UN NUEVO CARIOTIPO PARA Galea musteloides (RODENTIA : CAVIIDAE) Y LISTA PRELIMINAR DE ENDOPARASITOIDES, PROCEDENTE DE UNA POBLACION PERUANA

Jos F. Franco (1), Rosa Ochoa (2) & Edwin Jarufe( 3)

1), 2), Centro De Estudios biolgicos Fortunato L. Herrera, Laboratorio de Citogentica, Cusco, Per, Urb. Belempampa A-8 (Santiago), Email correspondencia: franciscofranco114@yahoo.com.pe 3) Museo de Historia Natural, Universidad Nacional San Antonio Abad de Cusco, Per.

RESUMEN
Se describe un nuevo cariotipo de Galea musteloides y se dan a conocer las siguientes especies de endoparsitos gastrointestinales, encontrados en 3 ejemplares procedentes de Puno, Per (3800 m): Eimeria caviae, Aspiculuris tetrptera, Trichuris muris, Paraspirodera uncinata, Syphacia obvelata y Fasciola heptica, todos los ectoparsitos se mencionan por primera vez parasitando a G. musteloides en la regin indicada. Palabras claves : Galea musteloides , cariotipo, endoparsitos, Puno, Peru. S UM M E R Y We describe a new karyotype of Galea musteloides and disclosed the following species of gastrointestinal endoparasites, found in 3 specimens from Puno, Peru (3800 m): Eimeria caviae, Aspiculuris tetraptera, Trichuris muris, Paraspirodera uncinata, Syphacia obvelata and Fasciola heptica, all ectoparasites are mentioned for the first time parasitizing G. musteloides in the region indicated. Keywords : Galea musteloides auceps, karyotype, endoparasites, Puno, Per.

INTRODUCCION De acuerdo a una reciente revisin desarrollada por Dunnum & Salazar (2010),el gnero Galea Meyen 1832, esta conformado por tres especies vivientes, de distribucin sudamericana: G. musteloides, G. flavidens y G. spixii., cuyo conocimiento taxonmico y sistemtico estn sustentados principalmente en estudios de caracteres morfolgicos, sesgados por pequeos datos mustrales, con pobre representacin geogrfica y taxonmica, al que recin se incorporan la informacin molecular y citogentica, como datos de gran valor sistemtico filogentico, que aporta nuevas evidencias a interpretar. La especie G.musteloides es la de ms amplia distribucin con poblaciones conocidas desde el centro de Per hasta el sur de la Argentina y desde el nivel del mar hasta ms de 4,000 m., est especie es objeto de captura, comercializacin y utilizacin en la alimentacin humana. Desde pocas ancestrales los antiguos pobladores aimaras y quechuas, consuman este roedor, mantenindolo en cautiverio, hoy su consumo continua con menor frecuencia, en la mencionada localidad. Agnolin et. al. (2008) Esta especie de roedor es de comportamiento polgamo, habita en las laderas de cerros, donde encuentran su alimento conformado por gramneas de la zona, cavn galeras a poca profundidad, all casi todos los miembros del grupo,(adultos machos, hembras y juveniles), aguardan en el refugio. Pearson (1957). Los estudios cromosmicos en esta especie, son muy limitados, particularmente las poblaciones peruanas carecen de informacin citogentica, excepto las poblaciones de Bolivia descritas por Dunnum & Salazar (2010), como 2n=68 ,NF= 132, donde se aprecia una marcada predominancia de cromosomas bibraquiales. Teniendo en cuenta la importancia de la especie en el altiplano peruano de Puno, se presentan los resultados citogenticos hallados en 3 especmenes de G. musteloides obtenidos de un mercado popular en los que eran comercializados, para su consumo humano y que dada la inexistencia de estudios parasitolgicos, se complementa este articulo con la presentacin de los endoparsitos, encontrados en los ejemplares

sacrificados durante el estudio cromosmico, cuya importancia es indiscutible ya que los resultados muestran un nuevo cariotipo diferente al conocido en esta especie y que corresponde a las poblaciones de esta zona peruana. MATERIALES Y METODOS Citogentica : Se realiz el anlisis citogentico en 3 especmenes del Sacha cuy Galeamusteloides (2 machos y 1 hembra), adquiridos en uno de los mercados populares de la ciudad de Puno (Per), ubicado en las coordenadas 15 50'20" S, 70 01' 43" O. a 3800 m., las mismas que fueron identificadas con ayuda de las claves proporcionadas por Pearson (1957) y las descripciones de Agnolin et. al. (2008).Se utiliz medula sea (fmur y hmero), en todos los especmenes, siguiendo la tcnica de Ford & Hamerton (1956).Se inyecto intraperitonealmente 1 ml de solucin de Colchicina al 0.025% por cada 100gr. de peso del animal, despus de 60 a 90 minutos sacrificamos por dislocamiento cervical y extrajimos la medula sea, hipotonizamos con KCl (0.075M), por 28 minutos y fijamos con Carnoy (Metanol- Acido Acetico 3:1), las suspensiones celulares fijadas, se gotearon en lminas portaobjetos, para luego colorearlas con Giemsa al 2% (Buffer Fosfato pH 6.8). Se analiz 10 a 15 placas metafsicas por lmina y para elaborar el cariotipo, se utilizaron microfotografas de las mejores preparaciones, utilizando un fotomicroscpio Carl Zeiss JENA; usando pelcula a color Kodak ASA 100. De los cromosomas apareados se tomaron las medidas relativas para calcular los valores del ndice Centromrico (Ic), los que fueron comparados con la escala de Levan et. al. (1964), Los resultados se comparan con los reportados previamente para G. musteloides de Bolivia por Dunnum & Salazar (2010). Parasitologia : Se recolect materia fecal recientemente emitida, para el reconocimiento de huevos y quistes en las heces, se utiliz una tcnica de por flotacin con solucin de Sheather para comprobar la posible presencia de

ooquistes y huevos de nematodes y cestodes; a efectos de comprovar la presencia de los endoparsitos en los roedores. Se complement las observaciones coproparasitolgicas con el examen detallado de la mucosa intestinal en la bsqueda de larvas de nematodos o cestodos, incluyendo los rganos como el hgado, etc siguiendo criterios parasitolgicos rutinarios de acuerdo con las recomendaciones encontradas en la bibliografa especializada. Las identificaciones de los endoparsitos se efectu con ayuda de la literatura especializada, Samuel et. al. (2001), finalmente se microfotografaron los ooquistes huevos y nematodos observados.

RESULTADOS NUEVO CARIOTIPO:

Los tres ejemplares de Galea musteloides analizadas cromosmicamente, tenan un nmero diploide 2n = 68 y el nmero de brazos autosmicos NA = 114. El complemento cromosmico (Fig. 2 A,B) consistio de 33 pares de cromosomas autosomicos y un par de cromosomas gonosomicos, responsables de la determinacin del sexo, que fueron de tipo XX (hembra) y XY (Macho). Cariotipo conformado por 24 pares de cromosomas bibraquiales de tipo Metacntricos (pares 2, 3, 5, 7, 14 y 15), Submetacntricos (pares 4, 6, 9, 10, 11, 12, 13, 19, 20, 21, 22, 23 y 24), Subtelocntricos ( 1, 8, 16, 17 y 18) y finalmente 9 pares monobraquiales de morfologa telocentrica ( pares 25 al 33). En el grupo de gonosomas, el cromosoma X es metacntrico y el Y un pequeo telocentrico. Los datos cariometricos de cada cromosoma, definidos por el Indice centromerico, se dan en la tabla correspondiente (Ver Tabla 1.).

LISTA DE ENDOPARASITOS:
El examen directo de heces fecales recin emitidas y de la mucosa intestinal, incluyendo otros rganos como el hgado, permiti reunir la presente lista, cuyos datos son considerados como preliminares.

Eimeria caviae Sheather 1924. Encontrada en casi todas las muestras de heces fecales, es un parasito coccidio (Apicomplexa), de la familia Eimeriidae, caracterizado por sus ooquistes de forma ovoide alargados y en ocasiones subesfricos (Ver Fig. 3 A), se encuentra tambin presente en otras especies de roedores caviomorfos. Paraspirodera uncinata Rudolphi 1819, (Travassos, 1914). Nematodo parasito de la familia Heterakidae, encontrado especialmente en los ciegos intestinales, e intestino grueso, larvas fusiformes, la hembra presenta 2 espculas sexuales alargadas (Ver Fig. 3 B,C,D), parasita muchas especies de roedores caviomorfos y muridos, presenta los huevos con una gruesa corteza protectora o descorticados , se encontr en todos los ejemplares estudiados. Aspiculuris tetrptera Schulz 1924. Nematodo parsito dela familia Heteroxinematidae, larvas fusiformes, encontradas en el intestino delgado de uno de los ejemplares, con huevos inconfundibles, (Ver Fig. 3 E,F,G), registrado en otras especies de roedores. Syphacia obvelata Seurat, 1916. Nematodo parasito de la familia Oxyuridae, larvas fusiformes, se encontr en el intestino delgado de 2 ejemplares presenta la cauda muy dilatada y los huevos alargados, tal como es apreciado en las lminas correspondientes (Ver Fig.3 H,I, J). Trichuris muris Schrank 1788. Nematodo parasito, de la familia Trichuridae, se encontr los huevos en heces fecales, de un ejemplar, las que se diferencian fcilmente por su caracterstica forma de barril con los dos extremos dilatados y romos (Ver Fig 3. K). Fasciola heptica Linnaeus 1758. El nico trematodo parasito, encontrado en el hgado de 2 ejemplares, se verifico la presencia de huevos en las heces fecales y de los adultos en el rgano afectado, de los especmenes estudiados., su huevo es inconfundible y muy conocido (Ver Fig3, L)., se le conoce como duela o kallotaca en una amplia gama de hospederos incluyendo el hombre.

DISCUSION Citogeneticas:
Nuestros resultados muestran la existencia de un nuevo cariotipo para la poblacin peruana de Galea musteloides, procedente de la regin Puno sobre la base de 3 especmenes estudiados, con tcnicas convencionales y que fueron obtenidos de un mercado popular en la que son comercializados para el consumo humano. El cariotipo sustentado como nuevo, presenta el mismo nmero cromosmico (2n=68, XX/XY), encontrado y descrito por Dunnum & Salazar (2010), para las poblaciones de Bolivia, sin embargo difiere en el cariotipo, en el que se distinguen 9 pares de cromosomas telocentricos, pequeos (pares 25 al 33), que no existen en los cariotipos reportados para la poblacin boliviana. El contraste de ambos resultados (ver tabla2), permite reconocer una gran cantidad de cromosomas morfolgicamente diferentes, cuyos centrmeros no concuerdan. El cariotipo descrito para Bolivia presenta un 100% de cromosomas bibraquiales donde predominan los cromosomas de tipo metacntrico, submetacntrico lo que est representado por un NF= 132, que resulta mayor que lo encontrado en los cariotipos de Puno (Per), NF= 118, por la presencia de cromosomas telocntrico. Este fenmeno se explicara como un polimorfismo cromosmico generado por el aislamiento geogrfico , en la que las posibles mutaciones cromosmicas serian hipotticamente, las inversiones pericntricas que modificaron la posicin de los centrmeros en forma radical. Parasitologicas : Pocos son los estudios parasitolgicos en G. musteloides, de acuerdo a la revisin bibliogrfica solo conocemos la existencia de parasito Monoecocestus eliefe ( Cestoda), encontrado en G. musteloides de la localidad de Santa Cruz (Bolivia), descrito por primera vez por, Haverkost & Gardner (2010), constituyendo el nico antecedente para esta especie y aparte Graphidioides mazzai encontrado sobre Galea leucoblephara de la Argentina Lent (1935). AGRADECIMIENTOS.- Asemos extensivo nuestro reconocimiento al Dr. Jorge Salazar-Bravo de Bolivia, por el gentil envo de sus artculos.

FIGURA 1.- Galea musteloides : A) CARACTERISTICAS EXTERNAS DE UN EJEMPLAR (HEMBRA), B),C) METAFASES MITOTICAS DE MEDULA OSEA MOSTRANDO 2n= 68 CROMOSOMAS, LA FLECHA MUESTRA LOS AUTOSOMAS MS GRANDES.

FIGURA 2.- CROMOSOMAS DE Galea musteloides, DE PUNO, PERU: A) CARIOTIPO (MACHO), B) CARIOTIPO (HEMBRA).

Fig.3- IDIOGRAMA DE Galea musteloides

Fig. 4.- PARASITOS DE Galea musteloides:

Leyenda de la fig.4 : A) Eimeria caviae, B) C) D) Paraspirodera uncinata E) F) G) Aspiculuris tetrptera H) I) J) Syphacia obvelata K) Trichuris muris L) Fasciola hpatica

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Tabla 1.- VALORES CARIOMETRICOS DE LOS CROMOSOMAS DE Galea musteloides, EN BASE AL JUEGO HAPLOIDE (2N= 68, NF= 114 117, XX/XY), PROCEDENTE DE PUNO ,PER. (N=1).
PAR CROMOSMICO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 X Y LONGITUD RELATIVA (%) 7.75 5.17 4.74 4.74 4.31 4.31 4.31 3.87 3.87 3.44 3.44 3.44 3.01 3.01 2.58 2.58 2.58 2.15 1.72 1.72 1.72 1.72 1.72 1.72 3.01 2.15 1.72 1.29 1.29 0.86 0.86 0.86 0.96 5.17 2.15 NDICE CENTROMERICO 16.66 50.00 45.45 27.27 50.00 30.00 40.00 22.22 25.00 25.00 33.33 25.00 33.33 50.00 50.00 14.28 14.28 20.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00 50.00 TIPO DE CROMOSOMA Submetacentrico Metacentrico Metacentrico Submetacentrico Metacentrico Submetacentrico Metacentrico Subtelocentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Metacentrico Metacentrico Subtelocentrico Subtelocentrico Subtelocentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Submetacentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Telocentrico Metacentrico Telocentrico

Tabla 2.- CARIOTIPOS DE Galea musteloides, PROCEDENTES DE PUNO , PER Y DE BOLIVIA Par Cromosmico Tipo de cromosoma, Tipo de Cromosoma, Comparacin Puno Per (Franco Bolivia (Dumnum & et. al 2013) Salazar (2010) 1 Submetacntrico Metacntrico Discordante * 2 Metacntrico Metacntrico Concordante 3 Submetacntrico Submetacntrico Concordante 4 Submetacntrico Submetacentrico Concordante 5 Metacntrico Submetacentrico Discordante * 6 Submetacntrico Submetacentrico Concordante 7 Metacntrico Metacntrico Concordante 8 Subtelocntrico Submetacentrico Discordante * 9 Submetacntrico Submetacentrico Concordante 10 Submetacentrico Submetacntrico Concordante 11 Submetacntrico Metacntrico Discordante * 12 Submetacntrico Submetacntrico Concordante 13 Submetacntrico Submetacntrico Concordante 14 Metacntrico Submetacntrico Discordante * 15 Metacntrico Metacntrico Concordante 16 Subtelocntrico Metacntrico Discordante * 17 Subtelocntrico Metacntrico Discordante * 18 Subtelocntrico metacntrico Discordante * 19 Submetacntrico metacntrico Discordante * 20 Submetacntrico metacntrico Discordante * 21 Submetacntrico metacntrico Discordante * 22 Submetacntrico metacntrico Discordante * 23 Submetacntrico metacntrico Discordante * 24 Submetacntrico metacntrico Discordante * 25 Telocentrico metacntrico Discordante * 26 Telocntrico metacntrico Discordante * 27 Telocntrico metacntrico Discordante * 28 telocntrico metacntrico Discordante * 29 Telocntrico metacntrico Discordante * 30 Telocntrico Subtelocntrico Discordante * 31 Telocntrico Subtelocntrico Discordante * 32 Telocntrico Subtelocntrico Discordante * 33 telocntrico Subtelocntrico Discordante * X metacntrico Submetacntrico Discordante * Y Telocntrico metacntrico Discordante * NF 117 132 Discordante *