Anilisisclinicos 2

UNIVERSIDAD DE COLIMA
BACHILLERATO TCNICO NO. 4

LABORATORIO DE ANLISIS CLNICOS II
PRCTICA NO. 1
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de glucosa sangunea
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sanguneos de glucosa y
importancia en el diagnostico de enfermedades como la diabetes
valorar
su
MATERIAL:
Bao mara a
Tubo seco o con gel para la toma de sangre
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Torundas con alcohol
Pipetas pistn de 20, 50, 100y 1000 microlitros
Puntillas para las pipetas pistn
Pipetas graduadas de 5 y 10 ml.
Tubos limpios de 13x100 y 18x 200
Gradilla, centrfuga, perilla de tres vas, pipetas pasteur
Espectrofotmetro
Equipo para la determinacin de glucosa sangunea
INTRODUCCIN:
Normalmente, la comida que ingerimos se convierte en glucosa, la cual es una forma de
azcar. La glucosa pasa por el flujo sanguneo, donde se utiliza por las clulas como principal
fuente de energa. Sin embargo, para que las clulas puedan utilizar la glucosa, la insulina tiene
que estar presente. La insulina es una hormona producida por el pncreas, una glndula grande
detrs del estmago. Si la insulina no est presente, o si las clulas no le responden, la glucosa se
queda en el flujo sanguneo causando elevacin de los niveles de glucosa en la sangre. Cuando
los niveles del azcar en la sangre son muy altos, se le llama hiperglicemia; y cuando el nivel de
azcar en la sangre baja, se le llama hipoglicemia.
La diabetes mellitus es un grupo de enfermedades metablicas caracterizadas por una
hiperglucemia resultante de defectos en la secrecin de insulina, en la accin de la insulina o en
ambas. La hiperglucemia crnica de la diabetes est asociada a lesiones, disfuncin y fallo de
varios rganos, especialmente de los ojos, los riones, los nervios, el corazn y los vasos
sanguneos.
Varios procesos patognicos estn implicados en el desarrollo de la diabetes. Estos van
desde una destruccin autoinmunolgica de las clulas del pncreas, con la consiguiente
deficiencia de insulina, hasta anormalidades que ocasionan una resistencia a la insulina. La accin
deficiente de la insulina en los tejidos diana es la responsable del metabolismo anmalo de los
hidratos de carbono, grasas y protenas en la diabetes.
La accin deficiente de la insulina ocasiona unas respuestas deficientes o inadecuadas en

uno o ms puntos de la compleja trama metablica en la que esta hormona tiene acciones.
Frecuentemente coexisten en el mismo paciente una deficiente secrecin de insulina con defectos
de la accin de sta, sin saberse si una de estas anormalidades es la consecuencia o la causa de
la otra. En cualquier caso, el resultado es la hiperglucemia.
La gran mayora de los casos de diabetes pueden incluirse en dos amplias categoras
etiopatognicas. En el primer caso (diabetes de tipo I) la causa es una deficiencia absoluta en la
secrecin de insulina. Los individuos con alto riesgo de desarrollar este tipo de diabetes pueden
ser a menudo identificados mediante evidencias serolgicas de un proceso autoinmune patolgico
que se produce en los islotes pancreticos y tambin mediante marcadores genticos. En la
segunda categora (diabetes de tipo II), mucho ms prevalente, la causa es una combinacin de
una resistencia a la accin de la insulina y de una inadecuada respuesta secretora compensadora.
Esta segunda categora puede estar presente durante muchos aos antes de ser detectada una
hiperglucemia sin sntomas clnicos, pero suficiente para ocasionar cambios patolgicos y
funcionales sobre los rganos diana. Durante este perodo asintomtico, es posible demostrar
anomalas en el metabolismo de los carbohidratos midiendo la glucosa plasmtica en ayunas o
despus de una sobrecarga de glucosa por va oral.
Los criterios de diagnstico de la diabetes son:
Con sntomas con una glucosa plasmtica al azar >200 mg/dl (11.1 mmol/l), confirmada un otro
da con:
1)una glucosa plasmtica en ayunas >126 mg/dl (7.0 mmol/l),

2) un test de tolerancia a la glucosa oral con un valor a las dos horas >200 mg/dl (11.1
mmol/l), o
3) sntomas con una glucosa plasmrica al azar >200 mg/dl (11.1 mmol/l)
NOTAS IMPORTANTES PARA LA DETERMINACION DE GLUCOSA SANGUINEA:

1. La muestra de eleccin es suero o plasma, libre de hemlisis. Tambin pueden utilizarse
otros lquidos orgnicos, como cefalorraqudeo y la orina
2. los anticoagulantes comunes como EDTA, Citrato o heparina no producen interferencia
3. dado que la glucosa en la sangre total puede experimentar glucolisis a temperatura
ambiente, a una velocidad de aproximadamente 5% por hora, la muestra debe
centrifugarse, separandose del coagulo o clulas sanguneas los ms pronto posible
4. En el suero o plasma, en ausencia de clulas sanguneas, la glucosa es estable hasta 3
das a una temperatura de 2 a 8C.
EL PACIENTE DEBER PRESENTARSE AL LABORATORIO PARA PRACTICARLE EL
ANALISIS EN AYUNO, DE PREFERENCIA POR LA MAANA, SI NO ES POSIBLE DEBERA
TENER UN AYUNO COMO MNIMO DE 5 HORAS. EN CASO DE DIABETICOS
DESCOMPENSADOS EL ANALISIS SE DEBERA REALIZAR DE FORMA INMEDIATA
PROCEDIMIENTO:
1.- Una vez completada la coagulacin de la muestra, separar el suero y realizar el protocolo de
acuerdo a la tcnica indicada en el equipo.
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
ESTANDAR O PROBLEMA O
PATRON
MUESTRA
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VALORES DE REFERENCIA:
CALCULOS Y RESULTADOS:
CUESTIONARIO:
1.- Explica los diferentes tipos de diabetes (tipo I tipo II, gestacional)
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2.- Indica cules son las complicaciones de la diabetes:
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3.- En qu consiste la determinacin de hemoglobina glicosilada y cundo es til su

determinacin?
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4.- Qu importancia representa la dieta y el ejercicio para el diabtico?:
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OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES
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Nombre del alumno: ______________________________________________________________
Fecha de realizacin: _____________________________________________
Vo. Bo. Del profesor
Firma del alumno
PRCTICA NO. 2
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de urea sangunea
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles de urea sangunea
participacin en el diagnstico de la funcin renal.
conocer
su
MATERIAL:
Bao mara a 37C
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Pipetas pistn de y 50, 100, 500 y 1000 microlitros y puntillas
Gradilla, centrfuga, perilla de tres vas, pipetas pasteur
Espectrofotmetro
Equipo para la determinacin de urea sangunea
INTRODUCCIN: La urea se sintetiza en el hgado a partir del amonio producido por el
catabolismo proteico:
1. El cuerpo produce en promedio 25 a 30 gramos de urea al da algo ms en personas que
comen dieta rica en protenas, menos en personas con dieta pobre en protenas.
Toda esta urea debe eliminarse por orina; de lo contrario se acumular en lquidos
corporales.
Los dos factores principales que establecen el ritmo de excrecin de urea son:
1) la concentracin de urea en el plasma.
2) la intensidad de filtracin glomerular.
Estos factores aumentan la concentracin de urea principalmente porque la carga de urea
que penetra en tbulos proximales es igual al producto de la concentracin plasmtica de
urea por la intensidad de filtracin glomerular.
En general, la cantidad de urea que sigue por los tbulos y va a la orina es
aproximadamente proporcional a la carga de urea que penetra en los tbulos proximales,
en promedio 50 a 60%. Sin embargo, esto solo es cierto cuando la intensidad de filtracin
glomerular no se aleja de lo normal.
Cuando la intensidad de filtracin glomerular es muy baja, el filtrado persiste en los tbulos
por largo tiempo, antes de acabar en la orina.
Como todos los tbulos son por lo menos ligeramente permeables a la urea, cuanto ms
tiempo persista el liquido tubular en los tbulos, mayor resorcin de urea hacia la sangre; la
proporcin de urea filtrada que llega a la orina disminuye considerablemente.
Por otra parte, cuando la filtracin glomerular es muy intensa, el liquido pasa a travs del
sistema tubular tan rpidamente que se resorbe muy poca urea. Por lo tanto con intensidad
de filtracin glomerular muy elevada, casi el 100% de urea sale hacia la orina.
Una leccin muy importante, que debe aprenderse de estas relaciones, es que en
pacientes con insuficiencia renal es importante conservar la intensidad de filtrado
glomerular en valores altos. Cuando la intensidad de filtracin glomerular disminuye
demasiado, la concentracin de urea en sangre aumenta hasta un nivel proporcionalmente
mayor.
Por lo general este estudio se realiza para saber qu tan bien estn funcionando los riones. Las
enfermedades renales muchas veces dificultan el filtrado correcto de la urea. Esto causa niveles
altos de urea en sangre.
El estudio tambin se realiza a pacientes que estn sometidos a dilisis renal para ver si se esta
realizando bien esta funcin.
Ciertos medicamentos alteran las funciones de ciertos rganos como el rin y este estudio ayuda
a monitorear si los medicamentos y la dosis son correctos.
Este anlisis se debe pedir cuando sospechemos de problemas renales, o cuando queremos saber
sobre la dieta del paciente, muchas veces alta en protenas, aunque tambin es indicador de
malnutricin en concentraciones bajas de urea.
Concentraciones altas de urea pueden ayudar a diagnosticar tambin fallo cardiaco, hemorragias
gastrointestinales, hipovolemia (quemaduras, deshidratacin), inanicin, obstrucciones renales
como clculos o tumores.
Concentraciones bajas de urea pueden ayudar a diagnosticar dietas pobres en protenas, fallo
heptico, embarazo y exceso de hidratacin entre otras.
La concentracin de urea en la sangre se mide como nitrgeno ureico y el test se denomina BUN
(blood urea nitrogen) o NUS (nitrgeno ureico sanguneo).
Las pruebas bioqumicas que exploran la funcin renal incluyen la determinacin de urea y
creatinina que son indicadoras de la capacidad renal de filtracin. Evaluaciones repetidas de
ambas, son tiles para comprobar la eficacia del tratamiento y la progresin de la enfermedad.
NOTAS IMPORTANTES PARA LA DETERMINACION DE GLUCOSA SANGUINEA:
1. Para los mtodos de diacetilmonoxima, ureasa se pueden utilizar, suero y plasma
heparinizado. El fluoruro inhibe la reaccin de la ureasa.
2. La orina se puede analizar tras previa dilucin (1:20 a 1:50) segn el mtodo empleado.
3. Debido a la susceptibilidad la degradacin bacteriana de la urea, las muestras de suero y
orina deben conservarse a 4-8C hasta su anlisis
EL PACIENTE DEBER PRESENTARSE AL LABORATORIO PARA PRACTICARLE EL

ANALISIS EN AYUNO, DE PREFERENCIA POR LA MAANA, SI NO ES POSIBLE DEBERA
TENER UN AYUNO COMO MNIMO DE 5 HORAS. EN CASO DE PACIENTES CON
INSUFICIENCIA RENAL DEBERA REALIZARSE DE INMEDIATO
PROCEDIMIENTO:
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Por qu la urea sangunea es una determinacin que se considera importante para valorar el
funcionamiento renal?
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2.- Menciona en qu casos se eleva y se disminuye la urea

sangunea.
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3.- En qu consiste la dilisis peritoneal y la hemodilisis? Cundo es que se practican?:
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Fecha de realizacin: _____________________________________________________________
Firma del alumno
PRCTICA NO. 3
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de creatinina sangunea
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles de creatinina sangunea y conocer
participacin en el diagnstico de la funcin renal y enfermedades del msculo.
su
MATERIAL:
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Gradilla
Espectrofotmetro
Centrfuga, Pipetas pasteur, Perilla de tres vas
Cronmetro
Equipo para la determinacin de creatinina sangunea
INTRODUCCIN:
La creatinina es un producto de degradacin de la creatina, la cual es un elemento
importante constitutivo del msculo. La creatina se sintetiza en el hgado y el pncreas a partir de
tres aminocidos: arginina, glicina y metionina. Tras la sntesis, la creatina se difunde en el sistema
vascular y llega a diversas clulas, particularmente las musculares, en donde experimenta
fosforilacin. El fosfato de creatina sirve como compuesto de alta energa y se transforma con
facilidad a trifosfato de adenosina (ATP) en los msculos y otros tejidos.
La creatinina es un producto de desecho que se deriva de la creatina y fosfato de creatina. Es el
anhdrido que se forma cuando la creatina pierde una molcula de agua y el fosfato de creatina
pierde una molcula de cido fosforito. La reaccin se verifica de manera espontnea. Cerca del
2% de la creatina se transforma en creatinina cada 24 horas
La cantidad de creatinina que aparece en la sangre de un individuo depende de su masa muscular,
por tanto, esta concentracin ser constante para cada individuo si no vara su masa muscular.
Por otro lado, el aumento de creatinina en sangre puede ser debido a una mala filtracin
glomerular. Esto se valora con la determinacin de creatinina en orina de 24 horas, estableciendo
la relacin existente entre sta y la concentracin de creatinina en sangre. Este parmetro se
denomina Aclaramiento de Creatinina. (Depuracin de creatinina), sus unidades son ml/min. y
valora la filtracin glomerular.
Por lo general la depuracin de creatinina en orina de 24 horas se ordena para verificar:
Qu tan bien estn trabajando tus riones,

Falla renal
Monitorear el funcionamiento de tus riones si tienes alguna enfermedad crnica como la
diabetes o ciertas enfermedades autoinmunes.
El grado de dao en los riones
Las dosis de ciertos medicamentos cuando los riones estn fallando
Su disminucin indica que el glomrulo est filtrando menos de lo debido mientras que su
elevacin indicara una filtracin anormalmente elevada.
La elevacin de urea y creatinina (azotemia) se puede producir como consecuencia de un elevado
nmero de trastornos, entre los que se incluye la insuficiencia renal.
Las pruebas bioqumicas que exploran la funcin renal incluyen la determinacin de urea y
creatinina que son indicadoras de la capacidad renal de filtracin.
Evaluaciones repetidas de ambas, son tiles para comprobar la eficacia del tratamiento y la
progresin de la enfermedad.
NOTAS:
1. Se ha encontrado que el mtodo de Jaffe tiene baja presicin, por la reaccin del reactivo
con cromgenos distintos a la creatinina, (incluyendo ascorbato, piruvato, acetona etc.), por
lo que se recomienda buscar otra alternativa, como ensayos enzimticos o la determinacin
de creatincinasa cuando se sospecha de dao muscular.
2. Se ha demostrado que la elevacin de los niveles de bilirrubinas causa falsa reduccin de
los valores
PROCEDIMIENTO:
Una vez completada la coagulacin de la muestra, separar el suero y realizar el protocolo de
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Indica varios casos en que se eleva y se disminuye la creatinina sangunea.
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2.- cules son las condiciones en que debe presentarse el paciente para la prueba? Por qu?
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3.- En qu consiste la depuracin de creatinina en orina de 24 horas y qu ventajas o desventajas
presenta con respecto a la determinacin de creatinina sangunea? Explica:
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Nombre del alumno: ______________________________________________
Fecha de realizacin: _____________________________________________
Firma del alumno
PRCTICA NO. 4
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de cido rico sanguneo
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sricos de c. rico
participacin en el diagnstico de enfermedades como la artritis gotosa..
conocer
su
MATERIAL:
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Gradilla
Espectrofotmetro
Cronmetro
Equipo para la determinacin de c. rico en sangre
INTRODUCCIN
La gota, una de las enfermedades ms antiguas en los registros histricos mdicos, es un
trastorno hereditario del metabolismo de las purinas (componentes de ciertas protenas, las
nucleoprotenas), por el cual se acumulan concentraciones anormales de cido rico en la sangre.
El cido rico es el resultado final del metabolismo de las purinas (partes de DNA y RNA).
La conversin de purinas en cido rico se efecta principalmente en el hgado. Casi todo el cido
rico en el plasma se encuentra en forma de urato monosdico.
La mayor parte del cido rico se excreta por el rin, y algo por el sistema intestinal.
Cuando aumenta la destruccin de los tejidos (como en diversos tipos de cncer) el cido rico
aparece elevado en sangre, aunque la causa ms comn de su elevacin es la gota.
Como consecuencia, se forman unas sales (uratos de sodio) que pueden depositarse en
articulaciones pequeas y tejidos vecinos (tofos). Estos depsitos a su vez pueden daar las
articulaciones y dar lugar a una artritis crnica. La enfermedad, que suele ocurrir despus de los
35 aos, se caracteriza por dolor artrtico por lo general localizado en un ataque sbito que se
inicia en el dedo gordo del pie y que contina hacia arriba por la pierna. Puede presentarse de
forma aislada o acompaarse, en algn momento de la evolucin, de litiasis renal rica y/o de la
llamada nefropata gotosa.
La gota es causada por un defecto en el metabolismo que provoca una sobreproduccin de

cido rico o lleva a una reduccin de la capacidad del rin para eliminarlo. La causa exacta de
este defecto metablico se desconoce.
El riesgo aumenta en los hombres, mujeres posmenopusicas y personas que sufren de
hipertensin. Asimismo, el consumo excesivo de alcohol, diabetes, obesidad, anemia de clulas
falciformes y enfermedad renal aumentan el riesgo, como tambin la falta de medidas preventivas
en aquellas personas que han experimentado episodios previos. Esta condicin tambin se puede
desarrollar en personas que toman medicamentos que interfieren con la excrecin del cido rico.
NOTAS:
1. Se puede utilizar suero o plasma. El EDTA y el fluoruro de sodiodeben evitarse como
anticoagulantes y conservador, respectivamente, ya que interfieren la reaccin
2. El cido rico es estable a 2-6C durante 3 a 5 das y por lo menos 6 meses a -20C
PROCEDIMIENTO:
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Cules son las condiciones en que debe presentarse el paciente al laboratorio para la
determinacin de c. rico sanguneo?
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2.- Qu es la gota y cules son sus complicaciones?
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3.- Cul es la dieta que debe seguir un paciente con esta enfermedad? Por qu?
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Fecha de realizacin:______________________________________________________________
Firma del alumno
PRCTICA NO. 5
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de colesterol total
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sricos de colesterol total y conocer
participacin en el diagnstico de enfermedades coronarias y accidentes cerebro vasculares.
su
MATERIAL:
Torniquete,Jeringa de 5 ml.,Torundas con alcohol
Espectrofotmetro
Centrfuga, Pipetas pasteur, Perilla de tres vas, gradilla
cronmetro
Equipo para la determinacin de colesterol total en sangre
INTRODUCCIN
Ante la profusa campaa del cuidado del colesterol que se viene desarrollando desde hace
ya algunos aos, el pblico identifica al colesterol como una sustancia muy daina para el
organismo. Sin embargo todos tenemos colesterol.
El colesterol es un lpido muy necesario para la vida, ya que con el, el organismo sintetiza la bilis,
sustancia segregada por el hgado, importantsima para la digestin. Fabrica adems las
hormonas sexuales y lo que es ms importante, el colesterol es un componente indispensable de
las membranas (paredes) de todas las clulas, sobre todo las cerebrales.
Lo que resulta daino, son los excesos de colesterol ya que stos se depositan en las paredes de
las arterias favoreciendo la arteriosclerosis, proceso que angosta la luz de los vasos dificultando
as el pasaje de la sangre que debe transportar alimento y oxgeno a los diferentes tejidos y
rganos
Esto adquiere especial inters a nivel del corazn y del cerebro. Cuando las arterias se angostan
demasiado, pueden llegar a obstruirse provocando la muerte por desnutricin de las clulas que se
encuentran detrs de esta obstruccin.
Esto es lo que se conoce como infarto en el caso del corazn y es causa de los accidentes
cerebro- vasculares en caso del cerebro.
En sangre podemos dosificar el Colesterol Total, el HDL colesterol (colesterol bueno) ya que ste
es el colesterol que se encuentra en viaje al hgado donde ser procesado; y el colesterol LDL
(colesterol malo) que es el que tiende a ingresar en las clulas que tapizan las paredes arteriales.
En base a estos valores podemos calcular el ndice aterognico, es decir un nmero que permite
hacer un pronstico sobre la tendencia quo tiene un individuo a desarrollar arteriosclerosis.
En algunos estudios donde se sigui el desarrollo de la salud de varias personas, a lo largo de
varias dcadas se comprob que las alteraciones de los lpidos en sangre (dislipidemias) estaban
presentes en la mayora de los casos de infartos cardacos y cerebrales.
Hoy sabemos que esa alteracin es tambin uno de los factores que aceleran los procesos del
envejecimiento por la disminucin del rendimiento de los rganos que no reciben suficiente caudal
sanguneo
por
estrechamiento
de
los
vasos
que
los
nutren.
El aumento del colesterol en sangre, est muy relacionado con la alimentacin, pero no solamente.
Depende de cada organismo y como ste proces dicho colesterol.
El colesterol se encuentra solamente en el reino animal e ingresa en nuestro organismo, en parte,
a travs de la ingestin de sus productos derivados y tambin es sintetizado en el hgado.
NOTAS.
1. Las determinaciones de los componentes lipdicos en suero o plasma se realizan
normalmente en sangre extrada de pacientes con ayuno de 12 a 16 horas. De lo contrario
las muestras no son adecuadas ya que los resultados elevados producidos por asimilacin
normal de los alimentos no se pueden distinguir de los resultados elevados por
metabolismo lipdico anormal o errores congnitos del metabolismo.
2. Tambin tngase en cuenta que el no ayunar puede producir hiperquilomicronemia e
hiperbetalipoproteinemia lo cual interfiere en la determinacin.
PROCEDIMIENTO:
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Cul es la importancia clnica de la determinacin de colesterol?
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2.- A qu se refiere cuando se habla del colesterol bueno y el colesterol malo? Explica.
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3.- Qu es el colesterol y cules son sus funciones?
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4.- Por que es recomendable consumir mejor grasas de origen vegetal a la animal? Explica:
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5.- Qu es la arteriosclerosis? Quin tiene riesgos de padecerla? Por qu?
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6.- Qu otros estudios deben realizarse adems del colesterol para determinar el riesgo de
enfermedades cerebro-vasculares y cmo calculamos el ndice aterognico?
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Firma del alumno
PRCTICA NO. 6
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de triglicridos
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sricos de triglicridos y su participacin en el
diagnstico de enfermedades lipdicas.
MATERIAL:
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Gradilla, bao maria
Espectrofotmetro
Cronmetro
Equipo para la determinacin de triglicridos sanguneos
INTRODUCCIN:
Significado clnico
Los triglicridos forman la mayor parte del peso seco del tejido adiposo, constituyendo, por lo
tanto, una potente forma de almacenamiento de energa.
El movimiento de cidos grasos entre los distintos compartimientos del organismo, se produce con
gran rapidez en respuesta a diversos estmulos (dieta, actividad fsica, stress, edad). Los
triglicridos (uno de los ms importantes vehculos para el transporte de cidos grasos) varan
tambin su concentracin en respuesta a estos factores fisiolgicos.
La digestin de los triglicridos se realiza en el duodeno e leo proximal.
La mayor parte de la digestin tiene lugar por accin de las lipasas intestinales y pancreticas y de
los cidos biliares. Los triglicridos son hidrolizados a glicerol y cidos grasos. Los triglicridos son
resintetizados en la mucosa intestinal.
Los cidos grasos de cadena larga aparecen en el conducto torcico transportados como
triglicridos en los quilomicrones, mientras que los cidos grasos de cadena corta y media se
transportan fijados a la albmina en la circulacin portal.
La circulacin sangunea transporta quilomicrones y VLDL a todos los tejidos del organismo,
incluyendo tejido adiposo, principal sitio de incorporacin. Los quilomicrones son eliminados
(hidrolizados) ms rpidamente que los VLDL.
El aumento de triglicridos en individuos obesos, tiene importancia pronstica respecto a la
probabilidad de desarrollar enfermedad cardiaca coronaria.
Alrededor del 50% de los lpidos de las lesiones ateromatosas que ocurren en las arterias
coronarias son triglicridos, por lo que es posible relacionarlos con la patognesis de la
arteriosclerosis coronaria.
Este punto de vista est sustentado por el hecho que gran porcentaje de pacientes con infarto de
miocardio exhiben hipertrigliceridemia.
Utilidad clnica
Evaluacin de factor de riesgo en individuos con colesterol elevado.
Variables por enfermedad:
Aumentado: Septicemia, hepatitis viral, diabetes mellitus, enfermedad de Von Gierke,
hipotiroidismo, hiperlipotroteinemia tipo II A, 4, 2B, 3, 1, 5; enfermedad de Tangier, gota, anemia
perniciosa, hipertensin maligna, arteriosclerosis, pancreatitis aguda, sndrome de Down, cirrosis
biliar y sndrome nefrtico.
Disminuido: Hipertiroidismo, hiperparatiroidismo, abetalipoproteinemia, esfero-citosis hereditaria,
enfermedad pulmonar crnica obstructiva
Variables por drogas:
Aumentado: Acetilsaliclico, asparaginasa, carbimazol, ciproterona, estrgenos, estrona,
furosemida, glucocorticoides, glucosa, isobutidiona, metildopa, prednisona, anticonceptivos orales,.
Disminuido: Amiodarona, cido ascrbico, asparaginasa, bezafibrato, clofibrato, colestipol,
fenolfibrato, glucagn, lovastatina, mednoxiprogesterona, neomicina, niacina, nifedipina, probucol,
sulfonilureas.
NOTAS IMPORTANTES PARA SU DETERMINACION:
1. Es importante el ayuno de por lo menos 12 horas antes del examen
2. si se emplean tubos BD Vacutainer, los tapones deben ser siliconados, no glicerinados.
3. la sangre debe centrifugarse rpidamente a fin de reducir la hidrlisis espontnea de los
triglicridos a glicerol y cidos grasos ( ver metabolismo de los triglicridos)
4. si los triglicridos no pueden analizarse dentro de las 25 horas, la muestra debe
congelarse a -20C.
PROCEDIMIENTO:
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1. Que papel juegan los lpidos (en especial los triglicridos) en nuestro organismo y que
importancia clnica pude tener el determinarlos en un individuo?
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2. Por que es importante determinar junto con los triglicridos otros lpidos como el colesterol?
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3. Que papel juega la dieta en el desarrollo o control de trastornos como la hipertrigliceridemia o
dislipidemias?
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Firma del alumno
PRCTICA NO. 7
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de bilirrubinas
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sanguneos de bilirrubinas y conocer su
importancia en el diagnostico de enfermedades hepticas, Biliares y hemolticas.
MATERIAL:
Torniquete, Jeringa de 5 ml. Torundas con alcohol
Pipetas pistn de y 50, 100, 500 y 1000 microlitros
Puntillas para las pipetas piston
Gradilla
Espectrofotmetro
Cubetas para el espectrofotometro
Gasas,Centrfuga
Pipetas pasteur
Perilla de tres vas
Cronmetro,Bao Mara
Equipo para la determinacin de bilirrubinas en sangre (BT y BD)
INTRODUCCIN
La
bilirrubina
es
un
producto
del
catabolismo
de
la
hemoglobina.
Los 2 pigmentos biliares son la bilirrubina y la biliverdina, se originan en el sistema
reticuloendotelial, incluyendo las clulas de kupfer del hgado y otras clulas reticuloendoteliales
que retiran de la circulacin a los eritrocitos.
Est claro que un aumento de la destruccin de hemates, lesin hepatocelular y obstruccin de
las vas biliares, puede causar aumento de los pigmentos biliares.
Cuando hay un exceso de pigmentos biliares en la sangre, stos pasan a los tejidos, los cuales
toman una coloracin amarillenta. A esto se le denomina ICTERICIA O ICTERUS. Esto sucede
cuando la concentracin de bilirrubina directa en sangre es mayor de 2.5mg/dl. La bilirrubinuria
antecede a la ictericia porque el umbral de eliminacin renal de la bilirrubina es menor de 2 mg/dl.
En individuos normales, las pruebas para demostrar bilirrubinas en orina son negativas.
El mdico se interesa por la concentracin de bilirrubina de aquellos pacientes que
presenten algn factor de riesgo, para tener alteraciones sobre todo de la funcin heptica, y de la
produccin
de
las
clulas
rojas
de
la
sangre.
Debido al metabolismo particular de la bilirrubina, resulta de suma importancia conocer la

concentracin srica de este componente, pues as se evala indirectamente el funcionamiento
heptico. Adems, ayuda a identificar enfermedades intra y extra hepticas de todas las clulas,
enzimas y productos intermediarios en el metabolismo de la bilirrubina. La patologa probable
depender del tipo de bilirrubina que se encuentre elevado. A continuacin listamos las distintas
enfermedades
donde
las
distintas
bilirrubinas
se
elevan:
a)
La bilirrubina indirecta o sin conjugar, que se calcula restando la bilirrubina total menos la
bilirrubina directa o conjugada, produce la llamada Ictericia Hemoltica, causada por
cualquier tipo de anemia hemoltica (reaccin a la transfusin, enfermedad de clulas
falciformes, etc.) Se eleva tambin en la enfermedad de Gilbert, en la ictericia fisiolgica
(normal)
del
recin
nacido,
y
en
el
sndrome
de
Crigler-Najjar.
b)
La bilirrubina directa o conjugada, que es cuando la bilirrubina total result mayor de 1.2
mg/dl, se eleva en obstrucciones biliares o colestasis (por un clculo o piedra de la
vescula, tumores, o estrechamientos de los conductos biliares), en colestasis inducidas por
medicamentos,
o
en
los
sndromes
de
Dubin-Johnson
y
de
Rotor.
c)
La bilirrubina total (directa e indirecta juntas), se eleva en cualquier tipo de dao heptico
(en cirrosis, hepatitis o ingesta de txicos, en obstrucciones biliares (por piedras o tumores
en
las
vas
biliares),
hemlisis
y
por
ayuno
prolongado.
NOTAS IMPORTANTES PARA SU DETERMINACION:

1. Las determinaciones de bilirrubina total utilizando un mtodo diazo requieren suero o
plasma, pero se prefiere suero porque la adicin de alcohol en el anlisis puede precipitar
protenas del plasma que interfieren luego con el anlisis. Tambin se pueden determinar
bilirrubinas en el lquido cefalorraqudeo.
2. La presencia de hemlisis disminuye falsamente el resultado de bilirrubinas en la mayora
de los ensayos debido a un aumento en la absorbancia del blanco; por ende las muestras
no deben exhibir hemlisis.
3. La bilirrubina es sensible a la luz y al calor, por los cuales es destruida; por lo tanto, el
anlisis debe llevarse a cabo rpidamente y proteger la muestra de la luz.
PROCEDIMIENTO
Una vez completada la coagulacin de la muestra, separar el suero y realizar el protocolo de
DETERMINACION DE BILIRRUBINA TOTAL
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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DETERMINACION DE BILIRRUBINA DIRECTA

REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1. Que funciones tienen las bilirrubinas Y cul es la importancia clnica de su determinacin?
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2. Por que el medico pediatra solicita en algunos casos en los recin nacidos la determinacin de
bilirrubinas?
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3. Que es una exa-sanguneo transfusin y por qu en algunos recin nacidos ictericos debe ser
practicada
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Firma del alumno
PRCTICA NO. 8
NOMBRE DE LA PRACTICA: Determinacin de protenas totales, albmina y globulinas
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sanguneos de protenas totales, albmina y
globulinas, adems de conocer su importancia en el diagnostico de enfermedades hepticas,
entre otras.
MATERIAL:
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Tubos limpios de 13x100 0
Gradilla
Espectrofotmetro
Cubetas para el espectrofotmetro
Gasas
Centrfuga
Pipetas pasteur
Perilla de tres vas
Cronmetro
Bao Mara
Equipo para la determinacin de protenas totales y albmina
INTRODUCCIN:
Las protenas plasmticas como la albmina y las globulinas son sintetizadas por el hgado
(la principal excepcin son las inmunoglobulinas que son producidas por las clulas plasmticas) ,
de ah que su medicin pueda considerarse como prueba de su actividad funcional. El suero
contiene las mismas protenas que el plasma excepto el fibringeno que se consume en el proceso
de coagulacin.
Las protenas del plasma tienen diferentes funciones en el organismo:
1.- Conservar la presin osmtica de la sangre.
2.- desempear un papel nutritivo.
3.- Actuar como amortiguadores del balance cido-bsico de la sangre.

4.- Actuar como agentes de transporte.
5.- Actuar como agentes inmunolgicos.
6.- Suministrar factores necesarios para la coagulacin de la sangre.
7.- Representan las enzimas necesarias en la sangre.
La funcin de la protena srica total es mantener la presin osmtica coloidal del plasma. Esta
presin osmtica evita la prdida de lquidos hacia los tejidos. El contenido de protenas totales es
suero depende del estado nutricional, del funcionamiento heptico, el funcionamiento renal, de
errores metablicos y de afecciones como mieloma mltiple. Aunque es fcil cuantificar las
protenas totales en suero por el mtodo de Biuret, las variaciones de fracciones especficas de
protenas son ms tiles para el diagnstico de las enfermedades.
La deshidratacin hace que todas las fracciones de protenas aumenten en el mismo porcentaje
dando lugar a hiperproteinemia. La deshidratacin puede ser resultado de del consumo o aumento
de la prdida de lquidos en enfermedades como el mal de Addison, acidosis diabtica o diarrea
grave. El mieloma mltiple es la principal enfermedad en la cual la elevacin de una fraccin de
protenas provoca un aumento de las protenas sricas totales.
Las protenas plasmticas pueden aumentar (hiperproteinemia)
en: hemoconcentracin,
deshidratacin, mieloma mltiple, hemlisis intra vascular, e infecciones.
Por otro lado pueden disminuir (hipoproteinemia) en: desnutricin, absorcin deficiente,
insuficiencia pancretica, sndrome nefrtico, en quemaduras extensas, hemorragias, heridas
extensas, anemia perniciosa en lesiones hepticas.
Notas:
1. El mtodo de Biuret es el ms utilizado y conveniente y tiene buena precisin
2. se pueden analizar suero, lquido cefalorraqudeo y otros lquidos corporales. Se puede
utilizar plasma, que suele dar resultados comparables.
3. las protenas en suero y plasma son estables durante 1 semana a temperatura ambiente y
por lo menos 1 mes cuando se refrigera
4. se requiere de ayuno para la determinacin
5. la determinacin de protenas totales en orina es ms difcil que en suero, debido a que la
concentracin es normalmente baja y la tcnica de Biuret no es conveniente. Debern
utilizarse otros reactivos como cido tricloroactico o c. Sulfosaliclico.
PROCEDIMIENTO
DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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DETERMINACION DE ALBUMINA
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Menciona que funcin desempea las protenas, albmina y globulina el organismo
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2.- Adems de la determinacin de protenas totales, Cules otras determinaciones se realizan en

sangre para valorar funcionamiento heptico por qu?
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3.-Qu son las inmunoglobulinas y Por qu si las inmunoglobulinas son protenas, no pueden ser
utilizadas para valorar funcionamiento heptico como en las dems? Explica
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Firma del alumno
PRCTICA NO. 9
NOMBRE DE LA PRCTICA: determinacin de cloruros en sangre.
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sanguneos
importancia clnica de esta determinacin.
de cloruros y conocer la
MATERIAL:
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Gradilla
Espectrofotmetro
Cubetas para el espectrofotmetro
Gasas
Centrfuga
Pipetas pasteur
Perilla de tres vas
Cronmetro
Bao Mara
Equipo para la determinacin de cloruros en sangre
INTRODUCCIN:
El cloruro es el principal anin extracelular del organismo. Con pocas excepciones el metabolismo
normal del cloruro est muy relacionado con el del sodio. Por su asociacin con el sodio, las
principales funciones del cloruro incluyen la preservacin del equilibrio de lquidos y de la presin
osmtica. Los niveles de cloruro en general varan en proporcin con los de sodio en caso de
modificacin del contenido de agua del organismo. Cualquier cambio desproporcionado en el
contenido de cloruro con respecto al de sodio es atribuible a alteraciones del equilibrio cidobsico en el organismo.
Una variacin de la determinacin de cloruros que tiene significado clnico es el anlisis
del contenido de cloruros en el sudor. Se efecta en nios recin nacidos y pacientes peditricos
para diagnosticar fibrosis qustica. Esta enfermedad es una afeccin generalizada de las
glndulas exocrinas que se caracteriza por secreciones mucosas excesivas. El moco es rico en
glucoprotenas que precipitan y obstruyen los conductos de los rganos. La principal caracterstica
clnica de la enfermedad se debe a obstruccin de los pulmones y de las vas respiratorias
superiores que dan lugar a insuficiencia respiratoria.
Para el anlisis clnico de cloruros generalmente se emplea la titulacin mercurimtrica. La
principal limitacin de este mtodo es la dificultad de detectar el punto final que varia de uno a otro
tcnico y se hace difcil de discernir por la presencia de protenas, bilirrubinas, hemlisis y lipemia.
Se produce hipocloremia cuando el nivel de cloruros en suero son menores a 99 mmol/l y pueden
ser ocasionados por: vmitos prolongados, succin nasogastrica, quemaduras peridas renales por
diurticos, alcalosis metablica etc.
La hipercloremia se produce cuando el nivel de cloruros es mayor de 1089 mmol/L y puede ser
producido por: deshidratacin, acidosis tubular renal, acidosis metablica por diarrea prolongada,
perdida de bicarbonato o intoxicacin con salicilatos.
La evaluacin de cloruros en orina solo se aplica para estudiar la alcalosis metablica persistente.
Un nivel de cloruros en orina menor de 10 mmol/L indica prdida de tipo gstrico o inducida por
diurticos, mientras que el valor de cloruros en orina mayor de 10 mmol/L indica perdidas renales.
NOTAS:
1. Los cloruros se determinan en suero, plasma heparinizado, orina o sudor y otros lquidos
corporales
2. El Ion cloruro es estable en suero, plasma, orina y otros lquidos por lo menos durante una
semana a temperatura ambiente, de refrigeracin o de congelacin.
3. El suero o plasma debe separarse rpidamente de las clulas para evitar desplazamientos
del equilibrio inico por metabolismo y cambio de pH
4. Los electrodos ion-selectivo para anlisis de cloruros se emplean cada vez ms, ya que
estos electrodos se incorporan con facilidad a analizadores automatizados.
PROCEDIMIENTO
DETERMINACION DE CLORUROS EN SUERO
REACTIVOS
PROBLEMA O MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Menciona que funcin desempea los cloruros en el organismos y como se relacionan con los
dems electrolitos
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2.- Cul es la importancia clinica de la determinacin de cloruros en suero?
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3.-Por que es importante la determinacin en algunos casos de cloruros en el sudor de recin
nacidos o pacientes peditricos y en que consiste este? Explica
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4.- En que consiste la fibrosis qustica? Explica

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Firma del alumno
PRCTICA NO. 10
NOMBRE DE LA PRCTICA: determinacin de calcio en sangre.
OBJETIVO: realizar la determinacin de los niveles sanguneos de calcio y conocer la importancia
clnica de su determinacin.
MATERIAL:
Torniquete
Jeringa de 5 ml.
Gradilla
Espectrofotmetro, Cubetas para el espectrofotmetro
Gasas, Centrfuga
Pipetas pasteur, Perilla de tres vas
Cronmetro
Bao Mara
Equipo para la determinacin de calcio en sangre
INTRODUCCIN:
El calcio es el electrolito que mas abunda en el organismo humano, principalmente por su alta
concentracin en el esqueleto. Noventa y nueve por ciento del calcio total del organismo est
enlazado en el esqueleto. El calcio es un in divalente que predomina en el exterior de las clulas
y es fundamental para muchas funciones fisiolgicas. Es importante para la actividad
neuromuscular adecuada, la coagulacin sangunea, el metabolismo seo y la preservacin de la
integridad funcional de las membranas celulares. El calcio tambin funciona como mensajero
intracelular. El calcio srico total se encuentra en tres formas: enlazado con protenas (46%),
formando complejos con citratos (7%); y libre o ionizado (47%). La nica forma de actividad
fisiolgica del calcio es como calcio ionizado. Las variaciones de los niveles de protenas sricas
alteran la concentracin de la fraccin enlazada con protenas y por tanto los niveles de calcio
total. Por ello deben tomarse en cuenta los niveles de protenas para la interpretacin correcta de
los niveles de calcio total en suero. El estado cido bsico del organismo tambin influye en el
enlace de calcio con albmina. La alcalosis reduce la concentracin de calcio ionizado, lo que
puede producir hipocalcemia sintomtica. En caso e acidosis, el exceso de H+ se enlaza con la
albmina y libera el calcio enlazado con protenas, lo que produce incremento de la fraccin
ionizada.
La vitamina D tambin es muy importante para preservar niveles normales de calcio. Puede
absorberse del aparato digestivo o formarse en la piel por accin de la radiacin ultravioleta.
Sus requerimientos aumentan durante procesos de desarrollo fisiolgico normal, embarazo y
lactancia.
La hipocalcemia se produce cuando los nivlees de calcio en suero son menores 8.5 g/dL y
pueden deberse a: hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D, raquitismo, osteomalacia,
insuficiencia renal crnica etc. Los sntomas se manifiestan por mayor excitabilidad del
funcionamiento neuromuscular (puede provocar convulsiones parecidas a la epilepsia)
NOTAS:
1. las muestras adecuadas para el anlisis de calcio incluyen suero, plasma heparinizado y
orina
2. Las muestras de suero y orina son estables en refrigeracin durante varios meses
3. el plasma con EDTA u oxalato como anticoagulantes no es aceptable, debido al efecto de
quelacin del calcio
PROCEDIMIENTO
DETERMINACION DE CALCIO EN SUERO
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Menciona qu funcin desempea el calcio en el organismo y como se relacionan con los
otros electrolitos explica
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2.- Cul es la importancia clnica de la determinacin de calcio srico en un paciente?
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3.- Explica de que manera influyen los niveles de calcio y fosforo en enfermedades seos
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Firma del alumno
PRCTICA NO. 11
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de Transaminasa Glutmica Oxalactica (TGO)
OBJETIVO: Determinar la actividad de la enzima TGO en el suero de un paciente, como un medio
en el diagnstico de enfermedades del hgado y de infarto al miocardio principalmente
INTRODUCCION:
La aspartato-aminotransferasa (AST), antiguamente conocida como glutamato-oxalocetatoTransaminasa (TGO) pertenece al grupo de las transaminasas que, por transferencias de grupos
aminos, cataliza la transferencia de un grupo amino de aminocidos especficos (L-glutmico o Lasprtico) a cetocidos especficos (alfa-cetoglutrico u oxalactico) y viceversa. La aspartato
aminotransferasa es muy frecuente en los tejidos del organismo. Aunque se encuentran altas
concentraciones en el miocardio, su actividad es significativa en el cerebro, el hgado, en el
sistema gastrointestinal, el tejido adiposo, el msculo esqueltico y los riones.
La TGO se halla en el citoplasma y las mitocondrias. En lesiones celulares ligeras, la mayor parte
de TGO liberada proviene del citoplasma y una parte pequea de las mitocondrias. En caso de
daos graves, se liberan enzimas ligadas en las mitocondrias. Concentraciones elevadas de las
transaminasas pueden ser ndice de un infarto del miocardio, hepatopatas, distrofia muscular y
lesiones orgnicas.
Razn por las que se les llama de "escape".
Aunque estas enzimas se encuentran en todos los tejidos, se relacionan preferentemente, en los
procesos de escape de enzimas del miocardio o el hgado. Estas enzimas siempre estn
presentes en el suero pero en concentraciones muy bajas, por lo tanto su elevacin nos indicara
que hay un proceso anormal en estos rganos, lo cual las hace muy tiles en los diagnsticos.
La AST se eleva en forma notable en infarto al miocardio, hepatitis viral, necrosis heptica txica y
fallo circulatorio con choque e hipoxia. Se observan elevacin moderada en cirrosis heptica,
ictericia colesttica, metstasis heptica, enfermedades del msculo esqueltico, anemia
hemoltica grave etc.
Aunque los niveles de AST se emplean para confirmar el diagnstico de infarto agudo al miocardio,
son ms tiles para determinar la extensin del dao al miocardio.
MATERIAL:
Espectrofotmetro con rango de UV
Cubetas o celdillas para el espectrofotmetro
Agua destilada, Gradilla, tubos de 13X100
Centrifuga, reloj de intervalos, Cronmetro
Pipetas pistn de 50, 100, 500 y 1000 microlitros y puntillas
Agua destilada, Torundas con alcohol
Torniquete, gasas, Bao mara a 37C
Tubos Vacutainer con gel o secos
Equipo para la determinacin de TGO en sangre
NOTAS:
1. Se puede utilizar suero o plasma; se ha comprobado que la heparina, el oxalato, EDTA y
citrato no causan inhibicin de la enzima. La orina tiene poca o ninguna actividad y no se
recomienda para anlisis.
2. En los recin nacidos y lactantes se observan niveles aproximadamente dobles que en
adultos; estos declinan hasta alcanzar los niveles adultos alrededor de los 6 meses de vida.
3. Debido a la elevada actividad de AST dentro de los eritrocitos, las muestras bemolizadas
son inaceptables.
4. La lipemia y el exceso de bilirrubinas pueden interferir en ciertos anlisis, principalmente
colorimtricos.
5. cuando se congela la muestra, aparentemente no se prolonga la actividad ms all de tres
das.
PROCEDIMIENTO:
Es importante que al realizar la reaccin sustrato-enzima con la muestra (suero) todos los
reactivos y la muestra estn a la misma temperatura y mantener esta durante toda la
reaccin
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PROBLEMA
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Qu importancia bioqumica representan las transaminasas como la AST (TGO) en el
organismo?
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2.- Qu importancia clnica tiene su determinacin en el laboratorio y cmo puedo diferenciar
entre las AST proveniente del tejido heptico del cardiaco u otros? explica
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3.-Las determinaciones enzimticas se realizan en base a su actividad cataltica. Por qu no
determinar su concentracin como en el caso de los dems componentes qumicos de la sangre?
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4.- En que casos se elevaran los niveles de las transaminasas en un paciente? Realzan alguna
actividad cataltica en la sangre? Explica.
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Vo.Bo. del maestro
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Vo.Bo. del Titular
PRCTICA NO. 12
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de Transaminasa Glutmica pirvica (TGP)

OBJETIVO: Determinar la actividad de la enzima TGP en el suero de un paciente, como un medio
en el diagnstico de enfermedades del hgado y de infarto al miocardio principalmente
INTRODUCCION:
La alanina-aminotrasnferasa (glutamato-piruvato-transaminasa: GTP) pertenece al grupo de las
transaminasas que, por transferencias del grupo amino, cataliza la conversin de los aminocidos
a los -oxicidos correspondientes y viceversa. Concentraciones elevadas de alaninaaminotransferasa (ALT) aparecen en el hgado; su actividad es inferior en los riones, el corazn,
el msculo esqueltico el pncreas, el bazo y el tejido pulmonar.
Una concentracin elevada de transaminasas puede ser ndice de un infarto del miocardio,
hepatopatas, distrofias musculares y lesiones orgnicas. Sin embargo el aumento de TGP en
suero es especfico de enfermedades del parnquima heptico, (se eleva ms la TGP o ALT)
mientras que la TGO (o AST) es una enzima menos especfica del hgado, pero que tambin se
eleva en lesin hepatocelular
Razn por las que se les llama de "escape".
Aunque estas enzimas se encuentran en todos los tejidos, se relacionan preferentemente, en los
procesos de escape de enzimas del miocardio o el hgado. Estas enzimas siempre estn
presentes en el suero pero en concentraciones muy bajas, por lo tanto su elevacin nos indicara
que hay un proceso anormal en estos rganos, lo cual las hace muy tiles en los diagnsticos.
MATERIAL:
Agua destilada
Gradilla, tubos de 13X100
Centrifuga, reloj de intervalos
Cronmetro

Agua destilada
Torniquete, gasas
Bao mara a 37C
Equipo para la determinacin de TGP en sangre
NOTAS:
1. Se puede utilizar suero o plasma; se ha comprobado que la heparina, el oxalato, y citrato
no causan inhibicin de la enzima. La orina tiene poca o ninguna actividad y no se
recomienda para anlisis.
2. En los recin nacidos y lactantes se observan niveles aproximadamente dobles que en
adultos; estos declinan hasta alcanzar los niveles adultos alrededor de los 3 meses de vida.
Esta mayor actividad ha sido atribuida a la fuga de la ALT de los hepatocitos del recin
nacido que, por ser inmaduros, poseen membranas ms permeables.
3. Debido a la elevada actividad de ALT dentro de los eritrocitos, las muestras bemolizadas
son inaceptables.
4. La lipemia y el exceso de bilirrubinas pueden interferir en ciertos anlisis, principalmente
colorimtricos.
5. cuando se congela la muestra, aparentemente no se prolonga la actividad ms all de tres
das.
Aunque los aumentos de actividades de ALT con frecuencia son paralelos a los aumentos
de actividad de AST, hay casos clnicos concretos en los cuales la ALT proporciona
informacin que no suministra la AST. En la hepatitis infecciosa se liberan a la circulacin
grandes cantidades de ambas enzimas, igual como ocurre en hepatitis txica. Sin embargo,
en la hepatitis viral la actividad de la ALT es superior y persiste ms tiempo que la AST.
PROCEDIMIENTO:
reaccin
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PROBLEMA
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Qu es la Unidad Internacional / L qu utilidad tiene en enzimologa?
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2.- Qu importancia clnica tiene la determinacin de ALT (TGP) y cmo la diferenci de la AST
(TGO) proveniente tambin del tejido heptico y/o del cardiaco u otros? explica
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3.-Qu es una isoenzima? Que importancia representa su determinacin?
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4.- Realizan las transaminasas alguna actividad cataltica en la sangre? Explica.
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PRCTICA NO. 13
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de Fosfatasa alcalina (ALP)
OBJETIVO: Determinar la actividad de la enzima ALP en el suero de un paciente, como un medio
en el diagnstico de enfermedades hepticas.
INTRODUCCION:
Es el nombre genrico de un grupo e enzimas que presentan su mximo de actividad en el rango
de pH de 9.0-10.5 que catalizan la liberacin de cido fosfrico de algunos steres monofosfricos :
OH
OH
H2O
R-O-P-OH
O
R-OH + HO-P-OH
O
Son protenas de membrana cuya estructura es la de una glicoprotena. La parte glucdica est
formada por cadenas de oligosacridos que llevan generalmente en el extremo ms alejado de la
protena cido silico.
El papel fisiolgico de la fosfatasa alcalina no est totalmente clarificado pero se cree que est en
relacin con el transporte, ya que es particularmente abundante en aquellos tejidos que tienen
funciones de transporte de nutrientes y en el hueso durante el proceso de calcificacin (nio, adulto
con fracturas recientes, etc). Los niveles en suero se ven elevados en enfermedades seas y
hepticas.
La fosfatasa alcalina es una enzima que se encuentra en todos los tejidos. Los tejidos con
concentraciones particularmente altas son, entre otros: el hgado, los conductos biliares, la
placenta y el hueso. Puesto que los tejidos enfermos o deteriorados liberan enzimas en la sangre,
las mediciones de fosfatasa alcalina en suero pueden ser anmalas en muchas condiciones que
incluyen la enfermedad sea y la enfermedad heptica. No obstante, la fosfatasa alcalina en suero
tambin se eleva en algunas circunstancias normales (por ejemplo, durante el crecimiento normal
del hueso) o como respuesta a diversas drogas.
Hay una gran variedad de enzimas FA llamadas isoenzimas, que pueden poseer estructuras un
poco diferentes y se encuentran en distintos tejidos (por ejemplo, las isoenzimas de fosfatasa
alcalina seas y del hgado poseen diferentes estructuras) y se pueden cuantificar en forma
separada en el laboratorio. Para diferenciar la ubicacin del tejido daado o enfermo en el cuerpo
se debe realizar el examen de las isoenzimas de la FA.
Los niveles de FA varan segn la edad y el sexo. Es normal que los nios jvenes que
experimentan un rpido crecimiento y las mujeres embarazadas tengan niveles elevados de esta
enzima.
Los niveles de la fosfatasa alcalina se pueden elevar en los siguientes casos:

Anemia, Obstruccin biliar, enfermedad sea, Fractura en recuperacin, Hepatitis,
Hiperparatiroidismo , Leucemia, Enfermedades del hgado, Cnceres seos osteoblsticos,
Osteomalacia, Enfermedad de Paget , Raquitismo.
Los niveles de la fosfatasa alcalina pueden disminuir en:
Desnutricin , Deficiencia de protena
MATERIAL:
Agua destilada
Centrifuga, reloj de intervalos
Cronmetro
Agua destilada
Torniquete, gasas
Bao mara a 37C
Equipo para la determinacin de fosfatasa alcalina (ALP) en sangre
NOTAS:
1. La ALP puede encontrarse en todos los lquidos orgnicos y tejidos. Las muestras de
sangre deben extraerse luego de un ayuno de por lo menos 8 horas. El suero y plasma
heparinizado dan resultados similares.
2. los anticoagulantes como el EDTA, oxalato y citrato inhiben la enzima por complejar el Mg+
+.
3. Una ligera hemlisis es tolerable, pero se debe evitar la hemlisis intensa.
4. cualquier droga hepatotxica aumenta la actividad de la ALP en suero.
5. por su susceptibilidad a la temperatura debe analizarse rpidamente.
Aunque los aumentos de actividades de ALT con frecuencia son paralelos a los aumentos
de actividad de AST, hay casos clnicos concretos en los cuales la ALT proporciona
informacin que no suministra la AST. En la hepatitis infecciosa se liberan a la circulacin
grandes cantidades de ambas enzimas, igual como ocurre en hepatitis txica. Sin embargo,
en la hepatitis viral la actividad de la ALT es superior y persiste ms tiempo que la AST.
PROCEDIMIENTO:
reaccin
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PROBLEMA
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Qu importancia clnica representa la determinacin de fosfatasa alcalina en el paciente?
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2.- Por qu en caso de lesin hepatocelular en ocasiones nos resultan algunas enzimas de
origen heptico, elevadas y otras dentro del rango normal, a pesar de la lesion? explica
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3.-Qu importancia representa que determinemos las isoenzima de la fosfatasa alcalina?

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4.- Realizan las fosfatasas alcalinas alguna funcin fisiolgica en la sangre? Explica.
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PRCTICA NO. 14
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de amilasa seria
OBJETIVO: Determinar la actividad de la amilasa srica y conocer su importancia
diagnstico de enfermedades pancreticas ente otras.
en el
INTRODUCCION:
sta enzima desdobla las molculas de almidn y otros polisacridos como el glucgeno,
hasta transformarse en disacrido maltosa, se produce principalmente en las glndulas salivales y
el pncreas. Cuando una de estas glndulas se inflama derrama la amilasa a la sangre y aparece
elevado su nivel en el anlisis de la amilasa srica.
En el cuerpo, la amilasa esta presente en varios rganos y tejidos. La mayor concentracin
se encuentra en el pncreas y las glndulas salivales. Tambin se encuentra importante actividad
en el hgado, rin y tejido muscular, y alguna en lquido cefalorraqudeo, orina y la leche.
Se utiliza para evaluar la funcin del pncreas, diagnosticar la presencia de enfermedades
del mismo (pancreatitis) y para controlar su evolucin. Tambin se utiliza para evaluar
enfermedades de la vescula biliar, problemas intestinales, paperas, etc. Se encuentra tambin en
el hgado y en el revestimiento de las trompas de Falopio.
Valores elevados coincidentes con: enfermedad aguda de las glndulas salivales;
Pancreatitis aguda; obstruccin de la ampolla de Vater; obstruccin del conducto biliar comn;
cncer de pncreas; injuria pancretica por lesin ulcerosa pptica.
Valores disminuidos: enfermedad renal, cncer pancretico; toxemia del embarazo.
MATERIAL:,
Espectrofotmetro, Cubetas o celdillas para el espectrofotmetro
Agua destilada, Gradilla, tubos de 13X100 y 18x200
Centrifuga, reloj de intervalos, Cronmetro

Torundas con alcohol, Torniquete, gasas
Bao mara a 37C, Tubos Vacutainer con gel o secos
Equipo para la determinacin de amilasa en sangre
NOTAS:
1. El suero o plasma heparinizado o la orina resultan adecuados para el anlsisis. Los
anticoagulantes que producen quelacin del calcio ( citrato, oxalato, y EDTA) son
inadecuados porque se requiere que haya calcio presente para que la amilasa desarrolle
toda su actividad. La actividad se conserva varios meses a 4C
2. La contaminacin con saliva produce resultados errneos (no debes pipetear con la boca
nunca).
3. La elevacin de los triglicridos acta como inhibidor y hace descender en forma falsa los
niveles de amilasa si se utiliza el mtodo de almidn-yodo. Sin embargo, aparentemente la
lipemia no interfiere con los mtodos de almidn enlazado con tinte o los mtodos
enzimticos ms modernos.
4. La proteinuria incrementa notablemente los valores de la amilasa en la orina y las
afecciones de la filtracin glomerular provocan niveles bajos falsos cuando existe
hiperamilasemia.
PROCEDIMIENTO:
reaccin
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PATRON
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Qu importancia clnica tiene la determinacin de alfa-amilasa en un paciente?
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2.- Cmo puedo diferenciar si la elevacin de la amilasa se debe a una patologa pancretica, de
glndulas salivares u otra enfermedad?
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3.-Por qu debe evitarse el pipetear con la boca en la determinacin de amilasa en el laboratorio?
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4.- En qu consiste la enfermedad conocida como pancreatitis? Explica.
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5.- Por que se le llama alfa-amilasa?
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PRCTICA NO. 15
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de deshidrogenasa lactica
OBJETIVO: Determinar la actividad de la deshidrogenasa lctica como un medio para
diagnstico de enfermedades cardiacas y cerebro-vasculares ente otras.
el
INTRODUCCION:
La deshidrogenasa lactica es una enzima oxidorreductasas cuya actividad es necesaria para la
reaccin reversible mediante la cual se efecta la interconversin de piruvato y lactato.
Especficamente es importante n la va metablica de Embder-Meyerhof de la gluclisis. Por tanto,
esta reaccin in vivo desempea un papel muy importante en los tejidos que utilizan glucosa (por
ejemeplo: msculo esqueltico)
La deshidrogenasa lctica (LDH, por sus siglas en ingls) se mide con mayor frecuencia para
evaluar la presencia de tejido daado. La enzima deshidrogenasa lctica (LDH) se encuentra en
muchos tejidos del cuerpo, especialmente el corazn, el hgado, el rin, el msculo esqueltico,
cerebro, eritrocitos, leucocitos, plaquetas, ganglios linfticos, miocardio, y los pulmones.
La deshidrogenasa lctica (LDH) cataliza la interconversin del piruvato y el lactato. Los msculos
en ejercicio convierten la glucosa en lactato (y los glbulos rojos la metabolizan), el cual es
liberado en la sangre y finalmente absorbido por el hgado. ste, a su vez, convierte el lactato en
glucosa y la libera en la sangre. Dicha glucosa es luego absorbida por los msculos en reposo, los
glbulos rojos y otros tejidos
Los niveles superiores a los normales pueden ser debido a:
Accidente cerebrovascular, Ataque cardaco, Anemia hemoltica, Hipotensin, Mononucleosis
infecciosa, Isquemia intestinal (deficiencia de sangre) e infarto (muerte del tejido), Enfermedad
heptica (por ejemplo, hepatitis), Lesin del msculo, Distrofia muscular, Estados neoplsicos
(formacin anormal de nuevos tejidos), Pancreatitis, Infarto pulmonar (muerte del tejido)
Nota: si se eleva el nivel de LDH, es recomendable la medicin de isoenzimas de la

LDH: LDH1, LDH2, LDH3, LDH4, LDH5
Las condiciones que pueden genera disminucin de los niveles de LDH son:
Anemia por deficiencia de B12 , Anemia megaloblstica, Anemia perniciosa
MATERIAL:
Agua destilada,
Centrifuga,
Reloj de intervalos, Cronmetro
Torundas con alcohol,
Torniquete,
Gasas
Equipo para la determinacin de deshidrogenasa lctica
NOTAS:
1. La LDH puede encontrarse en todos los lquidos y tejidos orgnicos. Los niveles
sanguneos ms exactos se obtienen en suero ms bien que en plasma, dado que algunos
anticoagulantes tales como el oxalato interfieren en la reaccin.
2. La hemlisis produce la liberacin de la DHL (LDH) hacia el lquido orgnico, dando
posibles resultados falsamente elevados.
3. Dado que las diferentes isoenzimas son estables a diferentes temperaturas, no existe un
mtodo absoluto de conservar muestras sin cierta prdida de actividad. Una buena tcnica
de conservacin va a producir resultados ms precisos.
4. La congelacin provoca prdida de actividad de la enzima.
5. La muestra (suero) debe separarse del coagulo lo ms pronto posible, ya que los glbulos
rojos contienen 100 veces ms LDH que el suero normal.
PROCEDIMIENTO:
reaccin
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PROBLEMA O
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Qu importancia clnica tiene la determinacin de la LDH en un paciente?
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2.- Qu importancia representan la determinacin en sangre de las isoenzimas de la LDH?
Indica
la
ubicacin
de
cada
una
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3.-En qu est basada la clasificacin de las isoenzimas DHL1, DHL2, DHL3, DHL4, DHL5?
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4.- Por qu se prefiere suero a plasma en la determinacin de la DHL (e isoenzimas), y; por qu

debe evitarse la hemlisis en estas determinaciones?
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PRCTICA NO. 16
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de creatincinasa o cratinfosfoquinasa
OBJETIVO: Determinar la actividad de la creatincinasa (CPK CK) como un medio para el
diagnstico de enfermedades cardiacas y del msculo esqueltico.
INTRODUCCION:
La creatin quinasa (CK CPK) es una enzima celular, ampliamente distribuida en los tejidos del
organismo. Su funcin fisiolgica est asociada con la gneracin de adenosin-trifosfato (ATP) para
sistemas contrctiles o de transporte, la CK cataliza la fosoforilacin reversible de la creatina,
reaccin en la cual el ATP acta como dador del grupo fosfato. La reaccin es dependiente del pH
y, si ste es neutro, se favorece la formacin de ATP. El pH 9.0 es ptimo para la formacin de
fosfocreatina, otro compuesto de alta energa.
Se encuentra ms abundancia de CK en el msculo esqueltico. Las otras fuentes en que se
encuentra, por orden decreciente de actividad son: cerebro, recto, estmago, vejiga, colon, tero,
prstata, intestino delgado y rin. Se detectan cantidades despreciables en hgado, placenta y
tejido tiroideo.
La CK posee tres isoenzimas que se designan: CK-BB (CK-1), CK-MB (CK-2), y CK-MM (CK-3).
Como la CK total de eleva en diversas afecciones cardiacas y de msculo esqultico, la
separacin y anlisis de las isoenzimas tiene mayor significado clnico que la determinacin de
niveles totales de creatincinasa.
La CK-BB se encuentra predominantemente en el cerebro y en el SNC; sin embargo tambin esta
presente en pequeas cantidades en diversos tejidos, incluyendo pulmn, prstata, tero y aparato
digestivo.
La CK-MM es la isoenzima que predomina en el msculo esqueltico y cardiaco; por tanto se
observa elevacin en sus niveles en diversas afecciones musculares. La CK-MB se limita casi
exclusivamente al tejido muscular cardiaco. La elevacin de los niveles de CK-MB tiene
importancia clnica como ayuda de laboratorio para el diagnstico del infarto agudo al miocardio.
MATERIAL:

Agua destilada,
Centrifuga,
Reloj de intervalos, Cronmetro
Torundas con alcohol,
Torniquete
Gasas
Equipo para la determinacin de creatinfosfoquinasa (CK CPK)
NOTAS:
1. El suero es la muestra de eleccin para determinar CK; sin embargo puede utilizarse
plasma heparinizado sin interferencias. La actividad de la CK se inhibe fcilmente por la
presencia de EDTA, citrato y fluoruro. Los sueros hemolizados con aproximadamente 320
mg/l de hemoglobina /trazas de hemlisis) no varan en forma apreciable la actividad de la
CK medida, un mayor grado de hemlisis produce una actividad de CK errneamente
elevada debido a la presencia de adenilato quinasa (AK, mioquinasa) abundante en los
eritrocitos, si no se aade un inhibidor a la mezcla de reaccin (fluoruro por ejemplo).
2. La muestra de suero para el anlisis de la CK debe protegerse de la luz. Si se va a retrasar
el anlisis, el suero debe almacenarse a obscuras, a 4C, si se demora el anlisis ms de 4
horas. La conservacin prolongada de muestras a -20C ha producido una perdida mnima
de actividad luego de 2 meses de las tres isoenzimas, la CK-BB es la menos estable.
3. es necesario considerar distintas tensiones fsicas, como ejercicio, intervencin quirrgica,
inyecciones intramusculares, o desfibrilacin elctrica, como variables preanalticas al
interpretar los nieles de CK para el diagnstico de infarto agudo al miocardio. Estos
factores pueden confundir la interpretacin.
PROCEDIMIENTO:
reaccin
REACTIVOS
BLANCO
TESTIGO
PROBLEMA O
MUESTRA
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CUESTIONARIO:
1.- Qu importancia clnica tiene la determinacin de la CK total en un paciente?
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2.- Por qu cuando ingresa un paciente con infarto al miocardio adems de solicitar la
determinacin
de
la
CK
solicitan
tambien
la
fraccin
MB
(isoenzima)?
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3.-Especifica las isoenzimas de la CK, indica su ubicacin y la importancia clnica de su
determinacin
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4.- Por qu se prefiere suero a plasma en la determinacin de la CK y sus isoenzimas y por qu

debe evitarse la hemlisis en estas determinaciones?
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PRCTICA NO. 17
NOMBRE DE LA PRCTICA: Realizacin de un Examen General de orina
OBJETIVO: Determinar un examen general de orina completo como un medio para diagnosticar
infecciones de las vas urinarias principalmente y algunas otras alteraciones de tipo metablicas.
INTRODUCCION:
Los riones humanos son pares, tienen forma de frijol y estn localizados a cada lado de la
mdula espinal, ligeramente por arriba de la cintura. Cada uno mide 13 cm de longitud, 8 de
ancho y 2.5 de grosor, aproximadamente.
La sangre que lleva desechos celulares disueltos entra a cada rin por la arteria renal; despus
de que ha sido filtrada, sale por la vena renal. La orina es sacada de cada rin por un tubo
muscular angosto que recibe el nombre de urter. Por medio de contracciones peristlticas, los
urteres transportan la orina a la vejiga. Esta cmara muscular vaca, recoge y almacena la orina
Son responsables del mantenimiento de la homeostasis, comprendiendo la regulacin de
los lquidos corporales, del equilibrio cido bsico, del equilibrio electroltico y la excrecin de los
productos de desecho.
Tambin participa en el mantenimiento de la presin arterial y en la eritropoyesis. La
funcin renal est influenciada por el volumen sanguneo, la presin arterial y la composicin de la
sangre, as como tambin por las glndulas suprarrenales e hipfisis.
Los principales constituyentes de la orina son: agua, urea, cido rico, creatinina, sodio,
potasio, cloro, calcio, magnesio, fosfatos, sulfatos y amonaco. En algunos procesos patolgicos
aparecen en grandes cantidades sustancias tales como cuerpos cetnicos, protenas, glucosa,
bilirrubinas. La orina tambin puede contener estructuras como clulas epiteliales, cristales,
cilindros, clulas sanguneas etc.
La funcin principal de los riones es la remocin de productos potencialmente txicos y es
realizada mediante la formacin de la orina. Los procesos bsicos involucrados en la formacin de
la orina son filtracin, reabsorcin y secrecin. Los riones filtran grandes volmenes de plasma,
reabsorben la mayora de lo que es filtrado, y queda para la eliminacin una solucin concentrada
de desechos metablicos llamada orina. En individuos sanos, altamente sensibles a fluctuaciones
de la dieta e ingesta de fluido y electrolito, los riones compensan cualquier cambio variando el
volumen y la consistencia de la orina.
El anlisis corriente o sistemtico de la orina y los estudios especiales de la funcin renal
aportan datos tiles respecto a la integridad de riones y vas urinarias y sus funciones, y tambin
constituyen indicadores sensibles del estado general del sujeto.
El examen general de orina (EGO) tambin denominado urianlisis, es una de las pruebas de
gabinete ms importante en la determinacin del estado de salud de un paciente, ya que mediante
este anlisis se pueden determinar muchas caractersticas de funcionamiento en varios rganos
internos.
MATERIAL:
Centrifuga, Gasas
Microscopio compuesto
Porta y cubreobjetos
Tiras reactivas para urianlisis (N-Multistix)
Muestra reciente de orina
NOTAS:
1. La muestra debe ser recolectada en un frasco limpio, de preferencia de vidrio con tapa de
rosca que cierre bien
2. La recoleccin deber hacerse del chorro medio de la miccin y si se solicita junto con el
EGO, urocultivo; ser necesario el aseo previo de la zona genital (puede ser tambin que
se recolecte despus de baarse) y el frasco deber ser estril.
3. En el caso de los bebs existen bolsas recolectoras especiales que se colocan en la zona
genital del bebe previo aseo pues debe evitarse la contaminacin de la orina con cremas,
talco u otro producto que se utilizan para las rozaduras. Y siendo a veces difcil la
recoleccin en los lactantes ser suficiente con 15 o 20 ml de orina.
4. De preferencia debe ser la primera orina de la maana pues es la ms concentrada, pero si
no es posible cualquiera del da, recolectada segn las caractersticas ya mencionadas.
5. Aunque no se requiere estrictamente ayuno para la recoleccin y realizacin del EGO, con
frecuencia de recolecta en estas condiciones pues, adems de este examen se nos solicita
junto con exmenes de sangre que si lo requieren.
PROCEDIMIENTO:
EXAMEN GENERAL DE ORINA
El urianlisis implica el examen de los caracteres fsicos y componentes qumicos de la

muestra, as como el estudio microscpico del sedimento urinario.
Examen fsico:
Volumen: Se forman diariamente de 600 a 1800 ml. de orina, variando con el peso, sexo, edad,
condiciones climatolgicas y la ingesta de lquidos o medicamentos como diaureticos.
Aspecto: Recin emitida la orina es transparente, puede volverse turbia por reposo, enfriamiento,
cambios de pH, accin bacteriana, cristales etc.
Color: Normalmente presenta color de amarillo paja a amarillo mbar. Algunas sustancias
presentes ( y que representan estados patolgicos) pueden hacer variar el color; por ejemplo, en
caso de hematuria (sangre en la orina) la muestra adquiere un tinte rojo.
Olor: La orina reciente tiene un olor caracterstico aromtico, que con el tiempo, por accin
bacteriana, se forma amoniaco con su olor peculiar. Tambin pueden existir olores distintos
debido a alteraciones metablicas; por ejemplo, en el caso de diabticos puede llegar a
presentarse cetonuria presentndose un olor como a frutas (cetonas) u olores ftidos o
desagradables en infecciones graves por bacterias.
Reaccin de pH: La orina normal es cida con pH de 5.5 a 6.5, por reposo se torna alcalina por la
conversin de urea en amoniaco. En caso de infecciones, con algunas bacterias pude alcanzar pH
alcalinos como 8.0 o 9.0.
Densidad: Normalmente es de 1.003 a 1.030, variando segn la ingestin de alimentos y agua.
Examen qumico:
Los parmetros a medir son: glucosa, protenas, cuerpos cetnicos, nitritos, urobilingeno,
bilirrubina, sangre y hemoglobina e incluso leocitos.
Las tiras reactivas para urianlisis son bases plsticas en las que hay adheridas diversas
reas impregnadas de reactivo para determinar los parmetros anteriores
Los resultados obtenidos con las tiras reactivas proporcionan informacin referente al
metabolismo de carbohidratos, funcin heptica y renal, balance cido-base e infecciones del
tracto urinario.
Las tiras reactivas estn listas para usarse y son desechables. Pueden ser ledas
visualmente aunque existen presentaciones que pueden ser ledas en autoanalizadores.
Las instrucciones deben seguirse correctamente, considerando los tiempos de espera para
cada parmetro as como los requisitos de almacenaje y utilizacin.
Examen microscpico:
El sedimento urinario proviene en gran parte de la exfoliacin de la superficie de los
rganos internos.
En estado de salud se excretan algunos eritrocitos, leucocitos y cilindros. Se considera

normal que se encuentren 4 5 leucocitos por campo, de 0 a 1 eritrocitos y 1 2 cilindros hialinos
en toda la preparacin. La presencia de bacterias no tiene significado si no se ha recolectado la
orina por sondeo y en frasco estril.
Pueden encontrarse tambin en la orina espermatozoides, hongos levaduras, parsitos y
cristales.
Recoleccin y conservacin de la orina:
Se analizan muestras de cualquier hora del da, sin embargo se prefiere la primera de la
maana por ser la ms concentrada.
La orina se recolecta en frasco de cristal, incoloro, transparente, de boca ancha, limpio y
seco. Debe examinarse lo antes posible, de no ser as debe de refrigerarse y si se prolonga el
almacenamiento se adicionar un preservativo adecuado.
1-
S e observa la orina y se hacen las anotaciones para el examen fsico: color, olor, aspecto
2-
Se mezcla por agitacin suave y se colocan entre 5 y 7 ml. en un tubo de ensayo de 13 x 100
3-
Se sumerge la tira reactiva en la orina. Solo se deja unos 2 o 3 segundos y luego se retira
rpidamente para evitar se disuelvan los qumicos de los cojinetes que detectan cada
componente qumico.
4-
Se escurre el exceso de orina (puedes utilizar una gasa o papel absorbente para absorber el
exceso de muestra). Esto evita que se mezclen los reactivos entre si y exista confusin en la
interpretacin
5-
Se compara cuidadosamente (en los tiempos especificados) el color de reaccin de la tira con
la escala de colores del frasco del reactivo (sostener la tira cerca de la carta de colores) Por
favor evita tocar con la tira el frasco y la carta de colores. se hacen las anotaciones
correspondientes ya sea por cruces o indicando en cada componente qumico la
concentracin correspondiente marcada en el frasco, en el caso que no haya cambios se
reportarn negativos y solo el urobilingeno como normal
6-
Centrifugar el tubo 5 min. A 3000 rpm.
7-
Desechar el sobrenadante por inversin del tubo conteniendo la muestra
8-
Resuspender el sedimento y colocar una gota entre porta y cubreobjeto.
9-
Examinar la preparacin al microscopio, primero hazlo con el objetivo de 10X para tener un
panorama amplio y buscar cilindros, filamento de moco y luego cambia al de 40X para hacer
el reporte de los elementos formes observados, considerando por lo menos 7 campos; los
leucocitos, eritrocitos y cilindros se reportan en nmero por campo microscpico
(promediando). El resto de los elementos: clulas epiteliales, levaduras, cristales, etc. se
reportan como escasos, moderados abundantes. En algunas ocasiones por contaminacin (
por ejemplo: uretral o vaginal), pueden aparecer algunos parsitos como tricomonas u otras
estructuras celulares que debern reportarse como una observacin ms del examen, pues
tiene importancia clnica y ayuda a orientar ms al mdico para dar un tratamiento adecuado
al paciente.
Resultados:
Examen fsico:
Color: ____________________________
Olor: _______________________________
Densidad: _________________________
pH: _______________________________
Examen qumico:
Glucosa ___________________________
Protenas __________________________
Cetonas ___________________________
Bilirrubina __________________________
Nitritos ____________________________
Urobilingeno _______________________
Sangre ____________________________
Hemoglobina _______________________
Bilirrubinas_________________________
Leucocitos_________________________
Examen microscpico:
CELULAS
LEUCOCITOS
ERITROCITOS
PIOCITOS
BACTERIAS
HONGOS
HONGOS
FILAMENTO DE MOCO
CRISTALES
CILINDROS
OTROS
Cuestionario:
1.- A qu sustancia se debe y en que enfermedades la orina presenta color de cerveza obscura
con visos verdosos?
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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
2.- Anota dos factores normales y dos patolgicos que hacen que el rin produzca mayores
cantidades de orina.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
3.- Cules son los procesos que se llevan a cabo en el rin para la formacin de la orina?
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_______________________________________________________________________________
4.- Indica la importancia clnica que tiene el realizar el examen general de orina en el paciente.
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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
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5.- Indica los valores normales que se deben presentar en parmetro estudiado en cada uno de
los anlisis que realizaste: anlisis fsico, qumico y microscpico
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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
6.-Indica en el caso de cada parmetro medido en el estudio fsico, qumico y microscpico, en

que situaciones (enfermedades o patologas) se presentan o estn elevados los niveles de estos
estudios;
esto
nos
permitir
conocer
mejor
el
diagnstico
del
paciente.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
7.- Qu otros estudios se pueden realizar en la orina? Explica algunos e indica la importancia de
sus determinaciones o para que se realizan.
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_______________________________________________________________________________
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Vo.Bo. del maestro
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Vo.Bo. del Titular
PRCTICA NO. 18
NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de una prueba de embarazo en orina
OBJETIVO: Realizar la deteccin de la hormona gonadotropina corinica como un mecanismo
para determinar el estado de embarazo, utilizando una muestra de orina de la paciente.
INTRODUCCION:
Los aos de funcin reproductiva de la mujer se caracterizan por cambios rtmicos en las tazas de
secrecin de las Hormonas Femeninas y cambios correspondientes en los rganos sexuales. Las
funciones sexuales y reproductivas en la mujer pueden dividirse en dos fases principales; primera:
la Preparacin del Cuerpo para la Concepcin y la Segunda: el Periodo de Gestacin o Embarazo.
La gonadotropina corinica humana (hCG) es una hormona glicoproteica que se produce en
condiciones normales en la placenta y aparece en el plasma y en la orina durante el embarazo. La
hCG, junto a la hormona folculo estimulante (FSH), la hormona luteinizante (LH) y la hormona
estimulante del tiroides (TSH), est constituida por una cadena alfa, estructuralmente similar entre
ellas, y una cadena beta especfica que determina su actividad biolgica. 2 Esta hormona estimula
la produccin de hormonas esteroides por el cuerpo lteo, lo que propicia el ambiente uterino
adecuado para el desarrollo del embrin. El principal uso de la determinacin de la hCG es el
diagnstico precoz del embarazo; sin embargo, es posible observar niveles elevados en pacientes
con carcinomas urogenitales, embarazos ectpicos y ovricos.
Una funcin principal de la Gonadotropina Corinica Humana (GCH) es administrar los factores
nutricionales y estimular cantidades necesarias de otras hormonas para mantener en ptimas
condiciones el endometrio y la cavidad uterina, lo que en caso contrario de no haber concepcin o
cantidad insuficiente de esta hormona se perdera en forma de lquido menstrual.
La deteccin precoz del embarazo por las pruebas bioqumicas se fundamenta en la determinacin
de la gonadotropina corinica humana (HCG) en suero o en orina.
Una vez producida la fecundacin y la implantacin del blastocisto en la decidua endometrial, las
clulas trofoblsticas empiezan a sintetizar HCG.2 Las cifras de HCG se incrementan rpidamente
en las primeras semanas del embarazo y a los 35 das de amenorrea alcanzan cifras de 1800 UI/L.
La HCG est compuesta de 2 subunidades alfa y beta, diferentes entre s; mientras la subunidad
alfa es compartida por las restantes glicoprotenas hipofisarias, la subunidad beta le confiere sus
caractersticas biolgicas e inmunolgicas distintivas.2
La combinacin del empleo de los anticuerpos monoclonales contra la subunidad beta de la HCG
(beta HCG) y los inmunoensayos enzimticos, ha posibilitado el auge de mtodos
semicuantitativos y cualitativos rpidos, sensibles y especficos con valores de sensibilidad de 50
UI/L que pueden ejecutarse en las propias consultas mdicas y donde el resultado se ofrece en
menos de una hora.
EMBARAZO
El primer signo de embarazo es la ausencia de una menstruacin esperada. Si los ciclos son
regulares, el retraso de la regla durante 1 semana o ms es la base de presuncin de
embarazo. El mdico diagnosticar embarazo por medio de procedimientos exploratorios y
utilizando diversos sistemas diagnsticos (doppler, test de embarazo, etc.)
CURVA DE hCG
Semana desde Cantidad de hCG
el ltimo ciclo
en mUI/mL
3
5-50
4
25-400
5
200-7000
6
1000-50000
7-8
7000-200000
9-12
25000-250000
13-16
15000-250000
17-24
5000-150000
25-40
4000-100000
La hCG (Hormona del embarazo) estimula el cuerpo lteo del ovario para mantener las
secreciones de estrgenos y progestgenos a fin de garantizar la integridad del embarazo. Como
regla general, los niveles de hCG se duplican al doble cada dos o tres das. Una mujer
embarazada tendr de 10 a 50 mUI/mL de concentracin de hCG en suero la primera semana
siguiente a la concepcin (al final de la tercera semana del ciclo), alcanzando la mxima
concentracin entre el segundo y tercer mes, seguido de un descenso a partir de la 12 semana.
Mtodos de determinacin de la Gonadotropina Corinica humana (hCG, -hCG, hormona
del embarazo)
La hCG se sintetiza en la placenta y aparece en el suero y en la orina relativamente pronto
despus de la concepcin.La hCG es una glucoprotena compuesta por dos subunidades
polipeptdicas: alfa y beta. La subunidad alfa es esencialmente idntica a la cadena alfa de otras
hormonas hipofisiarias (TSH, LH y FSH). Es la variacin de las subunidades beta donde reside
la especificidad de la actividad biolgica de estas hormonas.
Con los mtodos cuantitativos de laboratorio pueden detectarse cantidades muy pequeas de hCG (sensibilidad entre 0,05 y 0,1 mUI/mL). Dichos mtodos son: radioinmunoanlisis (RIA),
enzimoinmunoensayo (EIA, ELISA), inmunoanlisis de fluorescencia (FIA). Casi todos ellos usan
dos tcnicas: Inhibicin competitiva (RIA, FIA), y tcnicas sndwich de doble anticuerpo (EIA, FIA).
Todos estos ensayos cuantitativos requieren instrumentacin especial y largos tiempos de anlisis
(de 30 minutos a 3 horas).
Suero: determinacin
cuantitativa de la -hCG
Marcador Tumoral
Mola hidiatiforme, coriocarcinoma,

teratomas ovricos y testiculares, hCG
ectpica, neoplasias
Embarazo mltiple, amenaza de aborto.
Eritroblastosis fetal grave.
Suero: determinacin
cuantitativa de la -hCG
Suero u orina: cualitativa o

semicuantitativa
Prueba de estmulo
en adultos y nios
varones
Hipogonadismo secundario. No est

indicada con niveles altos de FSH o LH.
Embarazo
Cualitativa en suero u orina. En orina se

prefiere la primera de la maana, recin
evacuada. Restringir ingesta de lquidos a
partir de la medianoche.
Semicuantitativa: orina de 24 h. Refrigerar
durante la recoleccin.
Tradicionalmente se han utilizado pruebas cualitativas urgentes en orina, de aglutinacin en

portaobjetos, como indicadores para visualizar una reaccin positiva. Estas tcnicas han cado en
desuso tras la aparicin de los tests rpidos en dispositivos inmunocromatogrficos,
proporcionando sensibilidades de 25 mUI/mL en tiempos de ensayo por debajo de los 3 minutos.
La aparicin de una nueva generacin de mtodos inmunoabsorbentes con partculas de

oro coloidal recubiertos de anticuerpos anti -hCG (DONNATEST Embarazo) permite
mejorar la sensibilidad de deteccin de esta hormona en orina por debajo de 20 mUI/mL en
menos de dos minutos.
Estas pruebas se utilizan como mtodo cualitativo, tanto en laboratorio, en formato de tira
reactiva para suero y orina, o en formato de dispositivo como prueba rpida de uso
personal, y con la sensibilidad suficiente para detectar la hormona desde el primer da de la
falta.
MATERIAL:
Centrifuga, Gasas
Tiras reactivas para deteccin de la fraccin beta de la hormona
Muestra reciente de orina
NOTAS:
1. La muestra debe ser recolectada en un frasco limpio, de preferencia de vidrio con tapa de
rosca que cierre bien. De preferencia debe ser la primera orina de la maana pues es la ms
concentrada, pero si no es posible cualquiera del da, puede ser utilizada en el examen.
PROCEDIMIENTO DE USO:
1. Procedimiento opcional: recoger la orina en un vaso limpio. Sumergir la zona absorbente del
dispositivo durante 10 segundos. Esperar que aparezca el resultado a partir de un minuto.
RESULTADOS:
Si aparecen dos lneas rosadas o rojas, el resultado es

positivo.
Si solo aparece la lnea rosada o roja, el resultado es
negativo.
Cuestionario:
1.- Adems del embarazo, qu importancia clnica determina el detectar los niveles sanguneos de
la hormona gonadotropina corinica?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
2.- Qu es un embarazo ectpico? Explica detalladamente.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
3.-En casos de amenaza de aborto, para que solicita el Gineclogo la cuantificacin de la hormona
gonadotropina corinica en la paciente? Cmo se realiza el estudio?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
4.-Por qu se recomienda que el estudio se realice de preferencia en la primera orina de la
maana?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
5.- Por que el mdico solicita la fraccin beta de la HGC?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
6.-Que diferencia existe el realizar la determinacin de la HGC en sangre en vez de orina? Explica
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

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Vo.Bo. del maestro
______________________
Vo.Bo. del Titular

Anilisisclinicos 2

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UNIVERSIDAD DE COLIMA

BACHILLERATO TCNICO NO. 4

La accin deficiente de la insulina ocasiona unas respuestas deficientes o inadecuadas en

1)una glucosa plasmtica en ayunas >126 mg/dl (7.0 mmol/l),

NOTAS IMPORTANTES PARA LA DETERMINACION DE GLUCOSA SANGUINEA:

3.- En qu consiste la determinacin de hemoglobina glicosilada y cundo es til su

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Fecha de realizacin: _____________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

EL PACIENTE DEBER PRESENTARSE AL LABORATORIO PARA PRACTICARLE EL

2.- Menciona en qu casos se eleva y se disminuye la urea

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

Qu tan bien estn trabajando tus riones,

Las dosis de ciertos medicamentos cuando los riones estn fallando

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

La gota es causada por un defecto en el metabolismo que provoca una sobreproduccin de

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

Debido al metabolismo particular de la bilirrubina, resulta de suma importancia conocer la

NOTAS IMPORTANTES PARA SU DETERMINACION:

DETERMINACION DE BILIRRUBINA DIRECTA

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

3.- Actuar como amortiguadores del balance cido-bsico de la sangre.

2.- Adems de la determinacin de protenas totales, Cules otras determinaciones se realizan en

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

4.- En que consiste la fibrosis qustica? Explica

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Fecha de realizacin: _____________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Vo. Bo. Del profesor

Firma del alumno

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

NOMBRE DE LA PRCTICA: Determinacin de Transaminasa Glutmica pirvica (TGP)

Pipetas pistn de 50, 100, 500 y 1000 microlitros y puntillas

Los niveles de la fosfatasa alcalina se pueden elevar en los siguientes casos:

3.-Qu importancia representa que determinemos las isoenzima de la fosfatasa alcalina?

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Centrifuga, reloj de intervalos, Cronmetro

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Nota: si se eleva el nivel de LDH, es recomendable la medicin de isoenzimas de la

4.- Por qu se prefiere suero a plasma en la determinacin de la DHL (e isoenzimas), y; por qu

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

Espectrofotmetro, Cubetas o celdillas para el espectrofotmetro

4.- Por qu se prefiere suero a plasma en la determinacin de la CK y sus isoenzimas y por qu

Nombre del alumno: ______________________________________________________________

El urianlisis implica el examen de los caracteres fsicos y componentes qumicos de la

En estado de salud se excretan algunos eritrocitos, leucocitos y cilindros. Se considera