Diagnstico

Debido a la presencia normal de este agente en el organismo, el diagnstico debe estructurarse conjuntamente con las manifestaciones clnicas y la respuesta al tratamiento. El cultivo, por s solo, nicamente nos informa de la existencia de levaduras, pero no diferencia la colonizacin de la infeccin. Por tanto, la observacin de levaduras en el examen directo es imprescindible para establecer el diagnstico de certeza.

La toma de muestras se lleva a cabo de diferentes maneras: frotis directo con torunda estril, enjuague bucal con solucin salina (para cuantificacin), impregnacin con un cuadrado de espuma estril (para cuantificacin), biopsia (en candidiasis hiperplsica y esofagitis). El examen directo con solucin salina y azul de lactofenol puede ser til para el diagnstico rpido de la candidiasis oral pseudomembranosa, pero las tcnicas de cultivo suelen ser ms sensibles, ya que la microscopa directa precisa de la existencia de un nmero significativo de levaduras. La tincin de Gram mejora mucho la observacin en fresco, pues pueden distinguirse ms fcilmente las clulas levaduriformes. Buen rendimiento ofrece tambin la tincin con fluorocromos (rojo Congo, blanco de calcoflor). La presencia de pseudohifas o hifas y clulas inflamatorias en un frotis se valora ms que la de blastosporas en relacin con una posible infeccin. La presencia de hifas o pseudohifas sugiere infeccin por Candida albicans. El examen histolgico es esencial para el diagnstico de candidiasis hiperplsica, y muy til en la esofagitis. Debido a la proliferacin de levaduras en los tejidos, las muestras de biopsias deben procesarse rpidamente. Para la deteccin de levaduras en estas muestras, la tincin con hematoxilina-eosina no es muy sensible, por lo que debe utilizarse otra tcnica como la del cido perydico de Schiff (PAS), que pone de manifiesto la presencia de hifas y blastosporas que se ramifican en las capas superficiales del epitelio. El cultivo es imprescindible para establecer la etiologa y efectuar pruebas de sensibilidad a los antifngicos, as como para llevar a cabo estudios de tipificacin molecular. Un cultivo positivo slo demuestra la presencia de levaduras, pero no de infeccin, sobre todo en ausencia de clnica sugestiva. El agar glucosado de Sabouraud con antibiticos es un buen

medio para el cultivo primario de muestras orofarngeas, pero dada la similar morfologa colonial que exhiben las distintas especies de levaduras es deseable el empleo de un medio capaz de diferenciar las especies ms frecuentes y detectar cultivos mixtos, como es el CHROMagar Candida, donde se identifican muy bien C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis y C. krusei La produccin de tubos germinativos y de clamidosporas, son pruebas muy rentables para identificar a C. albicans. La produccin de tubos germinativos es adems una prueba sencilla y rpida (2-4 horas) que puede obviar otras ms lentas.La produccin de clamidosporas en medio de agar harina de maz, agar de Wolin-Bevis, agar arroz o agar patata-zanahoria, es ms rentable para la confirmacin de C. albicans cuando la prueba del tubo germinativo es negativa o se presta a confusin, pero requiere ms tiempo. <!--[if !supportLineBreakNewLine]--> <!--[endif]--> Actualmente, existen tcnicas de aglutinacin que ofrecen una buena alternativa diagnstica por su rapidez (5 minutos), sensibilidad y especificidad. As, el test BichroLatex Albicans utiliza partculas de ltex recubiertas con anticuerpos monoclonales que reaccionan con antgenos de C. albicans, y el llamado test Krusei color va dirigido a la identificacin de C. krusei; el test Candida Check posibilita identificar las especies ms frecuentes en clnica y detectar los serotipos A y B de C. albicans El estudio de la actividad enzimtica sobre sustratos concretos se ha aplicado desde hace unos aos a la identificacin rpida de levaduras, sobre todo de C. albicans. Existen mtodos rpidos con sustratos fluorognicos y cromognicos, con una sensibilidad y especificidad similar a la prueba del tubo germinativo y ms rpidos que sta, pero menos especficos que la asimilacin de compuestos de carbono.

Candida albicans, (blastoporas y clamidosporas).

(Imagen del texto de Diagnstico microbiolgico de Finegold) Al microscopio se observarn abundantes formas levaduriformes y seudohifas. El material examinado puede provenir de: mucosa bucal, uas, escamas, pus o esputo. La incubacin puede hacer a temperatura ambiente preferiblemente a 37 C, o en estufa

Medio de cultivo de Sabouraud con cloranfenicol. Crecimiento de levaduras (C. albicans) Paciente diagnosticada con Lupus Eritematoso sistmico.

AGAR CROMOGNICO PARA CNDIDA (Cat.1382): Nuevo medio diferencial y selectivo para el aislamiento y la rpida identificacin de especies de Cndida de importancia sanitaria. Las colonias de Candida albicans son verdes, las de Candida krusei son malvas-rosas, y aquellas de Candida tropicalis azules

DIAGNOSTICO

La diagnosis de una infeccin por levaduras se realiza ya sea a travs de un examen microscpico o cultivos. Para la identificacin por microscopa ptica, un raspado o frotis de la zona afectada se coloca en un portaobjetos de un microscopio. Luego se le aade a la muestra una sola gota de solucin de hidrxido de potasio (KOH) al 10%. El KOH disuelve las clulas cutneas pero deja las clulas Candida intactas, permitiendo la visualizacin de pseudohifas y las clulas de la levadura en ciernes tpico de muchas especies de Candida.

Para el mtodo de cultivo, un bastoncillo estril se frota sobre la superficie de la piel infectada. El bastoncillo es luego pasado por un medio de cultivo. El cultivo es incubado a 37 C por varios das, permitiendo el desarrollo de las colonias de levadura o bacterianas. La caractersticas (tales como la morfologa y el color) de las colonias puede permitir el diagnstico inicial del organismo que est causando los sntomas de la enfermedad.10 Un diagnstico diferencial caracterstico de la cndida con otras lesiones blancas orales, es que se elimina al raspado.