presencia de leucoantocianidinas en la muestra. Prueba para la deteccin de cardiotnicos y lactonas , insaturadas: adicionar 1 ml de filtrado en un tubo de ensayo y agregar 0.5 ml de reactivo de Kedde (mezclar 1 ml de solucin A con 1 ml de solucin B para preparar este reactivo antes de usarlo). La aparicin de coloraciones violetas o prpuras es prueba presuntiva de la existencia de cardiotnicos en la muestra. Reconocimiento de antocianinas Obtencin del extracto: en un Erlenmeyer colocar 100 g de muestra fresca finamente desmenuzada, aadir 200 ml de agua, calentar a ebullicin durante 5 minutos y filtrar. Prueba cualitativa: adicionar 2 ml del filtrado en un tubo de ensayo y aadir 1ml de NaOH diluido. Observar la coloracin formada. En otro tubo de ensayo adicionar 2 ml del filtrado y aadir 6 gotas de algn cido mineral diluido (HCl H 2 SO 4 al 10%). Observar la coloracin formada. Las antocianinas se reconocen por producir diferentes colores a diferentes pH. Reconocimiento de cumarinas En un tubo de ensayo grande adicionar 1 g de material vegetal fresco y macerado y agregar cantidad suficiente de etanol comercial hasta cubrir la muestra. Con un trozo de papel filtro blanco cubrir la boca del tubo de ensayo y sujetarlo con pinzas o una banda elstica. Agregarle unas gotas de NaOH diluido en el papel filtro y calentar hasta ebullicin durante 5 minutos, posteriormente enfriar y retirar el papel filtro. Observar bajo luz ultravioleta a 365 nm la aparicin de una coloracin fluorescente que puede ser: verde, amarilla o roja. Reconocimiento de Taninos Desmenuzar con ayuda de un mortero unos 10 g de muestra fresca, con ayuda de unos pocos ml de agua. Filtrar. Tomar 1 mL de filtrado acuoso en un tubo de ensayo. aadir 1 ml del

Reactivo Gelatina -Sal. Si se forma un precipitado, centrifugar a 2000 RPM durante 5 minutos. Des echar el sobrenadante. Redisolver el precipitado en 2 mL de Urea 10M. Aadir 2 -3 gotas de solucin de cloruro frrico al 10%. La formacin de precipitado al agregar el reactivo de gelatina, y la aparicin de colores o precipitados verdes, azules o negros e s prueba positiva de la presencia de taninos en la muestra.