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Sponsoren und Aussteller

Aussteller:
Gold-Sponsoring:
1

Veranstalter:
Norgenta Norddeutsche Life Science Agentur GmbH
Life Science Nord e.V.
in Kooperation mit:
Prof. Dr. Michael Amling (UKE)
Dr. Michael Hahn (UKE)
Prof. Dr. Ulrich Hahn (UHH)
Prof. Dr. Michael M. Morlock (TUHH)
Prof. Dr. Bernd Niemeyer (HSU HH)
Prof. Dr. Jrgen Stettin (HAW)
Prof. Dr. Friedrich Ueberle (HAW)
Tagungsorganisation:
Simone Hauck
Norgenta Norddeutsche Life Science Agentur GmbH
E-Mail: simone.hauck@norgenta.de
Tel.: 040 471 96 - 423
Beteiligte Hochschuleinrichtungen:
Hochschule fr Angewandte Wissenschaften Hamburg (HAW)
Helmut-Schmidt-Universitt / Universitt der Bundeswehr Hamburg (HSU HH)
Technische Universitt Hamburg-Harburg (TUHH)
Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf (UKE)
Universitt Hamburg (UHH)
Nachwuchswissenschaftler aus fnf Hamburger Hochschulen prsentieren ihre Arbeiten aus
den Bereichen Medizintechnik, Biotechnologie und Pharma und bieten Einblicke in den
gegenwrtigen Forschungsstand der Life Sciences am Standort Hamburg. Die
interessantesten Vortrge und Poster werden durch eine Jury ausgewhlt und mit
Preisgeldern ausgezeichnet.
Fr Studierende ist diese Tagung eine gute Inspirationsquelle, um Einlicke in die Arbeiten
und Erkenntnisse ihrer Kommilitonen und Nachbardisziplinen zu erhalten. Darber hinaus
bietet sie Informationen fr die Zeit nach dem Studium. Um den Austausch zwischen
Industrie und Forschung zu frdern, stehen zahlreiche Unternehmen aus dem Life Science
Nord Cluster am Veranstaltungstag fr persnliche Gesprche bereit.
2

Inhaltsverzeichnis
Seite
Programm 3
Vortrge 4 29
Block I 4 9
Block II 10 13
Block III 14 19
Block IV 20 25
Block V 26 29
Poster 30 58
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Vortrge
9.45 - 10.25 Uhr Block I
Vorsitz: Prof. Dr. Michael Amling, Dr. Michael Hahn, UKE
Development and integration of a cable actuated joint into a surgical robotic arm
Melanie Zimmermann, HAW
Numerische Feldexpositionsuntersuchungen von Patienten mit einem Implantat zur Tiefen
Hirnstimulation
Benjamin Winter, HSU HH
Schweidrsen als Wund(er)heiler? Der lange Weg einer neuen Stammzellquelle in die
klinische Praxis
Moritz Gldner, TUHH

3

Development and integration of a cable actuated joint into a
surgical robotic arm
Melanie Zimmermann
2)
, Tommaso Ranzani
1)
, Arianna Menciassi
1)
, Bernd Kellner
2)

1)
The BioRobotics Institute, Scuola Superiore SantAnna,
Viale Rinaldo Piaggio 34, 56025 Pontedera, Pisa, Italy
2)
Hamburg University of Applied Science, Department Medizintechnik,
Lohbrgger Kirchstrae 65, 21033 Hamburg
I nt r oduct i on
Some of the limitations, associated with Minimal Invasive Surgery (MIS), such as limited views of
surgical areas and difficult handling of surgical tools, are overcome by robotics surgery [1]. Surgeons
are enabled to perform highly skilled jobs by increasing flexibility and accuracy with respect to
traditional tools [2]. Continuum snake-like surgical robots enable the surgeon to have more dexterity
on the manipulator arm [3, 4, 5, 6], thus allowing to follow even complex anatomical paths. Despite
this, they may lack of dexterity at the distal manipulator [3,7,8]. Dexterity and enhanced DoF in the
distal wrist are of primary importance for tool manipulation and the performance of surgical tasks such
as suturing. The Endowrist of the DaVinci surgical system, the most distributed surgical robot, is one
of the key features of its success [2]. This work focuses on the development of a cable actuated
spherical joint as a wrist to be integrated onto a surgical robotic arm. Such robotic arm is characterized
by a soft continuum-like structure for omnidirectional bending and elongation capabilities.
Mat er i al s and Met hod
The joint has been designed to meet specific features extracted by literature research and medical
requirements. It is composed of two separated joint parts, a sphere oriented and tensioned by four
cables, hosted on a Teflon bearing (Fig. 1). Cable actuation was chosen for moving the joint due to its
compatibility with flexible structures of the robotic arm. Bending is possible in all directions. One main
advantage of the proposed design is the intersection of all rotation axes in the center of the sphere.
Fig. 1: Sketch of the spherical joint design a) cross section;
b) perspective front view.
Fig. 2: Joint testable-top bench test set-up.
Cables are actuated in pairs by two DC (Faulhaber Hybrid Gearheads 78.5:1) motors, with an output
torque of up to 31.4 mNm and a speed of 152.9 rpm, integrated with encoders (EPOS 24/1). Moving
only one motor causes bending on one plane; by combining two motors, bending in all directions is
obtained. A testable-top set-up has been developed that is actuated by a tendon pulley technique with
motors (Fig. 2). Each pulley enables the winding and unwinding of two opposite cables actuating the
joint. The motors are connected via serial interface to the PC; controlled in LABVIEW. The software
allows controlling the joint angle with a user interface (input of desired angle) or a joystick. Bench
6

tests, determining the joints workspace and movement tracking were performed using an AURORA
electromagnetic localization system; a 6 DoF localization probe was fixed on the tip of the joint. Data
analysis has been elaborated in MATLAB.
Resul t s
A prototype of the joint was fabricated by rapid prototyping technology. The current prototype can
reach a maximum bending angle of 55 in all planes
(
Fig. 3). Fig. 4 shows the mean data points of
three repeated joint movements from 0 to 55 in respect to its fitting curve (4
th
degree polynomial)
with a standard error of 0.16.
Fig. 3: Workspace shape of the joint. Fig. 4: Mean curve of three datasets from 0-55
with a 4th degree polynomial fitting curve.
The force developed at the tip of the joint was measured by fixing a load cell (Alluris FMI-210B5) at the
tip and moving the joint against it; we measured a maximum force of 5 N. First integration of the joint
into the current manipulator model has been successfully completed.
Concl usi on
A fully working 2 DoF joint was designed, fabricated and tested. Future work includes the complete
integration into the current continuum-like robot module and the integration of a further joint (e.g. Roll).
The results represent an important step towards the development of flexible, surgical robotic systems
equipped with distal wrist dexterity for the performance of complex surgical tasks.
Acknowl edgment s
The work described in this paper is supported by the STIFF-FLOP project (http://www.stiff-flop.eu/)
grant from the European Communities Seventh Framework Program under grant agreement 287728.
Ref er ences
[1] O. Dolghi et. al "Miniature in vivo robot for laparoendoscopic single-site surgery," Surgical Endoscopy, vol. 25, pp. 3453-3458, 2011.
[2] C. Freschi et. al "Technical review of the da Vinci surgical telemanipulator," The International Journal of Medical Robotics and Computer
Assisted Surgery, 2012.
[3] J. Ding et. al "Design, simulation and evaluation of kinematic alternatives for Insertable Robotic Effectors Platforms in Single Port Access
Surgery," in IEEE Int. Conf. Robotics and Automation (ICRA), 2010.
[4] N. Simaan et. al "A dexterous system for laryngeal surgery," in Robotics and Automation, 2004. Proceedings. ICRA '04. 2004 IEEE
International Conference on, 2004.
[5] D. P. Noonan et. al "A modular, mechatronic joint design for a flexible access platform for MIS," in IEEE/RSJ Int. Conf. Intelligent Robots and
Systems (IROS), 2011.
[6] T. Ota et. al "A Highly Articulated Robotic Surgical System for Minimally Invasive Surgery," The Annals of Thoracic Surgery, vol. 87, pp. 1253-
1256, April 2009.
[7] K. Moorthy et. al "Dexterity enhancement with robotic surgery," Surgical Endoscopy And Other Interventional Techniques, vol. 18, pp. 790-
795, 2004.
[8] J. Arata et. al "Development of a dexterous minimally-invasive surgical system with augmented force feedback capability," in Intelligent
Robots and Systems, 2005. (IROS 2005). IEEE/RSJ International Conference on, 2005.
7

Numerische Feldexpositionsuntersuchungen von Patienten mit
einem Implantat zur Tiefen Hirnstimulation
Benjamin Winter, Thomas Fiedler, Stefan Schenke und Stefan Dickmann
Helmut-Schmidt-Universitt / Universitt der Bundeswehr Hamburg
Professur fr Grundlagen der Elektrotechnik, winter.benjamin@hsu-hh.de
Einleitung
Die kontinuierliche Behandlung mit Stromimpulsen in bestimmten Gehirnregionen hat sich
bewhrt zur Reduktion der Symptome von Krankheiten wie Epilepsie, Dystonie und
essentiellem Tremor. Darber hinaus zeigen sich gute Ergebnisse bei der Behandlung
psychischer Leiden wie Depression. Bei der sogenannten Tiefen Hirnstimulation wird eine
leitfhige Elektrode in das jeweilige Zielgebiet des Gehirns implantiert. Zustzlich wird im
Brustbereich ein Stimulator implantiert, der mit der Elektrode verbunden wird.
Die metallischen Komponenten des implantieren Systems knnen mit ueren
elektromagnetischen Feldern interagieren. Dadurch ist zu befrchten, dass besonders im
empfindlichen Gewebe des Gehirns, erhhte Feldstrken auftreten knnen. Weiterhin
knnen aufgrund elektromagnetischer Induktion zustzliche Strme in der Elektrode
entstehen, welche den Stimulationsprozess beeinflussen knnten.
In dieser Arbeit wurde der Einfluss von elektromagnetischen Feldern im
Mobilfunkfrequenzbereich auf ein System zur Tiefen Hirnstimulation untersucht.
Methoden
Mit dem Programm FEKO (Momenten Methode) wurde ein vereinfachtes Modell fr die
numerische Simulation erstellt. Es besteht aus geometrischen Objekten, welche die
Krperform eines erwachsenen Menschen nachbilden. Das Menschmodell wurde mit einem
homogenen Material gefllt, welches aus einer anteiligen Gewichtung und Mittelung der
vorkommenden Materialien im Menschen stammt. In das Menschmodell wurde ein
vereinfachtes passives Modell des Systems zur Tiefen Hirnstimulation integriert.
Die Anregung des elektromagnetischen Feldes erfolgte ber ein neben dem Kopf platziertes
Handy-Modell. Betrachtet wurden jeweils die Frequenzen 835 und 1900 MHz. Die
Auswirkungen auf das biologische Gewebe wurden mit Hilfe der spezifischen
Absorptionsrate (SAR) bestimmt. Darber hinaus wurden zustzlich in das Implantat
induzierte Strme ermittelt.
Ergebnisse
Die Ergebnisse der numerischen Simulationen zeigen deutliche Erhhungen der ber 1 und
10 g Krpermasse gemittelten SAR-Werte beim Einsatz des Systems zu Tiefen
Hirnstimulation. Insgesamt kann festgestellt werden, dass die hhere Frequenz (1900 MHz,
ca. 15,7 cm Wellenlnge) strker mit dem implantierten System interagiert. Dabei erhhte
sich die gemittelte

um 38,5%, die

um 21,6%.
Ebenfalls konnte ein zustzlich in die Elektrode induzierter Strom ermittelt werden. Bei 1 W
Anregungsleistung bildete sich an der Elektrodenspitze ein maximaler Strom von 1,46 mA
aus. Dieser Strom entspricht bei konstanter Anregungsleistung 5,7% der vom Stimulator
abgegebenen maximalen Stimulationsstromstrke von 25,5 mA.
Fazit
Die Ergebnisse zeigen, dass das Implantat eine deutliche Erhhung der vom Gewebe
aufgenommenen Leistung und folglich eine Erhhung der SAR-Werte bewirkt. Vor dem
Hintergrund bestehender Personenschutznormen muss weiter untersucht werden, in-wie-
weit ein Patient mit einem Implantat zur Tiefenhirnstimulation durch elektromagnetische
Felder des Alltags- und Berufslebens beeinflusst wird. Der Einsatz von detaillierteren
Modellen und anatomischen Krpermodellen ist dabei unumgnglich.
8

Schweidrsen als Wund(er)heiler? Der lange Weg einer neuen
Stammzellquelle in die klinische Praxis.
Moritz Gldner
1,2)
, Sandra Danner
2)
, Daniel H. Rapoport
2)
, Anna E. Matthieen
2)
, Charli Kruse
2)
,
Ralf Prtner
1)
Kontakt: moritz.goeldner@tuhh.de
1) Technische Universitt Hamburg-Harburg (TUHH)
2) Fraunhofer Einrichtung fr Marine Biotechnologie (Fraunhofer EMB)
Zelltherapien bieten einen neuartigen Ansatz bei der Behandlung von einer Vielzahl an
Krankheiten, die heutzutage noch nicht oder nur teilweise geheilt werden knnen. Trotz
intensiver Forschung und vielversprechender Ergebnisse in den letzten 20 Jahren wird die
zell-induzierte Regeneration noch nicht routinemig in der klinischen Praxis angewandt. Ein
Grund dafr sind auch die hohen Kosten gerade bei Therapien mit autologen (d.h.
krpereigenen) Zellen liegen die Herstellungskosten ein Vielfaches ber denen einer
konventionellen Behandlung.
An der Fraunhofer EMB wurde in den vergangenen Jahren ein Verfahren zur Isolation und
Charakterisierung von Stammzellen aus glandulrem Gewebe etabliert. Dabei konnten
multipotente Stammzellen aus humanen Schweidrsen isoliert werden. Schweidrsen
sind im Gegensatz zu den heute gngigen Stammzellquellen wie Knochenmark oder
Fettgewebe im Patienten reichlich vorhanden und leicht zugnglich. Zudem wurde gezeigt,
dass stark proliferierende Zellen auch von lteren Patienten gewonnen werden konnten.
Daher erscheint eine Nutzung der Zellen fr Patienten aller Altersgruppen sinnvoll.
Ziel dieser Arbeit war es, die Transition eines Forschungsprojektes hin zur kommerziellen
Nutzung von Zelltherapeutika aus verschiedenen Perspektiven zu beleuchten. Dabei sollten
biotechnologische, regulatorische und betriebswirtschaftliche Aspekte betrachtet werden.
Dieser berblick soll der Fraunhofer EMB eine Entscheidungsgrundlage bieten, die nchsten
Schritte in Richtung klinische Nutzung der Zellen zu planen.
Zunchst wurden bei ausgewhlten Schritten im Stammzellisolationsprozess die Richtlinien
der guten Herstellungspraxis (Good Manufacturing Practice, GMP) implementiert. Die
Ergebnisse dieser Arbeit deuten darauf hin, dass eine GMP-konforme Anpassung des
Zellisolationsprozesses realisierbar ist und die Prozessnderungen zu einer Verbesserung
der Proliferationsrate der Zellen fhren knnen. Die Prozessdauer der Stammzellisolation
konnte um 83% von ber 23 Stunden auf 234 Minuten verringert werden. Zudem wurden
erste Gesprche mit den Zulassungsbehrden fr Zelltherapien gefhrt. Die regulatorischen
Rahmenbedingungen fr eine Zulassung wurden auf nationaler und europischer Ebene
analysiert.
Des Weiteren wurde ein mgliches Geschftsmodell fr die klinische Nutzung der
Schweidrsenstammzellen entworfen: Durch eine Einlagerung der autologen Zellen fr
chronisch kranke Patienten knnte ein vergleichsweise gnstiges off-the-shelf Produkt fr
die Wundversorgung aus krpereigenen Zellen hergestellt werden. Dieses Geschftsmodell
wrde die klinischen und konomischen Voraussetzungen fr eine erfolgreiche
Kommerzialisierung der Schweidrsenstammzellen bieten.
Die Arbeit bietet einen berblick ber die Vielzahl an Schritten, die auf dem Weg in die
klinische Praxis bedacht werden sollten. Die Ergebnisse sollen helfen, die
Schweidrsenstammzellen nicht nur in der Forschung, sondern lngerfristig auch in der
Anwendung als klinische Wundauflage nutzen zu knnen. Dies knnte die Lebensqualitt
vieler Menschen mit chronischen Wunden deutlich verbessern.
9


10

Vortrge
11.00 - 11.40 Uhr Block II
Vorsitz: Prof. Dr. Friedrich Ueberle, HAW
In Silico RNA Faltung
Jan Knop, UHH
Der CTLA-4 +49GG Genotyp ist mit einem erhhten Auftreten von nephrotischen
Nierenerkankungen assoziiert
Clemens Spink, UKE
AAL - Dienstleistungen und Assistenzsysteme fr ein selbstbestimmtes Leben
Roman Woitaschek, HAW

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In Silico RNA Faltung
von Jan Knop
Bachelor-Thesis im Studiengang
Molecular Life Sciences
Universitt Hamburg
2012
1. Gutachter: Prof. Dr. Andrew Torda
2. Gutachter: Prof. Dr. Matthias Rarey
Ziel
Wie im Bereich der Proteine ist bei RNA die Struktur des Molekls ein mageblicher Faktor
in Bezug auf ihre Funktion. Entscheidend ist hierbei auch die Faltungszeit, die im Rahmen
dieser Bachelor-Thesis erstmals grundlegend in silico untersucht werden sollte. Aus den
simulierten Faltungen tausender RNA Molekle sollten statistische Aussagen ber RNA
Strukturen und ihre Faltungsgeschwindigkeiten gewonnen werden. Zudem wurde untersucht,
inwiefern solche simulierten Faltungen reprsentative Daten ergeben.
Methoden
Knstlich berechnete RNA Molekle wurden mithilfe des Programs Kinfold aus dem
ViennaRNA Package in ihrer Faltung kinetisch simuliert. Die erhaltenen Faltungszeiten
wurden dann statistisch ausgewertet, auf ihre Signifikanz hin untersucht und mit in vitro
Messungen der Faltung von RNA Moleklen verglichen.
Ergebnisse
Die Ergebnisse der Simulationen bei denen 90.000 RNA Sequenzen verglichen wurden und
eine einzelne Sequenz ber 10.000 mal in ihrer Faltung simuliert wurde zeigten, dass die
Faltungszeiten von RNA Moleklen in sehr breiten Verteilungen vorliegen und eine
Charakterisierung einzelner Molekle sehr schwierig machen. Jedoch lassen sich aus
simulierten Faltungszeiten durchaus entsprechende Faltungskinetiken herleiten, die somit
eine Charakterisierung der RNA Molekle ermglichen. Zudem werden die RNA Molekle
somit auch vergleichbar.
Ein Hauptproblem bei dieser Arbeit war jedoch ein zu stark vereinfachtes Energiemodell des
Simulationsprogrammes, welches ein neues Licht auf die Aussagekraft solcher sehr
reduzierten kinetischer Faltungsmodelle wirft. Besonders zeigte es, welchen groen Einfluss
tertire Interaktionen bei der Faltung von RNA haben. Auch die zeitliche Machbarkeit solcher
grundlegenden Untersuchungen groer Mengen an RNA erwies sich als recht problematisch.
Schlussfolgerungen
Diese Arbeit zeigte sehr deutlich welche geringen Informationen es bisher zu der
Faltungszeit von RNA gibt und welch groes Potential in der Bearbeitung dieser Frage liegt.
Besonders grundlegende Aussagen zu der Faltung und dementsprechend der Faltungszeit
von RNA, die durch statistische Verfahren gewonnen wurden, wren sehr wnschenswert
und bten einen guten berblick ber RNA Molekle. Hier verdeutlicht sich besonders die
Schwierigkeit einer exakten Bestimmung der Faltungszeit und lenkt den Blick auf alternative
Methoden, bei denen der Faltungsweg betrachtet wird. Jedoch sollte auch hierbei ein
Augenmerk auf bisher bereits existierenden kinetischen Modellen und deren Verbesserung
gelegt werden.
12

Der CTLA-4 +49GG Genotyp ist mit einem erhhten Auftreten
von nephrotischen Nierenerkrankungen assoziiert
Clemens Spink
1
, Gesa Stege
1
, Klaus Tenbrock
2
, Sigrid Harendza
1
1
Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf
Zentrum fr Innere Medizin
III. Medizinische Klinik
Martinistr. 52
20246 Hamburg
2
Universittsklinikum Aachen
Klinik fr Kinder- und Jugendmedizin
Abteilung fr Pneumologie, Allergologie und Immunologie
Pauwelsstr. 30
52074 Aachen
Einleitung:
Die Minimal-Change-Glomerulonephritis (MCD), die fokal-segmental sklerosierende
Glomerulonephritis (FSGS) und die membranse Glomerulopathie (MGN) gehren zu den
hufigsten Ursachen fr ein nephrotisches Syndrom. Untersuchungen zur Pathogenese
der Glomerulonephritiden ergaben Hinweise fr eine inadquate Reaktion des adaptiven
Immunsystems mit Beteiligung von T-Lymphozyten. Ein wichtiger Faktor in diesem System
ist das Oberflchenprotein CTLA-4, welches von aktivierten T-Lymphozyten exprimiert wird,
den Aktivierungsstatus der T-Zelle herunterreguliert und so eine berschieende
Immunreaktion unterbindet.
Methoden:
In dieser Arbeit wurden die Hufigkeiten der Single Nucleotide Polymorphismen (SNP)
C-318T (rs5742909), A49G (rs231775) und CT60 (rs3087243) auf dem CTLA-4 codierenden
Kandidatengen in Form einer genetischen Assoziationsstudie zwischen gesunden
kaukasischen Blutspendern (n=156) und Biopsieproben kaukasischer Patienten, die an MCD
(n=160), FSGS (n=159) oder MGN (n=185) erkrankt sind, verglichen. Mittels PCR aus
genomischer DNA und Verdau mit Restriktionsenzymen wurden die entsprechenden
Genotypen der Kontrollen und Patienten identifiziert und mit Hilfe von
2
-Tests verglichen.
Ergebnisse:
Der +49GG Genotyp war signifikant (p<0,001) assoziiert mit dem Risiko fr MCD, FSGS
oder MGN (AA vs. GG: OR=1,761, 95% KI=1,748-6,622, OR=3,846, 95% KI=1,945-7,604
und OR=2,381, 95% KI=1,257-4,511). FSGS-Patienten zeigten auerdem ein signifikantes
Risiko (p<0,05) fr den +49AG Genotyp im Vergleich zu den Kontrollen (AA vs. AG: OR
1,829, 95% CI = 1,038-3,228). Darber hinaus wies der heterozygote Genotyp -318CT ein
signifikantes Risiko (p<0,05) fr das Auftreten einer MGN auf (CC vs. CT: 2,214, 95% CI =
1,146-4,276).
Zusammenfassung:
Das Vorkommen des homozygoten GG-Genotyps im SNP A49G des CTLA-4 Gens knnte
einen Risikofaktor in der Pathogenese von MCD, FSGS und MGN darstellen. Da der GG-
Genotyp zu einem vollstndigen Aminosurenaustausch von Threonin gegen Alanin fhrt
und somit vermutlich eine Konformationsnderung des CTLA-4 Proteins mit einer
Funktionseinschrnkung hervorrufen knnte, wre damit eine inadquate T-Zellaktivierung
erklrbar, die eine Rolle bei der Auslsung oder Aufrechterhaltung der
Inflammationsprozesse bei MCD, FSGS und MGN an einer gemeinsamen Endstrecke der
Podozytenschdigung spielen knnte. Sollte sich dies in weiteren funktionellen
Untersuchungen besttigen, knnte das Screening der Trger des homozygoten GG-
Genotyps im SNP A49G fr die Risikoeinschtzung und den Verlauf der genannten
Erkrankungen eine Bedeutung erhalten.
13

AAL - Dienstleistungen und Assistenzsysteme fr ein
selbstbestimmtes Leben
Roman Woitaschek
Hochschule fr Angewandte Wissenschaften Hamburg
Ziel
Im Rahmen des Forschungsprojektes VERNETZTES WOHNEN IM QUARTIER ZUKUNFTSFHIGE
VERSORGUNG LTERER MENSCHEN IN HAMBURG wird die Vernetzung von Assistenzsystemen
(Ambient Assisted Living) mit Dienstleistungen im Groraum Hamburg Uhlenhorst erprobt,
um lteren Menschen ein lngeres selbstbestimmtes Leben in ihrer eigenen Wohnung zu
ermglichen.
Neben der Verbesserung der Lebensqualitt knnte so erhhten Kosten der Pflege und dem
Mangel entsprechender Fachkrfte entgegengewirkt werden.
Methode
Fr diese Erprobung werden neben der Einbindung bestehender, insbesondere haushalts-
naher auch neuartige Dienstleistungen entwickelt, deren Implementierung das Innovations-
potential dieses Forschungsbereiches demonstrieren soll.
Das Vorhaben sttzt sich auf die Ausstattung einer Zweizimmerwohnung und eines Zimmers
in einer Pflegeeinrichtung mit entsprechenden Assistenzsystemen. Beide werden whrend
der Schlussphase des Projektes von freiwilligen Personen der Zielgruppen bezogen.
Als Bindeglied der Vernetzung zwischen Wohnraumausstattung und Dienstleistern fungiert
eine barrierefreie, webbasierte und modular erweiterbare Dienstleistungsplattform, welche
mittels Tablet-Computer und berhrungsempfindlichem Fernsehgert bedient wird.
Neben dem Angebot und der Abwicklung von kommerziellen Dienstleistungen soll das
System die folgenden Kernbereiche bedienen:
Kommunikation mit Freunden und Verwandten
Gesundheitsvorsorge
Anbieten eigener Dienstleistungen (bspw. Nachhilfe oder Kinderbetreuung)
Untersttzung bei der Einnahme von Medikamenten
Steuerung von Hausausstattung (bspw. Fenster und Beleuchtung)
Hilfestellung bei der Nahrungszubereitung und -einnahme
Im Vergleich zu anderen Projekten des AAL-Bereichs fokussiert dieses die
Zusammenfhrung der Bewohner des Quartiers untereinander als auch mit lokalen Dienst-
leistern. Anhand eines ausgewhlten Service-Portfolios mit hoher Praxisrelevanz soll gleich-
zeitig die Akzeptanz des Systems sowohl bei gesunden als auch altersbedingt erkrankten
Menschen unterschiedlicher Einkommensschichten gesteigert und zustzlich der
verbreiteten Stigmatisierung durch geriatrische Assistenzsysteme entgegengewirkt werden.
Ergebnis
Das Projekt befindet sich derzeit in der Umsetzungsphase und endet voraussichtlich im Mai
2014 mit einer umfassenden Evaluation der entwickelten Plattform, den geschaffenen
Dienstleistungen und des zugrundeliegenden Geschftsmodells.
Das Projekt wird vom Europischen Fond fr regionale Entwicklung (EFRE) und der Freien
und Hansestadt Hamburg (Behrde fr Gesundheit und Verbraucherschutz) gefrdert.
Frderkennzeichen: G|53381|2012|121-21 Z12
14

Vortrge
12.20 - 13.00 Uhr Block III
Vorsitz: Prof. Dr. Ulrich Hahn, UHH
Finite-Elemente-Simulation von Zellen in wssriger Lsung
Sven Beilmann, HSU HH
Entwicklung eines Telemetriesystems fr eine freibewegliche Maus
Andreas Bahr, TUHH
Tetramolekulare Fluoreszenzkomplementierung zur Detektion von spezifischen RNAs in vitro
Stefanie Kellermann, UHH

13

Finite-Elemente-Simulation von Zellen in wssriger Lsung
Sven Beilmann
1)
, Sven Hundertmark
1)
, Lars Ole Fichte
1)
, Marcus Stiemer
1)
1)
Helmut-Schmidt-Universitt / Universitt der Bundeswehr Hamburg
Einleitung/Ziel
Biologische Zellen sind durch ihre Zellmembran vergleichsweise gut gegen statische (zeitlich
invariante) elektrische Felder geschtzt. Ebenso kann ausgeschlossen werden, dass
moderate statische Magnetfelder Einfluss auf den Zellstoffwechsel haben. Hingegen tritt bei
zeitlich vernderlichen elektrischen Feldern eine signifikante Wechselwirkung zwischen Zelle
und uerem Feld in drei charakteristischen Frequenzbereichen auf. Diese Wechselwirkung
zeigt sich in einer deutlichen nderung der Permittivitt und der Leitfhigkeit einer
Elektrolytlsung mit biologischen Zellen, die als -, - und -Dispersion bekannt sind. Ziel
dieser Arbeit ist die elektrotechnische Modellierung der Wechselwirkung zwischen Zelle und
uerem Feld sowie die anschlieende Simulation des Systems mit der Finite-Elemente-
Methode. So knnen einerseits durch Vergleich numerischer Resultate mit experimentellen
Ergebnissen die zugrundegelegten Modellannahmen validiert werden und andererseits die
Entwicklung biotechnologischer Verfahren, z.B. zur Automatisierung der Handhabung von
Zellen in wssriger Lsung durch elektrische Felder, entwickelt werden.
In dieser Arbeit wird zunchst der Bereich der -Dispersion betrachtet. Im Gegensatz zum
Stand der Technik (Differenzenverfahren, Asami 2006) ist die hier gewhlte Finite-Elemente-
Methode flexibler und erlaubt die Erweiterung des Modells: Beispielsweise ist geplant,
zustzliche Details, wie z.B. Ionenkanle in der Membran in das Modell zu integrieren, um
Modelle der -Dispersion simulieren und bewerten zu knnen.
Methode
Betrachtet wird eine einzelne Zelle in wssriger Lsung. Das hier relevante elektrotechnische
Modell, die Elektroquasistatik, fhrt auf eine Beschreibung des Problems durch drei partielle
Differentialgleichungen fr das elektrische Skalarpotential im Zellinneren, in der Membran
und im Auenraum der Zelle. An den bergngen Zellinneres-Membran und Membran-
Zellueres sind die Teilprobleme durch zeitlich vernderliche bergangsbedingungen fr
die elektrische Flussdichte und die Stromdichte gekoppelt. Fr die Finite-Elemente-
Simulation werden Zellinneres, Zellmembran und Zellueres vernetzt und Nherungen des
elektrischen Skalarpotentials in den Netzpunkten in einer endlichen Zahl sukzessiver Zeit-
punkte nherungsweise errechnet. Hierbei wird das Rckwrts-Euler-Zeitschrittverfahren als
Update-Formel verwendet.
Ergebnis
Die entwickelte Simulationsmethode wurde in einer vereinfachten, rotationssymmetrischen
Geometrie durch den Vergleich mit einer alternativen Methode (Lsung einer Differential-
Algebraischen-Gleichung in jedem Zeitschritt) erfolgreich validiert. Das Verfahren ist nun
einsetzbar, um das Dispersionsverhalten unterschiedlicher biologischer Zellen im -Bereich
darzustellen. Ferner knnen Einflsse von Geometrievariationen untersucht werden.
Fazit/Schlussfolgerung
Die in dieser Arbeit geschaffenen Grundlagen ermglichen es, Modelle zur Beeinflussung
biologischer Zellen durch zeitlich vernderliche elektrische Felder zu testen und zu bewerten.
So wird eine systematischere Untersuchung der elektrischen Eigenschaften biologischer
Zellen mglich. Die entwickelte Simulation erlaubt die Integration weiterer Modellierungs-
details, wie z.B. Ionenkanle in der Zellmembran oder Details im Zellinneren. Auch Zell-
verbnde sollen zuknftig simuliert werden. ber die Validierung von Modellen des Verhal-
tens biologischer Zellen in elektrischen Feldern hinaus, soll die Simulation zur Entwicklung
von Verfahren zur Handhabung einzelner Zellen in wssrigen Lsungen verwendet werden.
16

Entwicklung eines Telemetriesystems fr eine freibewegliche Maus
Andreas Bahr, Arthur Schott, Wolfgang H. Krautschneider
Technische Universitt Hamburg-Harburg, Institut fr Nanoelektronik, Hamburg, Deutschland,
a.bahr@tu-harburg.
Abstract Dieses Paper stellt ein kabelloses
Telemetriesystem zur vielkanaligen Aufnahme von
Biosignalen an der Hirnrinde von frei beweglichen
Musen vor.
I. ZIEL
In aktuellen Studien des Universitts-
Krankenhauses Hamburg-Eppendorf werden die
Gehirnaktivitten von Musen untersucht. In
diesen Experimenten werden ber feine
Elektroden in einer Sonde in der Hirnrinde der
Muse die Hirnsignale ber ein Kabel
aufgenommen. Dieser Kabelbaum beeintrchtigt
die Mobilitt der Muse und begrenzt die Anzahl
der Signalbertragungskanle.
Im vorliegenden Projekt wird ein kabelloses
bertragungssystem fr die Messdaten
entwickelt.
II. SYSTEMENTWURF TELEMETRIESYSTEM
Fig. 1. Schematische Darstellung des Telemetriesystems
Das vorgeschlagene System wird in Abbildung 1
schematisch dargestellt und besteht aus vier
Komponenten. Auf dem Kopf der Maus befindet
sich ein PCB mit einem Mikrokontroller zum
Empfangen und zum Senden der Daten. Die
Stromversorgung des PCB erfolgt ber induktiv
gekoppelte Spulen, die Primrspule ist um den
Kfig gewickelt, die Sekundrspule befindet sich
auf dem PCB. Die Energieversorgung erfolgt
ber einen Hochfrequenzsender mit Verstrker
und Anpass-Netzwerk. Die Datenbertragung
erfolgt ber eine Bluetooth Low Energy
Verbindung ber Antenne vom PCB auf einen
PC.
III. ERGEBNISSE
Fr die Energiebertragung wird eine Frequenz
von 4MHz gewhlt, die fr den vorliegenden
Versuchsaufbau optimale Energiebertragung
ermglicht [1].
Auf dem PCB wird ein System-on-Chip von
Texas Instruments eingesetzt. Der CC2540 hat
einen sehr geringen Leistungsverbrauch von
60mW im Sendebetrieb und erreicht eine
Datenrate von max. 1000kbps.
Der SoC erfordert den Einsatz weniger externer
Komponenten und hat eine Gre von 6x6mm.
Das PCB wird als vierlagiges PCB entworfen und
mit SMD Bauteilen der Bauform 0402 bestckt.
Hierdurch wird eine sehr kompakte Bauweise
ermglicht. Auf dem PCB befindet sich ein
Resonanzkreis zur Energiegewinnung, eine
Gleichrichterschaltung und Spannungsregelung,
Koppelkondensatoren und ein 32MHz Oszillator.
Zum Senden wird eine SMD Antenne ber einen
Balun-Filter angeschlossen.
Das hergestellte System hat eine Gre von
10mm x 25mm und ein Gewicht von weniger als
2,5g. Es kann somit problemlos auf dem Kopf der
Maus befestigt werden.
Die Primrspule wird aus HF Litze der Dicke
0,7m waagerecht um den Kfig gewickelt.
Dieses ermglicht eine kontinuierliche Kopplung
der Sekundrantenne auch bei Bewegung der
Maus. ber den Sender lsst sich eine Leistung
von 90mW in den Sekundrkreis einkoppeln, die
zum Betrieb des PCB ausreicht.
Im Versuch konnte gezeigt werden, dass die
Bluetooth LE Verbindung zwischen PCB und PC
hergestellt werden kann und der Datenaustausch
funktioniert. Es wird erwartet dass Nettodatenrate
von bis zu 250kbit/s [2] erreicht werden knnen.
IV. SCHLUSSFOLGERUNG
In dieser Arbeit wurde ein Telemetrie -System
entwickelt, dass die drahtlose Auswertung von
Biosignalen aus dem Gehirn einer Maus
ermglicht. Die grundstzliche Funktionalitt
wurde gezeigt. Die Lsung enthlt viele
Ansatzpunkte fr weitere Verbesserungen z.B. im
Bereich der Datenbertragung oder in der
Integration als SoC.
17

Die Lsung ist problemlos auf andere
Tierversuche, z.B. mit Ratten, bertragbar und
stellt einen effektiven Weg zur vielkanaligen
Aufnahme von Biosignalen verschiedenster Art
dar.
[1] M. Zimmerman, N. Chaimanonart, D. J. Young, "In
Vivo RF Powering for Advanced Biological Research," the
28th Annual International Conference of the IEEE
Engineering in Medicine and Biology Society (EMBC-2006),
New York, N.J., 2006, pp. 2506-2509.
[2] C. Gomez, I. Demirkol, and J. Paradells. Modeling
the Maximum Throughput of Bluetooth Low Energy in an
Error-Prone Link. Communications Letters, IEEE ,
15(11):1187 1189, november 2011.
18

Tetramolekulare Fluoreszenzkomplementierung zur Detektion von
spezifischen RNAs in vitro
S. J. Kellermann
1)
, A. K. Rath
1)
, A. Rentmeister
1)
1)
Universitt Hamburg
Einleitung/Ziel
Asymmetrische Lokalisation von mRNA ist ein Mechanismus zur rumlichen und temporren
Genregulation und trgt zu wichtigen Entwicklungsprozessen bei. Zur Untersuchung von
Lokalisationsprozessen mittels RNA Imaging wurden verschiedene Sonden etabliert. Diese
Sonden basieren auf Nukleinsuren oder Proteinen und geben bei Bindung an die Target
RNA ein charakteristisches Signal. Auf Nukleinsure-basierte Sonden, wie beispielsweise
Molecular Beacons oder Forced Intercalation Probes, knnen jedoch nicht in den Zellen
produziert werden und erschweren das in vivo Imaging. [1] Protein-basierte Sonden, welche
an gespaltene fluoreszierende Reporter fusioniert wurden, knnen von der zellulren
Maschinerie produziert werden. Die sequenz-spezifische Bindung von Proteinen an ihre Ziel
RNA und die anschlieende Rekonstitution des fluoreszierenden Reporters ermglicht die
RNA Detektion. Traditionelle, auf dem grn fluoreszierenden Protein (GFP) basierte Reporter
sind jedoch gro und neigen zur spontanen Selbst-Assemblierung, was einen erhhten
Hintergrund zur Folge hat.
Um diese Limitierungen zu umgehen sollte ein 3-Komponenten Split-GFP fr die Etablierung
eines Reportersystem zur in vitro Detektion von RNA verwendet werden.
Methode
Das System besteht aus vier Komponenten: zwei Varianten des Proteins Pumilio, welche an
jeweils ein -Faltblatt des GFP fusioniert wurden, einen GFP Detektor sowie die Ziel RNA
welche von den Pumilio gebunden wird und die Assemblierung des Komplexes auslst. Die
Rekonstitution des GFP kann anhand von Fluoreszenzmessungen verfolgt werden. [2]
Ergebnis/se
Die tetramolekulare Fluoreszenzkomplementierung konnte genutzt werden um bereits nach
10 Minuten zwischen sehr sequenzhnlichen RNAs zu unterscheiden. Hierbei betrug der
Hintergrund lediglich 1.4%. Weiterhin war eine Differenzierung in Gegenwart von total RNA
aus E. coli Zellen sowie E. coli Zelllysat mglich. [2]
Fazit/Schlussfolgerung
Es konnte gezeigt werden, dass es sich bei dem System um ein spezifisches System mit
gutem Signal-zu-Rausch Verhltnis handelt. Die Tatsache, dass die Fluoreszenz-
komplementierung auch in einer komplexen Umgebung erfolgreich durchgefhrt werden
konnte, ist eine gute Voraussetzung dafr, dass in Zukunft eine Erweiterung des Systems
in vivo mglich ist.
1. Bao, G., W.J. Rhee, and A. Tsourkas, Fluorescent probes for live-cell RNA
detection. Annu Rev Biomed Eng, 2009. 11: p. 25-47.
2. Kellermann, S.J., A.K. Rath, and A. Rentmeister, Tetramolecular Fluorescence
Complementation for Detection of Specific RNAs in Vitro. Chembiochem, 2013. 14(2):
p. 200-4.

19


20

Vortrge
14.40 - 15.20 Uhr Block IV
Vorsitz: Prof. Dr. Michael Morlock, TUHH
Die Rolle des braunen Fettgewebes in der Atherosklerose
Anna-Franziska Worthmann, UKE
Einfluss von Gangmodifikationen auf die mediale Kniegelenkkraft - in vivo Messungen mittels
instrumentierter Knieendoprothese
Jan Bornschein, HAW
Analyse akustischer Orientierungskonzepte zur RFID-basierten Mobilittsuntersttzung fr
Blinde und Sehbehinderte im PNV
Martin Henning, HSU HH
21

Die Rolle des braunen Fettgewebes in der Atherosklerose
Anna Worthmann
1)
, Alexander Bartelt
1)
, Markus Heine
1)
, Jrg Heeren
1)
1) Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf
Ziel:
Bei der Herz-Kreislauf-Erkrankung Atherosklerose, die zu Schlaganfall oder Herzinfarkt fhrt,
lagern sich berschssige Blutlipide in der Gefwand als Plaques ab. bergewicht ist ein
Hauptrisikofaktor fr Atherosklerose, weil sich hierbei berschssige Lipide im Blut in Form
von Lipoproteinen anreichern. Im Gegensatz zum weien Fettgewebe, das Lipide im Krper
speichert, verbrennt braunes Fettgewebe Lipide zur Wrmegewinnung. In dieser Arbeit sollte
der Einfluss des aktivierten braunen Fettgewebes auf die Reduktion von Plaques in
bergewichtigen, atherosklerotischen Musen untersucht werden.
Methoden:
Durch Ftterung einer Fett, Cholesterin und Zucker angereicherten Dit ber 12 Wochen
wurde in einem Mausmodell fr Atherosklerose (LDL-Rezeptor-KO) bergewicht und
Atherosklerose induziert. Anschlieend wurden die Muse fr 4 Wochen mit einer
Normaldit mit dem Zusatz des beta3-adrenergen Agonisten CL316243 (CL), einem
Aktivator des brauen Fettgewebes, gefttert. Normale Dit ohne CL diente als Kontrolle.
Whrend der Ftterung wurden tglich die Nahrungsaufnahme sowie wchentlich
Krpergewicht und Blutlipide gemessen. Anschlieend wurden die Muse geopfert, um Blut,
Lebern, Fettgewebe und Aorten zu entnehmen. Es wurden biochemisch Blut- und
Leberlipide bestimmt und die Expression verschiedener Gene in der Leber sowie im weien
Fettgewebe mittels quantitativer PCR (qPCR) untersucht. Von Leber und Fettgewebe
wurden histologische Schnitte angefertigt. Zur Untersuchung der Atherosklerose wurden die
Aorten prpariert und en face mit Sudan IV gefrbt.
Ergebnisse:
Obwohl CL-behandelte Muse eine leicht erhhte Nahrungsaufnahme aufwiesen, wurden
keine Unterschiede im Krpergewicht beobachtet. CL-Behandlung fhrte zu einer
signifikanten Reduktion von sowohl Bluttriglyzeriden als auch von Blutcholesterin. In der
Histologie zeigten CL-behandelte Tiere weniger Lipideinlagerungen in der Leber und kleinere
Adipozyten im weien sowie im braunen Fettgewebe. Nach CL-Gabe fanden sich auerdem
vermehrt braune Adipozyten im weien Fettgewebe. Dazu konform zeigten die Ergebnisse
der qPCR im weien Fett eine Erhhung der Expression von Genen, die als Marker fr
braune Adipozyten dienen. Die en face Frbung der Aorten wies keinen Unterschied im Grad
der Atherosklerose auf.
Schlussfolgerung:
Obwohl kein Unterschied im Ausma der Atherosklerose gefunden wurde, fhrt schon die
kurzfristige Aktivierung des braunen Fettgewebes zu einer Reduktion von Blut- und
Leberlipiden und beeinflusst somit die Stoffwechselgesundheit positiv.

22

Einfluss von Gangmodifikationen auf die mediale Kniegelenkkraft
in vivo Messungen mittels instrumentierter Knieendoprothese
Jan Bornschein
1) 2)
, Verena Schwachmeyer
1)
, Ines Kutzner
1)
, Georg Bergmann
1)
1)
Julius Wolff Institut, Charit Universittsmedizin Berlin
2)
Hochschule fr Angewandte Wissenschaften Hamburg, Betreuer: Prof. Dr. Jrgen Lorenz
Einleitung
Eine dauerhaft hohe Belastung des medialen Kniekompartiments erhht das Risiko einer
Gonarthrose [1,2]. Gangmodifikationen sollen die mediale Kniegelenkkraft reduzieren und
somit den Krankheitsverlauf auf lngere Zeit verlangsamen, allerdings zeigen bisherige
Studien kontroverse Effekte auf [3]. Ziel dieser Studie war, den Einfluss von drei
verschiedenen Gangmodifikationen auf die mediale Kniegelenkkraft in vivo zu ermitteln, um
die zugrundeliegenden biomechanischen Mechanismen besser zu verstehen.
Methode
Die in vivo Kniegelenkkrfte wurden bei fnf Patienten (4 , Alter 72 6 Jahre) mit
instrumentierten Knieendoprothesen gemessen. Die Prothesen wurden so modifiziert, dass
integrierte Halbleiter-Dehnungsmessstreifen die auftretenden Krfte und Momente
aufnehmen. Jeder Patient ging ber eine 10 m Gehstrecke mit normalem Gangmuster sowie
mit ein- und auswrts gedrehten Fen (Toe-in bzw. Toe-out), einer vermehrten
Oberkrperseitneigung (Duchenne-Hinken) und einem Gehstock auf der kontralateralen
Seite. 37 Gangzyklen jeder Gangmodifikation wurden aufgezeichnet und die Maximalwerte
der medialen Kniegelenkkraft (F
med
) in % des Krpergewichts (KG) berechnet und mittels
eines T-Tests mit denen beim normalen Gehen verglichen. Die Abhngigkeit der medialen
Kraft von der Gehgeschwindigkeit wurde durch eine Regressionsanalyse untersucht.
Ergebnisse
Innerhalb der Standphase wies F
med
eine typische Doppelhgelkurve mit zwei Maxima auf.
Das erste Maximum (182%KG) wurde durch den Gehstock um 17% (p<0,01) reduziert,
whrend die anderen Gangmodifikationen einen Effekt von +2% bis -5% hatten. Das zweite
Maximum (191%KG) wurde beim Toe-in um 7% (p<0,05) reduziert, beim Toe-out um 8%
(p<0,01), beim Duchenne-Hinken um 5% (p<0,05) und bei der Verwendung eines Gehstocks
um 32% (p<0,01). Die Gehgeschwindigkeit erklrte dabei 9% von F
med
beim ersten Peak und
1% beim zweiten Peak.
Schlussfolgerung
Das zweite Maximum von F
med
wurde durch Gangmodifikationen deutlicher gesenkt als das
erste. Von allen untersuchten Gangmodifikationen reduzierte der Gehstock die mediale
Kniegelenkkraft am effektivsten. Auch wenn relativ geringe Reduktionen erzielt wurden,
knnten diese auf lange Sicht eine klinisch relevante Entlastung des Kniegelenks darstellen
und somit den Arthrosefortschritt verzgern. Die praktische Anwendbarkeit dieser
Gangmodifikationen bleibt jedoch noch unklar mgliche berbelastungen der
benachbarten Gelenke mssen zuknftig untersucht werden.
[1] Fronst HM. 1994, Anat Rec 240: 19-31
[2] Miyazaki T. et al. 2002, Ann Rheum Dis 61:617622
[3] Simic M. et al. 2011, Arthritis Care Res 63: 405-26
23

Analyse akustischer Orientierungskonzepte zur RFID-basierten
Mobilittsuntersttzung fr Blinde und Sehbehinderte im PNV
Martin Hennig, Stephan Schleitzer, Rando Meister
Institut fr Automatisierungstechnik Prof. Dr.-Ing. Alexander Fay,
Helmut-Schmidt-Universitt / Universitt der Bundeswehr, Hamburg
Hintergrund
Der Deutsche Blinden- und Sehbehindertenverband (DBSV) geht entsprechend einer Studie
der World Health Organization (WHO) von 1,2 Millionen [Ber05] sehbehinderten und blinden
Menschen in Deutschland aus - Tendenz steigend. Das Behindertengleichstellungsgesetz
(BGG), welches 2002 in Deutschland in Kraft trat, kompensiert die Benachteiligung von
Menschen mit Behinderungen und hat das Ziel ffentlich zugngliche Verkehrsanlagen
sowie Befrderungsmittel des ffentlichen Personenverkehrs barrierefrei zu gestalten (.8
BGG). Das Verbundprojekt Bus-ID, bestehend aus dem Institut fr Automatisierungstechnik
der Helmut Schmidt Universitt, DBSV, RTB Elektronik GmbH und dem Ingenieurbro
KramerAlbrecht, beschftigt sich seit 2008 mit der Konzeption, Entwicklung und Evaluierung
eines RFID-basierten Orientierungs-Systems zur Erhaltung der Mobilitt von Blinden und
Sehbehinderten. Die Distanz des Nutzers zum ortsfesten Reader wird durch eine
zweiseitige, symmetrische Roundtrip Time-of-Flight-Messung (RToF) realisiert. Hierbei
tragen sehgeschdigte Menschen einen kleinen aktiven Funksender (Tag) am Krper, zum
Beispiel am Schlsselbund. Begibt sich der Nutzer in die Nhe von PNV-Zugngen, sendet
ein akustischer Signalgeber einen Orientierungston. Der akustische Ausgabepegel wird in
Abhngigkeit des Geruschpegels des direkten Umfelds, der Entfernung zum Nutzer sowie
der Tageszeit geregelt. Wenn das System eine spezifische Aufenthaltsdauer des Nutzers
innerhalb eines Nahbereichs registriert, werden relevante Sprachinformationen ausgegeben
und ggf. weiterfhrende Aktionen gesteuert. Das Bus-ID System kann autark installiert oder
als zustzliches Modul in die bestehende Technik integriert werden, wie beispielsweise an
Lichtsignalanlagen. Evaluierungen durch blinde und sehbehinderte Menschen an
Bushaltestellen und Fugngerberwegen wurden bereits durchgefhrt. Die Komplexitt des
Systemdesigns nimmt bei unterirdischen Verkehrsanlagen zu, daher ist ein akustisches
Orientierungskonzept mit Optimierung der auditiven Wahrnehmung, Sprachverstndlichkeit
und Richtungshren erforderlich.
Konzept
Zur generischen Konzeptentwicklung [Sch12] wurde die Methode der morphologischen
Ksten angewandt, welche eine Vielzahl prinzipiell technisch realisierbarer
Lsungsmglichkeiten in komprimierter Form darstellt. Es wurden fr den Weg des Abgangs
zur unterirdischen Verkehrsanlage sowie fr den Weg des Aufgangs jeweils zwei Konzepte
entwickelt. Die Konzepte wurden durch eine Gruppe von 26 stark sehbehinderten und
blinden Menschen evaluiert. Bei beiden Versuchen fr den Weg zur U-Bahn erreichten
jeweils 77% im ersten Versuch sowie 80% im zweiten Versuch das Ziel. Dabei gaben 15%
der Probanden an, dass sie auch ohne Hilfe das richtige Gleis gefunden htten. Diese
Aussage kann dadurch begrndet werden, dass die entsprechenden Probanden mit der
jeweiligen U-Bahnhaltestelle vertraut waren.
Der Weg des Aufgangs jedoch ist fr blinde sowie sehbehinderte Menschen aufgrund der
Vielzahl an Ausgngen schwieriger zu bewltigen. Fr den Weg des Aufgangs wurden zwei
Konzepte betrachtet, welche das Richtungshren sowie die akustische Orientierung im
Raum miteinander vergleichen. Hierbei besttigte sich das Konzept mit den verteilten
Akustiken im Raum unter optimaler Ausnutzung des selektiven Richtungshrens im
Vergleich zum preisgnstigen Konzept mit nur einer Akustik. Es erreichten 88% den richtigen
Ausgang mit Hilfe des erstgenannten Systems. Im Vergleich htten nur 7% ohne Hilfe das
Ziel erreicht. Mit nur einer zentralen Akustik, wie es das zweite Konzept vorsieht, erreichten
nur 26% das Ziel. Dieses Ergebnis resultiert zum einen aus der rckwrtigen Ausrichtung
zum Orientierungston sowie zum anderen aus der Handlungskomplexitt.
24

Schlussfolgerungen
Bei einer geringen Komplexitt der unterirdischen Verkehrsanlage ist das simple Konzept mit
nur einer Akustik ausreichend. Bei komplexen Schalterhallen ist ein getrenntes und
dezentrales Konzept anzuwenden. Fr jede Haltestelle muss das jeweils angewandte
Konzept individuell angepasst werden. Als Richtwert sollte eine Akustik pro Gang verwendet
werden, welcher aus der Schalterhalle heraus fhrt.
Literatur
[Ber05] Bertram, Bernd: Blindheit und Sehbehinderung in Deutschland: Ursachen und
Hufigkeit. In: Der Augenarzt 39, 6. Heft (2005).
http://www.dbsv.org/infothek/zahlen-und-fakten
[Sch12] Schleitzer, Stephan: Entwurf und Analyse eines Orientierungssystems in
unterirdischen Verkehrsanlagen fr blinde und sehbehinderte Menschen. (2012)
23


26

Vortrge
15.50 - 16.30 Uhr Block V
Vorsitz: Prof. Dr. Bernd Niemeyer, HSU HH
Einfluss von Gamma- und Rntgenstrahlung auf die mechanischen Eigenschaften des
kortikalen Knochens in humanen Femora
Felix Nikolai Schmidt, TUHH
Die GTP-Cyclohydrolase I als potentielles Target fr neue Antibiotika
Sonja Schssler, UHH
Metabolismus von 2-deoxy-ADPR n.v.
Adriana-Michelle Wolf, UKE

27

Einfluss von Gamma- und Rntgenstrahlung auf die mechanischen
Eigenschaften des kortikalen Knochens in humanen Femora
Felix N. Schmidt
1
, Michael Hahn
1
, Klaus Pschel
2
, Michael Amling
1
, Gerold Schneider
3
, Bjrn Busse
1
1)
Institut fr Osteologie und Biomechanik, Universittsklinikum Hamburg Eppendorf, Hamburg,
Deutschland
2)
Institut fr Rechtsmedizin, Universittsklinikum Hamburg Eppendorf, Hamburg, Deutschland
3)
Institut fr keramische Hochleistungswerkstoffe, Technische Universitt Hamburg-Harburg,
Deutschland
Einleitung
Patienten sind in der heutigen Klinik verschiedenen Strahlungsbelastungen ausgesetzt. Dabei
werden Dosen vom Niedrigdosis- (Gy) bis hin zum Hochdosisbereich (Gy bis kGy) appliziert.
Derzeit wird in der Osteologie zunehmend die HR-pQCT eingesetzt, um eine dreidimensionale
Bewertung der Knochenstruktur vorzunehmen. Im Vergleich zur klassischen Osteodensitometrie
(dual energy X-ray absorptiometry) wird dabei eine, um ein Vielfaches erhhte, Strahlendosis
appliziert (Gy vs. mGy). Fortschritte in der osteologischen Bildgebung, sowie neue
Analysetechniken, erfordern eine Prfung der Auswirkungen der aktuell klinisch relevanten
Strahlendosen, sowie eine Evaluation potentieller Risiken fr die biomechanische Kompetenz des
Knochens.
Material & Methoden
Es wurden Knochenproben aus dem Femurschaft einer weiblichen Organspenderin (39 Jahre)
entnommen und 50 rechteckige Kortikalis-Proben prpariert. Mit 5 Gruppen 10 Einzelproben
konnte ein Dosenspektrum von 6,4mGy (HR-pQCT) ber 8mGy (Thorax-CT), 30Gy
(Strahlentherapie) bis 31,2 kGy (Allograftsterilisation) erfasst werden. Im Drei-Punkt-
Biegeversuch wurden die Werkstoffparameter E-Modul, Fliegrenze, Maximalspannung (max),
Dehnung bis max, Bruchspannung und -dehnung, Arbeit bis
max/Bruch
und Steifigkeitsverlust
ausgewertet. Durch eine hochauflsende CT-Analyse (Voxel-Size: 10 m) konnte die Porositt
fr jede Probe bestimmt und als Einflussfaktor auf die biomechanischen Kennwerte eruiert
werden. Zustzlich erfolgte eine quantitative 3D-Analyse der Bruchflchen. Hochauflsende
REM-Aufnahmen der Knochenbruchflchen dienten der qualitativen Analyse der
Bruchcharakteristiken (sprde oder duktile Brche).
Ergebnisse
Bei Gruppen, die mit 6,4 mGy, 8 mGy und 30 Gy bestrahlt wurden, konnten keine negativen
Auswirkungen auf die biomechanischen Parameter nachgewiesen werden. Jedoch zeigte die
Untersuchung, dass eine Bestrahlung der Knochenproben mit 31,2 kGy in einer fast vollstndigen
Abnahme des plastischen Verhaltens resultiert. Die Arbeit bis max reduzierte sich dabei um
67,86%, die Dehnung um 52,13 % und Spannung (max) um 28,38 %. Signifikante Unterschiede
in der Bruchflchencharakteristik wurden zwischen der Kontrollgruppe und der Hochdosisgruppe
quantifiziert.
Schlussfolgerung
Diese Arbeit zeigt, in welcher Form Rntgen- und Gammastrahlung die biomechanische
Kompetenz humanen Knochens beeinflussen kann. Fr die klinische Bildgebung in der
Osteologie ergibt sich hieraus, dass verwendete Strahlendosen von unter 10 mGy keinen
28

negativen Effekt in Relation zur Knochenbiomechanik aufweisen. Jedoch ist fr die
experimentelle Forschung, z.B. bei hochauflsenden Strukturanalysen mit einer
Bestrahlungsdosis von ber 30 Gy zu empfehlen, biomechanische Prfungen immer vor der
Bildgebung durchzufhren. Speziell durch die hochauflsende Bildgebung kann der Charakter
des Knochengewebes modifiziert werden und entsprechende nderungen der biomechanischen
Kennwerte nach sich ziehen. Die Untersuchungen zeigten, dass die Einbeziehung der
Probenporositt und Bruchflchencharakteristika effektive Zusatzinformationen zur
Knochenqualittsanalyse dieser Fragestellung liefern. Der Verlust plastischen Verhaltens bei
31,2 kGy liefert einen Hinweis auf, durch Strahlung induzierte, negative Auswirkungen erhhter
Kollagen-Crosslink-Dichten auf biomechanische Parameter.

29

Die GTP-Cyclohydrolase I als potentielles Target fr neue
Antibiotika
Schssler, Sonja; Sarge, Sonja; Schding, Alexandra; Wegner, Katrin; Grwert, Tobias;
Haase, Ilka; Fischer, Markus
HAMBURG SCHOOL OF FOOD SCIENCE, Institut fr Lebensmittelchemie, Universitt Hamburg
www.hsfs.org
Einleitung und Zielsetzung
Die Entwicklung von Resistenzen von pathogenen Mikroorganismen gegenber gngigen
Antibiotika stellt eine aktuelle und weltweit zunehmende Problematik dar. Einige dieser
Erreger haben besondere Eigenschaften, die eine infektionsvorbeugende Handhabung
erschweren. So kann z.B. Listeria monocytogenes, der Erreger der Listeriose, die durch den
Verzehr von Lebensmitteln bertragen werden kann, auch bei Khlschranktemperaturen
wachsen. Neben den lebensmittelvermittelten Krankheiten spielen nosokomiale Infektionen
heutzutage eine groe Rolle, die ebenfalls durch hufig auftretende (Multi-)resistenzen der
Erreger gekennzeichnet sind. Zu den hufigsten Krankenhauskeimen zhlt Pseudomonas
aeruginosa, welcher bspw. schwere Pneumonien, aber auch Harnwegsinfekte oder
Meningitis, auslsen kann.
Als mgliche Targets fr neue Antiinfektiva eignen sich essentielle Enzyme bestimmter
Biosynthesewege. Eine der ltesten Antibiotikaklassen, die Sulfonamide, entfalten ihre
Wirkung ber die Hemmung der Dihydropteroat-Synthase der Folsure-Biosynthese. hnlich
wie dieses Enzym scheint auch die GTP-Cyclohydrolase I (GTPCHI), das erste Enzym der
Folsure-Biosynthese, als neues, potentielles Drug-Target geeignet.
Methoden und Ergebnisse
Nach der Klonierung wurden die rekombinanten Enzyme mit unterschiedlichen
chromatographischen Methoden (Nickelaffinitts- und Gelfiltrationschromatographie) isoliert.
Diese Verfahren lieferten hinreichende Mengen an reinem Enzym; mittels Gelfiltration konnte
auerdem die Quartrstruktur der Proteine ermittelt werden. Zur weiteren Charakterisierung
der Proteine wurden Bestimmungen des Cofaktors (Zn
2+
-Ionen) mittels ICP-MS durchgefhrt;
die Sequenz wurde mittels Edman-Sequenzierung sowie LC-MS/MS verifiziert.
Die Aktivittsmessungen sowie die Bestimmungen der kinetischen Parameter erfolgten mit
Hilfe eines photometrischen Assays. Schlielich konnte ein HTS (High-Throughput Screen)
gegen eine Bibliothek von ca. 8000 Substanzen durchgefhrt werden. Es konnten einige
inhibitorische Substanzen ermittelt werden, deren hemmende Wirkung durch genauere
Messungen untersucht werden. Die Inhibition der humanen GTPCHI wird durch einen
Counter-Screen ausgeschlossen. Es wurden auerdem Versuche zur Kristallisation der
Proteine durchgefhrt. Hierbei konnten einige Proteinkristalle erhalten werden, die sich zur
Strukturaufklrung mittels Rntgenstrukturanalyse eignen.
Schlussfolgerung und Ausblick
Mit Hilfe des HTS knnen potentielle Inhibitoren identifiziert und ggf. zu Wirkstoffen
weiterentwickelt werden. Mit den erzeugten Kristallen knnen Strukturaufklrungen erfolgen,
die u.a. eine Optimierung potentieller Hemmstoffe anhand der Struktur ermglichen.

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Erarbeitung eines Konzepts zur definierten Fermentation von Stroh
Sebastian Antonczyk
#
, Paul Scherer
Hamburg University of Applied Sciences (HAW), Hamburg Research Center for Biomass
Utilization, Lohbrgger Kirchstr. 65, 21033 Hamburg-Bergedorf, Germany
#
Sebastian. Antonczyk@haw-hamburg.de
Die Kommission der Europischen Union will beim Erreichen ihrer Klimaziele die sogenannte
zweite Generation der Bioenergie aus Abfllen und Cellulose (Stroh) frdern. Dadurch soll
eine mgliche Nahrungskonkurrenz ausgeschlossen bzw. eine indirekte
Landnutzungsnderung verhindert werden. Das nachhaltige, weitgehend ungenutzte
Strohpotenzial Deutschlands betrgt zwischen 8 bis 13 Mio. Tonnen Feuchtmasse pro Jahr.
Bei einer Nutzung des nachhaltigen Strohpotenzials wrden sich keine negativen Wirkungen
auf die Humusbildung ergeben. Die zur Verfgung stehende Menge an verwendbarem Stroh
entspricht in etwa einem Biogaspotenzial von 1400 - 2300 MWhel, wobei noch zustzlich fast
die gleiche Menge an Wrmeenergie erzeugt werden knnte. Das ergibt die Energie von 1-2
Atomkraftwerken.
Eine Strohnutzung ist generell nur punktuell erprobt, die Vergrung von Stroh ist
wissenschaftlich bisher noch nicht nher untersucht worden. Das Ziel des vorgestellten
Projektes ist die effektive Vergrung von Stroh. Wissenschaftlich gesehen eignet sich Stroh
aus Getreide mit seiner weitgehend homogenen Zusammensetzung, die mehrheitlich aus
Cellulose besteht, hervorragend als Modellsubstrat zur Biogaserzeugung aus
nachwachsenden Rohstoffen. Um diesem Modellcharakter gerecht zu werden, wird in den
Versuchen eine Schlempe mit Strohpulver verwendet. Zuerst werden verschiedene
Schnittgren des Strohs zur Beurteilung der Gasbildungspotenziale in Batchfermentationen
getestet. Im Anschluss soll die Umsetzung der erlangten Erkenntnisse aus der
Batchfermentation auf 6 Liter Versuchsfermenter mit automatischer Regelung, ohne Fuzzy-
Logik Regelung (FLC) geschehen. Dabei soll die grtmgliche, betriebssichere Organic
Loading Rate (OLR) ohne Fuzzy-Logik Regelung erreicht werden, um den Einfluss der FLC
auf den Prozess als Referenz zu ermitteln. Ein weiterer wichtiger Faktor ist die
Betriebstemperatur, die in den Versuchen zum Abbau untersucht werden soll. Anschlieend
soll dann die Installation der Fuzzy-Logik-Regelung inklusive dem Parameter Redoxpotenzial
erfolgen, um eine Optimierung der Fuzzy-Logik Regelung aufbauend auf einer
Parameterregelung mit Redoxpotenzial und einer damit verbundenen Intervallbeladung zu
erreichen.


32

Knowledge and Technology Transfer of Biogas Systems for
Environmental Protection
Richard Arthur, Paul Scherer
Hamburg University of Applied Sciences (HAW), Hamburg Research Center for Biomass Utilization,
Lohbrgger Kirchstr. 65, 21033 Hamburg-Bergedorf
Richard. Arthur@haw-hamburg.de
The over-reliance on biomass as fuel in developing countries has resulted in severe
irreversible deforestation. This has necessitated the search for a reliable and cleaner
sources or eco-friendly methods to transform the biomass. These sources and
methods must be inexpensive, renewable and sustainable. In Ghana, 72 % of the
primary energy supply is from wood fuel. There are also about 5.5 million households
with 87 % using wood as primary fuel for cooking and 90 % of this wood is directly
from the forest. There is an average per capita of 3kg of wood per day for energy. At
this rate of deforestation, the Sahara desert could soon extent to Ghana which is
located on the belt of sub-Saharan Africa in the next decade. Efforts have been made
in the past to integrate biogas into the sustainability mix. Currently, only about 240
digesters with capacities ranging from 6m
3
to 10 m
3
have been installed with only 44
% of these plants are functioning. This is attributed to poor design and construction of
digesters, poor substrates management, and lack of knowledge on operation and
maintenance techniques by users. Agriculture contributed nearly 26 % to Ghanas
GDP in 2011 and about 3.4 million (62 %) households are in this sector. There is also
a potential to install about 278,000 domestic biogas plants in Ghana. Adapting and
integrating a robust and efficient domestic biogas technology into the Ghanaian
household system, would reduce the over dependence on wood fuel. The effluent
can be applied as a bio-fertilizer on the farms


33

FAIR vs. AIR - kleine nderung, groe Wirkung
Katharina Berg
1
, Cindy Meyer
2
, Inken Lorenzen
3
, Joachim Grtzinger
3
, Stefan Rose-John
3
, and Uli
Hahn
1*
1
Institute for Biochemistry and Molecular Biology, Department of Chemistry, University of Hamburg, Martin-Luther-King-Platz 6, 20146 Hamburg, Germany
2
Tuschl Lab, The Rockefeller University, 1230 York Ave, Box 186, New York, 10065 NY, USA
3
Institute of Biochemistry, Medical Faculty, Christian-Albrechts-University, Olshausenstr. 40, 24098 Kiel, Germany
* uli.hahn@uni-hamburg.de
Interleukin 6 (IL-6) ist ein multifunktionales Zytokin, das von einer Vielzahl verschiedener
Zelltypen whrend Infektionen, Verletzungen und anderen immunologischen Reaktionen
sekretiert wird und dabei sowohl pro- als auch anti-inflammatorisch wirken kann, indem es an
seinen spezifischen Rezeptor bindet. Bei einer Dysregulation kann IL-6 jedoch
Entzndungen, Krebs und andere Krankheiten frdern. Um der IL-6 Funktion
entgegenzuwirken, wurden Aptamere untersucht, die gezielt Wirkstoffe zu oder in IL-6
Rezeptor-tragende Zellen bringen. Aptamere sind kurze Nukleinsuren, die eine klar
definierte dreidimensionale Faltung eingehen. Sie besitzen hnlich wie Antikrper eine hohe
Affinitt und Spezifitt zu ihren Zielmoleklen. Da sie nicht immunogen sind, knnen sie von
groem therapeutischem Interesse sein. Die Affinitt der Aptamere fr die IL-6 Rezeptoren
konnte mittels Filterretentionsanalysen bestimmt werden. Die Dissoziationskonstanten, die
ein Ma fr die Affinitt des Aptamers an das Zielprotein sind, lagen im nanomolaren
Bereich. Es konnte weiterhin gezeigt werden, dass die Aptamere spezifisch mit dem IL-6
Rezeptor interagierten und keine unspezifische Interaktion mit den natrlichen
Bindungspartnern gp130 sowie IL-6 aufwiesen. Des Weiteren zeigte sich, dass
Fluormodifikationen der RNA-Aptamere mit einer hheren Stabilitt im Kulturmedium
einhergehen.


34

Relating cytoarchitectonic differentiation and interareal distance to
corticocortical connection patterns in the cat brain
Sarah F. Beul
1)
, Claus C. Hilgetag
1)
1)
Institut fr Computational Neuroscience, Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf, Universitt
Hamburg, Martinistrae 52, 20246 Hamburg
S.Beul@uke.de, C.Hilgetag@uke.de
Einleitung/Ziel
Information processing in the brain is constrained by structural connectivity on multiple
scales. However, the principles governing the organization of corticocortical connectivity,
particularly the existence, density and laminar origin and termination patterns of projections,
remain elusive. Here, we tested three models of relationships between the organization of
cortical structure and features of connections linking 48 areas in the cat cerebral cortex.
Factors taken into account were the relative cytoarchitectonic differentiation (structural
model), relative spatial position (distance model), and relative hierarchical position
(hierarchical model) of cortical areas.
Methode
Qualitative measures of corticocortical connections were extracted from a data collation of
published reports of anatomical tract-tracing experiments in the cat (Scannell et al., 1995).
The database that was provided for download in conjunction with the paper includes 1376
projections which are mapped onto a cortical parcellation comprising 65 brain areas.
Existence of projections was given as either absent ('0'), or present, where presence was
described by ordinal weights as dense ('3'), intermediate ('2') or sparse ('1'). Moreover,
laminar projection patterns are available for a subset of 133 projections linking 22 cortical
areas of the cat visual system, from which Scannell and colleagues (1995) constructed a
hierarchy of the cat visual system. We determined anatomical distance and difference in
cytoarchitectonic differentiation of source and target brain regions for 904 projections, and
furthermore included difference in hierarchical level for 282 of those projections.
Ergebnis/se
Structural differentiation as well as distance (which were themselves uncorrelated) correlated
strongly with the existence or absence of interareal connections, whereas no correlation was
found with relative hierarchical position. Moreover, a strong correlation was observed
between the laminar projection patterns and structural differentiation. Additionally,
architectonic differentiation correlated with the absolute number of corticocortical connections
formed by an area, and varied characteristically between different cortical subnetworks,
including a module of hub areas.
Fazit/Schlussfolgerung
Thus, structural connectivity in cat cerebral cortex can, to a large part, be explained by the
two independent factors of relative structural differentiation and distance of brain regions.
Hierarchical area rankings, by contrast, did not add explanatory value. As both the structural
and the distance model were originally formulated in the macaque monkey, their applicability
in another mammalian species suggests a general principle of cortical organization.


33

Die Massenspektrometrische Charakterisierung von Proteinen und
derivaten mittels HPTLC-MS Proteomics revisited ?
Julia Biller
1
*; Kathrin Tscherch
1
; Maria Trusch
2
; Sascha Rohn
1
1)
Institut fr Lebensmittelchemie, HAMBURG SCHOOL OF FOOD SCIENCE, Universitt
Hamburg, Grindelallee 117. 20146 Hamburg
2)
Institut fr Organische Chemie, Universitt Hamburg, Martin-Luther-King Platz 6, 20146
Hamburg
*biller@chemie.uni-hamburg.de
Einleitung/Ziel
Proteine gehren neben Lipiden und Kohlenhydraten zu den wichtigsten Bestandteilen der
Nahrung. Infolge ihrer vielfltigen Funktionalitt und Reaktivitt bilden sie einen wesentlichen
Forschungsschwerpunkt in der Lebensmittel- und Ernhrungswissenschaft.
Die Identifizierung von Proteinen anhand ihrer Sequenz ist durch die gut etablierten
Techniken der Protein- und Proteomanalytik problemlos mglich. Neben der klassischen
Betrachtung stellt aber die Aufklrung von Protein-Interaktionen und posttranslationalen
Proteinmodifikationen, die z.B. auch im Verlauf der Lebensmittelbe- und -verarbeitung
auftreten knnen, ein bedeutendes Forschungsgebiet dar. Die Analytik von Proteinspezies
ist dabei eine besondere Herausforderung, da es hierfr gelingen muss, einzelne
Proteinspezies vor der massenspektrometrischen Analyse voneinander zu trennen.
Methode
Vor diesem Hintergrund soll eine neue Form der Analytik etabliert werden. Die Basis ist
dabei eine optimierte Trennung mit Hilfe der mehrdimensionalen Hochleistungsdnnschicht-
chromatografie (high performance thin layer chromatography, HPTLC). Ein groer Vorteil
dieses Verfahrens liegt in der groen Variationsmglichkeit an mobilen und stationren
Phasen, der simultanen Analyse mehrerer Proben, die Verwendung nicht-LC-MS-geeigneter
Lsungsmittel oder Lsungsmittelgemischen, sowie die vielfltigste Derivatisierungs-
mglichkeiten der Analyten. Die Identifizierung und Charakterisierung erfolgt schlielich
massenspektrometrisch, was die Etablierung von Kopplungsverfahren wie HPTLC-MALDI-,
HPTLC-ESI- oder HPTLC-LESA-ESI-Massenspektrometrie erforderlich macht. Die
Umsetzung und Weiterentwicklung dieser Methoden erfolgt zunchst anhand von natrlich in
Lebensmitteln vorkommenden, aber gereinigten Proteinen sowie Proteingemischen.
Ergebnisse
Eine Trennung einzelner Proteine konnte auf unterschiedlichen stationren Phasen
(Kieselgel, Kieselgel-RP-8 und RP-18) unter Verwendung geeigneter mobiler Phasen
grundstzlich erzielt werden. Ebenso wurden bereits mit den verschiedenen
Kopplungsmglichkeiten (HPTLC-MALDI- und HPTLC-LESA-ESI-MS) Proteine
massenspektrometrisch identifiziert. Hierfr erfolgte im Fall der MALDI-TOF-MS eine
Optimierung der Matrix sowie des Verfahrens zur Matrixbeschichtung der
Plattenoberflchen.
Im Fall der HPTLC-LESA-ESI-MS wurde eine Optimierung des Extraktions- und
Messverfahrens von den verschiedenen stationren Phasen durchgefhrt.

36

Fazit/Schlussfolgerung
Fr eine Identifizierung und Charakterisierung von unterschiedlich modifizierten Proteinen ist
eine weitere Optimierung der Trennung mittels HPTLC erforderlich, um die
massenspektrometrische Analytik der separierten Proteinspezies anschlieen zu knnen.
Des Weiteren muss die Sequenzierung von Proteinen von der HPTLC-Platte weiter optimiert
werden, um zuknftig auch unbekannte sowie modifizierte Proteine analysieren zu knnen.


37

Die Analyse der Herzratenvariabilitt ergibt Hinweise fr eine
vegetative Dystonie bei Patienten mit obstruktivem Schlafapnoe-
Syndrom
Dieba Ayasi*, Derya Domac*, Tasmia Khokhar*, Egbert Happe
1
, Boris Tolg
2
,Jrgen Lorenz
3
*) Studierende im Master Programm Biomedical Engineering der HAW, 1) Leiter der HNO-
Praxisklinik Mmmelmannsberg; 2) Betreuender Professor der HAW; 3) Betreuender
Professor der HAW
Einleitung
Das obstruktive Schlafapnoe-Syndrom (OSA) wird durch Verlegung der Atemwege im Schlaf
hervorgerufen und ist durch Schlafstrungen mit hufigem Erwachen und vermehrter
Tagesmdigkeit gekennzeichnet. Wir gingen der Frage nach, ob bei OSA Patienten eine
abnorme Herzratenvariabilitt (HRV) als Ausdruck einer vegetativen Dystonie festgestellt
werden kann, die mglicherweise als Frhindikator des erhhten kardiovaskulren Risikos
herangezogen werden kann, das mit OSA verbunden ist (Mannarino et al. 2012).

Methodik
Wir untersuchten mittels einkanaligem EKG 11 Patienten mit OSA im Vergleich zu 11
gesunden Freiwilligen gleichen Geschlechts (8 Mnner, 3 Frauen) und Alters (MW = 43,2;
SD = 8,7). Zur Manipulation der vorwiegend vagal gesteuerten respiratorischen
Sinusarrhythmie sollten die Studienteilnehmer fr die Dauer von 3 Minuten entweder mit 10
oder 15 Atemzyklen/Minute atmen, entsprechend einem Takt, der ihnen per Kopfhrer
prsentiert wurde. Die Einhaltung dieser Atemrhythmen wurde ber die FFT-Analyse der
parallel mittels Brustgurt registrierten Respirogramme verifiziert. Zur Provokation der
berwiegend sympathoton gesteuerten Orthostasereaktion untersuchten wir die
Studienteilnehmer fr jeweils 90 Sekunden vor und nach einem Wechsel aus liegender zu
sitzender Krperposition bei 10 Atemzgen pro Minute. Zur HRV-Auswertung verwendeten
wir die Analysesoftware Kubios HRV. Hierbei wurden Kennwerte im Zeit- und
Frequenzbereich sowie auf der Basis nicht-linearer Methoden berechnet und mittels
einfaktorieller Varianzanalyse auf Gruppenunterschiede sowie den Einfluss von
Atemfrequenz und Krperposition und Wechselwirkungen dieser Parameter mit Gruppe
ausgewertet.
Ergebnisse
Die Patienten zeigten im Vergleich zu den Kontrollen eine signifikante Verminderung der
HRV. Ferner fehlte bei ihnen anders als Kontrollen eine signifikante Erhhung der
vorwiegend von vagalen Einflssen abhngigen HF-Komponente (0.15-0.4 Hz) beim
Wechsel von 15 zu 10 Atemzgen pro Minute. Die vorwiegend sympathoton modulierte LF-
Komponente (0.04-0.1 Hz) war zwar bei den Patienten ebenfalls signifikant vermindert,
zeigte aber beim Wechsel vom Liegen zum Sitzen bei beiden Gruppen eine gleichstarke
Erhhung.
Diskussion
Die Studie liefert Hinweise fr eine generelle Abnahme der HRV bei Patienten mit OSA.
Insbesondere imponiert eine deutlich abgeschwchte Synchronisierbarkeit der vornehmlich
vagal gesteuerten respiratorischen Sinusarrhythmie mit der Atemfrequenz.

38

Optimierung eines Integrierten Bioprozesses zur Herstellung eines
potentiellen Malariavakzins mit Pichia pastoris
S. Schreiber
1
, S. Jensen
1
, J. Paul
1
, S. O. Borchert
1
, B. Faber
2
, G. Cornelissen
1
1
HAW Hochschule fr angewandte Wissenschaften Hamburg, Deutschland
2
BPRC Biomedical Primate Research Center, Niederlande
In diesem Beitrag wird ein Gesamtprozess zur Herstellung eines Malariavakzin-Kandidaten, dessen
Gensequenz vom BPRC in Pichia pastoris kloniert wurde, vorgestellt. Das gewhlte Hostsystem besitzt
die Fhigkeit das Zielprotein in das umgebende Medium zu sekretieren. Dies erleichtert den
anschlieend ange-gliederten Downstream-Prozess, bestehend aus einer Expanded Bed Adsorption
Chromatography (EBA), einer Ultrafiltrationseinheit und einem Chromatographie-schritt.
Fr die Forschungsarbeit steht ein hochinstrumentierter Bioreaktor zur Verfgung, mit dem
vollautomatische sequentiell ablaufende Produktionszyklen gefahren werden knnen. Zunchst erfolgt
eine Batch und Fed Batch Phase zur Zellanzucht auf Glycerin, anschlieend wird durch Methanol die
Zielproteinexpression induziert.
Die Teilernte der zyklischen Kultivierung erfolgt in einen Konditionierungstank, in dem whrend des
Refreshes im Bioreaktor, die Bedingungen fr eine primre Aufreinigung durch Expanded Bed
Adsorption Chromatography eingestellt werden. Der Prozessschritt EBA kombiniert zum einen die
Zellabtrennung sowie das Protein-Capture. Die Verwendung von fluidisierten Adsorberpartikeln bei der
EBA ermglicht eine direkte Aufgabe von Kulturbrhe, wobei das Zielprotein an die Partikel bindet.
Nach einem Waschschritt erfolgt die Elution. Verwendet wird ein Immobilized Metal Affinity
Chromatography (IMAC) Material in einer STREAMLINE 50 Sule.
Das EBA-Eluat wird ber eine Crossflow-Ultrafiltrationsmembran zunchst auf-konzentriert,
anschlieend wird batchweise eine Diafiltration durchgefhrt, um die Bedingungen fr eine folgende
prparative Chromatographie zu erhalten.
Die Feinreinigung des Produktes erfolgt an einem KTA avant. Zur Verfgung steht ein
multimodales Anionenaustausch-Sulenmaterial, an welches das Produkt unter Hochsalzbedingungen
bindet und durch einen pH-Shift eluiert wird. Dabei kann das Produkt von Verunreinigungen, wie
Abbauprodukten, getrennt werden.
Jeder Prozessschritt wird hinsichtlich Produktmenge, Reinheit und Ausbeute mittels Design of
Experiments optimiert. Diese statistische Versuchsplanung ermglicht den Wirkzusammenhang
zwischen Einflussfaktoren und Zielgren zu ermitteln, um einen robusten Integrierten Bioprozess, der
ber mehrere Produktionszyklen das Zielprotein in gleichbleibender hoher Qualitt liefern kann, zu
erhalten.


39

Barrieren beim Umgang mit Patienten mit Zahnbehandlungsangst -
ein qualitativer Ansatz
Philipp Klose
1
, Daniel R Reimann
2
, Daniel Ldecke
3
, Guido Heydecke
1
1
Poliklinik fr Zahnrztliche Prothetik, Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf, Hamburg

2
Department of Diagnostic and Biological Sciences, University of Minnesota, Minneapolis MN, USA
3
Institut fr Medizinische Soziologie, Sozialmedizin und Gesundheitskonomie (IMSG),
Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf, Hamburg
Zielstellung
Patienten mit Zahnbehandlungsangst sind hufig und stellen die behandelnden Zahnrzte
und deren Team vor besondere Herausforderungen. Die Studie soll mittels eines qualitativen
Ansatzes strukturelle und interpersonelle Barrieren in der ambulanten zahnrztlichen
Versorgung von Patienten mit Zahnbehandlungsangst (ZBA) identifizieren.
Methode
Es wurden bei einer randomisiert ausgewhlten Stichprobe von N=60 Zahnrzten in
Deutschland semistrukturierte problemzentrierte Interviews von durchschnittlich 30 mintiger
Dauer durchgefhrt. Dabei wurden pro Fragebogen 22 offene Fragen gestellt, die durch die
Teilnehmer frei beantwortet wurden. Die Antworttranskripte wurden mittels qualitativer
Inhaltsanalyse nach Mayring codiert und ausgewertet. Es standen insgesamt 1320
Aussagen mit 1400 Codes zur Verfgung. Zur Codierung wurden die Daten inhaltlich
strukturiert, in Unterpunkte geclustert und zusammenfassend analysiert. Aus den
Antwortmustern ergaben sich Typologien mit differenzierten Schwerpunkten und
Verhaltenssymmetrien bezglich Motivation, Methodik, Problematik, Kenntnisse und
Behandlungsergebnisse.
Ergebnisse
Es werden deutliche Unterschiede im Umgang mit Patienten mit Zahnbehandlungsangst
festgestellt. Als strukturelle Probleme werden hufig erhhter Zeit- und Logistikaufwand mit
unverhltnismiger Vergtung genannt. Interpersonelle Probleme werden durch die
Zahnrzte als psychisch belastend und demotivierend beschrieben. Fast alle Zahnrzte
fhlen sich unzureichend in der Lage, diese Patienten ohne Probleme zu versorgen. Obwohl
Behandlungskonzepte bereits vorliegen und bekannt sind, fehlt es oft an der konkreten
Ausfhrung. Das kann wiederum zu interpersonellen Problemen fhren. Vor allem in der
universitren Ausbildung und Weiterbildung zeigten sich wahrgenommene Defizite. Trotz der
hufigen Schwierigkeiten bei der Betreuung von Patienten mit ZBA gibt es zahlreiche
Zahnrzte, welche solche Patienten gerne behandeln. Urschlich dafr sind das Gefhl
rztlichen Handelns oder die Mglichkeit, einem Menschen mehr Lebensqualitt zu bieten.
Es lassen sich acht definierte Behandlungstypen identifizieren.
Schlussfolgerung
Aus den Aussagen von Zahnrzten aus der Praxis konnten wir bewhrte Anstze ermitteln
und verbinden. Die Typologisierung leistet so einen Beitrag zur berprfung bereits
bestehender Konzepte, sowie einen wichtigen Schritt zum Erstellen von Empfehlungen und
Handlungskonzepten.

40

Darstellung von funktionalen und biokompatiblen
Nanokristallkompositen mittels Emulsionspolymerisation
Hauke Kloust
1
, Artur Feld
1
, Christian Schmidtke
1
, Robin Eggers
1
,Jan-Philip Merkl
1
, Elmar Pselt
1
,
Johannes Ostermann
1
, and Horst Weller
1,2
1)
Institute fr Physikalische Chemistry, Universitt Hamburg, Grindelallee 117, 20146 Hamburg.
2)
CAN GmbH, Grindelallee 117, 20146 Hamburg.
Einleitung/Ziel
Nanokristalle haben heutzutage vielfltige Anwendungen als Biomarker. Je nach Art der
Partikel kommen unterschiedliche Detektionsverfahren in Betracht, z.B. MRT oder
Fluoreszenzmikroskopie. Da Nanokristalle nach der Synthese meist hydrophob sind, mssen
sie biokompatibel gemacht werden. Dazu werden in der Regel polymere Liganden
verwendet. Fr rezeptorspezifische Bindungen mssen die Liganden mit funktionellen
Gruppen versehen werden. Dies kann schon fr eine Gruppe synthetisch sehr aufwendig
sein. Weiterhin ist es wnschenswert eine Vielzahl von funktionellen Gruppen in ein
Nanokomposit einbringen zu knnen. In der Emulsionspolymerisation knnen einfach durch
Mischen der funktionellen Monomere die entsprechenden Funktionalitten eingebracht
werden.
Methode
Um Nanokristalle mittels Emulsionspolymerisation zu verkapseln mssen diese zunchst in
Mizellen transferiert werden. Dazu werden sie gemeinsam mit einem Emulgator oder
funktionalem Surfmer in THF gelst und anschlieend in Wasser injiziert. ber das
Verhltnis zwischen Nanopartikeln und Emulgator kann die Clustergre eingestellt werden.
Dies ist insbesondere fr hohe Relaxivitten von zentraler Bedeutung.
Die mit Nanokristallen gefllten Mizellen knnen im Weiteren als Saat in einer
Emulsionspolymerisation fungieren. Dafr werden Monomere zu der Lsung gegeben und
die Emulsionspolymerisation mit Hilfe eines Radikalstarters initiiert. ber die Menge des
verwendeten Monomers lsst sich Dicke der Polymerhlle einstellen. Werden funktionale
Monomere verwendet so lsst sich diese Funktionalitt im Zuge der Polymerisation in die
Nanokomposite einbringen.
Ergebnis/se
Mittel Emulsionspolymerisation verkapselte Nanokristalle zeichnen sich durch eine hohe
kolloidale Langzeitstabilitt aus und sind in einer Vielzahl von biomedizinisch relevanten
Medien stabil. Quantum dots, deren Fluoreszenz leicht durch lschende Substanzen
gemindert wird, werden durch die in der Emulsionspolymerisation erzeugten Hlle fast
vollstndig (~90%) auch gegen stark lschende Ionen wie Cu
2+
(500 q.) abgeschirmt.
Durch Copolymerisation von sauren und basischen Moleklen konnte das Zeta-Potenzial
zwischen -31 und +30 mV variiert werden. Copolymerisation von alkyliertem Biotin
ermglicht spezifische Bindung von Avidin-Konjugaten. In dot blot Experimenten konnten an
Avidin-beschichteten Membranen die Biotin-funktionalisierten Nanokristalle nachgewiesen
werden. Copolymerisation von Disulfiden ermglichte die Anlagerung von Gold und somit die
Darstellung von Nanohybriden.
Fazit/Schlussfolgerung
Mit Hilfe der Emulsionspolymerisation ist es gelungen ohne Aufwendige
Ligandenmodifikation, sondern einfach durch Mischen von funktionellen Monomeren und
Surfmeren Nanokristalle zu funktionalisieren. Diese Technik erlaubt darber hinaus die
Position der funktionellen Gruppe im Komposit zu steuern. Dadurch wir eine kombinatorische
Synthesestrategie ermglicht, die mit den gngigen Ligandensystemen nicht zugnglich ist.

41

Regulation des Lipidstoffwechsels durch induzierbare braune
Adipozyten
Lucia Krott
Institut fr Biochemie und Molekulare Zellbiologie
Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf

Whrend das weie Fettgewebe primr der Speicherung von Lipiden dient, verbrennt das
braune Fettgewebe Fettsuren, um Wrme zu erzeugen und somit den Krper vor Klte zu
schtzen. Nach Klte tauchen im weien Fettgewebe induzierbare braune, sogenannte
beige oder brite (brown-in-white) Adipozyten auf, welche den klassischen braunen
Adipozyten in Funktion und Morphologie sehr hnlich sind. Jedoch ist die genaue Funktion
und metabolische Aktivitt dieser induzierbaren braunen Adipozyten nur wenig verstanden.
Das Ziel dieser Doktorarbeit ist es, die Signifikanz der induzierbaren braunen Adipozyten fr
den Energie- und Lipidstoffwechsel zu untersuchen.
Wir arbeiten mit einem transgenen Mausmodell, welches den Diphterie Toxin (DT)- Rezeptor
unter der Kontrolle des Ucp1 Promotors exprimiert. Da das Ucp1 ein spezifischer Marker
thermogener Fettzellen ist, wird eine konditionelle Ablation Ucp1-positiver brauner und
induzierbarer Fettzellen durch Behandlung mit DT ermglicht. Im Anschluss wird durch die
Behandlung mit einem
3
-Agonisten (CL316,243) selektiv die Entwicklung der induzierbaren
braunen Adipozyten erreicht. Dadurch kann selektiv der Einfluss dieser Fettzellen, -
unabhngig vom braunen Fettgewebe - auf den Lipidstoffwechsel untersucht werden. Die
Auswertung erfolgt mittels metabolischer Tests, quantitativer PCR, Western-Blot, Histologie
und Blutlipid-Analysen.
Erste Daten zeigen, dass die DT-Behandlung zu einem signifikanten Gewichtsverlust des
interskapularen braunen Fettdepots fhrte. Zudem bewirkte das DT einen Verlust des
typischen histologischen Phnotyps der braunen Adipozyten im interskapularen Depot. Als
Folge konnte das fr die Wrmegewinnung essentielle Ucp1 auf Proteinebene nicht mehr
nachgewiesen werden. Im Blutplasma zeigte sich eine DT-bedingte Senkung der
Triglyzeride, die mit einem signifikanten Cholesterin Anstieg korrelierte.
Das von uns verwendete Protokoll erzeugt Muse, welche keine Ucp1-positiven braunen
Adipozyten mehr besitzen. Dadurch ermglicht dieses neuartige Mausmodell, die biologische
Relevanz der induzierbaren braunen Adipozyten zu untersuchen und bildet die Grundlage fr
die Therapie von bergewicht und dessen Folgeerkrankungen durch den Einsatz dieser
Zellen.

42

Gerichtete Aufnahme von Therapeutika durch Aptamere
Sven Kruspe
1)
, Cindy Meyer
2)
& Uli Hahn
1)
.
1)
Uni Hamburg
2)
Rockefeller University New York
Einleitung/Ziel
Als Aptamere werden einzelstrngige Oligonukleotide (DNA oder RNA) bezeichnet, die
aufgrund ihrer dreidimensionalen Faltung die Fhigkeit besitzen, Zielmolekle spezifisch zu
binden. Dies ist vergleichbar mit der Bindung von Antikrpern an Antigene.
In dieser Arbeit wird das 19 Nukleotide lange RNA-Aptamer AIR-3A verwendet, um einen
Wirkstoff gezielt in Zellen einzuschleusen. AIR-3A bindet an den humanen Interleukin-6-
Rezeptor (hIL6R) und wird mit diesem in die Zielzelle endozytiert. AIR-3A trgt in diesem Fall
einen sogenannten Photosensitiser (PS), der unter Anregung von langwelligem Licht
zytotoxisch wirkt. Photosensitiser werden in der Photodynamischen Therapie (PDT) zur
Behandlung kutaner Lymphome oder operativ zugnglicher Tumore eingesetzt. Ein
entscheidender Nachteil der konventionellen PDT mit freien Photosensitisern ist die
Schdigung von gesundem Gewebe. Die gerichtete PDT unter Verwendung von Aptameren
bietet die Mglichkeit, den phototoxischen Effekt exklusiv auf eine Zellart zu beschrnken
und dadurch die Schdigung gesunden Gewebes zu verhindern.
Methoden
Chemische Modifikation von AIR-3A, Durchflusszytometrie und konfokale Laser Mikroskopie
zur Detektion der Internalisierung in den Zellen und der spezifischen Zytotoxizitt.
Ergebnis/se
In Zellkultur-Experimenten konnte gezeigt werden, dass mit dem verwendeten Aptamer-
Photosensitiser-Konjugat der zytotoxischen Effekt der PDT selektiv auf hIL6R positive Zellen
erzielt werden kann.
Fazit/Schlussfolgerung
Die Ergebnisse aus dieser Zellkulturstudie erffnen Perspektiven fr die in vivo Anwendung
gerichteter PDT unter Verwendung von Aptameren.


43

In vitro Selektion von RNA-Aptameren fr den Interleukin-6
Rezeptor
MITTELBERGER, F.
1
; MEYER C.
1
; WAETZIG, G.
2
; HAHN, U.
1*
1. Department Chemie, MIN-Fakultt, Institut fr Biochemie u. Molekularbiologe, Universitt
Hamburg, Martin-Luther-King-Platz 6, 20146 Hamburg
2. CONARIS Research Institute AG, Schauenburgerstr. 116, 24118 Kiel
* Kontakt: Prof. Dr. Ulrich Hahn, uli.hahn@uni-hamburg.de
Aptamere sind einzelstrngige RNA- oder DNA-Oligonukleotide, die niedermolekulare
Molekle, Proteine, Viren oder ganze Zellen erkennen und binden. Dabei wird mit einer
Bibliothek aus 10
13-15
verschiedenen Nukleinsuremoleklen mit einer randomisierten
Kernsequenz begonnen. Die Selektion von bindenden Oligonukleotidspezies erfolgt durch
das sogenannte SELEX- (Systematic Evolution of Ligands by EXponentional enrichment)
Verfahren. In diesem zyklischen Prozess werden ber 5 15 aufeinander folgenden
Selektionsrunden RNA- oder DNA-Aptamere angereichert, die ein Zielmolekl mit sehr hoher
Affinitt und Spezifitt binden.
Interleukin-6 (IL-6) ist ein sekretiertes 26 kDa Glycoprotein, bestehend aus 212
Aminosuren, die in vier -Helices angeordnet sind. Es spielt eine Schlsselrolle bei
Entzndungen und ist der Hauptfaktor in der Induktion der Akute-Phase-Proteinsynthese.
Ergebnisse aus Mausmodell und klinischen Studien am Menschen legen eine frdernde
Wirkung von IL-6 fr Pathologie und Fortschreiten verschiedener Krankheiten wie
chronischer Darmentzndung, multiplem Myelom, rheumatischer Arthritis und Morbus Crohn
nahe.
Die Signalvermittlung des IL-6 erfolgt durch Binden an den Interleukin-6 Rezeptor (IL-6R) der
infolge dessen mit zwei signalbermittelnden Glycoprotein 130 (gp130) interagiert. Die
Komplexbildung fhrt zur Dimerisierung der cytoplasmatischen Domnen von gp130, die die
Transphosphorylierung von Janus Kinasen (JAK) und Rekrutierung von STAT3-Proteinen
bewirkt.
Eine mgliche Strategie die rezeptorvermittelte Signalbertragung, ausgelst durch IL-6, zu
inhibieren, ist die Blockierung der Ligandenbindedomne des IL-6R. Zu diesem Zweck
werden RNA-Aptamere mit dem IL-6R als Zielmolekl selektiert. Die Selektion erfolgt ber
Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA), wodurch die gezielte Anreicherung von stark
affinen Oligonukleotiden ermglicht wird. Aufgrund der starken Anflligkeit von RNAs
gegenber Ribonukleasen wird fr die Selektion 2'-deoxy 2'-fluoro-Pyrimidin-modifizierte
RNA verwendet, die eine deutlich hhere Stabilitt gegenber RNAsen aufweist.



44

Nachweis von in vivo produzierter RNA mittels Pumilio und Split-
GFP
Marina Mutas
Bachelorarbeit
Im Arbeitskreis von JProf. Andrea Rentmeister
Universitt Hamburg
Einleitung/Ziel
Neue Visualisierungsmethoden von Ribonukleinsuren (RNA) innerhalb der Zelle sind
notwendig, um deren Lokalisierung und damit verbundenen zellulren Funktionen sowie
Prozessierung zu verstehen. Es existieren bereits Visualisierungsmethoden basierend auf
fluoreszenzmarkierten Oligonukleotidsonden (z.B. molekulare Beacons) oder RNA-
bindenden Proteinen wie beispielsweise Pumilio.
Pumilio gehrt zur Familie der PUF-Proteine und bindet sequenz-spezifisch an eine 8 nt
Sequenz innerhalb der Ziel-RNA. Die RNA-bindenden Proteine knnen zur Visualisierung mit
autofluoreszierenden Proteinen, wie dem grn fluoreszierenden Protein (GFP), gekoppelt
werden. Ozawa et. al. verwendeten beispielsweise zur Lokalisierung von mitochondrialer
RNA in lebenden Zellen zwei Pumilio-Proteine, die mit je einer Hlfte des GFPs (Split-GFP)
verknpft waren. Durch die Bindung der Pumilio-Proteine an ihre spezifische Basensequenz
in rumlicher Nhe, konnten die GFP-Fragmente komplementieren und fluoreszierten.
Im Arbeitskreis von JProf. Dr. Rentmeister wurde die Methode der tetramolekularen
Fluoreszenzkomplementierung (TetFC) entwickelt.
Bei der TetFC handelt es sich um eine Visualisierungsmethode, bei der an eine spezifische
RNA-Sequenz (boxAB) zwei RNA-bindende Pumilio-Proteine (Pum-WT und Pum-Var1)
binden, die jeweils mit einer der elf -Schleifen des GFPs (S10, S11) verknpft sind. Somit
ergeben sich die Fusionsproteine S10-Pum-WT und Pum-Var1-S11. Nach sequenz-
spezifischer Bindung der beiden Proteine an die Ziel RNA und Zugabe des Fragments
GFP1-9 kann das GFP komplementieren und fluoresziert.
Innerhalb der Bachelorarbeit sollte die bereits etablierte Methode der tetramolekularen
Fluoreszenzkomplementierung fr in vitro RNA auf in vivo produzierte RNA erweitert werden.
Methode
Fr die Erweiterung der tetramolekularen Fluoreszenzkomplementierung auf in vivo
produzierte RNA wurde zunchst der Einfluss von Gesamt-RNA auf die
Visualisierungsmethode untersucht. Hierfr wurde die Gesamt-RNA von E. coli Zellen isoliert
und je 10 g der Gesamt-RNA zu unterschiedlichen Konzentrationen der in vitro produzierten
RNAs boxAB (enthlt die spezifischen Bindungsstellen der Pumilio-Proteine) und der
Negativkontrolle boxAC (enthlt nur eine Bindungsstelle) hinzugefgt. Zur Visualisierung
wurden konstante Konzentrationen der, in E. coli Zellen produzierten und mittels
Affinittschromatographie gereinigten, Pumilio-Proteine S10-Pum-WT und Pum-Var1-S11
hinzugefgt und 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Anschlieend wurde das
Fragment GFP1-9 im berschuss hinzugefgt, und die Fluoreszenzkomplementierung
spektrometrisch verfolgt.
Fr die Untersuchung der in vivo produzierten RNA wurde zunchst die Geninformation fr
die RNA-Sequenzen boxAB oder boxAC in das Plasmid pSK17 kloniert und damit E. coli
Zellen transformiert. Nach RNA-Produktion der E. coli Zellen wurde die Gesamt-RNA mittels
Phenol-Chloroform-Extraktion isoliert und auf analoge Weise wie oben beschrieben fr die
Fluoreszenzkomplementierung eingesetzt.

43

Ergebnis/se
Die Fluoreszenzmessung der in vitro produzierten RNA boxAB in Anwesenheit von Gesamt-
RNA wies einen konzentrationsabhngigen Fluoreszenzanstieg auf. Innerhalb von 15
Stunden stieg die Fluoreszenz, wobei die hchste RNA-Konzentration die maximalste
Intensitt und die niedrigste RNA-Konzentration lediglich eine minimale Fluoreszenzintensitt
aufzeigte. Die Fluoreszenzkurve der Negativkontrolle boxAC, die lediglich eine
Bindungsstelle fr den PumWT besitzt, stieg innerhalb der Messung lediglich minimal,
sodass eine Differenzierung zwischen der Negativkontrolle (keine Fluoreszenz) und der
Positivkontrolle mglich war. Die Klonierung der Geninformation fr die RNAs boxAB und
boxAC in den pSK17-Vektor verlief erfolgreich. Jedoch konnte mittels der isolierten Gesamt-
RNA aus den Zellen, welche die boxAB bzw. boxAC RNA produzierten, keine
Fluoreszenzkomplementierung gemessen werden.
Fazit/Schlussfolgerung
Die TetFC konnte mit der in vitro produzierten RNA mit hinzugefgter Gesamt-RNA
erfolgreich durchgefhrt werden. Die Fluoreszenz wurde konzentrationsabhngig zur Ziel-
RNA nachgewiesen. Die Negativkontrolle hingegen erzeugte keine Fluoreszenz. Somit
konnte nachgewiesen werde, dass die Gesamt-RNA nicht als Konkurrent fr die in vitro
transkribierte RNA fungiert. Die Klonierung der Geninformationen fr die RNAs boxAB und
boxAC konnten erfolgreich hergestellt werden. Jedoch konnten keine Fluoreszenz fr die
RNAs box AB und boxAC detektiert werden. Eine mgliche Ursache hierfr knnte eine
unvollstndige Expression der RNA durch die E. coli Bakterien sein. Anderweitig knnte eine
geringe Konzentration der Ziel-RNA innerhalb der Gesamt-RNA lediglich zu einer geringen
Fluoreszenz fhren, die qualitativ nicht von der Negativkontrolle unterscheidbar ist
(Nachweisgrenze TetFC 4 nM).


46

Thermophilic Anaerobic Digestion of Liquid Manure Leading to a
Successful Sanitation Effect
Sandra Off
#
, Sebastian Antonczyk, Paul Scherer
Hamburg University of Applied Sciences, Faculty Life Sciences, Lohbruegger Kirchstr. 65, 21033
Hamburg-Bergedorf, Germany
#
Sandra.off@haw-hamburg.de,
Thermophilic anaerobic digestion (temperature >51C) leads to in addition, a
successful sanitation effect. Digestate is the liquid or solid residue from the
fermentation of biomass in a biogas plant. It is mostly used as an agricultural
fertilizer, because of its high nutrient content. According to the new German legal
basis (Erneuerbare-Energien-Gesetz: EEG 2012) the use of corn or other renewable
resource plants for methane production should be reduced (up to 60% (w/w) mono-
substrate). Thus, the admixing with liquid manure becomes more attractive with
energy recovery and additional compensation from the EEG. The use of untreated
manure as organic fertilizer on agricultural land leads to a closed nutrient cycle.
However, it can possibly result in a cycle of pathogens. The spread of pathogens
(e.g. EHEC) can be prevented by operating biogas plants under thermophilic
conditions. Furthermore, it would leave open the possibility to bring out the digestate
in water protection areas. Preliminary results of the investigation of a thermophilic
biogas plant with over 65% (w/w) cow manure show a reduction of hygiene-relevant
germs at least by a factor of 1000 after fermentation. The microorganisms studied
include Enterobacteriaceae (E. coli, coliforms and Salmonella) as well as enterococci
(e.g. E. faecalis). Investigations regarding the determination of relevant germs were
carried out using plating method with different (non)selective nutrient media. The
monitoring period for all important parameters such as substrate, metabolites,
retention time and temperature of the biogas plant lasted for more than one year.


47

Simulation der Fluid-Struktur-Interaktion an der Schnittstelle zu
knstlichen Blutgefen
L. Radtke
1)
, A. Dster
1)
, S. Debus
2)
, T. Klbel
2)
, A. Larena-Avellaneda
2)
1)
Technische Universitt Hamburg-Harburg
2)
Universitres Herzzentrum Hamburg, Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf
Einleitung
Strmungen an oder in elastischen Strukturen rufen im Allgemeinen eine Verformung dieser
hervor, welche ihrerseits das Strmungsverhalten beeinflusst. Am Institut fr Konstruktion
und Festigkeit von Schiffen an der TUHH wird Software zur Simulation solcher
Problemstellungen entwickelt.
Das Ziel der Arbeit ist es, mit den entsprechenden Methoden ein Modell zur Simulation von
Blutstrmungen in greren Arterien und knstlichen Blutgefen zu erstellen.
Damit soll es mglich sein, das Strmungsfeld, sowie die Verformungen der Gefwand fr
den Ausschnitt eines Blutgefes vorherzusagen. Es knnen somit verschiedene
Ausfhrungen der Verbindungen zwischen Arterien und knstlichen Blutgefen, so
genannten Anastomosen, verglichen und bewertet werden.
Methode
Zur Simulation der Fluid-Struktur-Interaktion wird ein partitionierter Ansatz verwendet. Die
Verformung der Struktur und das Strmungsfeld werden getrennt voneinander berechnet.
Um die Eigenschaften der pulsierenden Strmungen in Blutgefen mglichst genau
abzubilden, werden spezielle Randbedingungen vorgegeben. Am Einlass des betrachteten
Ausschnitts wird ein Geschwindigkeitsprofil, am Auslass ein davon abhngiger Druck
vorgegeben. Als zentrale Eingangsgre dient somit der zeitliche Verlauf des Flusses durch
den betrachteten Ausschnitt.
Eine weitere Herausforderung bei der Erstellung eines geeigneten Modells ist die Erstellung
der bentigten Rechengitter. Diese ist fr beliebig geformte Gefe automatisiert worden
und beinhaltet die Modellierung verschiedener Schichten der Gefwand. Es knnen
beliebige rumliche Verlufe des Blutgefes, sowie vernderliche Durchmesser und
Wandstrken bercksichtigt werden.
Ergebnisse
Mit dem erstellten Modell ist es mglich, die Fluid-Struktur-Interaktion in Blutgefen mit
einem akzeptablen Rechenaufwand zu simulieren und konsistente Ergebnisse zu erzielen.
Die entscheidende Gre zur Bewertung verschiedener Alternativen, sowohl bei der
Ausfhrung von Anastomosen, als auch bei der Wahl der Materialien fr die knstlichen
Blutgefe sind die auftretenden Wandschubspannungen. Die bisherigen Untersuchungen
zeigen einen deutlichen Anstieg dieser mit zunehmender Steifigkeit der Gefwand. Zudem
wurde eine starke Abhngigkeit der Wandschubspannungen von der Geometrie festgestellt.
Fazit
Es konnte gezeigt werden, dass die beschriebenen Methoden sich zur Simulation von
Blutstrmungen eignen. Die bisher erhaltenen Ergebnisse stimmen qualitativ mit denen aus
der Literatur ber ein. Aufgrund der vielen beeinflussenden Faktoren ist eine Validierung des
Modells jedoch nur fr bestimmte Situationen mglich. Zur weiteren Verbesserung des
Modells ist ein Vergleich mit Messdaten unter Verwendung realer Daten, sowohl fr die
Randbedingungen, als auch fr die Geometrie der Blutgefe, ein sinnvoller nchster Schritt.

48

Validierung einer Nachweismethode fr oxidative posttranslationale
Protein-Modifikationen
Svea Riek, Lea Kanitz, Konstantina Stathopoulou, Angelika Piasecki and Friederike Cuello.
Institut fr Experimentelle Pharmakologie und Toxikologie, Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf,
Martinistrasse 52, 20246 Hamburg
Hintergrund.
Reversible oxidative posttranslationale Protein-Modifikationen (OPTMs) wie zum Beispiel die
Glutathionylierung oder die Ausbildung von Intra- und Interprotein-Disulfidbrcken spielen eine
wichtige Rolle bei der intrazellulren (patho)physiologischen Signalweiterleitung. Im Vergleich
zum Nachweis Kinase-abhngiger Protein-Phosphorylierungen (phosphospezifische
Antikrper, Phospho-Protein-Frbungen wie ProQ und Phos-Tag) existiert fr die Identifikation
von Protein-OPTMs nur ein limitiertes Spektrum komplexer zeitaufwndiger analytischer
Nachweismethoden (LC-MS/MS, Proteomics).
Ziel.
Das Ziel des Projektes bestand in der Validierung einer zeit-und kostengnstigen
molekularbiologischen Nachweismethode fr Protein-OPTMs.
Methoden und Ergebnisse.
Zunchst wurde ein His
6
-markiertes rekombinantes Fusionsprotein hergestellt, das insgesamt
5 Protein-Cystein-Reste enthielt. Das rekombinante Protein wurde in vitro durch Inkubation mit
oxidiertem Glutathion modifiziert. Anschliessend wurde eine Alkylierung der freien Cystein-
Thiol-Reste durchgefhrt, unter Erhalt der oxidative modifizierten Protein-Cystein Reste. Nach
Reduktion der OPTM(s) zu reduzierten Cystein-Thiolgruppen wurde erneut alkyliert, in diesem
Fall mittels eines pegylierten Alkylanz mit einem definierten Molekulargewichts-Tag von 5 kDa.
Die Detektion von oxidativ modifiziertem rekombinantem Protein konnte nun mittels Standard
Western Immunoblot-Analyse unter Verwendung eines anti-His Antikrpers durchgefhrt
werden, wobei jeder zuvor oxidierte Protein-Cystein Rest einen Molekulargewichts-Shift von 5
kDa im Vergleich zur nicht-modifizierten Kontroll-Gruppe bewirkte. Dies resultierte in einer
Molekulargewichtsverschiebung von ca 5 kDa, was einer oxidativen Glutathionylierung unseres
rekombinanten Fusionsproteins an einem von 5 Protein-Cystein Resten entspricht. Dieses
Ergebnis wurde anschliessend durch Ortsgerichtete-Mutagenese, Herstellung mutierter
rekombinanter Fusionsproteine und Western Immunblot- Analyse besttigt.
Schlussfolgerung.
Mittels der hier beschriebenen Nachweismethode knnen Protein-OPTMs zuverlssig in vitro
nachgewiesen werden, unter Zuhilfenahme von molekularbiologischen Standardmethoden,
unter minimalem Zeit-und Kostenaufwand.
Ausblick.
Zuknftig planen wir, diese PEG-Switch-Methode fr Zell-und Gewebehomogenate zu
optimieren, um OPTMs endogener Proteine nachzuweisen.


49

Listeria monocytogenes
Gezielte Inhibition lebensmittelpathogener Mikroorganismen
S. Sarge, S. Schssler, K. Wegner, E. Anamoa-Wallace, J. Klehm, I. Haase, T. Grwert, M. Fischer
HAMBURG SCHOOL OF FOOD SCIENCE, Institut fr Lebensmittelchemie, Universitt Hamburg
Einleitung und Zielsetzung
Die Kontamination von Lebensmitteln mit humanpathogenen Mikroorganismen stellt ein
stndiges Risiko fr den Verbraucher dar. Zu den hufig bertragenen Infektionen gehrt
neben der Salmonellose und der Campylobacteriose auch die Listeriose, deren hufigster
Erreger Listeria monocytogenes ist. Diese Infektion nimmt eine Sonderposition unter den
lebensmittelbertragenen Krankheiten ein, da sie vor allem fr Schwangere bzw. das
Ungeborene eine besondere Gefhrdung birgt. Dies ist darin begrndet, dass die Listerien in
der Lage sind, die Plazenta-Barriere zu berwinden und so Frh- und Totgeburten
hervorrufen knnen.
Die Listeriose kann bisher noch mit verschiedenen Antibiotika behandelt werden, wobei
jedoch eine Resistenzentwicklung der Listerien als wahrscheinlich gilt. Des Weiteren kann
der Erreger intrazellulr vorkommen, was eine Therapie zustzlich erschwert. Fr die
Entwicklung alternativer Wirkstoffe gegen die Listeriose sollten gezielt Inhibitoren fr ein
ausgewhltes, essentielles Enzym des wichtigsten Erregers L. monocytogenes gesucht
werden.
Da L. monocytogenes einen unvollstndigen Citratzyklus besitzt, wird das wichtige
Stoffwechselintermediat Oxalacetat ausschlielich ber die Carboxylierung von Pyruvat
gebildet. Diese Reaktion wird von der Pyruvatcarboxylase (PYC) katalysiert, welche folglich
essentiell fr L. monocytogenes ist und sich daher als Drugtarget eignet.
Methoden und Ergebnisse
Das entsprechende Zielgen wurde an die Codon Usage des Hosts Escherichia coli
angepasst, kloniert, rekombinant exprimiert, ber zwei chromatographische Verfahren
(Nickelaffinittschromatographie und Gelfiltrationschromatographie) prparativ aufgereinigt
und charakterisiert (Bestimmung der kinetischen Parameter, Cofaktorbestimmung,
Sequenzierung). Fr die Bestimmung der spezifischen Aktivitt wurde ein Hilfsenzym-
gekoppelter photometrischer Assay entwickelt.
Mit Hilfe der dargestellten rekombinanten PYC wurden im High Throughput Screening (HTS)
einige tausend Verbindungen auf ihre Hemmwirkung untersucht. Fr alle Hits wurden
Counterscreens gegen das Hilfsenzym sowie IC
50
-Bestimmungen durchgefhrt.
Schlussfolgerung und Ausblick
Mit Hilfe des hergestellten Enzyms konnten im HTS mehrere Inhibitoren fr die PYC aus
L. monocytogenes identifiziert werden. Diese mssen abschlieend einem weiteren
Counterscreen gegen das humane Analogon unterworfen werden, da sich eine fehlerhafte
Funktion der humanen PYC im menschlichen Organismus in leichten bis schwerwiegenden
Krankheitsbildern uert. Nur Substanzen ohne inhibitorische Wirkung auf das humane
Enzym sind daher geeignete Kandidaten fr die Suche nach alternativen Wirkstoffen gegen
die Listeriose.

30

Malaria Entwicklung neuer Antiinfektiva durch die Inhibition von
Enzymen aus der Mevalonat-unabhngigen Terpenbiosynthese
Schding, Alexandra; Grwert, Tobias; Fischer, Markus
HAMBURG SCHOOL OF FOOD SCIENCE, Institut fr Lebensmittelchemie,
Universitt Hamburg
Einleitung und Zielsetzung
Malaria ist eine tropische Krankheit, die durch Parasiten der Gattung Plasmodium ausgelst
wird. Der Erreger der meist tdlich verlaufenden Malaria tropica ist
Plasmodium falciparum. Die Krankheit ist durch immer wiederkehrende Fieberschbe
gekennzeichnet, die auf die ungeschlechtliche Vermehrung des Parasiten im menschlichen
Krper zurckzufhren sind. Die bertragung erfolgt durch den Stich der Anopheles Mcke.
Dies ist der Grund fr die schnelle Verbreitung der Krankheit.
Ein hohes Risiko bei Malaria und anderen Krankheiten ist die Ausbildung von
Antibiotikaresistenzen der Erreger. Es muss daher stets nach neuen, potentiellen Wirkstoffen
gesucht werden. Hufig werden dazu Enzyme aus essentiellen Stoffwechsel- oder
Biosynthesewegen der Erreger als mgliche Targets untersucht.
Die Terpenbiosynthese, die u.a. zur Synthese von Hormonen und Vitaminen dient, ist fr alle
Lebewesen essentiell. In vielen pathogenen Mikroorganismen, wie P. falciparum, werden
Terpene ausschlielich ber den Mevalonat-unabhngigen Biosyntheseweg synthetisiert. Da
dieser Stoffwechselweg nicht im Menschen vorkommt, stellen die Enzyme der Mevalonat-
unabhngigen Terpenbiosynthese potentielle Targets fr neue Antibiotika dar. Durch die
Inhibition eines Enzyms dieses Biosyntheseweges, wie zum Beispiel der
4-diphosphocytidyl-2C-methyl-D-erythritol-Kinase (IspE) knnen keine Terpene synthetisiert
werden, wodurch es zu einer Hemmung des Wachstums der Mikroorganismen kommt.
Methoden und Ergebnisse
Die Sequenz des Zielgens von IspE wurde an die codon usage von Escherichia coli
angepasst und in ein geeignetes Expressionssystem kloniert. Nach der rekombinanten
Expression in E. coli erfolgte eine Reinigung des Enzyms mit Hilfe der Nickelaffinitts- und
der Gelfiltrationschromatographie. Die spezifische Aktivitt des gereinigten Enzyms wurde
ber einen mit Hilfsenzymen gekoppelten photometrischen Assay bestimmt. IspE aus
P. falciparum konnte mit Hilfe der erluterten Schritte erfolgreich dargestellt und aufgereinigt
werden. Die Aktivittsbestimmung erwies, dass es sich hierbei um ein aktives Enzym
handelt, dessen kinetische Parameter mit Hilfe des Assays bestimmt werden knnen.
Schlussfolgerung und Ausblick
Das dargestellte Enzym kann mit Hilfe weiterer Optimierungen des Assays zur Suche nach
geeigneten Inhibitoren eingesetzt werden. Dazu wird ein High-Throughput-Screening (HTS)
durchgefhrt, wobei aus einer Bibliothek aus 100.000 Substanzen mgliche Hemmstoffe
gegen IspE aus P. falciparum gesucht werden. Potentielle Inhibitoren mssen abschlieend
in einem sogenannten Counter-Screening gegen die Hilfsenzyme des Assays getestet
werden und knnen anschlieend den Prozess der Wirkstoffentwicklung durchlaufen.


31

Vom Signalpeptid zur Stoffwechselerkrankung: Eine neuartige
Mutation im kardiovaskulren Risikofaktor ApoA-V
Christian Schlein
1
, Kirstin Albers
1
, Alexander Bartelt
1,2
, Kirsten Wenner
3
, Peter Lohse
4
, Joerg
Heeren
1
, Ren Santer
3
& Martin Merkel
1,5
1
Institut fr Biochemie und Molekulare Zellbiologie,
2
Klinik fr Orthopdie,
3
Klinik und Poliklinik fr
Kinder- und Jugendmedizin, Universittsklinikum Hamburg-Eppendorf
4
Institut fr Klinische Chemie Grohadern, Ludwig-Maximilians-University, Mnchen
5
1. Medizinische Abteilung, Asklepios Klinik St. Georg, Hamburg
Einleitung/Ziel
Lipide werden im Blut durch Plasmalipoproteine transportiert. Das in der Leber hergestellte
Apolipoprotein A-V (ApoA-V) ist hierbei ein wichtiger Regulator des Plasmatriglyzeridspiegels
und ist mit kardiovaskulren Erkrankungen assoziiert. Hier beschreiben wir die Identifikation
und Funktionsanalyse einer neuartigen Deletionsmutation in der kodierenden Sequenz des
Signalpeptides von ApoA-V in einem 11 Monate alten Sugling.
Methode
Im Hinblick auf verschiedene Gene, deren Mutationen mit hohen Triglyzeridspiegeln
einhergehen, wurde das Genom des Patienten teilsequenziert. Das Plasmalipoproteinprofil
des Suglings wurde per Lipidbestimmung, ELISA und Western Blot charakterisiert. Um die
intrazellulre Prozessierung der Mutante zu untersuchen, wurden primre Maus-ApoA-V-
defiziente Hepatozyten mit humanen Wild-Typ oder mutiertem ApoA-V transfiziert. Die
Analyse des intrazellulren Transports erfolgte mittels Immunofloureszenz; die Sekretion
wurde durch Western-Blots charakterisiert.
Ergebnisse
ApoA-V ist durch die Mutation des Signalpeptides im Plasma des Suglings nicht
nachweisbar und fhrte klinisch zu einem Chylomikronmie-Syndrom mit assoziierter
Pankreatitis. Die ApoA-V-Mutante wird im intrazellulren Sorting statt an die
Plasmamembran an Lipid droplets fehlgeleitet und gelangt damit kaum noch funktionell aus
der Zelle.
Fazit/Schlussfolgerung
Die neuartige Mutation des Signalpeptids von ApoA-V fhrt zu einer Fehlsortierung an Lipid
droplets und erklrt damit den nicht nachweisbaren ApoA-V-Spiegel und die damit
verbundene schwere Hypertriglyzeridmie im Sugling. Da die Funktion, insbesondere die
Sekretion, von ApoA-V nicht vollstndig geklrt ist, kann die Charakterisierung dieser neuen
Mutante einen Beitrag zum Verstndnis der Zellbiologie und der physiologischen Sekretion
von ApoA-V liefern.

32

Multifunctional Nanocontainers with Controllable Surface
Properties for Diagnostic Imaging
Christian Schmidtke
1
, Jan-Philip Merkl
1
, Johannes Ostermann
1
, Hauke Kloust
1
, Huong Tran
1
, Robin
Eggers
1
, Elmar Pselt
1
, and Horst Weller
1,2
1)
Institute of Physical Chemistry, University of Hamburg, Grindelallee 117, 20146 Hamburg
2)
Center for Applied Nanotechnology, Grindelallee 117, 20146 Hamburg
Einleitung
Nowadays nanoparticles (NPs) are playing an increasingly important role in the field of
biomedical applications, such as magnetic iron oxide (FeOx) NPs which are used as contrast
agent for magnetic resonance imaging and hyperthermia treatment of tumors. Whereas
fluorescent semiconductor nanoparticles, also called Quantum dots (QDs), have attracted
extensive scientific interest owing to their promising potential applications in the fields of
biological labeling and imaging. QDs exhibit excellent optical features, a high photo-stability
and a narrow size-dependent emission.
The control of such NPs features requires synthetic strategies in high boiling organic
solvents. Consequently, it is necessary to modify their surface to transfer them to aqueous
systems. What are the requirements for a good ligand system? The ligands should preserve
the physical properties of the NPs and make them water-soluble, long-time stable,
biocompatible and nontoxic. For many biological applications the size of the nano-composite
is important to avoid fast hepatic or renal clearance. For targeted imaging or for targeted
drug release, any NPs must be equipped with recognition molecules or a specific
functionality.
Methode
We would like to present a novel micellar encapsulation technique which fulfills nearly all the
requirements mentioned above. This system is based on a ligand exchange procedure with
the poly(isoprene)-diethylentriamine (PI-N3) and the subsequent ligand addition with
poly(isoprene)-b-poly(ethylene glycol) (PI-b-PEG). As previously reported, ligand systems
are usually based on self-organization by hydrophobic effects and/or coordinative bonds.
Here, both effects were combined and expanded to include the possibility of cross-linking.
This leads to unique stability in aqueous media and ensures rigidity against biodegradation.
Due to the synthesis of diblock copolymer by living anionic polymerization the chain end can
be tailored by different strategies.
Ergebnisse
PI-b-PEG encapsulated NPs showed an outstanding stability in different media and under
dilution while retaining physical properties of the particles material. QDs and FeOx-NPs were
successfully used for antibody-mediated imaging of tumors in vivo.
[1]
We are able to control
the micellar size, their surface chemistry and charge using the PI-b-PEG as a
functionalization platform. All constructs showed no toxicity from 0.001 to 1 M in standard
WST and LDH assays on A549 cells, as well as controllable unspecific cellular uptake.
Fazit
We presented a new strategy for micellular-encapsulating nanoparticles with functionalizable
PI-b-PEG diblock copolymers. The micelles show a high stability and inertness in the
biological environment. It is possible to control the surface properties of the resulting
nanocontainers and to use them for biomedical imaging in in vivo experiments.
[1] E. Pselt et al. ACS Nano 2012, 6, 33463355.

33

RNA-Strukturanalyse mittels SHAPE
Kristina Szameit
1)
, Cindy Meyer
2)
, Marco Matthies
1)
, Andrew Torda
1)
, Uli Hahn
1)
.
1)
Uni Hamburg
2)
Rockefeller University New York
Einleitung/Ziel
Die Sekundr- und daraus resultierende Tertirstruktur ist essentiell fr die biologische
Funktion von RNA. Eine Strukturvorhersage auf Basis thermodynamischer Parameter ist
zwar mglich aber nicht immer genau. Genaue Vorhersagen wrden zur Aufklrung der
Struktur-Funktions-Beziehung beitragen.
Ziel der vorliegenden Arbeit war die Etablierung und Anwendung der Methode SHAPE
(Selektive 2-Hydroxyacylierung und Primer-Extension) zur Aufklrung der Sekundrstruktur
bioinformatisch relevanter RNA-Molekle.
Am Institut fr Bioinformatik wurde ein neuer Algorithmus zum Design von RNA-Moleklen
entwickelt. Ausgehend von der Sekundrstruktur einer bekannten tRNA aus Hefe wurde die
die RNA 4-arm-junction entworfen. Die vorhergesagte Struktur sollte anhand der SHAPE-
Ergebnisse verifiziert werden.
Methode
Die Vorhersage von RNA-Sekundrstrukturen erfolgt mithilfe bioinformatischer Algorithmen
(z.B. durch das Programm Mfold, dessen Grundlage das Nearest Neighbour Model bildet).
Beim Sequenzdesign wird eine definierte Struktur vorgegeben und nach einer dazu
passenden Basensequenz gesucht.
Zur Analyse der Sekundrstruktur eignet sich der Einsatz von Chemical Probing Methoden,
wozu auch die SHAPE-Methode gehrt.
Dabei wird die RNA an flexiblen Riboseeinheiten mit der Chemikalie NMIA modifiziert und
die modifizierte RNA mittels Reverser Transkription (RT) in cDNA umgeschrieben (primer
extension). Das 5-Ende der RNA fungiert dabei als Anlagerungsstelle fr den radioaktiv
markierten RT-Primer. Die cDNA-Synthese bricht an allen modifizierten Nukleotiden ab,
wodurch radioaktiv markierte Fragmente unterschiedlicher Lnge entstehen. Um eine
Zuordnung der Fragmente zur Sequenz zu ermglichen, wird parallel eine
Sequenzierungsreaktion der RNA durchgefhrt
Mittels denaturierender Polyacrylamid-Gelelektrophorese werden die cDNA-Fragmente ihrer
Gre nach getrennt und anschlieend autoradiographisch detektiert. Aus dem
Bandenmuster kann man die Struktur lesen.
Ergebnis/se
Durch Anwendung der SHAPE-Methode konnte die prognostizierte Sekundrstruktur der
4-arm-junction besttigt und dadurch die Anwendbarkeit des optimierten Sequenzdesigns
belegt werden.
Fazit/Schlussfolgerung
Die SHAPE-Methode eignet sich hervorragend zur Analyse von RNA-Sekundrstrukturen
und bietet eine einfache Handhabung und kostengnstige Auflsung auf
Einzelnukleotidebene. Die Ergebnisse dieser Arbeit bildeten einen wichtigen Bestandteil der
Etablierung des neuen Ansatzes zum Sequenzdesign.
Entwurf eines adaptiven Filters zur Unterdrckung von
Bewegungsartefakten in kapazitiven EKG-Signalen
Roy Welton
Farzad Hosseini
Wolfgang H. Krautschneider
Technische Universitt Hamburg Harburg
Institut fr Nanoelektronik
V. EINLEITUNG
Das Elektrokardiogramm (EKG) ist ein wertvolles Hilfsmittel fr klinische Diagnosen und findet auch
in der biomedizinischen Forschung vielfache Anwendung. Bei Personen, die an Herz-
Kreislauferkrankungen leiden, sind mobile Gerte von zunehmender Bedeutung. Mobil aufgenommene
Signale beinhalten aber hufig Artefakte, die die Diagnostik von Herzrhythmusstrungen, wie z. B.
Arrhythmien, und Langzeit-Untersuchungen (Monitoring) erschweren. Mit einer kapazitiven Elektrode
lsst sich eine kontaktlose Ableitung des Biosignals erreichen, was bei Langzeitberwachung eine
deutliche Verbesserung der Patientenversorgung ermglicht. Auf Grund der Anpassung an
unbekannte Ereignisse (Prdiktion) wird oftmals ein adaptiver Filter verwendet, um die Strungen zu
eliminieren. Hierfr hat man meistens einen zweiten Sensor zur Aufnahme der Bewegungen
verwendet. Dieser sollte als korrelierter Eingang des adaptiven Filters dienen, war aber meistens
wegen fehlender Korrelation zur Filterung von Strungen nicht geeignet (Strung in EKG-Signal und
Referenzsignal). Hier wird eine Methode vorgestellt, die anhand eines aus dem kapazitiven EKG-Signal
gewonnenen Referenzsignals die niederfrequenten Strungen von Bewegungen erfolgreich eliminiert,
ohne das EKG-Signal in seiner Morphologie dabei stark zu verndern.
VI. METHODIK
Das Referenzsignal wurde aus dem verrauschten EKG-Signal mit dem hier entwickelten
Algorithmus erzeugt und als Eingang fr den adaptiven Filter verwendet. Im Folgenden sind die
zugehrigen Schritte aufgelistet.
A. QRS-Detektionalgorithmus
Die Detektion der relevanten Frequenz des EKG fr die anschlieende Filterung wurde mit zwei
unterschiedlichen Algorithmen untersucht: der erste basiert auf dem bekannten Pan-Tompkins-
Algorithmus und der zweite ist ein modifizierter Algorithmus von Sergei Chernenko (Librow).
B. Svitsky-Golay Filter mit variabler Fenstergre
Anhand der gewonnenen Informationen aus dem EKG (RR-Intervall) wurde die Glttung durch
einen gleitenden Mittelwert gebildet. Durch polynomiale Regression (n-ten Grades) ber eine Serie von
Werten (Fenstergre) wird eine Mittelwertbildung fr jeden Punkt bestimmt [2]. Hier wurde als
variable Fenstergre das R-zu-R-Intervall aus dem EKG gewhlt. Somit wird das Filter an die
entsprechende Frequenz angepasst, die zwischen den Strungen und dem EKG liegen. Vorausgesetzt
ist, dass die Bewegungsartefakte nicht mit dem EKG korreliert sind. Am Ende bleibt ein Signal, das nur
die Bewegungsartefakte beinhaltet und nicht das EKG. Der Algorithmus ist in Matlab

unter Savitzky-
Golay-Filter zu finden.
C. Implementierung des adaptiven Filters
Unter Verwendung der Methode des steilsten Anstiegs (LMS) und der rekursiven kleinsten
Quadrate (RLS) wurden hier die als besonders stabil, einfach und effektiv geltenden adaptiven
Algorithmen [1] fr die Implementierung des Filters ausgewhlt. Die Adaption des Systems beruht auf
der Methode der Minimierung des mittleren Fehlerquadrats (MSE) zwischen Eingang und Ausgang.

33

Fig. 2. Struktur zur Unterdrckung von BA mit erzeugten Referenzsignal.
VII. ERGEBNISSE
A. RR-Intervall-Detektion
Fig. 3. RR-Intervall des kapazitiven EKG mit Artefakten.
B. Adaptives Filter
Fig. 4. Ergebnis des RLS-Filters mit dem hier gewonnenen Referenzsignal.
VIII. SCHLUSSFOLGERUNG
Das Hauptziel ist die Anwendung des Filters auf kapazitiven EKG-Daten fr die
Langzeitberwachung von Personen mit Herzkreislauferkrankungen. In Hinblick auf zuknftige Tests
sollte eine Implementierung in Echtzeit mit einem digitalen Signalprozessor erfolgen. Ausgehend von
den erzielten Ergebnissen lsst sich das adaptive Filter mit der hier getesteten Verfahren zur
Referenzsignal Erzeugung, als eine viel-versprechende Methode einstufen, die allerdings durch
ergnzende Tests weiterentwickelt werden sollte.
References
[3] Diniz, Paulo Sergio Ramirez, Adaptive filtering. Algorithms and practical implementation, 3. Aufl. New York: Springer, pp.
77-80, 2008.
[4] Kramme, Rdiger, Medizintechnik. Verfahren - Systeme - Informationsverarbeitung, 3. Aufl. Berlin: Springer Medizin
Verlag Heidelberg; Springer, pp. 529-551, April 2007.

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5
x 10
4
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
Abtastpunkte
S
p
a
n
n
u
n
g
in
V
0 5 10 15 20 25 30 35
0.3
0.2
0.1
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
Zeit in s
S
p
a
n
n
u
n
g
in
V

36

Konstruktion einer Prfvorrichtung zur biomechanischen
Untersuchung osteosynthetischer Stabilisierungsverfahren bei
instabilen Beckenringverletzungen
Yasmin Wolf
Technische Universitt Hamburg-Harburg
Ziel
Ziel meiner Bachelor Arbeit war es, eine Prfvorrichtung zu konstruieren, mit der
untereinander vergleichbare Ergebnisse ber die Steifigkeiten verschiedener
osteosynthetischer Stabilisierungsverfahren bei komplett instabilen Beckenringverletzungen
erhalten werden knnen. Anders als in bisher durchgefhrten Versuchsreihen, werden die
Steifigkeitsmessungen an einem intakten anatomischen Prparat durchgefhrt, um auch den
Einfluss des umliegenden Weichteilgewebes zu bercksichtigen.
Die Versuchsdurchfhrung wird in vier Schritten erfolgen, wobei zunchst die Steifigkeit des
intakten Beckens bestimmt wird. Anschlieend wird die Steifigkeit des frakturierten und des
stabilisierten Beckens erfasst. Der letzte Schritt umfasst eine zyklische Belastung. Die
Versuchsreihen werden von einem Arzt am Institut fr Rechtsmedizin des UKE durchgefhrt
und sind nicht Bestandteil meiner Bachelor Arbeit.
Anforderungen an die Prfvorrichtung
Bei der Konstruktion der Prfvorrichtung mussten einige limitierende Faktoren bercksichtigt
werden.
Die Prfvorrichtung musste so gestaltet werden, dass sie auf die unterschiedlichen
anatomischen Gegebenheiten der intakten anatomischen Prparate individuell eingestellt
werden kann.
Es war zu beachten, dass der Arzt in seiner Arbeit nicht beeintrchtigt werden darf. Dies
bedeutet, dass er in der Lage sein muss, die verschiedenen Fixateure ohne
Einschrnkungen an dem intakten anatomischen Prparat implantieren zu knnen.
Der Bereich des Beckens sowie alle anderen Bereiche, die zur Implantation der Fixateure
relevant sind, mssen rntgendurchlssig sein. Dies ist notwendig, um die Fixateure unter
Bildwandlerkontrolle anbringen und um vergleichende Rntgenaufnahmen des Beckens
zwischen den verschiedenen Belastungszyklen machen zu knnen.
In der Versuchsreihe soll der Einbeinstand des Menschen simuliert werden. Zu diesem
Zweck muss die mit Hilfe eines elektromagnetischen Aktuators eingeleitete Kraft entweder
ber ein Bein oder eine Beckenhlfte des intakten anatomischen Prparats eingeleitet
werden. Die Kraft muss mindestens dem auf einem Bein lastenden Gewicht entsprechen
etwa 700 N.
Die Prfvorrichtung sollte mobil sein und gut desinfiziert werden knnen.
Ergebnis
Die entstandene Prfvorrichtung, welche allen Anforderungen gengt, stellt eine
Tischkonstruktion dar (Abbildung 1). Sie setzt sich aus zwei mit einem Tischgestell


verbundenen Platten (Referenzplatte und Krafteinlei
Referenzplatte ist L-frmig und starr mit dem Tischgestell verbunden. Di
Krafteinleitungsplatte ist rechteckig und entlang d
Das intakte anatomische Prparat wird so auf der Ti
Oberkrper, die linke Beckenhlfte und das linke Be
liegen. Die rechte Beckenhlfte
gesetzten Fraktur und das rechte Bein sind auf
der Krafteinleitungsplatte positioniert. Die Fixier
des intakten anatomischen Prparats an der
Referenzplatte erfolgt ber die Lendenwirbelsule
und den linken Beckenkamm. Das rechte Bein wird
an der Krafteinleitungsplatte fixie
Verschiebung der Krafteinleitungsplatte entlang der
Longitudinalachse einer Belastung des Beckens
wie bei einem Einbeinstand entspricht.
37
verbundenen Platten (Referenzplatte und Krafteinleitungsplatte) zusammen. Die
frmig und starr mit dem Tischgestell verbunden. Di
Krafteinleitungsplatte ist rechteckig und entlang der Longitudinalachse verschiebbar.
Das intakte anatomische Prparat wird so auf der Tischkonstruktion positioniert, dass der
Oberkrper, die linke Beckenhlfte und das linke Bein auf der L-frmigen Referenzplatte
liegen. Die rechte Beckenhlfte die Seite der
das rechte Bein sind auf
der Krafteinleitungsplatte positioniert. Die Fixierung
des intakten anatomischen Prparats an der
Referenzplatte erfolgt ber die Lendenwirbelsule
und den linken Beckenkamm. Das rechte Bein wird
an der Krafteinleitungsplatte fixiert, so dass eine
Verschiebung der Krafteinleitungsplatte entlang der
Longitudinalachse einer Belastung des Beckens
wie bei einem Einbeinstand entspricht.
Abbildung 1:Tischkonstruktion mit einer
schematischen Zeichnung eines Skelet
tungsplatte) zusammen. Die
frmig und starr mit dem Tischgestell verbunden. Die
er Longitudinalachse verschiebbar.
schkonstruktion positioniert, dass der
frmigen Referenzplatte
:Tischkonstruktion mit einer
schematischen Zeichnung eines Skelettes

38

Quantitative Microscopic Fingerprinting of
Environmental Microbes
Y. Kim
#1
, P. Scherer
1
1
Hamburg University of Applied Sciences, Faculty Life Sciences, Lohbruegger Kirchstr. 65, 21033
Hamburg-Bergedorf, Germany
#
Corresponding Author: E-mail: yongsung.kim@haw-hamburg.de, Ph.: +49 (0)40 42875 6387 Fax:
+49 (0)40 42875 6359
Abstract
The goal of this study was to find a new tool to evaluate the biological vitality of anaerobic
digesters. Therefore, a simple microscopic method for quantification and morphological
classification of microorganisms was developed. Cell counts and its morphology are
supposed to be a direct indicator of a methanogenic habitate. Since environmental sample
contains interfering fibrous material, an appropriate sample preparation is required such as
an optimal visualizing stain, agent with its optimal viscosity for microscopic slide,
homogenous distribution of sample on the slide as well as a proper image analysis algorithm.
SYBR Green I was found to be the most sensitive dye for total cell counts in environmental
samples with minimal background fluorescence. For detection of methanogens,
autofluorescence based on the typical methanogenic fluorescent coenzyme F
420
was used. A
low viscosity methylcellulose was successfully applied as a fixing agent for microscopic slide.
It showed a better adhering character and supplied more regular surface related to agar or
gelatin. With the help of accompanying molecular analysis, morphological classification
algorithms for methanogens could be established by the image analysis software Image Pro
7. During analyzing one biogas plant sample for more than 26 weeks and several different
anaerobic digesters for a shorter time, its reliability as a counting method was verified. The
correctness of the counting by image analysis system was proven by Neubauer counting
chamber and reference bacteria. The results showed a good congruence between
quantitative image analysis and Neubauer counting chamber representing deviation of 0.2
2.6 %.