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7(2): 861-871, April 2013 ISSN 1991-8631

Original Paper

http://indexmedicus.afro.who.int

Etude comparative des teneurs en polyphnols et en antioxydants totaux dextraits de graines de 44 varits de voandzou (Vigna subterranea (L.)Verdcourt)
Abel MBAIOGAOU 1, Adama HEMA 1*, Mahama OUDRAOGO 2, Eloi PAL 1, Michel NAITORMBAIDE 3, Yaya MAHAMOUT 4 et Mouhoussine NACRO 1
Laboratoire de Chimie Organique et de Physique Appliques, Dpartement de Chimie, UFR-SEA, Universit de Ouagadougou; 03 BP 7021 Ouagadougou 03, Burkina Faso. 2 Institut de lEnvironnement et de Recherches Agricoles (INERA), Ouagadougou, Burkina Faso. 3 Institut Tchadien de Recherche Agronomique pour le Dveloppement (ITRAD) de Bebedja, Tchad. 4 Laboratoire de Recherche sur les Substances Naturelles, Facult des Sciences Exactes et Appliques (F.S.E.A) de l'Universit de NDjamena, Tchad. * Auteur correspondant; E-mail: hemaadama@yahoo.fr
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RESUME
44 varits de Vigna subterranea provenant de lInstitut de lEnvironnement et de Recherches Agricoles, au Burkina Faso et de lInstitut Tchadien de Recherche Agricole pour le Dveloppement au Tchad, ont fait lobjet dune tude comparative de leurs teneurs en polyphnols et en antioxydants totaux. Les teneurs en polyphnols totaux ont t dtermines par la mthode utilisant le ractif du Folin-Ciocalteu et les teneurs en antioxydants ont t values par trois mthodes courantes, simples et disponibles : Trolox Equivalents Antioxidant Capacity (TEAC), 1,1-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) et Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP). Ltude a montr que les polyphnols, responsables de la couleur des pricarpes contribuent 94% la teneur en antioxydants totaux des extraits tudis. Ainsi, travers les comparaisons effectues, les 17 varits suivantes ont t slectionnes comme tant les plus riches en polyphnols ( 4,536 mg dEAG/g) et en antioxydants totaux ( 10,72 mg dET/g ; FRAP) : KVS350, KVS314, M2, D2, KVS311, M3, KVS109, KVS67, KVS288, KVS153, KVS360, M4, KVS141, M7, KVS225, KVS97, KVS312 (P<0,001). Ces varits possdent des teneurs en polyphnols totaux plus leves que celles de Vicia faba/faba vulgaris, Phaseolus vulgaris, vigna unguiculata et dautres lgumineuses de la mme famille des Fabaceae. 2013 International Formulae Group. All rights reserved. Mots cls: Fabaceae, TEAC, DPPH, FRAP, Folin-Ciocalteu, anthocyanes totales.

INTRODUCTION La plupart des aliments de l'homme proviennent du rgne vgtal. Ces produits naturels apportent l'homme des macronutriments tels que les matires grasses, les sucres rapides, les sucres lents et les protines dont il a besoin. Outre ces
2013 International Formulae Group. All rights reserved. DOI : http://dx.doi.org/10.4314/ijbcs.v7i2.41

macronutriments nergtiques bien connus dans les aliments traditionnels, il existe dautres substances dites secondaires (micronutriments) qui sont de plus en plus populaires pour leurs effets bnfiques sur la sant des consommateurs.

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Les lgumineuses du genre Vigna font partie des aliments les plus consomms en Afrique au sud du Sahara (Brink et al., 2006). Connu sous les noms courants voandzou en franais, souma en moor (au Burkina Faso) et oule-nd en ngambaye (au Tchad), le voandzou est la deuxime lgumineuse conomiquement importante aprs le nib [Vigna unguiculata (L.) Walpers] dans les pays au sud du Sahara. Cest une plante qui sadapte bien aux conditions climatiques difficiles (Heller et al., 1997). Les graines sont trs nutritives et les analyses chimiques ont montr qu'elles contiennent 32.72% dacides amins totaux essentiels et 66.10% daminoacides totaux non-essentiels (Minka et al., 2000 ; Mahama et al., 2008 ). Dautres lgumineuses du mme genre sont reconnues renfermer des micronutriments responsables des couleurs observes au niveau des graines. Ces micronutriments, gnralement antioxydants, sont trs abondants dans les fruits et les lgumes et interviennent dans la prvention des cancers, des maladies cardio-vasculaires et dautres maladies dgnratives lies au stress oxydant (Navindra, 2008 ; Yanjun et al., 2008). Dans les pays au sud du Sahara o les lgumineuses du genre Vigna notamment le V. subterranea sont beaucoup consommes, il convient davoir une base de donnes sur leurs teneurs en antioxydants qui informe les consommateurs sur leurs effets bnfiques sur la sant (Liangli et al., 2005). En effet, ces donnes sur leurs teneurs en antioxydants totaux constituent des informations nutritionnelles supplmentaires qui faciliteront une meilleure intgration du voandzou parmi les aliments locaux caractre fonctionnel linstar dautres fruits et lgumes (Liu et al., 2003; Jimaima et al., 2007). Plusieurs mthodes ont t frquemment utilises pour valuer les activits antioxydantes dans les extraits vgtaux. On peut entre autres citer le DPPH (1,1-diphenyl-1-picrylhydrazyl), lABTS (2,2-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6sulfonique)), et le FRAP (ferric reducing 862

antioxidant power). Ces techniques ont montr des rsultats diffrents des chantillons de plante tests travers les laboratoires. Le ractif de Folin-Ciocalteu est utilis pour valuer les teneurs en polyphnols totaux et la mthode du pH-diffrentiel est utilise pour valuer les teneurs en anthocyanes totales. Lobjectif de la prsente tude tait de dterminer les teneurs en polyphnols et en anthocyanes totaux et destimer les teneurs en antioxydants totaux en utilisant les mthodes de DPPH, ABTS, et FRAP (Stephanie et al., 2009) de 44 varits de voandzou du Burkina Faso et du Tchad. Ces trois mthodes bases sur diffrents mcanismes chimiques ont t choisies pour prendre en compte la large variabilit et de gamme daction des antioxydants individuels des extraits tudis. Le TEAC mesure la capacit des antioxydants ) piger le radical-cation ( (Pellegrini et al., 2003), le DPPH mesure la capacit de pigeage du radical stable commercial ) (Brand-Williams et al., 1995) et le FRAP, une mthode directe qui value le pouvoir rducteur dun chantillon (Benzie et al., 1996). MATRIEL ET MTHODES Matriel vgtal Ltude porte sur 30 varits de V. subterranea du Burkina Faso et quatorze varits du Tchad rcoltes en fin octobre. Ces diffrentes varits sont fournies respectivement par INERA de Ouagadougou (Burkina Faso) et ITRAD de Deli (Tchad). Extraction Les graines des diffrentes varits de V. subterranea ont t broyes. Ensuite, 3 g de poudre de chaque varit sont extraits avec 15 mL du systme actone-eau-acide actique (70 : 29,5 : 0,5) par macration pendant 24 heures 4 C. Les extraits sont filtrs et les rsidus sont extraits de nouveau deux fois avec 10 mL de solvant pendant 24 heures. Les filtrats sont conservs au rfrigrateur 4 C pour la dtermination des teneurs des

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polyphnols et des (Asami et al., 2003).

antioxydants

totaux

Ractif de Folin-Ciocalateu Les teneurs en polyphnols totaux des extraits de voandzou ont t dtermines par la mthode de Folin-Ciocalteu (Nihal et al., 2007). Elle consiste faire ragir 60 L de lchantillon tudi avec 60 L du ractif de Folin (dilu 10 fois). Aprs 8 min, 120 L de carbonate de sodium 7,5% (p/v) y sont ajouts. Aprs 30 min dincubation, labsorbance est lue 765 nm. Les blancs sont prpars pour chaque varit en remplaant le ractif de Folin par de leau distille. Lacide gallique est utilis comme standard (Tableau 1) et les rsultats sont exprims en mg dquivalents dacide gallique (EAG)/g de matriel sec. pH diffrentiel Les teneurs en anthocyanes totales des extraits sont estimes par la mthode de pHdiffrentiel utilisant deux systmes tampon : la solution de chlorure de potassium, pH 1,0 (0,025 M) et la solution dactate, pH 4,5 (0,025 M). 100 L de lextrait sont mlangs 200 L des tampons correspondants et labsorbance est lue par rapport au blanc 510 nm et 700 nm 15 minutes plus tard. L'absorbance A a t calcule comme suit : La concentration monomrique en colorants anthocyaniques dans l'extrait est calcule comme la cyanidin-3-glucoside (Sellapan et al., 2002).
A PM FD 1000 mg / L = l

persulfate de potassium K2S2O8 et 5 mL de solution dABTS 7,01 mM, le mlange est conserv labri de la lumire la temprature de 4 0C durant 16 heures, temps ncessaire pour la gnration du radicalcation. La solution bleu-vert obtenue est dilue pour avoir une absorbance de 0,70,5 734 nm. chaque chantillon (50 L) sont ajouts 200 L de solution de ABTS et labsorbance est mesure aprs 10 min 734 nm. Le rsultat est exprim en mg dEquivalents de Trolox (ET) (Tableau 1) (Pellegrini et al., 2003). Mthode de DPPH Le radical commercial de DPPH est dissout dans du mthanol une concentration de 0,04 mg/mL et gard 4 C labri de la lumire. chaque chantillon dextrait (50 L) sont ajouts 200 L de solution de DPPH et labsorbance est lue aprs 10 min 517 nm. Les rsultats sont exprims en mg dET (Tableau 1) (Stephanie et al., 2009). Mthode du FRAP Le ractif de la mthode du FRAP (TPTZ) est obtenu en mlangeant une solution de TPTZ (10 nM), une solution tampon dactate de sodium (pH3,6) et une solution FeCl3 (20 nM) dans les proportions 1:10:1. chaque chantillon dextrait (20 L) sont ajouts 30 L deau et 200 L de solution de FRAP et labsorbance est mesure aprs 10 min 595 nm. Les rsultats est exprims en mg dET (Tableau 1) (Benzie et al., 1996 ; Proteggente et al., 2002). tude statistique Ltude statistique a t ralise par le logiciel statistique GentStat14e Edition au seuil de probabilit de 5%. Toutes les expriences ont t ralises en triple. Les rsultats sont exprims sous la forme moyenne cart type. Les valeurs de p<0,05 sont considres statistiquement significatives (Athamena et al., 2010).

A = (A 510 A 700 )pH 1.0 (A 510 A 700 )pH 4.5

o A : absorbance ; PM : poids molculaire ; (449,2); FD : facteur de dilution ; : absorptivit molaire (26900). Les teneurs en anthocyanes totales ont t exprimes en microgrammes de cyanidin-3-glucoside par gramme de matriel sec. Mthode du TEAC Le radical-cation ABTS est gnr en mlangeant 1 mL de solution 39,2 mM de 863

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Tableau 1 : Etablissement des courbes-talons. Courbes-talons RFC ABTS (TEAC) DPPH FRAP Standard Acide gallique Trolox Trolox Trolox Equations y = 43,57x + 0,200 y = -23,36x + 0,590 y = -26,99x + 0,636 y = 25,47x + 0,068 coefficients de corrlation R = 0,990 R = 0,999 R = 0,999 R = 1

RESULTATS Il a t systmatiquement dtermin les teneurs en antioxydants, en polyphnols et en anthocyanes totaux de 44 varits de voandzou provenant du Burkina Faso et du Tchad. Ces 44 varits sont caractrises par la couleur jaune-crme, noire pourpre ou bigarre de leur pricarpe. Les diffrences entre les teneurs en antioxydants, en polyphnols et en anthocyanes totaux (Tableau 2) de ces varits de voandzou sont souvent trs larges. Cette variation des teneurs est probablement lie la couleur de ces graines. Teneurs en antioxydants totaux (TAO) En se basant sur les teneurs en antioxydants, certaines varits de voandzou prsentent des valeurs trs diffrentes. En effet, les trois mthodes utilises pour dterminer les TAO (DPPH, TEAC et FRAP) rvlent des variations respectives denviron 28 fois, 13 fois et 50 fois. Par la mthode de DPPH (Tableau 2 ; Figure 1), il ressort que les varits KVS416, KVS411, KVS358 ont pratiquement la mme teneur en antioxydants denviron 0,072 mg dET/g de graines sches (les diffrences observes ne sont pas statistiquement significatives). Ces dernires sont moins riches que les varits KVS358, KVS202, KVS415 prsentant une teneur en antioxydants denviron 0,171 mg dET/g de graines sches. Par cette mthode, les plus riches sont les varits M4, KVS312, KVS97 prsentant une teneur denviron 2,039 mg dET/g de graines sches. Il en rsulte donc 864

que les teneurs en antioxydants varient largement entre 0,072 et 2,039 mg dET/g de graines sches. Par la mthode de TEAC, il rsulte des diffrences trs significatives (P<0,001) entre les diffrentes varits de graines de V. subterranea. En effet, les TAO varient de 0,17 pour la varit KVS411 2,327 mg dET/g de graines sches pour les varits M4, M7 (Tableau 1, Figure 2) soit une variation denviron 13 fois. Par ailleurs, on note une assez bonne corrlation (Tableau 3 ; Figure 4) entre ces deux mthodes (R= 0,964) ; ce qui montre que ces deux mthodes, ne divergent pas fondamentalement dans lexplication de la variabilit constate entre ces varits de V. subterranea. La troisime mthode, beaucoup plus directe que les deux prcdentes, la mthode FRAP est base sur la rduction des ions ferriques en ions ferreux par les antioxydants des extraits. Elle contribue expliquer les diffrences significatives entre les varits de V. subterranea. Ainsi, on observe une variation denviron 50 fois soit des teneurs variant entre 0,214 pour les varits KVS411, KVS358, KVS202, KVS415, KVS416, KVS199 10,727 mg dET/g de graines sches pour la varit KVS225 qui en est la plus riche (Tableau 2 et Figure 3). Par ailleurs, cette mthode prsente dassez bonnes corrlations (R = 0,934 ; R = 0,939) respectivement avec les mthodes DPPH et TEAC (Tableau 3).

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Tableau 2: Teneurs en antioxydants (TAO) (par les mthodes de DPPH, TEAC et FRAP), en polyphnols totaux (TPP) et en anthocyanes totales (TAT) dans les diffrentes varits des graines de V. subterranea. varits KVS141 KVS109 KVS61 KVS416 KVS407 KVS350 KVS225 KVS311 KVS314 KVS358 KVS32 KVS415 KVS120 KVS360 KVS128 KVS199 KVS97 KVS153 KVS288 KVS351 KVS210 KVS312 KVS67 M1 KVS41 KVS408 KVS411 M4 KVS202 KVS410 KVS310 KVS414 D2 D7 D4 D6 D1 D3 D5 M7 M2 M3 M5 TAO (mg/g) TEAC 1,9230,003 t 1,7950,005 r 0,6560,003fgh 0,4110,016 d 0,6670,008gh 1,4740,016 op 1,8420,007rs 1,630,026 q 1,4040,011mn 0,3130,006bc 1,6770,035 q 0,370,025 cd 1,2270,015 l 1,8670,005st 0,5860,009 e 0,3740,012 cd 2,2420,010 w 2,1070,006 v 2,0530,021uv 0,6330,015efg 0,7060,006 hi 2,2390,002 w 2,0380,004 u 1,6630,005 q 1,0420,031 k 1,3690,011 m 0,170,011 a 2,3080,002 x 0,2530,010 b 1,0350,020 k 0,6010,017ef 0,6340,008efg 2,0130,012 u 0,8320,010 j 0,4140,004 d 1,3690,001 m 0,7440,012 i 1,4590,009 no 0,8650,002 j 2,3260,003 x 2,0710,009uv 2,0080,010 u 1,5320,006 p TPP (mg/g) RFC 3,7360,051 op 2,828,045 n 0,4050,008 de 0,1250,014abc 0,2720,006bcd 1,860,072 k 4,4060,055 q 2,510,067 m 2,2840,021 l 0,0520,006 a 1,5540,072 j 0,1020,013ab 1,0680,001 h 3,5950,006 o 0,1560,015abc 0,1540,002abc 4,5330,128 q 2,9970,051 n 2,9640,014 n 0,3160,008 cd 0,4050,013 de 4,5360,089 q 2,8760,027 n 1,1010,024 hi 0,670,006fg 1,1830,009 hi 0,0460,004 a 3,6730,089 o 0,1930,006abc 0,5990,006ef 0,2850,005bcd 0,2780,003bcd 2,3860,054 lm 0,8290,023 g 0,2860,013bcd 1,3040,035 i 0,5590,006ef 1,5980,009 j 0,60,009ef 3,9130,083 op 2,3810,002 lm 2,5380,046 m 1,2980,046 i TAT (mg/g) pH-diff. 0,0530,001 r 0,0120,0008cdefg 0,0170,0004hijk 0,0040,0005 a 0,0150,0009efghij 0,1610,004 t 0,0340,001 no 0,0110,0005bcdef 0,020,0009klm 0,0150,0003efghij 0,0410,0014pq 0,0070,0001abc 0,030,0007 n 0,0340,0008 no 0,0060,0007 a 0,0180,0005ijkl 0,3310,0023 v 0,010,0009bcde 0,030,000008 n 0,0080,0002abc 0,0170,0008ghijk 0,030,0002 n 0,0120,0007cdef 0,0370,0012 op 0,0420,0009 q 0,0080,0006abc 0,0070,0005ab 0,2810,0015 u 0,0050,0002 a 0,0240,0006 m 0,0220,0020 lm 0,0090,0006abcd 0,0160,0002fghijk 0,0140,0016efghi 0,0240,0003 m 0,0170,0007ghijk 0,0360,0003 o 0,1390,0005 s 0,0190,0002jkl 0,030,0009 n 0,0330,00008 no 0,0340,0004 no 0,0130,0001defgh

DPPH 1,9210,019uvw 1,7930,021 t 0,64850,003ij 0,0710,005 a 0,5950,018 hi 1,5810,009 r 1,9060,002 w 1,6770,010 s 1,4020,013 o 0,130,023abc 1,430,009 op 0,1710,015 c 1,2620,011 n 1,8360,007 tu 0,4750,002ef 0,4090,004 d 2,0380,002 x 1,9030,016vw 1,8830,016uvw 0,4220,020 de 0,580,035 h 2,0060,021 x 1,8390,006tuv 1,420,003 op 0,8510,009 kl 1,2080,009 n 0,0930,004ab 1,9910,009 x 0,1420,020bc 0,9180,012 m 0,4970,030fg 0,5560,014gh 1,4890,011pq 0,8020,0004 k 0,6710,003 j 1,2540,003 n 0,8930,024 lm 1,2290,013 n 0,8650,007klm 1,650,001 s 1,5480,001 r 1,540,0004qr 1,2350,006 n

FRAP 8,5930,021 s 6,7010,155 n 1,2150,008 de 0,4420,015 a 0,9380,030 cd 5,1010,090 l 10,7270,043 v 6,0270,184 m 5,0180,014 l 0,370,007 a 4,2760,0075jk 0,4190,009 a 3,1480,042 i 9,2330,219 t 0,8550,017 c 0,5200,016ab 8,440,010rs 7,4080,081pq 6,9290,101 no 1,0240,025 cd 1,1480,012cde 8,4660,013rs 7,2230,092 op 3,1970,031 i 1,7150,047fg 3,0430,088 i 0,2130,010 a 8,1540,085 r 0,3790,013 a 1,7720,025 g 0,8370,009bc 0,9440,023 cd 7,6160,084 q 3,3480,026 i 1,4490,002ef 4,0930,025 j 2,1330,013 h 4,5270,036 k 1,9980,035gh 9,7210,079 u 6,9740,017 no 7,7040,036 q 4,5460,037 k

Les rsultats des teneurs en polyphnols, anthocyanes totaux et des activits antioxydantes (par les mthodes de DPPH, TEAC et FRAP) sont exprims sous la forme moyenne cart-type. Les comparaisons multiples entre les varits sont effectues par le multivariate analysis de Genstat version 14. Diffrentes lettres dune colonne indiquent une diffrence significative (P<0,001) entre les varits de voandzou.

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Tableau 3: Corrlation(R) entre les diffrentes mthodes TEAC 0,964 0,939 0,917 0,404 DPPH 0,934 0,923 0,417 FRAP RFC

DPPH FRAP RFC pH-diff.

0,973 0,364

0,443

Teneurs en polyphnols totaux (TPP) Ces trois mthodes utilises pour valuer les teneurs en antioxydants tendent toutes montrer quun certain nombre de varits sont homognes du point de vue de leur teneur en antioxydants tandis que les autres rvlent des diffrences statistiquement significatives (P<0,001). De nombreux travaux scientifiques contribuent montrer que lactivit antioxydante des extraits de plantes est largement due la prsence de certains micronutriments tels que les polyphnols en gnral et des anthocyanes en particulier. Les bonnes corrlations entre les teneurs en polyphnols et les teneurs en antioxydants values par les trois mthodes prcdentes confirment les donnes de la littrature (Tableau 3, Figure 4). Les teneurs en polyphnols totaux varient de 0,046 pour les varits KVS411, KVS358, KVS415, KVS416, KVS199, KVS128 et KVS202 4,536 mg dEAG/g de graines sches pour KVS225, KVS97 et KVS312 soit une variation de prs de 98 fois. Teneurs en anthocyanes totales (TAT) Les teneurs en anthocyanes totales values sont trs faibles dans la majorit des extraits des varits de voandzou tudies. Leur teneur est certainement lie la couleur du pricarpe ; certains tant plus colors que les autres. Ainsi les quatre varits qui se distinguent par la couleur pourpre ou noire de leur pricarpe possdent les teneurs les plus leves en anthocyanes totales (Tableau 1 et Figure 5). Ce sont D3 < KVS350 < M4 < KVS97, de TAT respectives 0,139 ; 0,161 ; 0,281 et 0,331 mg/g de graines sches (P<0,001). DISCUSSION Les analyses systmatiques sur les 44 varits de voandzou collectes au Burkina 866

Faso et au Tchad montrent quil y a une large variation entre les teneurs en antioxydants, en polyphnols et en anthocyanes totaux. En dehors des travaux disolement, de sparation et didentification de trois anthocyanines monoglucosides de la delphinidine, la ptunidine et de la malvidine (Eloi et al., 1997), nous navons pas connaissance dune tude comparative des teneurs en antioxydants de plusieurs varits de V. subterranea en relation avec leurs teneurs en polyphnols. En revanche, une tude comparative des TAO a t mene sur des lgumineuses de la mme famille des Fabaceae (Dong et al., 2007) que le V. subterranea, montre que Vicia faba/faba vulgaris possde la plus haute teneur en antioxydants totaux de 1,86 mmol/100 g (dtermine par la mthode FRAP) ; ce qui correspond 4,65 mg dET/g de graines sches. Elle est suivie par Phaseolus vulgaris (nib) >Glycine maximus (soja) >Vigna unguiculata (nib) >Lens culinaris (lentille) >Phaseolus vulgaris ssp.>Vigna radiata> dont les TAO correspondantes sont respectivement : 2,85 ; 2,05 ; 1,62 ; 1,22 ; 0,95 et 0,87 mg dET/g de graines sches (Bente et al., 2002). Les varits KVS411, KVS358, KVS202, KVS415, KVS199, KVS416 possdant une TAO moyenne de 0,214 mg dET/g de graines sches sont inferieures ces graines de la mme famille. Cependant, les varits KVS141, KVS109, KVS225, KVS311, KVS360, KVS97, KVS153, KVS288, KVS312, KVS67, M4, D2, M7, M2 et M3 possdent des TAO plus leves (> 6 mg dET/g de graines sches) que celle de Vicia faba/faba vulgaris (4,65 mg dET/g) comparable aux varits KVS350, KVS314 et KVS32 (environ 5 mg dET/g).

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Figure 1: Histogramme comparatif des TAO des diffrentes varits des graines de V. subterranea (DPPH).

Figure 2: Histogramme comparatif des TAO des diffrentes varits des graines de V. subterranea (TEAC).

Figure 3: Histogramme comparatif des TAO des diffrentes varits des graines de V. subterranea (FRAP). 867

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Figure 4: Histogramme des rsultats de mesure TPP dans les diffrentes varits des graines de V. subterranea.

Figure 5: Histogramme des rsultats de mesure des TAT des diffrentes varits des graines de V. subterranea.

La couleur du pricarpe des varits de V. subterranea explique certainement en partie les diffrences observes entre ces voandzou tudies. Il est connu que les polyphnols sont responsables travers des phnomnes de copigmentation intra- ou intermolculaire (Wigand et al., 1992 ; Leland et al., 2006), de la diversit de couleurs observes (rouge, bleu, mauve, pourpre, etc.) au niveau des feuilles, racines, tiges, corces, fruits et fleurs des plantes 868

(Kouda-Bonafos et al., 1994 ; Eloi et al., 1997). De plus, ils sont presquentirement responsables des activits antioxydantes des extraits botaniques (Ou et al., 2005 ;Wojdylo et al., 2007) ; ceci a t confirm dans cette tude travers les bons coefficients de corrlation (r~0,94) observs entre les TPP et les TAO (Tableau 3). En effet, il a t mis en vidence que les polyphnols contribuent prs de 94% aux teneurs en antioxydants. Cest ce qui explique que les varits de V.

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subterranea les plus colores surtout en rouge, noir ou plus ou moins bigarres, prsentent les TAO les plus leves. Un sous-groupe de polyphnols bien connu est celui des anthocyanes caractrises par leur couleur rouge en milieu acide et bleu en milieu basique (Eloi, 1998), illustrent leffet de la couleur du pricarpe sur les teneurs en polyphnols et par consquent sur les teneurs en antioxydants totaux. Parmi les 44 varits tudies, il y a seulement les quatre varits D3, KVS350, M4 et KVS97 dont les teneurs en TAT sont respectivement apprciables : 0,139 ; 0,161 ; 0,281 et 0,331 mg/g de graines sches. Excepte D3, ces quatre varits font partie des 17 varits possdant un minimum de TAO de 5 mg dET/g de graines sches. Ceci montre que la couleur elle seule ne saurait expliquer la TAO dun extrait botanique qui est en ralit un mlange trs complexe (de divers composs) (Dejian et al., 2005) du fait que les systmes de solvant dextraction ne sont pas toujours spcifiques ; ce qui est un facteur de sous- ou de surestimation dans les dosages. Ainsi, ltude mene sur les quarante quatre (44) varits de graines de V. subterranea a permis didentifier KVS350, KVS314, M2, D2, KVS311, M3, KVS109, KVS67, KVS288, KVS153, KVS360, M4, KVS141, M7, KVS225, KVS97, KVS312 prsentant une teneur en antioxydants totaux minimum de 6 mg dET/g de graines sches par la mthode FRAP. Cette mthode et les deux autres (DPPH, TEAC), convergent montrer que le coefficient de corrlation entre la teneur des extraits des graines de V. subterranea en polyphnols et lactivit antioxydante est fortement significatif (environ R = 0,94) ; ce qui indique que 94% de la capacit antioxydante de ces extraits est due la contribution des composs phnoliques. Ces varits sus-cites possdent des teneurs en polyphnols totaux comparables celles de sept varits de sorgho blancs du Sngal (Khady, 2010). La teneur en anthocyanes totales est trs faible pour la majorit des varits tudies, cette teneur tant lie la couleur du 869

pricarpe ; certaines tant plus colores que dautres. Ainsi les quatre varits qui se distinguent par la couleur pourpre ou noire de leur pricarpe prsentent les plus fortes teneurs en anthocyanes ; ce sont : D3, KVS350, M4 et KVS97. Les graines de voandzou ne sont plus seulement perues comme une source protino-nergtique mais aussi comme une source de substances phytochimiques secondaires dites antioxydants et possdant des effets bnfiques sur la sant des consommateurs. Dans les pays au sud du Sahara, ces lgumineuses peuvent donc entrer dans la formulation daliments locaux fonctionnels pour la prvention des maladies lies au stress oxydant. REMERCIEMENTS Les auteurs remercient lUniversit de Ouagadougou, le CNRST/INERA (Burkina Faso) et lITRAD (Tchad) pour tous les efforts consentis dans la ralisation de cette tude. Ils remercient par ailleurs The MCKNIGHT Foundation" pour le financement de ce travail. REFERENCES Asami KD, Yun-Jeong H, Diane MB, Alyson EM. 2003. Comparison of the total phenolic and ascorbic acid content of freeze-dried marionberry, strawberry, and corn grown using conventional, organic, and sustainable agricultural practices. J. Agric. Food Chem., 51: 1237-1241. Athamena S, Chalghem I, Kassah-Laouar A, Laroui S, Khebri S. 2010. Activit antioxydante et antimicrobienne dextraits de Cuminum cyminum L. Lebanese Science Journal, 11(1) : 69-81. Bente LH, Kari H, Mari CWM, Ingrid B, Erlend H, Siv FR, Anne-Brit W, Karin H, Halvard B, Lene FA, Jan M, David RJ, Rune B. 2002. A systematic screening of total antioxidants in dietary plants. J. Nutr., 132: 461-471. Benzie IF, Strain JJ. 1996. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of

A. MBAIOGAOU et al. / Int. J. Biol. Chem. Sci. 7(2): 861-871, 2013

antioxidant power: the FRAP assay. Anal. Biochem., 239 : 7076 Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C. 1995. Use of free radial method to evaluate antioxidant capacity.Lebensm. Wiss.-Technol., 28: 25-30. Brink M, Grubben GJH, Brink M, Belay GA. 2006. Ressources Vgtales de lAfrique Tropicale 1: Crales et Lgumes Secs. Edition M. Brink. Dejian H, Boxin O, Ronald LP. 2005. The chemistry behind antioxidant capacity assays. J. Agric. Food Chem., 53: 18411856. Dong M, He XJ, Lieu RH. 2007. Phytochemicals Black Bean Seed Coats; Isolation, Structure Elucidation and Their Antiproliferative and Antioxidative Activities. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 15: 6044-6051. Eloi P, Kouda-Bonafos M, Mouhoussine N, Maurice V, Rne V, Ottinger R. 1997. 7O-methylapigeninidin, an anthocyanidin from Sorghum caudatum. Phytochemistry, 45: 1091-1092. Eloi P, Mouhoussine N, Maurice V, Rene V. 1997. Anthocyanins from Bambara groundnut (Vigna subterranea). J. Agric. Food Chem., 45: 3359-3361. Heller J, Begemann F, Mushonga J, 1997. Bambara groundnut Vigna subterranean (L.)Verdc. Conservation and improvement of Bambara groundnut (Vigna subterranea (L.)Verdc.). International Plant, Harare, Zimbabwe. Jimaima L, Craige T, Mark W, Naiyama W, Subramanium S, Robert P. 2007. Phytochemical flavonols, carotenoids and the antioxidant properties of a wide selections of Fijian fruits, vegetables and other readly available foods. Food Chemistry, 101(4): 1319-1326. Khady Ba, 2010. tude comparative des composs phnoliques, du pouvoir antioxydant de diffrentes varits de sorgho sngalais et des enzymes amylolytiques de leur malt. Biotechnol. Agron. Soc. Environ., 14(1) : 131-139.

Kouda-Bonafos M, Czyzewska E, Nacro M. 1994. Isolation of apigeninidin from leaf sheaths of Sorghum caudatum. Journal of Chemical Ecology, 20: 2123-2125. Leland JC, Kirakosyan A, Kaufman PB, Warber SL, Duke JA, Brielmannk HL. 2006. Natural Products from Plants (2nd edn), CRC Press. Liangli LY, Kequan KZ, John P. 2005. Antioxidant properties of cold-pressed black caraway, carrot, cranberry, and hemp seed oils. Food Chemistry, 91: 723729. Liu RH. 2003. Health benefits of fruits and vegetables are from additive and synergistic combination of phytochemicals. Am. J. Clin. Nutr., 78: 517-520. Mahama O, Jeremy TO, Jean Baptiste T, Didier B, Clmentine BD, Gnissa K. 2008. Characterization and evaluation of accessions of Bambara groundnut (Vigna subterranean (L.) Verdcourt) from Burkina Faso. Sci. Nat., 5(2): 191-197. Minka DR, Bruneteau M. 2000. Partial chemical composition of bambara pea (Vigna subterranean L. Verdc.). Food Chem., 68: 273-276. Navindra PS. 2008. Berry Fruits: Compositional Elements, Biochemical Activities, and the Impact of Their Intake on Human Health, Performance, and Disease. J. Agric. Food Chem., 56: 627 629. Nihal TY, Sedat V, Ferda S, Gokce P. 2007. Effect of Extraction Conditions on Measured Total Polyphenol Contents and Antioxidant and Antibacterial Activities of Black Tea. Molecules, 12: 484-496. Ou B, Prior RL, Huang D. 2005. The chemistry behind dietary antioxidant capacity assays. J. Agric. Food Chem., 53: 1841-1856. Pal E. 1998. Contribution ltude des composs anthocyaniques des plantes : cas de Hibiscus sabdariffa, Lannea microcarpa, Vigna subterranea et Sorghum caudatum du Burkina Faso.

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A. MBAIOGAOU et al. / Int. J. Biol. Chem. Sci. 7(2): 861-871, 2013

Thse de troisime Cycle, Universit de Ouagadougou, Ouagadougou, p. 16-17. Pellegrini N, Del Rio D, Colombi B, Bianchi M, Brighenti F. 2003. Application of the 2,2-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6sulfonic acid) radical-cation assay to a flow injection system for the evaluation of antioxidant activity of some pure compounds and beverages. J. Agric. Food Chem., 51: 260-264. Proteggente AR, Pannala AS, Paganga G, Van Buren L, Wagner E, Wiseman S, Van De Put F, Dacombe C, Rice-Evans CA. 2002. The antioxidant activity of regularly consumed fruit and vegetables reflects their phenolic and vitamin C composition. Free Radical Res., 36(2): 217-33. Sellapan S, Akoh CC. 2002. Flavonoids and antioxidant capacity of Georgia-grown blueberries and blackberries. J. Agric. Food Chem., 50: 2432-2438. Stephanie D, Xavier V, Philippe C, Marion W, Jean-Michel M. 2009. Comparative

Study of Antioxidant Properties and Total Phenolic Content of 30 Plant Extracts of Industrial Interest Industrial Interest Using DPPH, TEAC, FRAP, SOD, and ORAC Assays. J. Agric. Food Chem., 57: 17681774. Wigand MC, Dangles O, Brouillard R. 1992. Complexation of a fluorescent anthocyanin with purines and polyphenols. Phytochemistry, 31(12): 4317-4324. Wojdylo A, Oszmianski J, Czemerys R. 2007. Antioxidant activity and phenolic compounds in 32 selected herbs. Food Chem., 105: 940-949. Yanjun Z, Navindra PS, Rupo L, Lydia F, David H. 2008. Isolation and identification of strawberry phenolics with antioxidant and human cancer cell antiproliferative properties. J. Agric. Food Chem., 56: 670-675.

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