CLULAS MADRE HEMATOPOYETICAS, CELULAS DE CORDON UMBILICAL Y MEDICINA REGENERATIVA

Jos E. Cardier, MD, PhD

(jcardier@ivic.gob.ve)

Unidad de Terapia Celular - Laboratorio de Patologa Celular y Molecular Centro de Medicina Experimental, IVIC, Caracas - Venezuela

CELULAS MADRE (STEM CELLS)

Clulas indiferenciadas a partir de las cuales se pueden obtener clulas de distintos tejidos Pueden ser cultivadas indefinidamente

Embrionarias Tejidos Adultos Totipotentes: Pueden dar lugar a un individuo completo Pluripotentes: Pueden dar lugar a clulas de todo tipo de tejidos Multipotentes: Pueden dar lugar a clulas de diversos tejidos Unipotentes: Slo dan lugar a clulas de un solo tejido

INVESTIGACION BASICA
Thomas D. Bone Marrow Transplantation in Dogs. 19501960s. NOBEL PRIZE IN MEDICINE. 1990 Till JE, McCulloch EA. A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells. Rad. Res. 14, 213-222 Spangrude GJ, et al. Purification and characterization of mouse hematopoietic stem cells. Science. 1988.

INVESTIGACION APLICADA (CLINICA) PLASTICIDAD

Brazelton TR, et al. From Marrow to Brain: Expression of Neuronal Phenotypes in Adult Mice. Science 2000 Mezey E, et al. Turning Blood into Brain: Cell Bearing Neuronal Antigens Generated in Vivo from Bone Marrow. Science 2000.

McKinney-Freeman SL, et al. Muscle-derived hematopoietic stem cells are hematopoietic in origin. PNAS. 2002
Theise ND, et al. Liver from bone marrow in humans. Hepatology. 2000 Masuya M, et al. Hematopoietic origin of glomerular mesangial cells. Blood. 2003

REPROGRAMACION CELULAR

(Thomson J, et al. Science, 1998)

Cell, 2006 Nature, July 2007

Clulas Madre
CME
ESC ESC

Curacin de Anemia Drepanoctica con iPSC

Autorenovacin

Pluripotencialidad

Progenitor Comprometido Science 2007 - Disease-corrected haematopoietic progenitors from Fanconi anaemia iPS. Nature, July 2009

Reprogramacin Molecular iPSC

Clula Diferenciada

-Reversal of hyperglicemia in diabetic mouse models using iPS-derived pancreatic like cells. Alipio et al. PNAS 2010 -- Targeted gene correction of 1antitrypsin deficiency in induced pluripotent stem cells. Nature 2011

Cell, 2006

Reticulocyte Megakaryocyte CFU-E Monocyte Neutrophile

CFU-G CFU-M CFU-Mk

BFU-E

CFU-GM CFU-GEMM

STEM CELL

Clulas Madre: Ontogenia

Blastocisto Humano 4-5 das de desarrollo
Embrin Humano ( 32 das)

Clulas Madre Embrionaria

CD34+ EC CD34+ HSC

Fetal
Saco Vitelino
Bazo 10 a 12 semanas

Postnatal
Lquido Amnitico (AFSC)

SCU
Mdula Osea (CM en SP) Tejidos nohematopoyticos (piel, SNC, msculo, adiposo, pulpa dentaria, etc)

Hgado Fetal

BPAD

Clula Stem Hematopoytica (HSC)

HSC HSC

Pluripotencialidad

Autorenovacin

Progenitor Comprometido

Citocinas
HSC
CMP
Tempranas LIF,SCF,flt-3l

CLP

HSC PLURIPOTENTE

MKEP

Intermedia SCF,GM-CSF

GMP

Tardas CFU-G CFU-M CFU-GM CFU-MK CFU-E

Epo
G-CSF

Linfocitos Granulocitos Monocitos Macrfagos

Plaquetas Eritrocitos

Obtencin de Clulas Progenitoras Hematopoyticas.

TIM CMO

2 das
CMO-5FU

9-12 das
Ratn embarazada CHF

Obtencin de Stem Cells Hematopoyticas Humanas

CD34+

Sangre de Cordon Umbilical

CD34+

EFECTO DE CITOQUINAS SOBRE FORMACION DE COLONIAS HEMATOPOYETICAS

HPP-CFC

SCF/IL-1/IL-3

SCF/IL-1/IL-6
CFC

Cardier et al, STEM CELLS, 1997,15:437-442

Ensayos Clonognicos

Sinusoide Heptico

HSC HSC Hematopoysis Extramedular Heptica Qumicos

Patologa Quimioterapia

CELULAS HEMATOPOYETICAS EN MICROAMBIENTES ENDOTELIALES HEPATICOS

LSEC-1

LSEC-2

MICROAMBIENTE HEMATOPOYETICO

Hematopoysis in vitro HSC

LSEC

Cardier et al, Hepatology, 1997,26:165-175

ESC LSEC

HSC LSEC

Linfopoysis B in vitro

CELULAS MADRE: UNIDAD DE TERAPIA CELULAR - IVIC

CLULAS MADRE DE NEUROEPITELIO OLFATORIO HUMANO Nestin

Stem and Development, 2012

INVESTIGACION BASICA
CONOCIMIENTOS DE LA BIOLOGIA DE CELULAS MADRE: AISLAMIENTO, CRECIMIENTO, GENERACION DE CELULAS DE DIVERSOS TIPOS, POSIBILIDAD FORMACION DE TUMORES, etc

INVESTIGACION APLICADA

TRATAMIENTOS CON CELULAS MADRE PARA REGENERACION DE ORGANOS Y TEJIDOS

CELULAS MADRE HEMATOPOYETICAS: TRANSPLANTE DE MEDULA OSEA

CMC CMMO G-CSF

The Nobel Prize in Physiology and Medicine 1990

"for their discoveries concerning organ and cell transplantation in the treatment of human disease"

CD34+

CD34+

Sangre de Cordn Umbilical (SCU)

Alto contenido de CM (vs pequeo volumen de muestra). En transplante de SCU la cintica de recuperacin hematopoytica es mas lenta que en el transplante de CMMO. Retardo o falla de injerto comparado con CMMO (adultos). La frecuencia de CMH primitivas es similar en MO (adultos), CM movilizadas a SP y en SCU. Sin embargo el potencial de proliferacin es mayor en SCU (presencia de CMH ms primitivas) Bajo GVHD

Ventajas de Trasplante de clulas de cordn:

Menor restriccin HLA Oportunidad de Trasplante para pacientes sin donante HLA compatible Disponibilidad para minoras tnicas Menos enfermedad injerto vs husped Menos transmisin de enfermedades Menos alorreactividad

Evidencias del potencial de diferenciacin de CMSCU

In vitro: Presencia de clulas multipotentes (CD45-) CH, SN, osteoblastos/clastos, condrocitos, adipocitos. CD34/CD133 CE + cardiomiocitos (in vitro) Clulas mesenquimales Cardiomiocitos

In vivo:
Angiogenesis / Mejora contractilidad (ratn, cerdo). Terapia gnica: CD34 Transf. Ang1 y VEGF Angiogenesis / Mejora contractilidad (ratn) EPC Angiognesis (rata)

Ingeniera de Tejidos (Ej. Vlvulas cardacas)

TODAS LAS EVIDENCIAS SON EXPERIMENTALES !!!!

Nature Reviews Cancer, 2008

MEDICINA REGENERATIVA

Clulas Madre

International Society for Stem Cell Research

La gama de enfermedades en los que las clulas madre han demostrado ser beneficiosas en ensayos clnicos llevados a cabo en forma responsable sigue siendo muy restringida. La terapia con clulas madre mejor definida y utilizada ms ampliamente es el

trasplante de clulas madre

hamatopoyticas

(formadoras de clulas de la sangre) para tratar

enfermedades y afecciones de las sangre y el sistema inmunolgico o para restaurar el sistema sanguneo despus de tratamientos para algunos tipos especficos de cncer. Algunas

enfermedades o lesiones de los

pueden ser tratados con injertos de

huesos, la piel y la crnea

tejido que depende de clulas madre de esos rganos y son generalmente aceptadas como seguras y efectivas por la comunidad mdica

www.isscr.org

No cell therapy has cured cancer, fixed heart disease, or stopped neurodegeneration. When we finally go into patients and give an injection that stops MS or stops lupus in its tracks, youre going to see people running toward cell therapies.
Robert Lanza, chief scientific officer at Advanced Cell Technology (The Scientist July 2012)

OFERTAS DE TRATAMIENTOS CON CELULAS MADRE

ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES DIABETES TIPO 1 PARKINSON ALZHEIMER PARAPLEJICO: SECCION MEDULAR

SINDROME DE DOWN

AUTISMO

SCLEROSIS MULTIPLE

SCLEROSIS LATERAL AMIOTROFICA

Regeneracin Cardiaca Mediante Clulas Madre: Evidencias experimentales y clnicas

FUENTES DE CM PARA REGENERACION CARDIACA
Lancet, 2012

M.O:CMH/ MSC / CPE

S.P: CMH/ G-CSF

CME iPS
T. Muscular: Mioblastos

T. Adiposo: MSC
2000 200 2004 2005 2008 2010 en progreso

CPC CSF

200 en progreso

PROGENITORES NO-CARDIACOS

CELULAS CARDIACAS/ PROGENITORES CARDIACOS

WHOLE-ORGAN TISSUE ENGINEERING: DECELLULARIZATION AND RECELLULARIZATION OF THREE-DIMENSIONAL MATRIX SCAFFOLDS.

(Badylak SF, et al. Annu Rev Biomed Eng 2011)

Nature Medicine, 2008

RECELLULARIZED HEART CONSTRUCT ON DAY 4

WHOLE-ORGAN TISSUE ENGINEERING: DECELLULARIZATION AND RECELLULARIZATION OF THREE-DIMENSIONAL MATRIX SCAFFOLDS.

(Badylak SF, et al. Annu Rev Biomed Eng 2011)

Cell 2011

Lancet 2011

PROGENITORES ENDOTELIALES PARA GENERACION DE ANGIOGENESIS CFU-EC / in vitro angiogenesis

REVASCULARIZACION MEDIANTE TRANSPLANTE DE PROGENITORES DE CELULAS ENDOTELIALES

Blood, 2009

TRATAMIENTO POTENCIAL CON CELULAS MADRE

DE LA DIABETES TIPO I

A PESAR DE QUE LA INSULINA FUE DESCUBIERTA HACE MAS DE 75 AOS

LAS COMPLICACIONES DE LA DIABETES SIGUEN SIENDO IMPORTANTES

IMPLANTE DE CELULAS- MEDIANTE TRASPLANTE DE PANCREAS

TRASPLANTE DE ISLOTES PANCREATICOS

CELULAS MADRE COMO FUENTE DE CELULAS-

(Clulas Madre Pancreticas vs Progenitores Pancreticos)

Clulas Madre
CME
ESC ESC

Curacin de Anemia Drepanoctica con iPSC

Autorenovacin

Pluripotencialidad

Progenitor Comprometido Science 21007 - Disease-corrected haematopoietic progenitors from Fanconi anaemia iPS. Nature, July 2009

Reprogramacin Molecular iPSC

Clula Diferenciada

- Generation of pluripotent stem cells from patients with type I diabetes. PNAS, 2009 - Reversal of hyperglicemia in diabetic mouse models using iPS-derived pancreatic like cells. Alipio et al. PNAS 2010

Cell, 2006

Yamanaka sobre el uso futuro de las clulas madres

"Pasarn aos antes de poder ofrecer tratamientos basados en estas clulas" "La retina ser el primer rgano que regeneremos
La vanguardia.com; Espaa, Julio 2011

TRANSPLANTE DE CELULAS MADRE HEMATOPOYETICAS EN ENFERMEDADES DEL SISTEMA NERVIOSO

Lancet Neurology, 2009

TRANSPLANTE DE CELULAS MADRE SOMATICAS (RESIDENTES O DERIVADAS DE TEJIDO) EN ENFERMEDADES DEL SISTEMA NERVIOSO StemCells, Inc. Announces Positive Phase I Batten Trial Results Reports Evidence of Engraftment and Long-Term Survival of HuCNS-SC Cells. June 18, 2008
www.stemcellsinc.com/news/090608.html

TRANSPLANTE DE CELULAS MADRE EN ENFERMEDADES AUTOINMUNES ?

QUIMIOTERAPIA PARA LA ELIMINACION DE CELULAS AUTOREACTIVAS Y REGENERACION DE UN SISTEMA INMUNOLOGICO TOLERANTE A PARTIR CE CELULAS MADRE HEMATOPOYETICAS
1. 2. EVIDENCIA PRECLINICA: MODELOS ANIMALES DE DIABETES: RATONES NOD (NON-OBESE DIABETIC MICE) GENETICO TRANSPLANTE ALOGENICO MODELO ANIMAL DE ENCEFALOMIELITS AUTOINMUNE

EXPERIMENTAL MICROAMBIENTE TRANSPLANTE AUTOLOGO

PROTOCOLOS CLINICOS: NW UNIVERSITY TRANSPLANTE CMH EN 200 PACIENTES

1.

LES, EM, Enf. CROHN, MIASTENIA GRAVIS, AR, VASCULOPATIAS AUTOINMUNES

BENEFICIO CLINICO: POTENCIAL CAMBIO DE LA EVOLUCION CLINICA NATURAL DE LA ENFERMEDAD

NO CURA LA ENFERMEDAD
Burt et al., J of Autoimmunity 2008

CONCLUSIONES
Es una necesidad clnica urgente el desarrollo de estrategias para tratamientos regenerativos de rganos. Protocolos clnicos de tratamientos con CM EN CARDIOLOGIA, DIABETES, ENFERMEDADES DE SISTEMA NERVIOSO NO HAN DEMOSTRADO EFICACIA CLINICA HASTA EL MOMENTO LA MAYOR PARTE DE ESTUDIOS DE REGENERACION DE TEJIDOS Y ORGANOS (Ej. PANCREAS, CORAZON) MEDIANTE CELULAS MADRE PROVIENEN DE MODELOS ANIMALES Y PROTOCOLOS CLINICOS EXPERIMENTALES ASPECTOS ETICOS ! EVALUACION EXHAUSTIVA POR CBE !!!!!!

TRATAMIENTOS DE PACIENTES CON CLULAS MADRE:

REALIDAD O FRAUDE?
OFERTAS ENGAOSAS / FRAUDE

DESARROLLO DE UN LABORATORIO TERAPIA CELULAR

LABORATORIOS INVESTIGACION BASICA: I&D CLINICOS:
Proveen CM Dx, Seleccin pacientes Seguimiento clnico

Investigacin Bsica Desarrolo de RH de 4 nivel y tcnico

Investigacin Aplicada Desarrolo de RH de 4 nivel y tcnico

CELULAS MADRE:
Post-Grados IVIC Post-Grados Universidades Instituto Biomedicina UCV Sangre y MO: CD34+, EPC, MESENQUIMALES Articulacin rodilla: condrocitos Msculo estriado: mioblastos Otros: islotes L, SN, ??? Ascardio-Barquisimeto Post-Grado Cardiologa HJMV Hospital Universitario Caracas Hospital Victorino Santaella Hospital MPC Hospital Militar Unidad de Rodilla CLF Cardiologos/Hematologos Instituto Hematooncologa UCV,

EXPANSION - DIFERENCIACION
FASE I: FASE II: Infarto Agudo Miocardio Regeneracin Cartlago de Rodilla y Hueso Potencial: Piel, Crnea, Otros: Sistema Sistema Nervioso , Diabetes ???

CELULAS MADRE: UNIDAD DE TERAPIA CELULAR - IVIC

CM DE PULPA DENTAL

OSTEOGENESIS - CONDROGENESIS 2010 CM DE LIQUIDO AMNIOTICO

CM LIMBALES

ANGIOGENESIS IN VITRO

CLULAS MADRE DE NEUROEPITELIO OLFATORIO HUMANO

Nestin

UTC - IVIC / ORL - Hosp Militar

UTC-IVIC / HUC / FO-UCV / HMPC

CULTIVO Y EXPANSION DE CELULAS MADRE MESENQUIMALES DE MEDULA OSEA: REGENERACION OSEA

CMO

CD29

CD49b

CD49c

CD49e

CD54

CD62P

CD166

CD90

CULTIVO CELULAS MESENQUIMALES

OSTEOGENESIS: in vivo

UTC-IVIC / FO-UCV

PROCEDIMIENTO DE TRATAMIENTO CON CELULAS MADRE PARA REGENERAR HUESO

TOMA DE MUESTRA DE MEDULA OSEA DE PACIENTE CULTIVO DE CELULAS MADRE IMPLANTE DE CELULAS MADRE

REGENERACION OSEA
PRE-OPERATORIO 3 MESES DESPUES

FOTO: CORREO DEL ORINOCO

Implante de Clulas Madre en San Carlos/Cojedes.

Criopreservar las clulas madre del cordn umbilical de su beb es una de las decisiones ms importantes que como futuros padres podrn tomar. Una decisin que les permitir brindarle a su beb un respaldo de vida. En Clulas Madre Latinoamrica entendemos la importancia de esta decisin y ponemos a su disposicin nuestra experiencia y profesionalismo con la intencin de garantizar su tranquilidad!. Salvamos cordn, guardamos VIDA".

Parkinson, Alzheimer, Demencia Senil, Retinopata,osteoartrosis, Procesos Degenerativos en General, Manchas de la Piel, Insuficiencia Renal, ESTADO DE ANIMO, HUMOR, NIVELES DE ENERGIA ., etc.

Beneficios mltiples, en especial para Diabticos, Parkinson, demencia senil etc.

En la segunda quincena del mes de Febrero 2009, se estarn realizando en la ciudad de San Carlos estado Cojedes, las segundas Jornadas de Implante de Clulas Madres, los beneficios de realizarse el implante son muchsimos, ambulatorio, sin riesgo de rechazo pues se toman las clulas madre de la misma persona.

En que casos esta indicado el Implante Autlogo de Clulas Madre?

Diabetes tipo 1 y tipo 2, Enfermedades cardiovasculares, Insuficiencia Renal Crnica, Cirrosis Heptica, Enfermedades Respiratorias, Enfermedades Neurodegenerativas (Parkinson, Alzheimer, Demencia Senil, el ACV), Enfermedades Autoinmunes, Diabetes infantil, Retraso psicomotor post natal, Epilepsias, Distrofia Muscular

UNIDAD DE TERAPIA CELULAR - IVIC

Egidio Romano / Jos Cardier

UTC / LPCM - IVIC Rosalinda Pieruzzini, MD, ORL ESTUDIANTES

Ingrid Silva, Est. PhD Mayela Mendt, Est. PhD Yamelis Adasmes Esp. Oftalmol. HMPC Emily Sanchez, Esp. Oftalmol. HMPC Kimberly Triana, Est. Preg. UC Mara Villa, Est. Preg. UC Ariana foiquinos, Est Pregr. USB Estudiantes Fac. Medicina UCV Estudiantes Bachillerato Gonzalo Luna, MD, PhD Jesus Paez, MD, PhD Edgardo Caras, Esp. Odontol Maria del Castillo, Esp. Odontol

UTC / LPCM - IVIC Olga Wittig, MsSc Dylana Diaz, PhD Mara Elena Marquez, PhD Carlos Ayala, PhD
HUC: Dr. Csar GonzlezTraumatologa
Unidad de Rodilla Clnica La Floresta Dr. Ramn Prez, Barquisimeto Hospital MPC: Traumatol / Oftalmol Hospital Militar: ORL Ascardio-Barquisimeto Post-Grado Cardiologa HJMV Hospital Victorino Santaella Hospital Militar Hospital Miguel Perez Carreo Instituto Hematooncologa UCV, Instituto Biomedicina: Enrique Arciniegas

1 Clulas Madre Hematopoyticas, Clulas de Cordn Umbilical y Medicina Regenerativa Jose E. Cardier, MD; Olga Wittig, MSc; Dylana Daz, PhD; Mara Elena Mrquez, PhD; Carlos Ayala, PhD; Ingrid Silva, PhD; Mayela Mendt, PhD. Unidad de Terapia Celular, Laboratorio de Patologa Celular y Molecular, Centro de Medicina Experimental, Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC), Apartado 21827, Caracas 1020-A, Venezuela.

Las clulas madre (CM) constituyen los elementos a partir de los cuales pueden diferenciarse todos los tipos de clulas del organismo, por lo cual son consideradas como las unidades naturales de generacin de tejidos y rganos durante la etapa embrionaria, y de regeneracin de tejidos en el individuo adulto (1, 2). De acuerdo a la capacidad de diferenciacin de las CM, estas pueden ser definidas como totpotentes (representadas por el huevo o zigote y cada una de las 4-8 primeras clulas producto de su divisin), que pueden dar origen a un individuo completo; pluripotentes (representadas por las CM embrionarias, CME), las cuales pueden dar origen a clulas de todos los tipos de tejidos, pero no a un individuo completo; multipotentes, pueden dar origen a clulas de diversos tejidos; y unipotentes, dan origen a clulas de un solo tejido (1, 2). Una de las caractersticas ms importantes de las CM es su capacidad de autorenovacin ilimitada. Mediante esta propiedad las CM pueden dar origen a copias de ellas mismas , al proliferar sin diferenciarse (se mantienen como clulas indiferenciadas). Es importante resaltar que nicamente las CM pluripotentes tienen capacidad de autorenovacin ilimitada (1). En la etapa postnatal y adulta del individuo, las CM pueden ser aisladas a partir de sangre de cordn umbilical (SCU) y en la mdula sea (MO). Las CM localizadas en MO estn asociadas fundamentalmente con el sistema hematopoytico (generacin de clulas sanguneas), y se les denomina CM hematopoyticas (CMH). La facilidad de obtencin de las CMH, en la etapa postnatal y adulta del individuo, ha permitido estudiar ampliamente la capacidad de autorenovacin, diferenciacin y proliferacin de estas clulas. Muchos de los conocimientos generados sobre la biologa de las CMH han sido extrapolados a CM localizadas en otros tejidos. La enorme capacidad de diferenciacin de las CMH ha originado un gran entusiasmo en la comunidad mdica por el posible uso de estas clulas para regeneracin de tejidos en humanos. El desarrollo de tecnologas que permitan la expansin y diferenciacin de estas clulas podra tener un enorme impacto en el tratamiento de pacientes que requieren regeneracin o reparacin de rganos vitales. Todo esto ha llevado a plantear que el uso de CM podra constituir una poderosa herramienta teraputica en determinadas patologas humanas (1,2). Esto ltimo ha dado lugar a que personas inescrupulosas exploten comercialmente los potenciales usos clnicos de la multitud de nuevos conocimientos en el rea, la mayora experimentales y todava en fase preclnica (3). A pesar de que en muchas instituciones mdicas, con frecuencia sin fundamentacin ni permisologa adecuadas y con intencionas oscuras, se administran tratamientos basados en

2 CM, actualmente el transplante de mdula sea (TMO) constituye la nica terapia, basada en CM, que ha demostrado su efectividad clnica en humanos. Este tipo de terapia se ha usado fundamentalmente para la reconstitucin de mdula sea posterior a la administracin de quimioterapia en pacientes con cncer de origen hematolgico (ciertas leucemias, linfomas, mieloma mltiple) como tambin en cncer de seno (4). En el caso de enfermedades genticas, tipo talasemias y drepanocitosis, el TMO potencialmente podra constituir un tratamiento curativo para estas enfermedades (4). Por otro lado, se ha planteado la posibilidad de expandir CMH, in vitro, como una alternativa teraputica importante para ciertos problemas hematolgicos. Sin embargo, esto no ha sido logrado a pesar de los avances en el campo de cultivos de CM, ya que una vez que las CMH son colocadas en cultivo ocurre una expansin notable de los progenitores hematopoyticos, pero no ocurre una verdadera expansin de las CMH. Consecuentemente, cuando estos progenitores son transplantados nuevamente en el donante el efecto benfico es transitorio. La sangre de cordn umbilical (SCU) es usada como una alternativa a la medula sea, como fuente de CMH (4), para transplante alognico en leucemias, aplasia medular, hemoglobinopatas y en algunas otras enfermedades neoplsicas, genticas y metablicas. El xito del uso de CM de SCU se basa en que parecen ser ms eficientes en cuanto a la repoblacin medular, generar menos rechazo y menos incidencia de enfermedad de injerto contra husped (4). Esto ltimo, ha trado como consecuencia una proliferacin de compaas que ofrecen el servicio de coleccin y mantenimiento de sangre de cordn umbilical para fines de uso privado, con la consecuente comercializacin de estos servicios usando argumentos no sustentados cientficamente, y especialmente con la promesa de tratamientos potenciales, pero no probados clnicamente (ofrecimientos de un seguro de vida para su hijo y su familia) (4). En todo caso, y sin lugar a dudas, el almacenamiento de sangre de cordn umbilical para ser usada por quien necesite el transplante de CMH, y sea compatible, debera funcionar en Bancos de Sangre de Cordn Umbilical de Acceso Publico. Este tipo de Bancos funcionan en muchos pases, asociados entre ellos en redes, y constituyen una necesidad actual en los servicios de salud de cualquier pas. El desarrollo continuo de tcnicas de cultivos celulares no solo ha permitido avanzar en el campo de las CM, sino tambin ha permitido el poder cultivar y expandir una gran variedad de tipos celulares, algunos de ellos con potencial uso clnico. En nuestro laboratorio hemos desarrollado tcnicas de cultivo no solo para expandir sino para diferenciar algunos tipos de CM provenientes de diferentes tejidos. Entre estos precursores podemos mencionar el
+

aislamiento de CMH/CD34 de sangre perifrica de pacientes, posterior a inyeccin de GCSF. En cuanto a diferenciacin celular, el uso de diferentes tipos de cultivo ha permitido obtener diferentes clulas sanguneas a partir de CMH (5-8). Mediante el uso de sistemas de cultivo semi-slidos, pueden obtenerse progenitores hematopoyticos (Mk, eritropoyticos y granulocticos-macrofgicos) a partir de CM provenientes de mdula sea. En conclusin, los resultados reportados hasta el momento, en revistas biomdicas de alto impacto internacional, muestran que la mayor parte de estudios de regeneracin de rganos y tejidos, mediante el uso de clulas madre, provienen de modelos animales y protocolos clnicos experimentales. Estos estudios no han demostrado claramente la efectividad clnica del uso de CM en humanos hasta el momento. El desarrollo de tecnologas que permitan usar las CM con fines teraputicos, constituye uno de los campos de investigacin y desarrollo de mayor impacto en la medicina actual para el tratamiento sustitutivo

3 (regeneracin o reparacin) de rganos y tejidos. La posibilidad de aislar, cultivar, expandir y diferenciar estas clulas en el laboratorio, y su uso en modelos experimentales y potencialmente en humanos, tendrn un enorme impacto no solo en la salud de estos pacientes, sino tambin que podra disminuir los costos de tratamientos de estas enfermedades. Referencias bibliogrficas: 1. Weissman IL. Translating Stem and Progenitor Cell biology to the Clinic: Barriers and opportunities. Science 2000;287:1442-1446 2. Klimanskaya I, Rosenthal N, Lanza R. Derive and conquer: Sourcing and differentiating stem cells for therapeutic applications. Nature Rev Drug Discov. 2008;7: 131-142 3. Lindvall O, Hyun I. Medical innovation versus stem cell tourism. Science. 2009;324: 1664-1665. 4. Sullivan MJ. Banking on cord blood stem cells. Nat Rev Cancer. 2008;8:555-563. 5. Cardier J, Foster D, Lok Si, Jacobsen S.E.W, Murphy MJ, Jr. Megakaryocytopoiesis in vitro: from the stem cells perspectives. Stem Cells 1996;14:163-172 . 6. Wittig O, Paez-Cortez J, Cardier JE. Liver sinusoidal endothelial cells promote B lymphopoiesis from primitive hematopoietic progenitors. Stem Cells and Development 2010; 19: 341-350 7. Cardier J, Erickson-Miller CL, Murphy MJ, Jr. Differential effect of erythropoietin and GM-CSF on megakaryocytopoiesis from primitive bone marrow cells in serum-free conditions. Stem Cells, 1997;15:286-290. 8. Cardier J, Barber-Guillem E. Extramedullary hematopoiesis in the adult mouse liver is associated with specific hepatic sinusoidal endothelial cells. Hepatology 1997; 26:165175.