Aspectos Bioqumicos y Fisiolgicos de la Nutricin Animal

Instituto de Ciencia Animal Ministerio de Educacin Superior

PROLOGO

Este libro ha sido preparado por los profesionales del departamento de Ciencias Biofisiologicas de Instituto de Ciencia Animal a partir de las conferencias que se imparten en la asignatura Fisiologa Digestiva y Bioqumica Nutricional correspondiente a la maestra Produccin Animal Tropical que se imparte con carcter nacional e internacional a profesionales y egresados de las carreras de corte agropecuario o disciplinas afines. Fue concebido para actualizar las ediciones anteriores de los Tomos I y II de Bioqumica Nutricional y para llevar a los educandos los conocimientos mas actualizados acerca de la fisiologa digestiva de rumiantes y monogstricos sometidos a las nuevas condiciones de alimentacin con dietas tradicionales y no convencionales. El libro consta 20 conferencias distribuidas en tres captulos que abarcan desde la fisiologa y anatoma del tracto digestivo de rumiantes y monogstricos hasta la influencia de las practicas de manejo en el comportamiento de estos ndices. En el se tratan aspectos nuevos acerca del el estrs en el trpico el estrs oxidativo, los factores antinutricionales, los minerales orgnicos, el uso de alimentos fibrosos en especie monogstricas y mtodos actuales para hallar el valor nutritivo de los alimentos entre otros. Consideramos que el libro puede servir como un valioso material de consulta tanto para profesionales que deseen investigar en el campo de la agropecuaria como para recien graduados que requieran profundizar en sus conocimientos acerca de la Fisiologa Digestiva y la Bioqumica Nutricional .

Odilia Gutirrez y Lourdes Savn

ndice Contenido Seccin I: Fisiologa y Anatoma del Tracto Digestivo HI II III IV V Fisiologa digestiva del rumen Anatoma comparada y digestiva de los animales monogstricos: aves, cerdos y conejos Los microorganismos del rumen y su actividad La celulosas ruminal y los factores que la modifican Micro ecologa del Tracto Gastrointestinal en monogstricos Seccin II: Digestin y absorcin de nutrientes VI VII VIII IX X XI XII XIII Digestin de los carbohidratos y absorcin de los AGV en el rumen Digestin y absorcin de carbohidratos en monogstricos Digestin y absorcin de lpidos en rumiantes Digestin y absorcin de lpidos en monogstricos Digestin y absorcin de compuestos nitrogenados en rumiantes Digestin y absorcin de protenas en monogstricos Metabolismo mineral Metabolismo de las vitaminas Seccin III: Aspectos fisiolgicos del manejo animal El estrs oxidativo: sus causas y consecuencias Consideraciones acerca del estrs y su manejo en rumiantes Aspectos fisiolgicos del uso de los follajes tropicales en la alimentacin de rumiantes XVII Efectos de los factores antinutricionales en la fisiologa digestiva de las especies monogstricas XVIII Consumo voluntario y su mecanismo de control en monogstricos XIX XX Alimentacin no convencional de especies monogstricas. Utilizacin de alimentos ricos en fibras Metodologa para determinacin del valor nutritivo de pastos y forrajes XIV XV XVI R. Stuart Denia Delgado Bertha Chongo Mara. F. Daz Lourdes Savn y Madeleidy Martnez Lourdes Savn O. La O Denia Delgado Soraya Rodrguez R. Stuart Madeleidy Martnez Bertha Chongo R. Bocourt Odilia Gutirrez y Lourdes Savn Odilia Gutirrez y R. Bocourt Denia delgado L. E. Dihigo Juana Galindo Juana Galindo R. Bocourt Autores

Seccin I Fisiologa y Anatoma del Tracto Digestivo

I Fisiologa digestiva del rumiante Dra. Denia C. Delgado Contenido

Introduccin .............................................................................................................................................................................6 El tracto digestivo del rumiante. ............................................................................................................................................7 El retculo rumen. Caractersticas generales.........................................................................................................................8 El canal reticular o gotera esofgica. ...................................................................................................................................9 El Omaso. ............................................................................................................................................................................10 El abomaso. .........................................................................................................................................................................10 Intestinos..............................................................................................................................................................................10 Desarrollo del estmago del rumiante..................................................................................................................................11 Microbiologa del rumen. ......................................................................................................................................................11 Motricidad ruminal y movimientos asociados del contenido de la digesta. ......................................................................12 Motricidad ruminal. Los dos ciclos motores. ......................................................................................................................12 Propulsin y mezclaje. .........................................................................................................................................................13 Ingestin y Rumiacin. ..........................................................................................................................................................13 Rumiacin. ...........................................................................................................................................................................14 El tamao de las partculas del rumen. Factores que influyen en su degradacin .............................................................14

Gravedad especfica de las partculas ............................................................................................. 15 Relacin entre la GEF y el tamao de las partculas....................................................................... 15
El pasaje de las partculas slidas ......................................................................................................................................16 Digestin ruminal ................................................................................................................................................................17 Digestin microbiana de los hidratos de carbono. ..............................................................................................................17 Digestin de los compuestos nitrogenados. .........................................................................................................................18 Digestin ruminal de los lpidos. .........................................................................................................................................18 Pasaje intestinal. ....................................................................................................................................................................18 Conclusiones ...........................................................................................................................................................................19 Bibliografa a consultar. ........................................................................................................................................................19

Introduccin La principal funcin del tracto gastrointestinal (TGI) de los animales es proporcionar los nutrientes para la absorcin y la excrecin de ciertos productos de desecho. Aunque las funciones pueden ser similares en muy diversas especies, existen marcadas diferencias en la naturaleza de su alimentacin, as como en la estructura de su TGI. La mayor parte de los carnvoros y omnvoros tienen un estmago relativamente simple que se conoce como estmago monogstrico. En tales animales el estmago es esencialmente una estructura en forma de bolsa que contiene glndulas secretoras de cido clorhdrico y pepsingeno, el precursor de la pepsina y en los animales jvenes tambin secreta renina y lipasa. En contraste, los rumiantes presentan una serie de caractersticas en su tracto digestivo que difieren del resto del los animales, gracias a lo cual pueden utilizar los carbohidratos celulsicos procedentes de las plantas, que el hombre ni los animales monogstricos pueden aprovechar, por carecer de las enzimas digestivas capaces de romper las uniones 1-4 de la glucosa en las cadenas de los polisacridos estructurales. La utilizacin de estos alimentos fibrosos es posible, gracias a la existencia de un preestmago en los rumiantes que constituye una cmara de fermentacin continua donde una gran poblacin microbiana,

productora de enzimas celulasas, vive en simbiosis con el animal y le permite aprovechar de forma indirecta la energa almacenada en las plantas y convertirlas en alimento (carne, leche, etc.). Esta conferencia recoge algunos aspectos relevantes de la fisiologa digestiva de los rumiantes con el propsito de realizar una mejor explotacin del potencial del rumen a favor de una mayor eficiencia productiva y econmica en la explotacin de esta especie animal. El tracto digestivo del rumiante. Los rumiantes ocupan un lugar destacado dentro de la cadena alimenticia, puesto que ellos pueden digerir las paredes celulares de las plantas, a travs de la fermentacin ruminal. La fermentacin tiene lugar en el estmago pluricavitario, una regin especial de amplia capacidad donde los alimentos permanecen un cierto tiempo y sufren la accin de una densa poblacin microbiana que fermenta los carbohidratos y otros materiales de las plantas para producir principalmente cidos grasos de cadena corta (AGV), metano, dixido de carbono y energa (ATP). El estmago pluricavitario se ubica en el lado izquierdo de la cavidad abdominal y ocupa casi las 3/4 partes. Est formado por cuatro partes netamente distinguibles: el retculo, el rumen, el omaso y el abomaso (Fig. 1). Las tres primeras partes estn cubiertas por papilas, que forman un epitelio estratificado escamoso queratinizado y que es el sitio principal de absorcin de nutrientes.

Figura 1. Diagrama esquemtico del estmago de un rumiante.

En estos compartimentos no hay glndulas ni se segrega mucus y la digestin ocurre gracias a las enzimas microbianas. La verdadera digestin ocurre en el abomaso que es el estmago glandular propiamente dicho. El tamao, forma y capacidad de los distintos compartimentos gstricos de los rumiantes dependen de la alimentacin, la edad y la talla de los animales. Al ao o ao y medio de vida el estmago debe alcanzar un desarrollo adecuado. En este momento el retculo rumen (RR) representar entre el 62-80
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% de la capacidad total del complejo gstrico y al omaso y el abomaso corresponden el 5 y el 7 %, respectivamente. El retculo rumen. Caractersticas generales. El retculo y el rumen, debido a su continuidad anatmica y a la no diferenciacin fisiolgica entre ellos, son considerados usualmente como un rgano simple: el retculo rumen (RR). El epitelio del retculo presenta pliegues que forman celdas poligonales. Una gran cantidad de pequeas papilas estn presentes en la superficie de celdas. El contenido del retculo se mezcla con el del rumen casi continuamente (una vez por minuto). El RR es el rgano principal del sistema digestivo de los rumiantes. En el animal adulto se encuentra situado en la regin abdominal izquierda del animal, desde las costillas sexta y octava costillas hasta la pelvis. Ocupa prcticamente toda el rea, extendindose adems sobre el plano medio ventral y en su centro. En sentido dorso ventral se expande desde las vrtebras sacro-lumbares hasta muy cerca de la lnea media del cuerpo. El lmite superior constituye la llamada curvatura dorsal y el inferior la ventral. Los laterales son la cara parietal (izquierda) y la visceral (derecha). El rumen est dividido por medio de pilares o tabiques en cuatro sacos. Los sacos mayores, el dorsal y el ventral, tienen comunicacin entre s y con el retculo, mientras que los sacos pequeos caudales no tienen comunicacin con el exterior y se les denominan sacos ciegos dorsal y ventral (Fig.2).
Figura 2. Diagrama del retculo-rumen por su parte interna

Por su parte interior, el RR tiene apariencia rugosa por la presencia de las papilas. Estas papilas son mayores en los sacos dorsal y ventral lo que incrementa la superficie de absorcin. Esto constituye una forma de adaptacin a las necesidades absortivas del rgano que como se dijo anteriormente, no posee capacidad secretora (Van Soest, 1982). El RR se puede considerar como un sistema de fermentacin continua, cuya capacidad requiere que todas las sustancias que entren con los alimentos o se produzcan por la fermentacin salgan del rgano
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y la entrada y la salida deben estar balanceadas. El rumen puede contener hasta 100-120 Kg. de materia en digestin. Y las partculas de fibra permanecen en l, de 20 a 48 horas porque la fermentacin bacteriana es un proceso lento (Watiaux et al,. 2000). Con alimentos fibrosos de baja calidad este tiempo suele ser an mayor. El ambiente ruminal est controlado por el tipo y la cantidad de alimentos consumidos, el mezclaje peridico debido a las contracciones ruminales, la salivacin, la rumia y la difusin o secrecin hacia el rumen (Preston y Leng, 1987). El ambiente slo se perturba bajo condiciones anormales drsticas. Los rumiantes producen grandes cantidades de saliva, en vacas adultas entre 100-150 litros/da y 8.5-12.5 litros/da en los ovinos; adems de sus cualidades conocidas, la saliva del rumiante posee funciones importantes: Mantiene un pH constante. Debido a que es rica en fosfatos y bicarbonatos tiene la facultad de actuar como amortiguador, controlando el efecto de los cidos que se producen durante la fermentacin. Es una fuente de nitrgeno no proteico (NNP). La urea sintetizada en el hgado se secreta en la saliva para nutrir a la microbiota ruminal. Ciertos hechos del rumen son comunes a casi todos los rumiantes y situaciones alimentarias. Por lo general, se observa un ambiente anaerbico con muy bajo potencial redox (250-450 MV) temperatura entre 39-41C y una presin osmtica de 260-340 mosm. El pH se mantiene casi constante entre 6-7, gracias a la alta capacidad buferante de la saliva y a la absorcin de los productos finales de la fermentacin a travs de la pared celular. El rumen est densamente poblado por una gran variedad de bacterias, hongos y protozoos (Hungate, 1966; Van Soest, 1994 y Jonany et al, 1995) que son responsables de los procesos digestivos que tienen lugar en el rgano. El contenido del RR es heterogneo y comprende una fase gaseosa, una fase lquida y una slida, ntimamente ligadas con un alto por ciento de agua (85-90 %) y una densidad ligeramente inferior a 1. El gas, en su mayor parte, proviene de la fermentacin de los alimentos y se acumula en la parte superior del saco dorsal. En un bovino adulto se producen cerca de 30-50 litros/hora de diferentes gases y en un borrego, 5 litros/hora; estos se eliminan a travs del eructo. Los principales gases son: Bixido de carbono (60-70%), Metano (30-40%), Nitrgeno (7%), Oxgeno (0.6%), Hidrgeno (0.6%) y cido Sulfhdrico (0.01%). La fase lquida est compuesta principalmente por el agua de bebida, la saliva y por sustancias solubles, principalmente los AGV, el NH3, los glcidos y las materias nitrogenadas solubles de los alimentos. En la fase slida presente en el rumen, las partculas de los alimentos y la biomasa microbiana forman una suspensin de estructura compleja que ser revisada en detalle posteriormente. El canal reticular o gotera esofgica. El rumen est conectado con el omaso, a travs de un cuello corto y estrecho que termina en el llamado orificio retculo omasal (ORO) que se extiende desde el cardias hasta el omaso. El ORO est formado por dos pliegues musculares que se cierran para dirigir los alimentos lquidos desde el esfago hasta el abomaso sin pasar por el rumen.

El cierre se produce por un reflejo que inicialmente se atribuy a algunas sustancias presentes en la leche, sin embargo, en la actualidad existen evidencias de que el patrn de comportamiento, unido con la estimulacin tctil de la teta que proporciona la leche, son los responsables del cierre del canal (Orskov, 1990). Se ha demostrado que el estmulo es necesario para el cierre, ya que aunque los receptores presentes en la boca se sobrepasen por introduccin del lquido directamente en el esfago, si el animal se estimula ensendole el bibern o la vasija donde se alimenta normalmente, el fluido entra al abomaso. Por el contrario, si el animal lactante se fuerza para que ingiera la leche, sin que haya un estmulo previo, sta entra al rumen y se produce fermentacin lctica, lo que conduce a acidosis y parcial destruccin de la protena. El cierre del canal reticular no es perfecto, lo que posibilita que una pequea parte de los alimentos que ingiere el ternero vaya cayendo directamente en el rumen. Esto sirve de inculo inicial para que se establezca la microflora en el rgano. El canal reticular es ms funcional en los animales lactantes que lo utilizan para pasar la leche directamente desde el esfago hacia el abomaso. En el rumiante adulto slo funciona si se ha mantenido el estmulo para el cierre, suministrando los nutrientes con teteras o algunas soluciones minerales de cobre y de sodio que provocan un efecto similar. El Omaso. El omaso tiene forma elipsoidal, presenta papilas longitudinales y anchas en forma de hojas o lminas que emergen de las paredes del rgano y se disponen en orden de tamao en varias hileras. La funcin del omaso an no se comprende totalmente, pero parece ser que atrapa las partculas pequeas de la ingesta, comprime los alimentos y extrae lquido. Adems en este rgano se absorbe agua y otras especies moleculares pequeas (NH3, AGV, electrolitos inorgnicos, etc). El omaso, contrarresta, por absorcin, el exceso de carga cida, osmtica, acuosa o amoniacal de dicho contenido con lo que protege al abomaso y al duodeno de la llegada de un quimo anormal y asegura una buena digestin (Asocras, 2000). El abomaso. El abomaso es un saco alargado que se encuentra en su mayor parte en el suelo del abdomen. Constituye la regin glandular del estmago de los rumiantes y es equivalente al estmago de los monogstricos. En esta regin ocurre la verdadera digestin ante la presencia de cido clorhdrico y enzimas. Intestinos. El abomaso y el intestino delgado (duodeno, yeyuno e leon) parecen tener funciones similares en los rumiantes y en los monogstricos. Es en estos rganos donde los residuos no fermentados de los alimentos y los microorganismos ruminales se someten a la digestin enzimtica y sus productos se absorben (Preston y Leng, 1987 y Forbes y Frences, 1994). Es muy importante saber que la velocidad de digestin de los alimentos en los rumiantes es ms lenta que en los monogstricos, pero tambin, los sustratos (alimentos) son modificados con mayor intensidad).
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El intestino grueso (ciego y colon) se une al leon, a travs del orificio ileocecal. El ciego y el colon son reas de colonizacin microbiana y fermentacin de aquellas fracciones alimentarias que sobrepasan la fermentacin ruminal y la digestin en el intestino delgado. Las bacterias presentes en el intestino grueso difieren muy poco de las del rumen. La produccin de AGV que se absorbe desde el intestino grueso representa una fraccin muy variable, de 4 a 26 % de la energa total digerida. Desarrollo del estmago del rumiante. El desarrollo del epitelio ruminal, depende de estmulos qumicos (absorcin de los cidos orgnicos liberados de las fermentaciones, principalmente) y mecnicos (masticacin y rumiacin) que se inician con el consumo de alimentos slidos (Fig. 3).
Figura 3. Estimulacin fisicoqumica para el desarrollo ruminal

Estimulo quimico AGV, NH3

Estimulo mecnico

Desarrollo Estructural
Actividad metablica
Epitelio Msculo

Motilidad

NH3 y Ac. Butrico

Ac. actico y propinico

Flujo sanguneo
Ac. actico y propinico

Habilidad absortiva

Las proporciones de los AGVs que se producen durante la fermentacin dependen de la dieta consumida. El cido butrico y, en menor grado, el cido propinico, derivados de la degradacin de los hidratos de carbono, son los responsables del crecimiento, desarrollo, mantenimiento, reposicin y de la correcta funcionalidad del epitelio de los preestmagos. Para que estos cidos, sean efectivos, deben mantener un ritmo de produccin adecuado y, alcanzar una determinada concentracin. Por ltimo, las concentraciones de AGV deben estar equilibradas entre s. El periodo crtico de formacin del epitelio para adaptarse a la funcin de la rumia, se inicia a las 3-5 semanas, alcanzando su madurez funcional a los 3-4 meses de vida. Microbiologa del rumen. Aunque los datos de los efectos de la dieta en la poblacin bacteriana son limitados y hay una gran variacin entre animales. Murphy (1990) hizo algunas generalizaciones referentes a las principales especies presentes en el rumen.
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Las bacterias ms importantes para la digestin de la fibra son el Ruminococcus albus, el Ruminococcus flavefaciens, el Fibrobacter succinogenes y el Butyribibrio fibriosolvens. En dietas basadas en granos predominan el Streptococcus bovis, particularmente a pH bajos y en dietas con sustratos altamente degradables. Los lactobacilos bajo estas condiciones son tambin un grupo importante. Los microorganismos actan una vez que el alimento llega al rumen. La colonizacin de la fibra por los microorganismos ocurre muy rpidamente (<15 minutos). Las celulasas alcanzan y digieren la celulosa del sustrato colonizado. La digestin del almidn ocurre en forma similar por la accin de las bacterias amilolticas. La invasin y el ataque de las bacterias ocurre primero donde las superficies han sido fracturadas y hay discontinuidad en las cutculas y en las aberturas de los estomas. En el prximo captulo se estudiarn estos aspectos en detalle. Motricidad ruminal y movimientos asociados del contenido de la digesta. La ingestin y la digestin de los alimentos fibrosos por los rumiantes implican complejas interacciones entre los componentes del forraje, los microorganismos ruminales y la actividad motriz del rumen que implican la desintegracin de las partculas alimentarias y al mezclaje y propulsin de la digesta. Para que ocurra un buen proceso digestivo, se debe conseguir que en el rumen de nuestros animales, la capacidad fermentativa y la movilidad de los preestmagos, acten de forma coordinada. Se sabe que una alteracin, en cualquier de estas dos funciones del rumen influye negativamente en la otra (Asocras, 2000). Motricidad ruminal. Los dos ciclos motores. La actividad contrctil de la pared ruminal consiste en contracciones cclicas regulares con una duracin de 50-70 segundos mediante las cuales es posible poner en movimiento y mezclar la ingesta, promover el recambio y hacer ms accesible las partculas alimentarias a la fermentacin microbiana.

A-Reposo
A B

B-Contraccin bifsica delRetculo C-Paso de la contraccin a la regin ceflica y al pliegue retculo- ruminal D-Contraccin de la porcin del saco dorsal.

E-Contraccin de la porcin caudal del saco ventral. F-Reposo.

Ciclo de mezcla en el rumen

Figura 5. Esquema de los ciclos motores del rumen

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Se han descrito dos tipos de contracciones o frecuencias: la secuencia A o primaria, que afecta el RR totalmente y la secuencia B o secundaria, que afecta slo una parte del rgano La secuencia A se inicia por una contraccin bifsica del retculo que se propaga sucesivamente hacia el saco cranial, el dorsal y el caudoventral; despus se vierte hacia los sacos ventral y caudoventral. Este movimiento primario se considera como peristltico o de mezcla. La secuencia B no ocurre siempre. Cuando se presenta, la contraccin del saco caudoventral se prolonga y gana el saco caudodorsal para su propagacin hacia adelante y se termina nuevamente en el saco ventral. Este movimiento se conoce como antiperistltico o de eructo. De estos eventos, resulta una onda gradual de contraccin, seguida por una relajacin. Puede ocurrir que algunos sacos estn dilatados, mientras que otros estn contrados. La repeticin regular de las diferentes fases de los ciclos de contracciones establece un rgimen coherente de movimientos que adems de permitir el mezclaje de la digesta, constituye un mecanismo eficaz en el rumiante para liberar las grandes cantidades de gases que se producen durante la fermentacin. La frecuencia y la amplitud de las contracciones ruminales se pueden afectar por la forma fsica del forraje y el tamao de las partculas. En dependencia de la dieta se pueden producir entre 1400 y 1600 contracciones reticulares diarias, con mayor velocidad durante la ingestin (Ruiz, 1987). La contribucin de la frecuencia, la duracin y la amplitud de las contracciones en la regulacin del pasaje de la digesta ruminal, an no est bien determinada y requiere de ms estudio. Propulsin y mezclaje. Cuando un bolo de material slido entra al rumen puede seguir dos caminos: si es lo suficiente denso para sumergirse en la regin del cardias, las partculas se detienen en el tabique cranial. Si flota, las partculas se mantienen cercanas al cardias, hasta la prxima contraccin reticular que las arrastra hacia el saco dorsal del rumen (Wyburn, 1980). La direccin que el bolo toma, depende de su densidad. Una vez que los alimentos ingeridos llegan al saco dorsal, las contracciones de los distintos sacos tienden a mover una parte de la digesta de forma circular, particularmente las porciones ms fluidas. Cada contraccin del rumen fuerza el paso de los fluidos hacia la parte superior del saco dorsal con lo que la ingesta se baa peridicamente con stos y an, las partculas presentes en el saco ciego dorsal, estaran en estrecho contacto con el fluido ruminal. El tiempo requerido para que la digesta complete un circuito depende de su consistencia y sta, a su vez, del tipo de racin. Ingestin y Rumiacin. El consumo de alimentos es un aspecto fundamental de la nutricin ya que este fija la entrada de nutrientes y por tanto determina la respuesta animal y su funcin (Van Soest, 1982). La naturaleza y la morfologa del forraje influyen en el tiempo que el animal emplea en aprehender y reducir el alimento para formar un bolo que pueda tragar. En los trpicos la calidad de los forrajes declina con la edad y por lo general, en perodos secos, escasea la comida por lo que el ganado se ve
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obligado a invertir mucho tiempo en la seleccin y la ingestin. Si los forrajes necesitan ser picados hoja por hoja, afectan la velocidad de consumo. Un aumento en el tiempo que se invierte en comer y rumiar necesariamente limita el tiempo necesario para realizar otras actividades (Van Soest, 1994). Rumiacin. El fenmeno de la rumia o nueva masticacin del contenido ruminal es uno de los aspectos ms caractersticos de los rumiantes. Esta accin asegura que el alimento que se ingiere est sometido a un perodo prolongado de remasticacin y rensalivacin, lo que es muy necesario para la digestin de la celulosa y otros componentes estructurales de las plantas. (Kolb, 1975). La rumia comprende tres procesos principales: el reflujo del contenido del retculo rumen hacia la boca, la rumia propiamente dicha y la deglucin del bolo rumiado. La deglucin del bolo se realiza de igual forma que cuando se ingiere el alimento; se acompaa de una breve pausa respiratoria. El tamao del bolo regurgitado es del orden de los 54-74 g en las ovejas (Ulyatt et al 1986) y de 750-824 g en las vacas (Kennedy, 1985). Un objetivo obvio de la rumiacin es reducir el tamao de las partculas del contenido ruminal. Los factores que determinan el inicio y el cese de la rumia no estn bien determinados pero est comprobado que la presencia de fibra larga en el rumen es esencial para el inicio de la actividad. Trabajos recientes sugirieron que las partculas largas de las leguminosas y las gramneas se reducen por la actividad de rumiacin en 13 %/hora en ovejas y 8 %/hora en vacas (Kennedy y Doyle, 1993 y Wilson y Kennedy, 1996). El tiempo disponible para la rumiacin es limitado, usualmente ocupa 10 a 12 horas diarias. El tamao de las partculas del rumen. Factores que influyen en su degradacin La ruptura fsica del alimento es importante tanto para la ingestin como para la digestin de los rumiantes, ya que las partculas deben tener un tamao lo suficientemente pequeo para salir del retculo rumen. Esta ruptura depende primeramente de la masticacin ingestiva y de la rumiacin, ya que ambos procesos producen efectos similares (Pond et al, 1987). La actividad microbiana contribuye poco a la rotura directa y su efecto es ms bien el de incrementar la fragilidad y por tanto, mejora la eficiencia de rotura durante la rumiacin (Mc Leod y Minson, 1988). La magnitud de la reduccin de las partculas es variable y depende de varios factores, fundamentalmente de las caractersticas anatomo-morfolgicas de los forrajes, de su composicin qumica (Moseley y Jones, 1984 y Wilson, 1997) y de la especie animal. Las partculas presentes en la digesta duodenal y fecal tienen un tamao menor que 1.2 mm, lo que hizo pensar que stas no abandonaban el rumen hasta alcanzar un tamao crtico ptimo para el pasaje (Poppi et al, 1980). Aunque parece existir alguna variacin entre especies, relacionado posiblemente con el patrn de masticacin, corresponde a las ovejas las partculas menores (1.0 mm) y a las vacas las mayores (2.8 mm). El tamao crtico de las partculas tiene un valor prcticamente estable que no se afecta mucho por el nivel de ingestin, el tipo de alimento o su calidad. La tabla 1 muestra que el 99.6 % de las partculas que llegan al abomaso, tienen un tamao igual o menor que 1.0 mm
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Tabla 1. Distribucin de partculas segn su tamao en el estmago de ovejas alimentadas con heno de alfalfa troceado (% MS).
4.0 16.5a 10.7b 0c a b 2.0 8.6 8.6 0.6b a a 1.0 14.6 15.3 3.4b a a 0.5 17.4 18.6 15.7b a a 0.25 11.9 12.8 26.0b <0.25 31.0a 34.0a 54.4b Entre los rganos las medias con superndices diferentes, difieren (P<0.001).

Tamao del tamiz, mm

Rumen

Retculo

Omaso

Abomaso
0c 0.6b 4.0b 19.4a 22.7c 53.3b

Gravedad especfica de las partculas Entre los factores que modifican la dinmica de las partculas en el RR, el ms importante, parece ser la flotacin o gravedad especfica funcional (GEF). La GEF se define como la densidad efectiva, considerando las contribuciones de los componentes slidos, lquidos y gaseosos de las partculas (Sutherland, 1988). La GEF aumenta debido a la reduccin de las partculas y a la absorcin de agua y cationes. Estudios realizados en la dcada del 80 dejaron establecido que las partculas con una densidad entre 1.17 y 1.42 g/ml dejan el rumen mucho ms rpido que el resto. Los forrajes que se consumen frescos tienen generalmente una GEF de alrededor de 0.8 g/ml debido a sus espacios internos y al aire empacado dentro. La rumiacin rompe la cubierta protectora de cutina de los alimentos fibrosos lo que facilita la penetracin de agua y microorganismos hacia el interior. Las partculas que se hidratan con mayor rapidez, son ms accesibles al ataque microbiano y su GEF aumenta ms rpido que las que demoran mayor tiempo en hidratarse (Nocek y Kohn, 1987). Generalmente, las leguminosas aumentan su GEF ms rpido que las gramneas por poseer menor contenido de pared celular y mucho ms protenas; adems las diferencias en el tamao y la forma en que se rompen las partculas contribuyen a explicar diferencias en la GEF (Wilson, 1997). Relacin entre la GEF y el tamao de las partculas. Estudios con partculas plsticas demostraron que la GEF y el tamao tienen una marcada influencia en el tiempo de retencin de las partculas en el rumen. Kaske y Engelgardth (1990) establecieron que las partculas de 1.0 mm de largo con una densidad de 1.44 g/ml dejan el rumen 2.6 veces ms rpido que las de 0.92 y 1.03 g/ml (figura 6). Resultados similares se obtuvieron en vacas y en ovejas.

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100 80

Partc. largas (10 mm) Partc. cortas (1 mm)

TRM, horas

60 40 20 0

0.92

1.03 D e n s i d a d, g / m l

1.22

1.44

Figura 6. Tiempo de retencin media (TRM) de partculas plsticas en el rumen de ovejas alimentadas con heno ad libitum (Kaske y Engelgardt, 1990).

Las partculas difieren en tamao y densidad segn el sitio de muestreo en el rumen. Las del saco dorsal resultan ms largas y ligeras que las del saco ventral. El pasaje de las partculas slidas Aunque hay pruebas de que las partculas deben ser lo suficientemente pequeas para el pasaje, el mecanismo exacto que determina cuales partculas salen del rumen no est bien dilucidado. Luginbuhl et al (1990) encontraron que dos horas despus de la alimentacin 47.5 % de las partculas del superestrato ruminal eran lo suficientemente pequeas para pasar, a travs de un tamiz de 1.0 mm y datos de la literatura confirman que aunque el tamao influye, otros factores deben incidir en que muchas partculas se mantengan en el rumen, an cuando su tamao ya es ptimo para el pasaje. La velocidad de rotura de las partculas largas no parece ser el factor limitante de la salida de la digesta slida del rumen. Ms bien, es la velocidad de flujo de salida de las ms pequeas la que parece tener mayor influencia Entre el omaso, el abomaso y el recto las partculas se reducen slo ligeramente independientemente de la especie animal (chivas, ovejas, vacas), lo que reafirma que los factores que determinan el pasaje actan en el rumen y no fuera de ste. La complejidad del pasaje ruminal se recoge en la figura 8.

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Planta entera
Reduccin mecnica del tamao de las partculas Masticacin Partculas de 1-2 mm o menos Fermentacin ruminal y digestin Rumiacin de partculas > de 1.2 mm Reguladores del pasaje 1. Tamao de las partculas 2. Densidad de las partculas ? 3. Contenido celular ? 4. Velocidad de reduccin de las partculas 5. pH y presin osmtica ? 6. Distensin del rumen y el abomaso ? 7. Resistencia y frecuencia de las contracciones ruminales ? 8. Consistencia de la ingesta

Excrecin fecal Partculas < 1.2 mm

? Aspectos que no estn bien entendidos

- Ideas seguidas de ? no estn bien entendidas como las otras.

Figura 8. Esquema del pasaje en partculas de forraje en el rumiante (Martz y Belyea, 1986)

Digestin ruminal La digestin microbiana que tiene lugar en el rumen es la piedra angular de la fisiologa digestiva del rumiante. En el rumen se modifica el alimento consumido, se degradan la celulosa y los carbohidratos solubles, se altera la secuencia de aminocidos de las protenas y se sintetizan algunas vitaminas del Complejo B. El hecho ms sobresaliente de la digestin en los rumiantes es su capacidad para utilizar todas las formas de celulosa. La celulolisis falta en el reino animal, ningn mamfero segrega celulasa, que es la enzima que degrada la celulosa, pero las bacterias y los hongos celulolticos, que conviven simbiticamente en el rumen, producen un complejo enzimtico -1-4 glucosidasas capaz la de solubilizar entre 70 y 90 % de la celulosa. Los productos universales de la fermentacin microbiana ruminal son los cidos grasos voltiles (AGV), principalmente los cidos actico, propinico y butrico, que constituyen ms del 90 % de los cidos que se producen en el rumen, el dixido de carbono (CO2) y el metano (CH4). En estos procesos se pierde energa en forma de calor y de metano. Digestin microbiana de los hidratos de carbono. A partir de los hidratos de carbono se obtienen los compuestos de mayor importancia energtica para los rumiantes, los AGV. Estas sustancias se absorben desde el RR y producen entre el 50-80 % de la energa metabolizable (EM) que ingiere el animal. Los carbohidratos a su vez, son los precursores ms importantes en la sntesis de grasa y azcar (lactosa) para la leche.
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Digestin de los compuestos nitrogenados. El estudio de las particularidades del rumiante en la digestin de los compuestos nitrogenados rene aspectos de gran inters econmico. La produccin de protena microbiana, a partir de los compuestos qumicos no proteicos, junto a la digestin de la fibra, ofrecen una forma de producir alimentos para el hombre a partir del material no utilizable directamente para el consumo humano. De este modo el rumiante se sita en el papel central del uso efectivo de los recursos nutritivos en el mundo (Ruiz y Ayala, 1987). Los rumiantes pueden utilizar el nitrgeno no proteico (NNP) porque los microorganismos que habitan el rumen tienen la habilidad especial de sintetizar aminocidos y de formar protena a partir nitrgeno no-proteico. Por otra parte, los compuestos nitrogenados de origen dietario que llegan al rumen incluyen varios tipos de protena que pueden diferir marcadamente en el contenido de aminocidos y solubilidad. Al rumen tambin llega N de origen endgeno que incluye fundamentalmente las descamaciones de los tejidos epiteliales, la urea que aporta la saliva y la que difunde, a travs de la pared ruminal. Los rumiantes poseen adems, un mecanismo para ahorrar nitrgeno. Cuando el contenido de nitrgeno en la dieta es bajo, la urea, un producto final del metabolismo de las protenas en el cuerpo, puede ser reciclada al rumen en grandes cantidades y los microorganismos la utilizan para sintetizar protena. En los no-rumiantes, la urea siempre se pierde en la orina.

Digestin ruminal de los lpidos. Los lpidos de los pastos son la fuente principal de grasa para los rumiantes. Usualmente la dieta consumida por los rumiantes contiene slo 4 - 6% de lpidos, en base seca. Sin embargo, ellos son parte importante de la racin de una vaca lechera porque contribuyen directamente a casi 50% de la grasa en la leche y son la fuente ms concentrada de energa en los alimentos (Wattiaux y Grummer, 2000). El metabolismo de los lpidos se diferencia enormemente en los monogstricos y los poligstricos. Esta diferencia radica, principalmente, en que en los rumiantes la flora microbiana ruminal modifica las sustancias lipdicas, dando lugar a que las grasas que se depositan en los tejidos tengan una composicin relativamente constante y diferente de la que aportan los alimentos, mientras que en los monogstricos las grasas de reservas son muy similares a las alimentarias. La adicin de grasa a la dieta de los rumiantes influye en el comportamiento de la fermentacin ruminal y en la secrecin de la grasa lctea. Un exceso en la racin resulta negativo en la digestibilidad de la fibra. Actualmente las grasas se saponifican para formar jabones de calcio u otros, lo que permite su mayor utilizacin. Pasaje intestinal. El flujo y la composicin de la digesta que pasa, a travs del duodeno, tiene un inters considerable, particularmente, con relacin a los estudios de pasaje y a los problemas de la cuantificacin de la protena microbiana y al escape de los residuos no fermentados que logran salir del rumen, sobre todo
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en los rumiantes que consumen forraje y subproductos tropicales. Por lo general, estos alimentos son bajos en protena y dependen de la sntesis microbiana. Por otra parte, los carbohidratos se fermentan casi totalmente en el rumen y los requerimientos de glucosa dependen de la glucognesis (formacin de glucosa en el hgado), fundamentalmente a partir de propionato. En estas condiciones slo se cubren los requerimientos de mantenimiento (Preston y Leng, 1987). En estos casos la suplementacin con protena y almidn que sobrepasen el rumen y lleguen al intestino, mejora el comportamiento productivo de los animales. El uso de las cnulas duodenales y de sustancias marcadoras internas y externas ha permitido conocer y cuantificar la digesta que llega al intestino y lo que se absorbe desde ste. El consumo y la frecuencia de la alimentacin, as como el tipo de alimento tienen un efecto importante en las tasas de flujo hacia el duodeno. En ovejas estas oscilan entre 3-9 Kg./da con dietas de heno y entre 4-10 Kg./da con concentrados. Las ms altas velocidades de flujo duodenal ocurren en animales que consumen forraje fresco y las ms bajas con dietas de concentrados. El orden en que tienden a disminuir el flujo es el siguiente: forraje fresco > forraje seco > heno corto > heno molido y dietas mezcladas. La preez y la adaptacin se asocian con aumentos del flujo y parece que es ms alto en vacas que en ovejas (Faichney, 1993). En general, se puede plantear que el contenido duodenal de los poligstricos tiene una composicin muy estable. Al intestino entran alrededor de 250 litros de digesta y de ellos 220 litros se absorben para nutrir al animal hospedero. Este representa 3-4 veces el alimento junto con el agua ingerida. En el intestino delgado se absorben 62-75 % de la digesta contra 17-25 % en el intestino grueso. La cantidad de fsforo es el doble que el que se ingiere, la del sodio 7 veces y la del cloruro 10 veces, debido fundamentalmente, al aporte endgeno de la secrecin abomasal y la saliva. Conclusiones Son mucho los procesos y las interacciones que intervienen en la fisiologa digestiva del rumiante y resulta imposible abarcarlos todos en una conferencia con la profundidad que se requiere. En este trabajo se recogen aquellos aspectos relevantes que diferencian esta especie de los monogstricos y cuyo conocimiento puede contribuir a mejorar la eficiencia de los alimentos disponibles en el trpico y evitar las alteraciones que se producen por las condiciones de manejo, lo cual implica una ganadera ms ecolgica y sostenible. Bibliografa a consultar. Akin, D.E.; Gordon, L.R y Hogan, J.P., 1983. Rumen bacterial and fungal degradation of Digitaria petzii grown with and without sulfur. Appl. Env. Microbial 46: 701 Asanuma, N.; Iwamoto, M y Hino, T. 1999. Effect of the addition of fumarate on methane production. J. Dairy Sci. 82: 780 Asocras, 2000. Digestive Anatomy in Ruminants. Internet. Beever, D.E. 1993. Rumen Function. En Quantitative Aspects of Ruminant Digestion and Metabolism. Eds. Forbes, J.M. y France, J. CAB International, UK.
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II Anatoma comparada y digestiva de los animales monogstricos: aves, cerdos y conejos DMV Luis E. Digo Cutis Contenido
Introduccin.............................................................................................................................................................................22 I. Clasificacin de los animales domsticos segn hbitos alimentarios ...........................................................................22 II - Caractersticas generales del TGI y su importancia..........................................................................................................22 III- Aparato digestivo del cerdo, comparacin con las aves y el conejo.................................................................................23 Sistema digestivo. ...............................................................................................................................................................23 El hgado. ............................................................................................................................................................................29 El pncreas. ........................................................................................................................................................................29 Bibliografa a consultar............................................................................................................................................................31

Introduccin El estudio de la fisiologa de los rganos del tracto gastrointestinal (TGI) de los animales tiene una gran importancia si se toma en consideracin que este interviene en la degradacin de los alimentos consumidos por el animal. Asimismo la utilizacin que de ello pudiera realizar el organismo depende de la eficiencia de los procesos digestivos (digestin, absorcin y excrecin). En los animales superiores el sistema digestivo presenta un esquema estructural semejante (boca, faringe, esfago, estmago e intestinos). Sin embargo los hbitos alimentarios han modificado algunas de estas estructuras adaptndolas al tipo de alimento preferido y como respuestas a las condiciones impuestas por la naturaleza. Los mamferos conjuntamente con las aves son los vertebrados que ms han evolucionado. Ambos ofrecen importantes particularidades en el estudio de su fisiologa digestiva. En la presente conferencia se desarrollar un breve anlisis antomo-fisiolgico de las analogas y diferencias entre las aves cerdos y conejos. I. Clasificacin de los animales domsticos segn hbitos alimentarios Herbvoros y No Herbvoros

Rumiantes y No rumiantes

Carnvoros Omnvoros Granvoros

Vaca Carnero

Conejo Caballo

II - Caractersticas generales del TGI y su importancia.

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El sistema o aparato digestivo est constituido por rganos a los que concierne directamente la recepcin, digestin y absorcin de alimentos y la expulsin por el recto del material no utilizado. Este conjunto de rganos se divide en dos grupos principales: el conducto alimentario y los rganos accesorios. El conducto alimentario se prolonga desde la boca hasta el ano. La longitud y tamao de los rganos digestivos vara con la edad, especie, tamao del animal as como con la cantidad y tipo de alimento suministrado. El conducto se halla revestido interiormente por una membrana mucosa y cubierta externamente por una capa muscular lisa. La membrana mucosa que reviste el tracto digestivo forma pliegues temporales o permanentes y rugosidades. Esta permanece humedecida por el mucos que se deriva de las glndulas o clulas caliciformes del epitelio. Esta membrana tiene una funcin secretora y protectora. La membrana mucosa tiene por fuera una tnica muscular representada por una musculatura lisa y en la vecindad de los orificios una musculatura estriada. La porcin abdominal del TGI esta cubierta en gran parte por una membrana serosa el peritoneo visceral. La mezcla de los alimentos con los jugos digestivos se obtiene por medio de movimientos u ondas peristlticas. El transporte del contenido intestinal se realiza en direccin caudal y a su paso por el intestino se produce la absorcin de la mayora de los nutrientes La microflora presente en el TGI de los animales se caracteriza por su extensa actividad y desempea un papel importante en la digestin. III- Aparato digestivo del cerdo, comparacin con las aves y el conejo. Sistema digestivo. En el aparato digestivo del cerdo se destacan diferentes rganos cuyas caractersticas y funciones se describen literalmente comparadas con las aves y los conejos. En las tres especies la constitucin de su aparato digestivo comienza a partir de la boca. El aparato digestivo del cerdo concuerda perfectamente con el de un animal omnvoro con una denticin completa. Esto permite una verdadera masticacin de los alimentos que entran al estmago completamente triturado por lo que el TGI es normal. En las aves que nos ocupan que son en lo fundamental granvoras su pico ejerce slo una funcin recolectora, la que al tener un estmago glandular pequeo justifica la presencia del buche. En el caso particular de los conejos (Fig. 1) vamos a encontrar que presentan un desarrollo de los incisivos, los que crecen constantemente, de ah la necesidad de roer para provocar un desgaste continuo.

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Figura 1. Esquema del tracto digestivo de los conejos.

La saliva en los mamferos tanto en el cerdo como en el conejo provienen de la secrecin de las glndulas submaxilares, sublinguales y partidas que se hallan en la mucosa bucal. La saliva de los mamferos contiene enzimas digestivas, la ms importante es la amilasa salival que realiza la hidrlisis parcial de los almidones. El cerdo contiene una saliva que contiene suficiente amilasa la que desempea un papel importante en la digestin. Contrariamente en el ave como el alimento permanece poco tiempo en la cavidad del pico, las glndulas salivares suministran saliva como secrecin mucosa para lubricar los alimentos ingeridos y por tanto el no haber una manifiesta actividad enzimtica no tienen lugar todava procesos digestivos. La faringe se comunica con el esfago, que es el rgano que se conecta con el estmago. En las aves se detecta un ensanchamiento a la entrada de la cavidad torxica llamado buche. Se plantea que el buche puede segregar enzimas y existe la duda si esas enzimas provienen de los mismos alimentos de la regurgitacin del contenido intestinal, molleja, proventrculo o de las bacterias existentes all. En el conejo adulto el tubo digestivo tiene una longitud total de 4.5-5m con un esfago corto. El estmago es simple (Fig. 2) y presenta una diferenciacin anatmica y fisiolgica con las aves. En el cerdo es monocavitario, voluminoso, su capacidad flucta entre 5 y 8 litros aproximadamente (Tabla 1). Esta situado en posicin transversal con la curvatura mayor en posicin ventral, posee una disposicin especial por dentro y tiene una bolsa ciega cnica y aplanada. La extremidad pilrica se comunica con el intestino mediante el esfnter pilrico. La membrana mucosa se divide en 4 regiones: esofgica, cardaca, glandular fndica y pilrica.

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Regin de las glndulas cardiaca

Regin esofgica

Regin de las glndulas fndica

Regin de las glndulas pilrica

Figura 2. Estmago del cerdo

Tabla 1. Volmenes del tracto digestivo de varias especies de animales (% del PV). Especies
Rumiantes Vaca Cabras No rumiantes Conejo Caballo Cerdo

Contenido total
13-18 12-19 7-19 16.4 10.4

Estmago
10.6-16 9.8-14.9 2-7 1.3 3.6

Intestino delgado
0.9-2.3 1.0-1.6 0.6-1.8 2.6 1.9

Ciego
0.8 0.9-1.6 2.5-7.8 2.4 1.6

Colon recto
0.8-1.5 0.5-0.7 0.7-1.3 8.8 3.4

La regin esofgica es blanda y glandular, la cardaca se caracteriza por secretar un mucus no enzimtico, cuya funcin es proteger fsicamente y lubricar la mucosa gstrica. La zona fndica tiene tres tipos de clulas, paritales u oxnticas que segregan cido clorhdrico, clulas principales que segregan pepsingeno y clulas del cuello que segregan mucus. La regin pilrica se caracteriza por segregar pepsingeno y mucina que acta como antisptico. El estmago del cerdo se presenta como un reservorio de alimentos, los retiene mientras estos sufren cambios mecnicos y qumicos, adems de controlar la salida de alimentos digeridos hacia el intestino (duodeno) El contacto de los alimentos con la mucosa gstrica sirve como estmulo directo de las funciones iniciadas por el vago y la hormona gastrina especialmente para la produccin del jugo gstrico. En el caso de los rumiantes alimentados de forma tradicional entre s 36 y 56 das de edad desarrollan los llamados preestmagos que son tres: omaso, retculo y rumen. Adems tambin se encuentra el abomaso o verdadero estmago. El rumen (Fig. 3) constituye el rgano fundamental desde el punto de vista digestivo y anatmico, pudiendo alcanzar en el rumiante alrededor del 80 % del volumen del estmago en tanto que el abomaso no pasa del 5-7 %. En el rumiante tienen lugar procesos digestivos y fermentativos entre los que se puede mencionar la celulolisis ruminal que permite la solubilizacin del 70 al 90 % de todas las formas de celulosas.

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Figura 3. Esquema del rumen de la vaca.

Las aves poseen un estmago de dos posiciones fcilmente distinguibles: el estmago glandular o proventrculo y el estmago muscular o molleja. La mucosa del proventrculo contiene glndulas bien desarrolladas que producen jugo gstrico y cido clorhdrico, que a diferencia con los mamferos estas se producen por una misma clula, es por ello que el proventrculo se considera el verdadero estmago de las aves. La molleja tiene como funcin fundamental triturar y moler la ingesta proveniente del buche (realiza la funcin de la dentadura ausente en esta especie) ayudados por las piedrecitas grit. El estmago del conejo tiene un peso aproximado de 20 g un contenido entre 90 -100g y un pH 1.52.0. El contenido de estmago se inyecta progresivamente en el intestino delgado mediante pequeas descargas merced a las poderosas contracciones del estmago. Respecto a los intestinos el conducto intestinal del cerdo mide aproximadamente quince veces la longitud de su cuerpo y posee gran cantidad de grasa. Se divide en intestino delgado y grueso los que constituyen la parte digestiva donde terminan la transformacin de los alimentos. El intestino delgado mide de 15 a 20 m de largo los primeros 60 cm constituyen el duodeno el cual se contina con el yeyuno y el ilen sin que exista una lnea de demarcacin entre estos dos. En toda la superficie del intestino la mucosa posee pliegues y presenta un aspecto a terciopelado debido a las prolongaciones digestiformes llamadas vellosidades. Entre las vellosidades se hallan numerosas glndulas intestinales llamadas de Lieverkuhn que conjuntamente con las glndulas de Brunner segregan el jugo entrico. Los conductos biliares y pancreticos se abren en el duodeno a una distancia del ploro de 5 y 10 cm respectivamente. En las aves el intestino delgado tambin consta de duodeno yeyuno e ilen pero el duodeno sale del estmago muscular en su parte anterior derecha y se dirige hacia la parte posterior y luego hacia delante formando el asa duodenal caracterstico de a gallina (Fig.4).
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Esfag Buche Proventrcu Molle Hga Pncre

Ciegos Intestino delgado

Cloa
Figura 4. Esquema del tracto gastrointestinal de la gallina domstica.

El duodeno en las aves est considerado como el sitio de accin principal de la digestin gstrica. Esto se hace posible debido a las caractersticas anatmicas que posibilitan que se mantenga bajo el pH de los jugos gstricos. En el duodeno se encuentran vlvulas conniventes, y las vellosidades estn muy desarrolladas y entre ellas se encuentran criptas de Lieberkuhn manifiestas. No se encuentran glndulas de Brunner y adems el tejido linfoide no es abundante; al igual que el cerdo, no hay demarcacin entre el yeyuno y el ilen. El yeyuno comienza en una de las ramas en U del duodeno y se aparta de la otra. El ilen est estirado y se localiza en el centro de la cavidad abdominal donde desembocan los ciegos. La motilidad del intestino delgado es variable y existen contracciones peristlticas, cambios tnicos y movimientos pendulares de las vellosidades. La importancia de estos diferentes tipos de movimientos no es la misma en todas las especies. En el cerdo son ms caractersticas los movimientos pendulares que mezclan los alimentos con los jugos digestivos y los pone en contacto con la mucosa para su absorcin y contribuye al movimiento del contenido intestinal a travs del tracto. En el conejo el ID mide aproximadamente 3 m de longitud por un dimetro aproximado de 0.8-1cm. El contenido del mismo es lquido, sobre todo en la primera parte. Adems es normal encontrar porciones de una decena de centmetros, vacos de todo contenido.

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El intestino grueso del cerdo tiene una longitud de 4 a 5m. Es ms grueso y ms ancho que el delgado. Est constituido por el ciego, colon y el recto terminando en el esfnter anal. Las secreciones de las glndulas mucosas no producen enzimas y las que se hallan a est nivel provienen del intestino delgado. La secrecin del intestino grueso es clara, viscosa con altos contenidos de mucus y de reaccin alcalina. No se encuentran vellosidades en el intestino grueso del cerdo. La funcin del intestino grueso es continuar la digestin del material que escapa a la absorcin en el intestino delgado. La presencia de bacterias en aquellos tramos del TGI donde el vaciado es incompleto (ilen, ciego y colon) brinda condiciones idneas para el desarrollo y multiplicacin de estas y favorecen su accin qumica en el contenido intestinal completndose as la digestin en este nivel. Otra funcin fundamental del IG es devolver a la sangre el agua vertida por medio de las secreciones de las glndulas digestivas, as como los electrolitos, vitaminas y aminocidos. En las aves el IG consta de dos ciegos y el colon. No existe una lnea de demarcacin entre el recto y el colon como en los mamferos. Es un rgano corto y su contenido digestivo es vertido a la cloaca. Con relacin al ciego en los cerdos es un saco cilndrico de 20 a 30 cm de largo localizado a la izquierda del plano medio del ijar. Su extremidad dorsal se comunica con el colon. El ilen se une con el ciego oblicuamente, as un pliegue muscular que pasa de uno a otro lado del orificio ileocecal acta como vlvula. La funcin de esta vlvula es no permitir el retroceso del material intestinal. Normalmente permanece cerrada, pero cuando llega una onda peristltica se abre brevemente dejando pasas pequeas cantidades de quimo al ciego. Los ciegos en las aves son dos sacos e unos 7 cm de largo cuya superficie se encuentra cubierto por pequeas vellosidades similares a las del colon, aunque hay autores que opinan que no hay vellosidades en los ciegos de las aves. En los ciegos contina la degradacin de los principios nutritivos. La flora presente en el ciego de los cerdos acta en los almidones que han escapado a la digestin, teniendo accin limitada con materiales fibrosos, como producto de la fermentacin se producen cidos grasos que son absorbidos por las paredes del ciego, sin embargo estos rganos no ejercen papel importante durante los procesos digestivos de las aves, sino que cumplen fines de absorcin (agua) y de depsito bacteriano principalmente. Se han encontrado sntesis de vitaminas del complejo B. La siguientes porciones del IG, el colon se localiza en el cerdo a la derecha del plano medio detrs del estmago. Esta dispuesto en su mayor parte en 3 asa espirales dobles sus capas musculares presentan dos cintas longitudinales y dos series de saculaciones las que desaparecen gradualmente en la porcin centrfuga. Los ndulos son numerosos y desaparecen en forma de prominencias redondas. El recto en los cerdos est ordinariamente circundado por gran cantidad de grasa. Ella constituye la ltima porcin del intestino grueso y se comunica con el exterior mediante el esfnter anal. En cambio el segmento terminal del intestino grueso de las aves se caracteriza por terminar en una ampolla llamada cloaca que es comn para el sistema digestivo, urinario y reproductor: Coprodeum donde se vaca el recto; Urodeum donde se abren los urteres y Proctodeum porcin final.
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El ID del conejo desemboca en la base del ciego. Este segundo depsito mide aproximadamente 4050cm de longitud por un dimetro medio de 3-4 cm. Contiene 100-120 g de una pasta homognea que tiene un contenido en materia seca del 22 %. En su extremidad, el apndice cecal (10-12 cm) tiene un dimetro mas delgado. Su pared est constituido por un tejido linfoide. Muy cerca de su unin con el ID, es decir de la entrada de ciego, se encuentra el inicio del colon, la salida del ciego. El colon mide cerca de 1.5 m plisado y ondulado cerca de 50cm colon proximal y liso en su parte terminal colon distal. Hasta aqu el funcionamiento de tubo digestivo del conejo no difiere de los dems monogstricos. En cambio su originalidad consiste en el funcionamiento dual del colon proximal. El cual es el encargado de elaborar dos tipos de cagarrutas las duras y las blandas (cecotrfias) las que consume directamente del ano. Respecto a los rganos accesorios del tracto digestivo como se sealo antes realmente son dos Hgado y Pncreas El hgado. Es relativamente voluminoso siendo su peso medio de 1.5 a 2 kg en el adulto la porcin central es gruesa, pero su circunferencia es delgada. Est dividida por tres cisuras nterlobulares profundas en cuatro lbulos principales: lateral derecho, central derecho, central izquierdo y lateral izquierdo; este ltimo es ms voluminoso. El hgado en la gallina pesa de 30 a 50gr y su estructura no ofrece diferencias importantes con respecto a la de los mamferos, pero en el caso de las aves resulta ms evidente el carcter lobuloso de la glndula. Este rgano no produce enzimas es el encargado de elaborar la bilis y numerosas sustancias orgnicas necesarias para la digestin. El pncreas. En el cerdo se extiende a travs de la pared dorsal de la cavidad abdominal por detrs del estmago. Es triangular la extremidad derecha se fija a la primera curvatura del duodeno y aqu su conducto excretor pasa al intestino mientras que la extremidad izquierda se relaciona con el estmago. En las aves el pncreas es un rgano alargado que se halla entre las dos ramas del asa duodenal cubierta por la serosa y fijada al duodeno por dos ligamentos pancreticos duodenales. A diferencia del hgado produce una gran cantidad importante de enzimas digestivas que permiten la degradacin de las protenas (tripsina y quimotripsina), del almidn (amilasa) y de las grasas (lipasas) (Tabla 2). Tanto el hgado como el pncreas son rganos que cumplen misiones importantes para el desarrollo de los procesos vitales sobretodo el hgado considerado como el laboratorio central en el organismo por su participacin en el metabolismo de casi todos los nutrientes.

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Tabla 2. Principales enzimas presentes en el TGI de los animales domsticos.

Boca Estmago Intestino delgado Amilasa salivar cerdos Pepsina, CLH y jugo gstrico Tripsina, Quimotripsina Carboxipeptidasa Lipasa y Amilasa Renina o fermento lab Carboxiamino Endopeptidasa Sacarasa,maltasa, lactasa y enterosinasa Lipasa gstrica(lactantes) lecitinasas, Fosfatasas, prolinasas,nucleosida-sas

Tabla 3. Enzimas de mayor importancia en la digestin de los carbohidratos en los monogstricos (lvarez, 1984). rgano de secrecin
Boca (saliva) Estmago (jugo gstrico)

Enzima
Alfa-amilasa No hay

Sustrato
Almidn Glucgeno secrecin Maltosa Sacarosa

Especificidad
Enlaces 1,4 alfaglucosdico de carbohidrasas Enlace 1,4 alfaglucosdico Enlace 1,2 alfaglucosdico Enlace 1,4 betaglucosdico Enlace 1,6 alfaglucosdico Enlace 1,4 alfaglucosdico

Productos finales
Oligosacridos (6-7 molc de glucosa, maltosa y alfa-dextrina) Glucosa Glucosa Fructosa Glucosa Galactosa Glucosa

Intestino delgado (jugo entrico)

Maltasa Alfaglucosidasa Sacarasa

Pncreas (jugo pancretico)

Lactosa Lactasa Dextrina Betagalactosidasa Alfa-dextrinasa Amilasa Almidn pancretica Glucgeno

Maltosa, maltotriosa, glucosa dextrina

Tabla 4. Localizacin y accin de las enzimas proteolticas de mayor importancia. rgano y secrecin
Estmago Quimosina Tripsina Pncreas (jugo Pancretico) Quimotripsina Carboxipeptidasa Aminopeptidasa Dipeptidasa Casena Protenas y polipptidos Protenas y polipptidos Pptidos y protenas Pptidos Dipptidos

Enzimas
Pepsina

Sustrato
Protenas

Especificidad
-Fen/x-Tir/x-Fen/x-Lis/x-Arg/x-Fen/x-Tir/x-COO-terminal -NH3+ terminaldeterminados pptidos

Productos del desdoblamiento

Mezcla de polipptidos p-casena Pptidos Pptidos Aminocidos y pptidos Aminocidos y pptidos Aminocidos

Intestino delgado (jugo entrico o mucosa intestinal)

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Bibliografa a consultar. lvarez, R. J. 1984. Digestin de carbohidratos en aves y cerdos. Bioqumica nutricional. Tomo I. p. 179-187. lvarez, R. J. 1994. Alimentacin no convencional de animales monogstricos. Valor nutricional y fisiologa digestiva de las aves. Memorias, II Encuentro regional de nutricin y alimentacin de especies monogstricas. P. 8-10. lvarez, R. J. Savn, L. & lvarez, R. J. 1984. Bases fisiolgicas y bioqumicas de la absorcin intestinal. Bioqumica nutricional. Tomo I. p. 271-296. lvarez, R. J. y Boucourt, R. 1984. Digestin de protenas en aves y cerdos. Bioqumica nutricional. Tomo I. p. 251-259. lvarez, R. J. y Brito, L. 1984. Bioqumica nutricional. Tomo I. p. 31-48. Cheeke, P.1994, Nutrition and Nutritional Diseases. The Biology of the Laboratory Rabbit, 14:321 Davenport. H. W. 1971. Physiology of the digestive tract. Third edition. p. 197-198. De Blas , Beorlegui, P., Garca, P & Reballa . 1993. Tamao de partcula de los forrajes tropicales en la alimentacin de vacas lecheras y conejos. Bases fisiolgicas y recomendaciones .IX Curso de especializacin tecnologas y nutricin. Forsythe, S. J; & Parker, D. S. 1985. Nitrogen metabolism by the microbial flora of the rabbit. J. Appl. Bacterial. 58:363. Fraga, L. M. 1994. Utilizacin de la Leucaena en la alimentacin de las aves. Memorias, II Encuentro regional de nutricin y alimentacin de especies monogstricas. p. 155-157. Geerken, C. M. y lvarez, R. J. 1984. Metabolismo de la glucosa. Bioqumica Nutricional. Tomo II. p. 1-18. Gidenne, T., Pinhero., Falcao, L y Cunha, C. 2000. A comprehensive approach of the rabbit digestion: consequences of a reduction in dietary fibre supply. Livestock Production Science. 64: 225 Gonzlez, C. T. 1974. Introduccin a la nutricin de las aves. p. 12-45. Ibez, R. S. 1974. Elementos de anatomofisiologa aviar. La Habana: Editorial Pueblo y Educacin. Kolb, E. 1975. Fisiologa Veterinaria. Editorial Acribia. Espaa. p. 390-407. Krogdahl, A. 1985. Digestion and absorption of lipids in poultry. Symposium: digestion and absortion in poultry. American Institute of Nutrition. p. 675-684. Lebas, F. 1996. El conejo. Cra y patologia. Coleccin FAO: Produccin y sanidad animal 19:21 Marrero, A. I. 1998. Contribucin al estudio de la utilizacin de la fibra diettica en las gallinceas. Tesis de aspirante a la categora de Doctor en Ciencias. Instituto Superior de Ciencias Agropecuarias de La Habana "Fructuoso Rodrguez Prez". Facultad de Veterinaria. p. 2-4. Pedroso, D. M. 1984. Metabolismo de los lpidos. Bioqumica nutricional. Tomo II. p. 57-83. Savn, L. y lvarez, R. J. 1984. Bases fisiolgicas y bioqumicas de la absorcin intestinal. Bioqumica nutricional. Tomo I. p. 271-296. Sturkie, P. D. 1971. Fisiologa aviar. La Habana: Editorial ciencia y tcnica. Instituto cubano del libro. p. 233-248. Sisson, S. 1977. Anatoma de los Animales Domsticos. La Habana. Editorial pueblo y educacin. Instituto cubano del libro. p. 367-479.

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III Los microorganismos del rumen y su actividad Dra. Juana Galindo Contenido
Introduccin.............................................................................................................................................................................32 Caractersticas generales del ambiente ruminal .......................................................................................................................33 El rumen como sistema de fermentacin continua ..................................................................................................................33 Clases de microorganismos .................................................................................................................................................34

Caractersticas Generales de las bacterias del rumen ................................................................... 34 Grupos fisiolgicos de bacterias del rumen ................................................................................... 35 Caractersticas Generales de los protozoos del rumen .................................................................. 38 Caractersticas Generales de los hongos del rumen ...................................................................... 40
Relacin entre los microorganismos del rumen y el animal hospedero ...................................................................................41 Requerimientos nutricionales de los microorganismos del rumen...........................................................................................42 La dieta y su manipulacin. .................................................................................................................................................43 Cantidad y frecuencia en el suministro de alimentos...........................................................................................................45 Cambios diurnos y estacionales...........................................................................................................................................46 Procesamiento de la dieta ....................................................................................................................................................46 Competencia entre protozoos y bacterias ............................................................................................................................47 Especie animal .....................................................................................................................................................................47 Edad.....................................................................................................................................................................................48 Fermentacin microbiana de Nutrientes ..................................................................................................................................48 Fermentacin microbiana de nutrientes en diferentes fuentes .................................................................................................48 Fermentacin de fuentes energticas ...................................................................................................................................48 Fermentacin de compuestos nitrogenados .........................................................................................................................49 Fermentacin de lpidos.......................................................................................................................................................50 Adaptacin de bacterias a la dieta............................................................................................................................................51 Conclusiones............................................................................................................................................................................51

Introduccin Los rumiantes ocupan una posicin estratgica con respecto al hombre. En el proceso de digestin de los alimentos presentan particularidades en relacin con el resto de los mamferos, porque el rumen y el retculo, dos de los compartimentos pre estomacales, se encuentran habitados por millones de microorganismos, cuya accin enzimtica hace posible la utilizacin de molculas complejas. Estos animales, como vertebrados, no poseen enzimas capaces de atacar las uniones 1,4 y 1,6 glucosdicas presentes en la celulosa y otros componentes que constituyen los carbohidratos estructurales de las paredes celulares de los vegetales. El conocimiento de las poblaciones de microorganismos del rumen, sus interacciones fundamentales y los productos finales de la fermentacin constituyen la piedra angular de la fisiologa digestiva de los rumiantes y posibilita su manipulacin en funcin de obtener mejoras productivas. La presente conferencia tiene como objetivos presentar y discutir los aspectos bsicos de la microbiologa del rumen, las caractersticas de los microorganismos que habitan en ese reservorio, as como sus principales interacciones en el proceso fermentativo de nutrientes. Se prev dotar a los estudiantes del tema de las herramientas necesarias para actuar y manipular, con conocimientos, los procesos fermentativos que se producen en el rumen.

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Caractersticas generales del ambiente ruminal El rumen es una gran cmara de fermentacin, el que garantiza las condiciones necesarias para la existencia y reproduccin de los microorganismos que lo habitan. Es el reservorio mas voluminoso del aparato digestivo de los rumiantes y representa del 70-75% del contenido total del tubo digestivo y del 50-60% de su volumen. En condiciones normales de manejo y alimentacin, el contenido ruminal se mantiene relativamente constante y se caracteriza por Concentracin elevada de agua (85-90%) Temperatura constante (39-40 C) Potencial de oxidacin- reduccin que vara entre 250 a 400mV. Este bajo potencial REDOX garantiza las condiciones de anaerobiosis necesarias para el desarrollo de los microorganismos. PH generalmente comprendido entre 6-7, el que es regulado por varios factores, entre los que se pueden mencionar el aporte de bicarbonatos y fosfatos procedentes de la saliva, la cual posee un pH de 8.3. Presin osmtica relativamente constante (290-320 mOsmol). Aporte regular de nutrientes para los microorganismos y el animal hospedero, procedente de la ingestin de alimentos. Eliminacin continua de productos finales del metabolismo por absorcin directa a travs de las paredes del rumen o por pasaje hacia las partes bajas del tracto gastro intestinal y por la eructacin. Atmsfera relativamente constante de gases situados al nivel del saco dorsal. La fase gaseosa del rumen se compone principalmente de CO2, CH4, N2, H2S, e H2 Tabla 1. Composicin de la mezcla de gases del rumen, % Gas
CO2 CH4 N2 O2 H2 H2 S

% de la mezcla
65.53 26.76 7.00 0.56 0.18 0.01

El rumen como sistema de fermentacin continua El rumen es un sistema de fermentacin continua en el cual estn ingresando constantemente los alimentos frescos, solucin nutritiva y saliva los cuales se mezclan con la masa que se encuentra en proceso de fermentacin. Al mismo tiempo salen por el orificio retculo omasal lquidos, residuos de alimentos, productos finales de la fermentacin y clulas microbianas en cantidades similares a las que ingresan. El volumen en fermentacin se mantiene constante.

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Figura 1. Esquema del rumen

Clases de microorganismos El rumen normal de un rumiante adulto contiene una de las ms variadas, densas y activas poblaciones microbianas conocidas en la naturaleza, la cual es responsable de la degradacin de los principios nutritivos, al mismo tiempo que sintetizan protenas, vitaminas y otros metabolitos tiles en la nutricin del animal hospedero. La poblacin microbiana ruminal se encuentra integrada por bacterias, protozoos, hongos, bacterifagos y ocasionalmente, levaduras. Estos mantienen estrechas inter- relaciones entre s, tanto sinrgicas como mutualistas Caractersticas Generales de las bacterias del rumen 1. Forma y Representacin de las bacterias del rumen Las bacterias constituyen la mayor y ms diversa poblacin microbiana que est presente en el rumen. El nmero total de bacterias del contenido del rumen, bajo condiciones normales de alimentacin, es aproximadamente 109- 1010 ufc/ml. Se encuentran representadas por tipos morfolgicamente variados: cocos, bacilos, vibrios, espirilos, espiroquetas, rosetas ovales y tetracocos. La forma y tamao de las bacterias del rumen puede variar considerablemente en cultivos simples o en grupo de cepas, incluso si se observa en condiciones estrictamente uniformes, como en los trabajos con cultivos puros. Las bacterias del rumen son pleomrficas. Su tamao oscila entre 0.1- 1 de dimetro y 1-3 de largo Las bacterias consiguen un ecosistema constante y permiten a los rumiantes el consumo de nutrientes inasequibles para otros animales. Por otra parte, tambin se establecen relaciones mutualistas entre los microorganismos del ecosistema ruminal. La mayora de los microorganismos del rumen, especficamente las bacterias tienen relaciones de sinergismo, mutualismo o simbiosis.

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Tabla 2. Relaciones ecolgicas entre microorganismos del rumen

Nombre
Neutralismo Comensalismo Sinergismo Mutualismo o simbiosis Parasitismo Depredacin

Individuo 1
0 + + + + +

Individuo 2
0 0 + + -

Grupos fisiolgicos de bacterias del rumen En dependencia de los sustratos que las bacterias pueden utilizar o fermentar, estas se han agrupado en: celulolticas, hemicelulolticas, amilolticas, proteolticas, fermentadoras de azcares, bacterias que utilizan los cidos, metanognicas, lipolticas, pectinolticas, bacterias que sintetizan vitaminas, bacterias que utilizan aminocidos como fuente de energa, y otras. Bacterias celulolticas: Son las bacterias que producen el complejo de enzimas celulasas, que hidroliza la celulosa nativa u original. Tambin pueden utilizar la celobiosa, disacrido que contiene el enlace beta. Gran nmero de bacterias celulolticas son, tambin, hemicelulolticas. Entre ellas se pueden citar Fibrobacter succinogenes, Butyrivibrio fibrisolvens, Clostridium lochheadii, Ruminococcus albus y Ruminococcus Flavefaciens. Bacterias hemicelulolticas: Son capaces de hidrolizar la hemicelulosa. Este compuesto se diferencia de la celulosa por contener pentosas, adems de hexosas entre los azcares que forman la molcula. Existen bacterias hemicelulolticas que no son capaces de utilizar la celulosa. Butyrivibrio fibrisolvens, Bacteroides ruminicola y Lachnospira multiparus. Bacterias amilolticas: Son bacterias que hidrolizan y digieren el almidn. Algunas bacterias amilolticas son, tambin, celulolticas, como por ejemplo Clostridium lockheadii, algunas cepas de Fibrobacter succingenes, y Butyrivibrio fibrisolvens. Algunas especies no celulolticas que digieren el almidn incluyen Streptococcus bovis, Bacteroides ruminicola, Succinomonas amylolytica y Bacteroides amylophilus. Muchas cepas de Selenomonas ruminantium tambin digieren el almidn. La poblacin de bacterias amilolticas se incrementa considerablemente cuando la dieta es a base de almidones. Bacterias proteolticas: Son bacterias que hidrolizan las protenas y las utilizan como fuente primaria de energa. Bacteroides amylophilus, Clostridium sporogenes, Bacillus licheniformis Bacterias sacarolticas: Son las bacterias que utilizan los azcares, mono y disacridos. Muchas especies de bacterias celulolticas, hemicelulolticas, amilolticas, proteolticas, y otras, tambin son capaces de fermentar los azcares. Bacterias lipolticas: Son las bacterias capaces de utilizar e hidrolizar el glicerol en la molcula de grasa. Tambin se encuentran en ste grupo los organismos que hidrogenan los cidos grasos no saturados y los que metabolizan los cidos grasos de cadena larga a cuerpos cetnicos. Bacterias metanognicas: Son bacterias capaces de producir metano a partir de la reduccin del dixido de carbono o el cido frmico. Methanobacterium ruminantium.
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Bacterias que utilizan los cidos: A este grupo pertenecen las bacterias que utilizan diferentes cidos orgnicos, como: lctico, succnico, mlico, fumrico, oxlico. De forma general, estos cidos no se producen en grandes cantidades en el rumen, aunque su concentracin se encuentra relacionada, fundamentalmente con la dieta que reciben los animales. Bacterias que utilizan aminocidos como fuente de energa: Son bacterias que incapaces de utilizar otra fuente de energa diferente a los aminocidos. Generalmente se incluyen dentro de las bacterias proteolticas. En las siguientes tablas se muestran las caractersticas morfolgicas y fermentativas de algunas de las ms importantes especies de bacterias del rumen. Como se observa, una misma bacteria es capaz de fermentar diferentes sustratos, aspecto ste que hace muy complejo el rumen como sistema ecolgico.

Tabla 3. Caractersticas morfolgicas y fermentativas de algunas bacterias del rumen

Organismo
Fibrobacter succinogenes Butyrivibrio fibrisolvens Ruminococcus albus Clostridium lochheadii Ruminococcus Flavefaciens Clostridium polysaccharolyticum Bacteroides ruminicola Ruminobacter amylophilus Selenomonas ruminantium Succinomas amylolytica Streptococcus bovis Selenomonas lactilytica Megasphaera elsdenii Viellonella prvula Lachnospira multiparus Anaerovibrio lipolytica Eubacterium ruminantium Lactobacillus ruminis Lactobacillus vitulinus Methanobrevibacter ruminantium Methanomicrobium mobile Eubacterium oxidoreducens

Morfologa
Bacilo Bacilo curvado Coco Bacilo (espora) Coco Bacilo (espora) Bacilo Bacilo Bacilo curvado Bacilo ovalado Coco Bacilo curvado Coco Coco Bacilo curvado Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo

Productos de fermentacin
Succinato, acetato, formiato Acetato, formiato, lactato, butirato, H2 y CO2 Acetato, formiato, H2 y CO2 Acetato, formiato, butirato H2 y CO2 Acetato, succinato y H2 Acetato, formiato, butirato y H2 Formiato, acetato y succinato Formiato, acetato y succinato Acetato, propionato y lactato Acetato, propionato y succinato Lactato Acetato y succinato Acetato, propionato, butirato, valerato, coproato, H2 y CO2 Acetato, propionato y H2 Acetato, formiato, lactato, H2 y CO2 Acetato, propionato y succinato Formiato, butirato, lactosa y CO2 Lactosa Lactosa CH4 (de H2 + CO2 o formiato) CH4 (de H2 + CO2 o formiato) Lactosa y H2

Sustrato
Celulosa Celulosa Celulosa Celulosa Celulosa Celulosa y almidn Almidn Almidn Almidn Almidn Almidn Lactato Lactato Lactato Pectina Lipolitico Xilano Azucares Azucares Metangenos Metangenos Aromticos

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Tabla 4. Algunas especies de bacterias que fermentan principios nutritivos en el rumen Celulolticos
Fibrobacter succinogenes Ruminococcus flavefaciens Ruminococcus albus Butyrivibrio fibrisolvens

Hemicelulolticos
Butyrivibrio fibrisolvens Bacteroides ruminicola Ruminococcus sp.

Utilizadores de azcar
Treponema bryantii Lactobacillus vitulinus Lactobacillus ruminus

Utilizadores de cidos
Megasphaera elsdenii Selenomonas ruminantium

Pectinolticos
Butyrivibrio fibrisolvens Bacteroides ruminicola Lachnospira multiparus Succinivibrio dextrinosolvens Treponema bryantii

Utilizadores de lpidos
Anaerovibrio lipolytica Butyrivibrio fibrisolvens Treponema bryantii Eubacterium sp. Fusocillus sp.

Streptococcus bovis Amilolticos

Bacteroides amylophilus Bacteroides ruminicola Streptococcus bovis Succinimonas amylolytica

Micrococcus sp. Proteolticos

Bacteroides amyliphylus Bacteroides ruminicola Butyrivibrio fibrisolvens Streptococcus bovis

Productores de amoniaco
Bacteroides ruminicola Selenomonas ruminantium Megasphaera elsdenii
Ureolticos

Productores de metano
Methanobrevibacter ruminantium Methanobacterium formicicum Methanomicrobium mobile

Succinivibrio dextrinosolvens Bacteroides ruminicola Selenomonas sp. Ruminococcus bromii Butyrivibrio sp. Treponema sp.

Fotos de algunas de las bacterias del rumen (extrado de Kaufmann) Rosetas Rosetas y Selenomonas

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Cocos

Sarcinas

Caractersticas Generales de los protozoos del rumen Los protozoos fueron los primeros organismos que se descubrieron en el rumen, debido, fundamentalmente a su tamao relativamente grande. Su tamao oscila entre 38-195 micras de largo por 15-109 micras de ancho. De igual forma que las bacterias, requieren una temperatura de 39 a 40 0 C para vivir, ausencia de oxigeno, pH comprendido entre 5.5-8.0, con un rango optimo de 6.5-7.3 y un potencial de oxidacin - reduccin bajo. La mayora de los protozoos del rumen son ciliados (aproximadamente 104 - 106 / g de contenido ruminal) y tambin se encuentran algunos flagelados (Ej.: Trichomonas spp, Monocercomonas. Sp y Chilomastix. Sp) estn presentes en bajo nmero (103 - 104 / g). Aunque la clasificacin de los ciliados no est determinada, es difcil refutar la existencia de dos grupos ciliados del rumen bien separados, los cuales fueron primeramente denominados: Holotricha y Entodiniomorfos El primer grupo incluye tres especies comunes: Dasytricha ruminantium, Isotricha prostoma, Isotricha intestinalis y algunos otros menos frecuentes. El segundo grupo contiene numerosos gneros juntos, todos incluidos en la familia Ophryoscolecidae (Entodinium, Diplodinium, Ostracodinium, Eudiplodinium, Epidinium, Epiplastron, Opisthotrichum, Ophryoscolex, Elytroplastron, Polyplastron, entre otros). Las evidencias experimentales han sugerido que los protozoos pueden afectar la velocidad de crecimiento del animal, la digestibilidad de la racin, la calidad y cantidad de la protena microbiana disponible en el intestino. Los mayores cambios observados en la ausencia de protozoos del rumen parece ser un incremento en el nmero de bacterias ruminales y una ligera disminucin en la digestibilidad del rumen

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Los estudios comparativos que se han efectuado entre animales faunados y defaunados han demostrado que los ciliados no solamente contribuyen a los procesos metablicos en el rumen sino adems sugiere que los protozoos son capaces de modular las caractersticas fsicas qumicas del ecosistema. Tambin se ha demostrado que la presencia de protozoos influye en el volumen del rumen, la retencin de la digesta, la composicin y actividades de la poblacin microbiana presente, las concentraciones y proporciones de productos finales de la fermentacin microbiana y en el pH ruminal. Los cambios en uno de estos parmetros pueden influir en la funcin ruminal y como consecuencia, la digestin ruminal de protena diettica y la materia orgnica y fibra son mayores en animales faunados. Por otro lado, la sntesis de protena microbiana neta y el flujo de protena a las partes bajas del tracto gastrointestinal se reducen cuando los protozoos estn presentes en el rumen. La defaunacin ofrece el potencial para mejorar la eficiencia de la ganancia de peso vivo y la produccin de leche. El impacto de la presencia o ausencia de los protozoos ciliados del rumen para el hospedero puede depender de la dieta y del nmero y especie de ciliados presentes. En animales alimentados con dietas bajas en protena los protozoos ciliados aparentemente tienen un efecto negativo en el crecimiento y en el desarrollo. Sin embargo, en animales alimentados con dietas ricas en granos, los protozoos ciliados pueden tener un papel beneficioso, debido a su habilidad de influir en la degradacin ruminal del almidn y en el metabolismo del cido lctico. La presencia de protozoos ciliados en animales alimentados con dietas en granos est asociada con una disminucin de la acumulacin y fermentacin del cido lctico. Debido a su influencia en la acumulacin de lactato ruminal, existe la hiptesis de que los protozoos ciliados juegan un papel importante en la moderacin de la fermentacin ruminal en rumiantes alimentados con dietas ricas en grano. La defaunacin frecuentemente resulta en una disminucin en la produccin de AGCC. Esto est de acuerdo con resultados obtenidos en la digestin de materia orgnica en el rumen. La desaparicin de los protozoos est generalmente asociada con una disminucin en la proporcin de cido butrico y la disminucin de la concentracin de N - NH3 en el rumen. Los Entodiniomorfos, por el contrario a Holotrichas, metabolizan el cido lctico y limitan el riesgo de acidosis causado por el consumo excesivo de carbohidratos de fcil fermentacin (almidn, azcar) La baja actividad metanognica que se observa despus de la defaunacin del rumen, disminuye las prdidas de energa y se puede considerar beneficiosa para los animales productores de leche o carne que presentan un potencial de produccin alto Los protozoos pueden transformar las toxinas que estn presentes en los alimentos. Los animales defaunados son adems sensibles a la toxicidad por cobre. Estos grupos microbianos mejoran la formacin de sulfito de cobre que no puede ser absorbido en el tracto digestivo. Fotos de algunos integrantes de la poblacin de protozoos del rumen (a Galindo, 2004) Diplodinium spa Dasytricha ruminantiuma Isotricha prostoma

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Caractersticas Generales de los hongos del rumen Los hongos anaerobios son el grupo ms recientemente reconocido de los microorganismos del rumen, ya que primeramente eran incluidos como protozoos flagelados. Con el desarrollo de las investigaciones en microbiologa del rumen, as como la inclusin de las tcnicas de microscopia electrnica, se pudo demostrar que ciertas clulas flageladas que parecan ser protozoos eran, en efecto, zoosporas de hongos. Son organismos anaerobios estrictos que ataca, colonizan y crecen sobre fragmentos fibrosos de las plantas, por lo que son activos microorganismos celulolticos. La magnitud de la degradacin de la celulosa de los hongos del rumen sobre tiras de papel de filtro es de aproximadamente 60%. Las celulasas extracelulares de los referidos hongos atacan rpidamente los fragmentos de las plantas en el rumen y a las 2-3 horas ya tienen invadido el tejido vascular del vegetal. A las 3 horas se detectan en el tejido mesfilo y posteriormente el crecimiento es mayor con produccin de esporangio. Debido a la forma de crecimiento de los hongos, penetran dentro de los tejidos vegetales hasta zonas que normalmente resultan inaccesibles a las bacterias. Inicialmente todos los hongos anaerobios aislados del rumen fueron de tipo monocntrico. Existen tres gneros de hongos anaerobios monocntricos: Caecomyces (Sphaeromonas), Neocallimastix y Piromyces (Piromonas), cada uno de estos gneros contienen numerosas especies. Los hongos existen en el rumen como zoosporas y esporangios. La creencia de que los hongos anaerobios son de importancia considerable para la nutricin de rumiantes est basada en la habilidad demostrada para colonizar paredes celulares lignificadas y para debilitar los tejidos fibrosos de las plantas en el rumen, as como en la degradacin de los componentes estructurales de la pared celular de las mismas y la fermentacin de los monosacridos resultantes (fructosa, glucosa, xilosa) Estudios in vitro han demostrado que los hongos degradan extensivamente la fibra de las plantas en cultivos puros. Ellos producen un amplio rango de enzimas que degradan la fibra, muchas de las cuales son extracelulares. Los hongos anaerobios poseen endoglucanasas, exoglucanasas (incluyendo celobiohidrolasas) y - glucosidasas las cuales actan para degradar la celulosa (el mayor componente de la fibra) eficientemente. La hemicelulosa, el segundo mayor componente de la fibra, se degrada por - xilanasas y xilosidasas. La lignina, el tercer componente mayor de la fibra, es atacada por enzimas tales como
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feruloil y curamoil esterasas que actan para separar carbohidratos fermentables de la lignina ms que para degradar la lignina extensivamente. Los hongos tambin tienen el potencial de contribuir al suministro de protena al animal hospedero. Las clulas de los hongos estn compuestas de protenas con una combinacin bien balanceada de aminocidos las cuales son altamente digestibles y disponibles al animal hospedero. Relacin entre los microorganismos del rumen y el animal hospedero El animal rumiante y aquellos microorganismos que viven en su tracto digestivo, particularmente el rumen, son un ejemplo excelente de mutualismo. El animal provee un nicho ambientalmente favorable, con un suministro continuo de alimentos y remocin de productos finales. Por su parte los microorganismos (bacterias, protozoos y hongos) proveen un servicio digestivo o funcin que proporciona grandes cantidades de energa disponible al animal hospedero la cual no puede obtenerse a travs de sus propios procesos digestivos. Si los protozoos del rumen fueran meramente comensales entonces ni el hospedero ni los protozoos podran ser beneficiados o daados por la asociacin. Sin embargo el hospedero se beneficia de la habilidad degradativa de los protozoos y estos satisfacen a travs del hospedero sus requerimientos especficos para el crecimiento y multiplicacin. Esto incluye un amplio rango de temperatura, pH, alimento, bajo potencial Redox, bacterias vivas. Los protozoos del rumen pueden ser considerados como simbiontes dependiendo del animal hospedero y otros microorganismos del rumen. El hecho de que las bacterias del rumen y posiblemente los hongos puedan proveer actividades metablicas similares para el animal hospedero no afecta su clasificacin. La informacin sobre la interrelacin entre hongos y protozoos en el rumen es limitada. Las zoosporas individuales de hongos pueden ser ocasionalmente engolfadas por los protozoos ciliados del rumen. Es conocido que la defaunacin conduce a una mayor poblacin de hongos, aunque este incremento no es siempre significativo. El mecanismo por el cual la defaunacin incrementa la poblacin de hongos podra ser una reduccin en el recambio de las protenas de los hongos en el rumen, pero esta actividad predatoria es mucho menos aparente con hongos que con bacterias ruminales. La quitina, un componente comn en la pared celular de los hongos, es un polisacrido formado por N acetil D glucosamina y es extremadamente resistente a la degradacin por microorganismos. La hidrlisis completa de la quitina se produce por un sistema quitinoltico, que consiste en dos hidrolasas, cuyas acciones se efectan de manera consecutivas. La degradacin de clulas de hongos. Diferentes investigaciones han demostrado que los protozoos del rumen poseen un sistema quitinoltico con actividad quitinasa y N acetil - - D- glucosaminidasa. Por otra parte la protena fngica parece, en parte, ser usada por los protozoos para construir sus propios componentes. Los ciliados del rumen engolfan bacterias, algunas veces selectivamente, con velocidades de consumo mximo de aproximadamente 105 bacterias / protozoos / hora. La velocidad de consumo bacteriano es especie dependiente y est influenciada por la densidad de la poblacin bacteriana, la forma fsica de la bacteria, el estado nutricional de los protozoos y factores ambientales tales como el pH y concentraciones de sal.

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Los protozoos engolfan las bacterias mediante vesculas citoplasmticas y la mayora son matadas y digeridas con alguna liberacin de productos de la digestin en el medio. La actividad predatoria de los protozoos reduce el tamao de la poblacin bacteriana ruminal y puede influir en las proporciones relativas de los tipos de bacterias presentes. Por ejemplo, el nmero de bacterias celulolticas incrementa en animales faunados mientras que el nmero de bacterias amilolticas desciende. Requerimientos nutricionales de los microorganismos del rumen Los microorganismos del rumen, como todo organismo vivo, tienen requerimientos energticos, proteicos y factores de crecimiento para la sntesis de protoplasma celular. Como fuente de energa, puede ser capaz de utilizar una gran variedad de carbohidratos, desde azcares simples como la glucosa y la fructosa, hasta los ms complejos como el almidn, la celulosa, pectina y hemicelulosa. Sin embargo, esto no significa que todas las bacterias sean capaces de utilizar todos los carbohidratos, sino que por lo general, cada bacteria tiene sus requerimientos especficos. Como fuente de nitrgeno, las bacterias son capaces de utilizar desde el nitrgeno no proteico, pequeos pptidos, aminocidos y hasta protenas. La posibilidad de utilizar fuentes de NNP para la sntesis de protena microbiana es uno de los aspectos ms importantes del metabolismo nitrogenado de los microorganismos del rumen. Muchas bacterias del rumen, fundamentalmente celulolticas, requieren preferentemente amonaco en relacin a los aminocidos o pptidos. Tabla 5. Factores nutricionales de los microorganismos del rumen ENERGIA
as las fuentes energticas en ser utilizadas por las erias: 9 glucosa, fructosa, sacarosa, xilosa, celobiosa, celulosa, almidn, glicerol, dextrana, lactato, pectina, etc.

NITRGENO
9 protenas, 9 aminocidos, 9 pptidos, 9 amonaco 9 9 9 9

FACTORES DE CRECIMIENTO
AGCC: acetato, butirato, isovalrico, metilbutrico, caproico. Minerales: Mg2+, Ca2+, K+, Na+, PO4, Mn2+, Co, S, Hemina, etc. Vitaminas: biotina, p- aminobenzoico, tiamina, piridoxina, cido pantotnico, etc. Otros: Factores no identificados

Entre los aminocidos requeridos por las bacterias del rumen se encuentran los aminocidos ramificados y los sulfurados, como la tirosina, metionina, y la cistena. Esto se debe a la imposibilidad de sintetizar la cadena ramificada o sulfurada para la sntesis de novo de los aminocidos. Otros compuestos requeridos por las bacterias del rumen, se agrupan bajo el nombre genrico de factores de crecimiento. Entre estos se encuentran los cidos grasos de cadena corta, AGCC, algunos minerales, vitaminas del complejo B y otros factores no identificados y que se encuentran en el lquido ruminal clarificado. Los AGCC mas utilizados por las bacterias son el actico y los de cadena ramificada. Estos ltimos son el resultado de la fermentacin de las propinas y su importancia en la nutricin microbiana se debe a que las bacterias sintetizan sus aminocidos a partir de estos y el amoniaco.

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Los minerales y las vitaminas, principalmente del complejo B, participan como co- factores enzimticos en numerosas reacciones catabolizadas por las enzimas. Se ha demostrado que la inclusin en la racin para rumiantes de productos microbianos que contengan estas vitaminas, activa el crecimiento microbiano.

Factores que afectan la poblacin de microorganismos del rumen. Existen muchos estudios acerca del desarrollo de la mejor poblacin microbiana ruminal y los factores que controlan su balance. Algunos de estos factores estn ligados a la fisiologa de diferentes especies (mxima velocidad de crecimiento, afinidad por el sustrato, energa metablica, resistencia a pH cidos y compuestos txicos, habilidad para adherirse a las partculas de la planta, etc). Esto depende del hospedero y su alimento (composicin de la dieta, frecuencia de comidas, cantidades ingeridas, aditivos del alimento, forma en la cual el alimento es presentado, etc.) y de la naturaleza de las relaciones establecidas entre las diferentes poblaciones durante la evolucin, como la competencia, el sinergismo, la predacin, el mutualismo, etc.). Generalmente se acepta que los principales factores que modifican la poblacin de microorganismos del rumen son: La dieta y su manipulacin Cantidad y frecuencia en el suministro de alimentos Cambios diurnos y estacionales Procesamiento de la dieta Competencia entre protozoos y bacterias Especie animal Edad

Existen otras variables, que pudieran ser factores, las que tambin influyen en el nmero y representacin de especies microbianas, entre estas tenemos: El consumo y su velocidad, la selectividad al pastar, la fertilidad del suelo, la situacin geogrfica, el clima. Estos influyen en la cantidad y calidad de nutrimento que se ofrecern a los microorganismos del rumen. La dieta y su manipulacin. Uno de los principales factores que influyen en la poblacin de microorganismos del rumen es la variabilidad de los componentes de los alimentos. Por otro lado, el tipo de carbohidratos preponderante en la dieta produce una fermentacin caracterstica, que a su vez influir en la clase de microorganismos que se desarrollaran. Por ejemplo, las dietas ricas en carbohidratos solubles como las mieles presentaran una poblacin mayor de protozoarios de los diferentes gneros y en total que las dietas de concentrados ricas en almidn. Las bacterias se presentan en menor cantidad en aquellas dietas que en las de concentrados. La presencia de grandes cantidades de almidn produce una rpida fermentacin, lo que provoca un descenso rpido del pH. Este descenso ocasiona la muerte de los protozoarios. Esto afecta a las bacterias celulolticas, y aumentan las amilolticas. Sin embargo, se ha encontrado que la inclusin de
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almidn en dietas fibrosas mejora el desarrollo de la poblacin microbiana hasta cierto lmite. Mas adelante, analizaremos esta respuesta cuando se estudie la celulolisis ruminal. Otro aspecto importante a sealar es que no solamente cambia la relacin protozoo / bacterias, sino que tambin cambian las proporciones en que se encuentran los diferentes gneros protozoarios y especies de bacterias que se involucran en el proceso. La suplementacin con protenas, en dietas bajas en este nutrimento, tambin modifica la poblacin microbiana ruminal. Las dietas ricas en azcares como la caa deprimen la poblacin de bacterias celulolticas ruminales. A esto se une el hecho de que este alimento presenta un bajo contenido en protena. Sin embargo, cuando se utilizan diferentes estrategias de suplementacin a partir de suplementos activadores de la fermentacin ruminal (SNA), en el cual se mantenga la relacin NNP/PV adecuada, se incrementa la poblacin y actividad de las bacterias celulolticas. Este efecto, se obtiene, igualmente, a partir de una adecuada suplementacin con leguminosas, entre ellas, Leucaena leucocephala El efecto depresivo que producen los azcares en la representacin de bacterias celulolticas ruminales se demostr cuando se alimentaron a vacas Holstein con niveles de 20 y 30 l de guarapo. Esto se debe a la alta tasa de fermentacin que presenta esta dieta, donde predominan microorganismos sacarolticos, con una alta depresin de la flora celuloltica. Es evidente que niveles bajos como 10 l de guarapo producen un efecto activador de la referida flora microbiana. Tabla 6. Efecto de diferentes formas de suplementacin bacterias celulolticas ruminales Alimento
Caa sin suplementar Caa + SNA-77 Caa + SNA-77 + Heno Caa + SNA-77 + 2.5% Forraje verde Caa + SNA-77 + 5% Forraje verde Caa + SNA-100% (NNP/PV =100:0) Caa + SNA- 85% (NNP/PV = 85:15) Caa + SNA-70% (NNP/PV = 70:30) Caa + King grass Caa + King grass + Leucaena leucocephala Caa biofermentada, 50% en pienso Caa biofermentada, 70% en pienso Caa biofermentada, 90% en pienso
SNA. Suplemento nitrogenado activador de la fermentacin ruminal

nitrogenada en la poblacin de

Bacterias celulolticas, 10 5 (ufc/ml)

0.5 1.56 2.45 18.4 15.6 97.7 97.3 101.7 13.1 416.7 131.6 133.9 50.0

Tabla 7. Efecto del nivel de guarapo en los principales grupos de bacterias del rumen Nivel de guarapo, %
Bacterias celulolticas, 10-6 Hongos celulolticos, 10-6 Bacterias totales viables, 10-11

Medida (ufc/ml)

0.62ab 0.19 1.43

0.83a 0.15 0.93

10

0.41b 0.37 0.84

20

0.20b 0.40 0.85

30

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La suplementacin con fuentes que aporten minerales propicia un mejor equilibrio microbiano en el rumen, debido a que los microorganismos requieren de minerales tales como K, Mg, Mn, Cu, Na, P, entre otros para su crecimiento y el desarrollo de los numerosos procesos fermentativos. Las zeolitas naturales son minerales que pertenecen al grupo de los almino silicatos y en su micela presentan iones minerales, que en el ambiente ruminal se intercambian tonel in NH4. Este efecto incrementa la poblacin de bacterias celulolticas y reduce las proteolticas, amilolticas y protozoos, lo cual mejora la utilizacin digestiva de los nutrientes en los animales rumiantes. Tabla 8. Efecto del complejo mineral Zeolita en la poblacin de bacterias del rumen Medida
Bact. Viables totales, 1011 ufc/ml Bact. celulolticas, 10 ufc/ml Bact. amilolticas, 10 ufc/ml Bact. proteolticas, 10 ufc/ml Protozoos totales, 10 cel/ml
6 6 6 6

Ensilaje
28.7 12.8 3.7 43.8 21.8

Ensilaje + 1% Zeolita
19.8 20.3 1.6 14.7 17.1

El empleo de antibiticos como manipulador de la poblacin de microorganismos en el rumen es otra prctica que se ha empleado en diferentes pase, an cuando en la acualidad numerosos pases prohben su uso debido a efectos residuales en los productos agropecuarios. Los antibiticos ionforos en general, y el monensn en particular es capaz de reducir la poblacin de bacterias metanognicas y la produccin de metano en el rumen. Con ello mejora el metabolismo energtico de los rumiantes que lo consumen al reducir las prdidas dee nerega por concepto de emisin de metano al ambiente. Al mismo tiempo se reduce la poblacin de protozoos ruminales, pero peligrosamente tambin se deprime la poblacin de bacterias celulolticas Tabla 9. Efecto del Monensn en la poblacin de bacterias viables totales, celulolticas y metanognicas del rumen Tratamientos
Saccharina + monensn Forraje + monensn Almidn + monensn Saccharina Forraje Almidn EE

Bacterias totales viables, 10-9ufc/ml

1.11bc 1.08c 1.51ab 1.34bc 1.37bc 1.77a 0.13**

Bacterias metanognicas, Bacterias celulolticas 10-6/ml 10-6/ml

0.73c 0.71c 0.83c 1.07b 1.50a 1.41ab 0.12*** 0.13b 0.16b 0.05c 0.44a 0.18a 0.09c 0.15*

Cantidad y frecuencia en el suministro de alimentos La cantidad y frecuencia en el suministro de alimentos se ha encontrado que afecta a la poblacin microbiana. La alimentacin una vez al da produce grandes disminuciones en el pH y en los conteos de protozoos y bacterias. Por el contrario, un suministro de pequeas cantidades varias veces al da, produce

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variaciones mas pequeas, puesto que el rumen se asemejara mas a al modelo de fermentacin continua que se presento a inicios de esta conferencia. Cambios diurnos y estacionales Los cambios diurnos y estacionales que se presentan en la poblacin de microorganismos del rumen estn basados, principalmente, en la entrada y salida de alimento. Cuando los animales se someten a un ayuno prolongado y se les suministra de nuevo alimentos, se observa, inicialmente, un incremento en el nmero de protozoos y bacterias, las cuales se multiplican rpidamente. A las 2 horas del suministro de alimento se observan los mayores conteos de protozoos y de las 4 a 6 horas el de las bacterias, cuando la alimentacin es una vez al da. Los cambios estacionales que se presentan en nuestro clima afectan la poblacin de microorganismos debido a los cambios en la calidad del alimento, principalmente, por deficiencia en le aporte proteico de las dietas. Si se suplementa en estos momentos con un nivel adecuado de nitrgeno, las variaciones debidas a la estacin disminuirn y pueden desaparecer. Un ejemplo de efecto de las condiciones climticas en la poblacin de bacterias ruminales es el hecho demostrado que, bajo las condiciones edafo climticas de Cuba, los animales rumiantes presentan en el rumen una flora microbiana capaz de degradar la mimosina, aminocido txico presente en la leguminosa Leucaena leucocephala y el dihidroxipiridona (DHP), metabolito igualmente txico que se libera de la hidrlisis de la mimosina en el rumen. Esto posibilita que nuestros animales no corran riesgo de intoxicacin cuando consumen esta planta. Tabla 10. Presencia de bacterias que degradan la mimosina y el DHP en diferentes especies de rumiantes Animal
Toro Carnero Vaca Carnero Carnero Carnero Carnero Cabra

Dieta
Forraje+ 30% Leucaena Forraje+ Saccharina Caa +50% Leucaena Heno Heno:Leucaena(80:20) Heno:Leucaena(60:40) Heno:Leucaena(40:60) Pasto +50% Leucaena

mimosina
24.0 1.67 7.0 1.67 12.0 2.0 4.0 2.1

3,4- DHP
24.0 1.67 40.0 2.0 0.67 1.30 3.30 1.8

2,3-DHP
3.6 1.5 17.0 3.0

Dilucin
105 105 106 105 105 105 105 106

Los microorganismos ruminales tienen importancia como biodegradadores de compuestos xenobiticos, contaminantes ambientales debido a su gran capacidad metablica. Esta potencialidad est siendo estudiada actualmente para su aplicacin de forma controlada en procesos de biodegradacin de contaminantes industriales. Procesamiento de la dieta El procesamiento de la dieta, tambin influye en la poblacin ruminal. El molido, peletizacin y desecacin de los forrajes produce una disminucin de los protozoos y, en ciertos casos, pueden llegar a su eliminacin total. Estas disminuciones se han planteado se deben a un aumento en el pasaje del contenido ruminal, un incremento en la fermentacin con aumento de la acidez que atenta contra el desarrollo de los
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protozoos. Por lo regular, las bacterias se ven menos afectadas por estos procesamientos y en ocasiones se ven incrementadas en numero. Sin embargo, se plantea que existen variaciones en los grupos fisiolgicos que se establecen en un momento dado. En el caso de los almidones sucede algo parecido a lo que ocurre con los materiales fibrosos. El hacer del grano hojuelas, molerlo, peletizarlo o cocerlo, provoca un aumento de la fermentacin. Esto trae consigo la desaparicin de los protozoos y el aumento de bacterias. Competencia entre protozoos y bacterias El nmero de bacterias en los animales defaunados es mayor que en los que presentan fauna. Esta diferencia puede ser debida a la competencia por los nutrientes o al consumo de bacterias por los protozoos. Tambin se seala que los protozoos realizan una seleccin de las bacterias que ellos ingieren. Esto hace disminuir y en algunos casos desaparecer las especies de las cuales se alimentan. El empleo de rboles y arbustos de leguminosas para manipular la fermentacin microbiana ruminal y producir efecto defaunantes, es una prctica que ha tomado auge en los ltimos aos. Gliricidia sepium es uno de los arbustos de mayor empleo con estos propsitos. Reduce la poblacin de protozoos ruminales e incrementa el nmero de bacterias y hongos celulolticos ruminales. Las razones se encuentran en la presencia de metabolitos secundarios, fundamentalmente taninos condensados. Tabla 11. Efecto de Gliricidia sepium como defaunante su relacin con otros grupos microbianos ruminales Medida Niveles de G. sepium 0
70.791 6.31a 7.41a 45.71c 101.89 74.99 12.23 9.61

15
79.43 7.94a 8.34a 11.22b 103.64 78.08 16.36 9.20

30
26.92 13.90b 15.53b 2.57a 110.42 82.40 13.68 10.76

EE
0.42 0.14* 0.29* 0.09*** 5.04 3.86 2.11 0.72

Bacterias viables totales, 1011ufc/ml Bacterias celulolticas, 106 ufc/ml Hongos celulolticos, 106uft/ml Protozoos, 105 cel/ml AGV, mmol/ml cido actico, mmol/ml cido propinico, mmol/ml cido butrico

Especie animal El efecto de la especie y la raza de los rumiantes se ha encontrado que produce variaciones en la cantidad y especies de microorganismos presentes en el rumen. Estas variaciones parecen deberse a la cantidad y calidad del alimento que los diferentes rumiantes encuentran normalmente en su hbitat, lo cual produce especies mas adecuadas a las condiciones que se encuentran en el rumen. Tambin se han sealado variaciones entre la poblacin protozoaria del Ceb y su cruce con la Parda Suiza Brown Swiss). Diferencias, principalmente en la poblacin protozoaria, se han encontrado entre el camello, el Suni el Antlope y otros rumiantes salvajes.

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Edad La edad es otro de los factores que afecta la poblacin de microorganismos del rumen. Los terneros de pocos das de nacidos tienen escaso desarrollo en el rumen y la poblacin que aparece son organismos capaces de utilizar la leche, nico alimento que consumen. Entre los microorganismos ms numerosos en esta etapa se encuentran los Lactobacillus y Streptococcus, grandes productores de cido lctico, el que mantiene un pH muy bajo. En esta edad no estn presentes los protozoos, los que se establecen mas tarde, cuando el consumo de alimento fibroso se incrementa y por el contacto con otros animales adultos o que tienen una fauna establecida. Al transcurrir el tiempo y entrar en contacto con alimentos fibrosos se desarrolla el rumen, aumenta el pH, comienza la aparicin de los diferentes grupos fisiolgicos de bacterias y se establecen los protozoos.
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bacterias viables totales(10 ufc/ml

15 10 5 0
7 28 56 84

Figura 2. Efecto de la edad en la poblacin de bacterias viables terneros, das

Fermentacin microbiana de Nutrientes Los microorganismo al actuar sobre los nutrientes producen como resultado, producen como resultado de su metabolismo diferentes productos finales, los cuales son muy variados, segn la naturaleza de los sustratos y de las especies de bacterias y protozoarios presentes. En la tabla se muestran de una forma esquemtica las principales transformaciones que ocurren. Tabla 12. Fermentacin microbiana de nutrientes en diferentes fuentes Fuentes
Energticas

Sustratos
Carbohidratos de fcil fermentacin Carbohidratos estructurales Lpidos Protenas, Pptidos y Aminocidos

Productos Finales
AGCC, cido lctico y gases AGCC y gases Saturacin de los no saturados, lpidos para la sntesis de membrana celular AGCC, NH3 y gases

Proteicas

Fermentacin de fuentes energticas De acuerdo con el sustrato prevaleciente en el alimento, los microorganismos producirn diferentes cantidades de AGCC y adems, variaran sus proporciones relativas. En las dietas que presentan grandes cantidades de almidn, como son los concentrados energticos, se observa un pH mas bajo, el cual es consecuencia de un rpido ataque microbiano al almidn, que produce cido lctico, y AGCC. El cido lctico, cuando los animales se adaptan previamente, se
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presenta en pequeas cantidades debido a que se desarrolla una microflora que es capaz de utilizar este cido en la misma magnitud que se produce. Si los animales consumen dietas ricas en materiales fibrosos, que contienen grandes cantidades de material estructural, el pH del rumen es mas elevado. Estos componentes son atacados por las bacterias celulolticas mas lentamente y la cantidad de cidos formados, es tambin inferior. Las dietas ricas en azucares como las mieles y el jugo de cana presentan valores intermedios de pH, as como a la cantidad de cidos formados. En esta dieta, los carbohidratos que abundan son los monos y disacridos, los cuales son tambin rpidamente fermentados, pero el pH no desciende rpidamente. esto tal vez sea motivado por el hecho de que la formacin de cido lctico no es muy grande y o que la liberacin de amoniaco procedente de la urea neutralice adems los cidos formados, conjuntamente en un patrn de consumo intermitente. Consecuentemente, la cantidad de carbohidratos que entran al rumen no es grande por unidad de tiempo. Resultan tambin importantes las diferentes proporciones de cidos grasos individuales que se forman en las dietas. La dieta de concentrado presenta una proporcin de cido propicio alta, si se compara con las otras, y bajos valores de cido actico y butrico. Por esta razn, el patrn de fermentacin de una dieta rica en concentrado se acostumbra a decir que es alto en propinico y bajo en actico. El heno y los alimentos fibrosos presentan un pH alrededor de 7, una produccin de AGCC baja con altas proporciones de cido actico, compensada con bajas proporciones de cido propinico y butrico. Por otro lado, las mieles presentan un patrn de fermentacin intermedio, con pH cercanos al neutro, produccin de AGCC intermedia entre los dos anteriores y se caracteriza porque es alta la proporcin de cido butrico. Tabla 13. Efecto de la dieta en el pH y patrn de fermentacin ruminal % molar Dieta
Concentrado Heno Miel/urea

pH
6.16 7.10 6.66

AGCC, actico propinico butrico Isob. meq/l

157 82.0 132 44.9 76.0 49.7 42.8 15.0 21.3 5.83 7.46 25.7 1.83 0.41 0.30

Val. Isov. Cap

2.24 0.29 2.81 2.03 0.39 0.26 0.73 0.00 0.79

Fermentacin de compuestos nitrogenados La fermentacin de los compuestos nitrogenados en el rumen es muy complejo y en el intervienen gran numero de especies microbiana. La protena y la urea u otra fuente de NNP que entra al rumen se degradan a NH3. La concentracin de aminocidos libres en el rumen es relativamente baja debido a que los mismos son desanimados. Las protenas se degradan con una rapidez variable, en dependencia de su estructura y solubilidad y en el proceso de proteolisis intervienen bacterias, protozoos y hongos. Alrededor del 38% de las bacterias

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viables totales, aisladas del rumen de bovinos, son proteolticas, lo cual puede variar en dependencia de la fuente de energa y protena diettica. Bacteroides amylophilus, Selenomonas ruminantium y Bacteroides ruminicola son la bacterias de mas alta actividad proteoltica en el rumen. Otras bacterias proteolticas de inters son, Streptococcus bovis, Sphaerophorus hypermegas y Peptostreptococcus sp. La actividad proteoltica no es la accin aislada de una sola especie microbiana, sino que existe sinergismo y relaciones estrechas entre las diferentes especies, lo cual se ha demostrado en los estudios que se han efectuado en cultivos puros, donde la actividad proteoltica es menor. La urea que se utiliza para suplir total o parcialmente la protena verdadera, se hidroliza rpidamente a amoniaco y agua., sin embargo, en el rumen se han encontrado relativamente pocas especies de bacterias eminentemente ureolticas, lo cual indica que la ureasa puede ser inducida en algunos grupos microbianos cuando la urea esta presente en el medio de fermentacin. Tabla 14. Efecto de la urea en el pH y concentracin de amonaco ruminal Dieta
pH ruminal N-NH3 ruminal (ppm)

Heno Heno c/urea Heno-maz

7,3 35,4 7,2 110,6 7,0 1,7

Heno-maz c/urea 6,2 2,1

Heno alfalfa
6,7 26,8

Heno alfalfa c/urea 6,8 27,3

Fermentacin de lpidos Los lpidos, al entrar en el rumen sufren un proceso de hidrlisis debido al ataque microbiano a la molcula de grasa. Una vez liberados los cidos grasos, estos sufren un proceso de hidrogenacin, si no se encuentran saturados, que comienza siempre por los cidos grasos que tienen un grado mayor de instauracin, del modo siguiente Cx3 Cx2 Cx1 Cx0 En los forrajes se encuentran numerosos lpidos, los que se encuentran formando parte de las membranas de los cloroplastos, con un alto contenido de lpidos no saturados. En el proceso de hidrogenacin de los cidos grasos polinsaturados y monoinsaturados intervienen algunas cepas de Butyrivibrios, una cepa de Ruminococcus albus, dos cepas de Eubacterium sp, dos Fusocillus, un micrococo y Treponema sp Ventajas de la hidrogenacin de cidos grasos Aumenta el crecimiento bacteriano, ya que los cidos grasos insaturados provocan cambios en la permeabilidad de las membranas microbianas Se reduce la produccin de metano al haber menor cantidad de hidrgeno Aumenta la energa disponible, ya que los cidos grasos saturados liberan ms energa al oxidarse que los cidos grasos insaturados.

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Anaerovibrio lipolytica es responsable de la hidrlisis de los triglicridos, aunque ataca los galactolpidos directamente. Butyrivibrio fibrisolvens, bacteria eminentemente celuloltica, tambin interviene en la hidrlisis de los fosfolpidos, en la hidrogenacin de los cidos grasos polinsaturados y en la produccin de butirato a partir de la interconvercin del acetato en butirato. Adaptacin de bacterias a la dieta Como se estableci anteriormente, los microorganismos que viven en el rumen son capaces de utilizar diferentes fuentes de carbohidratos y muchos son capaces dos o tres de esas fuentes. Un cambio de dieta, por ejemplo, de forraje o concentrado, es decir de una dieta de lenta fermentacin ruminal a una de carbohidratos fcilmente fermentables, produce una accin rpida por parte de los microorganismos. Esos, atacaran rpidamente el concentrado y se desarrollaran mejor las bacterias amilolticas. El gran desarrollo de estas bacterias producir suficiente cido, capaz de descender el pH del ruminal. Estos cambios pueden ser tan violentos que produzcan disturbios digestivos como la acidosis y timpanismo, que pueden llegar a ocasionar la muerte del animal. Si el cambio de dieta se hace lentamente y se aumentan las cantidades de alimento nuevo a introducir diariamente, los cambios en la poblacin microbiana ruminal no sern tan bruscos. De esta forma se podrn desarrollar no solamente los microorganismos que utilizan las nuevas fuentes de energa, sino que tambin la de los microorganismos que utilicen parte de los cidos orgnicos. Estos no permitirn que se acumule una cantidad que provoque intoxicacin en el animal Conclusiones Como se ha podido apreciar, el rumen- retculo constituyen pre estmagos del aparato digestivo de los rumiantes en los cuales se produce un proceso de fermentacin anaerbica como resultado de la variada flora microbiana que lo habita. Los productos finales de la fermentacin de estos microorganismos contribuyen de manera importante a la nutricin del animal hospedero. Conocerlos reviste una gran importancia debido a que se puede actuar sobre ellos y modificarlos para obtener mejoras productivas. Bibliografa a consultar The rumen and its microbes. Hungate, R.E. 1966. New York: Academic Press. Book The roles of protozoa and fungi in ruminant digestion Editors. Armidale, NSW. 2351, Australia: Penambui Books The rumen bacteria of animal fed on a high molasses urea diet. Elas, A. 1971. Thesis Ph.D. Aberdeen. UK. Efecto de la Zeolita en la poblacin de bacterias celulolticas y su actividad en el rumen de animales que consumen ensilaje. Galindo, J. 1988. Tesis Dr Ciencia Veterinarias. Instituto de Ciencia Animal, La Habana, Cuba.

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La celulolisis ruminal y los factores que la modifican

Dra. Juana Galindo

Contenido
Introduccin.............................................................................................................................................................................52 Partes de la clula vegetal........................................................................................................................................................53 Polisacridos estructurales de las paredes celulares ................................................................................................................53 La celulolisis ruminal. Concepto .............................................................................................................................................55 Enzimas que intervienen en la celulolisis ruminal y modo de accin.....................................................................................57 Interacciones de microorganismos en la degradacin de la fibra.............................................................................................57 Factores que modifican la celulolisis ruminal..........................................................................................................................59 Nivel de lignificacin de las plantas ........................................................................................................................................59 Nivel de carbohidratos solubles de la dieta..............................................................................................................................60 Nivel de nitrgeno de la dieta ..................................................................................................................................................61 Utilizacin del nitrgeno no proteico (NNP)...........................................................................................................................61 Conclusiones............................................................................................................................................................................63

Introduccin Uno de los materiales que ms abundan en la naturaleza son los pastos y forrajes, naturales o artificiales y estos constituyen una de las principales y mas econmicas fuentes de alimentacin para los rumiantes. La alta variabilidad que existe entre especies y tambin dentro de una misma especie en relacin con la degradabilidad de la fraccin fibrosa, hace que se estudien los fenmenos responsabilizados con tales efectos. Se conoce que los animales rumiantes presentan un complejo sistema digestivo en el cual el rumen, el mayor de los cuatro compartimientos pre estomacales, es habitado por una densa poblacin microbiana y constituye el sitio principal de degradacin de la celulosa en los rumiantes. La conversin de la celulosa a glucosa en el rumen requiere de la accin cooperativa secuencial llevada a cabo por una familia de enzimas celulolticas constituida, al menos por tres complejos enzimticos bsicos: endoglucanasas, exoglucanasas, nombradas celobiohidrolasas y glucosidasas. Este complejo de enzimas se produce por los microorganismos que habitan en ese reservorio, entre los cuales se incluyen las bacterias, protozoos y hongos. Las celulasas, que pueden estar unidas a la superficie celular o ser segregadas al medio, son enzimas inducidas cuya actividad se inhibe por varios factores como son: pH, fuerza inica, temperatura, concentracin de sustrato entre otros, lo que implica una disminucin de la utilizacin de los alimentos fibrosos por el rumiante. El objetivo de la presente conferencia es informar y debatir los aspectos bsicos relacionados con la fermentacin microbiana ruminal de la celulosa, los principales factores que la modifican as como las estrategias para incrementar su actividad con vistas a alcanzar una mayor degradacin y, consecuentemente, esperar mayor produccin animal

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Partes de la clula vegetal. La clula vegetal se encuentra integrada por dos partes fundamentales: Contenido celular (ncleo y citoplasma) y Membrana celular o Pared celular El Contenido celular agrupa las fracciones de alta degradabilidad y disponibilidad nutritiva. Consiste fundamentalmente en: Protenas, 1-35, Carbohidratos solubles, 30%, Lpidos y cidos orgnicos >10%, Minerales 3-12% La membrana celular, pared celular, membrana esqueltica o membrana pectocelulsica distingue a la clula de los vegetales. Es rgida o semirgida. Su espesor vara segn la edad y tipo de clula. La estructura es compleja independiente a su espesor. La pared celular comprende del 30- 85% de la MS. del forraje. De forma breve se describen sus componentes: Polisacridos estructurales de las paredes celulares Celulosa: Es prcticamente un polmero lineal de unidades de glucosa unidas entre si por enlaces -14. Es el principal componente estructural de las paredes celulares de las plantas. Se considera relativamente insoluble en agua. Algunos polmeros pueden contener 10.000 unidades de glucosa. Los enlaces hidrgeno entre polmeros paralelos forman microfibrillas fuertes. Estas microfibrillas de celulosa proveen la fuerza y rigidez requerida en paredes celulares de plantas primarias y secundaras. Constituye el esqueleto de la pared celular. La celulosa existe en dos formas, una cristalina y otra amorfa. La primera se encuentra formada por cadenas lineares de celulosa orientada y en las cuales las molculas se mantienen unidas lateralmente por puentes de hidrogeno. En la segunda, este ordenamiento es menor o no existe. El ordenamiento de las cadenas en la molcula produce una estructura conocida como micro fibrillas. Al formarse las micro fibrillas de celulosas en la pared celular, las hemicelulosas, lignina y otros componentes de la pared, como los minerales pueden concentrarse en los espacios entre las micro fibrillas y forman una matriz que envuelve la celulosa y se forman enlaces covalentes entre la celulosa, la hemicelulosa y la lignina. El porcentaje de celulosa en los pastos vara entre 15-50%.

Figura 1: Estructura qumica de la celulosa

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Hemicelulosas: Son un heterogneo grupo de sustancias que contienen un nmero de azcares en su columna vertebral y en los lados de la cadena xilosa. Mannosa y galactosa frecuentemente forman la estructura vertebral, mientras la arabinosa galactosa y cidos urnicos estn presentes en los lados de la cadena. Las hemicelulosas por definicin son solubles en lcalis diluidos, pero no en agua. El tamao molecular y el grado de ramificacin son tambin altamente variables Una molcula tpica de hemicelulosa contiene entre 50 y 200 unidades de azcar. Se plantea que son polisacridos matrices que se enlazan junto a las microfibrillas de celulosa y forman enlaces covalentes con la lignina. Su contenido en los vegetales vara entre 6-40% de la MS. El peso molecular es mas bajo que el de la celulosa. Pectinas: Son ricas en cidos urnicos, solubles en agua caliente y forman geles. La estructura esqueletal consiste de cadenas no ramificadas de enlaces 1 ,4 de cido galacturnico. Los lados de la cadena pueden contener ramnosa arabinosa, xilosa y fucosa La solubilidad es reducida por metilacin de los grupos carboxilos libres y por formacin de complejos de calcio y magnesio. Las pectinas similares a la hemicelulosa son polisacridos matrices en las paredes celulares. -Glucanos: Son polmeros de glucosa que contienen ambos enlaces (13 y 14) en varias proporciones, dependiendo de la fuente, la cual hace a la molcula menos lineal que la celulosa y ms soluble en agua. Polisacridos no estructurales (no celulsicos) Son probablemente los que estn en mayor proporcin en la mayora de los alimentos que la celulosa o lignina. Las frutas y verduras tienden a tener niveles ms altos de celulosa que los cereales. Algunas frutas, en el cual la semilla es comestible tienen una proporcin muy alta de lignina. La composicin fibrosa de las plantas vara con la especie, la parte (esto es: raz, tallo, hoja) y madurez. El contenido de celulosa y lignina por ejemplo, se incrementan significativamente con la madurez de la planta. De acuerdo a como varan las funciones dentro de la planta vara la composicin qumica de cada fraccin. Los polisacridos no estructurales incluyen hidrocoloides tales como muclago, gomas (asociadas con el endospermo y el espacio intercelular) y polisacridos de algas. Los hidrocoloides son polisacridos hidroflicos que forman soluciones viscosas o dispersiones en agua fra o caliente. Las avenas y cebadas contienen muclagos. Las gomas exudadas de plantas incluyen gomas arbigas, caraya, y tragacanto; mientras que los polisacridos de algas incluyen agar, alginatos, y carragenina. Los polisacridos de las paredes no celulares contienen una gran cantidad de azcares neutros y cidos urnicos. No polisacridos estructurales (Lignina) La lignina es un polmero tridimensional, no-carbohidrato que consiste aproximadamente de 40 unidades de fenol con enlaces intramoleculares fuertes: La lignina es a menudo enlazada covalentemente a hemicelulosa. Contiene unidades de fenil propano derivadas de sipanil, coniferil y alcoholes p-coumarlicos. Son considerados muy inertes, insolubles y resistentes a la digestin. Su porcentaje en los pastos vara con la edad entre 2-15%. Su funcin es dar rigidez y dureza a los vegetales y su digestibilidad es escasa.

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Figura 2. Diagrama de la composicin qumica de la fibra: Forma de deposicin de la celulosa, hemicelulosa y lignina (Adaptado de Monje, 2004)

La celulolisis ruminal. Concepto La celulolisis ruminal es el proceso de transformacin bioqumica de la celulosa en carbohidratos solubles Este proceso se lleva a cabo por algunos miembros de la microflora y microfauna ruminal que tienen la capacidad de segregar enzimas celulasas. Accesibilidad de las enzimas a la celulosa La capacidad de los organismos celulolticos para digerir la celulosa varia grandemente con las diferentes especies de forraje o el grado de madurez en que se encuentren, aun cuando sus contenidos en celulosa no sean tan diferentes. Para apreciar completamente la influencia de la estructura de la fibra en la susceptibilidad o resistencia a la degradacin enzimtica, es necesario comprender la relacin entre microorganismo celuloltico, sus enzimas extracelulares y la fibra propiamente dicha. Los organismos que degradan la fibra viven en la superficie o en el interior de la fibra. En estos lugares segregan enzimas extracelulares o superficiales que catalizan la dilucin de los constituyentes de la fibra a productos que pueden ser asimilados y metabolizados por estos microorganismos.

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La susceptibilidad de la celulosa a la hidrlisis enzimtica esta determinada en grado considerable por la accesibilidad de las enzimas producidas y el sustrato, celulosa, es pues un prerrequisito para la hidrlisis, pues la celulosa es estructuralmente compleja y a la vez insoluble. Este contacto puede ocurrir por difusin de las enzimas dentro de la compleja matriz de la celulosa. Debe esperarse, que la velocidad de la reaccin deba ser funcin del rea superficial de la celulosa que esta accesible a la enzima. Cualquier aspecto estructural que limite la accesibilidad de las enzimas del complejo celulasas a la celulosa disminuir su susceptibilidad de la degradacin. Aspectos estructurales que afectan el ataque enzimtico Los aspectos estructurales que determinan la susceptibilidad de los materiales celulsicos a la degradacin enzimtica incluyen: Contenido de humedad de la fibra Tamao de los poros microfibrilares Los enlaces establecidos entre los diferentes constituyentes de la pared celular Otros aspectos La humedad desempea un importante papel en la degradacin de la celulosa ya que el agua es necesaria para hinchar la fibra; prev un medio adecuado para la difusin de las enzimas extracelulares y de los productos de la degradacin parcial de la fibra de los cuales obtienen los microorganismos sus nutrimentos. Los elementos del agua se utilizan para producir el rompimiento de los enlaces entre las unidades de glucosa que forman la molcula de celulosa. La degradacin enzimtica de la celulosa requiere que las enzimas celulasas y otras enzimas extracelulares de los microorganismos se difundan desde los organismos productores hasta la superficie accesible, sobre o dentro de la fibra. Estas superficies accesibles se encuentran definidas por su tamao, forma y propiedades superficiales en capilares microscpicos y sub microscpicos dentro de la fibra. Estos capilares se encuentran dentro de dos categoras: capilares gruesos, visibles al microscopio de luz y que tienen un dimetro que vara desde 2000 a 10 micrones y los capilares o poros de la pared celular, tales como los espacios entre las microfibrillas y las molculas de celulosa en las regiones amorfas. La mayora de los poros de la pared celular se encuentran cerrados cuando las paredes no contienen humedad, pero se abren otra vez cuando se absorbe agua. Cuando la fibra se encuentra completamente saturada de agua, los capilares de las paredes celulares alcanzan sus dimensiones mximas. Estos pueden alcanzar alrededor de 200 de dimetro, aunque comnmente poseen un dimetro menor. En un cuerpo poroso el rea superficial disponible para que el ataque de una enzima se realice depender de los tamaos relativos de los poros y la enzima. Los estudios realizados en este campo indican que la molcula del complejo celulasas posee un dimetro entre 30-40 . Cuando el volumen accesible al poro es cero, la reaccin de disolucin de la celulosa no ocurre; pero al incrementarse el volumen accesible del poro ocurre un incremento correspondiente en la velocidad de reaccin. Tambin existe una correlacin entre la reactividad y el rea superficial a una molcula con un tamao dado. Esto se basa en que la velocidad de una reaccin qumica heterognea entre molculas en solucin y un slido es, usualmente, proporcional a la superficie disponible.

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Existen algunas evidencias de uniones covalentes entre la lignina y algunos de lo polisacridos de la pared celular. Estos enlaces posiblemente contribuyan a impedir el ataque enzimtico de la fibra por inhibicin estereoqumica. Sin embargo, tambin se plantea que ocurre un enrejamiento fsico de la celulosa y la hemicelulosa. Otros aspectos que se cree influyen en la susceptibilidad de la fibra al ataque enzimtico son, el grado de cristalinidad de la celulosa, su grado de polimerizacin, la asociacin con minerales y otras sustancias.

Figura 3. Microfibrillas de celulosa en la pared vegetal

Enzimas que intervienen en la celulolisis ruminal y modo de accin El termino celulasas se utiliza para denominar las endoenzimas producidas por los microorganismos celulolticos, que hidrolizan los enlaces -1-4 glucosdicos presentes entre las unidades de anhidro glucosa y su nombre sistemtico es -1-4 glucan glucano hidrolasas. Las enzimas celulasas no son una sola enzima, sino que constituyen un complejo enzimtico, el cual est formado por varias enzimas, entre ellas: endo -1-4 glucanasas (-1-4 glucan glucano hidrolasa, carboximetil celulasa Cx celulasa); exo 1-4- glucanasas (exo celobiohidrolasa, 1-4- glucanglucanohidrolasa C1 celulasa); exo 1-4- glucosidasas (1,4 glucan glucohidrolasa); celobiasas ( glucosidasas glucohidrolasa); celulodextrinasas; etc. La mayora de los microorganismos celulolticos del rumen se encuentran dotados de todas las enzimas y por esa razn, la celulolisis puede ser total cuando se estudia en suspensiones con cultivos puros. Sin embargo, se ha indicado que algunos microorganismos atacan solamente la forma nativa de la celulosa, mientras que otros, considerados de baja actividad o pseudo celulolticos, intervienen en el proceso de degradacin cuando la molcula de celulosa ha sido atacada previamente. Interacciones de microorganismos en la degradacin de la fibra Para degradar la celulosa, los microorganismos se adhieren a las partculas de alimentos y reducen la celulosa en fragmentos con formacin de productos intermediarios que son metabolizados por otros grupos microbianos. Los productos intermediarios de la degradacin de la celulosa son, succinato, hidrgeno y formiato. Los productos finales son acetato y butirato. La fermentacin completa de la celulosa se efecta mediante la accin de una poblacin mixta, que comprende los siguientes grupos fisiolgicos Microorganismos Celulolticos Especies microbianas que fermentan los glcidos producidos por la hidrlisis de la celulosa
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Especies que degradan los compuestos como cido succnico y cido frmico Bacterias metanognicas, que utilizan el hidrgeno metablico o el formato para la formacin de CH4.

Las bacterias celulolticas mas comnmente aisladas y estudiadas son: Fibrobacter succingenes, Butyrivibrio fibrisolvens, Ruminococcus albus, Ruminococcus flavefaciens, Clostridium cellobiosparum, Clostridium lockheadii, Micromonospora ruminantium. Algunos protozoos Entodiniomorfos tienen actividad celuloltica y juegan un papel importante en la fermentacin de la lignocelulosa. Polyplastrom multivesiculatum es el protozoo mas activo en la celulolisis y su presencia puede incrementar hasta en un 10% la digestibilidad de la lignocelulosa. Otros protozoos, Entodinium, estn dotados de una poliglucosidasa de tipo C Otros protozoos con actividad celuloltica son, Eudiplodinium maggii, Epidinium ecaudatum. Los protozoos Holotrichos Isotrichas y Dasytrichas, reducen la degradabilidad de la fibra. Todos los hongos del rumen, aislados e identificados hasta el presente, son celulolticos. Entre ellos tenemos, Neocallimastix frontalis, Sphaeromonas comunis y Piromonas comunis Entre las diferentes especies y cepas de microorganismos celulolticas existen numerosas Inter.relaciones metablicas y asociaciones. Cada especie se caracteriza por una forma particular de penetrar, atacar y colonizar el vegetal. As, por ejemplo, R. Flavefaciens penetra al vegetal por las zonas daadas, pero se adhiere a las clulas de la pared celular del vegetal para producir la degradacin del mismo. Otros microorganismos se adhieren ms rpidamente a la epidermis del vegetal, esclernquima, floema y mesfilo, pero no degrada la pared celular a travs del esclernquima. La presencia de grandes concentraciones de lignina en la pared celular inhibe tanto la adhesin como la digestin. En sentido general, se puede sealar que los primeros organismos que se adhieren a la fibra proporcionan las condiciones para el ataque por los otros. La colonizacin de la fibra en el rumen es rpida y ocurre en minutos.

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Celulosa

Fibrobacter
Fragmentos de celulosa

Fibrobacter

Selenomonas
Acetato + CO2 + H2 CH4 CO2 CO2

CO2
+ Acetato + Formato + succinato

Propionato + Acetato + CO2

Figura 4. Interacciones entre Fibrobacter succingenes y Selenomonas ruminantium en el proceso de fermentacin de la fibra

Factores que modifican la celulolisis ruminal La degradacin de los componentes estructurales de la pared celular es extremadamente variable y depende de varios factores, entre ellos. Inherentes al vegetal. Naturaleza de los carbohidratos estructurales, edad del vegetal, origen botnico de la planta, contenido de lignina, tipo de tejido predominante, parnquima, esclernquima, estado vegetativo, aspectos estructurales del vegetal. Referente a la racin Naturaleza y cantidad de protena en el alimento Disponibilidad en minerales, los cuales condicionan directamente la actividad y el potencial enzimtico Contenido de carbohidratos de fcil fermentacin Estado fsico del alimento, tratamientos tecnolgicos, accin de agentes qumicos o biolgicos, etc

Cualquier factor que modifique la temperatura y el pH de accin de las enzimas celulasas o interfiera en la formacin del complejo enzima- sustrato (ES) Nivel de lignificacin de las plantas Cuando las plantas que ingieren los animales son jvenes, los microorganismos pueden obtener todos los nutrimentos necesarios para cubrir requerimientos, pero a medida que esta envejece aumenta la necesidad de tejidos de sostn y con ellos aumenta el contenido de carbohidratos estructurales, y de lignina., disminuye el contenido vegetal. No solamente ocurren cambios en la cantidad de los componentes qumicos, sino que tambin ocurren cambios en la disposicin espacial de los componentes y la formacin de enlaces entre ellos.

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La lignina y las hemicelulosas forman un enrejado que asla a la celulosa. Esto disminuye la superficie posible de ataque a la celulosa por parte del complejo enzimtico celulasas. Los materiales lignocelulsicos presentan grados de digestibilidad diferentes en dependencia con la relacin lignina/ celulosa que presente. Un ejemplo se muestra en la siguiente tabla. Las gramneas templadas, que presentan un menor contenido de lignina, tienen una mayor digestibilidad. Tabla 1. Digestibilidad de la celulosa en diferentes materiales Material
Alfalfa Gramneas templadas Gramneas tropicales Papa Papel Madera Vegetales

Digestibilidad, %
40-60 48-90 30-60 40-60 20-99 0-40 90-100

Proporcin lignina/celulosa
0.18-0.30 0.08-0.20 0.11-0.24 0.10-0.26 0.20-0.50 0.30-0.60 0-0.05

Las diferentes especies microbianas del rumen actan, preferentemente, sobre un sustrato con especificidad relativa. Esta caracterstica se encuentra estrechamente relacionada con los requerimientos nutricionales de cada especie, y con el grado de lignificacin y contenido celular de los vegetales. Por ejemplo, Ruminococcus albus y Fibrobacter succingenes solubilizan en mayor proporcin el heno de Teff en relacin a Butyrivibrio fibrisolvens, mientras que Fibrobacter succingenes hace una mayor degradacin de la mezcla de gramneas. Tabla 2. Solubilizacin de paredes celulares de plantas por bacterias del rumen Microorganismo
Butyrivibrio fibrisolvens

Sustrato
Heno de Teff Mezcla de gramneas Paja de Barley Heno de Teff Mezcla de gramneas Paja de Barley Heno de Teff Mezcla de gramneas Paja de Barley Heno de Teff Mezcla de gramneas Paja de Barley

Solubilizacin de paredes, %
25 31 20 74 42 26 63 30 35 80 61 42

Ruminococcus albus

Ruminococcus flavefaciens

Fibrobacter succingenes

Nivel de carbohidratos solubles de la dieta Para asegurar una actividad normal de la microflora y para que exista una buena actividad celuloltica en la dieta, deber estar presente cierta cantidad de carbohidratos solubles o fcilmente fermentables. Pequeas cantidades de stos carbohidratos producen un aumento en la digestibilidad de la celulosa, pero cantidades muy grandes la deprimen. Se aduce que estas diferencias en digestibilidad se debe a un aumento en la proliferacin de los organismos que utilizan estos carbohidratos y producen un incremento en la fermentacin de los mismos, con un consecuente cambio en el pH (disminucin) y en el patrn de fermentacin. Esto afecta el normal desarrollo de los microorganismos celulolticos, y por
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ende, la actividad de las enzimas tambin disminuye. Se debe sealar que generalmente, los pastos a la edad en que aproximadamente se debe utilizar, alrededor de 6-7 semanas de edad, presentan cantidades adecuadas de carbohidratos fcilmente fermentables. Nivel de nitrgeno de la dieta Uno de los Nutrientes ms limitantes en la utilizacin de la fibra es el nitrgeno. La deficiencia de nitrgeno disminuye la digestibilidad de la fibra, ya que las bacterias necesitan de este nutriente para sintetizar las enzimas necesarias para su crecimiento y metabolismo. Adems la formacin del conjunto de enzimas que constituyen el complejo celulasas requieren un gasto de energa y nitrgeno alto. Utilizacin del nitrgeno no proteico (NNP) Se conoce que para cubrir los requerimientos de nitrgeno los organismos celulolticos necesitan que parte del nitrgeno est en forma de NNP, porque aunque ellos requieren de aminocidos que le son esenciales, pueden utilizar el amonaco (NH3) para sintetizar sus aminocidos. Asimismo se ha encontrado que parte del nitrgeno total de la dieta debe encontrarse en forma de protena verdadera, ya que sta produce un efecto beneficioso en la digestin de la celulosa. Se han utilizado numerosos compuestos para suministrar el nitrgeno que se requiere en las dietas. En los ltimos aos se ha incrementado la utilizacin de compuestos que liberan NH3 en el rumen, como una forma de suministrar el nitrgeno en la dieta. Los ms utilizados se presentan en la tabla. Todos estos productos tienen en comn la presencia del grupo amonio (NH+ 4) o el amino (NH2), los que se hidrolizan a NH3. Uno de los componentes mas utilizados es la urea, la que se ha encontrado que produce un aumento en la digestibilidad de la celulosa cuando se suministra a los animales que consumen alimento fibrosos de baja calidad. Es importante sealar que con los materiales fibrosos de baja digestibilidad la adicin simultnea de pequeas cantidades de carbohidratos de fcil fermentacin, ayuda a un mejor desarrollo de los microorganismos ruminales. Los AGCC que se forman de la fermentacin de los carbohidratos, junto al NH3 contribuyen a la sntesis de protena microbiana La inclusin de urea incrementa la digestibilidad de la celulosa en la paja de trigo y mazorca de maz. Como se aprecia, los valores de inclusin de 50mg Urea/100ml de lquido ruminal, bajo condiciones in vitro, no se traducen en una mayor degradacin de la celulosa en la paja de trigo, aunque s en la mazorca de maz. Esto nos conduce a informar que la suplementacin con urea con el propsito de incrementar la digestibilidad de la celulosa, depende de la fuente de celulosa especfica, adems de otros factores como son el nivel de carbohidratos solubles de la racin. La suplementacin nitrogenada, ya sea en forma de nitrgeno no proteico (NNP) o de protena verdadera incrementa la digestibilidad y la eficiencia de utilizacin de los forrajes de baja calidad, como resultado de un efecto directo en la poblacin de microorganismos del rumen. Esta afirmacin se fundamenta en que los microorganismos del rumen degradan la urea a amonaco y como resultado, prolifera una amplia gama de microorganismos cuyos requerimientos simples de nitrgeno se cubren por la presencia de NH3. El amonaco as formado y las cadenas carbonadas presentes en el lquido de rumen, provenientes del resto de la dieta, se utilizan para la sntesis de protena microbiana.
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La mxima sntesis de protena microbiana en el rumen se alcanza cuando la concentracin de amonaco se encuentra entre 5-8 mg/100ml. A su vez, estos niveles de amonaco se alcanzan cuando la concentracin de protena bruta (PB) en la dieta es de aproximadamente 12 %. Sin embargo, resulta evidente que los microorganismos del rumen requieren de fuentes de protena verdadera, aminocidos, pptidos y otras formas nitrogenadas. Los aminocidos aportan las cadenas carbonadas para la sntesis de cidos grasos voltiles en el rumen, fundamentalmente, de cadena ramificada o isocidos conocidos como cido isobutrico, cido isovalrico y cido 2-metilbutirato Es bueno sealar que solo los tres aminocidos de cadena corta ramificada (valina, leucina e isoleucina), permiten la produccin de estos isocidos. Las vitaminas del complejo B tambin actan como activadores en el proceso de degradacin de la celulosa en el rumen. As en investigaciones que se realizaron bajo condiciones in vitro, se demostr que la mezcla de cido valrico, Biotina, cido para amino benzoico (PABA) y vitamina B12, producen incrementos en la digestibilidad de la celulosa. Igualmente, el uso de productos biofermentados con base a levaduras tambin incrementa el nmero de microorganismos celulolticos y la actividad de las enzimas secretadas por los mismos. Tabla 3. Efecto de la urea en la actividad celuloltica ruminal % digestibilidad de la celulosa Tratamiento
Control Control + 5mg Urea/100ml Control + 10mg Urea/100ml Control + 25mg Urea/100ml Control + 50mg Urea/100ml
* 2g de paja + lquido de rumen
*

Paja de trigo
30.3 31.6 32.5 36.6 36.6

Mazorca de maz
19.9 21.2 24.7 25.7 29.9

Tabla 4. Efecto de la urea en la actividad celuloltica del rumen Medida

Consumo de MS, Kg/da Digestibilidad de la MS, % Digestibilidad de la celulosa, % Protena bacteriana, mg/100ml Amonaco ruminal, mg/100ml

Paja sola
2.06 31.1 50.0 11.3 1.8

Paja + Urea
2.54 45.4 59.5 17.8 18.2

Paja + Urea + Sacarosa

2.35 40.9 56.3 18.8 10.5

Tabla 5. Efecto de las vitaminas en la digestibilidad de la celulosa Adiciones al medio de cultivo

Biotina y PABA cido Valrico cido valrico + Biotina cido valrico + PABA cido valrico +Biotina + PABA cido valrico +Biotina + PABA + B12 Lquido de rumen centrifugado

% digestibilidad de la celulosa
22.8 41.8 44.3 36.4 56.9 54.6 61.4

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Los rumiantes pueden ser capaces de utilizar diferentes fuentes de NNP. A continuacin se presentan algunas de las fuentes. Tabla 6. Fuentes de NNP para rumiantes
Fuentes Acetato de amonio Bicarbonato de amonio Carbonato de amonio Formiato de amonio Lactato de amonio Solucin de poli fosfato de amonio Sulfato de amonio Biuret puro Biuret comercial (alimento) Fosfato di bsico de amonio Dicianodiamino Glutamina Glicina Guanidina Fosfato monobsico de amonio Sarcosina Urea pura Urea comercial (alimento) Fosfato de urea Frmula NH4 CH3 CO NH4 CO3 (NH4 )CO3 NH4 H CO3 NH4 CH3 CHOHCO2 (NH4 )2SO4 NH2 CONHCONH2 H2 O (NH4)2HPO4 NH2CO(:NH)NHCN NH2CO(NH2)2CHNH2CO2H NH2CH2CO2H NH:C(NH2)2 NH4H2PO4 CH3NHCH2COOH (NH2)2CO (NH2)2COH2PO4 Contenido de N, % 18 18 36 22 13 9-11 21 40.8 37 21 67 19 19 71 12 15 46.7 42-45 17.7

Conclusiones Los animales rumiantes estn preparados para degradar los materiales fibrosos debido a que presentan una variada poblacin microbiana en el rumen capaz de segregar enzimas celulasas. La importancia de manipular esa poblacin y liberar la energa que potencialmente se encuentra dentro de la molcula de celulosa es una de las acciones que requiere mayor destreza dentro de la fisiologa ruminal. La accin de las enzimas celulasas se puede afectar por numerosos factores, tales como adsorcin de la enzima al sustrato, inactivacin de la enzima con el tiempo, pH, temperatura, concentracin de nitrgeno, inhibicin de la enzima con el tiempo de la reaccin, presencia de proteasas producidas por microorganismos, entre otros. Bibliografa a consultar The rumen and its microbes. Hungate, R.E. 1966. New York: Academic Press. Book The roles of protozoa and fungi in ruminant digestion Editors. Armidale, NSW. 2351, Australia: Penambui Books The rumen bacteria of animal fed on a high molasses urea diet. Elas, A. 1971. Thesis Ph.D. Aberdeen. UK. Efecto de la Zeolita en la poblacin de bacterias celulolticas y su actividad en el rumen de animales que consumen ensilaje. Galindo, J. 1988. Tesis Dr Ciencia Veterinarias. Instituto de Ciencia Animal, La Habana, Cuba.
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Microecologa del tracto gastrointestinal de monogstricos.

Dr. Ramn Boucourt Contenido
Introduccin.............................................................................................................................................................................64 1. Principios ecolgicos. ..........................................................................................................................................................65 2. Microecologa del tracto gastrointestinal.............................................................................................................................66 2.1. Composicin de la microflora del TGI. ........................................................................................................................67 2.2. Desarrollo de la microflora intestinal. .........................................................................................................................68 2.3. Papel de la microflora en el TGI. .................................................................................................................................68 2.4. Factores que afectan la correlacin microbiana. .........................................................................................................70

2.4.1. Factores alognicos. .............................................................................................................. 70 2.4.2. Factores autognicos. ............................................................................................................ 72

3. La microflora del TGI y desrdenes intestinales. ................................................................................................................73 4. Influencia de la microflora intestinal para el hospedero ......................................................................................................74 Conclusiones............................................................................................................................................................................75

Introduccin El tracto gastrointestinal (TGI) est habitado por una microflora diversa con ms de 500 especies diferentes, varias de las cuales ejercen efectos positivos sobre el hospedero y que hoy en da son denominadas bacterias probiticas. La flora bacteriana intestinal de los animales domsticos juega un importante papel en la absorcin e ingestin del alimento ingerido por el hospedero. Ellas intervienen en el metabolismo de los nutrientes de la dieta tales como: carbohidratos, lpidos, minerales, as como en la sntesis de vitaminas. Adems de este efecto fisiolgico en la nutricin, las bacterias brindan proteccin contra ciertas enfermedades e infecciones mediante la supresin del crecimiento de microorganismos patgenos. Las infecciones gastrointestinales constituyen uno de los principales problemas de salud que afectan, a nivel mundial, tanto a los animales como a los nios y adultos. De ah que, el establecimiento de una microflora intestinal completa es esencial para un buen estado y funcionamiento del TGI. Por lo tanto,

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es sumamente necesario conocer todos los mecanismos y relaciones que se establecen en el ecosistema del TGI para poder mejorar la calidad de vida del ser humano y de los animales. La Ecologa Microbiana es la ciencia que se dedica al estudio de este ecosistema altamente complejo, el cual constituye el tema de anlisis abordado en esta conferencia. Para ello, primeramente haremos un breve recuento de los aspectos ms importantes de la ecologa moderna para posteriormente abundar en la ecologa del TGI. 1. Principios ecolgicos. La ecologa microbiana abarca todo lo concerniente con las interrelaciones que se establecen entre los microorganismos y el ambiente en que estos se desarrollan (Alexander, 1971). El complejo de organismos en un ambiente especfico y los factores abiticos con los cuales estos organismos estn asociados son conocidos como un ecosistema. El ecosistema incluye el ensamblaje de especies y los constituyentes orgnicos e inorgnicos caracterizando el sitio en particular. Cada ecosistema diferente tiene una coleccin de organismos y componentes abiticos nicos para l. Los organismos que habitan un sitio dado constituyen una comunidad. Dentro de esta es posible distinguir varias categoras de microorganismos. Los verdaderos habitantes, frecuentemente designados como especies indgenas o autctonas, son nativos del lugar y en una etapa u otra ellos crecen, se multiplican y contribuyen al metabolismo de la comunidad. La mera presencia de una especie en particular por s misma no garantiza que esta sea un miembro permanente o funcional de la comunidad. Muchos microorganismos son fcilmente diseminados y muchos invasores o alctonos se originan en cualquier parte y pueden ser transportados a un ambiente en estado vegetativo o resistente. Ciertas especies no indgenas pueden crecer por cortos perodos de tiempo debido ha que son depositados en su nuevo domicilio temporal con nutrientes o tejidos derivados de su viejo ambiente y algunos son capaces de explotar una parte de los recursos del nuevo hbitat. En la comunidad existe una especie dominante que es la que exhibe la mayor talla poblacional aunque frecuentemente las comunidades contienen 2 o ms codominantes. Cada microorganismo ocupa un hbitat determinado, el cual est dado por el espacio fsico que ocupa en el ecosistema. El papel que

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juega cada microorganismo en su hbitat se denomina nicho. El nicho no es una connotacin de la posicin de un organismo sino ms bien de la funcin que este desempea en la comunidad.

2. Microecologa del tracto gastrointestinal. Despus del tracto respiratorio, el TGI constituye la mayor superficie del cuerpo (250-400m2) que comunica a este con el mundo exterior y es habitado por una rica microflora con ms de 500 especies bacterianas diferentes, muchas de las cuales ejercen importantes funciones en el organismo. Estas bacterias pueden ser clasificadas en dos tipos: aquellas nativas del lugar denominadas indgenas y otras capaces de vivir por cortos perodos de tiempo denominadas microorganismos transientes. Por ejemplo, nuestro cuerpo contiene 10 veces ms bacterias indgenas protectoras que clulas eucariotas y se ha sugerido que la misma pudiera ser considerada como parte del cuerpo humano. La microflora que habita el tracto gastrointestinal forma un ecosistema altamente complejo que a pesar de ser abierto es muy estable (Jonsson, 1985, Fuller, 1989). Existen interacciones entre el animal y su microflora y entre los microorganismos que componen esta ltima. Aqu se cumplen los dos postulados de la ecologa bacteriana: la inoculacin de especies exticas no puede cambiar el nmero y la composicin de un ecosistema abierto; y la composicin de nmero y la composicin dentro de la microflora pueden ser cambiados por variaciones en el ambiente (Hungate, 1984). Segn el autor el nmero de la microflora intestinal puede cambiar en el tiempo sin que ocurra una variacin discernible en el ambiente. Es decir, las condiciones no son estticas sino que fluctan. Las cepas mutantes aparecen constantemente, algunas encuentran un nicho y reemplazan a otras, ms tarde estas son reemplazadas y as sucesivamente. En el TGI las bacterias se encuentran provistas de un suplemento constante de nutrientes y mantenidas a una temperatura estable por el hospedero. Ellas tienen que luchar contra el lavado que efecta el flujo de la digesta, contra los mecanismos de defensa del hospedero y competir con otros microorganismos por nutrientes y espacio (Jonsson, 1985). Cuando el alimento es ingerido, el oxgeno tambin puede entrar al sistema y ser consumido por la microbiota de la parte anterior del tracto. Aunque la anaerobiosis incrementa hacia las secciones posteriores de este, aquellos microorganismos que estn estrechamente asociados con el epitelio pueden disponer del oxgeno, el cual difunde desde la sangre.

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Las bacterias pueden ser encontradas viviendo libremente en el lumen, unidas a las partculas del alimento o al epitelio. La unin al epitelio puede ser por asociacin con el mucus o por la adhesin verdadera a las clulas del epitelio escamoso estratificado o al epitelio columnar (Savage, 1980). Aquellas bacterias que viven libremente en el intestino pueden permanecer aqu siempre y cuando su velocidad de crecimiento sea mayor o igual a la velocidad de pasaje de la digesta, de lo contrario son expulsadas al exterior. La unin al epitelio constituye un recurso que le permite al microorganismo mantenerse en el intestino an a una velocidad de multiplicacin baja, as como, tener acceso a otros nichos.

2.1. Composicin de la microflora del TGI. El nmero y la composicin de la microflora varan considerablemente a lo largo del TGI (Salminen et al., 1998). El conteo de bacterias totales en el contenido gstrico est por debajo de 103/g, debido al pH cido del lumen. En el intestino delgado el nmero oscila entre 104/g a 107/g en la regin ileocecal, los principales factores limitantes del crecimiento aqu son el rpido trnsito de la digesta y la secrecin de bilis y jugo pancretico. El intestino grueso constituye el sitio ideal para el crecimiento microbiano. Varios cientos de especies se encuentran presentes con un nmero tpico de alrededor de 1011-1012/g. En los organismos saludables la microflora se encuentra en un estado de balance denominado eubiosis, lo que le permite crecer en una simbiosis beneficiosa con el hospedero. Segn Gedek (1989) existen tres tipos de microflora que caracterizan el estado eubisico de la flora gastrointestinal de los animales de granja. Flora principal: representa ms del 90% de la flora total, principalmente anaerobios obligados, predominan las bacterias formadoras de cido lctico: Bifidobacterium y Lactobacillus y las formadoras de cidos grasos de cadena corta (AGCC): Bacteriodiceae y Eubacterium. Flora satlite o secundaria: ocupa menos del 1%, son anaerobios facultativos, fundamentalmente E. coli y Enteroccoci. Flora residual o secundaria: representa menos del 0,01%. Se ubican aqu: Clostridium, Proteus, Staphilococcus, Pseudomonas, levaduras del gnero Cndida, bacterias no patgenas y facultativas

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Cualquier cambio del balance a favor de la flora secundaria o remanente trae consigo un estado desbalanceado denominado disbisico el cual afecta el funcionamiento del organismo. La composicin de la flora gastrointestinal humana ya establecida en un individuo sano aparece en la tabla 1. Tabla 1. Composicin de la flora normal del tracto gastrointestinal (Salminen et al., 1995).

Microorganismos
Conteo total Bacteroides Bifidobacterium Lactobacilos Estreptococos (anaerob) Clostridios Eubacterias Enterobacterium Estreptococos (aerobio) Levaduras

Microorganismos (UFC/ml oUFC/g) Estmago Yeyuno Ileon Colon

0-103 0-103 0-102 0-103 0-102 0-105 0-103 0-104 0-103 0-103 0-103 0-104 0-102 103-109 0-103 103-109 102-105 102-106 102-104 102-107 102-105 102-104 1010-1012 103-107 108-1011 104-109 1010-1012 106-1011 109-1012 104-109 104-109 104-106

- No detectados o muy raramente.

2.2. Desarrollo de la microflora intestinal. La formacin de la microflora intestinal normal comienza en el nacimiento cuando el recin nacido es contaminado por los microorganismos del tracto urogenital de la madre. Las bacterias comienzan a aparecer en las heces en los primeros das de vida. Los primeros microorganismos son usualmente microaeroflicos y aerobios lactobacilos, estreptococos y otras bacterias productoras de cido (Mikelsaar y Mndar, 1993). Escherichia coli y enterococos son aislados frecuentemente en meconio. Bacteroides y Bifidobacterium colonizan el intestino dentro de unos pocos das (Lejeune et al., 1984). Despus del nacimiento, el tracto gastrointestinal desarrolla una compleja y diversa microbiota con un perfil de bacterias anaerobias dominantes el cual es alcanzado dentro de los primeros cuatro aos de vida (Mikelsaar y Mndar, 1993).

2.3. Papel de la microflora en el TGI. El principal papel de la microflora intestinal es salvar la energa de los carbohidratos no digeridos en el intestino superior, a travs de la fermentacin (Salminen et al., 1998). Los principales sustratos para la

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fermentacin son los carbohidratos de la dieta que escapan a la digestin por las enzimas del hospedero, estos incluyen almidones resistentes, polisacridos no almidonados (celulosa, hemicelulosa, pectina y gomas), oligosacridos no digestibles, varios azcares y azcares-alcoholes (Cummings et al., 1997). Los principales productos de esta fermentacin son los cidos grasos de cadena corta (AGCC) fundamentalmente acetato, propionato y butirato los cuales constituyen los principales aniones en el intestino. Otros productos finales de la fermentacin de los carbohidratos incluyen lactato, etanol, succinato, etc. Los AGCC son rpidamente absorbidos del intestino y estimulan la absorcin de sales y agua. Ellos son entonces metabolizados principalmente por el epitelio intestinal, hgado y msculo con virtualmente ninguna aparicin en la orina y pequeas cantidades en las heces. Una de sus propiedades ms importantes la constituye su efecto trfico en el epitelio, siendo el butirato el ms efectivo en este sentido. El acetato es el principal AGCC en el intestino. Este es tomado por el epitelio y aparece en la sangre portal, posteriormente pasa a travs del hgado a los tejidos perifricos donde es metabolizado por el msculo. Esta constituye la principal ruta por la cual el cuerpo obtiene energa de los carbohidratos no digeridos y absorbidos en el intestino delgado. En las especies rumiantes, el propionato es el principal precursor de la glucosa pero este no es un papel importante en especies como el hombre. En experimentos in vitro el propionato inhibe la entrada de acetato en la va de sntesis de colesterol, y en ratas y cerdos, la inclusin de propionato en la dieta disminuye los niveles de colesterol en sangre, pero en humano existen muy pocos reportes de que esto ocurra (Stephen, 1994). El butirato es el ms interesante de loa AGCC, adems de su efecto trfico en la mucosa, constituye la principal fuente de energa para el epitelio del colon y regula el crecimiento y la diferenciacin celular (Salminen et al., 1998). Las protenas y aminocidos tambin son efectivos como sustratos de crecimiento de las bacterias del colon. Estos incluyen elastina, colgeno y albmina, protenas bacterianas liberadas luego de la lisis celular, enzimas pancreticas, clulas epiteliales descamadas y mucina, entre otros. Como productos finales del metabolismo bacteriano de las protenas se encuentran los cidos grasos de cadena ramificada como el isobutirato, isovalerato y otros productos como aminas, indoles, fenoles, amonaco, los cuales pueden tener propiedades txicas para el organismo (Macfarlane & Marcfarlane, 1995).

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La microflora tambin influye sobre el metabolismo de los lpidos. Se conoce que las bacterias sintetizan cidos grasos de novo y modifican los ingeridos en la dieta. Por otra parte, desconjugan las sales biliares, disminuyendo de esta forma su absorcin, afectando por tanto, el metabolismo del colesterol, lo que provoca la disminucin de sus niveles en sangre, aspecto este ventajoso para el hospedero. Sin embargo, otros autores plantean tambin que los cidos desconjugados pueden ejercer efectos nocivos como son: la inhibicin de las funciones de las clulas mucosales incluido el transporte activo de los azcares y aminocidos. En adicin a su papel fermentativo, los microorganismos intestinales pueden contribuir a la salud de otras maneras. El desarrollo de esta microflora provee las bases para una barrera que previene la invasin del tracto gastrointestinal por microorganismos patgenos, por otra parte, las bacterias intestinales estn involucradas en la sntesis de vitaminas (especialmente vitamina B y K) y en el metabolismo de xenobiticos. En los ltimos aos ha tenido un gran impacto el hecho de que los microorganismos indgenas promuevan la estimulacin del sistema inmune en el TGI (Perdign et al., 1995).

2.4. Factores que afectan la correlacin microbiana. La microflora del TGI est sujeta a diversos factores los cuales influyen en su composicin y nmero, ya sea por restriccin del crecimiento de unos microorganismos o por favorecer este en otros. Estos factores pueden ser agrupados en dos grupos: alognicos y autognicos (Savage, 1984). Los primeros son aquellos que estn relacionados con el hospedero mientras los segundos estn vinculados a la propia microflora.

2.4.1. Factores alognicos. Entre los factores incluidos en este grupo se encuentran: Estrs: Segn Ito (1981) se entiende por estrs al conjunto de reacciones las cuales son causadas por mltiples hormonas secretadas bajo la influencia de estresores, los cuales pueden ser de origen biolgico (inanicin, fatiga bacterias), fsico (calor, fro), qumicos entre otros. Estas hormonas secretadas alteran las condiciones fisiolgicas del organismo, afectando por lo tanto, la flora intestinal del mismo. Susuki et al., (1989) sometieron pollos a un estrs calrico y demostraron que este ejerca
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cambios en la composicin de la flora del TGI patgenos.

favoreciendo el desarrollo de microorganismos

pH: Cada microorganismo requiere de condiciones especficas para su ptimo desarrollo y crecimiento, y una de ellas es el pH. Se conoce que a valores bajos de pH la mayora de las bacterias entricas mueren, debido a la destruccin de las enzimas o a la prdida de la funcin de las mismas, as como a afectaciones en el transporte intracelular (Newman y Jackes, 1995). Las bacterias cido lcticas son las ms resistentes. Si se obstruye la secrecin de HCl, entonces el nmero de bacterias capaces de pasar hacia el intestino delgado incrementa. En el intestino grueso donde los niveles de pH son mayores, se favorece el desarrollo de los microorganismos. Dieta: El tipo de dieta es uno de los factores que controla grandemente la composicin de las especies microbianas presentes en TGI (Salminen et al., 1995). As por ejemplo, la flora fecal de los bebs alimentados con pecho es dominada por bifidobacterias, en contraste con los bebs alimentados con frmulas que presentan una microbiota ms compleja compuesta de bifidobacterias, bacteroides, clostridios y estreptococos, todos dominantes. Muchos estudios se han realizado, en los cuales se compara la composicin de la flora intestinal entre individuos con diferentes hbitos alimentarios encontrndose diferencias en cuanto al nmero de microorganismos Edad: En dependencia de la edad del individuo varan las caractersticas fisiolgicas del mismo y esto, a su vez, repercute en la microflora. Cuando se explicaba como se desarrolla la flora gastrointestinal se mencionaba como durante los primeros cuatro aos de vida, la microflora intestinal se iba desarrollando progresivamente hasta alcanzar un perfil tpico del estado adulto. Bertazzoni-Minelli et al., (1993) estudiaron la relacin entre la composicin fecal y la edad en la mujer. En las mujeres posmenopusicas las muestras fecales contenan ms hongos, clostridios y lactobacilos cuando se comparaban con muestras de mujeres frtiles, sugirindose que los patrones esteroides pueden influir en la flora fecal. Sistema inmune: Este tiene probablemente como efecto ms importante en el TGI la produccin de IgA, una inmunoglobulina que posee un componente secretorio, el cual le permite la asociacin con el mucus del epitelio y le confiere resistencia a la degradacin enzimtica. Esta IgA acta cubriendo la superficie de la bacteria, impidiendo de esta forma la adhesin de las mismas al epitelio y facilitando su identificacin por clulas fagocticas.

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Peristalsis: Es un factor importante que permite al hospedero mantener la microflora en un rango determinado. Una detencin de este movimiento provocara un sobrecrecimiento de las bacterias en el intestino, lo que conllevara severos problemas para el hospedero como son: mala absorcin de lpidos, daos a la mucosa etc. Antibiticos: La terapia antimicrobiana induce rpidos y profundos cambios en la microflora intestinal (Salminen et al., 1995). Los antibiticos no son selectivos, por lo que el uso de los mismos daa la flora protectora y predispone a enfermedades posteriores (Bengmark, 1998). Varios estudios indican que el desarrollo de infecciones spticas con especies gram-negativas aerobias est precedido por el uso de antibiticos (Bennet et al., 1987). Se ha observado que la diarrea asociada a C. Difficile ocurre como una secuela al tratamiento de antibiticos como metronidazol y vancomicina (Bennet et al., 1996).

2.4.2. Factores autognicos. Los factores autognicos, los cuales permiten la autorregulacin de la microbiota son menos entendidos. Entre ellos se encuentran: Competencia por nutrientes: La hiptesis que se refiere a la competencia por nutrientes como responsable para la exclusin de microorganismos no indgenas est basada en una serie de observaciones que indican que los mecanismos de control de las poblaciones bacterianas en el intestino, concuerdan con la teora del quimiostato, la cual plantea que en una mezcla de bacterias en un cultivo de flujo continuo, las mismas compiten por los nutrientes esenciales para el crecimiento (Hentges, 1992). En 1983, Freter et al., demostraron que la multiplicacin de E. coli, Fusobacterium spp y Eubacterium spp fue grandemente suprimida cuando los microorganismos fueron inoculados individualmente en un filtrado de un cultivo continuo de flora cecal de ratones. El principal factor limitante de la multiplicacin de estos microorganismos fue la escasez de una fuente de carbohidratos utilizable. Produccin de metabolitos inhibidores: Existen evidencias de que los metabolitos txicos tales como: H2S, cidos biliares libres, AGCC, H2O2, amonio, protenas antimicrobianas impiden el desarrollo de las bacterias patgenas ya sea por actuar directamente sobre los microorganismos o por crear condiciones ambientales desfavorables a este como son la disminucin del pH y del potencial redox. Se sabe que los AGCC son txicos para las bacterias gram (-) (Newman et al., 1990).

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Competencia por los sitios de asociacin: Para sobrevivir en el ecosistema del tracto, muchos microorganismos estn obligados a asociarse con la mucosa intestinal. Segn Fuller (1990), esta unin permite a los microorganismos impedir que sean lavados del intestino por el flujo peristltico. Se ha planteado que dos o ms cepas bacterianas que compiten por un mismo nutriente limitante pueden coexistir si la cepa menos eficiente metablicamente encuentra algn sitio de adhesin disponible en el epitelio (Freter et al., 1983). Existen evidencias de que las bacterias cido lcticas tienen la habilidad de competir exitosamente por sitios de adhesin con patgenos como E. coli (Newman y Jacques, 1995). No todas las relaciones que se producen son adversas, sino que tambin se desarrollan relaciones de cooperacin como por ejemplo: un microorganismo convierte un sustrato no disponible a otro microorganismo, en un producto que si puede ser asimilado por este ltimo. Tal es el caso de las bacterias celulolticas que descomponen la fibra hasta glucosa, la cual si puede ser degradada por las dems bacterias del intestino. Adems, muchos microorganismos sintetizan vitaminas que pueden ser aprovechadas por otros que tambin la necesitan pero no son capaces de producirlas. Todas estas interrelaciones hacen posible la regulacin de la microflora intestinal de forma tal que esta se mantenga en condiciones de equilibrio. 3. La microflora del TGI y desrdenes intestinales. Una variedad de cambios en la flora intestinal normal han sido descritos durante los desrdenes intestinales (Tabla 2). Los principales patgenos causantes de esta infecciones son virus y bacterias tales como E. Coli, Campilobacter sp, Vibrio cholerae, S. aureus, Bacillus cereus, Clostridium perfringens, Salmonella sp, Shigella sp entre otras. Estos microorganismos pueden secretar enterotoxinas o invadir la pared intestinal. Tabla 2. Ejemplos de diferentes desrdenes intestinales y cambios ocurridos en la microflora intestinal. (Salminen et al., 1995). Desorden
Colitis pseudomembranosa Diarrea aguda Diarrea crnica Costipacin Gastritis

Cambio caracterstico en la microflora fecal

Sobrecrecimiento de Clostridium difficile productor de toxinas. Patgenos entricos o virus en heces. Decrecen los anaerobios totales e incrementan los anaerobios facultativos. Decrecen las bacterias productoras de cidos. Helicobacter pylori en la mucosa gstrica.
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Radioterapia plvica/colitis

Invasin de bacterias intestinales a la mucosa.

Un interesante estudio fue realizado con nios de Kenya en el cual se compara la composicin de la microflora intestinal y otras caractersticas en nios aquejados de diarrea infecciosa y una vez recuperados (Tabla 3). Los datos demuestran como se afecta la microflora intestinal durante el transcurso de la infeccin, con una disminucin de la flora protectora. Tabla 3. Caractersticas fsico-qumicas y microorganismos de muestras fecales en nios de Kenya durante la diarrea y despus de recuperados (Salminen et al., 1995). Caracterstica ph Contenido de agua AGCC Acidos biliares Conteo total de anaerobios Conteo total de aerobios Conteo de lactobacilos Conteo de bacteroides Recuperados 5.4 60% Solamente pocos tipos Conjugadas primarias Alto Bajo Alto Alto Diarrea 6.8 85% Varios tipos Libres secundarias Decrece Incrementa Decrece Decrece

4. Influencia de la microflora intestinal para el hospedero El uso de animales libres de grmenes ha mostrado que la presencia de los microorganismos en el tracto gastrointestinal provoca cambios en la morfologa y funcin del tracto, as como cambios en la fisiologa del hospedero. En el TGI de los animales convencionales se ha observado un estado inflamatorio benigno, con mayor cantidad de tejido conectivo en la lmina propia y mayor cantidad de elementos retculos endoteliales en el intestino delgado que en los animales libres de grmenes. La estructura de las vellosidades es tambin modificada. Los animales libres de grmenes tienen los vellos ms alargados (en forma de dedos) y ms regulares. En estos animales adems, las clulas mucosales son ms grandes y contienen mayores niveles de enzimas digestivas (Savage y Whitt, 1982). Estas mismas clulas en los animales convencionales cambian su forma de columnar a ms cuboides y el borde de brocha est menos definido y con microvellosidades cortas. La velocidad de pasaje de la digesta es mayor en este estado.

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Por otra parte, la acidez y el potencial redox son ms elevados en los animales libres de grmenes, lo cual afecta la absorcin de minerales. El hierro se absorbe poco mientras el calcio es absorbido y retenido a niveles superiores (Jonsson, 1985).

Conclusiones La microflora del TGI forma un ecosistema abierto y de gran complejidad en el cual se cumplen los El nmero de microorganismos incrementa a lo largo del TGI y la composicin vara en las diferentes

principios de la ecologa moderna. partes. Las bacterias pueden ser encontradas en el lumen tanto de forma libre como adheridas a las partculas del alimento o al epitelio. Los microorganismos que habitan en el TGI realizan diversas funciones que pueden repercutir tanto de forma negativa como positiva en el hospedero. Por lo que el estudio y comprensin de este ecosistema es de gran valor para la salud y produccin animal. La microflora del TGI est regulada por dos tipos de factores: los que ocurren dentro de la propia microflora y aquellos que son inherentes al hospedero. BIBLIOGRAFA Alexander, M. 1971; Microbial Ecology; John Wiley y Son, Inc. New York, London, Sydney, Toronto. Bengmark, S. 1998; Ecological control of the gastrointestinal tract. The role of probiotic flora; Gut, 42: 2-7. Bennett, R.; Erikson, M. & Zetterstrom, R. 1987; Bacterial etiology of neonatal septicemia in relation to prior antibiotic treatment; Acta Paediatr. Scand. 76:673-674. Bennett, R. G.; Gorbach, L. S.; Goldin, B. R.; Chan, T.W.; Laughon, B. E.; Greenough, W. B. & Bartlett, J.G. 1996; Treatment of relapsing Clostridium difficile diarrhea with Lactobacillus GG; Nutri. Today 31(6): 35S-38S. Bertazzoni-Minelli, E.; Benini, A.; Beghini, A.; Cerrutti, R. 6 Nardo, G. 1993; Bacterial flora in healthy women of differnts ages; Microb. Ecol. Health Dis. 6:43-52.

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Seccin II Digestin y Asorcin de Nutrientes

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VI Metabolismo de los carbohidratos y absorcin de los cidos grasos voltiles (AGV) en el rumen
Dra. Denia Delgado Fernndez Contenido
Introduccin.............................................................................................................................................................................79 Los principales carbohidratos de las plantas............................................................................................................................80 Funciones de los carbohidratos................................................................................................................................................80 Carbohidratos no estructurales. ..........................................................................................................................................80 Carbohidratos estructurales ................................................................................................................................................81

Celulosa........................................................................................................................................... 82 Hemicelulosas ................................................................................................................................. 82 Sustancias pcticas.......................................................................................................................... 82 Lignina ............................................................................................................................................ 83

Digestin microbiana de los hidratos de carbono. ..............................................................................................................83 El metabolismo de los hidratos de carbono en los rumiantes. Formacin de AGV.................................................................84 Formacin de acetato. .........................................................................................................................................................85 Formacin de propionato. ...................................................................................................................................................85 Formacin de butirato. ........................................................................................................................................................86 Metanognesis .........................................................................................................................................................................86 Inhibidores de la metanognesis ..............................................................................................................................................88 Metano.....................................................................................................................................................................................88 Interconversin de AGV en el rumen ......................................................................................................................................88 Succinato .............................................................................................................................................................................88 Patrn de fermentacin ruminal...............................................................................................................................................89 Efecto del sustrato. ..............................................................................................................................................................90 Interrelacin sustrato-PH-microorganismos.......................................................................................................................90 Utilizacin de los AGV ...........................................................................................................................................................91 Mtodos para medir la produccin de AGV en el rumen. .......................................................................................................92 Procesos fisiolgicos que acompaan a la absorcin..............................................................................................................92 Absorcin de AGV ..................................................................................................................................................................93 Conclusiones............................................................................................................................................................................95 Bibliografa a consultar............................................................................................................................................................95

Introduccin Las partes areas de las plantas consisten en fracciones ricas en fibra que no pueden ser utilizadas por el hombre porque no posee enzimas en su tracto digestivo capaces de romper los enlaces que enlazan los azcares sencillos en grandes cadenas para formar los polisacridos estructurales celulosa y hemicelulosa. Los herbvoros, especialmente los rumiantes, son los animales ms efectivos en degradar los materiales fibrosos debido a la estructura de su estmago donde habitan en su primera porcin (rumen) una gran variedad de microorganismos que producen las enzimas necesarias para digerir los compuestos fibrosos y hacerlos aprovechables por el animal. La fermentacin de los carbohidratos en el rumen produce fundamentalmente cidos orgnicos de cadena corta (cidos grasos voltiles, AGV) que son la principal fuente de energa de los rumiantes. Adems estos compuestos son precursores de la grasa y la lactosa de la leche.
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Existen interacciones entre la dieta, el manejo, el PH ruminal y otros muchos factores que determinan el patrn de fermentacin que se establece en el rumen, lo cual influye grandemente en los indicadores productivos de los animales. El objetivo de esta conferencia est encaminado a profundizar en el conocimiento de la utilizacin de los carbohidratos de las plantas por el rumiante, el metabolismo ruminal y la manipulacin de los patrones de fermentacin con el fin de mejorar la eficiencia de los sistemas productivos tropicales. Los principales carbohidratos de las plantas Los carbohidratos son los compuestos ms abundantes en las plantas. Ellos producen alrededor del 5080 % de la materia seca de los forrajes y son extremadamente importantes desde el punto de vista nutricional, porque constituyen la fuente primaria de energa en las dietas de los rumiantes (Moore y Hatfield, 1994). La palabra Carbohidrato se deriva del francs hidrate de carbone y en un principio se aplic a los compuestos qumicos neutros formados por carbono (C), hidrgeno (H) y oxgeno (O), en los que estos ltimos elementos se encontraban en proporciones iguales que en el agua. Esta definicin todava es vlida, pero en la actualidad se incluyen dentro del grupo cierto nmero de derivados de los azcares y sus polmeros. Los carbohidratos segn el nmero de molculas que los componen se clasifican en: Monoscaridos: Azcares sencillos. La mayora de los monosacridos naturales se dividen pentosas (5 tomos de carbono) y hexosas (6 tomos de carbono). Se caracterizan por tener sabor dulce, son solubles en agua y pticamente activos. Los azcares sencillos se pueden unir en grupos de dos (disacridos), de tres, (trisacridos), etc. Olisacridos: (oligo = Poco). Son aquellas cadenas carbonadas formadas por la unin de un grupo de monosacridos. Pueden tener hasta alrededor de 20 residuos de azcares. Polisacridos: Carbohidratos macromoleculares. Se clasifican de acuerdo con las clase de azcar que producen al ser hidrolisados. Por ejemplo, las glucosanas son polmeros formados por cadenas de glucosa, las fructosanas, por cadenas de fructosa y as respectivamente. Entre los polisacridos tambin se encuentran las pectinas, gomas, muclagos y sustancias similares Heteropolisacridos: Son polisacridos mixtos que se producen por hidrlisis, son mezclas de monosacridos y productos derivados. Funciones de los carbohidratos Los carbohidratos en las plantas tienen las funciones primarias de servir como sustancias energticas de almacenamiento o como sostn en las estructuras rgidas de los vegetales, por lo que usualmente se clasifican en carbohidratos estructurales y no estructurales. Carbohidratos no estructurales.

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La glucosa, fructosa y sacarosa y los polisacridos de almacenamiento almidn y fructosanas son los principales carbohidratos no estructurales presentes en los tejidos vegetales. Su concentracin depende de la especies de plantas y de factores ambientales que afectan el crecimiento de stas (luz, temperatura, estado nutricional). La sacarosa y otros azcares solubles, generalmente, se encuentran en concentraciones ms altas en las leguminosas que en las gramneas y en pastos templados que en pastos tropicales Estos carbohidratos son solubles en agua y representan una fuente de energa rpidamente disponible para los microorganismos ruminales. El valor energtico potencial de los carbohidratos es de 4 kcal de energa/gramo aproximadamente. Los forrajes con altos niveles de CHO solubles usualmente son los ms digestibles. El almidn es la principal sustancia de almacenamiento de energa en las plantas. Es un polisacrido compuesto de unidades de -D-glucosa y se presenta en dos formas: amilosa y amilopectina. La amilosa es una cadena linear de unidades de -D-glucosa unidas por enlace 1-4. Tiene un peso molecular relativamente bajo, con menos de 2000 residuos de glucosa por molcula. La amilosa es soluble en agua y toma una conformacin helicoidal en solucin. La amilopectina es una molcula altamente ramificada con cadenas de -D-glucosa unidas por enlaces 1-4 y 1-6. Es ms pesada que la amilosa y generalmente contiene entre 2,000 y 220,000 residuos de glucosa. La solubilidad del almidn es variable en agua en dependencia de su contenido en amilopectina (Hacker, 1981). Los carbohidratos de almacenamiento, segn su naturaleza, permiten dividir las plantas por especies: Las leguminosas tropicales y templadas (plantas C4) acumulan almidn y sacarosa. En las leguminosas el almidn se almacena en hojas y tallos, pero en las gramneas tropicales las altas concentraciones de almidn se encuentran en las hojas. El almidn que se acumula en las hojas y tallos de las leguminosas y gramneas tropicales es poco soluble en agua y en el fluido ruminal. Las gramneas templadas (plantas C3) acumulan sacarosa y fructosanas ms que almidn, fundamentalmente en los tallos. La presencia de estos carbohidratos solubles incrementa la densidad de energtica de la dieta, por lo que mejora el suministro de energa en el rumen y determina la cantidad de protena bacteriana producida. Sin embargo, no estimulan la rumiacin o la produccin de saliva y cuando se encuentran en exceso pueden inhibir la fermentacin de fibra (Wattiaux y Armentano, 1996). Carbohidratos estructurales Los polisacridos celulosa ( 1-4 D glucosa), hemicelulosas ( 1-4 D xilopiranosa, 1-4 D- glucosa y D- manosa) y las sustancias pcticas ( 1-4 D-cidos galacturnico, galactanos y arabanos) son los carbohidratos estructurales que forman las paredes celulares de las plantas. Ellos representan entre el 30-80 % de la materia seca del forraje y determinan su calidad. Los carbohidratos fibrosos constituyen la principal fuente de energa para los rumiantes. Sin embargo, para obtener esta energa, necesitan romper los enlaces 1-4 que unen los azcares en largas cadenas. Los animales superiores no producen las enzimas necesarias para realizar esta funcin, por lo que el proceso tiene lugar gracias a la gran poblacin microbiana que habita en el rumen y que secreta estas enzimas. Las paredes celulares de las plantas tambin contienen en menores proporciones taninos, protenas, minerales y lignina, los que afectan la digestin de la celulosa y las hemicelulosas en el rumen.
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Celulosa. La celulosa es el carbohidrato ms abundante en la naturaleza. Representa entre el 4-20 % de las plantas superiores. Se forma por unidades de glucosa que se enlazan unas a otras por el carbono 1 de una molcula y el carbono C4 de la otra, en posicin 1-4-glucsdicos muy estables. Los poliscridos celulsicos pueden llegar a tener hasta 15,000 unidades de glucosa. Las asociaciones entre cadenas se estabilizan por puentes de hidrgeno. La celulosa pura es una rareza biolgica en la naturaleza y slo est presente en . algunas fibras, como por ejemplo el algodn. Las molculas de glucosa estn ordenadas en formas de microfibrillas y pueden contener adems de los 1-4-glucanos, pentosanas, cutina y slice. El proceso de transformacin bioqumica de la celulosa en COH solubles lo llevan a cabo los microorganismos ruminales y se conoce por celulolisis ruminal. La celulolisis es el hecho ms sobresaliente de la digestin de los rumiantes. Las bacterias y los hongos celulolticos producen un complejo de 1-4 glucosidasas que hidrolizan la celulosa a cadenas lineales de anhidroglucosa, glucosa, oligosacridos y celobiosa, la cual finalmente se degrada hasta glucosa 1-fosfato por un mecanismo fosforoltico (fig. 1 ). Los productos de la fermentacin de la celulosa en el rumen varan en dependencia de los microorganismos predominantes, pero en general se reconocen los cidos grasos voltiles (frmico, actico, butrico, succnico, lctico ), etanol CO2 y H2. Hemicelulosas Las hemicelulosas son polisacridos complejos. Su factor comn es el enlace 1-4 en el ncleo central del polmero de xilano, aunque las ramificaciones ocurren otros tipos de enlaces glucosdicos. En los forrajes de mala calidad, de la familia Grammineae, los xilanos son predominantes y tambin estn presentes galactosa, manosa, y glucosa en pequeas cantidades. Los microorganismos ruminales degradan las hemicelulosas. Su digestin transcurre de forma muy similar a la de la celulosa. Las enzimas de la hidrlisis de las pentosas catalizan la ruptura de los enlaces 1-4 xilosdicos para producir xilosa, xilo-oligosacridos y xilobiosa. La hidrlisis de la xilobiosa tambin produce xilosa. La xilosa se degrada por la va de las pentosas hasta formar fructosa 6-fosfato y triosa- fosfato, los cuales se convierten va glicoltixca, en compuestos de tres carbonos (Fig. 1).

Sustancias pcticas Son macromolculas poliscaridas filamentosas de alto peso molecular , formadas fundamentalmente por arabanos, galactanos y mananos, enlzados con cidos poliurnicos. Son ms abundantes en las plantas dicotiledneas, fundamentalmente en los frutos y en los forrajes de leguminosas. Son muy solubles. Se degradan fcilmente en el rumen y producen metanol, oligournidos, cidos galacturnicos (Acidos pctico y pectnico) y azcares simples. La poligalacturinasa cataliza la
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hidrlisis de los enlaces 1-4glucosdicos de las sustancias pcticas para formar los cidos galacturnicos. La posterior fermentacin de estos involucra la formacin de pentosas y su fermentacin es similar a lo descrito anteriormente para estos compuestos Lignina La lignina es una macromolcula tridimensional cuyos principales precursores son compuestos fenlicos, principalmente los alcoholes p-coumaril, coniferil y sinapil. La lignina est enlazada a los polisacridos estructurales. Es prcticamente indigestible. Su digestin requiere de un proceso oxidativo que no ocurre en el rumen, sin embargo, en la actualidad se reconoce que ella puede ser alterada. Su presencia en mayor o menor proporcin en los materiales fibrosos, determina, en gran parte, su digestibilidad. A medida que la planta madura, el contenido de lignina se incrementa y el grado de fermentacin de celulosa y hemicelulosa en el rumen se reduce. Los carbohidratos estructurales tienen un papel importante en el mantenimiento de las condiciones fisiolgicas del rumen. La presencia de partculas fibrosas largas es necesaria para estimular la rumiacin. Por otra parte, el equilibrio entre carbohidratos fibrosos y no-fibrosos es importante en la alimentacin de los rumiantes para lograr altas producciones, fundamentalmente para la produccin de leche. Digestin microbiana de los hidratos de carbono. A partir de los hidratos de carbono se obtienen los compuestos de mayor importancia energtica para los rumiantes, los AGV. Estas sustancias se absorben desde el RR y producen entre el 50-80 % de la energa metabolizable (EM) que ingiere el animal. Los carbohidratos a su vez, son los precursores ms importantes para la sntesis de grasa y azcar (lactosa) de la leche en las vacas. Las vas para la fermentacin de los principales carbohidratos de las plantas se presentan en la figura 1.

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En general los azcares y los carbohidratos solubles se degradan rpidamente, mientras que los polisacridos estructurales son atacados con rapidez variable. Los materiales de ms difcil degradacin son la celulosa y la hemicelulosa, cuya estrecha asociacin con la lignina los hace menos asequible a la accin microbiana. Los mamferos poseen enzimas en su tracto digestivo capaces de convertir el almidn y los azcares solubles en glucosa que desde el punto de vista energtico es superior que los AGV. Sin embargo, estos carbohidratos son fermentados en el rumen lo que constituye una prdida energtica inevitable para el rumiante. El metabolismo de los hidratos de carbono en los rumiantes. Formacin de AGV. Durante la fermentacin ruminal, la poblacin de microorganismos, principalmente las bacterias, fermentan los carbohidratos para producir cidos grasos voltiles AGV), gases (metano, CH4 y CO2) y calor. Las vas metablicas de formacin de los AGV y sus implicaciones para la produccin de energa en forma de ATP, estn bien descritas en la literatura. Los carbohidratos utilizan vas diferentes hasta convertirse en piruvato que es el intermediario universal en la sntesis de los AGV. La xido reduccin de piruvato seguida por una descarboxilacin conduce a la formacin de acetil-CoA que a su vez, se transforma en acetato. El butirato se forma por condensacin de dos molculas de acetil-CoA y el propionato tiene dos vas de formacin; a partir del succinato y del cido lctico (figura 2). Los cidos actico, propinico y butrico conforman la mayora (>95%) de los cidos producidos en el rumen.

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Figura 2. Esquema de la formacin de los principales AGV en el rumen a partir del piruvato

Formacin de acetato. El acetato se puede formar a partir del piruvato siguiendo ms de un mecanismo. Sin embargo en el rumen parecen predominar dos: 1. Tipo clostridium Piruvato+ CoA + FD Acetil CoA + P Acetil-P + ADP 2. Tipo coli-aergenes Piruvato + P Acetil-P + ADP Formiato + Acetil-P Acetato + ATP + H2 + CO2 CO2 + acetil CoA + FDH2 Acetil-P + CoA Acetato + ATP

Formacin de propionato. Se conocen dos vas para la conversin de piruvato en propionato. La primera involucra la formacin de oxaloacetato y succinato y la segunda, la formacin de lactato a acrilato. Ambas vas pueden ocurrir en el rumen, pero al parecer la va del succinato es la principal. Sin embargo, su importancia individual depende del tipo de dieta. La va del acrilato predomina en animales alimentados con dietas altas en carbohidratos de fcil fermentacin y en presencia de una deficiencia de azufre, probablemente, por un cambio en la microflora ruminal.
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Formacin de butirato. La sntesis de butirato puede ocurrir en el rumen a partir del acetato o de compuestos que dan actilCoA, tales como piruvato o glutamato. La sntesis de butirato a partir de acetato utiliza dos vas, pero la que predomina ms es la inversin de la beta- oxidacin. La formacin del acetil-CoA del acetato involucra una reaccin de dos pasos con la formacin de acetil fosfato por la acetoquinasa, que requiere 1 mol de ATP por mol de acetato activado y la transferencia de la funcin acetil a la acetil-CoA. En la segunda va interviene el malonil-CoA que requiere 2 moles de acetato. Esta ruta es energticamente ms costosa que la primera que slo requiere 1 mol de ATP. Metanognesis Durante los procesos de fermentacin ruminal se producen grandes cantidades de dixido de carbono, metano y amonaco, menores cantidades de nitrgeno sulfdrico y monxido de carbono y probablemente, trazas de otros gases. De acuerdo con la estequiometra de la fermentacin ruminal. (Tabla 1) es posible calcular las producciones de AGV, metano y ATP que se obtienen con diferentes raciones. Por cada mol de hexosa que se fermenta se producen 0,58 moles de metano (para el almidn y la celulosa pueden ser 162 g en peso seco). Tabla 1. Estequiometra de la fermentacin ruminal 31 hexosa + 62 H2O 11 hexosa + 22 H2 16 hexosa 58 hexosa + 40 H2O 134 H2 + 33,5 CO2 58 hexosa + 40 H2O 38,956 cal 62 CH3COOH + 62 CO2 + 124 H2 CH2 22 CH3CH2COOH + 22 H2O 16 CH3 CH2CH2COOH + 32 CO2 + 32 H2 62 Hac + 22 HPr + 16 Hbut + 94 CO2 + 134 H2 35,4 CH4 + 67 H2O 62 Hac + 22 HPr + 16 Hbut + 60,5 CO2 + 33,5 CH4 +27 H2O 13 000 cal 8070 cal 8340 cal 7030 cal

El metano es un gas contaminante del ambiente. El metano constituye adems, una prdida energtica considerable, ya que representa entre 7 y 8 % de la energa bruta consumida. Las prdidas que originan la produccin de metano pueden fluctuar entre 2,5-33 millones de t de alimento anuales (Ruiz y Dearriba, 1987). Se ha estimado que la poblacin de rumiantes del mundo produce 77, 000 000 t de metano anualmente, lo cual constituye alrededor del 15 % de la emisin total del gas atmosfrico (Mc Allister et al. 1996, Asanuma, 1999). Hasta la fecha la produccin de metano por los rumiantes es una consecuencia inevitable de la fermentacin de los carbohidratos en el rumen. El metano se forma por la accin de las bacterias metanognicas que reducen el CO2 a CH4 a travs de intermediarios reductores (formil, metenil, metilenil y metil). Se considera el cido frmico como la fuente ms probable de hidrgeno para que ocurra esta reaccin, aunque el formato, acetato, metanol y mono, di y tri- metilamina pueden servir
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como sustratos para la metanognesis. El ciclo propuesto para la reduccin del CO2 a metano se presenta en la figura 3.

Figura 3. Ciclo de la urea

La cantidad de metano producida vara dependiendo de factores tales como la digestibilidad, el nivel de alimentacin, y las caractersticas fsicas y qumicas de la dieta. La produccin de metano se incrementa rpidamente despus de la alimentacin y llega al mximo en dos horas; poco despus declina invariablemente. Asimismo, a medida que la digestibilidad de la racin es mayor, la produccin de metano disminuye. La principal va de excrecin del metano producido en el rumen es la eructacin, mientras que el metano producido en las partes bajas del tracto digestivo se expulsa a travs de los pulmones y del recto. Aunque los metangenos no producen enzimas fibrolticas ellos aumentan la eficiencia energtica y la magnitud de la digestin de la fibra de otros microorganismos ruminales porque previenen la acumulacin de nucletidos reducidos (ej. NADH) a travs de inter especies que transfieren H2 (Joblin et al. 1989, Willians et al, 1994, Mc Allister et al. 1996). El clsico ejemplo de Interespecies en la transferencia de H2 es el co-cultivo de R. Albus, R. flavefaciens y un metangeno

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Inhibidores de la metanognesis Debido a la sustancial prdida de energa de los alimentos como metano en los rumiantes, existe un marcado inters en reducir su produccin. Varios compuestos, en particular, los cidos grasos de cadena larga (AGCL) (tabla 2) y los halgenos de CH4 son efectivos. Sin embargo, in vivo la poblacin microbiana se adapta o degrada muchos de estos compuestos y raramente se han encontrado efectos favorables en el comportamiento animal (Jouany, 1994, Mc Allister et al. 1996). Algunos metangenos son sensibles por un corto tiempo a los ionforos, pero se adaptan a ellos despus de una prolongada exposicin. Tabla 2. Inhibicin de la metanognesis por cidos grasos de cadena larga Productos finales Metano
c. Propinico c. Butrico Total

Distribucin del H marcado %) Experimento 1 Experimento 2 Control 60 de C-18 Control 60 de C-18

56.4 37.9 5.7 100.0 21.6 76.5 1.9 100.0 47.9 45.6 6.5 100.0 37.8 60.9 1.3 100.0

Se puede lograr una depresin en la metanognesis si se logran altos niveles de fermentacin y pasaje a travs del rumen, lo que puede incrementar el porcentaje molar de propinico y disminuir el acetato y los AGV totales. Interconversin de AGV en el rumen Durante la fermentacin activa en el rumen, tiene lugar una interconversin sustancial entre los AGV. Esto refleja, sin dudas, el hecho de que un cido, que es el producto final de un microorganismo pueda ser un sustrato til para otra especie. Un ejemplo de lo anterior aparece en la tabla 3 donde se muestra el comportamiento de dos tipos de bacterias frente a la celulosa. Tabla 3. Interrelacin metablica entre dos microorganismos del rumen Racin 0,2 % celulosa
S. ruminantum B. succingenes Ambos 0.0 13.5 0.0 0.0 6.5 0.0 2.8 0.0 15.9 0.0 0.0 8.5 4.5 6.2 10.1 0.0 5.3 5.4 1.2 2.8 0.2 0.0 4.9 1.7

Succinato

Productos (mM) Propionato Acetato

Formato

0,1 % celulosa
S. ruminantum B. succingenes Ambos

Los datos que se presentan en la tabla 4 indican que del actico pueden producirse cantidades considerables de butrico (40-80 %), probablemente por condensacin de dos moles de actico para formar un mol de butrico. Estos datos indican tambin que cantidades muy pequeas de actico proviene del propinico (0-5 %) y propinico del butrico (2-5 %). En cambio considerables
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cantidades de actico proceden del butrico, lo que parece ser ventajosa, puesto que hay una ganancia neta de energa en forma de ATP. Sin embargo, parece haber una prdida de energa cuando se sintetiza butirato a partir del acetato. Se ha calculado en dietas de forraje que el 14 % del actico que se produce en el rumen se convierte en cido butrico y el 3 % del butrico en actico. Tabla 4. Interconversin de los AGV en el rumen Racin
Heno de trigo Heno de Graminea Barcia de alfalfa Alfalfa y paja de trigo Maz y Alfalfa

% acet. a partir del But. Prop.

6 20 11 6 12 3 4-5 0 0.2 0.2

%prop. a partir del Acet. But.

27 14 4 3 6 4 4-5 3 2 3

% butir.a partir del Acet. Prop.

80 61 47 40 44 13 4-5 0 0.3 0.2

Como se aprecia la S. ruminantum sola no produce succinato mientras que la B, succingenes s. Ahora bien, cuando ambos microorganismos se encuentran en el mismo medio con 0,2 % de celulosa no aparece succinato. En la misma tabla observamos que la S. ruminantum produce 2,8 moles de propionato y que el B. succingenes no lo forma. Sin embargo, cuando aparecen juntos se producen 15,9 mM de propionato. Este resultado De esto indica que el succinato formado por el B. succingenes es utilizado como fuente de energa por la S. Ruminantum y resulta en un incremento de la proporcin de succinato en el sistema. Patrn de fermentacin ruminal La concentracin total de AGV en el rumen y las cantidades de cada uno de ellos dependen de la dieta y de las condiciones de manejo en que esta se consume. En dependencia de la fuente de carbohidratos variar la cantidad y la relacin de AGV producidos. Esta proporcin es caracterstica para cada situacin dada y recibe la denominacin genrica de Patrn de fermentacin ruminal. La concentracin de AGV en el rumen oscila entre 60 y 120 Meq/litro. Los cambios en la dieta y la digestibilidad de los alimentos pueden modificar el patrn de fermentacin, aunque el producto ms abundante es siempre el acetato. El incremento de la digestibilidad ejerce un efecto positivo en la produccin de AGV en el rumen. Cuando la digestibilidad aumenta hasta un 60 % se observa un incremento en los niveles de acetato. A mayores digestibilidades el acetato comienza a declinar a medida que el propionato y el butirato se elevan. Otros factores que influyen en la concentracin de AGV en el rumen son : la absorcin ruminal, la interconversin , la degradacin y el pasaje a las regiones inferiores del tracto digestivo.

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Efecto del sustrato. La concentracin de AGV en el rumen y las cantidades de cada uno de ellos dependen en gran medida del sustrato que se ofrece la dieta. Con alimentos fibrosos el patrn de fermentacin es predominantemente actico, con una proporcin aproximada de 65 % de actico, 20 % de propinico y 15 % de butrico. Raciones muy ricas en almidones (concentrados), incrementan la proporcin de propinico hasta alrededor de 40 %. En dietas altas en miel es caracterstico encontrar mayores proporciones de cido butrico. En la tabla 5 se presentan los patrones de fermentacin que se obtienen con diferentes dietas. Tabla 5. Proporciones molares de AGV en diferentes dietas AGV, % MOLAR Dietas
Caa de azcar Miel/urea Granos de cereales Heno de alfalfa Pasto de gramneas Saccharina pienso Heno molido/Concentrado (50/50)

Actico
62.5 31.0 39.0 74.0 66.0 64.0 51.0

Propinico
23.9 19.0 40.0 18.5 18.5 19.0 31.0

Butrico
13.5 41.0 21.0 7.5 11.5 11.0 12.0

Otros
9 6.0

Por lo general, los carbohidratos no-fibrosos rinden ms AGV. Sin embargo hay que tener en cuenta que dietas muy ricas en almidones provocan que el porcentaje de cido actico disminuya por debajo de 40%, mientras el porcentaje de propionato aumenta en ms de 40%. En estos casos, es posible aumentar la produccin de leche porque el suministro de glucosa proveniente de propionato se incrementa, pero cuando la produccin de propionato es demasiado alta produce un efecto negativo en la salud de las vacas porque tiende a producir hgado graso, distocia y cetosis ruminal, pero el aporte de cido actico para el sntesis de grasa puede comenzar a ser limitante. Adems, la reduccin en disponibilidad de cido actico se asocia con una reduccin de produccin de grasa y una bajo porcentaje de grasa en la leche. Por el contrario, cuando predomina en la dieta un forraje de muy baja calidad, se limita la energa y la produccin de leche. (Wattiaux y Armentano, 2000). En resumen, un cambio en la proporcin de forrajes y concentrado en una dieta provoca cambios importantes en las caractersticas de los carbohidratos que tienen un efecto profundo en la cantidad y porcentaje de cada AGV producido en el rumen y a su vez influyen en la produccin. Interrelacin sustrato-PH-microorganismos. En el establecimiento del patrn ruminal intervienen una serie de procesos que ocurren en ecosistema ruminal y que se interrelacionan entre s. Se sabe que el pH que la actividad de los microorganismos ruminales se realiza ptimamente cuando el pH del medio se corresponde con sus caractersticas culturales. As, las bacterias celulolticas desarrollan su actividad en un rango de pH de 6.5 a 7.0 mientras las bacterias que atacan al almidn y los azcares lo hacen a pH inferiores.
90

La digestin de los alimentos por la flora microbiana conforma el patrn de fermentacin, el que a su vez modifica el ambiente ruminal, principalmente el pH. Esta modificacin del pH puede afectar a grupos especficos de microorganismos e inclusive hacer desaparecer algunas especies a favor del predominio de otros que al utilizar vas metablicas distintas para degradar el sustrato originarn productos metablicos en cantidades cuantitativamente diferentes. En la figura 3 se presenta de forma resumida las interacciones entre diferentes factores que intervienen en el establecimiento del patrn de fermentacin ruminal DIETA

Manejo del Sustrato para los

Catabolismo

Velocidad de recambio

Equilibrio microbiano

Microflora especfica

Ambiente ruminal PH

Patrn de fermentacin

Produccin Animal

Figura 3 . Representacin esquemtica de la interrelacin entre diferentes aspectos del ecosistema ruminal en el establecimiento de los patrones de fermentacin

Utilizacin de los AGV Hasta hace poco tiempo y sobre la base de la teora de Blaxter (1962) se consideraba que en rumiantes alimentados con dietas normales, el cido actico se utilizaba ineficientemente y que como en dietas fibrosas, este cido estaba en altas proporciones en el rumen, esto poda explicar por qu los forrajes se utilizaban menos eficientemente que los concentrados. Recientes estudios de Orskov y McLeod (1990) demostraron (con el uso de la tcnica intragstrica) que para objetivos prcticos los 3 principales AGV se utilizan por los rumiantes con igual eficiencia energtica. Las diferencias en la utilizacin de la energa metabolizable entre dietas de forrajes y concentrados se asocia hoy al costo de energa en el consumo y la rumiacin y a las actividades que

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realiza el rumiante, tales como estar de pie muchas horas. El trabajo muscular que se asocia con la ingestin y la digestin es mayor para dietas de forraje (Orskov, 1997). Mtodos para medir la produccin de AGV en el rumen. La produccin de AGV in vivo se puede medir por diferentes mtodos. El ms simple se basa en el clculo de esta produccin a partir de la cantidad de materia orgnica digerida en el rumen y que no se recobra en la materia orgnica microbiana, usando las relaciones estequiomtricas y las proporciones de AGV. Este mtodo requiere un simple requerimiento quirrgico (cnula ruminal), pero se basa en la asuncin de que las proporciones molares de los AGV en el fluido ruminal representan las proporciones producidas. En la mayora de las situaciones este criterio no resulta vlido. Durante muchos aos se han utilizado las tcnicas de dilucin isotpica para medir el metabolismo y la produccin de AGV. Las mediciones de las velocidades de produccin de estos cidos grasos con estas tcnicas demuestran una amplia variabilidad y errores (Sutton, 1985). En particular, el mtodo usado para la estimacin de los AGV totales en el rumen, en el cual la velocidad de dilucin de un cido marcado infundido de forma continua, no da aproximaciones exactas de las velocidades de produccin de los AGV (France et al. 1987). Por el contrario, los resultados de este mtodo dependen de la velocidad de absorcin de cada cido siendo proporcionales a sus concentraciones el fluido ruminal. El aporte de AGV tambin se puede medir a partir de la absorcin neta de AGV en el sistema portal. Debido al metabolismo de los AGV por la mucosas del tracto, especialmente del cido butrico y en menor extensin del cido propinico, las medidas de formacin de productos dentro del rumen proporcionan los estimados ms altos del aporte de los AGV que los realmente presentados para la produccin de tejidos. Tambin como resultado de su metabolismo preferencial hay poca concordancia entre las proporciones molares en el lquido ruminal y en la sangre periferal. Por tanto los estimados de produccin de AGV por cualquiera de estos mtodos debern ser tratados cuidadosamente (Dijkstra (1994). En sentido general, an en la actualidad resulta bastante difcil determinar las producciones exactas de AGV en el rumen. Las variadas y complejas interacciones que se producen en el rumen y la falta de tcnicas apropiadas son la causa fundamental de que as sea. No obstante en la actualidad las tcnica de infusin intragstrica desarrollada por rskov y sus colaboradores han permitido avanzar en este campo.

Procesos fisiolgicos que acompaan a la absorcin. La absorcin de los AGV, as como de otras molculas pequeas como el agua, el NH3, y algunos minerales en el rumen se debe a la presencia de las papilas, que varan en nmero y longitud en relacin con la regin en que se encuentren. Son ms numerosas en las zonas craneales y ventrales donde existen altas concentraciones de nutrientes solubles. Se ha demostrado que, donde las papilas son ms numerosas, existe mayor absorcin de AGV.
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Las papilas consisten en una masa central de fibras colgenas densamente empaquetadas, rodeadas por un epitelio estratificado plano cornificado. Existe una gran red de vasos capilares sanguneos y linfticos que se encuentran en la regin central y que son los encargados de llevar los AGV por va sangunea hasta la vena porta que los conduce al hgado. La presencia misma de los AGV estimula su absorcin por el incremento concomitante del flujo sanguneo. Absorcin de AGV Debido a las caractersticas lipoflicas del epitelio ruminal, solamente los AGV no disociados son los que se difunden a travs de la membrana. Una vez dentro, el AGV se disocia rpidamente debido a su bajo PK (4.8), comparado con el valor normal de pH normal en la clula (7.0), de ah que se trasladen iones H+ hacia el interior de la clula. Estos iones H+ se reciclan va intercambio Na+/H+ y conducen al aumento de la utilizacin de Na+ en la clula. Paralelamente con el intercambio de Na+/H+ trabaja el intercambio Cl-/CO3Gabel y Martens (1991) propusieron un modelo para explicar la posible interaccin entre el transporte de AGV y los iones en el epitelio ruminal. En este modelo es de particular importancia un aporte intracelular de protones (fig. 4)

Fluido Mucosal

+ Na+ H+

Epitelio AGV

+ Fluido seroso

H+ AGV-

AGV HCO3Cl HCO3

AGV H2O CO2

+

Figura 4. Modelo propuesto por Gbel y Martens (1991) para explicar la absorcin de Acidos Grasos Voltiles (AGV) a travs del epitelio ruminal.

Los resultados de estudios realizados por Djikstra (1994) ayudaron a soportar este modelo. Las velocidades de absorcin fraccional se redujeron con el incremento en el pH del rumen. A valores de pH por encima de 7.0, se observaron absorciones significativas de los AGV, an cuando de acuerdo con la ecuacin de Henderson-Hasselbach, ms del 99 % de cada cido debera estar en la forma no disociada y no podra difundirse hacia la clula.

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Por tanto, estas altas velocidades de absorcin se obtienen probablemente, a travs del aporte de iones H+ en el rumen, por intercambio Na+/H+ con incrementos en la velocidad a medida que como el pH cae. El metabolismo de los AGV en el epitelio ruminal incrementa su velocidad de desaparicin desde el contenido ruminal, pero disminuye su velocidad de transporte a la sangre (absorcin). De esta forma su velocidad de desaparicin desde el rumen es proporcional al largo de la cadena carbonada (butrico> propinico>actico) y su aparicin en sangre es a la inversa (actico>propinico>buttico), a lo que contribuye la mayor concentracin de actico en el contenido ruminal En la tabla 6 se observa que la absorcin de AGV no es directamente proporcional a su concentracin en el fluido ruminal (Djikstra et al. 1993), lo que en contrasta con los resultados obtenidos en otros experimentos (Hogan, 1961, Oshio y Tahata, 1984). Sin embargo, se debe notar que en los casos donde se redujo la absorcin, las concentraciones estaban por encima de los rangos fisiolgicos normales. Los autores sugirieron que la baja absorcin del actico a bajas concentraciones, pudo deberse a su metabolismo, mucho menor que el de los otros AGV y a las relativamente altas concentraciones en sangre, lo que resulta en una baja difusin contra gradiente. Las reducciones en la absorcin fraccional a altas concentraciones, pueden estar relacionadas con la acumulacin de AGV dentro de las clulas o a la limitadas disponibilidades de iones para su transporte (Bergman,1990, Thornley y Johnson, 1990, Dijskstra, 1994). Tabla 6. Efecto del PH inicial y la concentracin de AGV individuales de soluciones experimentales introducidas en el rumen de vacas lecheras en la velocidad de absorcin de los AGV (adaptado de Dijkstra et al. 1993) PH 4.5 5.4 6.3 7.2 Concentracin (mM) 100 50 20

Velocidad de absorcin fraccional (/h)

Acido actico Acido propinico Acido butrico 0.35 0.67a 0.85
a

0.35 0.54ab 0.53

b

0.33 0.51ab

0.21 0.35bc 0.28

b

0.32ab 0.44 0.54

0.43a 0.51 0.45

0.18b 0.60 0.60

En la actualidad se reconoce que los cidos grasos de cadena corta se metabolizan extensivamente en el epitelio ruminal durante la absorcin (Bergman, 1990; Rmond et al. 1995), pero los resultados parecen indicar que las proporciones relativas de los AGV que se encuentran en el rumen puede que no representen las velocidades de produccin relativas, particularmente a bajos PH o a muy bajas o muy altas concentraciones de AGV individuales y que para la estimacin de las velocidades de produccin de los AGV se den tomar en cuenta las velocidades de absorcin diferenciales y por tanto el aporte al metabolismo intermendiario. Sutton (1985) indic que la relacin entre las relaciones de AGV producidos y la relativa concentracin en el rumen parece ser ms cerradas cuando las dietas son altas en forrajes que en concentrados y tambin en ovejas que en vacas.

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Conclusiones La fermentacin de los carbohidratos en el rumen produce cidos grasos voltiles (AGV), principalmente actico, propinico y butrico. La importancia nutricional de los AGV est dada fundamentalmente por el aporte energtico que hacen al animal. Producto del metabolismo de los carbohidratos en el rumen tambin se produce metano, que es un gas contaminante del ambiente y que representa una prdida importante de energa en el proceso. Las proporciones en que se encuentran los AGV en el rumen conforman un patrn de fermentacin caracterstico, que depende de la composicin de la dieta, la disponibilidad de los nutrientes, el PH ruminal, las especies microbianas que se establecen, el manejo animal, etc. Los AGV se absorben a travs de la pared ruminal hacia el flujo sanguneo. El PH y las concentraciones en que se encuentran influyen en su desaparicin desde el rumen hacia el interior de las clulas. Hasta hace poco tiempo se asuma que las proporciones de AGV presentes en el rumen representaban las proporciones a las cuales ellos se producan, pero en la actualidad existen dudas acerca de si la produccin real y la que se estima por diferentes mtodos, (todava insatisfactorios), son las mismas. Estudios de los ltimos aos del pasado siglo aos parecen poner en duda la validez de estos criterios. Las futuras investigaciones debern estar dirigidas a mejorar el conocimiento de los factores involucrados en la produccin y estimacin de los AGV, unido con el conocimiento en la utilizacin de Nutrientes y las variaciones entre los animales para poder mejorar las predicciones en el comportamiento productivo. Bibliografa a consultar. Hacker, 1981. Moore y Hatfield, 1994. Wattiaux y Armentano, 1996. Ruiz, R. y Dearriba, 1987. Mc Allister et al. 1996, Asanuma, 1999. Joblin et al. 1989, Willians et al, 1994 .Wattiaux y Armentano, 2000. Blaxter. 1962. Orskov y McLeod. 1990. Orskov, 1997. Sutton, J.D. 1985. Digestion and absorption of energy substrates in the lactating cow. J.Dairy Sci. 68:3376-3393 Dijkstra, J. 1994. Production and absorption of volatile fatty acids in the rumen. Livestock Production Science. 39:61-69 Dijkstra, J., Boer, H.van Bruchem, J., Bruining, M. & Taminga, S. 1993. Absorption of volatile fatty acids from the rumen of lactating dairy cows as influenced by volatile fatty acids concentrations, PH, and rumen liquid volume. BR. J. Nutr. 69:385-396. Gbel, G & Martens, H. 1991. Transport of Na+ and Cl- across the forestomach epithelium: Mechanism and interactions whit short- chain fatty acids. In Tsuda, Y. sasaki and Kawashima, R. (Eds). Physiological aspects of digestion and metabolism in ruminants. Academy Press Inc. san diego, US, pp. 129-151 Hogan, J.P. 1961. The absorption of ammonia through the rumen of sheep. Aust. J.Biol. Sci. 14:448-460
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Oshio, S. & Tahata, I. 1984. Absorption of dissociates volatile fatty acids through therumen wallof sheep. Can. J. Anim. Sci. (Supplem.):167-168 Bergman, E.N. 1990. Energy contributions of volatile fatty acids from the gastrointestinal tract in various species. Physiology Rev. 70: 567-590

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IX Digestin y absorcin de lpidos en especies monogstricas.

MSc Madeleidy Martnez Contenido
Los lpidos. Caractersticas generales. .................................................................................................................................97 Digestin de lpidos. ...............................................................................................................................................................99 Fosfolpidos...........................................................................................................................................................................101 Colesterol. .............................................................................................................................................................................101 Absorcin y transporte. .......................................................................................................................................................102 Metabolismo de las lipoprotenas del plasma (resumen) ..................................................................................................102 Metabolismo .........................................................................................................................................................................104 Sntesis ..................................................................................................................................................................................105 Degradacin .........................................................................................................................................................................106 Regulacin del metabolismo lipdico. .................................................................................................................................108 Metabolismo del colesterol. .................................................................................................................................................108 Empleo del colesterol. ..........................................................................................................................................................109 Los probiticos en el metabolismo lipdico. .......................................................................................................................109 Inclusin de grasas y aceites en las dietas para animales monogstricos........................................................................110 Conclusiones. ........................................................................................................................................................................112 Bibliografa a consultar. ......................................................................................................................................................113

Los lpidos. Caractersticas generales. Los lpidos son biomolculas orgnicas insolubles en agua, que pueden extraerse de las clulas y de los tejidos mediante disolventes no polares, por ejemplo, el cloroformo, el ter o el benceno. Desempean diversas funciones biolgicas importantes dentro de las cuales podemos sealar: 1. Como componentes estructurales de las membranas; 2. como formas de transporte y almacenamiento del combustible catablico; 3. como cubierta protectora sobre la superficie celular relacionados con el reconocimiento clulaclula, la especificidad de especie y la inmunidad de los tejidos; 4. Poseen una intensa actividad biolgica ya que se encuentran entre ellas algunas vitaminas (A, B, K) y hormonas. Los lpidos estn representados principalmente por los triacilgliceroles (grasas y aceites) y en menor proporcin por los fosfolpidos, cidos grasos, esteroles (colesterol), ceras, pigmentos y otros compuestos. La molcula de triacilglicerol consiste de un alcohol: el glicerol, al cual se han esterificado tres molculas de cidos grasos, formando un lpido neutro. As las grasas neutras contienen muy baja concentracin de cidos grasos libres. Su funcin en el organismo es principalmente como almacenamiento de energa (Fig. 1).

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Figura 1. Estructura de un triacilglicerol.

Los cidos grasos son la unidad estructural bsica de los lpidos y estn compuestos de una cadena carbonada que vara en longitud. Presentan un grupo terminal metilo y un grupo carboxilo (fig. 2).

Figura 2. Dos cidos grasos corrientes (a) cido esterico, (b) cido oleico.

La cadena hidrocarbonada puede ser saturada o puede tener uno o ms dobles enlaces. Los cidos grasos difieren entre s, en primer lugar, por la longitud de su cadena, y tambin por el nmero y la posicin de sus dobles enlaces lo que determina sus propiedades fsicas y funcionales. Los ms abundantes poseen un nmero par de tomos de carbono, con cadenas de longitudes comprendidas entre los 14 y 22 tomos de carbono, aunque predominan los de 16 a 18. Los cidos grasos insaturados
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predominan sobre los saturados. En la tabla 1 se presenta una lista de los cidos grasos ms comnmente encontrados en las grasas y aceites utilizadas en la alimentacin animal. Tabla 1. cidos grasos frecuentemente encontrados en las fuentes de grasas/aceites utilizados en la alimentacin animal (Castaldo, 1998). Nombre
Laurico Mirstico Miristoleico Palmtico Palmitoleico Esterico Oleico Linoleico Linolnico

tomos De C: Dobles Enlaces

12:0 14:0 14:1 16:0 16:1 18:0 18:1 18:2 18:3

Las plantas, a diferencia de los animales, pueden insertar dobles enlaces adicionales entre el doble enlace n9 y el metil terminus de la molcula. Debido a que estos cidos grasos (linoleico y linolnico) no pueden ser sintetizados a partir de otras familias, ellos son definidos como cidos grasos esenciales. Los cidos grasos esenciales o sus derivados metablicos pueden definirse entonces como cidos grasos requeridos para el crecimiento normal y la integridad fisiolgica y no pueden ser sintetizados endgenamente, por lo que se requiere un aporte exgeno. Los sntomas de deficiencia de cidos grasos esenciales en aves son retardo del crecimiento, aumento del consumo de agua, reducida resistencia a enfermedades, entre otros. En las gallinas ponedoras disminuye la talla del huevo as como el peso y cambia la composicin en cidos grasos de la yema del huevo. Estos cidos grasos influyen en la fluidez, actividad receptora y funcin enzimtica de las biomembranas. Adems, son metabolizados in vivo a molculas de mayor peso molecular como los eicosanoides. Estos son un grupo de compuestos de 20 tomos de carbono con alta actividad biolgica y corta vida media (hormonas locales) producidos por las clulas para actuar en el micromedio inmediato ms cercano. Incluyen a los prostanoides que mantienen una funcin vascular normal y leucotrienos que adems son agentes quimiotcticos para clulas del sistema inmune. Digestin de lpidos. El paso inicial para la digestin de los lpidos lo constituye la hidrlisis efectuada por las lipasas. Se han aislado lipasa: Lingual; Gstrica: Pancretica; Sensible a hormonas; Lipoproteica. Las dos primeras tienen un papel fundamental en los cerdos y conejos recin nacidos donde no existe todava una madurez del pncreas. Una vez que se alcanza, entonces el pncreas libera a nivel de intestino delgado la lipasa. La lipasa lipoproteica acta sobre los lpidos que atraviesan la linfa y llegan a la zona cercana del tejido adiposo o muscular a travs de las lipoprotenas.
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Las lipasas hidrolizan los triacilglicridos. Dentro de sus caractersticas fundamentales tenemos: Son biomolculas solubles en agua; Actan sobre la superficie de los glbulos grasos; Son catalizadores interfaciales, es decir, su actividad cataltica se manifiesta porque exhibe su sitio cataltico cuando se encuentra en la interfase lquido-cido graso; Requieren de Ca, Mg, Cl, K; Requieren de la colipasa que garantiza el anclaje a la interfase; pH entre 7 y 8; Su accin aumenta bajo la influencia emulsionante de la bilis. Se ha estudiado la influencia del grado de emulsificacin en la hidrlisis. Los resultados han mostrado que la funcin de la bilis es de promover, estimular la emulsificacin y solubilizacin de los lpidos y esta funcin es debido a las sales de los cidos biliares. La velocidad de la digestin del triacilglicerol depende, por tanto, del rea superficial de la interfase, una cantidad que aumenta mucho por los movimientos peristlticos de agitacin del intestino combinados con la accin emulsionante de los cidos biliares. Estos ltimos son detergentes digestivos potentes que se sintetizan por el hgado y son segregados por la vescula biliar al intestino delgado en el que tienen lugar principalmente la digestin y la absorcin de los lpidos. El mayor sitio de la digestin de los lpidos es el intestino delgado. En el duodeno el bolo alimenticio se encuentra con la bilis y el jugo pancretico. Ellos son alcalinos y funcionan en parte como neutralizantes del quimo gstrico. La emulsificacin de los lpidos por las sales biliares es esencial para la digestin.

Figura 3. Estructura de los cidos biliares principales y sus conjugados glicina y taurina.

El flujo del jugo pancretico igual que las sales biliares se regulan hormonalmente antes de la entrada del quimo gstrico dentro del duodeno. Cuando se elevan las concentraciones de HCl en el mismo, existe una liberacin de secretina lo que trae como resultado que aumente la secrecin pancretica y bicarbonato. Estos al emulsionarse con los lpidos forman jabones que estimulan la secrecin de colecistoquinina. Este pptido estimula la secrecin de bilis y enzimas pancreticas (lipasa, fosfolipasas, colesterol esterasa).
100

Fosfolpidos. Se encuentra establecido que los fosfolpidos pueden ser formados en cantidades apreciables durante la absorcin de grasa. Las lecitinas y las cefalinas son los ms importantes fosfolpidos que se forman. Con respecto a la hidrlisis se piensa que se comportan de manera bastante semejante a las grasas neutras. Los cidos grasos constituyentes de los fosfolpidos de la dieta pueden ser encontradas en un 80% esterificando las grasas neutras de la linfa. Si los fosfolpidos son hidrolizados hasta incluir la preparacin de la base nitrogenada del grupo fosfato, la molcula resultante -glicerofosfato es un punto de partida en la sntesis de triglicridos y un punto de contacto con el metabolismo endgeno de los carbohidratos a nivel de la mucosa intestinal. La fosfolipasa en el tejido animal efecta la hidrlisis como sigue: Lecitina 1 lisolecitina + cido graso 2 glicerol fosforil colina + cido graso 3 glicerol fosfato + colina 4 glicerol + fosfato

1234-

Fosfolipasa A. Aislado en el pncreas u otros tejidos animales. Fosfolipasa B. Aislado en el pncreas y el hgado. Glicerol fosforil colina diesterasa. Fosfomonoesterasa.

La hidrlisis en el intestino se supone transcurre por la misma va. Colesterol. El colesterol es un esteroide que est presente en todas las clulas del organismo y es necesario para la propia vida. En el cuerpo realiza funciones importantes: Forma parte de las membranas celulares; Interviene en la formacin de cidos biliares, necesarios para la digestin de las grasas; A partir del colesterol se forman ciertas hormonas, como las sexuales y las esteroideas; En la piel, el colesterol se transforma en vitamina D por la accin de los rayos solares. Adems, protege a la piel de la accin de muchos agentes qumicos y evita la deshidratacin por la evaporacin. Es por tanto, una sustancia importante y natural que slo resulta peligrosa para la salud cuando se encuentra en concentraciones elevadas en sangre. La hidrlisis de los steres del colesterol es sencilla por tener un solo enlace ster en esta molcula. Existen evidencias de una hidrlisis completa del ster de colesterol antes de ser absorbidos. El colesterol absorbido aparece esterificado en la linfa. Como las sales biliares son productos finales del colesterol, son de gran importancia ya que no solamente tienen funcin emulsificante de los lpidos de la dieta sino que una pequea fraccin escapa a la absorcin y se excreta va heces fecales.
101

Absorcin y transporte. La mezcla de cidos grasos, mono y diacilgliceroles producidas por la digestin de los lpidos es absorbida por las clulas que recubren el intestino delgado (parte superior del duodeno, yeyuno e leon) en un proceso que facilitan los cidos biliares y dependiendo la relacin absorcin/ lugar de absorcin de la especie. La mezcla de grasa y sus productos de hidrlisis una vez en contacto con la pared intestinal son absorbidos, metabolizados y transportados por dos vas diferentes a la circulacin. La va principal de transporte es vasos linfticos- conducto torcico y la otra va es el sistema portal. En este ltimo son transportados los cidos de cadena corta principalmente en forma libre. El sistema linftico intestinal del pollo est menos desarrollado y difiere en su estructura con respecto a los mamferos. Se plantea que por lo menos el 90% de la grasa absorbida entra en el sistema portal como lipoprotenas de muy baja densidad y no se han detectado quilomicrones (Bell y Freeman, 1983). La composicin de la linfa del conducto torcico es la siguiente: Tabla 2. Composicin de la linfa. Componentes
Glicridos Fosfolpidos ster de colesterol Acidos grasos libres no esterificados

%
82 10 2 6

Dentro de la fraccin de glicridos el 90% esta constituido por triglicridos. El problema de transportar lpidos una vez absorbidos por el intestino al vehculo acuoso de la sangre se resuelve estabilizando las partculas de lpidos con una cubierta de compuestos anfiflicos: fosfolpidos y protenas. Las partculas resultantes son las lipoprotenas que son consideradas como agregados o microemulsiones de lpidos y protenas con un grado de organizacin estructural. Existen varios tipos de partculas con diferente composicin qumica, propiedades fsicas y funciones metablicas, pero su papel comn es transportar lpidos de un tejido a otro para abastecer las necesidades de lpidos de los tejidos. Por mtodos de ultracentrifugacin se han clasificado de menor a mayor densidad en: quilomicrones; lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL), lipoprotenas de baja densidad (LDL) y lipoprotenas de alta densidad (HDL). A medida que la densidad disminuye el tamao de la partcula se incrementa. En las aves aparecen las lipoprotenas de muy baja, baja y alta densidad. La grasa diettica es absorbida como lipoprotenas de baja densidad y no en forma de quilomicrn.

Metabolismo de las lipoprotenas del plasma (resumen) Despus de la digestin y absorcin de una dieta que contiene lpidos, los lpidos resintetizados por el intestino son transportados a la sangre en los quilomicrones, cuya funcin es precisamente transportar
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lpidos de intestino a sangre. Los quilomicrones en sangre se enlazan en la enzima lipasa de lipoprotenas. Esta enzima cataliza la hidrlisis de los triglicridos del ncleo de los quilomicrones, reduciendo su tamao y contenido en triglicridos. Componentes de superficie de los quilomicrones son recuperados en la fraccin HDL y la partcula remanente denominada resto de quilomicrn es captada por el hgado mediante un proceso mediado por receptor de membrana. Este sendero descrito es conocido como la va de transporte de lpidos exgenos (provenientes de la dieta). La va de transporte de lpidos endgenos se inicia con la secrecin de VLDL por el hgado. De igual modo a los quilomicrones estas partculas son degradadas por la lipasa de lipoprotenas endotelial hasta convertirlas en otro tipo de lipoprotenas, ricas en colesterol, cuyo producto final son las LDL. Restos de apolipoprotenas y fosfolpidos de la superficie de VLDL son transferidos a HDL durante este proceso. Las LDL son captadas por receptores hepticos. Una vez enlazada la partcula el complejo receptorLDL es endocitado y sus componentes degradados por enzimas lisosomales. Los esteres de colesterol transportados por las LDL son hidrolizados por la colesterol ester hidrolasa y cualquier exceso de colesterol libre desencadena eventos regulatorios encaminados a prevenir su acumulacin ulterior. Las LDL tambin pueden transportar lpidos a los tejidos extrahepticos para su almacenamiento o para su utilizacin como combustible energtico. La funcin principal de las HDL es captar colesterol no esterificado de las membranas biolgicas y transportarlo al hgado que es el nico rgano capaz de promover la excrecin de colesterol. Este proceso se denomina transporte reverso del colesterol. Una vez que el colesterol es captado por HDL, es esterificado seguido de la transferencia potencial del colesterol esterificado a lipoprotenas de menor densidad y finalmente es captado por el hgado (Fig. 4).

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Figura 4. Metabolismo de las lipoprotenas.

Metabolismo Todos los mamferos pueden sintetizar cidos grasos saturados (sntesis de novo) a partir de precursores simples como la glucosa y aminocidos (fig. 5). El hgado y el tejido adiposo son los rganos ms importantes. En las aves, el hgado es el asiento principal de la sntesis de los cidos grasos, en contraste con el papel dominante del tejido adiposo en la lipognesis de novo en los mamferos. El bajo nivel de algunas enzimas activas en la lipognesis, a saber, la acetilCoa carboxilasa, ATP citrato liasa, la enzima malato y hexosa monofosfato deshidrogenasa, explican la limitada capacidad del tejido adiposo para sintetizar los cidos grasos. El papel dominante del hgado en la lipognesis se mantiene durante toda la vida del ave, aunque influida por el contenido de grasa de la dieta y por algunos factores hormonales.

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Glucosa

Algunos aminocidos cidos grasos

Piruvato Acetil CoA Malonil C A Acetoacetil CoA CO2 -hidroxi--metilglutarilC A Colesterol Acetoacetat Esteroides D--hidroxibutirato Acidos bili Ester de l t l Triglicrido Fosfolpidos Acidos grasos

Citrato

Acetona

Figura 5. Biosntesis de lpidos, cuerpos cetnicos y esteroles a partir de precursores sencillos.

Sntesis El precursor comn es el acetil CoA que es activado por la acetil CoA carboxilasa en presencia de CO2 para rendir malonil CoA. A continuacin se suceden ciclos de adicin de dos unidades de carbono por la accin concertada de un conjunto de enzimas en el complejo multienzimtico cido graso sintetasa. El cido graso final usualmente es el cido palmtico (16:0) o el esterico (18:0). La introduccin de dobles enlaces es catalizada por enzimas desaturasas. Como la posicin inicial para introducir el doble enlace es entre los carbonos 9 y 10, esta enzima es llamada 9- desaturasa. El sustrato para esta enzima es el cido palmtico que es desaturado a palmitoleico o el esterico que es desaturado a oleico. Los animales, no pueden insertar dobles enlaces adicionales entre el doble enlace n9 y el metil terminus de la molcula. La sntesis de cidos grasos poliinsaturados de cadena larga ocurre a travs de elongaciones y desaturaciones sucesivas y alternas.

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Degradacin Los cidos grasos se degradan a travs de la - oxidacin, proceso que transcurre mediante cinco reacciones bsicas: Formacin del CoA tioester; - deshidrogenacin del acil CoA Hidratacin del enlace doble para formar 3-L- hidroxiacil CoA; Deshidrogenacin del - hidroxiacil CoA con formacin del - cetoacil CoA; Ruptura del enlace tioltico del - cetoacil CoA a fin de formar acetilCoA y un acil-CoA nuevo que contiene dos tomos de C menos que el original. La oxidacin de los cidos grasos no saturados y de los cidos grasos de cadena con nmero impar de tomos de carbono tambin ocurre por la va de la oxidacin, pero necesita de la participacin de enzimas adicionales. La oxidacin de los cidos grasos de cadena impar generan propionil CoA que se convierte en succinil CoA para incorporarse al ciclo de los cidos tricarboxlicos. Este proceso ocurre tanto en mitocondrias como en peroxisomas. Este ltimo se plantea que participa por la composicin enzimtica en el acortamiento de las cadenas de los cidos grasos de cadena larga. Una fraccin significativa del acetil CoA producido por la oxidacin del cido graso en el hgado se convierte en acetoacetato y D--hidroxibutirato que, junto con la acetona, se designan como cuerpos cetnicos. Los primeros dos compuestos se comportan como combustibles importantes para los tejidos perifricos. La biosntesis del cido graso se diferencia de la oxidacin del mismo en varios aspectos. Mientras que la oxidacin del cido graso ocurre en la mitocondria empleando los steres acil graso CoA, la biosntesis del cido graso ocurre en el citosol, con la cadena en crecimiento del cido graso esterificada a una protena portadora de acilos (ACP). Las coenzimas redox son diferentes (FAD y NAD+ en la oxidacin y NADPH en la biosntesis) as como en la estereoqumica de las etapas intermedias de la ruta. La oxidacin produce acetil CoA, mientras que el malonil CoA es el precursor inmediato en la biosntesis. Se necesita HCO-3 en la biosntesis pero no en la oxidacin (Fig. 6).

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Figura 6. Biosntesis y degradacin de los cidos grasos. Diferencias.

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Regulacin del metabolismo lipdico. Existen dos mecanismos de regulacin del metabolismo lipdico: A corto plazo; A largo plazo. La primera ocurre cuando la respuesta se produce en unos minutos o menos y est relacionada con el control de las actividades de los enzimas reguladores. La regulacin a largo plazo se basa en la alteracin de la cantidad de enzima presente por variaciones en las velocidades de sntesis y/o degradacin de las protenas. Este proceso requiere que transcurran horas o das. Las clulas pancreticas y perciben los estados de dieta y energticos del organismo a travs de la concentracin de glucosa en la sangre. Las clulas responde a la concentracin de glucosa baja de los estados de ayuno y de demanda de energa segregando glucagn. Las clulas responden a la concentracin de glucosa elevada en la sangre, de los estados alimentado y en reposo, segregando insulina. Estas hormonas regulan tambin, las velocidades de las rutas opuestas del metabolismo de los lpidos y controlan, por tanto, si se han de oxidar o sintetizar los cidos grasos. As, la acetil CoA carboxilasa, que cataliza el primer paso determinante en la sntesis de cido graso es inhibida por la fosforilacin dependiente de AMPc estimulada por glucagn y es activada por la fosforilacin estimulada por la insulina. La relacin glucagn insulina es, por tanto, de importancia primordial en la determinacin de la velocidad y de la direccin del metabolismo del cido graso. Metabolismo del colesterol. Todos los tomos de C del colesterol derivan del acetato. Este se convierte primero en unidades C5 llamadas isopreno. Las unidades de isopreno se condensan a fin de formar un precursor lineal del colesterol (escualeno) y despus se ciclan.

Figura 7. Todos los tomos de carbono del colesterol derivan del acetato.

El acetil CoA se convierte en isopreno por una serie de reacciones que comienza con la formacin de hidroximetilglutaril CoA. Una de las etapas esta catalizada por la HMG-CoA reductasa que es

mediadora de la etapa determinante de la velocidad de la biosntesis del colesterol y el enzima regulado de modo ms elaborado de esta ruta.

Figura 8. Estructura del isopreno.

Empleo del colesterol. El colesterol es el precursor de las hormonas esteroides y de los cidos biliares. Las hormonas esteroides se agrupan en cinco categoras: progestinas, glucocorticoides, corticoides minerales, andrgenos y estrgenos. La ruta ms importante para la excrecin del colesterol en los mamferos es la formacin de cidos biliares (tambin llamadas sales biliares). Los probiticos en el metabolismo lipdico. La microflora intestinal influye en el metabolismo de los lpidos. Se conoce que las bacterias sintetizan cidos grasos de novo y modifican los ingeridos con la dieta. Por otra parte, estas bacterias pueden inhibir la formacin de micelas biliares y disminuye de esta forma la absorcin del colesterol, lo que provoca la reduccin de sus niveles en sangre. Asimismo, se ha demostrado que los cidos grasos de cadena corta (AGCC) pueden inhibir la sntesis de colesterol en el hgado. Se considera que el uso continuo de probiticos puede favorecer la produccin de cantidades apreciables de estos cidos, esta pudiera ser una de las causas por las que su empleo reduce los niveles de este metabolito (Ouwehand y col., 1999). Sanders y Huis int Veld (1999) plantean que los probiticos bacteriales presentan beneficios en la salud en cuanto a los lpidos sanguneos y las enfermedades coronarias a travs de tres mecanismos: Asimilacin del colesterol por las clulas bacteriales; Alteracin de la actividad de la enzima BSH; Efecto antioxidativo. La utilizacin de probiticos en la dieta permite la eubiosis de la microflora intestinal y se obtienen mayores niveles de cido lctico y AGCC totales (actico, propinico y butrico) que son productos de la fermentacin de los microorganismos del tracto. Los AGCC influyen en la disminucin de los niveles de colesterol porque provocan inhibicin de la enzima HMG-CoA reductasa (Endo y col., 1999). Sin embargo, Prez (2000) obtuvo mayores niveles de cido lctico y AGCC en el ileon y ciego de los grupos tratados con un hidrolizado de levadura con respecto al control en pollos de ceba y no se logr diferencias significativas en la concentracin de colesterol entre los grupos estudiados. Ha sido demostrado que los Lactobacillus contribuyen a la eliminacin de cidos biliares y colesterol en las haces por su accin enlazante o unificadora y por la inhibicin de la formacin de micela. De

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esta forma, disminuye la absorcin de cidos biliares y causan un efecto inhibitorio en la absorcin intestinal de micelas de colesterol (Susuki y col., 1991). La prdida fecal de las sales biliares resulta, en un mayor requerimiento de colesterol como precursor para la sntesis de nuevas sales biliares y por tanto pueden reducirse los niveles de colesterol. Klaver y van der Meer (1993) sugirieron que la reduccin de colesterol in vitro por algunos Lactobacillus sp. resulta de su coprecipitacin con sales biliares desconjugadas. De Smet y col. (1994) sugirieron que especies de Lactobacillus que posean la BSH altamente activas, reducen los niveles de colesterol del suero. La BSH activa de los Lactobacillus posee la ventaja de sobrevivir y colonizar el ID bajo donde el ciclo enteroheptico tiene lugar (Du Toit y col., 1998). Jin y col. (1998), determinaron el efecto de los cultivos de Lactobacillus en varios parmetros productivos y en el colesterol en suero de broilers bajo condiciones tropicales. El nivel de colesterol en suero fue significativamente menor (P<0.01) en los broilers alimentados con tres dietas que contenan Lactobacillus a los 30 das de edad. Una reduccin similar de los niveles de colesterol en suero se encontr en ponedoras (Abdulrahim y col., 1996). Inclusin de grasas y aceites en las dietas para animales monogstricos. Las especies animales en cuyas dietas se adiciona grasa son ganado de carne y leche, cerdos, aves, peces y animales de compaa (perros y gatos). Dentro de cada especie, el porcentaje de la poblacin total que recibe raciones con grasa suplementada, vara desde un 10% para gallinas ponedoras hasta el 90% en el caso de pollos y gansos (Bisplinghoff, 1998). En la mayora de las dietas, la grasa es adicionada en un rango desde 0.5 a un 6.5%. Una dieta tpica para pollos contiene entre 2 y 5% de grasa aadida, mientras que en los pavos la dieta puede contener 5-10%. Entre un 4-6% es adicionado a dietas para ganado de carne y leche y en los cerdos aproximadamente el 5%. El crecimiento de la acuacultura ha contribuido tambin al uso de las grasas. Un tpico alimento para trucha puede contener 10-15% de grasa adicionada, usualmente como aceite de pescado. Muchos alimentos para animales de compaa tambin contienen altas cantidades de grasa (Coromoto, 1999). La grasa juega, cada vez ms, un papel importante en la nutricin animal, pero, es quizs tambin, uno de los ingredientes que enfrenta los mayores problemas es trminos de calidad ya que es muy sensible a degradarse y perder calidad. Esto es debido a la naturaleza qumica de la molcula de cido graso y al hecho, de que las fuentes de grasa para la alimentacin animal son subproductos de otras industrias. En Cuba, se ha estudiado el efecto de inclusin, en las aves, de diferentes fuentes energticas en varios indicadores con la utilizacin de subproductos de diferentes industrias (Lon Wo, 1988). Los resultados aparecen en las tablas 3 y 4. Tabla 3. Comparacin de diferentes fuentes de grasa en dietas de maz para la ceba de pollos. Medidas (2-8 Semanas)
Consumo (g/ ave) Ganancia (g/ ave) Conversin Peso vivo final (g/ ave)

Sin Grasa
4078 1590 2.51 1786

Sebo
4115 1667 2.33 1863

Manteca Enraciada
4024 1636 2.35 1831

Aceite Cachaza
3959 1586 2.37 1766

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Tabla 4. Efecto de diferentes fuentes energticas en las gallinas ponedoras durante 10 semanas de puesta. Control
Consumo acumulado (Kg/ ave) Consumo diario (g/ ave) Huevos totales Huevos para consumo Conversin Peso vivo inicial (Kg/ ave) Peso vivo final (Kg/ ave) Peso hgado (g) Peso grasa abdominal (g) Contenido grasa heptica (%BS) 7.65 109 57 56 1.34 1.35 1.58 27 52 43

6% Jaboncillo Acidulado
7.14 102 50 48 1.43 1.38 1.46 25 41 42

6% Aceite Crudo
7.17 102 57 57 1.25 1.39 1.55 26 41.5 40

1 Kg de alimento/ 10 huevos El empleo de grasas en la alimentacin de las gallinas ponedoras se fundamenta no slo en el hecho de poder ahorrar cereales de importacin, pues su requerimiento energtico es menor que el del pollo energtico, sino en factores tales como la eficiencia de utilizacin de los nutrientes con menor produccin de calor y menor gasto energtico y la mayor capacidad adaptativa que le infiere ante los cambios ambientales. La variabilidad en la composicin qumica de los lpidos, es de importancia durante el proceso digestivo como un todo, ya que su digestibilidad depender finalmente de la habilidad del cerdo para emulsificarlos, digerirlos y absorberlos eficientemente. En general, altos contenidos de cidos grasos insaturados en la molcula de triglicrido conduce a una mayor absorcin, lo que se traduce finalmente, en mejoras del valor de energa digestible. La longitud de la cadena carbonada tiene tambin influencia en la digestibilidad (fig. 9), as como la edad del cerdo (fig. 10).

Figura 9. Influencia de la relacin cidos grasos insaturado-saturado de las mezclas de grasa diettica sobre la digestibilidad en cerdos.

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Figura. 10. Influencia de la edad de los cerdos sobre la digestibilidad aparente de la grasa diettica.

Conclusiones. En este captulo se presenta la digestin y el metabolismo de los lpidos con el fin de conocer el destino de los cidos grasos por el animal despus de ingerir alimentos. Los triglicridos constituyentes de las grasas dietticas son hidrolizados en el intestino delgado mediante la accin de la lipasa pancretica y las sales biliares a monoglicridos y cidos grasos. Los cidos grasos son metabolizados en el hgado y el tejido adiposo. En las aves, el hgado es el principal lugar donde ocurre este proceso. Las lipoprotenas son de gran importancia en el metabolismo lipdico. Ellas son las encargadas de transportarlos en el torrente sanguneo. El colesterol tiene gran importancia en los organismos vivos de ah que su estudio sea objeto de atencin. Las grasas y aceites se utilizan en la alimentacin animal por su gran valor energtico y porque representan un ahorro por la inclusin de subproductos. Adems, mejora la eficiencia de utilizacin de los nutrientes con menor produccin de calor y menor gasto energtico y una mayor capacidad adaptativa que le infiere ante los cambios ambientales.

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Bibliografa a consultar. Abdulrahim, S. M.; M. Haddadin; E. Hashlamoun; R. Robinson. 1996. The influence of Lactobacillus acidophilus and Bacitracin on layer performance of chickens and cholesterol content of plasma and egg yolk. Br. Poult. Sci. 37 :341-346. Bell, D. y Freeman, B. 1983. Fisiologa y bioqumica de la gallina domstica. Ed. Cientfico Tcnica. Ciudad de La Habana. p.309. Bisplinghoff, F. 1998. Quality standard for animal and plant fats. In : http://www.morm.u.../QUALITYSTANDARDFORANIMALANDPLANTFATS.html Castaldo, D. J. 1998. Focus on feed grade fat. Part 2- Fat quality parameters. In : http://foodtab.com/fat2.hml. Coromoto, M. 1999. Usos y efectos de la incorporacin de grasas y aceites en dietas para cerdos. V Encuentro sobre nutricin y produccin de animales monogstricos. p.68-81 De Smet, I. ; L. van Hoorde ; N. De Saeyer; M. Vande Woestyne; W. Verstraete. 1994. In vitro study of bile salt hydrolase (BSH) activity of BSH isogenic Lactobacillus plantarum 80 strains and stimation of cholesterol lowering through enhanced BSH activity. Micro. Ecol. Health Disease. 7:315-329. Du Toit, M.; C. M.Franz ; L. M. Dicks ; V. Schillinger ; P. Haberer ; B. Warlies ; F. Ahrens; W. H. Holzapfel. 1998. Characterization and selection of probiotics lactobacilli for a preliminary miniping feeding trial and their effect on serum cholesterol levels, faeces pH and faeces moisture content. International J. of Food Micro.p. 93-104. Endo, T.; M. Nakano; S. Shimizu; M. Fukushima; S. Miyoshi. 1999. Effects of a probiotic on the lipid metabolism of cocks fed on a cholesterol-enriched diet. Biosci. Biotechnol. Biochem. 63(9):1569-1575. Jin, L. Z.; Y. W. Ho; N. Abdullah; S. Jalaludin. 1998. Growth performance, intestinal microbial populations, and serum cholesterol of broilers fed diets containing Lactobacillus cultures. Poultry Sci. 77(9):1259-1265. Klaver, F. y Van der Meer, R. 1993. The assumed assimilation of cholesterol by Lactobacilli and Bifidobacterium bifidum is due to their bile salt-deconjugating activity. Appl. Environ. Microbiol. 59 :1120-1124. Lon Wo, Esmeralda. 1988. Uso de grasas y aceites en la alimentacin de las aves. Curso de posgrado. XI Reunin de la Asociacin Latinoamericana de Produccin Animal, La Habana, Cuba. p. 45. Ouwehand, A. C.; P. V. Kirjavainen; C. Short; S. Salminen. 1999. Probiotics: mechanism and stablished effects. International Dairy J. 9:43-52. Prez, M. 2000. Obtencin de un hidrolizado de crema de levadura de destilera y evaluacin de su actividad probitica. Tesis presentada en opcin al grado cientfico de Doctor en Ciencias Veterinarias. Universidad Agraria de la Habana. Cuba. Sanders, Mary Ellen y Huis int Veld, J. 1999. Bringing a probiotic-containing functional food to the market: microbiological, product regulatory and labeling issues. Antoine van Leeuwenhock. 76:293-315. Kluwer Academic publishers-Netherlands. Stryer, S. 1995. Byochemestry. W. H. Freemav and Company. New York. 4th Ed. p. 685. Suzuki, Y.; H. Kaaizu; Y. Yamaanchi. 1991. Effect of cultured milk on serum cholesterol concentrations in rats fed on high-cholesterol diets. Animal Sci. and Technol. 62:565-571.

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XIV Digestin y absorcin de los lpidos en rumiantes

Dr. Ren Stuart Contenido Introduccin. ......................................................................................................................................... 114 Digestin de Lpidos ............................................................................................................................. 114 Aspecto general de la digestin. ........................................................................................................ 114 Digestin de triglicridos .................................................................................................................. 115 Digestin de fosfolpidos. .................................................................................................................. 116 Digestin de colesterol ...................................................................................................................... 117 Absorcin y Transporte......................................................................................................................... 117 Transporte linftico ........................................................................................................................... 117 Lipoprotenas ..................................................................................................................................... 118 Transporte de fosfolpidos y colesterol ............................................................................................. 118 Sistema portal. ................................................................................................................................... 119 Conclusiones ......................................................................................................................................... 119 Bibliografa a consultar......................................................................................................................... 119 Introduccin. El metabolismo de los lpidos en el rumiante adulto difiere notablemente del de los monogstricos y esta diferencia radica en la composicin de los cidos grasos de la grasa de depsito. La composicin en cidos grasos de las grasas de depsitos permanece ms o menos inalterables cuando los animales se alimentan con grasas no saturadas tales como los aceites de maz y soya, mientras que la grasa de depsito de los animales monogstricos reflejan la composicin en cidos grasos de los lpidos de la dieta. En el presente captulo sern reseados la digestin y absorcin de los lpidos o grasas de las dietas de los monogstricos y de los rumiantes. Digestin de Lpidos En los rumiantes la existencia de grasa de depsito "rica en cido esterico" es independiente de la dieta, la cual implica una hidrogenacin, que se ha podido comprobar la realizan los microorganismos del rumen, y efecta importantes modificaciones de los lpidos de las dietas. Estas son: 1) hidrogenacin de los cidos grasos; 2) hidrlisis de los glicridos y fosfolpidos y 3) fermentacin del glicerol procedente de los glicridos y fosfolpidos. Aspecto general de la digestin. El paso inicial para la digestin de los lpidos lo constituye la hidrlisis efectuada por las lipasas. Estas enzimas han sido aisladas del pncreas, glndulas de la base de la lengua y la pared intestinal; tambin han sido halladas lipasas en casi todos los tejidos asociados al metabolismo intermediario. Pruebas "in vitro" han dado respuesta del papel de las enzimas en la digestin tales como la lipasa pancretica, la cual tiene accin especfica en los enlaces steres de las posiciones alfa.

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Se ha estudiado la influencia del grado de emulsificacin en la hidrlisis. Los resultados han mostrado que la funcin de las bilis es de promover, estimular la emulsificacin y solubilizacin de los lpidos y esta funcin es debido a las sales de los cidos biliares. El mayor sitio de la digestin de los lpidos es el intestino delgado. En el duodeno el bolo alimenticio se encuentra con la bilis y el jugo pancretico. Ellos son alcalinos y funcionan en parte como neutralizantes del quimo gstrico. La emulsificacin de los lpidos por las sales biliares es aparentemente esencial para la digestin. Considerables cantidades de cidos grasos pueden ser absorbidos en ausencias de bilis lo cual tal vez indica poca diferencia con el modo de absorcin y que su papel principal es la de emulsificacin. El flujo de jugo pancretico igual que las sales biliares es regulado hormonalmente antes de la entrada del quimo gstrico dentro del duodeno. Un precursor de la lipasa en el jugo pancretico activas el lumen intestinal. Este mecanismo de activacin de la lipasa pancretica utiliza cofactores para la activacin. El papel de las sales biliares se extiende tambin a la absorcin donde los cidos hidrolizados y emulsificados con las sales biliares penetran a las clulas de la mucosa intestinal. Aqu se rompe la emulsin y las sales biliares van al hgado por va portal para ser posteriormente reincorporados al intestino va vescula conducto biliar, esto es la llamada circulacin etero-heptica. Digestin de triglicridos Los glicridos o grasas neutras son steres resultantes de la reaccin de los diversos cidos grasos con la gliricidia o alcohol trivalente. Se encuentran n el reino animal

C17H35-COOH C17H35-COOH +

HO-CH2 HO-CH

C17H35-COO-CH2 C17H35-CO-O-CH + 3H2O

C17H35-COOH 3 molculas de cido esterico

HO-CH2 Glicerina

C17H35-CO-O-CH2 Triestearina

Debido a la especialidad de la lipasa pancretica, slo las posiciones alfa de los glicridos son hidrolizadas y dejan como producto final el beta monoglicrido. Este grupo acilo de la posicin beta en el monoglicrido puede emigrar a la posicin alfa por la va enzimtica y despus ser hidrolizado por la lipasa para dejar como producto glicerina y cidos grasos. El mecanismo de hidrlisis de los triglicridos se muestra a continuacin.

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CH2O-COR1

CH2OH

CH2O-COR1

CHO-COR2 CH2O-COR3 Triglicrido

CHO-COR2 CH2O-COR3
diglicrido

CHO-COR2 + R1COOH +R3COOH CH2OH

- diglicrido c. graso 1 + c. graso 3

CH2OH 2 CHO-COR2 CH2OH

monoglicrido c. graso 1 + c. graso 3

+ R1COOH + R3 COOH

Actualmente se acepta que el 25-45% de la hidrlisis es completa (glicerina y cidos grasos) y los restantes 55-75% son absorbidos como monoglicridos. Se ha encontrado que los triglicridos se absorben en el orden de un 3%.
Digestin de fosfolpidos.

Se encuentra establecido que los fosfolpidos pueden ser formados en cantidades apreciables durante la absorcin de grasa. Las lecitinas y las cefalinas son los ms importantes fosfolpidos que se forman. Con respecto a la hidrlisis se piensa que se comportan de manera bastantes semejante a las grasas neutras. Los cidos grasos constituyentes de los fosfolpidos de la dieta pueden ser encontradas en un 80% esterificando las grasas neutras de la linfa. Si los fosfolpidos son hidrolizados hasta incluir la preparacin de la base nitrogenada del grupo de fosfato, la molcula resultante glicerofosfato es un punto de partida en la sntesis de triglicridos y un punto de contacto con el metabolismo endgeno de los carbohidratos a nivel de la mucosa intestinal. La fosfolipasa en el tejido animal efecta la hidrlisis como sigue:

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1 Lecitina lisolecitina

2 glicerol fosforil
3

+ c. graso

colina glicerol fosfato

+ c. graso + colina

4 glicerol + fosfato

1. 2. 3. 4.

Fosfolipasa A. Aislado en el pncreas u otros tejidos animales. Fosfolipasa B. Aislado en el pncreas y el hgado Glicerol fosforil colina diesterasa Fosfomonoestearasa

La hidrlisis en el intestino se supone transcurre por la misma va.

Digestin de colesterol

La hidrlisis de los steres del colesterol es sencilla por tener un solo enlace ster en esta molcula. Existen evidencias de una hidrlisis completa del ster de colesterol antes de ser absorbidos. El colesterol absorbido aparece esterificado en la linfa.
Absorcin y Transporte

Las grasas son absorbidas en el intestino delgado (parte superior del duodeno, yeyuno e ilen) dependiendo la relacin absorcin/lugar de absorcin, de la especie. La mezcla se grasa y sus productos de hidrlisis una vez en contacto con la pared intestinal son absorbidos, metabolizados y transportados por dos vas diferentes a la circulacin. La va principal de transporte es vasos linfticos-conducto torcico y la otra va es el sistema portal.
Transporte linftico

La composicin de la linfa del conducto torcico (%) es la siguiente: Glicridos Fosfolpidos Ester de colesterol Ac. Grasos libres 82 10 2 6

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Dentro de la fraccin de glicridos el 90% est constituido por triglicridos y como se vio en la parte de la digestin, los triglicridos son hidrolizados por la accin de la lipasa pancretica, por lo que se desprende debe existir una reesterificacin de las grasas en las clulas de la mucosa intestinal. Estas grasas se transportan en forma de quilomicrones (gotas de grasa de tamao microscpico) que contiene alrededor de un 2% de protena; tambin se transporta en cantidades mayores, como lipoprotenas, medio de transporte de los lpidos endgenos en la circulacin sistemtica.
Lipoprotenas

La insolubilidad de los lpidos en medio acuoso es tradicional y para que puedan ser transportados satisfactoriamente se asocian con las protenas sanguneas formando las llamadas lipoprotenas. Estas lipoprotenas se clasifican en: 1) quilomicrones, 2) lipoprotenas de baja densidad (LPBD) y 3) lipoprotenas de alta densidad (LPAD). Estas lipoprotenas se mueven asociadas a diferentes fracciones proteicas y de acuerdo con esta se puede clasificar en alfa y beta lipoprotenas. La correlacin entre estas va a ser: Alfa LP con la LPAD (> 1,063) Beta LP con la LPBD (<1,963) Las cuales han sido obtenidas por el mtodo de centrifugacin. El transporte de las lipoprotenas va a estar dado primeramente por la aparicin de quilocrones y despus las lipoprotenas de baja densidad. Los quilomicrones son destruidos en el hgado y posteriormente las grasas salen asociadas a las lipoprotenas de baja densidad sintetizadas en este rgano, de donde se pueden suponer que las LPBD van pasando a LPAD al ir perdiendo su contenido de lpidos. Los cidos grasos no esterificados son transportados por las albminas no tomando parte, por tanto, de la integracin de las lipoprotenas.
Tabla 1. Composicin de las lipoprotenas de plasma humano. Concentraci n mg/100 ml
100-250 130-200 210-400 290-400

Pptidos

Fosfolpidos

Colesterol libre
2 7 8 3

ster
6 15 38 14

Triglicrido AGNE*
83 50 10 5 1 1 -

2 7 (quilomicrones) 9 18 (LPBD) 21 22 (LPAD) 57 21

* cidos grasos no esterificados

Transporte de fosfolpidos y colesterol

Los fosfolpidos son en su mayor parte transportados por la lipoprotena y desempean un papel importante en el mantenimiento de la estructura de stas. El colesterol es transportado en las LPAD.

118

Sistema portal.

En el sistema portal son transportados los cidos de cadena corta principalmente en forma libre. La glicerina libre aunque no ha sido vista en este captulo es de esperar que sea transportada al hgado va la sangre portal.
Conclusiones

Los triglicridos constituyentes de las grasas dietticas son hidrolizados en el intestino delgado mediante la accin de la lipasa pancretica y las sales biliares a monoglicridos y cidos grasos. Durante la absorcin los monoglicridos son reesterificados a triglicridos y los cidos grasos tambin son reesterificados con el glicerolfosfato a triglicridos. Estos cidos grasos esterificados son absorbidos en la linfa como triglicridos y constituyen los quilomicrones. En el hgado los quilomicrones son destruidos y forman la LPBD la cual es liberada a la circulacin para suministrar los cidos grasos que son depositados en el tejido adiposo. En el caso de los rumiantes llegan al duodeno cidos grasos libres principalmente estericos, por lo que la composicin, del tejido adiposo de estos animales no depende de la dieta. A nivel de intestino los procesos de resntesis transcurren slo por va del glicerolfosfato, aunque la composicin lipdica de la linfa es similar en rumiantes y monogstricos.
Bibliografa a consultar.

Ballard, F. J., Hanson, R.W. y Kronfeld, D. S. 1969. Gluconeogenesis and lipogenesis in rumiants and non ruminants tissnes Fed.. Proc. Fed. Am. Soc. Exp. Biol. 28:218. Phillipson, A. T. 1970. Physiology of digestion and metabolism in the ruminant. Ed. E. Lewis. White, A. Handler, P. y Smith, E. L. 1968. Principles of Biochemstry. Mc. Graw-Hill. Wilson, T. H. 1962. Intestinal Absorption W. B. Sauders, Co. Philadelphia.

119

XV Digestin y absorcin de compuestos nitrogenados

Dra. Bertha Chongo Garca Contenido
Introduccin...........................................................................................................................................................................120 Degradacin ruminal del nitrgeno .......................................................................................................................................121 Constituyentes no proteicos ...............................................................................................................................................122 Protena alimentaria ..........................................................................................................................................................124 Sntesis de la protena microbiana ruminal (PMR)................................................................................................................124 Contribucin al animal ......................................................................................................................................................125 Origen de la protena que llega al duodeno ...........................................................................................................................125 Digestin intestinal de protenas............................................................................................................................................126 Aportes al animal...............................................................................................................................................................126 Reciclaje de la urea. Importancia Fisiolgica .......................................................................................................................127 Conclusiones..........................................................................................................................................................................128 Bibliografa a consultar..........................................................................................................................................................128

Introduccin

La alimentacin del ganado en el rea tropical experimenta grandes afectaciones por la carencia y explotacin eficiente de sus recursos alimentarios. A esto se une que los pastos en estas regiones presentan una baja calidad nutritiva que se afecta grandemente en los perodos de sequa. Adems de un incremento en la lignificacin, su contenido en protena es bajo, disminuye con la poca del ao sobretodo cuando son altas las temperaturas y los pastos no son fertilizados ni irrigados adecuadamente. Unido a esto, se debe considerar el hecho de que las tecnologas que a menudo se explotan en la regin, son deficitarias en suplementos proteicos o se utilizan mas como sustitutos del pasto, por lo que encarecen el sistema. Al ser los pastos deficitarios en este nutriente, la relacin energa protena tiende a ser con frecuencia el factor que limita la produccin animal. Uno de los problemas a los que se enfrentan los nutricionistas en el mundo es la carencia de fuentes de protena de buena calidad con posibilidades de uso en la alimentacin de los rumiantes. En el rea, la situacin se agrava al no disponer de suficientes fuentes convencionales de nitrgeno y poco conocimientos para hacer un uso adecuado de las que sufren ruptura en el rumen como resultado de la degradacin y las que lo atraviesan sin ser degradadas, correspondiendo las leguminosas a estos grupos. Por lo que el nitrgeno constituye la mayor limitacin para tener un uso eficiente de los residuos de cosecha, pastos y forrajes. Es an mas importante en el trpico, en los pastos durante el perodo seco y en el subtrpico en el invierno. El objetivo de esta conferencia es trasmitir de forma sinttica la importancia del metabolismo del nitrgeno en el tracto gastrointestinal de rumiantes, de las diferentes rutas metablicas que involucran al nitrgeno en el rumiante el que est estrechamente relacionado con el mrtabolismo de la energa que deciden la produccin animal.

120

Degradacin ruminal del nitrgeno

Una vez que el alimento ingerido alcanza el rumen, los compuestos nitrogenados de acuerdo a sus caractersticas son atacados por la flora ruminal segn la naturaleza de la protena y solubilidad. En general, en el caso de los pastos donde gran parte de la protena se solubiliza es degrada en el rumen gracias a su extensa y variada microflora. Como resultado de de la degradacin de las proteinas en el rumen se producen pptidos, aminocidos y por ltimo y no menos importante NH3. Se plantea que la presencia de los pptidos y aminocidos en el rumen es baja, por lo que se pueden considerar como intermediarios, no obstante tienen dos origenes aminocidos libres que forman parte de la dieta y aminocidos producto de la hidrlisis de las protenas. En el rumen estos aminocidos pueden ser:

Absorbidos por la pared ruminal, metabolizados por los microorganismos ruminales, pasar al tracto digestivo inferior.

Adems se producen cidos grasos voltiles (AGV) ramificados fuente de energa en rumiantes entre otros compuestos. Tambin, se sintetizan cantidades variables de biomasa microbiana, estos nutrientes son utilizados por el rumiante para cubrir sus requerimientos de energa y protena.
SANGRE PROT NO DEGRADABLE PROTEINA

NH 4 NH 4
DIGERID

PROTEINA BACTERIANA HIGADO PROTEINA DIETARIA

ENERGIA FERMENTABLE

HECES

Figura 1. Metabolismo del nitrgeno en el rumen

Al proceso de degradacin ruminal de las protina se le denomina proteolisis ruminal, de manera que la protena que conforma la dieta que pasa sin ser degradada y la protena microbiana, sern digeridas y absorbidas en las partes mas bajas del tracto gastrointestinal. Algunos de los factores que influyen en la magnitud de la degradacin ruminal de la protena son:

121

El grado de solubilidad de la protena El pH del medio ruminal La concentracin ruminal de amonaco (NH3 )

La solubilidad es una caracterstica inherente y determinada por el tipo de protena presente en el alimento. Las albuminas y globulinas son las ms solubles, mientras que prolaminas y glutelinas son las fracciones ms insolubles del alimento (Coto et al. 1990). La tabla 1 cita ejemplos de protenas de origen animal, y vegetal poco degradables en rumen y muy degradables.
Tabla 1. Niveles de degradabilidad ruminal de diferentes fuentes de protena Baja degradabilidad
Harina de pescado H. gluten de maiz Harina de sangre Follaje de E. ciclocarpum

Alta degradabilidad
Harina de soya Harina de colza Follaje de G. sepium Follaje de M. alba

La protelisis que ocurre durante la fermentacin ruminal puede beneficiar al animal hospedero si la protena microbiana sintetizada a partir de los productos de la fermentacin de la protena es de mayor valor biolgico que la protena del alimento, aunque se considera que la proteina sintetizada en el proceso de novo en el rumen es de muy alta calidad. Varias especies de bacteroides, Butyrivibrio sp. y Selenomonas sp. parecen ser las bacterias mas potencialmente proteolticas. Sin embargo, ninguna especie es en particular se considera como activa y la mayora de las evidencias sugieren que una variedad de bacterias ruminales poseen proteasas activas y es colectivamente responsable de la intensa actividad proteoltica en el rumen. Las proteasas de las bacterias del rumen compuestas por endo y exopeptidasas estn unidas a la clula pero localizadas sobre la superficie celular para ofrecer acceso libre a los sustratos. Hoy se conoce que estas proteasas de las bacterias ruminales son enzimas constitutivas que no parecen estar sujetas a control metablico, por tanto, la maquinaria enzimtica necesaria para la degradacin ruminal, debe mantener su actividad una mayor versatilidad de condiciones.
Constituyentes no proteicos

El NH3 es el intermediario central en la degradacin y asimilacin del nitrgeno en el rumen y es tambin el nutriente nitrogenado preferido requerido por muchas especies de bacterias. Los niveles de NH3 en el rumen varan desde 0 a 130 mg/ml dependiendo fundamentalmente de la fuente de nitrgeno y del momento postpandreal. El incremento del NH3 en el medio trae como resultado un aumento de este en sangre por absorcin a travs de la pared ruminal. El NH3 que se metaboliza en el rumen puede tener sus orgenes en la desaminacin de los aminocidos, hidrlisis de la urea y otros compuestos nitrogenados, etc. Las vas metablicas fundamentales del metabolismo amoniacal son:

Pasaje a las partes ms bajas del tracto digestivo. Conversin a protena microbiana. Absorcin a travs de la pared ruminal.

122

Los factores que influyen en la utilizacin de NH3 por los microorganismos estn asociados con el suplemento de esqueletos carbonados y otros compuestos necesarios para la sntesis de una nueva protena. El nivel con que este compuesto es utilizado para este proceso depender principalmente de la energa disponible que se produce por la fermentacin de los carbohidratos, ambas de forma sincronizada optimizan el proceso. Se conoce que bajo estas condiciones se producen como promedio 20 g de protena microbiana por 100 g de matera orgnica que es fermente en el rumen. Entonces la cantidad de protena bacteriana puede variar entre 400 hasta aproximadamente 1500 g/d en dependencia de la digestibilidad de la dieta. As el porciento de protena en las bacterias est en un rango entre 38 y 55 % en dependencia del tipo de alimento que consuma el animal y del pasaje de bacterias adheridas a la fibra haca las partes bajas. Las caractersticas digestivas del rumiante permite el uso en su dieta de fuentes de nitrgeno no proteico un ejemplo de ello y que ha sido grandemente utilizado en los sistemas ganaderos en el trpico lo constituye la urea. Cuando esta llega al rumen es totalmente soluble y rpidamente hidrolizada con un alto nivel de produccin de NH3 por lo que debe ser empleada con cuidado para evitar intoxicaciones. En la prctica la urea es mas utilizada cuando se emplean alimentos altos en energa y pobres en protena ejemplo de esto lo constituye la miel final en los sistemas de ceba bovina en el trpico, tambin ha sido empleada con granos de cereales, pulpa de remolacha azucarera, subproductos de la caa de azcar mejoras en la ganancia de peso vivo (toros de ceba estabulados). Sin embargo puede ser empleada con xitos cuando se requiere balancear en el rumen la disponibilidad del nitrgeno degradable en rumen, siempre que la fuente de energa disponible as lo requiera. Por supuesto que la urea no es el suplemento indicado cuando se desea suplementar a alimentos con niveles elevados de nitrgeno disponible (Soya, forrajes de algunas leguminosas, gramneas jvenes), ya que pueden provocar una explosin en la produccin de amonaco en rumen, con malos resultados en el comportamiento animal. En la vaca lechera los niveles de amoniaco reportados como apropiados oscilan entre 150 200 g/vaca/d si se desean mejorar indicadores de consumo, palatabilidad etc., en cualquier caso se requiere de una adaptacin previa para lograr buenos resultados. Mientras que su suministro en la ceba de animales posibilita el uso de niveles superiores cuando se trata de dietas de miel. Bajo estas condiciones se reportan ganancias de peso vivo adecuadas en diferentes sistemas de alimentacin. Cabe sealar que la urea no es la nica fuente de nitrgeno utilizada en los rumiantes se reporta el posible uso de sales amoniacales su rpida hidrlisis en rumen ofrece nitrgeno disponible para la sntesis de protena aunque existe el riesgo de toxicidad y muerte rpida cuando no est controlado. En Cuba la miel amonificada ha permitido incrementos en la ganancia de peso vivo de toros estabulados por encima de 950 g/animal/d. El biuret es un producto del calentamiento de la urea a temperaturas elevadas y ha sido empleado en los rumiantes, su hidrlisis en rumen es a amoniaco y ocurre a menor velocidad que la de la urea lo que pudiera representar ventajas siempre que los animales estn bien adaptados ya que de lo contrario el producto no se hidroliza completamente en el rumen pasa por metabolismo animal sin ser degradado y se excreta pro la orina de forma intacta encareciendo el sistema. La conveniencia de utilizacin esta relacionada con su costo que generalmente supera al de la urea.

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Protena alimentaria

La cantidad de nutrientes de un forraje y su calidad nutritiva son factores que determinan el nivel de produccin de cualquier explotacin ganadera. En tal sentido, los forrajes tropicales por lo general, son de baja calidad y deficitarios en protena (niveles inferiores a 10 %) y de gran solubilidad. Por lo que precisan de una complementacin en la alimentacin de los rumiantes con protena de buena calidad. Desde luego que el uso de protena de buena calidad depender de la calidad de la fuente proteica y de las necesidades nutritivas segn propsito lo que dar la eficiencia econmica del sistema atendiendo al costo de la protena, una opcin sostenible la constituye el uso de follaje de arbreas o los sistemas silvopastoriles ya que estas fuentes son apreciadas por su buen contenido de protenas as como por disponibilidad de otros nutrientes como vitaminas y minerales. Segn sea la fuente de protena alimentaria una parte de la protena de la dieta se degradar en el rumen y otra parte escapar a esta degradacin al pasar en forma intacta al resto del tracto donde ser digerida lo que contribuir a la nutricin del animal (Tabla 2).
Tabla 2. Efecto del nivel de protena sobrepasante en dietas de melaza en la ganancia diaria y la conversin alimenticia

Protena sobrepasante % Ganancia diaria kg/d Conversin alimenticia

2.6 1.10 8.06

3.8 1.17 7.10

5.0 1.27 6.87

Sin embargo la no Degradabilidad en rumen de la protena vara entre fuentes proteicas, se puede resumir que en los forrajes las protenas son mas degradadas en rumen (60 - 87 %) que en alimentos concentrados (30 70 %) o en leguminosas (45 - 80 %). En esta ltima depende de que la protena en la planta se encuentre libre o acomplejada entre otros factores, en todo caso pueden hacer un aporte de nitrgeno importante con beneficios en el comportamiento animal.
Sntesis de la protena microbiana ruminal (PMR)

Un aspecto importante del retculo rumen es su capacidad de digerir lentamente la fibra por los microorganismos del rgano con la consecuente produccin de una nueva protena de origen microbiano capaz de aportar al animal aminocidos para su metabolismo. Este hecho es particularmente eficiente cuando la condicin nutricional de la dieta es baja por tratarse de materiales con alto contenido de celulosa y pobres en protena. La sntesis microbiana a partir del NNP del animal, produce una protena adecuada para el animal cuando las producciones son relativamente bajas. De manera similar sucede al utilizar la urea que recicla del cuerpo animal. Se ha indicado a partir de estudios con istopos marcados que entre un 2640 % de la protena microbiana puede ser sintetizada a partir de la urea de la dieta. Esta condicin

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indica que para mejorar el comportamiento productivo entonces se requiere de otras fuentes proteicas provenientes del alimento. Parte de la protena microbiana sintetizada se degrada en el rumen, aunque su mayora escapa sin degradarse y llega al abomaso adherida a las partculas del alimento. Es all donde comienza entonces su digestin. Sin embargo, se necesita precisar las insuficiencias en la sntesis de protena en el rumen que se originan en casos de desbalance de algn nutriente o el uso inadecuado del alimento. As, cuando se utiliza en la dieta protena de buena calidad y el amoniaco producido no puede ser utilizado para la sntesis por insuficiencias en la cantidad de energa fermentable, el proceso de sntesis es poco eficiente. Este caso con frecuencia es tpico en la mal nutricin energtico proteica en el trpico, donde se comprometa la salud de los rebaos. A tal efecto, el empleo de leguminosas en los sistemas contribuye a mejorar el balance de energa protena y permite mejorar los resultados productivos como se indica en borregos en crecimiento (Tabla 3).
Tabla 3. Consumo y ganancia de peso en borregos en crecimiento suplementados con forraje de por (Erytrina) con diferentes fuentes energticas. Suplementos
Erythrina sola Erythrina + melaza Erythrina + melaza + pltano verde Erythrina + pltano verde Erythrina + ame

Consumo total Ganancias de peso, (% PV) g/d

3.5 4.0 4.2 4.4 4.3 74 92 91 112 128

Contribucin al animal

La eficiencia con la cual el rumen sea explotado permitir contribuir en mayor cuanta con su protena microbiana a la nutricin del animal. No obstante, se indica que alrededor de un 60 % de los aminocidos absorbidos en el intestino delgado son provenientes de la protena de las bacterias, mientras que el 40% que resta se corresponde con la protena no degradada en el rumen. Un hecho curioso lo constituye la composicin de aminocidos de la protena microbiana que es relativamente constante respecto a la protena dietaria. Adems, se plantea que la protena microbiana ruminal contiene todos los aminocidos incluyendo los esenciales, sus niveles permiten una aproximacin a las proporciones de aminocidos necesarios para la sntesis de la leche por la glndula mamaria.
Origen de la protena que llega al duodeno

En los rumiantes la protena que llega al duodeno tiene dos orgenes uno, es la contribucin de la protena de la dieta que escap a la degradacin ruminal y la otra la que se sintetiz en el rumen de los animales. Ambas son protenas que sern digeridas y absorbidas en esta seccin del tracto gastrointestinal.

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Digestin intestinal de protenas Aportes al animal

La digestin en las partes bajas del tracto gastrointestinal depende en gran medida de lo que el rumen sea capaz de aportar. Al abomaso e intestino delgado llega una mezcla constituida por protenas, pptidos y aminocidos de origen diettico que escapan a la digestin ruminal, protena microbiana producida por los microorganismos del rumen y fuentes de nitrgeno endgeno (compuestas fundamentalmente por material secretado en el tracto digestivo y tejido de los epitelios). Los mecanismos de digestin en esta seccin del tracto son propios del animal y llavados a cabo por un equipo de enzimas del pncreas denominadas proteasas (tripsina , Quimotripsina) que hidrolizan a la protena hasta sus aminocidos los que una vez absorbidos por mecanismos complejos luego pasan a la sangre, higado y tejidos y contributyen directamente al metabolismo animal. Los resultados de investigacin muestran que la digestibilidad intestinal de la protena no degradada en rumen difiere entre fuentes de naturaleza diferentes con rangos que pueden variar entre 50 y 95 % en la tabla 4 se ilustra una recopilacin de la literatura.
Tabla 4. Digestibilidad intestinal de la protena no degradada en rumen (PNDR g/kg) estimada y medida en el laboratorio. Alimento
Harina de pescado Harina de soya* Harina de colza Harina de gluten de maz Harina de semillas de lupino Chicharos Cebada Avena Leucaena l. Harina de sangre Harina de algodn Harina de Girasol

TPDNDR (calculada)
952 962 742 907 537 613 756 626 74.68 77.60 92.24

TPDNDR (medida)
939 939 779 925 860 834 884 785 76.57 52.66 83.13

AAT
318 211 116 459 68 89 103 66 -

El nitrgeno que an resisti la hidrlisis postruminal (residuos microbianos, clulas descamadas del TGL, urea que difunde de la sangre) pasa al intestino grueso. La flora cecal predominante son los bacilos Gram (Bacteroides, Butirivibrios y Fusobacterium) los cuales producen AGV, NH3 y protena microbiana. La intensa actividad proteoltica, desaminativa y ureoltica producen altos niveles de NH3 isobutirato e isovalerato en el contenido cecal. El NH3 es el principal componente que se absorbe en el intestino grueso cuya mayora es utilizada en procesos anablicos para sntesis de aminocidos no esenciales en el hgado.

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Reciclaje de la urea. Importancia Fisiolgica

En el rumiante al igual que en las especies monogstricas, la urea constituye el producto final del metabolismo del nitrgeno resulta la ms abundante y es la forma en que principalmente se elimina el nitrgeno. La fuente principal de nitrgeno para la sntesis de urea en el hgado proviene del proceso absortivo. La sntesis de urea en los rumiantes tiene gran importancia por contribuir a la nutricin nitrogenada del rumen. Esta urea sintetizada en el hgado, puede regresar al rumen por dos rutas diferentes. a travs de la saliva. a travs de la pared ruminal.

La urea puede ser reciclada y utilizada como fuente de nitrgeno por los microorganismos ruminales. El grado de reciclaje de la urea por va salival al rumen puede ser directamente proporcional a su concentracin en sangre y a la cantidad de saliva segregada. Aunque se ha encontrado que si bien la concentracin de urea salival se puede correlacionar con la concentracin en sangre, la primera puede ser ms baja. La concentracin de urea en sangre est influenciada por el grado de oxidacin de los aminocidos absorbidos y por el nivel de absorcin de amoniaco ruminal, por tanto, la concentracin de urea sangunea refleja en gran medida un balance de nitrgeno dietario.Tanto en cuanto al grado en que los requerimientos de nitrgeno para los microorganismos del rumen han sido cubiertos a partir de los del propio animal hospedero, es decir, el nivel en que tanto la cantidad como la composicin de los aminocidos llenan las necesidades del animal hospedero. Se indica que la urea presente en la saliva de borregos puede representar la mayor parte de la urea que entre en el rumen, adems se ha demostrado que hasta un nivel de 7.3 g de nitrgeno diario pueden entrar al rumen de borregos en forma de urea y que nicamente 15 % de este nitrgeno puede ser atribudo a la urea presente en la saliva, lo que indica que la de origen sanguneo es la fuente ms importante. Otra va mediante la cual llega urea al rumen es la dieta. Una vez en el rumen, la principal va metablica de la urea es su hidrlisis por la ureasa de los microorganismos ruminales. La velocidad de hidrlisis es muy alta La actividad de la ureasa tiene un pH ptimo entre 6.4-6.9 . Es difcil encontrar intoxicacin con urea debido a las posibilidades de reciclaje sealadas anteriormente. La toxicidad se puede producir cuando el hgado no puede convertir todo el NH3 en urea. Cabe notar que el NH3 es el responsable de los sntomas de intoxicacin que caracterizan el coma heptico. La urea introducida en el rumen se hidroliza ms rapidamente que lo que puede ser utilizada en el sitio. Se calcula que solo 1/5 del NH3 liberado se utiliza para la sntesis proteica de los microorganismos ruminales, el resto se absorbe y pasa al hgado. La actividad de la enzima ureasa ruminal es tan grande que nunca se acumula urea en el contenido normal del rumen, por degradarse completamente. La excrecin de la urea se regula en los tbulos renales por reabsorcin en forma pasiva, an cuando puede efectuarse en forma activa .

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La formacin de urea en el hgado, su movimiento al rumen (donde se utiliza en la sntesis proteica microbiana), as como subsecuente digestin y absorcin en el tracto digestivo, constituye un ciclo de regeneracin de protenas. Se considera que la protena producida por el reciclaje de la urea, puede ser una valiosa adicin a la dieta de aminocidos. El beneficio que la urea endgena proporciona al animal es estimular el crecimiento bacteriano aumentar el apetito y permitir un mayor consumo de energa. Conclusiones Se precisaron en forma resumida los complejos aspectos del metabolismo del nitrgeno en los rumiantes. Se particulariz en el NNP como parte importante del nitrgeno de la dieta sufre degradacin microbiana en el rumen y su contribucin al metabolismo. El NH3 es la principal fuente de nitrgeno utilizada por los microorganismos para su crecimiento. Se indica la importancia de la proeina de la dieta y la proteolisis en el rumen con aportes de aminocidos y el NH3 resultados de esta y de su utilizacin para la sntesis de protena microbiana La importancia del metabolismo del nitrgeno en rumen radica en la capacidad de sus microorganismos de sintetizar a partir de los compuestos nitrogenados sus propias protenas, las cuales sern luego utilizadas por el hospedero. A partir de los productos de catabolismo proteico ruminal ocurre una regeneracin de este nutriente esta vez en forma de clulas microbianas. Por ltimo se describe la importancia metablica del nitrogeno y su contribucin a la produccin animal Bibliografa a consultar. ANON 2002. Rumen Enviromental En: Comparative Nutrition: http:://www@rumen env. HtmChongo, B. 2002. Avances en la suplementacin para la produccin animal en los sistemas silvopastoriles. Conferencia Memorias del curso Internacional Sistemas Silvopastoriles una alternativa sostenible EEPF Indio Hatuey, Matanzas. Chongo, B. 2003. Metabolismo de las protenas en el rumen e intestinos y su utilizacin por el animal. Curso de Fisiologa Digestiva. Diplomado La Noria FIRA. Mxico. Hennessy, D.W., Kahn, L.P. y Leng, R.A. 1996 By pass proteins and associated technologies in drought. En : users Guide to Drougth Feeding alternatives. P.21 Ed UNE, New England, Australia. Hogan, J. 1996 Supplementary feeding of Australian Ruminants. Avances en la suplementacin para la produccin animal en los sistemas silvopastoriles La O, O., Chongo, B., Valenciaga, D. y Oramas, A. 2002 digestibilidad intestinal de la protena indegradable en rumen en Leucaena leucocephala. Rev. Cubana de Cien. Agrc. 3. 48. Masoero, F., Fiorentini, L. Rossi, F. y Piva, A. 1994. Determination of Nitrogen intestinal digestibility in ruminant. Anim. Feed Sci and techn. 48: 253. Orskov, E.R. 1986 Protein Nutrition in Ruminant 2nd Ed. Academic Press, London UK. Pino, D. 1997. Fisiopatologa de la mal nutricin energtica y proteica en bovinos en pastoreo. En Mejora de la ganadera mestiza de doble propsito p.180. Maracay, Venezuela. Rmond, D.J.P., Chaise E., Delval, E. y Poncet, C. Urea and Ammonia net transfer across the rumen wall of sheep. J. Anim. Sci. 71: 3215. Tareque, A.A.M.1996 Use of Non Protein Nitrogen in Farming Systems in Bangladesh Avances en la suplementacin para la produccin animal en los sistemas silvopastorilesVolden, H. 1999. Protein

128

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XVIII METABOLISMO MINERAL

Dra. Odilia Gutirrez y Dra. Lourdes Savn Contenido
Introduccin ...................................................................................................................................................................................... 130 Metabolismo y funciones de los elementos minerales .................................................................................................................... 131 Calcio ............................................................................................................................................................................................. 131 Fsforo ........................................................................................................................................................................................... 133 Magnesio ........................................................................................................................................................................................ 135 Sodio, cloro y potasio ..................................................................................................................................................................... 137 Azufre ............................................................................................................................................................................................. 139 Manganeso ..................................................................................................................................................................................... 140 Zinc................................................................................................................................................................................................. 141 Hierro ............................................................................................................................................................................................. 142 Cobre .............................................................................................................................................................................................. 143 Selenio ............................................................................................................................................................................................ 144 Cobalto ........................................................................................................................................................................................... 144 Yodo ................................................................................................................................................................................................ 145 Minerales Orgnicos......................................................................................................................................................................... 146 Selenio orgnico ............................................................................................................................................................................. 147 Cromo orgnico .............................................................................................................................................................................. 147 Microelementos nuevos y elementos txicos ................................................................................................................................... 148 Conclusiones ...................................................................................................................................................................................... 149

Introduccin

Los elementos minerales son nutrientes esenciales para todos los animales e influyen en su eficiencia de produccin. Constituyen cerca del 5 % del peso total del organismo y estn implicados en la mayora de las reacciones metablicas que ocurren a nivel intra y extra celular. La clasificacin ms generalizada los divide en dos grandes grupos: macrominerales y microminerales o elementos traza.
Tabla 1: Clasificacin de los minerales Microminerales
Calcio (Ca) Fsforo (P) Potasio (K) Magnesio (Mg) Sodio (Na) Azufre (S) Cloro (Cl)

Microminerales, o Minerales Traza

Arsnico (As) Boro (B) Cadmio (Cd) Cromo (Cr) Cobalto (Co) Cobre (Cu) Flor (F) Yodo (I) Hierro (Fe) Plomo (Pb) Litio (Li) Manganeso (Mn) Molibdeno (Mo) Nquel (Ni) Selenio (Se) Silicio (Si) Estao (Sn) Vanadio (V) Zinc (Zn)

La clasificacin con relacin a su funcin biolgica es variable debido a que constantemente aparecen elementos considerados como esenciales con funciones conocidas. Gran parte de las enfermedades carenciales y metablicas de los animales domsticos se debe a la ingestin continuada de dietas deficientes, desequilibradas o muy ricas en minerales. Esto da lugar a cambios en el funcionamiento en las concentraciones de los minerales presentes en los fluidos orgnicos. Estas circunstancias pueden conducir a lesiones bioqumicas o alteraciones en las funciones fisiolgicas.

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Metabolismo y funciones de los elementos minerales Calcio y Fsforo

El calcio y el fsforo tienen funciones vitales en casi todos los tejidos del cuerpo y deben estar disponibles para los animales en las cantidades y relaciones adecuadas. Estos elementos representan ms del 70% del total de los minerales del cuerpo y generalmente se estudian juntos debido a la interrelacin que existen entre ellos. Aproximadamente el 99 % del calcio y el 80 % del fsforo del cuerpo estn presentes en los huesos y los dientes. Se ha establecido que la relacin Ca:P y el nivel de la vitamina D pueden afectar la utilizacin tanto de uno como del otro.
Calcio

El calcio constituye alrededor del 2% del total del peso del animal. La concentracin de suelo vara en los diferentes mamferos de 9 a 15 mg/dl. Este mineral se encuentra en estado dinmico y es constantemente depositado y movilizado de los rganos de reserva. El calcio existe en 3 estados en de la sangre y fluidos del cuerpo. Como calcio soluble ionizado (in libre) Como calcio cido orgnicos no ionizado como el citrato Calcio ligado a la protena cuya fijacin aumenta con el pH. Solo el calcio soluble ionizado es fisiolgicamente activo Absorcin. El calcio se absorbe por mecanismo del transporte activo a lo largo del intestino aunque el sitio preferencial de absorcin es el duodeno la cantidad de calcio absorbido depende de varios factores entre los que se encuentran: La forma de nivel de ingestin del calcio Niveles absorbidos de calcio y fsforo El estado de la vitamina D en el animal La presencia de lactosa Sales biliares y grasas cido ftico, hierro y oxalato El calcio en los alimentos usualmente est presente como sales de cido ftico, fosfrico, oxlico, carbnico o tartrico. Estas sales son solubles a un pH bajo y aceleran la absorcin de los cidos de la dieta. La razn calcio fsforo tienen gran repercusin en el grado de absorcin de los niveles sanguneos de ambos elementos. Un exceso de cualquiera de los dos provoca un aumento en la excrecin fecal por formacin de calcio insoluble que no est disponible para la absorcin. Se ha comprobado que la vitamina D aumenta la absorcin de calcio a nivel de intestino solo cuando las sales son solubles. Las principales hiptesis plantean que:

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La vitamina D o sus derivados intensifican la difusin de los iones calcio a travs de la pared intestinal al contrarrestar los factores que reducen la concentracin de calcio (Ca+2) o por aumento de la permeabilidad de la membrana del epitelio intestinal. Es esencial para la formacin o iniciacin del mecanismo especial del transporte de calcio en la pared intestinal. Se ha comprobado que los azcares que se absorben relativamente despacio, como la lactosa, ribosa, sorbosa, xilosa, y fructosa pueden incrementar la produccin del calcio al favorecer su unin con la protena que le sirve de transportador. Bajo condiciones normales de alimentacin las grasas tienen un efecto mnimo en la absorcin del calcio intestinal. Cuando las grasas se hidrolizan en los alimentos, dando lugar a cidos grasos y estos no son absorbidos, ocurrir una unin para la formacin de sal de calcio insoluble que se pierde por las heces. Algunos compuestos orgnicos e inorgnicos como el hierro, el oxalato y el cido ftico pueden formar sales insolubles con el calcio y de esta forma afectan su absorcin. Otro factor que regula la absorcin del calcio es la hormona paratiroidea (PTH) que eleva los niveles bajos de calcio en sangre y mantienen los niveles normales mediante la movilizacin del calcio en el hueso. Una alta dosis de hormona paratiroidea puede desmineralizar el hueso y dar lugar a la hipercalcemia. Funciones del calcio La principal funcin del calcio es la formacin del hueso. Se ha demostrado que el contenido de este mineral en el cuerpo est en funcin del peso vivo del animal. La intensidad de la calcificacin posnatal depende de la madures fisiolgica del nacimiento. Est involucrado en la accin de las enzimas que intervienen en la coagulacin sangunea. Disminuye la permeabilidad de la clula y mantiene la permeabilidad fisiolgica y sus poros al contrarrestar el efecto del sodio y el potasio. Se requiere para la contraccin muscular. En su ausencia todos los tipos de msculos pierden su habilidad para contraerse. El exceso de calcio detiene la contraccin muscular. Para el mantenimiento del grado correcto de excitabilidad neuromuscular y el tono. Se requiere para la actividad rtmica del corazn. Vas de excrecin Las vas fundamentales de la excrecin del calcio son el intestino y los riones La cantidad de calcio excretada en la orina es mayor en el caso de los cerdos, conejos y gallinas ponedoras. La concentracin de calcio en la orina de los terneros est por enzima de 100 mg/dl debido a que durante las primeras semanas de vida en los rumiantes el calcio se excreta principalmente a travs de los riones y no a travs de los intestinos. Existe una relacin entre la excrecin del calcio y del magnesio. El magnesio aumenta la excrecin de calcio y viceversa, ambos compiten por un mecanismo de la absorcin comn

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Regulacin hormonal Varias hormonas como la paratiroidea (PTH), la calcitonina, y la 1,25-dihydroxivitamin D2 y D3 Estn implicadas en la homeostasis de calcio durante la gestacin y la lactacin. La hormona paratiroidea regula el mecanismo de calcio y mantiene un nivel constante de este elemento en la sangre en combinacin con la calcitonina. El proceso activo responsable de la regulacin homeosttica del nivel de calcio en la sangre puede ser de dos tipos. a) Mantener la calcemia o sea la actividad de calcio realizado dentro de los lmites requeridos para las funciones fisiolgicas normales b) Mantener el producto de la actividades de calcio y fsforo (ACa2+ . AHPO4-2) en el fluido extracelular a un nivel que posibilite el crecimiento espontneo de los cristales de hidroxiapatita en el hueso. As la primera lnea de defensa contra la disminucin de la actividad Ca2* es cuando la cantidad de fosfato en el suero disminuye. Esto es debido al aumento de la excrecin por los riones a travs del efecto de la parathormona. Este mecanismo es muy rpido y sensible pero su potencialidades son limitadas. La segunda lnea de defensa contra la disminucin de la actividad del Ca+2 , que es menos sensible pero prcticamente inagotable es la movilizacin de los iones calcio a partir de los huesos por el efecto directo de la parathormona. Al mismo tiempo tiene lugar la eliminacin del exceso de fosfato a travs de los riones (Fig 1) Vas para la actividad de la hormona paratiroidea Aumenta la concentracin del calcio y se reduce la concentracin de iones fosfato en el plasma. As compensa el efecto de la liberacin de los iones fosfatos durante la eliminacin del calcio a travs de los huesos. De acuerdo con esto el aumento en la concentracin del calcio en el plasma procede de acuerdo con la formula P x Ca = K. Exceso de calcio. La alimentacin con niveles altos de calcio reduce el consumo de pienso, el aumento de peso y retarda la madures sexual tambin el exceso de calcio puede provocar el desequilibrio minerales por quelacin de otros elementos como el Zinc que reduce el calcio y provoca paraqueratosis en los cerdos. En las vacas lecheras puede aumentar la incidencia de la paresia al parto y las dietas ricas en este elemento dificultan la absorcin del fsforo, cobre y manganeso.
Fsforo

El fsforo constituye alrededor del 1% del peso total del cuerpo del animal del cual 80% est presente en los huesos y dientes. Alrededor del 10% se combina con protenas, lpidos carbohidratos y otros compuestos. En la sangre los niveles de fsforo, oscilan entre 4 o 5 mg/dl. El fosfato en la sangre es inorgnico, existen como una razn definida HPO2-4 /H2PO4 dependiendo del pH. El fsforo existe en los tejidos de animales y plantas como uno de los radicales fosfatos y nunca como fsforo elemental u otra forma.

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Absorcin. El fsforo se absorbe rpidamente y su sitio preferencial es el duodeno. La absorcin a este nivel se eleva ante concentraciones bajas de berilio, calcio, magnesio y estroncio. Tambin por deficiencias de factores dietticos que incluyen la forma en que se ingieren, el pH de los fluidos intestinales, la razn calcio, fsforo y la vitamina D presente. Excrecin. El fsforo se excreta a travs de las heces y en cantidades casi insignificantes a travs de la orina en los rumiantes. En los cerdos se eliminan en cantidades por los riones y el intestino. La determinacin de las prdidas endgenas son importantes en los rumiantes ya que estos animales excretan el fsforo endgeno casi exclusivamente a travs del tracto digestivo y la cantidad puede exceder a la que est presente como no digerida en el alimento. Disponibilidad de fsforo. Los fosfatos se encuentran en la naturaleza en forma de compuestos orgnicos y son utilizados en dependencia de la especie y la edad del animal. Las sales del cido fitico (fitatos) especialmente los de calcio y magnesio no son digeridas por algunos animales particularmente en las especies monogstricas y la asimilacin es baja. En los cerdos una pequea parte de los fitatos se hidroliza en el estmago por las fitasas vegetales, mientras que los rumiantes la hidrlisis de los fitatos tienen lugar en los preestmagos por accin de las fitasas bacterianas. Esto se explica porque el pH optimo para la fitasas de los cereales es aproximadamente 5.1 y muestra alguna actividad a un pH inferior a 3. Por lo tanto, existe un rompimiento considerable de el fitato de la dieta en el buche de los pollos y en el estmago de los no rumiantes, antes de que la secrecin gstrica reduzca el pH de la ingesta a nivel demasiado bajo para la actividad de la enzimtica. Esto no ocurre as en los rumiantes, porque el pH de los preestmagos es superior a 5.1. El fsforo de los suplementos inorgnicos y de los alimentos de origen animal se puede utilizar hasta en un 100%, mientras que el de las plantas puede oscilar entre 30 y 60%. La digestibilidad y por tanto la disponibilidad del fsforo se reduce cuando se suministra dietas bajas en energa, por lo que se considera que esta es indispensable para garantizar una buena utilizacin de fsforo. Funcin en fsforo. En el metabolismo de las grasas aparece el metabolismo intermediario de formacin de cefalina y lecitinas (los fosftidos) Es un componente esencial de los nucleoprotenas y cidos nucleicos como RNA y DNA. Desempea un papel vital en el metabolismo de los carbohidratos en la formacin de hexosas y triosas as como compuestos energticos como el cido adenilico y el fosfato de creatinina.

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Intervienen en el metabolismo de las protenas (formacin de fosfoprotenas), y en el metabolismo del msculo. El fosfato como constituyente de los fosfatos ricos en energas tiene una importancia clave en el metabolismo energtico de las clulas (como ATP) gran cantidad de coenzimas son compuestos fosforados. Deficiencia. La deficiencia de fsforo es la ms extendida en los animales domsticos alimentados con pastos y es ms frecuente en el ganado vacuno que en el lanar, ya que este ltimo al tener unas necesidades energticas por unidad de peso superior a las del vacuno por su tamao ms reducido consume mayor cantidad de alimento. Las ovejas satisfacen las necesidades fisiolgicas de fsforos con dietas cuyas concentraciones son inferiores a las del ganado vacuno. La deficiencia de calcio se presenta pocas veces en el ganado vacuno y lanar, excepto en las vacas de alta produccin que requiere grandes cantidades de este elemento. En los cerdos y las aves se observan deficiencias de calcio debido a que sus raciones suelen fundamentarse en cereales y otras semillas que son generalmente pobres en calcio. Actualmente, la utilizacin del pienso lquido, miel final y levadura torula en la alimentacin del cerdo atenan las deficiencias. En las aves se observan una enfermedad producida por las deficiencias de calcio denominada fatiga de las ponedoras que no es ms que un tipo de osteoporosis caracterizada por la prdida del fosfato dicalcico no solo del hueso modular sino de los huesos largos de las patas. Una deficiencia de calcio y fsforo puede conducir a: osteoporosis, prdida de apetito, descenso en la fertilidad y la produccin de leche y huevo, raquitismo y trastorno en el tamao de la glndula paratiroidea, hemorragia dispersa, lesiones en el tubo digestivo y otras. La primera respuesta fisiolgica ante una deficiencia alimenticia del fsforo consiste en el descenso de la fraccin del fsforo inorgnico del plasma (de 4.5 6.5 mg/dl desciende a 2 3 mg/dl). Segn disminuye el fsforo aumenta el calcio srico hasta niveles de 13 o 14 mg/dl e incluso superiores (fig. 2 y 3). El valor normal para la mayora de las especies mg/dl. Los mecanismos fisiolgicos que regulan el contenido de calcio de suero son ms eficaces de los reguladores del fsforo inorgnicos. Es por ello que los niveles de estos minerales en el suero no constituyen ndices precoses de la deficiencia nutritiva.
Magnesio

El 60% del magnesio se encuentra con el calcio de fsforo como sales complejas en los huesos y dientes. El resto del magnesio se encuentra en tejidos y en los fluidos del cuerpo. El contenido de magnesio a diferencia del calcio y el fsforo se mantiene casi constante en los tejidos cuando el animal es adulto. Los niveles en los suelos oscilan entre 1.3 3,3 mg/dl y se relacionan directamente con su contenido de la dieta

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Absorcin. Se absorben hasta el 30% del magnesio ingerido especialmente en el intestino delgado en forma de sales solubles de magnesio. Si la dieta es rica en amonio y fosfato puede formarse un compuesto insoluble de amonio- fosfato magnesio. Que no se absorben o lo hacen en baja proporcin . Asimilacin del magnesio. La asimilacin del magnesio en los animales depende del grado de prdida endgena de este elemento por las heces. El magnesio endgeno se segrega en el tracto gastrointestinal con la saliva y otros tubos digestivos y puede pasar a travs de la pared intestinal. La concentracin de Mg+2 en la saliva de los rumiantes es de 0.4 0.6 meq/l y vara inversamente por la velocidad de desagregacin. La prdida endgena en el ganado mayor es de 3 4 mg/kg PV/da, en cerdos, ovejas y caballos es de 2,5 , 2 y 2,3 mg respectivamente. En todas las especies la asimilacin de magnesio es baja y depende del tipo de alimento. La asimilacin de magnesio de rumiantes adultos es de 25 30 % en el heno, de 16 20% en los concentrados, de 20 25% en las dietas mixtas y de 50 55 % en otras dietas. Excrecin. El magnesio se elimina principalmente por las heces. La mayor parte se filtra a travs de los alimentos vuelve a ser reabsorbida en los tbulos renales. Bajo condiciones normales el magnesio endgeno y no absorbido se elimina del organismo principalmente a travs del tracto gastrointestinal. La cantidad de magnesio excretado por la orina es relativamente pequeo, aunque esta va desempea un papel definido en el mantenimiento de su homeostasis. As si la concentracin de magnesio en la dieta aumenta, su excrecin relativa en la orina aumente pero hasta cierto lmite. Funciones bioqumicas. Los iones metlicos se encuentran en 2 formas en las enzimas. 1. Metaloenzimas en los cuales el magnesio est ligado a la protena 2. Complejos metaloenzimticos no ligados a las protenas. En muchas reacciones catalizadas se puede sustituir el magnesio por el manganeso. Otra funcin del magnesio consiste en influir en la irritabilidad del sistema nervioso central al activar la colinesterasa que descompone a acetilcolina. Interrelacin calcio magnesio. Los niveles de calcio y fsforo en la dieta tienen un efecto notable en las necesidades de magnesio. Al elevar el calcio y el fsforo se elevan las necesidades de magnesio.

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Deficiencias de magnesio. Una deficiencia de magnesio en la dieta de ponedoras produce una rpida disminucin de la puesta, hipomagnesemia en sangre y merma el magnesio en los huesos. La alteracin del metabolismo de magnesio produce en los herbvoros la tetania de los prados esta enfermedad se presenta al inicio de la primavera cuando se saca el ganado a pastar en pasto que han sido abonado con potasio o nitrgeno. El incremento de la produccin de amoniaco en el rumen causa la deduccin de la absorcin de magnesio. La alteracin bioqumica ms importante es la existencia de niveles subnormales de magnesio y calcio en la sangre de 1 7 mg/dl de magnesio y 6,6 mg/dl de calcio) tambin la hipomagnesemia se puede presentar en terneros alimentados con dietas lcteas. Otra enfermedad asociada con la deficiencia de magnesio es la parecia puerperal o fiebre de la leche que, aunque lo caracterstico es una hipocalcemia aguda tambin se observa que los niveles de fsforos inorgnicos en el suero disminuyen a la mitad del normal. La deficiencia de magnesio no suele apreciarse, a menos que aparezca una diuresis grave natural o inducida.
Sodio, cloro y potasio

El sodio, potasio y cloruro son los principales determinantes del balance cido bsico y del balance de agua (sodio, potasio alcalino, cloruro cido). El balance cido base y el desbalance puede afectar muchas funciones corporales, incluyendo la velocidad de crecimiento, consumo de alimento, metabolismo proteico, metabolismo seo y respuesta al estrs. El sodio y el cloruro son iones extracelulares. El potasio es intracelular y constituye la base de las clulas corporales. Los animales carnvoros pueden recibir suficiente cantidad de sodio en su dieta. Los herbvoros, sin embargo, deben suplementar su dieta con sodio, ya que los vegetales, por lo general, poseen cantidades reducidas de este elemento y son ricos en potasio. Esto provoca una mayor excrecin de sodio. Las sales potsicas aumentan de forma notable el contenido de potasio en las plantas. Por lo tanto, a menudo hay en la alimentacin de los bovinos una relacin potasio-sodio desfavorable de 10:1 y aun superior. Absorcin. El sitio de absorcin del sodio potasio y cloro es el intestino delgado. Excrecin. La va de eliminacin del cloruro, sodio y potasio es a travs del rin. El mecanismo homeosttico que regula el metabolismo del sodio y potasio se halla lo suficientemente desarrollado de manera que los animales pueden sobrevivir durante largos perodos con consumos bajos de sodio y conservan el potasio, excepto en condiciones patolgicas. El potasio es prcticamente 100% asimilable. Casi todo el potasio que se elimina del organismo es de origen endgeno. El porcentaje de K excretado con la orina es de 75-86% en las vacas, 85-88% en la

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oveja y 90% en los puercos; ni la cantidad de potasio ingerido ni el nivel de alimentacin afecta la razn entre la cantidad de potasio eliminado por los riones y por el intestino. Un esquema acercas del metabolismo del sodio y potasio en el organismo animal se presenta en la figura 4 Funciones bioqumicas. El cloruro y el sodio facilitan la regulacin de la presin osmtica. El sodio regula el equilibrio cido bsico y el volumen fluido. El sodio y el potasio aumentan la irritabilidad nerviosa. En esta funcin se oponen a los efectos del calcio y magnesio. Na+ + K+ + OHCa++ + Mg++ + H+ El cloruro interviene en el transporte de CO2 mediante el desplazamiento de ClEl K facilita la captacin de aminocidos neutros. El sodio interviene en las clulas musculares durante la contraccin. El sodio es necesario para el transporte de aminocidos y de glucosa a travs de las mucosas y membranas celulares. La glndula adrenal es importante para la regulacin de la retencin de sodio y su insuficiencia conduce a la reduccin del nivel de sodio en la sangre. El metabolismo del sodio en el organismo se controla por el sistema endocrino (los mineralocorticoides-aldosterona y oxicorticosterona). La aldosterona controla el proceso de reabsorcin y Na+ en los tbulos del rin. La retencin de Na+ (y de agua) se acompaa usualmente por una secrecin intensa de potasio en la orina. Los H+ que se segregan en la orina compiten con K+. La reabsorcin de Na se puede acompaar por una secrecin preferencial de los K+ (en rumiantes) y de H+. Por otra parte, la secrecin de aldosterona puede regular, por si misma, los niveles de Na+ y K+ en la sangre. Se ha encontrado que la aldosterona suprime la absorcin d magnesio por la pared intestinal in vitro y produce hipomagnesemia in vivo. El efecto de la aldosterona en el metabolismo del magnesio puede ser secundario y se relaciona con el metabolismo del magnesio del sodio y potasio En los rumiantes a los que se les suministra dietas basadas en paja de caa tratados con hidrxido de sodio se observaron bajos niveles de magnesio en suero. Deficiencias. Las deficiencias dietticas de sodio se pueden producir durante la lactacin. Esto puede ser ocasionado por la prdida de este elemento en la leche en animales que crecen con rapidez y consumen cereales pobres en sodio en zonas clidas donde hay amplias prdidas de sodio con el sudor. Tambin ocurre en animales sometidos a trabajos intensos y en animales que consumen pastos deficientes de este mineral. En los cerdos y ganado lanar la deficiencia de sodio provoca inapetencia, disminucin del crecimiento, mala conversin del alimento del consumo de agua. Las gallinas ponedoras con raciones pobres de sal pierden peso y son propensas al canibalismo.

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Las dietas de los animales de granja son a menudo deficientes en sodio y por esta razn el nivel del elemento en la racin se debe controlar constantemente. Las deficiencias y excesos de potasio son poco frecuente en la alimentacin animal
Azufre

El azufre representa 0,15% del peso del organismo. Este elemento est presente en todas las clulas del cuerpo, principalmente en los tejidos orgnicos ricos en protena. El metabolismo del azufre y del nitrgeno estn asociados, ya que dos aminocidos importantes la cistina y la metionina contienen azufre. Hay evidencias de que el azufre puede ser limitante en ciertas dietas. Con el incremento del uso de la urea en la racin se sugiere un incremento de la suplementacin con sulfato inorgnico. El requerimiento de azufre del animal se cubre con el contenido de aminocidos azufrados y, parcialmente, con compuestos heteroclicos como la biotina y tiamina. Absorcin. La absorcin de azufre tiene lugar principalmente en el intestino delgado. Entre las distintas fuentes el azufre inorgnico se absorbe menos que el azufre orgnico en algunas especies, aunque no en todas. Excrecin. El azufre se elimina en las heces y en la orina, segn sea la forma en que administre la cantidad recibida. Funciones bioqumicas. Posible utilizacin, por los microorganismos en el tracto digestivo, del azufre elemental o del sulfato que se le aade a las dietas para cubrir la deficiencia. El azufre es indispensable para la sntesis de ciertos compuestos (mucopolisacridos) en el organismo. El azufre es esencial para los microorganismos, para la digestin de la celulosa, utilizacin del NNP (nitrgeno no proteico) y para la sntesis de las vitaminas del complejo B. Deficiencias. En los rumiantes puede presentarse una deficiencia del azufre si la protena es sustituida por NNP. En los corderos es ms fcil que aparezca una deficiencia de azufre, ya que lo necesitan para las funciones corporales y para el crecimiento de la lana. Exceso de azufre. El exceso de azufre mineral como sulfato tiene un efecto adverso en los pollos y cerditos (inhibicin del crecimiento, gastroenteritis). Se debe tener precaucin al usar sal de Clauber como fuente de azufre y sodio en dietas de terneros y vacas.

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Manganeso

Aparece distribuido por todo el cuerpo en cantidades mnimas, aunque tiende a concentrarse en las mitocondrias. Tambin se halla en el hueso, hgado, pncreas, rin, cerebro y corazn. El hueso es la fuente principal de manganeso y puede servir como depsito de este elemento. Tambin se halla en el hgado, msculos y riones. La concentracin de manganeso en el pelo o plumas se puede correlacionar con el nivel en la dieta y se ha recomendado que el contenido en los pelos del cuerpo de los cerdos se tome como criterio de un suministro adecuado de la dieta. Absorcin. El manganeso se absorbe principalmente en el intestino delgado, especficamente, en el duodeno en animales poligstricos y monogstricos, y su absorcin disminuye cuando existe cantidades excesivas de calcio, fsforo o hierro. El MN absorbido se elimina rpidamente de la sangre al hgado, huesos y pelos. Excrecin. El manganeso se elimina a travs de las bilis y hacia el tubo intestinal y es excretado en las heces. Se absorbe como Mn ligado a la bilis. Cada tomo tritura varias veces antes de su excrecin final. La excrecin de Mn en la orina es despreciable. Funciones bioqumicas. Como parte o activador de numerosas enzimas como la enzima arginasa. En la funcin del esqueleto, los msculos y el desarrollo de los genitales. Es esencial para el desarrollo de la matriz orgnica del hueso que est compuesto por mucopolisacridos. Se requiere en la sntesis de cidos grasos como quelato de manganeso. Interviene en el metabolismo de los aminocidos con el fosfato de piridoxal. Deficiencias. Aunque las deficiencias de manganeso se han producido experimentalmente en muchos animales, solo se ha presentado como problema, prctico en la alimentacin de las aves cuyas necesidades dietticas son ms elevadas que los mamferos. Las deficiencias se manifiestan como retraso en el crecimiento, anormalidades en el esqueleto, alteracin de las funciones de reproduccin y ataxia de los recin nacidos. En los bovinos una alimentacin deficiente en MN retrasa la madures sexual y disminuye la fecundidad. La produccin Lctea disminuye. El sntoma principal en los cerdos es el retraso en el desarrollo de los huesos largos. En las cerdas reproductoras los periodos de celos son irregulares y poco marcados, y se presenta alta mortalidad prenatal. Por ultimo, en las aves se observan trastornos seos conocidos como pirosis. Afecta la produccin de huevos y la incubabilidad.

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Zinc

El organismo animal normal contiene una concentracin de zinc de aproximadamente 30 partes por milln .Las mayores concentraciones de zinc en el cuerpo se encuentran en el tejido epidmico tales como la piel y el pelo, aunque no tienen preferencias por ningn tejido en particular Absorcin. En la mayora de las especies el zinc se absorbe principalmente en el segmento superior del intestino delgado (menos del 10% de la cantidad ingerida). La absorcin varia de acuerdo con la forma en se ingiere el elemento. El carbonato, sulfato y oxido de zinc as como el zinc metlico se absorben igual En el rumen de los rumiantes que reciben dietas de pasto solo hay 5-10% de zinc en la forma soluble (pasto tiene 50%) . Parece ser que el zinc se fija en la microflora de los preestmagos. En el abomaso y duodeno la solubilidad aumenta y puede ser de ms del 80%. El exceso de cido fitico reduce la absorcin de zinc. Los tejidos blancos disponen de un amplio depsito de zinc intercambiable que mantienen un equilibrio con el zinc del plasma. Los rganos como el hgado y la corteza renal son ricos en mitocondrias y poseen una cantidad mxima de zinc. Excrecin. El zinc se elimina principalmente por las haces y menos del 5% del ingerido se elimina por la orina hay un mecanismo homeosttico efectivo para el zinc a nivel del intestino. La homeostasis se mantienen por variaciones en las cantidades de zinc absorbido y de su excrecin endgena con las haces. Funciones bioqumicas. Es componente esencial de la anhidrasa carbnica, enzima que desempea un papel importante en el equilibrio as bsico en el organismo y en el desprendimiento de CO2 en la mucosa gstrica. En aves tiene un papel importante en la calcificacin del hueso y formacin de la cscara del huevo. El zinc es componente de la carboxipeptidasa pancretica y de varias hidrogenazos. Deficiencias. En los cerdos el aporte deficiente de zinc produce paraqueratosis caracterizada por lesiones cutneas, disminucin del crecimiento y del ndice de conversin de alimentos En las cerdas reproductoras disminuye la fecundidad y mortalidad postnatal de lechones. En pollos, ocasiona retraso del crecimiento, acortamiento y espesamiento de los huesos de las patas y engrosamiento de la articulacin del tarso, prdida del apetito y otros. En los terneros se manifiestan por crecimiento subnormal, alopecia, paraqueratosis en algunas regiones del cuerpo. Los corderos manifiestan alteraciones del apetito, comen lana y reducen el crecimiento. Las alteraciones bioqumicas de la sangre y los tejidos no son constantes, pero a medida que avanza la deficiencia se presenta una ligera disminucin de zinc en los tejidos hepticos, renales, cardiacos y musculares y un descenso mas intenso en el pncreas.

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Tambin las deficiencias de zinc hacen descender el nivel de sangre conjuntamente con la fosfatasa alcalina. Interrelacin del zinc con otros minerales. El consumo elevado de zinc disminuye la retencin de Cu y de Fe . La interaccin entre el Cu y el zinc se vio forzada al ver que el zinc proporciona una buena proteccin en los contra la intoxicacin por cobre. Hay una interrelacin entre la ingestin de zinc y el calcio, ya que se a observado la paraqueratosis principal y en cerdos que reciben dietas altas en calcio
Hierro

En los animales adultos se encuentra en cantidades que oscilan desde 60 a 90 ppm en tejidos exentos de grasa. Aproximadamente 57% del hierro total esta en la hemoglobina de la sangre y el 7% en la mioqlobina. El hierro se almacena en su mayor parte en forma de ferritina y hemosiderina. La medula sea es una de las ultimas reserva que queda agotada de hierro y tambin unas de las ltimas en recuperarse. En la figura 5 se representa el esquema del metabolismo del hierro en el organismo animal. Absorcin y excrecin. El duodeno es el principal sitio de absorcin de hierro en el tracto digestivo, aunque se produce alguna absorcin en el estomago. Este se absorbe en forma de ion ferroso y se reduce a ferrico en el estomago. Se cree que el mecanismo de absorcin es el siguiente, el hierro ferroso entra en la clula de la mucosa y se oxida a forma frrica. Este se combina con la protena apoferritina para formar ferritina, lo que precisa energa de los enlaces fosfato. En el otro extremo de la clula se reduce el hierro al estado ferroso ,separndose de la ferritina , pasa a la sangre y despus de la autoxidacin y en presencia del CO2 se une a la siderofilina para transportarse como hierro frrico. Funciones bioqumicas. Una de las principales funciones del hierro es la de ser componente del hemo que se combina con la qlobina para formar la hemoglobina. Acta como componente de la citocromoxidasa y xantinoxidasa. Los msculos contienen un compuesto portador de oxigeno la mioglobina que contienen hierro. Deficiencias. El primer signo de deficiencias es la anemia hipo crnica microcitica causada por insuficiencia de hierro para la formacin normal de hemoglobina. No existen pruebas convincentes de que los animales que pastan en condiciones naturales sufran deficiencias de hierro. Los animales jvenes de cualquier especie domstica pueden presentar deficiencias de hierro si consumen dieta lctea y carecen de otras fuentes exteriores de hierro.

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Exceso de hierro. Muchas veces el sobrante de sales de hierro de origen alimenticio pueden ocasionar trastornos nutritivos, formar fosfato insoluble que reducen la absorcin del fsforo, lo que produce el raquitismo, el fosfato de hierro insoluble absorbe vitaminas o elementos trazas inorgnicos que impiden su absorcin .
Cobre

El cobre es un elemento esencial para la alimentacin. En la mayora de los organismos adultos de las especies se hallan en concentracin de 1,5 a 2 ppm. La mayor concentracin de cobres se haya en el hgado al elevar los niveles alimentarios el contenido heptico. Absorcin. Tiene lugar en la porcin superior del intestino delgado y se incrementan con el CIH y disminuye con el calcio. Alrededor del 28% del cobre ingerido es absorbido. El cobre absorbido unido a la albmina plasmtica se transporta rpidamente al hgado y otros rganos donde se almacena en forma de protena que contienen cobre. El hgado es el sitio principal de almacenamiento de cobre y status de balance de cobre en el animal se pude evaluar mejor al determinar el contenido de cobre en el hgado. Un nmero de factores como en la edad, hormona del crecimiento, y el embarazo influyen en el balance de cobre en el animal. Excrecin. La mayor parte del cobre se excreta por la bilis. La excrecin urinaria de cobre se asocia con la concentracin de cobre que no est unida ala protena plasmtica. Funciones bioqumicas. El cobre esta involucrado en la formacin de los eritrocitos jvenes, pero no en la concentracin de hemoglobina. Tiene un papel funcional en la absorcin de hierro. El cobre participa en el proceso de osteognesis; en funciones protectoras, en la pigmentacin y queratinizacion del pelo y plumas. Es componente de la citocromo oxidasa, ceruloplasmina, galactosa oxidasa y uricasa. Enfermedades carenciales. La anemia es un sntoma general para todas las especies. En el ganado la deficiencia de cobre presenta altos niveles de hierro y bajos de cobre en el hgado. Cuando los pastos son pobres en cobre, el crecimiento de los corderos se retrasa, la lana pierde su rizo y se hace quebradiza. Se han detectado problemas reproductivos en las vacas que consumen dietas carentes de cobre. Aunque los animales no son muy sensibles al exceso de cobre, el problema de la toxicidad se hace se ha sealado en los ltimos aos, especialmente en los rumiantes debido a:

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Dosis excesivas de cobre (incluyendo cobre en los sustitutos lecheros) y el uso indiscriminado de cobre. Introduccin de cobre como aditivo alimenticio, sin tener en cuenta los microfertilizantes del suelo o el contenido en los alimentos. Uso de sulfato de cobre para la desperacitacion de los animales. Uso de mezclas Bordeaux en el ensilaje de ciertas cosechas Presencia de excretas de cerdos y aves (de animales alimentados con altas dosis de cobre) en las dietas de los rumiantes)
Selenio

Se considera un elemento esencial en la nutricin y esta asociado con el azufre en compuestos orgnicos e inorgnicos. En los rumiantes un gran porcentaje del selenio ingerido se puede incorporar por los microorganismos del rumen junto con la cistina y la metionina. Se absorben y se depositan en los tejidos como seleno aminocidos. En los no rumiantes la mayora del selenio del organismo esta presente como producto de adicin de selenio con los compuestos azufrados (cistina y metionina). Absorcin. La selenometionina se absorbe en el tracto gastrointestinal por un mecanismo de transporte activo aparentemente muy similar al que esta implicado en la conduccin de la metionina a travs de la mucosa intestinal. Excrecin. Se excreta por varias vas, siendo las mayores perdidas por la orina, por las heces y por el aire expirado. Funciones metablicas. Se ha comprobado que pequeas cantidades de selenio estimulan los procesos vitales y contrarrestan algunos efectos desfavorables de la carencia de vit.E Deficiencia. En el cerdo la falta de vit.E , de aminocidos con grupos SH(metionina cistina) o de selenio ocasiona hepatodistrofia toxica. En los terneros y corderos la carencia de selenio, unida a la vit.E , fsforo y otros factores puede ser la causa de la enfermedad del msculo blanco (distrofia muscular). Exceso. La digestin prolongada de cantidades relativamente pequeas produce sntomas txicos, especial mente en los animales jvenes donde se inhibe el crecimiento.
Cobalto

El cobalto es un elemento esencial en la nutricin, debido al papel que desempea en la formacin del ncleo central de la cianocobalamina o vitamina B12.

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Absorcin. Se absorbe en la porcin proximal del tracto digestivo de los rumiantes. En los monogstricos se sintetiza y se absorbe en la regin distal. Excrecin. Su principal va de excrecin es la orina, aunque cantidades menores se eliminan por las heces. Funcin bioqumica. La primera o quizs la nica funcin del cobalto es la sntesis de vit B12 y representa el 4% de la molcula. Deficiencia. La deficiencia se ha observado solo en rumiantes y se puede producir por bajo contenido de cobalto en los suelos o por escasa disponibilidad de este elemento para las plantas. Los rumiantes sintetizan la vitamina B12 utilizando el cobalto. Cuando escasea este elemento, la sntesis de vitamina B12 disminuye originando anemia.
Yodo

Se encuentra en gran proporcin en la glndula del tiroides. Absorcin. Se absorbe a travs de todo el tracto digestivo y por la piel. Esta presente en pocas cantidades en las heces, lo que indica que casi todo el yodo administrado oralmente se absorbe. Excrecin. Se excreta casi totalmente por la orina. El yodo urinario es lo suficientemente constante para servir como indicador de la funcin tiroidea del animal. Funcin bioqumica. Se usa conjuntamente con la tirosina en la regulacin de la velocidad metablica del organismo. Deficiencia. La deficiencia de yodo en los animales domsticos trae como consecuencia cras muertas. Los que sobreviven tienen las tiroides agrandadas.

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Minerales Orgnicos

Este nuevo concepto desarrollado durante la ltima dcada ha constituido una revolucin entre los estudiosos que se dedican al complejo mundo del metabolismo mineral. De acuerdo con lo sealado por Gutirrez (2000) un mineral orgnico no seria ms que una forma molecular donde el mineral esta ligado por algn tipo de enlace (covalente o inico) a una o varias molculas orgnicas ya sean aminocidos, protenas o carbohidratos. Las bondades de los minerales orgnicos se basan en la hiptesis de que utilizan rutas de absorcin distintas a las fuentes inorgnicas lo que evita los problemas de interacciones entre distintos minerales. Tambin se sealan las ventajas de que no producen reacciones de oxidacin cuando son mezclados con las vitaminas. Son compuestos estables y elctricamente neutros donde el mineral se encuentra protegido de las reacciones qumicas que se producen durante la digestin y se mantiene su solubilidad hasta su lugar de absorcin en el tracto digestivo. Los minerales orgnicos hasta el presente se encuentran divididos en dos grandes grupos y dos compuestos especficos: Quelatos Complejos inicos con carbohidratos Selenio orgnico Cromo orgnico Los quelatos se definen como el producto resultante de la reaccin de un ion metlico con un aminocido donde los mas comunes son la lisina y la meteonina (tabla 10). Tambin se puede enlazar un metal soluble, con una protena hidrolizada. Los trabajos de Rojas et.al (1995), Swinkels et.al (1996), Olson et.al (1999), Eckert et.al (1999) y Polen et.al (1999) describen los resultados obtenidos al utilizar diferentes quelatos de minerales orgnico conformados por aminocidos o protenas. Las ventajas del uso de fuentes de origen orgnico se han encontrado en los incrementos de la concentracin de metalotionina a nivel de rganos y tejidos, los incrementos en la actividad de la ceruloplasmina y la mayor biodisponibilidad del elemento acomplejado.
Tabla 2: Biodisponibilidad relativa de fuentes suplementales de cobre y Zinc . (Adaptado de Ammerman 1995) Fuente
Sulfato cprico Cobre-lisina Cobre-metionina Cobre-proteinato Sulfato de Zn Zn, quelato Zn, lisina Zn, metionina

Aves
100 105 (2) 90 (2) 100 125

Cerdos Ganado Oveja

100 110 (1) 100 100 100 100 100 (1) 100 100 130 (1) 100 110 100

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En los complejos inicos con carbohidratos, el mineral es rodeado por estos ltimos que al poseer cargas contrarias forman enlaces estables. Las amilasas pancreticas secretadas a nivel de intestino delgado pueden catalizar al carbohidrato liberando al mineral que es posteriormente absorbido. Esto representa una desventaja con relacin a los quelatos pues el mineral libre va a competir por el sitio de absorcin con otros compuestos inorgnicos. Hasta el presente se conocen pocos trabajos donde se utilicen los microelementos enlazados a carbohidratos.
Selenio orgnico

La suplementacin con selenio es una prctica de rutina en la alimentacin animal. Para ello el suplemento ms utilizado es el selenito de sodio. Sin embargo, en los ltimos aos se ha descubierto que el ion selenito tiene propiedades pro-oxidativas (Khaled, 1999). Como alternativa para la suplementacin con selenio se estn utilizando con resultados satisfactorio los compuestos de selenio orgnico. Este se obtiene cultivando levaduras en medios pobres en azufre y ricos en selenio. Debido a la similitud atmica entre el azufre y el selenio este ltimo sustituye al azufre en los aminocidos de las levaduras. De esta forma se obtiene un producto rico en selenio-cisteina y selenio-metionina. Un resumen de los resultados obtenidos por Khaled et al (1999) cuando utiliz levaduras enriquecidas con selenio en cabras lactantes se muestra en la tabla 3.
Tabla 3: Efecto de la suplementacin diettica de Se enriquecido en levadura sobre concentraciones selenio en sangre y leche y la actividad de la GSH-Px en cabras lecheras.(Tomado de Khaled et al 1999). Variables
Selenio Sanguneo Selenio plasmtico Selenio de la leche GSH-PX sangunea g.I g.I-1 g.I-1 kat.I-1
-1

Grupo I
49.27 3.74 39.27 3.48 5.74 1.77 303.07 24.94

Grupo II
187.79 29.83c 113.31 7.74c 19.58 4.37c 1038.86 131.18c

Cromo orgnico

En los ltimos aos han aparecido suplementos de cromo orgnico que se han utilizado ms en las especies monogstricas y en el vacuno de carne y que actualmente se extiende al vacuno de leche sobre todo en la primera lactacin (Torrent, 1995). Los suplementos orgnicos de cromo son los picolinatos y las levaduras ricas en cromo quelado en forma de factor de tolerancia a la glucosa. El cromo en estos compuestos se presenta en forma trivalente que no es txica y se conoce que interviene en el metabolismo de la glucosa a travs del factor de tolerancia lo que propicia una mejor utilizacin de la energa Las fuentes de cromo orgnico no deben degradarse en el rumen. Numerosos resultados avalan las ventajas del uso del cromo orgnico en el metabolismo energtico como lo sealan los trabajos de Linderman et al (1995) Liam et al (1993) y Lukosky et (1996) De todo lo anterior podemos resumir: Los minerales orgnicos no oxidan a las vitaminas en los compuestos minero- vitamnicos. Utilizan rutas de absorcin distintas a las inorgnicas lo que evita la competencia por la absorcin. Poseen mayor biodisponibilidad lo que incrementa la eficiencia de utilizacin del mineral por la especie. Pueden actuar eficientemente en el metabolismo energtico como es el caso del cromo y la glucosa.

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Microelementos nuevos y elementos txicos De acuerdo a lo descrito por Mc Dowell et al (1998) los microelementos adicionales para los cuales hay evidencia de su esencialidad incluyen al As, B, Cd, Cr, F, Li, Ni, Pb, Si, Sn y V. A estos minerales se le denomina microelementos nuevos debido a que la evidencia de su esencialidad ha sido obtenida en aos recientes. Sin embargo, en contraste, se ha conocido por muchos aos el efecto beneficioso de agregar flor al agua de bebida en las dientes de los humanos. Tambin desde 1959 se conoce la importancia nutricional del cromo como parte del factor de tolerancia a la glucosa en los humanos. Recientemente se ha demostrado que la suplementacin con cromo mejora la ganancia y la eficiencia alimentara en terneros bajo estrs. Tambin el cromo puede mejorar la inmunidad en los terneros lo que resulta en menor mortalidad y necesidad de antibitico. Los trabajos realizados por Gutirrez et al (1995) muestran el carcter esencial del flor en estudios realizados con pollos de engorde que consumen dietas convencionales y suplementos hasta 80 ppm en forma de FNa
Tabla 4: Pollos de ceba suplementados con niveles de flor por debajo de 80 ppm.(tomado de Gutirrez 1995) Niveles de flor, ppm 0 10 20
PV, g/ave a los 14 das PV, g/ave a los 56 das Consumo de alimento, g/ave PV ganancia g/ave Conversin alimenticia Mortalidad, %
ab

40
233 2.466b 4836 2233b 2.16 0

80
213 2.522b 4899 2313b 2.12 5

ES
7.5 47*** 47*** 0.04 -

236 2.256a 5002 2015a 2.50 0

244.4 2.472b 4892 2248 2.21 5

229.5 2.531b 4875 2301b 2.13 0

Medias con letras en comn difieren significativamente a P<0.05 (Duncan,1955) *** P<0.001

De importancia tambin resulta el empleo de los elementos nominados como tierras raras en la produccin animal. Esto lo confirman los trabajos de Chang et al (1999) quienes encontraron incrementos en la ganancia de peso y mejoras en la conversin en cerdos suplementados con praseodimio, lantano y cesio (Tabla 5)
Tabla 5: Ganancia corporal diaria y conversin alimenticia en diferentes grupos experimentales en cerdos suplementados con tierras raras* Grupo
Control REE-A-L REE-AH REE-B-L REE-BH
cd

n
24 12 12 12 12

Peso Corporal (kg.) Comienzo Final

7.33 1.54 7.32 1.18 7.33 1.22 7.33 1.29 7.33 1.16 17.27 3.83 17.53 2.53 17.27 2.90 17.54 3.18 17.80 3.08

Ganancia Diaria (g)

Durante el Experimento Mejora en (%)

Conversin Alimenticia
Durante el experimento Mejora en (%)

285.1 70.3 291.7 52.0 284.0 55.7 291.7 66.3 299.4 60.0

+2 0 +2 +5

2.02 0.21 1.93 0.11 1.97 0.14 1.95 0.16 1.89 0.16

+5 +3 +4 +7

Cifras con letras no comunes difieren por fila y por columna (P< 0.001). REEA (97%LaCl3 6H2O) ; REEB(35%LaCl3, 52%CeCl3, 3.02%PrCl36H2O).

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Conclusiones

Los iones minerales son imprescindibles para el crecimiento y funcionamiento normal del organismo. Se puede considerar cuatro clases generales de iones inorgnicos, voluminosos, trazas esenciales y no esenciales. Los elementos minerales constituyen una cantidad relativamente pequea del total de la composicin y se hallan presentes en una variedad de formas qumicas y en proporciones variables. Son constituyentes de las protenas y lpidos que forman parte de los msculos, rganos, sangre, clulas y otros tejidos del cuerpo. No aportan energa al organismo, aunque desempean papeles importantes en el metabolismo y nutricin. El calcio y el fsforo son necesarios para la formacin de huesos y dientes, por lo que se establecen que la razn Ca: P y el nivel de vitamina D en la dieta, sealar la utilizacin de ambos por los animales. Otros minerales como el sodio, potasio y cloro estn relacionados con el mantenimiento y regulacin de la presin osmtica y el equilibrio cido bsico de los fluidos orgnicos. Tambin hay elementos trazas como el zinc y manganeso que forman parte integral del sistema enzimtico u otros como el hierro y el cobre necesario para la accin de la hemoglobina y hemocianina, cito cromos y otros pigmentos respiratorios o portadores de electrones, el cobalto en la vitamina B12 Hay elementos que se conocen como txicos cuando se consumen en cantidades excesivas que a bajas concentraciones son efectivos en la prevencin de enfermedades. Se pueden citar el selenio y el molibdeno. Las interrelaciones entre los elementos minerales son de gran inters en la nutricin prctica, as se puede sealar la interrelacin zinc-calcio. Se ha observado que las necesidades de zinc para prevenir la paraqueratosis dependen del calcio de dieta. Tambin hay interrelacin cobre, molibdeno y sulfato y la que existe entre sodio, cloro y potasio. Por ltimo, la mayora de las enfermedades carenciales y metablicas de los animales domsticos se deben a una ingestin continuada de dietas diferentes, desequilibradas o muy ricas en minerales que determinan cambios en el funcionamiento en las concentraciones de los minerales de los tejidos fluidos orgnicos, lo que desarrolla lesiones bioqumicas que afectan las funciones fisiolgicas y producen trastornos estructurales. De ah la necesidad de suministrar al animal una dieta que contenga minerales, al igual que otros nutrientes en los niveles adecuados y en la forma en que puedan sintetizarse. El descubrimiento de los llamados minerales orgnicos y los nuevos elementos representan un reto para la nutricin mineral actual. PRINCIPALES REFERENCIAS Gutirrez, O.1986. Some aspects of fluorine metabolism in ruminants under tropical conditions.5. Spurenelement-Symposium. New Trace Elements. Karl Marx Universitt Leipzig, Friedrich Schiller Universitt Jena., p762 Savn, L., Gutirrez, O., Torres, V. y Gonzlez, T. 1998. Una nota sobre la estimacin de zeolita en piensos comerciales. Rev. cubana Cienc. agric. 32:. 287.

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Gutirrez, O., Geerken , C M. y Daz, A. 1984. Digestibilidad aparente y retencin de Ca y P en terneros con dietas de forraje solo o suplementado con fosfato diclcico. Rev. Cubanac. agric. 18: 171. Gutirrez, O., Geerken, C. M. Y Daz, A. 1983.Nota sobre el balance de fsforo en terneros alimentados con dietas suplementadas con un superfosfato natural. Rev. cubana Cienc. Agric. 17: 45. Gutirrez, O, Marrero, A. I., Gutpirrez, O.,Terry, I y Cairo, J. 1993. Utilization of fluorine as a growth promotor in broiler rations. Performance measurements. Cuban. J. Agric. Sci. 27: 319. Guterrez, O., Chol Nam, K., Oramas, A. y Cairo, J. 1996. Disponibilidad biolgica del Fe, Cu y Co en sulfatos cubanos . Estudios en carneros. Rev. cubana. Cienc. agrc. 30:289. Gutirrez, O., Oramas, A. Chol Nam, K .y Cairo, J. 1998. Evaluacin de sulfatos de hierro, cobre, cobalto y manganeso de produccin nacional. Estudios in vitro. Rev. cubana Cienc. agrc.. 32:157. Gutirrez, O.,Castro, L. Y Oramas, A. 1999.Efectos de la zeolita en la excrecin fecal de nitrgeno y minerales en carneros con dietas de forraje verde y pienso comercial. Rev. cubana Cienc. Agric. 33: 291. Gutirrez, O., Geerken, C. M. y Daz, A. 1986. Una nota acerca de la aplicacin del mtodo de rumen artificial para medir la disponibilidad ruminal in vitro del Ca y el P en pastos. Rev cubana Cienc. agric.20: 143. Gutirrez, O. 1987. Flourosis: a potencial problem in cattle.Cuban J. Agric. Sci. 21: 103. Gutirrez, O. , Geerken, C. M. Y Daz, A. 1988. Determinacin de la digestibilidad real del fsforo en la bermuda cruzada No.1( Cynodon dactylon cv Coast cross).Rev. cubana,Cienc. Agric19: 233 .. Gutirrez, O. , Prez, A y Daz, J. 1987. Uso del fosfato diclcico nacional en la ceba de toros. Rev. Prod. Anim. 3: 27 Gutierrez O. 1998 Una nota sobre la composicin de heces y orina en rumiantes en pastoreo RCCA Evaluacin biolgica de hierro , cobre, cobalto y manganeso de produccin nacional. Estudios in vitro RCCA 1998 Gutirez O. 2000. Minerales Organicos.Nuevas fuentes suplementarias para el ganado. RCCA 34:52 Gutirrez Odilia Requerimientos y suplementacin mineral. Utilizacin de fuentes nacionales en dietas para animales monogstricos. Memorias Alimentacin Alternativa para el Trpico. IV Encuentro sobre nutricin de monogstricos Habana Cuba pg. 171. 1998 Gutirrez Odilia, L. Castro y A. Oramas. 2001 Zeolitas naturales. Interaccin con compuestos nitrogenados y elementos minerales en fluidos gastrointestinales. IV Congreso Internacional de la Qumica. Savn L.y Gutierrez O. 1987. Metabolismo Mineral . Bioqumica Nutricional TomoII EDICA Habana Cuba

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Metabolismo de las Vitaminas

Dra. Odilia Gutierrez y Dr. Ramon Boucourt Contenido
Introduccin...........................................................................................................................................................................151 Vitaminas...............................................................................................................................................................................151 Vitaminas hidrosolubles ..................................................................................................................................................152

Vitaminas del complejo B............................................................................................................. 152 cido Pantotnico ......................................................................................................................... 154 Biotina........................................................................................................................................... 155 Colina:........................................................................................................................................... 155 cido flico (cido pteroilglutmico).......................................................................................... 156 Vitamina C .................................................................................................................................... 157
Vitaminas liposolubles .....................................................................................................................................................158

Vitamina A.................................................................................................................................... 158 Vitamina D.................................................................................................................................... 159 Vitamina E .................................................................................................................................... 159 Vitamina K.................................................................................................................................... 160
Principales fuentes de utilizacin de las vitaminas................................................................................................................161 Conclusiones..........................................................................................................................................................................161

Introduccin

El conocimiento inicial de las vitaminas fue consecuencia de la identificacin de algunas avitaminosis. Desde el siglo XVIII se comenz a identificar la relacin de enfermedades como la pelagra, el beriberi, el raquitismo , la ceguera nocturna y el escorbuto con , deficiencia de componentes alimenticios cuyas correcciones a travs de la alimentacin constituan la va teraputica mas exitosa. A partir del 1739, investigaciones controladas demostraron que los alimentos naturales deban contener pequeas cantidades de sustancias desconocidas que resultaban imprescindibles para la vida: las aminas esenciales. En 1911 se aisl la sustancia activa de la cascarilla de arroz que curaba el beriberi y se le nombro vitamina por considerar que era un compuesto vital y aminado. En estudios posteriores se fueron aislando e identificando el resto de las vitaminas cuyas funciones bioqumicas son altamente conocidas en la actualidad.
Vitaminas

Bajo el nombre de vitaminas se agrupan compuestos orgnicos no relacionados qumicamente que se encuentran en los alimentos naturales en cantidades mnimas. Las vitaminas son necesarias para el crecimiento, reproduccin y mantenimiento. La deficiencia de una vitamina determinada altera el desarrollo normal de los procesos y se asocia con una enfermedad debido a su carencia. Los descubrimientos de las vitaminas se iniciaron en la dcada de 1890-1900 cuando Eijkman descubri que la cscara de arroz curaba una enfermedad en las aves (polineuritis) y la relacion con el

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beri-beri en el hombre; el descubrimiento fue casual, al observar que los sntomas nerviosos de la enfermedad no aparecan en pollos que coman arroz sin descascarillar. Los trabajos de Steep, Osborne, Mendel, McCallum y col, realizados entre 1909 y 1916 demostraron que existe una serie de factores alimenticios necesarios para que la vida se desarrolle normalmente. En 1912 Funk propone el nombre de "vitaminas" a las sustancias que en cantidades mnimas tienen tanta importancia vital. En 1926 se aisl ya la primera vitamina cristalizada. Las aves, en general, han desempeado un papel importante en el descubrimiento de las vitaminas, ya que son particularmente susceptibles a las carencias de vitaminas. Ellas obtienen muy poco beneficio de la sntesis microbiana de vitaminas en el tracto gastrointestinal. Los rumiantes son capaces, gracias a su flora, de sintetizar todas las vitaminas del complejo y la vitamina K y no dependen del suministro de estas sustancias con el alimento. Los tejidos de los rumiantes sintetizan tambin la vitamina C, como todos los dems animales domsticos. Para estas especies animales ocupa el primer lugar el aporte de las vitaminas liposolubles A, D y E. Las vitaminas se clasifican en dos grandes grupos: Las liposolubles, que se disuelven en solventes orgnicos (lpidos) y son relativamente estables a temperaturas normales de coccin, pero se inactivan por la luz y la oxidacin. Se digieren con las grasas y para su absorcin intestinal requieren de los lpidos de los alimentos y de la bilis. Pasan a la linfa asociadas a las grasas. Son transportadas por los quilomicrones remanentes o por protenas especificas. Las vitaminas A, D y K se almacenan asociadas a las grasas fundamentalmente en hgado y la vitamina E en el tejido adiposo. Si se ingieren en exceso resultan txicas en particular la A y D. Se excretan por las bilis y no por la orina y se reabsorben a travs de la circulacin entero heptica. Su eliminacin tiene lugar por las heces fecales. Las hidrosolubles, como su nombre lo indica, son las que se disuelven en agua y son relativamente insolubles en compuestos orgnicos. La tiamina, el cido flico, el cido ascrbico y la cobalamina se absorben mediante un transportador y las restantes por difusin pasiva a travs de la mucosa intestinal, las que una vez absorbidas pasan a la circulacin general. Cualquier excedente se excreta por la orina; la vitamina libre solo se almacena en pequea cantidad y en las especies monogstricas en la mayor parte de los casos es necesario su suministro continuo aunque puede existir almacenamiento de cido flico y vitamina B12 en el hgado. Las vitaminas hidrosolubles prcticamente no se acumulan en el organismo, por lo que pueden generar manifestaciones carenciales con mayor facilidad si los si la alimentacin resulta deficiente en estos nutrientes, dando lugar de forma rpida a trastornos metablicos especficos.
Vitaminas hidrosolubles Vitaminas del complejo B.

Las vitaminas del complejo B son solubles en agua y forman parte de una sola serie de coenzimas importantes, por lo que solo son esenciales para los seres vivos.

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Los requerimientos de las vitaminas del complejo B varan con la especie, ya que existen un gran nmero de microorganismos en el tracto gastrointestinal capaces de sintetizarlas y gran parte de ellas son absorbidas. En los rumiantes la sntesis de vitaminas B en el rumen es suficiente para cubrir los requerimientos. Las vitaminas del complejo son sintetizadas y absorbidas en pocas cantidades por el gato, el cerdo y las aves, de manera que una alimentacin carencial podra causarles una avitaminosis. Vitamina B1 (tiamina, aneurina) La tiamina es una base nitrogenada compleja, contiene un anillo perimdico unido a un anillo tiazol. Es un compuesto incoloro cristalino soluble en agua, establecen soluciones cidos dbiles, pero se descompone en medio neutro. Por la presencia de un grupo hidroxil al final de la cadena lateral, la tiamina puede formar steres. El principal ester es el pirofosfato de tiamina, tambin conocido como cocarboxilasa. Fuente: La tiamina es ampliamente distribuida en los alimentos; se encuentra en los cereales, las levaduras, hgado y riones. El salvado de los diferentes granos de cereales es rico en tiamina. En el rumen hay una sntesis intensa de vitamina B1. Tambin la microflora del intestino grueso realiza una sntesis considerable que es utilizada por el animal. Funcin: El pirofosfato de tiamina es una coenzima la cual est involucrada en la descarboxilacin oxidativa del cido pirvico y en el metabolismo del cido cetoglutrico. Cuando la vitamina es deficiente hay una acumulacin del cido pirvico y de sus productos de reduccin, cido lctico, en los tejidos acta en los procesos de transacetilacin y transaldolacin en la conversin de citrcidos a sulfosfato y en el funcionamiento normal del sistema nervioso. Deficiencias: La carencia de vitamina B1 produce: a) Trastornos funcionales del sistema nervioso central y perifrico, ataxia, parlisis y se observan lesiones histolgicas en muchos puntos del sistema nervioso central (SNC). b) Trastornos cardiacos y circulatorios que se manifiestan en forma de palpitaciones. c) Trastornos gastrointestinales (disminucin del apetito y diarrea) En los rumiantes no se presentan sntomas primarios carenciales, debido a la amplia sntesis en el tracto-digestivo, sin embargo, la ingestin de determinadas plantas pueden inactivar la vitamina B1 o tienen antagonismo como la Pteris aquilina y Equisetum. Vitamina B2 (lactoflavina, riboflavina). La riboflavina est compuesta de un ncleo dimetilisoalloxazina unido a un alcohol derivado de la ribosa compuesto amarillo cristalino, el cual tiene un color verde amarillento fluorescente. En solucin acuosa, es estable al calor, pero inestable a la luz en presencia de lcalis. Fuente: Es ampliamente distribuida en los alimentos aunque en los gramos de cereales no es abundante. Fuentes ricas son la levadura, hgado, leche y plantas verdes, los organismos simblicos que habitan en

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el tracto gastrointestinal (numerosas bacterias del rumen y del intestino) constituyen una fuente de riboflavina. Funcin: La riboflavina es un constituyente importante de las flavoprotenas, es el grupo prosttico de una docena de enzimas tales como la citocromo reductasa, la lipramida dehidrogenasa, xantino oxidasa, la L y D aminocido oxidasa, etc. Actan como riboflavin en forma flavin mononuletido (FMN) o en una forma ms compleja el flavin adenin dinucletido (FAD) Estos flavin nucletidos actan como grupos prostticos de las enzimas de oxidacin reduccin, que intervienen en la degradacin oxidativa del piruvato, los cidos grasos y los aminocidos, as como en el transporte electrnico de la cadena respiratoria. Deficiencias: La falta de vitamina B2 produce una menor sntesis y actividad de algunos flavoprotenas, alteracin del metabolismo celular. En los animales jvenes hay una disminucin del crecimiento y de la resistencia de los epitelios aparecen: a) b) c) d) Grietas en la comisura de los labios (queratosis) Vascularizacin anormal de los ojos. La piel presenta manchas rojas, prdida del pelo, dermatitis Trastornos locomotores

Vitamina B6 . (Piridoxina) La vitamina B6 se presenta en tres formas que son interconvertibles en los tejidos del organismo. Los tres compuestos son: el alcohol (piridoxol) a su aldehdo (piridoxal) y a su amina (piridoxamina) Es un producto cristalino blanco muy soluble en agua estable al calor y lcalis muy sensible a la luz. Fuente: Es ampliamente distribuido en el msculo, hgado, hojas verdes, cereales y leche. En los productos animales se encuentra casi siempre en forma de piridoxal y de fosfato de piridoxamina, en las plantas y semillas la forma frecuente es el piridoxol. Funcin: En forma de fosfato de piridoxal acta como grupo prosttico de los sistemas de descarboxilacin de los aminocidos, deshidratacin de la serina y desulfidracin de los aminocidos sulfurados. Es tambin un grupo proteico de las transaminasas, por lo que desempea un papel importante en el metabolismo proteico.
cido Pantotnico

El cido pantotnico es un compuesto formado por B alanina y el cido dihidroxi B-B dimetilbutrico. Es un aceite inestable, altamente higroscpico, soluble en agua insoluble en benceno, fcilmente destruido por cidos, bases y por el calor.

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Fuente: Como su nombre lo indica se trata de una sustancia de amplia distribucin en la naturaleza. Las fuentes ms abundantes son las levaduras, en el hgado, rin, la yema del huevo y granos de cereales. Funcin: El cido pantotnico es un constituyente del coenzima A, que tiene gran importancia en la transferencia de grupos cidos dentro del metabolismo de los carbohidratos y los lpidos. El coenzima A, es necesario en el organismo para la sntesis de numerosas sustancias (cidos grasos, esteroides, cetil coenzimas A, etc. Deficiencia: Los sntomas ms frecuentes son: lesiones inflamatorias de las mucosas, disminucin de la resistencia a las infecciones y parsitos, daos en la piel y cada del pelo. Trastornos de las funciones de la corteza suprarrenal y en la reproduccin. En la prctica son raras las deficiencias de cido pantotnico, debido a su amplia distribucin, sin embargo, se han presentado casos en las cras de cerdos de raza landrace.
Biotina.

La biotina se le llam en un principio factor epitelial o vitamina H. Se cristaliza en forma de agujas blancas, es bastante estable a las condiciones normales, es destruida por agentes oxidantes cidos y bases fuertes y su estructura es: 2 ceto-3, 4 - imidazilo 2 tetrahidratofenolvalrico. Fuentes: Se encuentra en cantidades muy pequeas en todos los alimentos de origen vegetal y animal, fundamentalmente, en el hgado, huevo, levadura, leche, cereales y verduras. La biotina se encuentra en la naturaleza en forma ligada y libre, gran parte de la biotina ligada es disponible al animal. Funcin: La biotina en forma de carboxibiotina es componente de enzimas que participan en los procesos de carboxilacin y descarboxilacin tales como la transformacin de piruvato a oxalacetato, del propionato en metilmolanato. La biotina participa en la sntesis de citrulina y purinas. Deficiencias: Las necesidades de biotina para los animales son muy pequeas, debido a esto no se presenta carencias en condiciones normales de alimentacin. En la carencia de biotina provocada en animales de experimentacin se han observado alteraciones cutneas caractersticas como dermatitis, prdida del pelo y de peso. La carencia de biotina puede producirse en animales que se alimentan con gran cantidad de albminas cruda, ya que contienen una protena de avidina que se combina con la biotina e impide su absorcin en el intestino.
Colina:

La colina es la colamina completamente metilada, es un lquido viscoso fuertemente alcalino. El cloruro de colina es el compuesto que se emplea normalmente en los piensos, existe en forma de cristales. B-hidroxietil trimetil amino hidrxido. Fuente: La colina est muy repartida en los alimentos animales y vegetales. Son fuentes abundantes de colina la harina de pescado, residuo de extraccin de levaduras y yemas de huevos.

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Funcin: La colina forma parte de los colinfosfatos, los cuales tienen mucha importancia en el metabolismo proteico. Por acetilacin de la colina se obtiene la acetilcolina que interviene en la transmisin del impulso nervioso. La colina proporciona grupos hbiles metilo para la formacin de metionina, a partir de la hemocistena y de creatina a partir del cido guando actico. Deficiencias. Las necesidades de colina dependen de diferentes factores. Cuando la metionita, el cido flico y la vitamina B12 estn en abundancia en la dieta, el organismo animal es capaz de sintetizar la colina. Las necesidades del organismo animal de esta vitamina son bastante grandes. Los sntomas deficitarios en pollos y cerdos incluyen retraso del crecimiento e infiltracin grasa del hgado y disminucin de la capacidad reproductora. En la enfermedad conocida como tendn distendido (pirosis), debida principalmente a la falta de manganeso interviene tambin la carencia de colina y de vitamina E.
cido flico (cido pteroilglutmico)

Est formado por un ncleo pteridino del cido p-animo benzoico y el cido glutmico (figura 5). Su nombre qumico es pteroilglutmico, cristaliza en delgadas placas de color amarillo naranja, es muy soluble en alcohol e insoluble en grasa y sus disolventes. El cido tetrahidroflico es la forma activa de la vitamina que se forma por hidrogenacin en la posicin 7 y 8 del anillo pterdnico. Fuente: Los compuestos del cido flico estn ampliamente distribuidos en la naturaleza, estn presentes en los animales, plantas y microorganismos. Funcin: El cido flico est ntimamente relacionado con el metabolismo del carbono, actuando como transportador de grupos monocarbonados (formilo, metilo) que se separan o arriman a los metabolitos en las reacciones tales como interconversin de serina o glicina, La degradacin de la histidina, sntesis de purina, sntesis de grupos metidos para compuestos como la metionita, colina y timina. El cido tetrahidroflico en unin a la vitamina B12 activa la eritropoyesis y la leucopoyesis, as como la sntesis de cidos nucleicos. Deficiencias: Debido a la notable cantidad de cido flico que sintetizan los microorganismos intestinales y de su absorcin, es raro que los animales presenten deficiencias. La administracin de inhibidores del cido flico o sulfamidas que inhiben la flora intestinal, puede provocar sntomas deficitarios que se caracterizan por: disminucin de la eritropoyesis por entorpecimiento de los procesos de maduracin ulceraciones de la mucosa intestinal, diarrea, cada del pelo, inflamacin cutnea, anemia y trastornos en crecimiento Vitamina B12 (cobalamina) A este grupo pertenecen varios compuestos qumicos de estructura semejante que se diferencian por su actitud. La vitamina B12 un quelato que contienen cobalto en su estructuras. El cobalto puede estar unido a un grupo hidrxido cianuro, nitrilo o cloruro, denominndose a la vitamina hidroxi-ciano, nitrito o clorocabalamina, respectivamente . La forma activa de la vitamina como coenzima es la hidroxicobalamina.

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La vitamina B12 existe en formas de cristales rojos oscuros solubles en agua y alcohol, se destruye por agentes oxidantes y reductores. Fuente. El origen natural de la vitamina B12 es la sntesis microbiana Es sintetizada por muchas bacterias y actinomicetos, pero no por levaduras. Los alimentos de origen animal son ricos en vitamina B12 tales como: carne, huevo, pescado y leche. Su presencia en los tejidos de los animales es debido a la ingestin de vitamina B12 con los alimentos animales o de sntesis intestinal o del rumen. De aqu que los rganos de los rumiantes son las ms ricos en vitamina B12 en comparacin con los no rumiantes. Funcin: La vitamina B12 interviene en muchas funciones importantes, est relacionada con el funcionamiento de otros nutrientes tales como: cido flico, cido pantotnico, colina, metionina y otros. Actan en la sntesis de grupos metilos y el metabolismo de los grupos monocarbonados, en el metabolismo de la metionina, en la sntesis de desoxinucletidos y DNA. En los rumiantes interviene en la transformacin del metil malonilcoenzima A, en succinil coenzina A en el metabolismo del cido propinico. Existe una elevada necesidad de vitamina B12 en los tejidos en constante multiplicacin celular el cual ocurre en la mdula sea, rganos linfticos y en la cepa basal de los epitelios. Diferencias: Las necesidades de vitamina B12 dependen de los niveles de colina, metionina y cido flico en la dieta y estn interrelacionados con el metabolismo del cido en el organismo. La manifestacin carencial ms conocida es la anemia perniciosa, hay atrofia de la mucosa de la porcin superior del canal gastrointestinal y lesiones degenerativas de la mdula sea, hay detencin en el crecimiento, diarrea y vmitos.
Vitamina C

Esta vitamina es un compuesto cristalino incoloro, soluble en agua de carcter cido y fuertemente reductor. En medio cido es estable al calor, pero en presencia de lcalis se descompone fcilmente. La luz acelera su destruccin. Fuente: Existe en abundancia en plantas y animales, en el citoplasma y las mitocondrias de las clulas. Fuentes ricas en vitamina C son las naranjas, los limones y las verduras. Funcin: La vitamina C acta como sistema REDOX e interviene en las oxidaciones biolgicas como aceptor de diversas hormonas y en el metabolismo de tejido conjuntivo. Hasta ahora solamente el hombre, y otros primates, cobayo y el zorro volador dependen de una fuente alimenticia de vitamina C. Dichas especies tienen una deficiencia gentica del enzima Lgluconolacro naoxidasa. Deficiencia. Las deficiencias de vitamina C se determinan por hemorragias, especialmente en las encas, en la piel y los msculos, disminuye la formacin de estructura fibrilares del tejido conjuntivo, desciende el funcionamiento de la mdula sea y aparece anemia como consecuencia de disminucin en la eritropoyesis, tambin se observa una disminucin en la actividad de algunas glndulas endocrinas, en especial, de la hipfisis y de las suprarrenales.

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Vitaminas liposolubles Se encuentran en los alimentos asociados con los lpidos, se absorben con las grasas alimentarias, aparentemente por mecanismos similares a los de la absorcin de la grasa y se almacenan en cantidades apreciables en el organismo. A este grupo pertenecen: el retinol (vitamina A), el ergocalciferol (vitamina D2), el colecolciferol (vitamina D3), las menoquinonas (vitamina K2 y el tocoferol (vitamina E).
Vitamina A

La vitamina A (retinol 1) y la vitamina A2 (retinol 2) son alcoholes que contienen unidades isoprenos con alcances alternos, comenzando con un anillo bsico de B-ionona. La vitamina A2 tiene un doble enlace ms que la vitamina A1, sta ltima tiene una potencia dos veces mayor cuando se suministra a ratas. La vitamina A es susceptible a perder actividad vitamnica por oxidacin o accin enzimtica y fotoqumica. Es un slido cristalino de color amarillo plido insoluble en agua, soluble en solventes orgnicos. Fuente: El hgado constituye una buena fuente de vitamina A, ya que la misma se aumenta en dicho rgano en los animales que le consumen. El aceite de hgado de bacalao, la yema de huevo y de grasa de la leche contienen cantidades considerables de esta vitamina. La vitamina A no existe como tal en las plantas, sino en forma de provitaminas como son los caratenos y los criptoxantnas que se convierten en vitamina A en la mucosa del intestino delgado, en el hgado y en las mamas de los bvidos y otros organismos. Funcin: Interviene en el mantenimiento e integridad normal de las mucosas, en la reproduccin en el crecimiento, en el metabolismo de los lpidos y los carbohidratos, en la sntesis de mucopolisacridos. El nico papel bioqumico establecido con exactitud es su accin sobre la visin. En el ojo el retinol (vitamina A) interviene en la transmisin de los estmulos luminosos hasta el cerebro. La vitamina se combina con un tipo especfico de protena llamado opsina, para formar el pigmento visual (rodopsina). En este proceso es necesario que la vitamina se convierta en el aldehdo correspondiente antes de combinarse con la protena. Con la accin de la luz la rodopsina se enciende en sus dos componentes pasando por numerosas sustancias intermediarias y en la oscuridad vuelve a regenerarse. Deficiencias: La falta de vitamina A puede producir ceguera en animales jvenes, mala formacin del feto con alteraciones oculares y deformacin de las extremidades. Cuando hay avitaminosis A en la gestacin.

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En el perodo de alimentacin verte los rumiantes ingieren grandes cantidades de carotenos que almacenan en el hgado en forma de vitamina en cantidades suficientes para cubrir las necesidades de 3-4 meses de alimentacin pobre en carotenos. En condiciones prcticas raramente se observan sntomas clnicos de avitaminosis A en los rumiantes, los primeros sntomas de carencia de vitamina A no aparecen hasta pasado 2-4 meses como mnimo.
Vitamina D

Existe un gran nmero de derivados esteroides que poseen actividad antirraqutica. Desde el punto de vista de la nutricin animal son de gran importancia las vitaminas D2 (ergocalciferol) y la vitamina D3 (colicalciferol) El colicalciferol es insoluble en agua, soluble en grasas solventes orgnicos. Cristaliza en forma de agujas finas blancas en la acetona diluida. Se destruye por sobretratamiento con luz ultravioleta y por oxidantes fuertes. Fuentes: Se encuentra en abundancia en los aceites de hgado de pescado y la yema de huevo. Las placas verdes frescas poseen cantidades muy escasas o nulas de vitamina D2. Solamente despus que han sido desecadas bajo la luz del sol aparecen cantidades abundantes. La vitamina D se sintetiza en el organismo animal bajo la accin de la luz solar a partir del 7 dehidracolesterol que se encuentra en la piel. La vitamina D deriva de su precursor, el ergosterol muy conocido en el reino vegetal, que expuesto a la luz solar abre su anillo B y se convierte en calciferol. Funciones. La accin bioqumica de la vitamina D en el animal no se conoce con exactitud, pero se sabe que interviene en la absorcin del calcio en el intestino, en el crecimiento, en la deposicin de mineral en el hueso y en los dientes, en la reabsorcin de fosfato en el tbulo renal, en el funcionamiento de las glndulas paratiroides. Tambin interviene en la sntesis de ARN. Diferencias: Durante el perodo de crecimiento, los requerimientos de vitamina D son especialmente altos, ya que en esta poca el organismo ha de disponer de grandes cantidades de Ca y de fosfato para la mineralizacin del hueso, debido a esto los sntomas carenciales de vitamina D se observaron fundamentalmente en animales jvenes y se caracterizan por alteraciones en la formacin del hueso, conocido como raquitismo, parlisis musculares y trastornos nerviosos. Estos signos carenciales se manifiestan en animales que reciben poca luz solar y que por tanto no son capaces de sintetizar la vitamina D.
Vitamina E

La vitamina E contiene un sistema de anillos aromticos con un grupo hidroxil y una cadena lateral de isoprenos. Los ms abundantes son los tocoferoles el tocoferol es el ms activo fisiolgicamente para los animales.

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Existe como un aceite viscoso a temperatura ambiente, es soluble en grasa y estable en presencia de cidos fuertes. Fuente: Los cereales, aceites, vegetales y plantas verdes son fuentes ricas en vitamina E. A medida que aumenta la edad de los vegetales disminuye la tasa de tocoferol. Funcin. La vitamina E acta como antioxidante fisiolgico, facilita la absorcin y almacenaje de vitamina A y carotenos. Acta en la respiracin normal de los tejidos y ayuda en el funcionamiento del citocromo reductasa, al proteger la destruccin oxidativa de la estructura lipdica de las mitocondrias; interviene en las reacciones normales de fosforilacin, especialmente de fosfatos tales como fosfato de creatina y citrifosfato de adenosina; as como en el metabolismo de los cidos nucleicos, sntesis de cido ascrbico y el metabolismo de los aminocidos sulfurados. Diferencias: Las necesidades de vitamina E dependen del aporte de antioxidantes, cidos grasos no saturados, de aminocidos sulfurados y selenio. Los casos ms frecuentes de avitaminosis E ocurren en animales de 3-10 semanas de edad, aparecen lesiones degenerativas del msculo esqueltico que se observan por rigidez de las extremidades. En la mayora de los casos aparecen lesiones cardiacas. La aparicin de la distrofia muscular enzotica del ternero se debe no solamente a la falta de vitamina E, sino tambin de fosfato y selenio, as como la abundante ingestin de cidos grasos no saturados.
Vitamina K

La vitamina K ampliamente difundida en las planta (en las hojas verdes) es la nica vitamina liposoluble que se sintetiza en el tracto digestivo por los microorganismos. Se requiere mucho en las dietas de los animales superiores y en aves. Se presentan dos formas de esta vitamina en la naturaleza: la K1 (fitoquinona) y la K2 (menaquinona). Son biolgicamente activas, poseen un ncleo 2-metil-1-4 naftoquinona y una cadena lateral compuesta de unidades isoprenas, solubles en lpidos, estable al calor y lbil a la oxidacin, lcalis cidos fuertes, luz e irradiacin. Fuente: La vitamina K1 est presente en las plantas, particularmente en las hojas verdes. La vitamina K2 es producida por la flora bacteriana de los animales. La yema de huevo y el hgado contienen cantidades significativas. La vitamina est ampliamente repartida en la naturaleza. Funcin: La vitamina K desempea un papel esencial en la coagulacin normal de la sangre. En el hgado se efectan la sntesis de tres protenas protrombina, proconvertina y tromboplastina, para lo cual se necesita la vitamina K. Estas protenas son transportadas por el plasma sanguneo e intervienen todas en la coagulacin de la sangre. Las investigaciones efectuadas con microorganismos sealan que la vitamina K participa en un sistema enzimtico respiratorio al intervenir en el transporte de electrones y en la fosforilacin. Deficiencias: Cuando hay una carencia de vitamina K se observa tendencia a las hemorragias, ocasionadas por la sntesis insuficiente de protombina y de otros factores de la coagulacin.

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Principales fuentes de utilizacin de las vitaminas. La llamada fuente comn. Diversas concentraciones de vitamina que aparecen en los distintos alimentos que forman una dieta. La sntesis microbiana en el tracto digestivo. La sntesis microbiana en el rumen es una fuente importante de dicho nutriente. Sin embargo, en los animales monogstricos como aves y cerdos reciben un aporte limitado de vitamina procedente de la sntesis intestinal. La transferencia materna bien a travs del tero a los fetos de la mamfera o con la yema y la albmina de los embriones de las aves. La sntesis de algunas vitaminas no precisa de un aporte de oxgeno. Esto depende de la especie y de una serie de condiciones propias en el animal Conclusiones. Las diferencias de vitaminas provocan enfermedades especficas con caractersticas propias para cada vitamina. Algunos tejidos se ven afectados de una manera particular por dichas deficiencias. Los cambios en la piel se observan en las deficiencias de la vitamina A, B6, riboflavina, niacina, biotina, B12 y cido pantotnico. El tejido nervioso se afecta por deficiencia de vitamina A, E, B6, B12, tiamina, niacina, biotina y cido pantotnico. Las deficiencias de cido flico, B12, B6, (E) y niacina provocan anemia en diferentes especies de animales. Las alteraciones cardiacas se aprecian con la deficiencia de tocoferol y tiamina, mientras aparecen hemorragias por la deficiencia de vitaminas E, K y C y defectos oculares en la deficiencia de vitamina A. La mayora de los sntomas de deficiencias de vitaminas que aparecen en los animales son reversibles al administrar vitaminas en algunos casos se observa una respuesta ms rpida y en otros ms lenta. PRINCIPALES REFERENCIAS Alwicck, D. 1993 Micronutrientes, La prescripcin ,(8), UNICEF, dicimbre /93 Boucourt R. y Tillan J. 1987. Metabolismo de las Vitaminas EDICA, Habana,Cuba Cabrera, A. 1995 Niacina Revista Cubana de Alimentacin y Nutricin No 1-2: 46

Cceres A., Hernndez M.,Muoz J. , Rodrguez R. 1999. Las Vitaminas en la Nutricin Humana. Litogrfica A. Romero, S.A. Tenerife Espaa.

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Seccin III Aspectos Fisiolgicos del Manejo Animal

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El estrs oxidativo: Sus causas y consecuencias

Dr. Rene Stuart Contenido
Introduccin163 Qu es un radical libre? Qu son las ERO?.........................................................................................................163 Las vas de formacin de las ERO164 Vas que dispone el organismo para la destruccin de las ERO. 167 Sistemas enzimaticos...167 Agentes antioxidantes no enzimticos.168 El ordenamiento espacial en el interior de las clulas y su efecto protector169 Las frutas y vegetales y su aporte de agentes destructores de las ERO..................................................................169 Algo ms sobre el glutatin......................................................................................................................................169 El Estrs Oxidativo. Definicin...............................................................................................................................170 Una forma de detectar el estrs oxidativo en el laboratorio.....................................................................................170 La accin de las ERO sobre las membranas lipoproteicas.......................................................................................170 Algunas enfermedades atribuibles a las ERO..........................................................................................................171 El mecanismo de la isquemia...................................................................................................................................171 El papel de la dieta en las caractersticas de los cidos de la membrana.172 Las ERO y el dao al sistema nervioso173 Otras enfermedades relacionadas con las ERO173 El proceso de la fagocitosis..174 La generacin del cido hipocloroso por el leucocito..175 Algunas medidas a tomar, para prevenir la accin de las ERO ...175

Introduccin.

El paso de los organismos vivientes desde la anaerobiosis a la utilizacin del oxgeno signific un evento importante en la en la eficiencia del uso de los sustratos energticos As, mientras que los anaerbios ms eficientes pueden obtener entre 4 y 5 ATP por mol de glucosa utilizada y eliminan sustratos con elevado valor energtico como los alcoholes y los cidos grasos de cadena corta, los organismos aerbios obtienen hasta 36 moles de ATP por mol de glucosa y los productos finales, como el agua y el dixido de carbono carecen de valor energtico. El uso del oxgeno como aceptor de electrones por los organismos aerobios los oblig a desarrollar paralelamente un conjunto de mecanismos eficientes, aunque no perfectos, para su autoproteccin contra los productos intermediarios que se forman durante dicho proceso, e incluso, a utilizarlo para su propia defensa contra organismos extraos. La relativa vulnerabilidad de los mecanismos de proteccin contra los productos intermediarios de la transferencia de electrones, al oxgeno y el descubrimiento de un nmero cada vez mayor de enfermedades y trastornos de animales y plantas vinculadas a esos fallos, ha hecho crecer el inters por el estudio de esos procesos, los que en conjunto constituyen el tema del estrs oxidativo. Como un prembulo al estudio de dicho proceso, es necesario definir primero lo que se define como un radical libre y la relacin de este tipo de ente qumico con las especies reactivas del oxgeno (ERO) Qu es un radical libre? Qu son las ERO?

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Un radical libre es un tomo, molcula o parte de una de ellas que tiene uno o ms electrones desapareados. De acuerdo con la anterior definicin, un tomo de hidrgeno libre posee un solo electrn y ser por tanto, un radical. La molcula de oxgeno es en realidad, un di- radical, pues tiene dos de sus dos electrones desapareados. Por otra parte, el perxido de hidrgeno no tiene electrones desapareados y, correspondientemente, no es un radical. Sin embargo, reacciona fcilmente con otros compuestos para dar lugar a radicales. Se utiliza la expresin Especies Reactivas del Oxgeno (ERO), para designar al oxgeno molecular y a otros productos intermediarios que dan como producto final radicales libres. Los radicales libres formados en el organismo pueden iniciar una serie de reacciones en cadena, que continan hasta que stos son eliminados tras diversas reacciones con otros radicales libres o por la accin del sistema antioxidante, el cual protege a los tejidos de los efectos que ellos producen. Algunas sustancias previenen la formacin de nuevos radicales libres, convirtindolos en molculas menos perjudiciales antes de que puedan reaccionar o evitando la formacin de radicales libres a partir de otras molculas
En la tabla No. 1 se recogen las principales compuestos que caen en la categora de ERO, as como su vida media

Tabla 1. Principales compuestos qumicos clasificados como Especies Reactivas del Oxgeno
Radical o molcula relacionada
Oxgeno Superxido Perxido de hidrgeno Radical hidroxilo Radical peroxilo

Frmula qumica
O

Vida media
Depende de enzimas Depende de enzimas Depende de enzimas 10 a la menos 9 segundos 7 segundos

O2 O2H2 OH
ROO

Las vas de formacin de las ERO. Una de las principales fuentes de EROs es la cadena respiratoria, donde pueden ocurrir las siguientes reacciones de transferencia de electrones: O2 eO2 eO2H2 eOH e

H 2O

Esa reaccin da cuenta de aproximadamente un 3 % de los electrones provenientes de NADH, por la incompleta reduccin del Oxgeno Veamos con ms detenimiento el proceso anteriormente esbozado. El primer paso consiste en la formacin de radical superxido, mediante la reaccin con una de las quinonas asociadas a la citocromo-oxidasa. Dos radicales superxido reaccionan entre s, en presencia de la enzima Superxido-dismutasa, dando lugar al perxido de hidrgeno y agua. A continuacin, pueden ocurrir dos reacciones distintas. En la primera que describiremos, conocida como reaccin de Fenton:

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O2.- + Fe3+____________ Fe2+ + O2 Fe2+ + H2O2 ____________ Fe3+ + OH- + OH. O2 + H2O ____________ OH- + OH.

El in frrico se regenera en el proceso, por lo que acta como un catalizador neto. La otra reaccin es la conocida como la reaccin de Haber Weis:

Como puede verse, en ambas reacciones participa el in frrico. Afortunadamente, el mismo se encuentra en forma libre en muy pequeas concentraciones, ya que se halla unido a alguna de las ferroprotenas que a tal efecto existen. Como resultado de ambas reacciones, se ha formado el radical hidroxilo. En el siguiente cuadro se muestra la estructura electrnica de las principales ERO

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Figura 1. La columna A muestra los distintos estados por los que atraviesa el oxgeno a medida que sufre sucesivas reducciones. La columna B muestra la distribucin de los electrones en los orbitales moleculares del oxgeno para cada especie formada. Las flechas verticales indican la direccin del momento magntico del espn de los electrones. Ntese que el oxgeno en su estado ms estable es un birradical, presenta dos electrones con el mismo espn ubicados en distintas orbitales; esta caracterstica acta como una restriccin para las reacciones qumicas en las que participa y contribuye al hecho de que reaccione en forma relativamente lenta con molculas que no son radicales

El radical hidroxilo, HO. puede reaccionar con distintas macromolculas (protenas, lpidos y cidos nucleicos, principalmente), en las que por captacin de un electrn produce otras especies reactivas, a travs de mecanismos y de intermediarios aun desconocidos. En este tipo de reacciones la hidroxilacin y la abstraccin de Hidrgeno son las modificaciones ms comunes que sufre el sustrato orgnico involucrado y se generan otros radicales libres orgnicos tales como: los radicales alcohoxilos (RO.), peroxilos (ROO.) y sulfoderivados. Son particularmente importantes las reacciones de dicho radical con las bases pricas de los cidos nucleicos, en las que induce transformaciones qumicas que en la prctica equivalen a un cambio en el cdigo gentico. Esos cambios pueden ser letales, o conducir a trastornos como el cncer.

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Otra fuente de EROs est relacionada a la cupla xantino/xantino oxidasa (oxidasas catablicas, presentes en los peroxisomas) (10). La acumulacin de hipoxantina y xantina, bajo condiciones anaerbicas, de la isqumia/reperfusin (deficiencia en la irrigacin sangunea -que empobrece la llegada de sangre y, por consiguiente, de Oxgeno a un tejido- con posterior reflujo sanguneo y consecuente afluencia de Oxgeno) o de bajo contenido energtico, puede desembocar en la produccin de ERO, segn la siguiente cascada de reacciones (Fig. 2):

Figura 2. Mecanismo de degradacin de la xantina por la xantina-oxidasa.

Existen otras vas para la formacin del radical OH, las cuales se pueden encontrar en textos especializados.
Vas que dispone el organismo para la destruccin de las ERO.

Para evitar que las ERO alcancen niveles incompatibles con el normal funcionamiento de las clulas, estas han desarrollado en el curso de la evolucin sistemas de defensa antioxidante que se pueden dividir en tres grupos. Estos son los siguientes: 1) 2) 3) 4) Sistemas enzimticos, como la catalasa, la superoxidodismutasa y la glutatin- peroxidasa Sustancias eliminadoras o atrapadoras, que son pequeas molculas que limpian el plasma de oxi-radicales. Un ejemplo de esto son el alfa tocoferol, el cido ascrbico, los carotenos y el glutatin. Sustancias proteicas, que son capaces de secuestrar metales de transicin, sobre todo el hierro, como la lactoferrina, la ceruloplasmina y la transferrina . Las barreras fisiolgicas, relacionadas con la organizacin celular y la separacin espacial

Sistemas enzimaticos La sper oxido dismutasa (SOD), representa la primera lnea de defensa del organismo, ya que acelera la transformacin del anin sper oxido en peroxido de hidrgeno. Es una reaccin que metablicamente es poco costosa, ya que no requiere el consumo de energa.

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La superxido-dismutasa se encuentra tanto dentro de las mitocondrias, como en el espacio extramitocondrial. La primera es activada por el manganeso, mientras que la segunda lo es por el cobre. ltimamente se han encontrado otras formas enzimticas que tienen actividad semejante a la SOD. La concentracin de esta enzima en los mamferos es directamente proporcional a la longevidad y es la quinta protena ms importante del cuerpo humano La catalasa (CAT), es la responsable de la destruccin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno Esta enzima se caracteriza por su alta reactividad. Tiene un grupo hemo, compuesto por hierro y una porfirina, as como una molcula de NADPH, aunque sta no participa como donador de equivalentes de reduccin. Un estudio efectuado en el gusano C. elegans demostr que la administracin de sustancias similares a la superxido dismutasa y catalasa es capaz de alargar la esperanza de vida del mismo. Es la primera vez que se observa que se puede intervenir en el proceso de envejecimiento, aunque an hay que corroborar estos resultados en animales de experimentacin superiores. La glutatin peroxidasa (GP-X), est tambin en la segunda lnea de defensa del ataque oxidativo, con la reduccin del peroxido y en general, de todos los hidroperxidos organicos tipo R-OOH. Esta ltima enzima requiere un donante de hidrgeno para actuar que es el glutatin reducido. Este se oxida y debe ser regenerado, con el consumo de un NADPH en dicho proceso. La glutatin-peroxidasa es una enzima que utiliza el selenio como cofactor. As, ese metaloide, que hace algn tiempo se consideraba como txico, ha pasado a ser un elemento esencial en la dieta del hombre y los animales. Agentes antioxidantes no enzimticos Son elementos principalmente exgenos, responsables de la capacidad antioxidante de los fluidos biolgicos. Estos compuestos a diferencia de las enzimas se consumen durante su accin antioxidante, por lo que deben ser reemplazados. Provienen principalmente de la dieta a travs de los aportes. Son la vitamina E, la vitamina C, los betacarotenos, los polifenoles, flavonoides y los oligoelementos. Adems, existen algunos componentes de origen endgeno tales como el glutatin, el urato, el ubiquinol y las protenas plasmticas, que tambin ejercen un rol protector. El glutatin, presente en todas las clulas elimina en stas los radicales, el perxido de hidrogeno y el hidroxilo. Este tripptido tiene un doble papel, pues adems acta como donador de equivalentes de reduccin para las reacciones catalizadas por la glutatinperoxidasa. El alfa tocoferol o vitamina E est presente sobre todo en las membranas celulares y juega un papel importante, al proteger a los lpidos de la oxidacin mediante la unin con los radicales hidroxilos formando un compuesto sin ninguna actividad metablica toxica. Reviste particular importancia la accin complementaria de la GPX y la vitamina E. Aunque los mecanismos de reaccin son distintos, ambas actan de conjunto y, en ciertos casos pueden sustituirse mutuamente.

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El cido ascrbico o vitamina C, presente de forma intra y extracelular, limpia los radicales hidroxilos y los aniones superxido, con lo que forma cido dehidroascrbico, el que es luego regenerado por el glutatin. El cido rico, la glucosa y el manitol tienen capacidad para neutralizar algunos agentes oxidantes. La ferritina, la transferrina y la ceruloplasmina son capaces de ejercer efecto antioxidante por secuestro de metales transicin, como por ejemplo, el hierro e impidiendo la formacin de radicales hidroxilos. El ordenamiento espacial en el interior de las clulas y su efecto protector.

En el interior de las clulas existe un riguroso ordenamiento espacial, lo que trae como consecuencia que las ERO y sus fuentes de generacin no siempre estn cerca de sus blancos sobre los cuales ejercern su accin.
Las frutas y vegetales y su aporte de agentes destructores de las ERO.

Estudios epidemiolgicos indican que la ingestin de frutas y vegetales confiere proteccin contra el desarrollo de cncer, frecuentemente asociado a estrs oxidativo. Si bien se ha propuesto que el efecto benfico de este tipo de alimentos radica en las propiedades antioxidantes de las vitaminas que contienen, cuando se administran vitaminas C y E y carotenoides puros no se obtienen resultados tan concluyentes. A partir de este estudio se ha concluido que frutas y vegetales actuaran como una polifarmacia contra el desarrollo de enfermedades crnicas, conteniendo no slo vitaminas sino tambin otros agentes antioxidantes, tales como los polifenoles (con propiedades de atrapantes de radicales libres y quelantes de metales), formando una compleja trama antioxidante. Los flavonoides son polifenoles antioxidantes, presentes en plantas y posiblemente los beneficios de la ingestin de frutas, vegetales y vino tinto, pregonado por los nutricionistas, radique en su alto contenido en estos antioxidantes polifenlicos. Los polioles (ej: sorbol) tambin activan fuertemente los caminos de seales sensibles a estrs
Algo ms sobre el glutatin.

Entre las defensas antioxidantes no enzimticas, tiene un lugar predominante el glutatin (GSH). Esta pequea molcula protege a la clula contra diferentes especies oxidantes y se ha comprobado su participacin clave en numerosos desrdenes neurodegenerativos (28). Tanto el GSH como otras molculas conteniendo tioles, tienen alto poder reductor y, por consiguiente, poseen propiedades antioxidantes, ya que pueden cederle un electrn a las ERO El estado de xido - reduccin de la clula est determinado por el equilibrio entre las contrapartes oxidadas y reducidas de los distintos compuestos biolgicos presentes en ella, principalmente de aquellos que se encuentran en mayor proporcin. El tripptido glutatin (GSH, -L-glutamil-Lcisteinil-glicina), debido a su alta concentracin intracelular (5-10 mM), se considera un regulador homeosttico del estado de xido- reduccin celular. Este metabolito se encuentra presente en su forma oxidada en slo un 1 % del total, es decir que predomina ampliamente su forma reducida (GSH) sobre la oxidada (GSSG). Esto trae como consecuencia que un ligero desplazamiento del equilibrio hacia la forma oxidada afecta drsticamente el estado de xido-reduccin general, debido a su participacin en muchos equilibrios de xido reduccin acoplados. En particular esto es crtico para la regulacin (prendido o apagado) de algunos factores de transcripcin, cuya actividad depende del

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estado de xido-reduccin en el que se encuentren. De esta forma, la accin de las ERO puede reflejarse en la modulacin de procesos celulares, aparentemente no relacionados. El Estrs Oxidativo. Definicin. Una vez caracterizados los radicales libres, las ERO y las vas para su neutralizacin, estamos en condiciones de entrar a definir lo que se considera como el estrs oxidativo. Este no es ms que el estado de la clula en la cual se encuentra alterada la homeostasis de oxido-reduccin intracelular. El mismo se produce por una produccin excesiva de ERO y una deficiencia de los mecanismos antioxidantes conduciendo al dao celular. Cuando el equilibrio entre los oxidantes y antioxidantes se pierde a favor de los primeros, se desencadenan procesos dainos que se asocian al desarrollo de numerosas enfermedades. En la siguiente figura se refleja de forma grfica el balance, a favor de las ERO en el estrs oxidativo. Una forma de detectar el estrs oxidativo en el laboratorio. Recientemente, se descubri que la molcula de salicilato, bombardeada por radicales hidroxilo, puede atraparlos a travs de un proceso de hidroxilacin que lleva a la produccin de diferentes formas del cido di-hidroxi-benzoico (DHBA)

En adicin al anterior mtodo, el estrs oxidativo se determina mediante la reaccin del malondialdehido con el cido tiobarbitrico y su cuantificacin colorimtrica. La forma de generacin del malondialdehido en relacin con las ERO se describir brevemente ms adelante.
La accin de las ERO sobre las membranas lipoproteicas.

La peroxidacin de los cidos grasos insaturados de las membranas lipoproteicas, da lugar a la destruccin de stas. Los cidos daados, son retirados por los sistemas enzimticos de la clula y en los lugares que stos ocupaban se forman canales, por donde pueden escapar o penetrar libremente en la clula determinados componentes de bajo peso molecular, como los iones. Mediante ese mecanismo se elimina la diferencia de potencial a travs de la membrana, lo cual la hace desde ese punto de vistas, inservible. En otros casos, la membrana pierde elasticidad, por lo que deja de ser funcional. Uno de los compuestos que se forman durante la degradacin de los cidos poli-insaturados, es el malondialdehido:

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H C-CH2-C- H O O Este di aldehdo es capaz de reaccionar simultneamente con dos grupos amino, por lo que puede formar un puente entre dos cadenas polipeptdicas. Al ocurrir esto, dichas cadenas pierden elasticidad y si ello ocurre con las protenas que forman la membrana celular, o algn sistema enzimtico, ste pierde sus propiedades. Algunas enfermedades atribuibles a las ERO Se han descrito diferentes enfermedades de carcter degenerativo que se atribuyen a la accin destructora de las ERO sobre distintos rganos, tejidos y componentes celulares. Entre stas se encuentran algunas formas de cncer, la artritis reumatoide, ciertas cardiopatas y enfermedades de las coronarias, disfunciones neuronales, como la demencia senil, as como la reduccin de la respuesta inmune. Se ha demostrado que la hipoproteinemia da lugar a trastornos vinculados a las ERO que incrementan la permeabilidad de las paredes del intestino al agua y a los cloruros, lo que da lugar a diarreas. En el bovino, la reduccin de la respuesta inmune incrementa la susceptibilidad a las enfermedades infecciosas, como la mastitis En estudios con el cerdo o la rata, se ha encontrado que la falta de vitamina E, el selenio (cofactor de la glutatin-peroxidasa) o los carotenoides, da lugar a fenmenos que confluyen en una reduccin de la calidad del semen. La estabilidad de las grasas y la coloracin de la carne, son vulnerables a la accin de los radicales libres, por lo que la presencia de cantidades suficientes de vitamina E en la dieta de los animales que sern sacrificados contribuye a mantener una alta calidad de los productos crnicos. El mecanismo de la isquemia. Uno de los trastornos de mayor importancia causados por las ERO son los relacionados con la isquemia y en particular, con el infarto al miocardio, por lo que conviene hacer una breve descripcin de dicho proceso. Para ello consideraremos dos etapas en el desarrollo del mismo. Primera etapa: El estrs es la causa desencadenante. Ante una situacin de estrs psquico, como puede ser el miedo, la ira etc, se produce, como es conocido, una liberacin de las catecolaminas, en particular, la epinefrina por la mdula de las glndulas suprarrenales. La epinefrina, a su vez, activa una enzima que libera el cido araquidnico de las membranas celulares. Este proceso tiene relevancia cuando ocurre en las plaquetas de la sangre. El cido araquidnico liberado es transformado en diferentes pasos en un compuesto llamado tromboxano. Este paso es bloqueado por diferentes frmacos, entre ellos, por la aspirina. El tromboxano estimula la agregacin de las plaquetas (se forma un trombo, de aqu, el nombre de trombosis), lo cual puede ocluir los capilares e impedir la circulacin de la sangre. El trombo se desliza a travs de los vasos como un mbolo, (de aqu el trmino embolia utilizado de vez en cuando). Ante la falta de irrigacin sangunea, se paraliza la cadena respiratoria y hay un dficit de ATP a nivel del tejido afectado. Se forma entonces ATP, mediante dos molculas de ADP, con la produccin de un AMP. Este ltimo se destruye y libera la xantina. La cual es su base prica constituyente.

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Cuando se restablece la normalidad, la xantina se oxida, segn un mecanismo visto en prrafos anteriores, lo que da lugar a la formacin de ERO. En particular, las ERO formadas atacan a las membranas lipoproteicas de los lisosomas, los cuales dejan escapar sus enzimas hidrolticas al espacio intracelular. Se produce entonces, una autodigestin y muerte de la clula (necrosis) . Eventualmente, la membrana celular tambin se rompe y salen al espacio extracelular las enzimas hidrolticas, las que atacan entonces a las clulas vecinas. El resultado final es la muerte de un cierto nmero de clulas, lo que hace que el rgano cardiaco deje de funcionar, es decir, se produce el infarto. Es conveniente insistir en el hecho de que, aunque el factor desencadenante de todo ese proceso ocurre durante la situacin estresante (como puede ser el miedo, o la tensin nerviosa, o una emocin fuerte), el infarto se produce al volver el individuo a la normalidad. Existe un conjunto de factores que predisponen hacia la ocurrencia de este tipo de fenmeno. Estos son los llamados factores de riesgo, entre los que se encuentran, la aterosclerosis, la hipertensin arterial, diabetes mellitus, dislipidemias, envejecimiento, obesidad y el estrs. Otro punto que es importante es evitar el consumo de cigarros ya que el ser fumador es un factor de riesgo para padecer enfermedades cardiovasculares y cncer, el humo del cigarro contiene un gran nmero de oxidantes los cuales pueden dar origen a un dao oxidativo a las LDL (partculas de lipoprotena de baja densidad) fenmeno que contribuye a la aterosclerosis, lo que provocar un alto riesgo de desarrollar esta peligrosa enfermedad cardiovascular, caracterizada por un endurecimiento de las arterias tenindose con esto una mala circulacin y predisponindose a un infarto.
El papel de la dieta en las caractersticas de los cidos de la membrana.

Los cidos insaturados de las membranas lipoproteicas son fundamentalmente los que el individuo consume, directamente o como precursores. El cido araquidnico, el cual se deriva del cido linoleico, un cido esencial, pertenece al grupo de los llamados omega 6,. Estos, bajo la accin de las enzimas correspondientes, dan lugar, en las plaquetas, bsicamente a los tromboxanos, mientras que en otros tejidos constituyen materia prima para la produccin de las prostaglandinas. Estas tienen efectos variados, entre ellos, la hinchazn de los tejidos. La accin analgsica, anti-inflamatoria y antitrombtica de la aspirina y de otros frmacos, como el paracetamol, el ibuprofeno y otros, se debe a su capacidad para inhibir alguno de los pasos en el metabolismo del araquidnico. Una dosis diaria de 100 miligramos de aspirina aumenta la capacidad antioxidante del organismo y reduce las posibilidades de envejecimiento de las arterias, previene la severidad de las migraas, mejora la circulacin de las encas en la enfermedad periodontal, previene ciertos tipos de cataratas, baja el riesgo de cncer colon- rectal y controla la presin arterial, peligrosamente alta que ocurre en un 5 a 15% de los embarazos (preeclampsias). En cambio, los cidos de la serie omega 3, cuando son metabolizados, no dan lugar a los tromboxanos y producen otro tipo de prostaglandinas, menos perjudiciales .Por otra parte, dan lugar a los leucotrienos, que estimulan el sistema inmunolgico. Los cidos saturados y monoinsaturados no participan en ese tipo de reacciones.

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El aceite de pescado es rico en cidos de la serie omega 3, mientras que ciertos aceites vegetales son ricos en los omega 6. De aqu, la recomendacin que se hace respecto al consumo sistemtico de pescado y a la reduccin del consumo de grasas en general.
Las ERO y el dao al sistema nervioso

El tejido nervioso y en particular, el cerebro es rico en cido insaturados y adems, tiene un intenso proceso respiratorio, por lo que dicho tejido es vulnerable en grado sumo a las ERO. La ruptura de un vaso sanguneo, el cual ha adquirido rigidez, a causa de la deposicin del colesterol (ateroesclerosis), da lugar tambin a procesos de isquemia que pueden resultar en la formacin de zonas necrticas en dicho rgano. Aunque no existen pruebas directas de que el estrs oxidativo sea el responsable de la muerte de clulas dopaminrgicas (estas son clulas claves para impedir la presentacin de la enfermedad de Parkinson), distintos hallazgos en humanos y animales de experimentacin apoyan esta hiptesis (ver cuadro a continuacin). Tanto en la enfermedad de Parkinson como en la de Alzheimer se han encontrado alteraciones neuroqumicas que sugieren claramente la existencia de estrs oxidativo (Fig. 4)

(disminuye) Glutatin reducido en la SN (aumenta) Hierro en la sustancia negra (disminuye) Glutatin peroxidasa (aumenta) Actividad de la superxido dismutasa (SOD) (aumenta) Productos derivados de la peroxidacin lipdica (p. ej., malonildialdehdo) (disminuye) cidos grasos polinsaturados en la sustancia negra Alteracin del complejo I mitocondrial Alteracin de la a-cetoglutarato dehidrogenasa mitocondrial

Figura 4. Hallazgos indicativos de estrs oxidativo en la enfermedad de Parkinson.

La tiamina una vitamina que participa como cofactor en la descarboxilacin del piruvato, como paso previo a la entrada del acetil-CoA al ciclo de los cidos tricarboxlicos. Cuando se produce un dficit de dicha vitamina en el tejido muscular, el piruvato se reduce a lactato, pero eso no es posible en el tejido nervioso, el cual carece de esa va metablica. Como consecuencia, se produce un dficit de ATP, en ese caso, por carencia de metabolitos energticos, lo que da lugar al desencadenamiento del mecanismo de la xantina- oxidasa ya explicado.
Otras enfermedades relacionadas con las ERO

En el pollo, la tiamina se encuentra dbilmente fijada en el tejido nervioso, por lo cual, ante un dficit nutricional, desaparece de dichos tejidos ms rpidamente que en otros animales. La consecuencia de

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ello, es la produccin de la enfermedad conocida como encefalomalacia: los animales pierden el apetito y desarrollan finalmente una polineuritis, como paso previo a la muerte. Como un sntoma caracterstico de esta enfermedad, el animal tuerce la cabeza hacia atrs y padece de convulsiones. En la sangre de los animales que padecen de poliencefalomalacia el cido pirvico est en niveles superiores a lo normal. Adems, se encuentran en dicho medio enzimas citoplasmticas y lisosomales, lo cual indica que ha ocurrido ruptura de las correspondientes membranas lipoproteicas.
La diatesis exudativa es otra enfermedad que padece el pollo, la cual est ligada a las ERO. Se caracteriza por un severo edema, causado por la acumulacin de un fluido viscoso subcutneo, de color azul-verdoso.

La enfermedad se produce por la destruccin de la estructura de las membranas de las clulas capilares, lo que da lugar a la salida del plasma. Se previene con la suplementacin de selenio, vitamina E y una dieta no muy rica en cidos poli-insaturados. Cuando el msculo esqueltico es sometido a una carga de trabajo prolongada, se agotan sus reservas de creatinina y glucgeno, en situaciones en las que el abasto de oxgeno es insuficiente para cubrir la demanda. Se forma entonces el ATP a partir del ADP y todo ello da lugar a la liberacin de la xantina. Al restaurarse el basto de oxgeno, se desencadena el mecanismo de la xantina- oxidasa. En el caso del msculo, las consecuencias de todo ello son las siguientes: Se destruye la membrana de los lisosomas, se produce la necrosis y destruccin del tejido, as como la salida a la sangre de las correspondientes enzimas. Como un sntoma de lo anterior, el individuo siente calambres. Adems, se vierte al torrente circulatorio una gran cantidad de potasio. Cuando ste se incrementa grandemente, el corazn no puede funcionar normalmente y se produce el fallo cardiaco, detectable mediante el electrocardiograma. El aparato digestivo es un gran consumidor de energa. As, luego de las comidas, la demanda de oxgeno por esas vsceras se incrementa grandemente y en consecuencia, la concentracin de oxgeno en la sangre disminuye. Si en esas condiciones, el organismo se ve obligado a realizar un gran esfuerzo fsico, muy probablemente existir anoxia a nivel muscular, con las consecuencias ya conocidas. No se recomienda por tanto, realizar ejercicios fuertes luego de las comidas. Una actividad extremadamente peligrosa es la natacin, ya que si el individuo siente un calambre cuando se encuentra en aguas profundas, muy probablemente morir ahogado.
El proceso de la fagocitosis.

El mecanismo mediante el cual el sistema inmunolgico detecta la presencia de un agente extrao es extraordinariamente complejo y todava no muy bien entendido. Existe un paso interesante sin embargo en dicho proceso, el cual se relaciona con las ERO. Este es, el mecanismo que utiliza el leucocito para destruir al organismo invasor. Al localizar el leucocito, por ejemplo a una bacteria, la envuelve con sus seudpodos y la incorpora a su citoplasma en una vacuola. Esta se denomina entonces, fagosoma.

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Paralelamente, en el aparato de Golgi, tiene lugar la formacin de los lisosomas. Estos contienen hasta 20 enzimas hidrolticas, as como un mecanismo de formacin de cido hipocloroso. Este mecanismo se describir brevemente despus.

Figura 5. Microscopa electrnica de barrido de clulas de sangre humana.

Los discos bicncavos son glbulos rojos; las otras clulas son leucocitos. El lisosoma y el fagosoma se mueven por el citoplasma hasta encontrarse y se unen. La vacuola que se forma se denomina entonces, lisosoma secundario. Durante el proceso de destruccin del organismo invasor, el cual se encuentra dentro del lisosoma secundario, se producen agentes vinculados a las ERO fuertemente agresivos. Si el leucocito no est convenientemente abastecido de las enzimas, vitaminas y otros componentes del mecanismo de destruccin de las ERO, el lisosoma secundario se puede autodestruir. Como consecuencia, las enzimas hidrolticas pasan al citoplasma, e incluso, pueden salir al exterior. El leucocito queda entonces, inhabilitado. De esta forma, los agentes protectores contra las ERO, como la vitamina E, la GP-X y otros, estn correlacionados positivamente con la resistencia a las enfermedades infecciosas en general.
La generacin del cido hipocloroso por el leucocito.

En presencia de cloro, y a travs del sistema enzimtico de la mieloperoxidasa de los leucocitos se forma el cido hipocloroso (anin hipoclorito) El cido hipocloroso es el radical ms txico y la especie mas reactiva formada por los fagocitos. Su efecto txico se ejerce tambin sobre clulas normales pudiendo oxidar lpidos y proteoglicanos de las membranas celulares. Intracelularmente inhibe los citocromos con lo que se impide la cadena respiratoria.
Algunas medidas a tomar, para prevenir la accin de las ERO

A continuacin, se describen algunas medidas a tomar por el hombre, en lo relacionado con su dieta y hbitos de conducta, las que pueden ayudarlo a preservarse de la accin de las ERO.,
Ingerir dieta variada y equilibrada

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 Cuidar ingesta de grasas totales, cidos grasos trans, cidos grasos polinsaturados y saturados. Aumentar los cidos grasos monoinsaturados. Aumentar el consumo de frutas, verduras y leguminosas. Aumentar la ingesta de alimentos ricos en fibra. Incentivar la ingesta de pescado, pollo y pavo. Incentivar el consumo de fibra como producto adicional. Consumir alimentos ricos en Vit. E, A, C, Carotenos, Aminocidos Ramificados. Ingerir antioxidantes antirradicalarios en forma medicamentosa. Utilizar medicamentos secuestrantes de metales. Limitar el consumo de alimentos encurtidos Limitar el consumo de tabaco. Limitar el consumo de bebidas alcohlicas. Ingestas seguras recomendadas diariamente: 700 a 1000 microgramos de retinol; 70 a 100 mg de cido ascrbico, 10 a 15 mg de vitamina E, 2 mg de piridoxina, 14 a 16 mg de niacina y 400 microgramos de cido flico.

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Consideraciones acerca del estrs y su manejo en rumiantes

Dra. Denia de la C. Delgado Contenido
Introduccin...........................................................................................................................................................................177 Interacciones entre animales..................................................................................................................................................178 Interacciones animal-medio ambiente ...................................................................................................................................178 Interrelacin animal hombre...............................................................................................................................................178 Estresores endgenos.............................................................................................................................................................179 Respuesta fisiolgica al estrs ...............................................................................................................................................180 El estrs calrico....................................................................................................................................................................182 Consecuencias generales del estrs calrico..........................................................................................................................185 Efecto del estrs calrico en la reproduccin.........................................................................................................................186 Manejo del estrs ...................................................................................................................................................................187 Conclusiones..........................................................................................................................................................................189 Bibliografa a consultar..........................................................................................................................................................189

Introduccin

El desarrollo de la ganadera intensiva trajo como consecuencia, para los animales, cambios en sus patrones de conducta al verse obligados a vivir en confinamiento con altas densidades de poblacin y sometidos a la manipulacin del hombre (alimentacin, destete, ordeo, inseminacin artificial, etc). Por otra parte, ellos estn expuestos a condiciones ambientales variables, tales como, temperatura, humedad, viento, etc. Estos estmulos o agresiones externas, de diversa intensidad y duracin, se pueden considerar como agentes estresores (Garca-Belenguer y Normde, 1993). Dentro de este medio adverso los animales se defienden poniendo en marcha mecanismos psicolgicos y neuroendocrinolgicos que permiten su adaptacin. Cuando estos mecanismos fallan, aparece la patologa de la adaptacin que se puede manifestar bajo la forma de numerosos procesos patolgicos o, simplemente, creando en el animal una situacin de malestar o incomodidad que se denomina estrs. Existen muchas definiciones del estrs. Navarro-Beltrn (1984) seal que el estrs es "el producto de reacciones biolgicas y psicolgicas que se desencadenan en un organismo cuando se enfrenta, de una forma brusca, con un agente nocivo, cualquiera que sea su naturaleza" y Broom (1988) lo defini como "el proceso por el cual los factores del medio ambiente sobrecargan los sistemas de regulacin de un individuo y perturban su estado de adaptacin". En dependencia de la duracin y la intensidad de la demanda interna, el organismo puede daarse y el estrs se convierte en estrs fisiopatolgico o "distress". Entre el estrs fisiolgico y el fisiopatolgico se usa el trmino "overstress" para definir los aspectos poco perjudiciales del estrs y cuando los mecanismos adaptativos inofensivos y fisiolgicos provocan poco dao al individuo. Los factores que pueden producir el estrs en los animales son numerosos. Se pueden agrupar en cuatro grandes grupos:
Interacciones entre animales

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Interacciones animal-ambiente Interacciones animal-hombre Estresores endgenos.

Interacciones entre animales El estrs debido a las interacciones entre los animales se deriva de las relaciones sociales como la superpoblacin, el aislamiento, la rotacin de los animales, el cambio del animal dominante, la presencia o no de hembras dentro del grupo, etc. La superpoblacin, por ejemplo, frecuente en los animales de cra intensiva, supone a menudo que los animales entren en competencia y se producen agresiones que a largo plazo, pueden desencadenar procesos patolgicos como degeneraciones cardiacas, lceras gstricas, etc. (Garca- Mormde y Belenguer, 1993). Interacciones animal-medio ambiente Estas interacciones incluyen la temperatura, el ruido, la humedad, la ventilacin, la higiene medio ambiental, la altitud, etc.

El ruido excesivo induce en las vacas un incremento de la glicemia y una disminucin en la concentracin de hemoglobina (Broucek et al, 1983). En las condiciones del trpico, el estrs debido a los efectos de la temperatura y la humedad son los ms comunes, por lo que se abordarn con mayor profundidad en un acpite aparte de esta conferencia.
Interrelacin animal hombre El hombre es el responsable del manejo animal y por tanto influye directamente en un grupo de actividades que producen estrs como son: la alimentacin, el destete, el esquileo, el transporte, el sacrificio, etc.

El destete es un estrs fsico, difcil de eliminar; sin embargo, se pueden utilizar tcnicas de preacondicionamiento y predestete que disminuyan su efecto. Durante el proceso de mercado, el ganado de carne sufre restriccin de alimentos y agua que implican la aparicin del estrs. En estos casos, los procesos fermentativos ruminales y la capacidad del rumen decrecen y el efecto se mantiene varios das. Tambin es comn encontrar animales afectados por el ayuno durante la transportacin, lo que influye negativamente en la poblacin microbiana del rumen y provoca incrementos del pH ruminal y la osmolaridad del suero sanguneo, la glucosa y la urea (Cole y Hutcheson, 1981). El estrs por sacrificio puede producir una disminucin en la calidad de la carne, debido a la hipersecrecin de catecolaminas y elevacin de la temperatura corporal que unido al aumento de las contracciones musculares provocan disminucin de la tasa de glucgeno muscular y el incremento del pH que se conoce como Sndrome de la Carne Oscura del Bovino (Belenguer y Mormde, 1993). La nutricin y el estrs son interactivos, porque el estrs puede producir o agravar deficiencias nutricionales y, a su vez, stas pueden producir un estrs como respuesta (NRC, 1996). Dietas bajas en energa pueden afectar severamente el sistema inmune (Nockler, 1988) pero los excesos de energa pueden provocar tambin efectos dainos. Raciones con ms de 75 % de concentrado

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produjeron mayor incidencia de enfermedades en terneros estresados por la llegada a un lote seco, comparados con los que consumieron dietas con 25 % de concentrado (Preston y Kunkle, 1974). El agua es un nutriente esencial para la vida. Dficit o exceso de agua, en un estrecho margen en el organismo, son incompatibles con la salud y carencias de alrededor de 20 % del peso del cuerpo, conducen a la muerte, por lo que la deficiencia de agua es un factor de estrs que es posible evitar y el hombre tiene gran responsabilidad en ello.
Estresores endgenos Son aquellos cuyo origen se encuentra en el propio animal como son: el dolor, las enfermedades de tipo metablico y autoinmune, el cncer, la depresin, etc.

De todas las interacciones son precisamente las que se derivan de la relacin hombre-animal, las ms fciles de evitar, puesto que dependen fundamentalmente de la influencia que ejerce ste sobre los animales. La mejora en el manejo de las explotaciones ganaderas servir de tratamiento preventivo para evitar el desencadenamiento de la respuesta al estrs (Garca-Belenguer y Mormede, 1993). En la figura 1 se muestran las posibles interacciones del animal con su medio.

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AGENTES GENTICOS Herencia FACTORES PREDISPONENTES Climticos: Humedad Temperatura Ventilacin Presin social: Posicin dentro del grupo Jerarquizacin DominanciaCompetencia Espacio vital Variacin biolgica individual Actividades de grupo (diversin/ocio) Interaccin bitica: Presencia de agentes patgenos Agentes txicos Disponibilidad de agua, alimentos y sales minerales Eficacia de los mecanismos de ADAPTACIN

ESTADO FISIOLGICO Sexo Talla Fertilidad Estado de salud Inmunidad BALANCE Hdrico Hdrico-salino Acido-bsico Calrico

SISTEMA FISIOLGICO DE INTEGRACIN ORGNICA DE SENSACIONES

termorregulador circulatorio

Reacciones orgnicas ADAPTATIVAS

RPIDAS Cardiovascular Respiratoria Muscular Conductual

DURACIN DE LA EXPOSICIN MUERTE

LENTAS Somticas Viscerales Endocrinas Enzimticas y Conductuales

Figura 1. Esquema de las interacciones del animal y su medio. Modificado de Selye (1973) y Caballero y Sumano (1993)

Respuesta fisiolgica al estrs La respuesta de un organismo que se enfrenta de forma brusca a un agente nocivo, cualquiera que sea su naturaleza, se manifiesta por una serie de reacciones que incluyen la activacin de los sistemas neuroendocrinos que provocan la liberacin de hormonas como la edenocorticotropina (ACTH), los glucocorticoides (GC) y las catecolaminas. La cantidad y proporcin de stas dependen del tipo de estrs. El agente que ocasiona el estrs, desequilibra los mecanismos reguladores homeostticos, de manera que el organismo pierde la capacidad de mantener las condiciones fisiolgicas dentro de los

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lmites normales. Posteriormente se perciben cambios en los patrones de conducta y finalmente ocurre la adaptacin o la muerte (Figura 2). AGENTES INDUCTORES DE ESTRES Efecto inmediato (Estimulacin aguda) Activacin del SNC Efecto retardado INDIVIDUO RESISTENCIA (Estimulacin crnica) Hipotlamo Adenohipfisis Corteza Adrenal Reaccin de Alarma Mdula Adrenal Epinefrina CHOQUE MUERTE ADAPTACION Parsitos Infecciones Desnutricin Cortizol

AGOTAMIENTO

Figura 2. Esquema del Sndrome General de Adaptacin (Caballero y Sumano, 1993)

Caballero y Sumano (1993) describieron las tres fases que comprende este proceso: a) reaccin de alarma dada por la respuesta inmediata del sistema nervioso simptico ante una estimulacin aguda; b) resistencia que se presenta cuando hay una estimulacin crnica y existe participacin del eje hipotlamohipfisiscorteza adrenal, cuyas implicaciones pueden llevar al organismo a un estado de adaptacin y resistencia y c) la reaccin de agotamiento, en la cual un estmulo crnico sobrepasa los niveles de resistencia y conduce al agotamiento de la energa de adaptacin y/o finalmente a la muerte. En la respuesta de adaptacin existe un componente no especfico de origen psicobiolgico que depende de factores genticos y que implica la intervencin del SNC y por otro lado, un componente especfico que depende de la naturaleza del estmulo. Existen criterios que permiten evaluar la respuesta de estrs en los animales. En caso de estrs agudo los criterios directos se obtienen a partir de las pruebas de laboratorio, como son la concentracin plasmtica de hormonas que se liberan durante el estrs (cortizol o cortizona, la adrenocorticotropina (ACTH) y las catecolaminas) y del cido vanil mandlico, producto del metabolismo de la tiroxina, durante la sntesis de adrenalina y noradrenalina.

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En las condiciones de produccin estas tcnicas resultan casi imposibles de realizar, por lo que los criterios indirectos son ms apropiados y pueden dar una idea de la magnitud del estrs. Los criterios indirectos ms comunes son: el ritmo cardiaco, la presin arterial, la temperatura rectal, la frecuencia respiratoria, la glucosa en sangre, los cidos grasos no esterificados (AGNE) y los leucocitos. Todos estos indicadores aparecen elevados en presencia de estrs. El estrs calrico En las reas tropicales y subtropicales, una gran parte del tiempo, existen condiciones ambientales que propician el estrs calrico y es frecuente encontrar animales afectados en las granjas. Los elementos climticos que ejercen mayor influencia en el ganado bovino son: la temperatura del aire, la radiacin solar, la humedad, la velocidad del viento y las precipitaciones. La combinacin exacta de estos indicadores, para que comience el estrs, es difcil de determinar porque existen diferencias muy marcadas entre individuos de cualquier especie, en cuanto a raza, sexo, edad, estado de lactacin, reproduccin, etc. El estrs se produce cuando la temperatura efectiva del ambiente se eleva por encima del rango de temperatura de la zona termoneutral de los animales que es de 15 a 25 C. En estas condiciones el ganado reduce el consumo de alimentos para evitar la produccin de calor metablico, lo cual afecta los procesos productivos. Los rumiantes generan grandes cantidades de calor como consecuencia de la digestin fermentativa y del metabolismo, especialmente, con dietas fibrosas y la cantidad de calor que producen se relaciona directamente con la cantidad de alimento consumido. Sin embargo, ellos resultan poco eficientes para disipar este calor y regular su temperatura corporal, por lo que realizan ajustes homeostticos cuando existen variaciones climticas externas (Caballero y col, 1995). En vacas lecheras, altas productoras cuyo consumo es elevado, esto provoca usualmente que no puedan alcanzar su potencial gentico en trminos de produccin de leche y eficiencia econmica. La cantidad de alimento consumido es dos veces mayor para una vaca que produce 18 litros de leche/da en comparacin con una que produce 5 litros /da. En pases templados el calor que generan estos animales puede ser beneficioso porque permite que las vacas de alta productividad tengan un buen comportamiento, sin tener que suministrarles alimentacin adicional, cuando las temperaturas son muy bajas (Preston y Leng, 1989). A medida que la temperatura ambiental se acerca a la temperatura corporal es ms difcil que la vaca utilice el calor que produce. Ante un calor extremo deja de generar calor metablico, a expensas de no consumir alimento. La produccin de calor en vacas altas productoras en condiciones de estrs calrico disminuye 1820 % y la produccin de leche baja 2025 % (Paton, 1994). En estas condiciones la leche se produce a expensas de las reservas corporales. En la figura 3 se puede observar como se afecta la produccin de leche con respecto a las temperaturas en vacas Holstein en el trpico seco (Palma et al. 1995).

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30 29 28 27 26 25 24 23 J A S O N D E F M A M J

10 9.5 9 8.5 8 7.5 7

Temperatura ambiente
Pdcin de leche

Figura 3. Efecto de la temperatura ambiente en la produccin de leche de vacas Holstein en el trpico seco (Palma et al., 1995)

Las producciones de leche resultaron mucho ms bajas en los meses de julio septiembre, cuando las temperaturas fueron superiores a los 29 C. La humedad relativa juega un papel importante en la termorregulacin del rumiante, acta conjuntamente con la temperatura y dificulta la disipacin del calor por la va fsica ms efectiva en dichas condiciones, la evaporacin (Garca, 1983). Un clima se considera hmedo cuando la tensin de vapor del aire es superior a 15 mm o en su lugar, cuando la humedad relativa es mayor de 60 % en condiciones trmicas semejantes. Temperaturas ambientales y humedad relativa altas, alteran el estado fisiolgico de la vaca lechera lactante y la reproduccin, adems reducen su comportamiento productivo, pero an cuando existan temperaturas termoneutrales, si la humedad relativa es superior a 80 % se puede producir estrs calrico, del mismo modo que ocurre cuando existen altas temperaturas y baja humedad relativa. En climas secos y en los trpicos a alturas de 500 1000 metros sobre el nivel del mar; donde las noches son frescas, con temperaturas a menudo por debajo de los 21C, es posible modificar los efectos del estrs diurno rociando con agua el ganado y utilizando la sombra para evitar los efectos del calor. En los trpicos hmedos, donde la temperatura nocturna est por encima de los 30C es fisiolgicamente imposible que los animales puedan disipar el calor. Preston y Leng (1989) y Esminger (1992) sealan que desde el punto de vista fisiolgico, no hay lugar en el trpico hmedo para la vaca lechera de alto potencial. Ignorar estos hechos, han llevado al fracaso a muchos ganaderos que han intentado introducir las razas europeas en las regiones tropicales. Para relacionar el efecto conjunto de la temperatura y la humedad relativa se estableci un indicador comn, el ndice TemperaturaHumedad (ITH) (Jonhson et al, 1963) que sirve para valorar el estrs calrico en el ganado. Los valores de ITH de 72, 80 y 90 indican los efectos de un estrs ligero, medio y severo, respectivamente.

183

En la tabla 1 se caracterizan los cambios que se presentan en los bovinos durante las diferentes etapas del estrs calrico. Tabla 1. Cambios presentados en los bovinos durante el estrs calrico. Etapas de estrs Calrico
Ligero ( ITH 72 - 79)

Cambios en el animal
Busca sombra e incrementa ligeramente la respiracin, hay dilatacin de los vasos sanguneos, se incrementa disipacin de calor. Los efectos sobre la produccin y la reproduccin son bajos. La frecuencia respiratoria, la salivacin, la temperatura y el consumo de agua aumentan considerablemente. El consumo de materia seca se reduce y se afecta la reproduccin.

Moderado (ITH 80 - 89)

La temperatura corporal se incrementa varios grados por encima de lo normal y hay salivacin excesiva. Se presenta la alcalosis metablica. El animal rehsa a echarse en el suelo, a menos que est mojado. La conducta se inhibe completamente. El consumo de agua se afecta. En casos extremos el cuerpo se torna fro y pegajoso, antes de convulsionar. La muerte es inminente. (Tomado de Caballero et al. 1995) Severo (ITH 90 - 98)

En Cuba la humedad es constantemente excesiva y contribuye a incrementar el efecto negativo de las altas temperaturas (tabla 2). Tabla 2. Humedad del aire e ndice de temperatura-humedad (ITH)* en las condiciones de Cuba. (Garca, 1983). Variable
Humedad Relativa, % Tensin de vapor, mm ITH*
*

Ene
80 18 71

Feb
78 17 70

Mar
77 20 72

Abr
75 20 73

May Jun
78 21 76 82 23 77

Jul
80 23 76

Ago
81 23 78

Sep
83 23 77

Oct
84 22 76

Nov
82 21 73

Dic
81 19 71

Anual
80 21 74

ITH calculado por la frmula de Jonhson et al. (1963)

En la termorregulacin del ganado tambin afecta el aire. La disipacin de la carga de calor en el animal se produce por radiacin, conduccin, conveccin y evaporacin. En estas dos ltimas influye decisivamente el viento. A temperaturas moderadamente altas o dentro de la zona de confort ste ejerce un efecto favorable en la actividad del bovino; sin embargo, si la temperatura del aire contina ascendiendo y se acerca a la de la piel del animal ( 30 C) o la supera, el efecto puede ser negativo, ya que en tal condicin, el flujo de calor pasa del aire al animal (Garca, 1983). Las precipitaciones tambin son de gran importancia en las zonas clidas. Su efecto es beneficioso si el ganado se encuentra bajo estrs calrico, porque la lluvia provocar un rpido restablecimiento del balance trmico. Si por el contrario, la temperatura es fra, producir hipotermia. Lluvias fuertes y prolongadas pueden disminuir el consumo hasta 30 %, tanto en zonas termoneutrales como a bajas temperaturas (NRC, 1984) y el fango resulta perjudicial.

184

Consecuencias generales del estrs calrico Las respuestas a la exposicin al calor se pueden agrupar en primarias y secundarias. Las primeras se producen de forma inmediata mediante la accin nerviosa refleja y se relaciona con la estimulacin, a travs del hipotlamo de los mecanismos para la disipacin trmica: vasodilatacin, aumento de la frecuencia respiratoria y cardiaca y en consecuencia de la conductividad trmica. En esta situacin, la actividad metablica se incrementa al liberarse mayores cantidades de ACTH, glucocorticoides, adrenalina y noradrenalina, etc. Las respuestas secundarias conciernen a las reacciones resultantes de una prolongada exposicin al calor. Estas respuestas incluyen cambios en la composicin de la leche, la sangre, el metabolismo del agua, los carbohidratos, protenas y minerales, el crecimiento, la produccin de leche y la reproduccin y en un caso extremo conducen a la muerte. Como consecuencia de la adaptacin se produce expansin isotnica de los fluidos extracelulares, disminucin del consumo de alimentos y mayor ingestin de agua. La alteracin de la frecuencia respiratoria es una de las primeras respuestas al calor. El incremento de sta aumenta la disipacin trmica, principalmente por evaporacin, aunque tambin en menor grado, la conveccin. Bajo las condiciones del verano cubano se han obtenido alteraciones de la frecuencia respiratoria en vacas Holstein aclimatadas a partir de 26C al sol y 30C a la sombra (Garca, 1983). Juarez y Roman (1987) determinaron en vacas Holstein 53 respiraciones por minuto (rpm) en clima tropical hmedo y Palma y col. (1995) encontraron una media de 48 rpm en clima tropical seco; mientras que en climas templados la frecuencia respiratoria promedio fue entre 1030 rpm (Kolb, 1976; Gonzlez y col. 1986). En la figura 4 se observan las variaciones de la frecuencia respiratoria y el efecto del sol y la sombra.

70
Frecuencia respiratoria

60 50 40 30
2:30 AM 5:30 AM 8:30 AM 11:30 AM 2:30 PM 5:30 PM 8:30 PM 11:30 PM

Sombra

Sol

Horas
Figura 4. Efecto del sol y la sombra en la evolucin diaria de la frecuencia respiratoria. En vacas Holstein (Garca, 1983).

Otro factor que influye en la termorregulacin del bovino es la evaporacin cutnea por sudoracin. En condiciones clidas los animales que ms sudan tienen menores temperaturas rectales y menor frecuencia respiratoria (Sequeira y col, 1993). La temperatura rectal aumenta como respuesta a la termorregulacin frente al estrs. La temperatura rectal comienza a aumentar en las vacas Holstein adaptadas a clima clido alrededor de los 26C al sol y a 30C a la sombra (Garca, 1983) con un promedio a la sombra de 38C 0.9.

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Efecto del estrs calrico en la reproduccin El estrs trmico afecta la reproduccin del ganado. Su efecto se manifiesta por la reduccin de la duracin y la intensidad del estro, el aumento de la incidencia de las ovulaciones silentes (calor callado) y del sangramiento post-ovulatorio (Hafez, 1973). Este autor seala que el estrs trmico, causa anormalidades morfolgicas de los vulos y disminuye la sobrevivencia embrionaria y que la poca del ao, influye en la proporcin en que maduran los folculos ovricos, el nmero de folculos en crecimiento y los ciclos ovulatorios. En primavera es mayor la proporcin de gestaciones del ganado que en el verano debido, posiblemente, a la mayor duracin del da y a las temperaturas moderadas que se consideran en esta poca, ptimas para la concepcin. Cuando las temperaturas son extremadamente altas, disminuye la fecundidad, aumenta el aborto y la reabsorcin fetal. La temperatura crtica, donde hay perjuicio en la fertilidad del bovino, es 30C. El ITH tiene una relacin negativa con respecto a la fertilidad dos das previos a la inseminacin. Ingrahan y col (1974) encontraron que cuando el ITH tuvo valores por debajo de 66, la tasa de concepcin fue 67 %; pero sta baj hasta 21 % cuando el ITH fue superior. La fertilidad de los bovinos Bos taurus y Bos indicus es diferente en el trpico. Estas diferencias existen, inclusive, dentro de las razas de cada especie. Aparentemente, la mayor tasa de fertilidad se consigue con animales cruzados entre estas especies (Romn-Ponce, 1992) posiblemente, por su aclimatacin que les permite una mejor respuesta frente a las condiciones ambientales. En Cuba, las vacas Holstein despus de un perodo de ms de cinco aos de aclimatacin, mantienen la homeostasis en las condiciones climticas medias durante la mayor parte del ao, si se les provee de sombra adecuada y buenas condiciones de alimentacin y manejo. Un estudio poblacional (tabla 3) donde se compararon Holstein con F1 (Holstein x Ceb) no se apreciaron diferencias entre ambos genotipos en la temperatura rectal ni en la frecuencia respiratoria. Sin embargo, se presentaron valores menores de eritrocitos, hematocritos y hemoglobina en las vacas Holstein, lo que denota el fenmeno de homodilucin como respuesta al estrs. Tabla 3. Comparacin de la temperatura rectal, la frecuencia respiratoria y los valores hemticos de vacas Holstein y F1 durante el verano Variable
Temperatura rectal, C Frecuencia respiratoria, rpm Eritrocitos, x 106 Hemoglobina, g/100 ml Hematocritos, % Glbulos blancos, x 103

Holstein
39.2 31 5.14 9.3 30.0 5.34

F1 (H x C)
39.0 32 6.21 11.4 35.0 7.18

Diferencia
0.2 0.7 1.07 2.1 5.0 1.84

Signif.
NS NS *** *** *** ***

186

Manejo del estrs En la vida de un animal muchos estrs son inevitables; sin embargo, ste se prepara o adapta para el ambiente, de tal forma que enfrenta las condiciones adversas de la forma que menos afecta su salud y su comportamiento productivo.

En las ltimas dcadas hubo un avance en las investigaciones relacionadas con el ambiente y la conducta animal. No obstante, quedan an muchas cosas por dilucidar porque estos estudios requieren de grupos multidisciplinarios que abarquen especialidades como nutricin, fisiologa, gentica, ingenierizacin y climatologa. El ganadero, para manejar el estrs, debe conocer la conducta de los animales y estudiar su evolucin etolgica, de forma que sea capaz de determinar los cambios en su modo de actuar que representen una respuesta al estrs. Los animales que tienen bienestar se ven satisfechos, vivaces, consumen con gusto, tienen la piel elstica, los ojos brillantes y orinan y defecan normalmente. Cualquier alteracin, de estos signos, puede ser una alerta de la presencia de estrs (Esminger, 1992). La presencia de un ambiente adverso provoca en los animales el incremento de los movimientos horizontales y verticales de la cabeza, durante el transporte ellos tienen mayor tendencia a defecar y orinar, y ante el estrs de calor, la conducta que siguen es la bsqueda de lugares frescos y sombreados, la disminucin de los movimientos y el aumento del consumo de agua. La buena productividad implica requerimientos de espacio, luz, temperatura, velocidad del aire y humedad relativa. El control de estos factores ofrece la oportunidad de mejorar el comportamiento animal. El manejo del estrs en el ganado tiene dos componentes principales: 1) el manejo de la causa que lo provoca y 2) el manejo del efecto que produce (NRC, 1996). El destete es una de las principales causas de estrs en los terneros, si ellos se inician en el alimento, se vacunan, se tratan contra los parsitos, antes de ser destetados: el estrs del subsecuente destete y traslado de lugar se debe minimizar. El efecto de la nutricin tambin se puede manejar de la forma menos daina. Los terneros estresados, generalmente, disminuyen el consumo de alimentos, por tanto, la concentracin de protena en la racin debe aumentarse (Hutcheson et al, 1993). El NRC (1996) sugiri que en estos casos la protena se eleve de 13.5 a 14.5 % (BS) y aconsej que el uso de la urea como fuente de nitrgeno no proteico, no deba sobrepasar los 30 g/da durante las dos primeras semanas de alimentacin, porque esta fuente nitrogenada se tolera menos en estos casos. Los requerimientos de minerales no parecen diferir entre animales estresados y saludables (Orr et al, 1990). Sin embargo, el ganado de mercadeo o embarque pierde peso, primeramente por prdida de agua del tracto gastrointestinal y posteriormente desde las clulas del cuerpo. Cuando se pierde agua extracelular, pueden ocurrir deficiencias de potasio y de sodio. El requerimiento de potasio en animales estresados es 20 % mayor que en los normales (Hutcheson et al, 1984) y se aconseja en estos casos dar 1.2-1.4 % de potasio en la dieta, durante dos semanas. El estrs afecta directamente la respuesta del sistema inmune (Caballero y Sumano, 1994) y el zinc, cobre, selenio y el hierro parecen ser necesarios para la inmunocompetencia, por lo que se debe

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asegurar su suplementacin en animales sometidos a estrs. Las vitaminas A y E en dosis superiores a sus requerimientos pueden tener tambin un efecto positivo en estos animales (NRC, 1996). El agua, como elemento esencial, no debe faltar al ganado y los alimentos deben ser suficientes para cubrir sus requerimientos productivos. En el trpico es comn en la poca de seca la escasez de alimento voluminoso y la calidad del pasto por lo general, no cubre las necesidades de los animales. En estos casos es necesaria una suplementacin que aporte los nutrientes necesarios para los objetivos propuestos. Las principales formas para proteger al ganado del estrs calrico incluyen mtodos adecuados de manejo, utilizacin de sombras naturales o artificiales, modificaciones del microclima y alojamiento satisfactorio. Es recomendable que al fijar los horarios de ordeo y pastoreo se garantice la estancia del animal en el pastoreo en los perodos de mximo aprovechamiento del pasto. McDowell (1972) seal que el mximo aprovechamiento del tiempo en pastoreo, en condiciones clidas, es temprano en la maana, despus del crepsculo matutino y al final de la tarde antes del crepsculo vespertino. El pastoreo nocturno en las vacas puede servir como una estrategia de adaptacin que les permite realizar esa funcin vital en las horas menos calurosas del da, aunque existen opiniones contradictorias. En Cuba (Garca-Lopz, 1979) encontr una mayor eficiencia en la utilizacin del pasto con vacas Holstein en pastoreo nocturno (0.5 litros ms de leche por vaca). En horario de mayor radiacin solar de 9:00 am a 4:00 pm, los animales deben quedar protegidos de la radiacin solar directa. La sombra ejerce un efecto positivo en la produccin en el trpico. La sombra natural parece ser la ms indicada, adems del beneficio de su bajo costo por lo que se deben sembrar rboles en los potreros y los alrededores de las naves. Aunque se ha sealado que la utilizacin de duchas mejora la produccin de leche y el comportamiento reproductivo, en las condiciones de clima clido hmedo como el de Cuba, se demostr que el efecto de la ducha es muy limitado en el mantenimiento del equilibrio trmico de las vacas (menos de 90 minutos). Esto unido al incremento de la humedad del aire que se produce, no hace aconsejable su uso (Garca, 1983). Las condiciones de alojamiento dependen del tipo de clima. En climas clidos deben construirse de forma que eviten la radiacin directa del sol, tengan una mnima interferencia en la circulacin del aire e impidan la humedad. En general, se recomiendan naves sin paredes, con el techo entre 2.4 y 3.7 metros de altura, con forma de doble pendiente; pero si son de una sola pendiente, se situarn con la parte ms baja hacia el sur en el hemisferio norte y viceversa. La orientacin norte-sur parece ser la ms adecuada en las condiciones clido-hmedas para los terneros que no estn confinados en cunas, boxers o similares, porque permite la eliminacin de la humedad y hay mayor incidencia de la radiacin solar directa en el interior de las naves en las horas iniciales y finales del da. Los pisos, ms aconsejables, son los que permiten eliminar fcilmente las heces y los restos de alimentos y ayudan a disminuir la humedad. Los pisos ranurados tienen, en general muchas ventajas,

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pero si las naves tienen pisos de concreto, deben tener cierta inclinacin para que no acumulen agua despus de la limpieza. Conclusiones En las condiciones actuales de explotacin intensiva o semi-extensiva, de la mayor parte de las especies ganaderas, el estrs es prcticamente inevitable. En el trpico hmedo, las condiciones climticas existentes empeoran la situacin. No obstante, debe ser empeo de todas obtener mejoras en la produccin y la reproduccin, con el menor dao posible a los animales. Para ello, se debe trabajar en el mejoramiento de las condiciones ambientales, a travs de mtodos adecuados de manejo y realizar estudios multidisciplinarios que permitan cuantificar el estrs para poder controlarlo y lograr, as, una explotacin ms racional de los animales.
Bibliografa a consultar

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Aspectos fisiolgicos del uso de follajes tropicales en la alimentacin de los rumiantes. Dra. Bertha Chongo

Contenido
Aspectos fisiolgicos del uso de follajes tropicales en la alimentacin de los rumiantes......................................................191 Introduccin...........................................................................................................................................................................191 Arboles y leguminosas arbreas en sistemas ganaderos. ...................................................................................................192 Caractersticas nutritivas de las leguminosas.........................................................................................................................193 Composicin Qumica. ..........................................................................................................................................................194 Lpidos ...............................................................................................................................................................................194 Carbohidratos ....................................................................................................................................................................194 Estructura de la Pared celular. .........................................................................................................................................195 Protena Bruta ...................................................................................................................................................................196 Consumo de follajes tropicales ..............................................................................................................................................198 Digestin ruminal de follajes tropicales ................................................................................................................................202 Metabolitos secundarios e impactos en la digestin ruminal y la fisiologa animal. .............................................................206 Alcaloides ..........................................................................................................................................................................206 Aminocidos txicos ..........................................................................................................................................................206 Saponinas...........................................................................................................................................................................207 Oxalatos y fitatos. ..............................................................................................................................................................207 Taninos ..............................................................................................................................................................................208 Terpenos ............................................................................................................................................................................209 Vias para reducir los efectos de los FANs .............................................................................................................................209 Conclusiones..........................................................................................................................................................................210 Bibliografa a consultar..........................................................................................................................................................210

Introduccin. Gran parte de la diversidad de alimentos que consume el ganado en producciones sostenibles lo constituyen los pastos naturales y residuos de cosecha los que usualmente son bajos en protena, energa y minerales. Adems, se sabe que la madurez de las plantas est en relacin con altos niveles de lignina y a su vez asociada con una reduccin de la palatabilidad y digestibilidad de las MS lo que influye en la actividad microbiana del rumen. Todo esto trae como consecuencia, afectaciones en el consumo de MS y disminucin en la disponibilidad de la energa, la protena y los minerales. Asmismo, las variaciones estacionales que ocurren en regiones tropicales y subtropicales determinan en gran medida la cantidad y calidad de biomasa disponible de los pastos y forrajes para la alimentacin animal, lo que constituye una limitante para la mayora de los sistemas de produccin ganadera en la poca de seca. Adems, de esto, es comn que los pastos naturales en estas regiones no soporten producciones de carne y leche apropiada por lo que la suplementacin o complementacin es necesaria si se desean alcanzar producciones satisfactorias del ganado y una adecuada reproduccin. Esto ha llevado a que en las ltimas dcadas la introduccin o utilizacin de rboles y arbustos de leguminosas en los sistemas de pastoreo resulte una necesidad promisoria. En las ltimas dcadas la utilizacin de fuentes proteicas complementarias en las que los rboles y arbustos de leguminosas en sistemas de pastoreo ha cobrado importancia, estos ofrecen una opcin barata y sostenible. Las arbreas, son fuentes importantes de nutrientes para el ganado, en particular,

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por su atractivo contenido de protenas para mejorar los niveles de este nutriente y tratar de cubrir las necesidades de los rumiantes en los sistemas silvopastoriles. Sin embargo, la actividad fisiolgica de las plantas es compleja y diversa, en su metabolismo se forman miles de compuestos secundarios entre los que se plantea que ms de 8000 son polifenoles, 270 aminocidos no proteicos, alrededor de 32 compuestos cianognicos, alcaloides, saponinas entre otros con acciones diversas. La presencia de estos compuestos en las plantas que consume el ganado influye en la palatabilidad, el consumo entre otros aspectos del comportamiento fisiolgico del rumiante. Por lo que se hace necesario cada vez mas, conocer la calidad nutritiva y el papel de los antinutrientes en estas plantas en el animal para lograr un mejor manejo y explotacin ganadera con el uso de los rboles proteicos y otras arbreas en el sistema. El objetivo de esta conferencia es dar a conocer aspectos novedosos de la composicin qumica de las leguminosas tropicales, la digestin ruminal de follajes y los efectos en rumen de los factores antinutritivos (FANs). Arboles y leguminosas arbreas en sistemas ganaderos. El papel que juegan los rboles en sistemas con gramneas y su rea espacial cuando estn en comunidades de plantas muestran relaciones competitivas que pueden hacer variar su composicin qumica, aspecto que a su vez influye en otros patrones de comportamiento y consumo de animales en pastoreo; de una u otra forma en la calidad y heterogeneidad del suelo. Es conocido que el consumo de alimentos es una de las actividades primordiales del ganado para sobrevivir, mantenerse, crecer reproducirse y producir. Uno de los aspectos principales que determinan ese comportamiento es la necesidad de nutrientes por el animal, la calidad y composicin nutritiva del alimento segn se encuentren los animales estabulados o en sistema de pastoreos. En regiones tropicales donde las gramneas tienen baja composicin en nutrientes de fcil asimilacin por el animal los rboles y arbustos de leguminosas juegan un papel importante por la riqueza nutritiva superior a estas gramneas. La introduccin de leguminosas en los sistemas ganaderos ha ofrecido ventajas en diferentes aspectos relacionados con la productividad y sostenibilidad de los mismos. En general, dada la caracterstica de estas rboreas de tener gran capacidad para fijar el nitrgeno de la atmsfera y proveer una fuente esencial de nutrientes a travs del reciclaje por la planta, bajo condiciones de baja fertilidad de los suelos, estimula el crecimiento y mejora el valor nutritivo de pastos tropicales permitiendo que el animal consuma un alimento de mejor calidad.
Los rboles y arbustos tienen un alto contenido de nutrientes apropiados para la alimentacin del ganado entre otros la riqueza en protena, minerales y vitaminas que los hacen atractivos para la suplementacin de animales en cualquier sistema de explotacin agrcolas bien sea de pastos y forrajes de pobre calidad en el trpico.

192

Adems de esta riqueza nutritiva, estas plantas tienen como caracterstica general que acumulan en su estructura un amplio rango de compuestos qumicos en sus clulas, pueden ser divididos en dos: aquellos productos del metabolismo primario entre los que se encuentran las protenas, los carbohidratos y las grasas y los directamente relacionados con el metabolismo secundario. Sin embargo, durante la seca la carencia de alimentos va esforzando al ganado en pastoreo (bovino, ovino y caprino) al consumo de diversas plantas que contienen niveles apreciables de FANs. Desde el punto de vista bioqumico, los metabolitos secundarios son compuestos producidos por la biosntesis, transformacin y biodegradacin de compuestos endgenos en la planta en los que media una protena de especializacin. La significacin biolgica de estos compuestos est dada por las funciones especficas que realizan en la misma y su funcin en la clula protectora entre los que se citan compuestos de naturaleza fenlica (taninos, terpenos, alcaloides etc). Los eclogos por su parte le atribuyen gran importancia a estos compuestos por su papel protector en la planta contra plagas y enfermedades, algunos autores los clasifican como sustancias de gran eficiencia ecolgica frente a metabolitos primarios que juegan el papel de sustancias con caractersticas fisiolgicas eficientes. Dentro de los compuestos secundarios es amplio el espectro que ha sido considerado como factores antinutricionales debido a los efectos adversos que pueden causar su presencia en los tejidos de las plantas consumidas por el ganado. Los trastornos principales se relacionaron con afectaciones en la digestibilidad de los nutrientes y en otros casos con alteraciones metablicas que bajo determinadas condiciones pueden ocasionar trastornos irreversibles. Caractersticas nutritivas de las leguminosas.
Las caractersticas, bioqumicas y morfolgicas entre especies le atribuyen diferencias en su valor nutritivo. Uno de los problemas principales a los que se enfrentan los nutricionistas en las regiones tropicales y subtropicales es la distribucin irregular en el ao de la biomasa de plantas forrajeras, seca disponible para la alimentacin animal y se alcanzan a menudo bajos consumos de materia seca por los rumiantes debido a la calidad del alimento, lo que incide en el consumo voluntario.

De los mecanismos que inciden en este son de gran inters por los nutricionistas, los aspectos relacionados con los niveles orofaringeos sobre todo con forraje de mala calidad y los niveles de minerales, capacidad digestiva asociada con aspectos fsicos y con los productos de la fermentacin (Dulphy, y Van Soest, 1996). De particular importancia es la composicin qumica de los pastos forrajes y otras plantas leguminosas, la naturaleza de los carbohidratos y los cambios ruminales que estos originan en el animal. Es evidente que el consumo voluntario de los alimentos esta regulado por numerosos mecanismos. Los efectos de un mecanismo simple o la combinacin de otros que pudieran interferir, y que dependern del tipo de alimento, su composicin qumica y calidad fermentativa. Ahora bien la diversidad qumica de las plantas leguminosas tropicales probablemente resulte mayor que la de clima templado, a lo que se une que las primeras han sido menos estudiadas. Todo esto hace que se descubra la aceptacin o limitacin de una en otra especie por inadecuadas prcticas de manejo en los sistemas de alimentacin y no necesariamente por conocer la naturaleza de sus componentes.

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Las especies de plantas poseen caractersticas diferentes segn sean gramneas y leguminosas. Estas diferencias son desde el punto de vista morfolgico, anatmico y Bioqumico es una caracterstica distintiva entre especies. Al parecer todas las leguminosas templadas y tropicales poseen una anatoma particular en sus hojas, presentan C3 en sus senderos metablicos de fijacin de carbono lo que hacen que contengan ms bajos contenidos de pared celular en su estructura y una menor proporcin de tejido vascular. Al mismo tiempo contienen mayor proporcin de tejido mesfilo con paredes delgadas no lignificadas lo que las distinguen de los pastos tropicales, adems de que estos presentan sendero C4 en la fijacin de Carbono. Composicin Qumica. Los reportes acerca de la composicin qumica del forraje de leguminosas tropicales son aun insuficientes, al parecer relacionado con la pobre explotacin como alimento en los sistemas ganaderos en estas reas. En la actualidad se considera que la composicin qumica en si, no es un buen indicador para predecir el valor nutritivo si no que se debe considerar tambin, que la disponibilidad de nutrientes de este alimento por el animal es variable entre forrajes de leguminosas y juega un papel esencial (Corniaux et al 1996). Es por ello que en esta conferencia solo abordaremos uno de los aspectos del valor nutritivo de las leguminosas que es la composicin qumica. Lpidos Los contenidos de lpidos de estas plantas han sido principalmente estudiados en forma de extracto etreo; se considera que su nivel es relativamente bajo y poco variable entre especies de leguminosas los rangos se mueven entre 20 - 40 g/kg MS -1 Sin embargo Corniaux, Durand, Sarahl y Guerin (1996), al evaluar la composicin qumica de 45 especies leosas arbustivas refieren variaciones en los lpidos de 24 - 80 g/kg MS-1 entre los que se encuentran Acacia farnesiana, Albizia Lebbeck, Erythrina sp, Gliricidia sepium, Leucaena leucocephala, Solamia mauritamium, Mucuna sp, Ficus, entre otras. Los trabajos desarrollados por un grupo de investigadores cubanos han indicado rangos entre 23 - 52 g kg MS -1 en 16 especies de leguminosas.
Carbohidratos

Los carbohidratos son compuestos abundantes en la mayora de las plantas, juegan un papel importante en el metabolismo intermediario, en la trasferencia y almacenamiento de energa y en la estructura de la planta. Adems tienen un papel esencial en los procesos de fotosntesis de la planta. De manera similar son importantes en la nutricin de los rumiantes por su papel esencial como fuente de energa. La concentracin de carbohidratos de los forrajes de leguminosas en el trpico ha sido poco estudiada, pero se plantea que existen variaciones entre gneros y especies. Los almidones predominan como polisacridos de reservas en estas plantas. Al respecto, Moore y Hutfield, (1992), refieren su acumulacin en las races aunque en plantas como el Trbol blanco (templado) se almacena en los estolones. Pedraza (2000) indic que las hojas de las leguminosas, contiene menores concentraciones de azucares libres que los tallos pero con mayores concentraciones de almidn. Asimismo, refiri al evaluar los

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contenidos en cuatro tipos de follaje de G. sepium que las concentraciones de azcares varan con el estado vegetativo en estas plantas. Esto indica que el contenido de carbohidratos de las leguminosas es variable y est establecido que a diferencia de las gramneas pueden almacenar los carbohidratos en forma de almidn con mayor contenido en las hojas que en los tallos. Sin embargo, esto ha sido ms estudiado en las leguminosas de clima templado que en las tropicales (Corniaux, 1996). Por su parte Norton y Poppi (1995) han indicado que en forma de celulosa, puede de aportar 17.5 Mj kg-1 en leguminosas tropicales. La importancia de los azcares de los forrajes de algunas leguminosas en cuanto a la palatabilidad y potencialidades para hacer ensilados ha sido planteada por (Van Soest 1983)
Estructura de la Pared celular. Los diferentes tipos de clulas de las plantas que en forma organizada estn estructuradas y tienen una funcin particular, dicha estructura anatmica tiene un efecto marcado que influye en mayor o menor magnitud en la digestin de los tejidos.

La base arquitectnica de estas plantas contienen en sus paredes celulosa en microfibrillas que se entrelazan con la hemicelulosa (xilanos, arabanos) y se separan de las clulas adjuntas por una media lmina. La composicin de la celulosa es un polisacrido -1, 4 glucosa mientras que la hemicelulosa es una mezcla heterognea compuesta por hexosas, pentosanos y cidos urnicos. Tanto en las leguminosas tropicales como en las templadas las hemicelulosas estn compuestas predominantemente por xilanos, aunque en algunas plantas como el Stytosanthes humilis se indicaron concentraciones importantes de galactomananos varios compuestos caractersticos en plantas maderables. En las leguminosas la lmina media es rica en pectinas y clulas con una nica pared celular (mesfila) que no est lignificada esto permite mayor acceso a la forma fsica y a la ruptura en el proceso digestivo. Existen reportes que indican que las bacterias del rumen si bien son capaces de digerir parcialmente los tejidos lignificados de las gramneas, al parecer los tejidos vasculares de las leguminosas permanecen indigeribles por estos organismos. Esto implica que en las leguminosas la digestibilidad de los tejidos se relacione ms con el grado de vascularizacin de la planta con el contenido de lignina. Aunque, en estos ltimos los tejidos vasculares son menos abundantes en las hojas que en el resto de la planta lo que hace que ocupen en lugar de preferencia respecto a las gramneas. La proporcin de componentes de la estructura fibrosa en las leguminosas al parecer es menos compleja. Al respecto, se reportan niveles de Fibra bruta que presenta grandes variaciones, aunque en la actualidad se conoce que la FND (pared celular) es un mejor indicador al expresar la composicin en nutrientes de la planta y que permite una mejor evaluacin de la leguminosa como alimento debido a sus caractersticas dentro de la estructura fibrosa y su participacin en el proceso digestivo. Se reporta (Delgado et al, 2000) en estas plantas su bajo contenido en pared celular y se atribuye a esto ventajas respecto a las gramneas tropicales en su valor nutritivo. As, es posible alcanzar en la en leguminosas forrajeras valores promedio de 43% de pared celular (FND) muestras que en arbreas alcanza hasta un 37 % muy inferior al de las gramneas que como promedio puede ser de 66 %.

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La hemicelulosa es otro componente que en estas plantas contiene niveles bajos. Se indica que en las leguminosas forrajeras los promedios son en arbreas muy inferior a las gramneas, que muestra valores elevados en esta fraccin de carbohidratos. Sin embargo, la cuanta en la que las paredes celulares de estas plantas son digeridas en rumen depende de las especies, de su composicin y grado de lignificacin. Moore (1994) al evaluar la calidad de forrajes seal que a diferencias de las gramneas, las leguminosas presentan un contenido de lignina superior. Aunque tienen como ventaja que su lignificacin es en el tejido vascular (Xilema) lo que las diferencia de las gramneas que se distribuye a travs de toda la planta y afecta en estos la degradabilidad de la fraccin fibrosa. La tabla 1 indica rangos de valores de las fracciones fibrosas, MS y otros indicadores en diferentes leosas tropicales. Tabla 1 .Composicin qumica y degradabilidad enzimtica in vitro" de especies leosas arbustivas* para rumiantes (Adaptado de Corniaux et al, 1996) Composicin Qumica (BS) (%)
Materia seca Cenizas Nitrgeno Grasas Celulosa bruta FND FAD LAD Taninos Precipitantes Calcio Fsforo DEMO (%) MO)1 DEN (% NT) N-FAD DMO

Media de 45 especies
35.9 9.4 17.1 4.2 26.8 49.3 38.4 18.6 0.86 2.2 0.26 50.3 24.3 4.4 49.6

Coeficiente de variacin (%)

29 35 26 31 27 20 28 46 228 57 50 26 44 7.3 18

Mnimo
22.1 4.2 7.7 2.4 14.5 27.0 20.5 6.4 0 0.9 0.13 20.0 7.2 0.9 32.4

Mximo
51.1 20.5 29.3 8.0 41.1 75.1 67.1 39.1 10.3 0.51 78.5 59.7 12.4 68.2

1 Degradabilidad enzimtica de la materia orgnica.

*Especies incluidas: Mimosaceas, Fabaceas, Caesalpiniaceas y Euforbiaceas

Protena Bruta

La composicin en protena de las leguminosas esta regida por senderos bioqumicos diferentes que la de los pastos tropicales lo que la atribuye concentraciones de protena celular mayores. Por otra parte se indican cambios necesarios y marcados en la relacin hoja tallo en el estado de maduracin y menores variaciones en el valor nutritivo de estas plantas en comparacin con los pastos tropicales en similar perodo de maduracin. Sin embargo, los niveles de protenas en estas plantas varan entre leguminosas y arquitectura de la planta sean erectas o rastreras. Los tejidos de las plantas contienen en su composicin nitrgeno que pueden estar en forma de protena soluble o insoluble, como aminocidos libres, ureidos, nitratos y amonio. Se reporta que los componentes no proteicos en pueden alcanzar hasta un 25 % de N total bajo determinadas condiciones.

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Tambin parte del nitrgeno se encuentra enlazado a las fracciones fibrosas el que en parte disminuye la degradabilidad de ese nutriente en Leucaena leucocephala (La O, 2001). Uno de los mayores cambios en el metabolismo de los constituyentes de las leguminosas es el nivel de protena bruta (PB) que puede variar entre especies de leguminosas y dentro de una misma especie (Chongo et al 1999; Norton y Poppy 1994; Corniaux et al, 1996). Por su parte Pedraza en el 2000 indic cambios con la poca de recoleccin de la planta; de forma general, siempre es ms alto que en los pastos tropicales. Otra de las caractersticas principales de las protenas de estas plantas es su capacidad de acoplarse con los taninos y formar complejos que las hace inaccesibles en muchas leguminosas al ataque por la microflora ruminal originando en estos casos su paso directo al intestino. Las formas solubles de nitrgeno por lo general son fuentes disponibles para los microorganismos del rumen y son rpidamente fermentadas con produccin de amoniaco y la sntesis de microorganismos. Por el contrario la protena insoluble puede escapar a la digestin ruminal y contribuir a la protena en el intestino, sin embargo est sujeto a las caractersticas propias de la leguminosa y a los enlaces del nitrgeno dentro del vegetal (CAB 2001) La disponibilidad de la protena al ataque de los microorganismos del rumen depende en gran medida en las leguminosas tanto templadas como tropicales de la presencia y tipos de Taninos que contenga la planta as como de las formas de enlaces. Son pocos los trabajos que refieren la composicin de las protenas en las leguminosas. As, Chongo, et al (2000) al estudiar las fracciones proteicas en un grupo de leguminosas rastreras, rboles y arbustos apropiados para la alimentacin del ganado seala las variaciones que existen entre fracciones de protenas entre especies y en la Figura 1 se resumen algunos resultados referidos por estos autores. Por otra parte Fall Toure y Doreau (1995) al comparar la fraccionamiento del nitrgeno de leguminosas templadas y tropicales indicaron que la distribucin del nitrgeno en las clulas de las plantas es ms homogneas en forrajes de plantas templadas (ej. Medicago sativa) que es Tropicales (Acacia sp, Bauhinia rufescens) como resultado indicaron mayores variaciones en la digestibilidad del N de estas ltimas. Estos autores tambin sealan una relacin en la degradabilidad del N de los rboles y su contenido en FAD-N; lo que coincide con La O. (2001) en Leucaena leucocephala En la actualidad, las investigaciones de mtodos accesibles para evaluar el valor nutritivo de las leguminosas en el trpico trabajan en la bsqueda de relaciones posibles entre la composicin qumica y el VN. Al respecto (Fall Taure y Doreau, 1995) sealan una relacin entre la digestibilidad del N. de los rboles y el contenido de estos en N-FAD, por el contrario Corniaux et al (1996b) despus de evaluar 45 muestras de 13 familias de 4 especies de leguminosas plantean que en plantas herbceas el criterio de FND no es suficiente para predecir la degradabilidad enzimtica de la MO debido a que no se comporta igual en todas las especies.

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Fracciones proteicas (mg/g protena) de los arboles y leguminosas estudiados.

mg/g de protena

ALBUMINAS GOBULINAS PROLAMINAS

GLUTELINAS

0 GLIRICIDIA ENTEROLOBIUM SAPINDO LEUCAENA

Figura 1.- Fracciones proteicas de los rboles y leguminosas estudiadas

Consumo de follajes tropicales

El consumo es una actividad indispensable para el animal, ya que permite mantener e incrementar las funciones vitales al mismo tiempo que aporta los nutrientes del alimento requeridos para mantener una condicin productiva. En los pases tropicales, este se ve afectado frecuentemente por las limitaciones que presentan los recursos forrajeros que imponen una restriccin que puede afectar el comportamiento productivo de los rebaos. Ahora bien, el consumo voluntario no es mas que la cantidad neta de materia seca consumida por un animal en una unidad de tiempo cuando es ofrecido ad libitum como alimento nico; hecho que est modulado o regulado por diferentes factores asociados al animal o no. Esta cantidad de alimento consumida le permitir alcanzar una produccin que estar en relacin con la disponibilidad de los nutrientes para su digestin y utilizacin metablica. El consumo est regulado por mecanismos relacionados con factores fsicos, fisiolgicos y psicognicos propios del animal que se pueden resumir en tres grupos:

Relacionados con el alimento, Los ligados al animal y Los relacionados con el manejo.

En el primer grupo se encuentran, la palatabilidad, las propiedades fsicas y la disponibilidad de nutrientes del alimento. En el segundo grupo se sitan la capacidad de consumo y el apetito, mientras que en el tercero se encuentran la alimentacin propiamente dicha y otros factores como el estrs, manejo y cuidado del animal, interacciones sociales y las condiciones de vida.

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As, la palatabilidad designa las cualidades organolpticas de los alimentos que pueden estimular o frenar el consumo. A esta ltima sensacin y la correspondiente respuesta de rechazo por el animal suele llamrsele aversin. Los rboles y arbustos forrajeros contienen compuestos secundarios (Taninos, saponinas, alcaloides, glicsidos, entre otros). La presencia de estos metabolitos en los rboles y arbustos forrajeros, juegan un papel en la palatabilidad y en la seleccin que hacen los animales de lo que consumen, por ejercer un efecto en los sentidos del gusto, el olor, etc. Aun, existen criterios divergentes acerca del verdadero papel de la palatabilidad en el consumo de alimentos, algunos autores sealan que en el caso de los forrajes los controles del consumo a largo plazo tienen ms importancia que la propia palatabilidad. No obstante, existen mtodos prcticos que permiten reducir el efecto de los compuestos secundarios como es el secado al sol el mezclado de forrajes de arbreas entre otros. En el pastoreo el animal se hace ms selectivo como es el caso de los sistemas Silvopastoriles y tratan de consumir lo ms palatable por lo que estos efectos son menos apreciados. Es conocido, que estos dos ltimos aspectos unido al bajo contenido de nitrgeno, la edad del vegetal y la poca afectan la digestibilidad de los forrajes sobretodo en las regiones tropicales, al mismo tiempo que hacen mas largo el tiempo de retencin, por lo que el consumo se reduce (Tabla 2). Tabla 2. Consumo por cabras y calidad de madero negro (G. Sepium) en diferentes periodos experimentales. Rebrote Indicadores >4 meses Perodo 1
1.65 32.1 18.4 51.2

<3meses Perodo 2
0.61 23.2 22.1 60.1

<3meses Perodo 3
0.37 20.5 23.0 63.4

Consumo, kg MS/d Materia seca, % Protena bruta, % DIVMS1, %

1 Digestibilidad in vitro de la Materia Seca. Adaptado de Benavides, 1999

Adems en sistemas donde los animales estn estabulados no tienen la capacidad de seleccionar el alimento por tanto el comportamiento del consumo es diferente a cuando estn en pastoreo donde este puede estar mas restringido por el tiempo de retencin del alimento en el rumen que por la estructura del pastizal, la calidad del pasto o por otros factores. Es bien conocido que, en condiciones de pastoreo existen interrelaciones entre la planta y el animal que pueden alterar cuantitativamente el orden e importancias que tengan algunas variables determinadas en estabulacin por lo que cada caso requiere anlisis diferentes. Existen otros factores de la planta que afectan el consumo por lo que se plantea que la asociacin de rboles, la composicin mineral y el aporte que hace el pasto tienen gran importancia para el animal. Cuando el contenido mineral de la planta est por debajo de los niveles aceptados, la fertilizacin o la suplementacin adecuada puede incrementar el consumo de los pastos y hacer ms eficiente su utilizacin por el animal.

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En el caso donde el nitrgeno es deficiente se afecta el crecimiento de la microflora del rumen, su actividad y por consecuencia el consumo. Entonces es posible lograr incrementos con el uso de la urea, o la suplementacin con concentrados de un buen nivel de protenas o con el uso de leguminosas en banco o asociadas en el pastoreo. La deficiencia de otros minerales se comporta diferente a la que ocurre con el N, la primera no puede ser atribuida a un efecto carencial neto, sino que esta mas relacionado con los factores de la planta. Se ha observado que la fertilizacin con azufre aunque aumenta el contenido del elemento en el pasto (de 0.09 a 0.15 %) no incrementa el consumo al mismo nivel que cuando se suplementa con el elemento solo. La composicin botnica y estructural del pastizal es un factor de inters, al respecto las leguminosas templadas y tropicales promueven mayores consumo que las gramneas. Resultados de investigaciones de diferentes pases sealan que las diferencias se atribuyen a la naturaleza de su fibra y a un menor tiempo de retencin de las leguminosas en el retculo rumen. As, se han encontrado diferencias apreciables en el consumo y la digestibilidad de los componentes estructurales y morfolgicos de la planta en particular hojas y tallos. De esta forma, las leguminosas y otras arbreas se recomiendan por su calidad nutricional como complemento o como suplemento en los sistemas de alimentacin. As la complementacin con forrajes de arbreas a forrajes de baja calidad resulta beneficiosa en diferentes especies de rumiantes (tabla 3). Bien sea en estabulacin o en pastoreo se alcanzan resultados beneficiosos por el incremento del consumo, la eficiencia de la fermentacin ruminal, un mayor trnsito y mejor balance de nutrientes absorbidos en el tracto posterior. No obstante, se han alcanzado resultados que indican que la edad de rebrote influye y cuando estas plantas son asociadas no siempre los efectos logran incrementar el consumo (Tabla 4). Tabla 3. Efecto de complementar con follaje de leguminosas arbreas en el consumo de forraje de baja calidad y productividad animal Adaptado de Norton 1994.

ARBREA ANIMAL (%) GPV (%) L. Leucocephal Ovinos a L. Leucocephal Bovinos a G. sepium Bovinos

CONSUMO VOLUNTARIO (G/KG PV/D) ------------------------DIETA BASE FOLLAJE DIETA BASE DMS Rastrojo de sorgo Pasto natural _ 5.9s _ 5.2s 24.6 32.8 20.2 26.1 41.7 46.7 42.0 44.0 -44 85 -20 290

Pulidura _ 27.0 47.0 10 de 11.0s 22.0 55.0 113 arroz S: Base Sesca; DMS: Degradabilidad de la materia seca y GPV: ganancia de peso vivo

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Tabla 4.- Consumo voluntario (g MS/vaca/d) de arbreas tropicales como complemento al pastoreo en vacas de doble propsito (Bobadilla 2001)
Complemento *
B L LB LP LG LPG BPG

Consumo voluntario
1626.3 1495.2 1648.2 1112.8 1470.3 1157.3 1201.2

* B Brosimum allicastrum; L Leucaena leucocephala; P Piscidia piscipula; G Guazuma ulmifolia

En sistemas silvopastoriles se han encontrado diferencias con la especie animal respectos en el consumo y seleccin en pastoreo relacionada con los hbitos de consumo de cada una. Varios autores indican que las cabras muestran comportamientos en cuanto a la seleccin comparable a las vacas, pero menos parecidas a los ovinos. En tanto que las cabras al ser ms ramoneadoras y consumir las gramneas y leguminosas desde su extremo suelen rechazar mas el tallo con respecto a otras especies como el vacuno y los borregos van ms al fondo. En cuanto a las caractersticas fsicas del alimento, aspectos tales como el molinado, el troceado y el prensado entre otros, varan la respuesta que se espera en trminos de consumo. Al respecto, se indican que los bloques multinutricionales (BMN) por su estructura ejercen restricciones en el consumo, lo que parece estar en relacin con la proporcin de ingredientes de la frmula que determinan la dureza y la palatabilidad al tiempo que influyen en su aceptabilidad por el animal. As, se informa que el uso de la melaza ejerce un efecto favorable en la palatabilidad, mientras que elevados niveles de sal reducen su aceptacin. Resultados en ovinos con BMN elaborados con diferentes durezas indicaron variaciones en el consumo (Tabla 5).
Tabla 5. Efecto de la dureza del BMN en el consumo de ovinos

Consumo promedio (g/d) de borregos de pelo y de lana.

Ovinos Tratamiento S10B25M15 200 S50B0M0 250 S20B30M0 200 S10B40M0 200 Pelo 311.4 21.4 104.2 37.1 Lana 278.5 40.0 32.8 22.8 Promedio 294.9 30.7 68.5 30.0

En sistemas donde existen forrajes de diferentes especies de plantas la aceptacin o aceptabilidad que realice el animal es importante en el consumo de uno u otro alimento. De este modo, la aceptabilidad de los rumiantes a un forraje vara con la especie de planta, su valor nutritivo, la forma de participacin en la dieta, y la especie animal de que se trate (Fig. 1).

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Digestin ruminal de follajes tropicales

El rumen es una gran cmara de fermentacin donde habitan millones de microorganismos de especies diversas y que se modifican con los cambios que se producen por la dieta, el uso de suplementos o aditivos. El empleo creciente de rboles y arbustos en los sistemas de alimentacin de los rumiantes impone la necesidad de conocer los efectos de estos metabolitos en el proceso de digestin ruminal ya que por la diversidad de compuestos y su naturaleza qumica pueden ser beneficiosos o perjudiciales. Las leguminosas han sido utilizadas para incrementar el consumo y la digestibilidad de los forrajes, residuos de cosecha y en pastos de baja calidad, lo que ha permitido mejorar la productividad animal, y en particular la produccin de leche. Este efecto se ha relacionado con los metabolitos secundarios en particular los taninos condensados y se atribuye a tres factores fundamentales: Provee nitrgeno que en dependencia de su enlace con los taninos es degradable en rumen o no. Parte del nitrgeno escapa del rumen sin ser degradado, sobre todo la protena protegida por la presencia de los taninos puede aportar protena alimentaria al animal. La presencia de algunos de estos metabolitos en el rumen puede reducir parcialmente los protozoos con una mejora en la eficiencia de sntesis de microorganismos en el rumen.

Un aspecto que permite alcanzar mejoras en la produccin animal cuando se suministran leguminosas y rboles forrajeros es conocer la degradabilidad del nitrgeno debido a que este no siempre est disponible a la digestin en el tracto gastrointestinal debido a diferentes factores estructurales, que lo acomplejan (taninos, fracciones fibrosas etc). El conocimiento de la degradabilidad permite una mayor manipulacin. Se conoce que los sistemas actuales de la evaluacin de protenas en los alimentos para rumiantes distribuyen el N de la protena bruta y el indegradable o tambin denominado de by pass esta ltima mas o menos digerible en el intestino para ello se emplea grandemente la tcnica de las bolsas de nylon y se estima la degradabilidad del nitrgeno en la planta o el perfil en diferentes partes, lo que ayuda a explicar la mayor o menor degradabilidad del nitrgeno entre diferentes leguminosas y seleccionar la dieta sobre esta base para alcanzar mejores resultados productivos. En este sentido, los resultados de degradabilidad efectiva del nitrgeno(DN) de un grupo de leguminosas y rboles forrajeros indicaron que la DN oscil desde 43 hasta 81 % y se relacionaron con los respectivos contenidos de polifenoles totales en las plantas en estudio (Chongo, 2002). En particular se ha informado que la digestibilidad de la MS y del nitrgeno vara entre Leucaena leucocephala, pallida y diversipholia lo que se relaciona con el contenido de taninos diferentes entre estas. La tabla.6 indica el comportamiento en la digestibilidad in vitro de la materia seca y los taninos condensados (Norton 1995). Tabla 6. Comportamiento en la digestibilidad in vitro de la materia seca y los taninos condensados en especies de Leucaena (Norton, 1995). Especies
L .leucocephala L. pallida L. diversipholia

DIVMS
66.3 56.4 54.2

Taninos condensados
6.6 8.5 12.0

Los efectos de los taninos condensados (TC) en la degradabilidad del nitrgeno pueden ser modificados

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si se desea, por la adicin de Polietilen-glicol (PEG) en la dieta, debido a que este libera la protena que se acompleja y mejora la DN (Lowry, 1990) en leguminosas templadas, La O et al, (2001) en estudios con Leucaena leucocephala. La combinacin de leguminosas y estas con los rboles forrajeros permiten aportes de nitrgeno con diferentes solubilidad y degradabilidad, los reportes de Rosales (1998) informan que el uso de la Cratylia argentea (libre de taninos) y Flemingia macrophyla (con 25.1 g/ Kg MS), mejor el consumo y la digestibilidad en ovinos. Los incrementos en consumo con diferentes sistema de manejo de la leguminosa originan niveles ms elevados de amonaco en rumen con respecto a las gramneas solas, efecto asociado con una mejor sntesis de protena microbiana en el rgano. Sin embargo, este acontecimiento estar en dependencia de la calidad de la gramnea acompaante y de la existencia de un adecuado aporte de energa para una sntesis ms eficiente del nitrgeno en rumen con beneficio a la produccin animal. Este efecto tambin puede ser alcanzado con la combinacin de la Gliricidia sepium y la Leucaena leucocephala al considerar que la degradabilidad del nitrgeno de estas es de 82 y 54 % respectivamente. Por otra parte, los trabajos de digestin en ovinos realizados en Cuba con la Leucaena leucocephala con el uso de niveles de 20, 40, 60 % con relacin al pasto Estrella (Cynodon nlenfluencis) indicaron que esta leguminosa mejor el consumo voluntario, el comportamiento alimentario se beneficio, la digestibilidad de la fibra se increment en 12% (Delgado et al, 1996) y en correspondencia los microorganismos celulolticos se incrementaron (Galindo et al, 1997) La digestin ruminal de las fracciones nitrogenadas permiti una mejor relacin de NNP(N-NH3)/Nt lo que sugiere beneficios en la produccin de biomasa microbiana y los mejores resultados se obtuvieron con 20% Chongo, (1998). Estos resultados avalan las ventajas reportadas en la produccin de leche con el empleo de esta leguminosa que se resumen en la tabla . En los pases tropicales la suplementacin en la dieta de animales en pastoreo por lo general ha estado acompaada de una mejor respuesta que en los pases templados. La suplementacin energtica (a los sistemas con leguminosas) han indicado beneficios en los nutrientes disponibles a la microflora ruminal, as el suministro de nivel en dietas de forraje con Leucaena mejor la digestin de nutrientes en el rumen de toros e increment la biomasa en 47.4 % y entre ellos los microorganismos que degradan la celulosa se incrementaron. Este ltimo fue superior cuando se incluy urea en la miel ya que las bacterias y los hongos que degradan la celulosa se multiplicaron en 2.64 y 8.92 veces respectivamente con este suplemento (Galindo et al, 1997, 1999) Factores antinutricionales en follaje de arbreas (FANs) En el metabolismo de las plantas y en especial en las leguminosas en sus senderos metablicos se forman un grupo de compuestos primarios esenciales para el crecimiento y desarrollo de las plantas entre los que se encuentran los carbohidratos, las protenas, las vitaminas, los minerales entre otros y a otro grupo pertenecen los metabolitos secundarios que son compuestos de naturaleza qumica diversa y con funciones que se contraponen a las de los metabolitos primarios. Estos, estn presentes en el citoplasma de todas las clulas vegetales y solo se diferencian entre plantas en su concentracin. Sin embargo, por el papel que juegan como mecanismos de defensa de las plantas ante el ataque de plagas, condiciones de clima adverso etc, se les comienza a denominar compuestos con actividad ecolgica eficaz. Existen en las plantas una gran diversidad en su estructura de estos metabolitos, con papeles diferentes en el vegetal as podemos citar (taninos, alcaloides, glicsidos, saponinas, aminocidos libres, etc.

203

Ante las condiciones desfavorables existe una respuesta variable de la planta hacia la formacin de los compuestos secundarios en dependencia del vegetal en cuestin, la estrategia de defensa de la planta es la produccin de estos metabolitos en diferentes tejidos del vegetal. Lo que depender de su importancia en la especie de planta que se trate y de su distribucin con el estado fenolgico (Makkar et al 1991). Es conocido que las yemas en crecimiento, los rganos reproductores y de dispersin hojas jvenes y otras partes del crecimiento de la planta alcanzan mayor concentracin de dichos metabolitos, asimismo habr mayor reaccin de los tejidos ms viejos. En las tablas 7 y 8 se resumen algunas de las funciones de estos compuestos secundarios en semillas de leguminosas y leguminosas de ramoneo as como, los efectos fisiolgicos en los animales segn lo informado por Liener, (1989) respecto a los FANs en semillas de leguminosas y los reportes de D`Mello en forrajes y leguminosas de ramoneo,. En la actualidad, los compuestos secundarios reciben tambin el nombre de FANs desde el punto de vista de la nutricin animal, esto es debido a los efectos perjudiciales de estos compuestos en los procesos digestivos y metablicos de los animales que consumen plantas que los contienen, con consecuentes deterioro nutricional o de la salud de los animales. Estos compuestos han sido ms investigados en las regiones templadas que en las tropicales. Tabla 7. Factores antinutricionales en semillas de leguminosas. (Adaptado de Liener, 1989) FAN
Inhibidores de proteasas Lectinas Inhibidor de amilasa -N-oxalyl-- cido propinico -N-metilamina-L-alanina Glucsidos cianognicos Vicina / convicina Cycasina Oligosacridos Saponinas Fitatos miscelneos Taninos Alcaloides

Distribucin
Muchas leguminosas Muchas leguminosas Muchas leguminosas
Lathyrus sativus

Efecto fisiolgico
Disminucin del crecimiento Pancreatitis hipertrofia/hiperplasia Ndulos acinares Disminucin del crecimiento Muerte Interfiere en la digestin del almidn Latirismo Neurotoxicidad Dificultad respiratoria Anemia hemoltica Carcinogenia Flatulencia Ventosidad Afectan la permeabilidad intestinal Interfiere con minerales Interfiere con protenas Afecta digestibilidad Disminuye el crecimiento

Cycas circinalis Habas de Lima Vicia faba Cycas circinalis Muchas leguminosas Muchas leguminosas Muchas leguminosas Muchas leguminosas Lupino

Tabla 8. Factores Antinutricionales en leguminosas de forraje y ramoneo (Adaptado de D'Mello, 1995)

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FAN
Taninos Ciangenos Aminocidos no proteicos: Mimosa Indospicina Canavanina Phytohemaglutininas Alcaloides: N-metil- fenetilamina Sesbanina Oxalato

Especie
Acacia aneura, A. nilotica, A. pendulada, Albizia chinensis, Calliandra calothyrsus, Lespedeza cuneata, Leucaena leucocephala, Lotus corniculatus, Onobrynchis viciifolia, Prosopis cineraria, Robinia pseudoacacia. Acacia binervia, A. cunvinghamii, A. giraffae, A. leucophloea, A. sieberiana, A. sparsiflora, Albizia procera, Sesbania grandiflora, Stylosanthess viscosa. Leucaena leucocephala Indigofera spicata Canavalia ensiformis Robinia pseudoacacia Acacia berlandieri Sesbania vesicaria Acacia aneura, Bauhinia thoningii, Calopogonium mucunoides, Erythrina variegata.

De forma general los metabolitos secundarios en las plantas pueden ser clasificados en varios grupos, atendiendo a su estructura qumica, modo de accin etc. Varios autores los clasifican de acuerdo a su repercucin en el valor del alimento caso particular de las leguminosas (Rosales, 1996) y por la respuesta biolgica en los animales, as se consideran varios grupos descritos a continuacin: Reducen el consumo de alimentos los alcaloides, saponinas, taninos, aminas Aquellos que afectan la utilizacin de los nutrientes en particular los lpidos (polisacridos antinutricionales) Interfieren en la digestin de carbohidratos los taninos, saponinas, inhibidores de amilasa, polisacridos antinutricionales Actan con efecto especifico en la digestin de los Minerales compuestos hetersidos, cido ftico, cido Oxlico, gosipol Provocan efectos carcinognicos y teratognicos (agentes cancergenos, productores de radicales libres, nitrosaminas, alcaloides) Afectan el metabolismo hormonal y el de las vitaminas (Agentes con actividad hormonal y/o Antihormonal, tiaminasa avidina, etc)

Desde luego, estos efectos son ms severos en unas especies de animales que en otras y dependen tambin de la planta de que se trate entre otros factores. Es posible detectar la presencia de estos grupos de compuestos secundarios mediante pruebas cualitativas simples como el tamizaje fitoqumico. As, Chongo et al, (1999) inform la presencia de estos compuestos al evaluar un grupo de leguminosas tropicales. (Tabla 9)

Tabla 9 . Tamizaje fitoqumico de las plantas estudiadas

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Taninos Flavonoides Quinonas Saponinas Triterpenos y Antocianidina Reductores esteroides L. leucephala +++ + ++ ++ + ++ B. bahamensis ++ + + ++ + + A. pintoi + + ++ + + ++ C..ensiformis + ++ ++ ND G. sepium + + ++ + ND ++ E. ciclocarpum +++ + ++ + + +++ M. aterrimum +++ + + + + ++ ND: no determinados Metabolitos secundarios e impactos en la digestin ruminal y la fisiologa animal. Alcaloides Los alcaloides, son compuestos inodoros como las quinolizidinas (derivados del aminocido lisina) presentes en leguminosas se encuentran distribuidas en varias especies, se ha aislado en el gnero Lupinus, leguminosa templada. Se reporta que el consumo de altramuces con mayor o menor contenido de alcaloides se reduce en vacas, asimismo repercute en la produccin de leche Mukisirat et al,. (1995), tambin puede causar alteraciones respiratorias y hasta la muerte del animal. Sin embargo, los efectos de estos compuestos difieren segn su naturaleza qumica del alcaloide. Por lo general, a estos compuestos se les atribuye el sabor amargo, reconocido como un agente que hace que los animales rechacen determinadas plantas en sistemas de pastoreo. Otros son identificados por sus efectos txicos en los animales como es el caso de los de naturaleza indlica que provocan a los animales afectaciones pulmonares de carcter grave y la piperidina identificadas por sus efectos en el sistema nervioso central. El alcaloide quinolizidina es uno de los que se encuentra en algunas leguminosas, su presencia puede originar diferentes afectaciones al ganado que van desde reduccin en el consumo, en la ganancia de peso vivo de los animales hasta reduccin en la produccin de leche. Los trabajos desarrollados en el ICA han mostrado que en las condiciones de Cuba, animales habituados al consumo de las leguminosas que contienen este aminocido y se reportan bacterias con actividad mimosinasa por lo que los animales son capaces de resistir la presencia del metabolito txico ya que las bacterias del rumen lo degradan por lo que la alimentacin del ganado con Leucaena leucocephala no est limitada por este aminocido txico. La ingestin de este compuesto en nivel que sobrepasa el permisible causa prdida reversible del pelo de los animales al inhibir la conversin de metionina en cistena. Adems provoca excesiva salivacin, prdida de peso corporal y aumento en el tamao de la tiroides.

Plantas

Aminocidos txicos

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Los aminocidos txicos son parte de un conjunto de toxinas nitrogenadas su doble funcin en la planta es como mecanismo de defensa y para almacenar nitrgeno (Ramos et al, 1998). La accin de estos compuestos se produce por analoga en la estructura con aminocidos esenciales ya que interfieren en su metabolismo y se incorporan por errores metablicos en procesos enzimticos o neurotransmisores, con lo que afectan diferentes funciones en el organismo animal. La mimosina es un anlogo de los aminocidos aromticos, antagonista de la tirosina y de la fenilalanina, su degradacin en rumen por las bacterias ruminales lo convierte en el 3-hidroxi-4(1H) piridona (DPH) y 2-3-dihidroxipiridona un agente bocigeno. La accin de la mimosina per. se esta mas relacionada con la alopecia. Leguminosas tropicales como la Leucaena, la Canavalia y la Indigofera los contienen. Aunque, los estudios realizados en la dcada del 90 en Cuba por Galindo et al, permitieron aislar bacterias del rumen que degradan la mimosina y sus metabolitos txicos, caso particular de la Leucaena, lo que permiti el uso de esta leguminosa en el 100% del rea del pastizal en explotaciones ganaderas de bovinos en pastoreo, sin la aparicin de cuadros txicos.
Saponinas

Las saponinas, son compuestos de estructura compleja en la mayora de las plantas donde estn presentes. Forman parte de una mezcla de compuestos que solo se diferencian en la cadena glicidica, algo que influye en sus propiedades o tambin en la parte de la aglicona. Como caracterstica, reducen la tensin superficial del medio ruminal. Alteran la permeabilidad de la membrana celular e intestinal. Las investigaciones realizadas en los rumiantes acerca de los efectos de estos compuestos es a menudo contradictoria y se refieren a modificaciones en la fermentacin ruminal, digestibilidad, eficiencia de utilizacin del alimento, principalmente se atribuyen los efectos al tipo de leguminosa de que se trate, nivel y forma de empleo, aunque la mayor parte de estos resultados corresponden a clima templado. Uno de los efectos estudiados de forma indirecta en el rea tropical es su poder como agente defaunante (Daz et al, 1992) con el pericarpio de la semilla de Sapindus saponaria y por Galindo et al (1998) en estudios de fermentacin ruminal in vitro y con animales canulados.
Oxalatos y fitatos.

El cido oxlico es un compuesto orgnico de naturaleza simple que se encuentra formando sales en una gran cantidad de plantas consumidas por los rumiantes. Las sales que se forman son simples con el calcio, zinc, el hierro y otros elementos trazas o tambin forman complejos internos o quelatos de pobre solubilidad y muy lenta absorcin intestinal. Muchos pastos tropicales de generos como Pennisetum, Setaria y Chentrus acumulan altas concentraciones de oxalatos con potencialidades txicas poco estudiadas. Cuando el cido oxalico es consumido en cantidades suficientes por el ganado, puede precipitar y como consecuencias causar obstrucciones en los capilares, producir daos en particular en el rumen y en los tubulos renales. Tambin se plantea que puede producirse hipocalcemiaa corto plazo. No obstante esto depender de otros factores asociados al manejo del animal en los sistemas de pastoreo. Al respecto en pastos templados se ha informado que en el rumen de los animales con adaptacin al consumo de plantas con oxalato es factible lograr un buen desarrollo de la bacteria Oxalobacter formigenes que produce cido frmico y CO2 proceso que cambia con el nivel de exposicin del animal al cido oxalico y que es un proceso que puede ser modificado por otros factores.

207

Los trabajos desarrollados en Inglaterra indicaron con niveles crecientes de este compuesto, la adaptabilidad de la microflora del rumen de cabras y ovejas a la presencia de este metabolito. Asimismo describen una mejor adaptabilidad en el rumen de las primeras para degradar el cido oxlico. Los inhibidores de fitasa son compuestos que tambin interfieren en al metabolismo de los Minerales, asimilacin del fsforo y trastornos digestivos. Diaz, 2000, los determin en variedades de vgnas y seala su presencia en otras leguminosas de grano en el tropico. Por otra parte Pedraza en el 2000 al evaluar dos ecotipos de Gliricidia sepium procedentes de Cuba y Ghana indic niveles de cido Ftico y una elevada actividad hemaglutinante en el ecotipo de Cuba recolectado en una regin del occidente, lo que sugiere variaciones de hecho coincide con otros investigadores al resaltar la influencia del ecotipo en los FANs.
Taninos

Los taninos (polifenoles) constituyen un grupo importante dentro de los compuestos secundarios de las plantas. Algunos son fenoles solubles en agua, su peso molecular que vara desde 500 hasta 3000. Ellos se presentan de forma natural como polifenoles y tienen la capacidad de combinarse con protenas y otros polmeros tales como la celulosa, hemicelulosa, cidos nucleicos, esteroides, alcaloides y saponinas para formar complejos estables (Rosales,1996). Estos compuestos presentan un rango de tomos de carbono que puede variar va desde C6 fenoles simples y Benzoquinonas, C7-C8 tales como el cido glico, el cumarico , de C15 como es el caso particular de los flavonoides, aunque pueden tener hasta n tomos de carbono como es el caso de las ligninas entre otros.. Estos ltimos, constituidos por un ncleo compuesto de un carbohidrato con grupos hidroxilos esterificados con cido carboxlicos fenolicos, mientras que los taninos condensados (proantocianidinas) son polmeros no ramificados de compuesto hidroflavonas (Reed 1995). Los taninos son capaces de formar asociaciones con los carbohidratos, se adhieren a las paredes celulares, sin embargo de particular importancia es su asociacin con las protenas de las plantas. Esta asociacin est determinada por el peso molecular, grado de polimerizacin de los taninos as como por la relacin taninos protenas. Diversos estudios que relacionan la interaccin de los taninos y las protenas, han indicado tambin su enlace con los carbohidratos particularmente la celulosa, el almidn y las pectinas. Hoy se adopta el criterio de que los mecanismos de enlaces son por formacin puentes de hidrgeno, entre los grupos hidroxilos de los taninos del vegetal y las otras estructuras acomplejantes. Aun cuando estos compuestos forman parte de un grupo diverso son divididos en dos grandes grupos, los taninos condensados y los hidrolizables. Los estudios que describen los efectos de los taninos de las plantas abarcan una gran variedad de especies, sin embargo su cuantificacin y estudio qumico an no se corresponde en cuanta con los criterios nutricionales ya que en varios trabajos se atribuyen los resultados negativos a estos compuestos sin que se conozca con exactitud el tipo de tanino y nivel en la planta estudiada. (MuelleHarvey y Mc Allen, 1992).

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Los taninos se ligan a las protenas salivares y al epitelio de la cavidad bucal afectando la palatabilidad del alimento con subsiguiente reduccin del consumo, lo que depende del tipo de tanino presente en la planta, lo que tambin puede ocurrir es su hidrlisis a compuestos libres por accin de las hidrolasas de las plantas. Los efectos ms encontrados a su paso por el rumen se pueden resumir en los siguientes aspectos entre otros:

Cambios en el pH e inactivacin de enzimas del rumen Producir toxicidad a los microorganismos del rumen al parecer debido a ligamentos con la pared celular Posible degradacin ruminal segn el tipo de tanino con produccin de otros compuestos como los fenlicos empleados por una bacteria del rumen Eubacterium limosum Deprimir en algunos casos la produccin de AGV y la sntesis de protena ruminal. Deprimir la Digestibilidad de la materia seca. Proteger a la protena de la degradacin ruminal cuando estn condensados

Los efectos de los taninos en animales que consumen arbustos y rboles tropicales son diversos en dependencia de la especie de planta y de la animal, aunque ambos taninos tienen similar habilidad para formar enlaces con la protena no siempre actan de manera similar en el animal. Aunque los taninos estn presentes en casi todas las plantas son particularmente importantes en las dicotiledneas y de ellos en las leguminosas. Su distribucin en las plantas resulta compleja ya que no se comporta igual en todas las especies, aunque de manera general se concentran en los rganos reproductores y partes tiernas de la planta. Uno de los efectos mas sealados de estos compuestos es el asociado con bajos consumos voluntarios y la degradabilidad de la protena bruta. Al respecto La O, (2001) seala en Leucaena macrophila, baja aceptabilidad relativa y comprueba la relacin de este efecto con los niveles de taninos condensados en la planta y la degradabilidad de los nutrientes por mtodos in situ.
Terpenos

Los terpenos son compuestos secundarios de un rango amplio de especies de plantas, su presencia es notable en las plantas coniferas. Son compuestos de alto peso moleculartales como los sesqui y diterpenos como los presentes en la Picea sitchensis, en muchas plantas predominan los monoterpenos a los que se les atribuye poder como insecticida y ante los mamiferos hervboros. Poco claridad existe de los efectos de estos en los animales , los trabajos mas recientes aunque contradictorios le atribuyen efectos en la actividad microbiana ruminal y en la digestibilidad in vitro. A pesar de los aspectos relacionados con los metabolitos secundarios el uso de leguminosas muestra resultados positivos la tabla resume los resultados en degradabilidad con la E. Poeppegiana. Por otra parte estudios de produccin de gases con E. Misorensis indicaron resultados aceptables en la produccin de gas in vitro.
Vias para reducir los efectos de los FANs

Los efectos provocados por estos compuestos en los animales pueden ser atenuados sobretodo en los sistemas de alimentacin estabulados si se desea mejorar la utilizacin de los nutrientes por el animal y atenuar los efectos en el metabolismo. Es conocido que los FANs son clasificados segn su respuesta

209

al calor en termolbiles temperaturas elevadas.

o susceptibles de descomponerse y termoestables o resistentes a las

De ah la aplicacin de diferentes mtodos permitir reducir el contenido de estos compuestos con mejores resultados entre los mtodos que actualmente se emplean se citan: Tratamiento trmico ( energa solar, temperatura controlada) Extrusin ( En especial para granos de leguminosas) Procesos biotecnolgicos (Trangnesis, seleccin de especies, produccin de ensilajes etc) Uso de agentes acomplejantes de taninos caso del Polietilenglicol (PEG), Polivinilpirrolidina (PVP), aunque resulta costoso se indican buenos resultados. Desde luego que la aceptacin de uno u otro mtodo depender del sistema de explotacin que se realice, de la especie de planta y la animal. Estudios realizados por Sethi y Kulkam (1994) revelan en dos variedades de Leucaena leucocephala su potencialidad como fuente de protena y la presencia de inhibidores de tripsina, amilasa, glicsidos cianognicos y sugieren un tratamiento con calor para reducir los contenidos de mimosina DHP entre otros. As, Scull, Chongo y Geerken (1994), encontraron niveles inferiores mimosina en leucaena pre rociada y posterior secado al sol lo que pudiera ser una alternativa para la alimentacin en aquellas especies que lo requieran. En animales en pastoreo los principales criterios que se aconsejan para atenuar los efectos de estos factores estn relacionados con el uso de adecuadas prcticas de manejo, mezclas de leguminosas, lo que a su vez permite un mejor balance de nutrientes. Aunque no se descarta el empleo de algunos aditivos: PEG, PVP y sales minerales especficas capaces de acomplejarse con algunos FANs permitiendo su paso por el tracto gastrintestinal con eliminacin por las heces y sin afectaciones al animal. Esto contribuye a una mejor explotacin del uso de las leguminosas en sistemas diversificados y armonicos desde el punto d vista ecolgico.
Conclusiones

Los estudios relacionados con la composicin qumica y los FANs de las leguminosas tropicales resultan insuficientes. Aunque, se sabe que contiene una riqueza en nutrientes disponibles al animal superior a las gramneas tropicales. Sin embargo, su explotacin en los sistemas ganaderos del rea puede ser superior dada las potencialidades en nutrientes para mejorar los resultados productivos. No obstante, pocos trabajos han abordado en detalle los FANs en estas plantas en las condiciones del trpico y se extrapolan de forma erronea los resultados de clima templado. Hoy se conoce sobretodo para leguminosas de clima templado que el ambiente ruminal parece ser una cmara eficiente en la transformacin de compuestos secundarios de las plantas . De igual forma los efectos de los otros FANs no se comportan igual en todas las especies de rumiantes. Todo esto hace pensar en el reto de la ciencia y la tcnica para vencer estas incgnitas y explotar mas, nuestra riqueza nutritiva para mejorar el uso de las leguminosas en los sistemas diversificados y alcanzar mejores producciones en el trpico, con mayor armona en los ecosistemas.
Bibliografa a consultar.

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210

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211

Efecto de los Factores Antinutricionales en la fisiologa digestiva de especies monogstricas.

Dra. Mara Felicia Daz Snchez

Contenido
Introduccin. ........................................................................................................................................................................212 Factores antinutricionales en granos y forrajes de leguminosas. ....................................................................................212 Papel de los FANs en las plantas. .....................................................................................................................................212 Limitaciones del uso de las leguminosas en la alimentacin de monogstricos. ..............................................................213 Factores que influyen en la digestibilidad de la protena de semillas de leguminosas que pueden ser eliminados por el procesamiento. ...................................................................................................................................................................213 Efecto de los FANs en la fisiologa digestiva de especies monogstricas. ........................................................................215 Lectinas..............................................................................................................................................................................215 Inhibidores de Proteasas ...................................................................................................................................................217 Fitatos ................................................................................................................................................................................218 Taninos ..............................................................................................................................................................................219 Aminocidos no proteicos..................................................................................................................................................220

-Galactsidos ..................................................................................................................................................................222 Ciangenos ........................................................................................................................................................................223 Saponinas...........................................................................................................................................................................223 Alcaloides ..........................................................................................................................................................................223 Procesos tecnolgicos para incrementar el valor nutritivo de las leguminosas. .............................................................224 Aspectos para resolver y meditar ......................................................................................................................................226
En el tratamiento trmico:............................................................................................................. 226
Bibliografa a consultar. .....................................................................................................................................................226

Neurolatirgenos........................................................................................................................... 221 Anlogos de la arginina................................................................................................................. 221 Aromticos .................................................................................................................................... 222

Introduccin. El valor nutritivo de las leguminosas est limitado por la presencia de compuestos naturales capaces de producir efectos deletreos en el animal. Estas sustancias son, principalmente, productos del metabolismo secundario de las plantas y son comnmente referidas como factores antinutricionales (FANs), que reducen el consumo de alimento y la utilizacin de los nutrientes en el tracto gastrointestinal de los animales que la consumen. Manifestaciones de toxicidad pueden acompaar, adems, el resultado antinutricional de estos compuestos, con efecto hepatotxico, neurotxico, e inclusive letal (Liener 1988 y 1994). Esta conferencia tiene como objetivo dar a conocer los factores antinutricionales presentes en granos y forrajes de leguminosas tropicales y su efecto en la fisiologa digestiva de los animales, principalmente, en especies monogstricas. Factores antinutricionales en granos y forrajes de leguminosas.
Papel de los FANs en las plantas. .Mecanismo de defensa contra insectos y microorganismos patgenos. .Regulacin del catabolismo durante la germinacin o degradacin de las protenas de reservas, en la maduracin de las semillas.

212

 .Mediadores de la relacin simbitica rhizobium leguminosa. Limitaciones del uso de las leguminosas en la alimentacin de monogstricos. Considerable variabilidad en contenido de nutrientes de los cultivares de la misma especie de leguminosa. Los niveles de FANs en algunos cultivares es tan alto que puede reducir su valor nutritivo. La mayora de las leguminosas presentan varios FANs procedentes de grupos diferentes, lo que dificulta su destoxificacin y el establecimiento de un orden jerrquico de potencialidad en estas sustancias. Procesamiento eficaz para la eliminacin de los FANs. La reduccin en el nivel de un FAN especfico difiere entre varias especies de leguminosas. Factores que influyen en la digestibilidad de la protena de semillas de leguminosas que pueden ser eliminados por el procesamiento.

1. Factores antinutricionales proteicos: (inhibidores de tripsina y lectinas sensibles a la desnaturalizacin) 2. Protenas resistentes a la proteo lisis: protenas constitutivas (albmina, globulina). 3. Constituyentes de la pared celular y fibras (nutrientes de la cubierta y compuestos de unin o enlace). 4. Factores antinutricionales de naturaleza no proteica (compuestos fenlicos, fitatos).
Principales investigaciones realizadas en FANs.

Aislamiento, identificacin, caracterizacin y metodologa analtica de constituyentes txicos individuales. Localizacin en la semilla y distribucin despus de fraccionado. Tratamiento trmico de FAN de naturaleza proteica. En los granos de leguminosas se presentan como grupos mayoritario los FANs de naturaleza proteica, compuestos por las lectinas e inhibidores de protenas, aminocidos no proteicos (canavanina y neurolathirgenos), carbohidratos como los galactsidos, compuestos fenlicos (taninos), glicsidos (ciangenos y saponinas), alcaloides y agentes que se unen a metales como el cido ftico (Tabla 1). Mientras en el forraje se encuentran los taninos, ciangenos, saponinas, aminocidos no proteicos (mimosina, indospicina y canavanina), fitohemaglutinina, alcaloides y oxalatos (Tabla 2). La mayora de las leguminosas presentan varios FANs procedentes de grupos diferentes, lo que dificulta su destoxificacin y el establecimiento de un orden jerrquico de potencialidad de estas sustancias (D' Mello, 1995c).

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Tabla 1. Principales factores antinutricionales presentes en las semillas de las leguminosas tropicales (D' Mello, 1995). Grupos mayores Componente antinutricional
Lectinas

Especies de leguminosas
Psophocarpus tetragonolobus Phaseolus lunatus Canavalia ensiformis Vigna unguiculata Lablab purpureus Arachis hypogaea Cajanus cajan Vigna unguiculata Psophocarpus tetragonolobus Phaseolus lunatus Canavalia ensiformis Cicer arietimum Lablab purpureus Cyanopsis tetragonoloba Lathyrus sativus Vicia sativa Vicia sativa Lathyrus sativus Lathyrus cicera Canavalia ensiformis Gliricidia sepium Robinia pseudoacacia Indigofera spicata Sesbania sesban Vicia villosa Leucaena leucocephala Leucaena leucocephala Cyanopsis tetragonoloba Psophocarpus tetragonolobus Vigna unguiculata Leucaena leucocephala Phaseolus lunatus Vigna unguiculata Lablab purpureus Cajanus cajan Vicia sativa Arachis hypogaea Vigna radiata Cyanopsis tetragonoloba Eritrina sp. Psophocarpus tetragonolobus Vigna unguiculata Lablab purpureus

Protenas

Inhibidores de proteasas

Neurolatirgenos Canavanina Aminocidos no proteicos

Mimosina Carbohidratos Compuestos polifenlicos Glicsidos Galactomannam gums Taninos Ciangenos

Saponinas Alcaloides Agentes que se unen a metales Eritrina alcaloide cido ftico

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Tabla 2. Principales Factores Antinutricionales presentes en forrajes de leguminosas tropicales (Kumar y D' Mello 1995).

Factores Antinutricionales Taninos

Especies
Acacia aneura, A. nilotica, A. pendula, Albizia chinensis, Calliandra calopthyrsus, Lespedeza cuneata, Leucauena leucocephala, Lotus corniculatus, Onobrychis visifolia, Prosopis cineraria, Robinia pseudoacacia. Acacia binervia, A. cunninghamii, A. giraffae, A. leucophleoea, A. sieberiana, A. sparsiflora, Albizia procera, Sesbania grandiflora, Stylosanthes viscosa Albizia stipulata, Medicago sativa, Sesbania sesban Leucauena leucocephala Indigofera spicata Canavalia ensiformis Robinia pseudoacacia Acacia berlandieri, Sesbania vesicaria Acacia aneura, Bahuinia thoningii, Calopogonium mucunoides, Erythrina variegata

Ciangenos Saponinas Aminocidos no proteicos Mimosina Indospicina Canavanina Phitohemoaglutininas Alcaloides Oxalatos

Efecto de los FANs en la fisiologa digestiva de especies monogstricas.

Lectinas

Protenas que se caracterizan por su capacidad de unin con azcares especficos o glicoprotenas, que forman parte de las membranas celulares de muchos animales, incluyendo aquellas que conforman la mucosa intestinal. Esta reaccin se manifiesta in vitro por la aglutinacin de los glbulos rojos de la sangre de diferentes especies animales (Jaffe 1980 y Grant 1991). Armour et al. (1998) informaron para la soya contenidos de lectina entre 2.4 y 9.6 g /kg de semilla desgrasada. Ologhobo y Fetuga (1984) encontraron para granos crudos de vignas actividad hemoaglutinante en un rango de 36 a 98 unidades /mg de protenas. Para la canavalia (Ologhobo et al.1993) informaron valores de 248 unidades de lectinas /mg de protenas, comparables con frjol alado (200-320 unidades de lectinas /mg de protenas) y frjol comn (218 unidades de lectinas/mg de protenas). Estudios realizados han manifestado que las lectinas desempean su papel en los mecanismos de defensa de las leguminosas, con potentes propiedades anti - insectos (Jansen et al,1978 y Gatehouse y Gatehouse 1996) y en la relacin simbitica entre las leguminosa y las bacterias fijadoras de nitrgeno. Se han informado cultivares de leguminosas con niveles no detectables de lectinas, lo que se ha aceptado con reservas, ya que puede ser debido a la ausencia de deteccin de su actividad, por utilizacin de sistemas de ensayo en los que no se emplean los receptores especficos, para la expresin de su actividad (Liener 1988 y Van Damme y Peumans 1996). Muchas lectinas, si no todas, son resistentes a la degradacin proteoltica y el grado de resistencia vara de una lectina a otra (Pusztai 1988). Hasta el 90% de la PHA (lectina del Phaseolus vulgaris)

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consumida por ratas puede ser recuperada por las heces, con su actividad esencialmente intacta (Pusztai et al.1996). Similares hallazgos fueron hechos por Nakata y Kimura (1985) con la Con A (concanavalina A) presente en Canavalia ensiformis. Uno de los principales componentes de las clulas epiteliales son los carbohidratos. Sin embargo, las membranas de diferentes compartimentos funcionales y estructurales del intestino delgado expresan diferentes tipos de carbohidratos estructurales (Liener 1994). Dependiendo de la especificidad de las lectinas sobre los azcares, las mismas reaccionan en diferentes compartimentaciones funcionales del tracto (Etzler y Branstratar, 1974). Lectinas como la Con A, lectinas del chicharo y de la lenteja con especificidad por D manosa o D glucosa, se unen preferentemente a la mitad inferior de las vellosidades absortivas, reduciendo el rea de absorcin intestinal por desgarre de las membranas del borde de brocha, prdidas celulares y acortamiento de la longitud de las vellosidades (Lorenzsonn y Olsen 1982 y Peumans y Van Damme 1996). Mientras que las lectinas del frjol, de la soya y del frjol alado se unen a oligosacridos de cadenas complejas, que se encuentran preferentemente en la porcin superior de las vellosidades absortivas, donde causan interferencia en la absorcin de nutrientes y extensos daos en el borde de brocha de la regin proximal, en ratas y cerdos (Liener 1986). Adems actan como factores de crecimiento, induciendo un desarrollo hiperplsico del intestino delgado (Bardocz et al. 1988 y Pusztai et al. 1996). Posterior a la unin de las lectinas con receptores especficos de las clulas epiteliales se produce su entrada por endocitosis al interior celular (Pusztai 1996). Se ha comprobado que su entrada al interior celular incrementa la velocidad de sntesis de protena (Palmer et al. 1987). En el caso de la Con A se ha encontrado hipersecrecin de mucus durante su pasaje por el intestino (Len et al 1989), mientras que las lectinas de la soya provocan un aumento de tamao del intestino delgado, independientemente de la va y dosis de administracin, lo que induce hiperplasia celular (Bardocz et al.1988 y 1996). Tcnicas de inmunofluorescencia han demostrado la presencia de lectinas de frjol en el contenido celular de clulas endocrinas (Bardocz et al. 1996). Aunque no existen experimentos que demuestren la extensin del efecto txico en las clulas endocrinas, el significativo incremento del pncreas en ratas que consumen lectinas puras de soya o frjol, puede considerarse un efecto indirecto mediado por hormonas intestinales (Pusztai et al. 1996). La alta cantidad de material acumulado en el intestino delgado, a causa de la interferencia en la digestin y absorcin de nutrientes, y el incremento de mucinas secretadas, en ratas consumidoras de dietas que contienen lectinas de soya o frjol, facilitan el sobrecrecimiento bacteriano (Pusztai 1988, Grant 1996 y Pusztai 1996). En conclusin, el efecto en las estructuras bioqumicas y lesiones inmunolgicas unido a la induccin y proliferacin bacteriana, producida por las lectinas dietarias, interfieren directamente en la digestin y absorcin de alimentos, o indirectamente al utilizar mayor proporcin de energa y protena dietaria, incrementando el recambio y proliferacin de clulas. La menor eficiencia en utilizacin de la dieta, provoca retardo en el crecimiento y efecto deletreo en la salud. Sin embargo, estudios recientes muestran que las lectinas pueden tener afecto beneficioso, con amplio rango de aplicacin en animales y humanos (Pusztai 1991, Pryme et al. 1996 y Glfi et al. 1996).

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Inhibidores de Proteasas

Los inhibidores de proteasas (tripsina, quimotripsina y amilasa) son protenas ampliamente distribuidas en semillas de leguminosas, las cuales difieren en especificidad y capacidad de inhibicin a 1 2 enzimas digestivas al mismo tiempo, y afectan las funciones metablicas de animales y humanos (Birk 1989 y Gelencsr et al. 1996). En ratas jvenes, ratones y hmster han causado alteraciones en el metabolismo del pncreas, al provocar hipersecreciones de sus enzimas y un rpido crecimiento pancretico (Liener 1989). Estos cambios estn en dependencia de la edad de los animales que consumen granos crudos de leguminosas y del tiempo de exposicin a la dieta. Generalmente, largos tiempos de consumo incrementan la susceptibilidad de presentar carcinomas y neoplasia en el pncreas. Al igual que las lectinas los inhibidores de enzimas pueden ejercer un efecto beneficioso al utilizarse como agentes teraputicos (Birk 1989) o insecticidas proteicos naturales en cultivo de plantas transgnicas (Piergiovanni et al. 1990 y Liener 1994). Estudios de Sastry y Murrayen (1987) destacaron la importante contribucin en contenido de aminocidos esenciales que realizan los inhibidores de tripsina en algunas leguminosas como Cicer arietimum L. Adems, Birk (1968) plante que el papel fisiolgico de estos compuestos estaba relacionado con la regulacin del catabolismo de las protenas durante la germinacin o la degradacin de las protenas de reserva durante el proceso de maduracin de las semillas. El grano de soya presenta 2 tipos de inhibidores de proteasas. El inhibidor Kunitz de la soya que tiene un peso molecular de aproximadamente 20 kd y es relativamente termolbil. Sin embargo, el inhibidor Bowman-Birk de la soya presenta menor peso molecular (8kd), pero tiene doble sitio de inhibicin uno para la tripsina y otro para la quimotripsina, los cuales pueden inactivarse simultneamente. El inhibidor Bowman-Birk presenta mayor estabilidad estructural debido al alto nmero de puentes disulfuros, estos para inactivarse in vitro necesitan tratamientos drsticos con calor, lcalis o enzimticos (Liener y Kakade 1980, y Arentoft et al. 1991). Estos inhibidores, fundamentalmente el Kunits, se encuentra ampliamente distribuido en todas las leguminosas Ferrasson et al.1997). Armour et al (1998) al estudiar el contenido de inhibidores de proteasas de 24 variedades de soya desgrasada encontraron que el contenido de inhibidores de tripsina oscilaba de 18 a 50 g/kg de grano desgrasado y de quimotripsina entre 12.8 y 26.6 g/kg de grano desgrasado. Ologhobo y Fetuga (1984) informaron para la vigna actividad inhibitoria de 19.6-28.2 unidades/mg de protenas y de 4.6-13.9 mg /g semillas. Ologhobo et al. (1993) encontraron en canavalia 42 unidades/mg de protena, mientras que para el dlico Deka y Sarkar (1990) informaron 2.4-3.2 unidades/mg de semillas. Muchos autores (Grant et al. 1995 y Armour et al.1998) han demostrado que ambos inhibidores incrementan las secreciones de tripsina, quimotripsina y amilasa en el pncreas de ratas, ratones y pollos y este efecto inductivo perdura durante un tiempo despus de retirado l estmulo de la dieta. Adems, producen un incremento de tamao del pncreas como consecuencia de la hiperplasia e hipertrofia de las clulas acinares, respuesta que cambia con la edad y especie animal. En aquellas especies como el puerco de guinea, puercos, terneros y primates no se produce un incremento del tamao del pncreas ante el consumo de harina de soya cruda, si embargo el retardo en el crecimiento se hace ms pronunciado (Hasdai et al. 1988) ver tablas 3 y 4.

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La depresin en el crecimiento esta dado por un efecto sumarizado de varios factores estructurales, o por las estructuras conformacionales que presentan las protenas de semillas de leguminosas crudas (forma natural) que impiden o dificultan su degradacin en el tracto gastrointestinal (Sesson et al, 1988). La respuesta inmunitaria de las especies ante la presencia de los factores antinutriconales es variable. En la tabla 5 se muestra como en las cerdas se produce un efecto, ms marcado, sobre el peso del baso que en ratas y pollos.
Tabla 3. Ganancia de peso medida durante 14 das en cerdas y 21 das en ratas y pollos (Huisman y Van der Poel, 1988).

Tratamientos
Dieta control Frjol crudo (20%) Frjol tostado(20%)

151.6a 32.9 26.3 -3.5b 145.8a 37.0

Cerdas g /da DS

Ratas g /da DS
3.0a 2.9a 3.1a 0.6 0.4 0.4

Pollos g /da DS
11.7a 10.6b 11.9a 0.7 0.4 0.5

Tabla 4. Peso del pncreas (% peso seco) (Huisman y Van der Poel, 1988) Tratamientos
Dieta control Frjol crudo (20%) Frjol tostado(20%)

Cerdas g /da DS

0.18a 0.03 0.16a 0.04 0.16a 0.02

Ratas g /da DS
0.51a 0.69b 0.65b 0.15 0.23 0.22

0.29a 0.39b 0.30a

Pollos g /da DS
0.04 0.05 0.03

Tabla 5. Peso del baso (% peso seco) (Huisman y Van der Poel, 1988). Tratamientos
Dieta control Frjol crudo (20%) Frjol tostado (20%)

Cerdas g /da DS
0.27a 0.15b 0.21c 0.09 0.04 0.04

Ratas g /da DS
0.24a 0.23a 0.25a 0.03 0.03 0.03

Pollos g /da DS
0.10a 0.10a 0.11a 0.02 0.03 0.03

Recientemente, se han comenzado a estudiar las propiedades fsico - qumica, significado nutricional y papel fisiolgico de los inhibidores de amilasa en leguminosas, especialmente en frjol. Los inhibidores de amilasa del frjol inhiben tanto la amilasa pancretica como la salivar. Su peso molecular (60 kd) supera al resto de los inhibidores de proteasas y es relativamente resistente al calor. Estos inhibidores estn presentes a altos niveles en los frijoles, sin embargo no aparecen en cantidades significativas en el resto de las leguminosas comestibles. Estos inhibidores causan una considerable reduccin de lpidos y glucgeno en el hgado, as como disminucin del tejido adiposo en ratas (Rousseau et al. 1996).
Fitatos

El cido ftico, mio-inositol hexaquisfosfato (IP6) y sus sales derivadas constituyen la mayor reserva de fsforo y mio-inositol de las semillas (1 a 5 % del peso seco de la semilla de leguminosas). El contenido de cido ftico vara con el genotipo y las condiciones ambientales del cultivo y oscila 0.51.89 % en cereales y 0.4-2.06 % en leguminosas (Reddy et al.1982). D' Mello (1995c) informa para la

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vigna contenidos de fitatos de 2.8 -3.3 g/kg de semillas, inferiores al dlico 10.0-13.5 g/kg y al frjol alado 6.2 g/kg. Desde el punto de vista nutricional, el inters del cido ftico se debe principalmente a su capacidad de formar complejos con minerales esenciales (Cu2+, Zn2+, Fe3+ y Ca2+), lo que disminuye la absorcin intestinal y biodisponibilidad de estos minerales (Forbes et al.1984). Adems, los fitatos interactan con los residuos bsicos de las protenas, formando complejos, por lo que muchas reacciones enzimticas a nivel digestivo se paralizan por la neutralizacin de lipasas, proteasas y amilasa. (Reddy et al. 1982 y 1985). El contenido de fitatos de las leguminosas es ligeramente afectado por el tratamiento trmico, pero tiene la ventaja de que durante el almacenamiento, germinacin, fermentacin u otros procesos, as como durante su paso por el tracto gastrointestinal, el cido ftico contenido en los alimentos va siendo desfosforilado enzimticamente mediante la accin de fitasas endgenas o exgenas de origen microbiano, resultando inositoles penta, tetra, tri, di y monofosfatos (IP5, IP4, IP3, IP2, IP1) y fosfato inorgnico (Liener 1989, Cuadrado et al. 1995 y Greiner et al. 1996). Slo IP6 e IP5 tienen un efecto negativo en la disponibilidad mineral, ya que el resto de los inositoles fosfatos menos fosforilados tienen baja capacidad para unir cationes inorgnicos o los complejos que se forman son ms solubles (Sandberg et al. 1989). Los fitatos tambin ejercen efectos positivos. En los ltimos 10 aos ha sido observado el efecto beneficioso de los fitatos en la prevencin de algunas enfermedades como cncer de colon y en el manejo de otras como la diabetes. Dependiendo de la composicin total de la dieta los fitatos pueden reducir la disponibilidad de minerales y elementos tazas en mayor o menor magnitud, ya que la formacin de los complejos insolubles fitatos-minerales depende de la concentracin de fitatos, minerales y elementos trazas de la dieta. Sin embargo, algunos componentes de los alimentos como oxalatos, citratos y algunos compuestos fenlicos aminocidos, protenas o cido ascrbico pueden reducir o eliminar el efecto negativo de los fitatos en los minerales, dada la facilidad que presentan de formar complejos solubles con los minerales y elementos trazas. Otros componentes alimenticios como fibra diettica y polifenoles pueden intensificar el efecto negativo de los fitatos sobre los minerales (Martn Cabrejas 1998a). Taninos Los taninos de acuerdo con su estructura y reactividad frente a agentes hidrolticos han sido agrupados en dos clases, hidrolizables y no hidrolizables o condensados. Los taninos hidrolizables con tratamiento con lcalis, cidos y enzimas hidroltica (tanasas) rinden dos unidades, una de azcar y la otra de cidos carboxi-fenlicos (cido glico y cido elgico, entre otros). Los taninos condensados son polmeros flavonoides complejos que presentan de 5 a 7 unidades de 3 flavonas cuyas unidades se despolarizan en un medio fuertemente cido para rendir pigmentos monomricos de cianidinas o proantocianidinas (Marquardt 1988). Estos compuestos se localizan principalmente en las cubiertas de las semillas de las leguminosas, y su concentracin es correlacionada positivamente con el color de la cubierta de la semilla (Liener 1989 y Yoshida et al. 1996). Ologhobo y Fetuga (1984) informaron contenidos medios de cido tnico para las vignas de 5.6 g / kg MS, inferiores a los encontrados por Ologhobo et al. (1993) para granos de lima (8.5 g/kg MS) y por Deka y Sarkar (1990) para el dlico (20-22 g/kg MS).

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El efecto antinutricional de los taninos se atribuye a un decrecimiento en la digestibilidad de las protenas y de los carbohidratos, como resultado de su unin a los taninos formando complejos insolubles y resistente a la digestin enzimtica o por la interaccin de los taninos con las enzimas digestivas, lo que interfiere en la digestibilidad de los sustratos presentes en la dieta. Otros efectos antinutricionales de los taninos han sido asociados a daos en la mucosa intestinal, toxicidad inherente a taninos absorbidos por la pared intestinal, interferencia con la absorcin del hierro y efecto carcinognico (Kumar y D' Mello 1995c). La literatura plantea variacin del efecto antinutricional de los taninos con la especie animal debido a su habilidad de secretar una protena rica en prolina (PRP), que presenta afinidad por los taninos formando un complejo tanino-PRP resistente al ataque de enzimas endgenas o microbianas presentes en el tracto gastrointestinal, lo que puede servir como un mecanismo de defensa contra el efecto antinutricional de los taninos (Mehansho et al. 1987). D' Mello (1992) informa la presencia de esta protena en venados, roedores, conejos, monos y humanos, mientras est ausente en vacas, ovejos, hansters y pollos. Para animales que consumen forrajes de rboles o arbusto de leguminosas el principal efecto antinutricional de los taninos se corresponde con una reduccin del consumo voluntario, disminucin de la digestibilidad de los nutrientes, efectos adversos durante el metabolismo ruminal y toxicidad (D' Mello y Acamovic 1989, Reed et al. 1990 y Kumar 1992). La unin de los taninos a la protena dietaria tiene efectos beneficiosos en la funcin ruminal como es la proteccin de la protena dietaria en el rumen (Mangan 1988 y D' Mello 1992) y la prevencin del timpanismo (Lees 1992), y deletreos como la inhibicin de la fermentacin ruminal (Nsahlai et al. 1984).
Aminocidos no proteicos

La presencia de diversos rangos de aminocidos no proteicos txicos, es caracterstico en semillas de leguminosas tropicales. Estos aminocidos por su estructura anloga a aminocidos indispensables o a su neurotransmisores derivados que se encuentran en el sistema nervioso central de estos animales, producen efectos adversos en la utilizacin de los nutrientes y desordenes neurolgico, incluyendo hasta la muerte. En la tabla 6 se presenta la distribucin de estos compuestos en semillas de leguminosas.

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Tabla 6. Distribucin de aminocidos no proteicos en semillas de leguminosas. (D' Mello, 1995). Aminocidos
Neurolatirgenos -cianoalanina -(N-oxalylamino)alanina cido, -diamino butrico Anlogos de la arginina Canavanina

Especies de leguminosas
Vicia sativa Lathyrus sativus Lathyrus latifolius

Concentracin (g/kg MS)

1.5 25 16 51 40 98 9 29 20 12 145

Canavalia ensiformis Gliricidia sepium Robinia pseudoacacia Indigofera spicata Vicia villosa Indigofera spicata Lathyrus cicera Leucaena leucocephala

Indospicina Homoarginina Aromticos Mimosina

Neurolatirgenos

Los estudios realizados por D' Mello (1991) demostraron que su toxicidad est en funcin de la especie, edad del animal y modo de administracin. Hay conocimiento que tanto la -cianoalanina como -(N-oxalylaminoalanina son neurotxicos en mamferos y aves, siendo ests ltimas ms susceptibles (Tabla 7). Latirgenos
-cianoalanina -(N-oxalylamino)alanina

Categora aviar
Pollo Pollo

Modo de administracin y dosis

Manifestaciones de toxicidad.

Alimento (0.75 g/kg. dieta) o Convulsiones, espasmo tetnico de inyeccin subcutnea msculos de la espalda. LD 50 70 mg/Kg. Peso Corporal Torcedura de pescuezo retraccin Inyeccin intraperitoneal de la cabeza y convulsiones 20 mg/pollo Muerte 30 mg/pollo Inyeccin intraperitoneal 100 mg/ave 100 mg/ave (2 da dosis) Inyeccin intraperitoneal 3.2 a 6.5 m mol/kg PC 12.9 m mol/kg PC Ausencia de enfermedad Manifestaciones de txicas Sntomas txicos Incremento de concentraciones de glutamina en el cerebro.

Pollo adulto cido, -diamino butrico Pollo

Anlogos de la arginina

La canavanina, indospicina y homoarginina son los anlogos estructurales de la arginina. La canavanina es el de mayor distribucin y concentracin en leguminosas. Len et al. (1990) plante que la canavanina presente en semillas de canavalia tratadas con calor es absorbida por el tracto digestivo de los pollos hasta aparecer en la circulacin sistmica. Pollos que consumen dietas con 3.7 g de

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canavanina presentan severa reduccin del crecimiento y en la eficiencia de utilizacin del nitrgeno (D' Mello et al.1989), posteriormente Enneking et al. (1993) encontraron este mismo efecto en puercos. D' Mello (1995c) resume los diferentes mecanismo de toxicidad que desarrolla la canavanina para provocar reduccin del crecimiento animal: aumento de la actividad de la arginasa con incremento de la degradacin de la arginina; sntesis de canalina, inhibicin de la ornitina descarboxilasa y reduccin de la sntesis de poliaminas; reduce el transporte celular de arginina y lisina; inhibicin de actividad transaminasa y disminucin de la sntesis de creatina; sntesis de protenas aberrantes de actividad reducida con aumento en el recambio de protena e inhibicin de la sntesis de oxido ntrico y reduccin del consumo de alimento. En el caso de la indospicina se ha demostrado efectos teratognicos, daos en el hgado, inhibicin de la excrecin de nitrgeno y de la incorporacin de arginina a la sntesis de protena. En homoarginina se plantea reduccin del crecimiento y del consumo de alimento (D' Mello, 1991).
Aromticos

La mimosina es la representacin ms importante de los aminocidos aromticos con propiedades deletreas y puede considerarse un anlogo estructural de la tirosina y de sus productos neurotransmisores dopamina y noradrenalina que se encuentran en el cerebro. En monogstricos la mimosina causa desordenes reproductivos, efecto teratognico y daos en rganos (D' Mello 1995c). Las semillas de leucaena son altamente concentradas en mimosina, la cual puede ser absorbida y depositada en los rganos y tejido de las aves.
En rumiantes no adaptados al consumo de Leucauena leucocephala la mimosina ha causado efectos adversos como: prdida de pelo, lana, dao de rganos e incluso la muerte. La prevencin de tales efectos se ha logrado mediante el control del consumo o pastoreo de dicha planta (Kumar y D Mello 1995). Sin embargo, el mtodo ms avanzado de destoxificacin es la manipulacin de las funciones del rumen a travs de la introduccin de bacterias capaces de degradar la mimosina a compuestos inocuos. Para Cuba esto no constituye una problemtica ya que trabajos de Galindo et al. (1995) demostraron la presencia de bacterias capaces de degradar la mimosina y sus metabolitos txicos a compuestos inocuos, en el rumen del ganado vacuno. Estos resultados coinciden con los encontrados por Jones et al. (1981) y Domnguez-Bello y Stewart (1990) en Hawai y Venezuela, respectivamente. La manipulacin ruminal puede constituir una estrategia a seguir para la destoxificacin de otros aminocidos proteicos (indospicina) y factores antinutricionales, que permita potenciar el uso de las leguminosas tropicales para la alimentacin animal.

-Galactsidos
Oligosacridos de la familia de la rafinosa formados por bandas de -galactosa unidas por enlaces (1,4) a molculas de sacarosa y glucosa. Sucesiva adicin de galactosil en presencia de humedad se produce rafinosa, estaquinosa, vervascosa y ajugosa (Gooneratne et al.1994). Los animales monogstricos y los humanos no son capaces de digerir tales oligosacridos por la falta de -1,6 galactosidasa y -D-fructosidasa en su mucosa intestinal. Estos compuestos son fermentados por bacterias intestinales con produccin de dixido de carbono, hidrgeno, metano y cidos grasos de cadena corta, lo que trae como resultado flatulencia, diarreas y nauseas (Martn - Cabreja 1998a).

222

El consumo en dietas de pollos de hasta 20 g/kg de este polisacrido produce depresin en el crecimiento y reduce la eficiencia de utilizacin de los alimentos (Ray et al.1982). El mecanismo mediante el cual se ejerce el efecto antinutricional incluye, reduccin de la digestin y absorcin de nutrientes. Estudios de Brennan et al. (1993) en puercos sugirieron que en primera instancia la interaccin enzima-sustrato puede ser inhibida mediante una capa gomosa que envuelve los grnulos de almidn. Una vez que comienza la digestin se incrementa la viscosidad de la digesta, causado por la solubilizacin de estos polisacridos, lo que impide la absorcin y digestin del producto final. Efectos inmunolgicos pueden aparecer si se tienen en cuenta los hallazgos de Roberts et al. (1993) acerca de la posibilidad de absorcin de sustancias gomosa de bajo y mediano peso molecular.
Ciangenos

Los glucsidos cianognicos estn ampliamente distribuidos en el mundo vegetal. Una hidrlisis de ciangenos rinde cianuro de hidrgeno, un potente veneno, glucosa y otros productos dependiendo del tipo de ciangeno. El cianuro exhibe una marcada afinidad por enzimas crticas como citocromo oxidasa, lo que resulta en convulsiones y muerte debido a la inhibicin de la respiracin celular (Montgomery 1980). La destoxificacin requiere de metionina como donador de grupos sulfuro, como consecuencia su mayor papel antinutricional est mediado por un incremento en el requerimiento de aminocidos azufrados en la dieta. Leguminosas como las vignas, dlico, gandul y chcharo contienen niveles no considerables de este metabolito (D' Mello 1995c).

Glicsido cianognico Aglicona

Saponinas

glicosidasa

azcar + aglicona HCN + aldehdo o acetona

hidroxinitrilo liasa

Glicsidos que contiene una aglicona policclica (esteroide o triterpenoide) llamada sapogenina unida a un carbohidrato. Estn ampliamente distribuidas en el mundo vegetal y tiene como caracterstica su sabor amargo, capacidad para formar espuman y efecto hemoltico en los glbulos rojos de la sangre (Agarwal y Rastogi 1974). Fenwick et al. (1991) informaron valores de 0.5 y 2.3 g/kg para frjol mungo y chicharo respectivamente, as como un rango de valores entre 2.2 hasta 4.7 g/kg para el grano entero de soya. En monogstricos el efecto antinutricional ha sido principalmente estudiado al utilizar saponina de alfalfa, donde el retardo del crecimiento y disminucin del consumo de alimento es provocado por la baja palatabilidad del alimento rico en saponina (Cheeke et al.1978). En rumiantes la saponina fue implicada como causante del timpanismo, sin embargo estudios posteriores demostraron que la saponina no influye de forma significativa en el sndrome del timpanismo (Majak et al. 1980). Lee (1992) plante que la saponina inhibe la fermentacin ruminal microbiana En algunas saponinas, presentes en plantas no comestibles, se ha probado su efecto hipocolesterolmico para animales y humanos (Martn - Cabrejas, 1998a).
Alcaloides

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Petterson et al. (1991) define como alcaloides bases nitrogenadas compuestas las cuales pueden formar sales con los cidos. Los alcaloides ms conocidos son los de la papa y los del lupino. Ms de 60 alcaloides han sido identificados en especies de Eritrina, un gnero de amplia distribucin en el trpico. Los principales efectos metablicos estn relacionados con disminucin del consumo de alimento, efectos neurolgicos y teratognico. El efecto metablico de los alcaloides y sus metabolitos son mediados, principalmente, por inhibicin neural, produccin de signos de toxicidad aguda y convulsiones, seguida por parlisis respiratoria. El efecto de no palatabilidad pude ser mediado va neurolgica.

Procesos tecnolgicos para incrementar el valor nutritivo de las leguminosas.

Un gran nmero de mtodos estn disponibles para la inactivacin o remocin de factores antinutricionales en las semillas de leguminosas. Vander Poel (1988) plante las variantes aplicadas: cruzamiento y manipulacin gentica; formulacin de alimentos (seleccin de ingredientes y suplementacin con aminocidos) y procesamientos como: tratamiento qumico (lcalis, cidos y solventes); tratamiento enzimtico y tratamiento fsico como ruptura mecnica (molinaje, pulverizacin, peletizado y picado o troceado), calor (hmedo o seco), presin y radiaciones. Su aplicacin est en funcin de las caractersticas fsico-qumicas del FAN, localizacin en la semilla y sensibilidad a factores fsicos, qumicos, as como a procesos tecnolgicos (Van der Poel y Melcin 1995).

El cruzamiento y la manipulacin gentica constituyen mtodos cuyos resultados se alcanzan a largo plazo y se debe trabajar con cautela por el papel que desempean los FANs como barrera de defensa ante el ataque de plagas y enfermedades. Adems, en muchas leguminosas el inhibidor Bowman-Birk con su alto contenido de cistena provee el 40 % de la cantidad total de aminocidos azufrados presentes en la protena total del grano, por tanto esta eliminacin gentica podra exacerbar las deficiencias de aminocidos azufrados que presentan las protenas de las leguminosas. Los principales esfuerzos se han realizado en la obtencin de variedades de bajo contenido de inhibidores de tripsina, taninos, lectinas y ms recientemente de -galactsidos (Liener 1988, Fras 1992 y Oluwatosin 1999). El tratamiento fsico basado en la separacin de fracciones de la semilla es una posibilidad para reducir al menos una parte de los FANs. Estos procesos son solamente eficaces en el caso de producir un mayor valor nutricional de la protena y la energa, con relacin a los niveles de FAN en el material procesado (Van der Poel 1988). El ms ampliamente usado es el tratamiento por calor, mientras que en el procesamiento comercial de la soya el tostado, micronizacin y extrusin son las variantes ms utilizadas y en situaciones experimentales predomina el autoclaveado y la hervidura (Vidal-Valverde et al. 1994 y D'Mello 1995c). El valor nutritivo de la protena vegetal es mejorado por el tratamiento trmico. Se plantea que el mecanismo a travs del cual esto ocurre es el resultado de un incremento de la accesibilidad de la protena para el ataque enzimtico y por inactivacin de FANs proteicos (Vidal-Valverde et al. 1993). El sobre calentamiento causado por las altas temperaturas o por el perodo de tiempo que se expone a ellas puede traer efectos nefastos tales como prdida de nutrientes (lisina, metionina y cistena). El efecto del tratamiento trmico en el valor nutritivo de la semilla depende de la combinacin de la temperatura del proceso, tiempo de calentamiento, tamao de partcula, contenido de humedad inicial y cantidad de agua adicionada durante el procesamiento (Van der Poel y Melcin 1995). El tratamiento trmico ha sido efectivo para inhibidores de proteasas y lectinas y cuestionable para taninos y fitatos (Liener 1989). Adems, la inactivacin del FAN vara con el tipo de tratamiento

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trmico. D' Mello (1992) encontr que para el frjol alado la micronizacin infrarroja era mucho ms efectiva que la microonda, tanto en la reduccin de los niveles de FANs como en el aumento del valor dietario de este grano en ratas. Para la vigna Ologhobo y Fetuga (1984) encontraron el autoclaveado como un tratamiento efectivo para eliminar lectinas, inhibidores de proteasas y mejorar la energa metabolizable aparente, mientras que el remojo y el germinado resultaron ms adecuados para taninos y fitatos. Estos mismos autores informaron que el remojo y la hervidura en granos de lima y canavalia y el autoclaveado en gandul resultaron los mtodos ms eficaces para eliminar FANs de naturaleza proteica. Armour et al. (1998) encontraron que el tratamiento trmico de las semillas embebidas en agua a100 C por 10 min era capaz de abolir la actividad de los inhibidores de proteasas y lectinas presentes en los granos de soya desgrasados. El efecto negativo de la dieta de soya en el peso del pncreas y del intestino delgado de las ratas tambin fue eliminado, el consumo del alimento y la utilizacin de los nutrientes tambin mejor notablemente. D' Mello y Walker (1991) plantearon que la extraccin con una solucin acuosa de KHCO3 (10 g/L) a 80 C por 48 h seguida por autoclaveado a 121 C reduce considerablemente la cantidad de canavanina en la semilla de canavalia. La arginina como antdoto de la canavanina ha sido utilizada con resultados parcialmente efectivos (D' Mello et al. 1989) El uso de enzimas representa una tcnica especializada que est comenzando a tener una notable relevancia en la nutricin animal (van Hartingsveldt et al. 1996). El xito de la accin enzimtica depender de las reacciones bioqumicas que se desencadenen durante su actuacin. De ah que el sustrato deba estar perfectamente identificado y caracterizado, y que las reacciones se lleven a cabo con las condiciones catalticas idneas (pH, temperatura, contenido de humedad y tiempo). Las tcnicas modernas de enzimologa y de biologa molecular estn seleccionando fuentes de enzimas sobre la base de la selectividad del sustrato y a las condiciones de reaccin (Estell 1993). La aplicacin del enzima en el alimento despus de la molienda es una forma alternativa que particularmente est bien adaptada para el procesado de alimentos como la soya (Classen et al. 1993) y que podra ser aplicada a otras leguminosas con perspectivas de uso en la alimentacin animal en Cuba. Entre las tcnicas de adicin de enzimas como coadyuvante tecnolgico con el objetivo de aumentar el valor biolgico de las leguminosas se encuentra: adicin de -galactosidasa (Solomons et al. 1991), fitasas (Sandberg 1994, Yi et al. 1994, Komegay 1995 y Greiner et al. 1996), tanasas (Jean et al. 1978, Brune et al.1989 y Gustafsson y Sandberg 1995) y enzimas que actan sobre polisacridos no almidn como son las celulasas (Clarkson y Morgan 1996) y pentosanasas (Schutte 1996). Adems, se utilizan mezclas de enzimas, un ejemplo es la mezcla de enzimas proteolticas, hemicelulasa y celulasa comercializada con el nombre de Oliver. Los procesos de germinacin y fermentacin han demostrado producir una serie de cambios positivos en el contenido de nutrientes de las leguminosas, como es el incremento en el contenido de aminocidos esenciales, protenas solubles y digestibilidad in vitro de la protena (Liener 1994 y Urbano et al. 1995) disminucin significativa de los niveles de -galactsidos e inositoles penta- y hexa-fosfatados (Fras et al. 1995 y 1996) y reduccin de inhibidores de proteasas y lectinas as como del grado de polimerizacin de los taninos (Vidal-Valverde et al. 1998). Trabajos ms recientes han demostrado que el proceso germinativo en leguminosa logra un incremento circunstancial en vitaminas B1 y B2 (Blzquez 1999).

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Aspectos para resolver y meditar "Por qu las protenas de granos tratados, en los cuales los inhibidores de proteasas y lectinas han sido inactivados, an muestran pobre digestibilidad? En el tratamiento trmico: Efecto de la extensin del proceso trmico sobre la disponibilidad de aminocidos, protenas y carbohidratos, as como su digestin a lo largo del tracto gastrointestinal. Relacin entre el nivel de compuesto qumicamente activo y la temperatura, humedad y tiempo de calor necesario para su inactivacin. Efecto sobre compuestos termolbiles como: aminocidos y vitaminas. Efecto de antinutrientes termoestables como: fitatos, taninos. Actividad residual de inhibidores de proteasas posterior al tratamiento trmico. "Variabilidad en los valores de actividad de FANs informados por diferentes autores. Necesidad de estandarizacin de tcnicas analticas para medir in vivo actividad de FANs, que muestren criterios de comparacin con resultados obtenidos en diferentes laboratorios. "El estudio de FANs debe realizarse con respecto a la variedad o cultivar, madurez y condiciones de crecimiento. "Se debe describir de forma ms explcita las condiciones del proceso tecnolgico y equipamiento empleado. "Incrementar las investigaciones relacionadas con procesos biolgicos. "El cruzamiento gentico pudiera jugar un papel ms importante en la eliminacin de factores termoestables como taninos, fitatos, alcaloides y glicsidos. "Obtener por vas biotecnolgicas enzimas (FANasa) que permitan la inactivacin de los FANs. "Optimizacin biolgica y econmica de la tecnologa a utilizar.

Bibliografa a consultar. Aguirre, L. 1999. Bases Fisiolgicas del nivel de inclusin de vigna Vigna unguiculata en dietas para ratas. Tesis de Maestra, Instituto de Ciencia Animal, La Habana Cuba. Blzquez, I. 1999. Contenido de vitamina B1 y vitamina B2 en guisantes y lentejas. Efecto de los procesos de germinacin y extraccin alcohlico. Tesis de Licenciatura en Ciencias Qumica. Universidad Autnoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Qumica, Agrcola, Geologa y Geoqumica. Madrid, 75 p. Chavan, U.D., Chavan, J.K. & Kadam, S.S. 1988. Effect of fermentation on soluble proteins in vitro protein digestibility of sorghum, green gram and sorghum - green gram. J. Food Sci. 53: 1574. D' Mello, J.P.F., 1995a. Leguminous Leaf Meals in Non-ruminant Nutrition. En. Tropical Legumes in Animal Nutrition. Eds. JPF D'Mello and C. Devendra. CAB International. p. 247. D' Mello, J.P.F., 1995b. Under-utilized Legume Grains in Non-ruminant Nutrition. En:. Tropical Legumes in Animal Nutrition. Eds. JPF D'Mello and C. Devendra. CAB International. p. 283. D' Mello J.P.F., 1995c. Antinutritional Substances in legume Seeds. En. Tropical Legumes in Animal Nutrition. Eds. JPF D'Mello and C. Devendra. CAB International. D' Mello, J.P.F. y Acamovic, T. 1989. Leucaena leucocephala in poultry nutrition-a review. Anim. Feed Sci. Tech., 26: 1-28. D' Mello, J.P.F. y Devendra, C. 1995. Tropical Legumes in Animal Nutrition. CAB Internatuinal. Walingford, UK. D' Mello, J.P.F. y Walker, A.G. 1991. Detoxification of jack beans (Canavalia ensiformis): studies with young chicks. Anim. Feed Sci. Tech. 33: 117-127

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Consumo Voluntario y su mecanismo de control en especies monogstricas.

Dra. Lourdes Savn Vldes y Msc. Madeleidy Martnez Prez

Contenido
Introduccin...........................................................................................................................................................................228 Consumo voluntario. Concepto. Su importancia ...............................................................................................................229 Patrn de consumo. Diferencia entre especies monogstricas..........................................................................................229 Mtodos para determinar el consumo voluntario. .............................................................................................................231 Control Fisiolgico del consumo voluntario..........................................................................................................................232 Factores que regulan el consumo voluntario. ...................................................................................................................232 Regulacin a corto plazo en las especies monogstricas. Teoras unifactoriales del control del consumo alimentario .233 Teoras multifactoriales. ....................................................................................................................................................236 Vas de retroalimentacin negativa........................................................................................................................................237 Factores presentes en la circulacin general..........................................................................................................................238 Metabolitos ........................................................................................................................................................................238 Hormonas. .........................................................................................................................................................................238 Integracin del Sistema nervioso Central (SNC)...................................................................................................................241 Bibliografa a consultar..........................................................................................................................................................245

Introduccin La alimentacin es una actividad compleja que comprende acciones diversas como la bsqueda de alimento, su reconocimiento y los movimientos tendientes a su consecucin, la aprehensin sensorial del alimento, el inicio de la comida y la ingestin. En el tracto digestivo el alimento es digerido y los nutrientes son entonces absorbidos y metabolizados. La cantidad de alimento consumido por una parte representa el balance entre las necesidades del animal y de otra la habilidad del alimento para cubrir estas demandas. As, la energa de la dieta generalmente se toma para fijar los niveles de los dems nutrientes. El control de la ingestin de alimentos y la regulacin del balance energtico se hallan influidos por varios factores, de manera que en condiciones normales se mantienen un equilibrio entre la entrada y salida de la energa. Sin embargo en algunas ocasiones este equilibrio puede fallar y se produce una ganancia o prdida de peso que origina en cualquier caso un trastorno metablico y una produccin animal deficiente. El comportamiento alimentario se puede modificar por factores correspondientes al medio interno del animal (factores intrnsecos) que incluyen factores gastrointestinales hormonas y metabolitos o por factores externos o extrnsecos como las condiciones ambientales, los nutrientes en la dieta. El principal sitio responsable del control integrado del consumo de alimento y el balance energtico es el sistema nervioso central (SNC) aunque aun existen muchas interrogantes acerca del mecanismo especfico. Los pptidos encontrados en el SNC como los pptidos opoides y la colicestoquinina y ms recientemente la hormona leptina descubierta por Zhang et al (1994), tienen un efecto directo en el control del metabolismo, consumo de alimentos y comportamiento reproductivo. Tambin existen un nmero de sistemas receptores del SNC y perifricos que suministran informacin del estado metablico del animal, estable siendo de esta forma un comportamiento alimentario coordinado.

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En este captulo se analizar la terminologa del consumo voluntario, los factores relacionados con su control y el balance energtico, sealando la diferencia entre las especies monogstricas, pero antes es necesario aclarar algunos conceptos.
Consumo voluntario. Concepto. Su importancia

El consumo voluntario se define (Forbes, 1986) como la cantidad de alimento consumido por un animal o grupo de animales durante un perodo de tiempo que tiene libre acceso al mismo. El control de este indicador en cada una de las especies productivas constituye la piedra angular en los estudios de fisiologa digestiva y bioqumica nutricional debido a que permite la interpretacin de la relacin aporte-produccin, y de muchos de los procesos metablicos que se efectan en el organismo animal. Los animales normalmente ingresen la cantidad de alimentos que satisface su requerimiento energtico aunque tambin existen otros controladores del consumo voluntario innatos o no, que pueden influir en la seleccin del alimento y el consumo total. El objetivo es combinar la calidad de la dieta con los requerimientos del animal si la dieta se ofrece ad libitum, esto implica que la composicin del alimento ser tal que se consuma lo suficiente para cubrir las necesidades de nutrientes del animal. En la prctica se deben ofertar alimentos con nutrientes altamente digestibles cuando se requiere una alta produccin (crecimiento, lactacin y produccin de huevos), pero e la densidad de nutrientes se debe reducir en otras etapas para prevenir la deposicin de grasa excesiva.
Patrn de consumo. Diferencia entre especies monogstricas.

Antes de analizar las diferencias en el patrn de consumo entre las especies monogstricas, es necesario aclarar algunos conceptos fundamentales. Los perodos determinados de tiempo que pueden incluir descansos breves pero que se hallan separados por intervalos mayores se denominan comidas. Los perodos cortos entre comidas son los perodos interprandiales. Al analizar el patrn de comportamiento alimentario,a menudo se toma un intervalo mnimo entre las comidas y las que estn separadas por intervalos menores que ste se consideran parte de la misma. Este intervalo entre comidas no se selecciona arbitrariamente, sino slo despus de estudiar y de graficar su frecuencia. La distribucin de la comida no es muy uniforme durante las 24 horas , siendo mayores las comidas realizadas a la luz del da. Cuando el animal comienza a ingerir alimentos se dice que se halla en un estado de hambre y cuando termina entonces se encuentra saciado. El apetito es la preferencia a ingerir un nutriente especfico ms que consumir el alimento en general, mientras que la palatabilidad es la impresin sensorial completa que el animal recibe del alimento. El peso de un alimento consumido por unidad de tiempo es la velocidad de ingestin. Cuando es posible medir los pesos intermedios de un alimento durante una comida, se puede observar que la velocidad de ingestin disminuye hacia el final de la comida como sucede en el cerdo. Hay que diferenciar el consumo voluntario que como ya se explic es la cantidad de alimento consumido durante un perodo de tiempo (usualmente un da), del potencial de consumo que es el peso de alimento requerido para satisfacer todos los requerimientos de nutrientes del animal y que a menudo es menor debido a las restricciones fsicas y qumicas en el animal o a sus limitaciones ambientales.

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El patrn de consumo es caracterstico en cada una de las especies monogstricas. (Fig. 1)

Principales factores que afectan el consumo voluntario del cerdo Concentracin energtica Nivel de protena Deficiencia de aminocidos Antilicticos Peletizacin Temperatura Humedad Tipo de piso Nmero de cerdos/corral Raza Sexo Manejo Enfermedades

Dieta

Factores extrnsecos

Factores Ambientales

Otros factores

El cerdo realiza varias comidas separadas por largos perodos interprandiales de manera que la frecuencia va de 9 a 10 comidas/da despus del destete hasta 3 comidas diarias cuando es adulto. La mayora de las comidas son diurnas. En tanto, las aves pueden realizar hasta 31 comidas diarias con un perodo interprandial de 2 minutos.. Los conejos, consumen sus alimentos ad libitum, por lo que sul patrn de consumo pueden tener grandes variaciones entre individuos. Adems, ellos practican la cecotrofa y el consumo de alimentos es mnimo durante este perodo (Fig. 2). Los conejos recin destetados presentan dos perodos de cecotrofa (0400 a 1200 h y de 2200 a 2400 h), en tanto que en los adultos es de 0800 a 1400h). La cecotrofa representa una estrategia especializada en los conejos que permite la ingestin de protena, enzimas, minerales y vitaminas). El consumo de heces blandas sigue un marcado ritmo circadiano opuesto al consumo de alimentos y que implica importantes cambios en la composicin qumica de los contenidos de digesta a travs del da .La excrecin de heces duras origina un incremento en el consumo de alimentos por el aumento del material fermentable en el ciego y la actividad antiperistltica del colon proximal durante este perodo, que inducir un enriquecimiento en lquidos y bacteriasprovenientes del ciego . El patrn de consumo se puede analizar desde dos puntos de vista. Anlisis univariado que considera que existe una alta correlacin entre el tamao de las comidas y la longitud de los intervalos interprandiales precedentes, lo que implica que es un mecanismo que

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determina cuando se debe detener el consumo, esto es un mecanismo de saciedad. Contrariamente, existe una correlacin significativa entre el tamao de la comida y el intervalo posprandial que determina cuando el consumo debe comenzar, esto es un mecanismo de hambre. En el pollo la correlacin posprandial es mayor que la preprandial. Anlisis multivariado. Considera imprescindible el uso de anlisis de varianza mltiple, anlisis de discriminante y regresiones mltiples cuando se combina ms de una variable relacionado con la comida. Este mtodo se aconseje cuando se estudia la naturaleza cclica del patrn de consumo del conejo. Tambin se puede utilizar en otras especies ya que las intercorrelaciones entre variables como duracin de la comida, tamao de comidas e intervalos entre comida puede producir diferencias significativas falsas.
Mtodos para determinar el consumo voluntario.

El estudio de los factores que regulan el consumo voluntario y el desarrollo de mtodos para su prediccin indican la necesidad de determinar el consumo en situaciones experimentales diversas. Por lo general, el consumo voluntario de alimentos se mide en intervalos de 24 horas, a veces ms cortos u ocasionalmente ms largos, por lo que se hace difcil la interpretacin de los datos recolectados en esta forma, porque los animales realizan numerosas comidas durante el da y es necesario tener un conocimiento de su frecuencia y tamao.. Es importante suministrar suficiente alimento fresco cuando ste se ofrece una vez al da para que al menos el rechazo sea de un 15%, una cantidad excesiva puede promover la seleccin de las partes ms palatables de la mezcla de alimentos, lo que puede agravar la dificultad para fijar el consumo de nutrientes. Se debe permitir que el animal se adapte con tiempo suficiente al nuevo alimento antes de registrar el consumo voluntario. Asimismo debido a la variabilidad entre individuos es necesario utilizar un nmero suficiente de animales para obtener un estimado confiable del consumo. La variabilidad entre animales en un grupo no difiere grandemente entre diferentes alimentos y es menor cuando los animales se alojan individualmente que cuando se alojan juntos.. El registro del consumo voluntario en animales alojados individualmente se ha realizado tradicionalmente por la observacin paciente de los intervalos regulares en los que cada animal se levanta para comer. Este mtodo presenta dos desventajas principales: 1) Que consume mucho tiempo, lo que se puede superar hasta cierto punto mediante un video registrador y observar el retroceso a gran velocidad. 2 ) Slo suministra informacin del patrn alimentario y no de la cantidad de alimento consumido. La utilizacin de marcadores externos o internos ha posibilitado la medicin del consumo de alimentos. Un marcador muy utilizado es el xido crmico (marcador externo). ste, por lo general se incorpora al alimento a razn de 1 % de la materia seca de la dieta y despus de varios das de suministro para alcanzar un equilibrio (6 das aproximadamente se recolectan las heces del animal directamente del recto. A partir del contenido de marcador en las heces se puede calcular la produccin total de las mismas. Para el clculo del consumo de alimento es necesario determinar su digestibilidad. Tambin se han empleado marcadores internos como la ceniza cido insoluble, etc.

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Control Fisiolgico del consumo voluntario.

El consumo de alimentos es la suma de las comidas individuales. El bocado est determinado por la presencia de alimento en el canal alimentario que involucra una evaluacin cualitativa y cuantitativa del alimento. La inhibicin (saciedad) de consumo posterior tiene lugar cuando ha sido ingerido suficiente alimento para corregir la deficiencia nutricional que ocurre en el intervalo entre comidas. Pero esta evaluacin rpida del alimento antes de que se complete la absorcin, puede ser una primera aproximacin del ajuste del bocado a la necesidad de nutrientes, posteriormente tiene lugar otra evaluacin de los nutrientes absorbidos para el ajuste fino del balance entre el alimento ingerido y la necesidad de nutrientes. La frecuencia y tamao de la comida o bocado se puede alterar por factores metablicos y sensoriales, mientras que el bocadopuede variar grandemente, ya que la cantidad de comida ingerida/da se controla por el balance energtico.
Factores que regulan el consumo voluntario.

Existen diferentes seales o factores que intervienen en la regulacin del consumo voluntario, cada uno de los cuales puede ser predominante en un momento determinado. Estos se pueden clasificar en: factores intrnsecos que son los relacionados con el animal que incluye factores fsicos como los factores gastrointestinales, y otros ms ntimamente relacionados con el metabolismo como las hormonas, metabolitos y pptidos reguladores, balance energtico y estado fisiolgico y factores extrnsecos que son los que involucran los referentes a la dieta (concentracin de nutrientes), los ambientales y sensoriales y otros factores como el manejo, enfermedades y efectos sociales.
Principales factores que afectan el consumo voluntario del cerdo

Fsicos

Control gastrointestinal Distensin gstrica

Factores intrnsecos Metablicos

Metabolitos (glucosa, depsito de grasa) Hormonas (insulina, glucagn, leptina) Pptidos reguladores (colecestoquinina Pptidos opoides Balance energtico y estado fisiolgico

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Factores intrnsecos Los factores relacionados con el animal, (fsicos o metablicos) pueden regular el apetito mediante la integracin de los estmulos del SNC segn se ha puesto para la regulacin del balance energtico. Los estmulos se pueden convertir en seales por su accin en los receptores y sistemas de deteccin especficos. Estas a su vez pueden ser de diferente naturaleza y contenido (metablicas o sensoriales), pero actan coordinadamente mediante un complicado sistema. Por lo tanto el consumo de alimentos es una de las funciones mejor reguladas en el animal. La regulacin del consumo voluntario puede ser a corto plazo (regulacin diaria del consumo). Los factores que actan a corto plazo se divide en dos grupos: los que actan en los receptores gstricos y los que lo hacen en los receptores del SNC. Los sistemas de regulacin a largo plazo se hallan relacionados con el mantenimiento del balance energtico y la regulacin del peso corporal. A continuacin se analizarn estos aspectos en las especies monogstricas principalmente aves y cerdos por ser los ms estudiados.
Regulacin a corto plazo en las especies monogstricas. Teoras unifactoriales del control del consumo alimentario

Se han propuesto varias teoras que tratan de explicar el mecanismo de control del consumo de alimento a corto plazo. Todas estas teoras clsicas analizan el papel preponderante de un factor, desde la limitacin fsica al apetito (teora de distensin gstrica) hasta las que consideran que el consumo de alimento se halla bajo control fisiolgico y refiere la utilizacin de glucosa, la produccin de calor y los depsitos de grasas como medidas directas o indirectas del contenido energtico (liberados o potencial) de los principales nutrientes. Tambin, la concentracin de aminocidos y cidos grasos libres, vitaminas y minerales presentes en los fluidos corporales podrn actuar como seales reguladoras.

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Distensin gstrica y controles gastrointestinales. Existen pruebas que sugieren que el bocado se determina principalmente por las seales de retroalimentacin negativa del tracto digestivo y la iniciacin de la prxima comida en parte por la disminucin de las seales de saciedad a medida que el alimento es digerido y absorbido. La distensin gstrica es una seal importante de la saciedad en algunas condiciones de alimentacin. Incluso las raciones pueden diluirse con un material no digestible hasta el punto de alterar el consumo de energa porque la ingestin de alimentos queda limitada por la distensin gstrica. Se ha planteado que la introduccin de cargas nutritivas (glucosa, leche, aceite de maz, lactosa) y cargados no nutritivas (ClNa 3 %) a travs de un tubo estomacal en cerdos recin nacidos provoca una disminucin de la cantidad de leche succionada. Esto sugiere que hay seales de retroalimentacin negativa del estmago e intestino, pero que debido a la rapidez con que el lquido pasa al estmago es difcil determinar si es el estmago, intestino o ambos y adems que puede existir ms de un estmulo efectivo (distensin por solucin salina isotnica, efecto osmtico del agua y ClNa, accin de la glucosa) Experimentos posteriores demostraron que cuando las soluciones de glucosa y cloruro de sodio eran descargados directamente a travs de catteres implantados en el duodeno, hubo una disminucin del volumen hipertnico que conllevaba a una disminucin del bocado. La duracin de la comida fue de 10 minutos y los efectos de saciedad se iniciaron principalmente en el intestino. Esto se confirm con el hallazgo de que azcares que no son absorbidas como el manitol y sorbitol, tenan un efecto mucho ms atenuado en la saciedad, si se comparaba con la glucosa y el ClNa que si se absorban. Sin embargo, el resultado ms sorprendente fue la similitud en los efectos de saciedad de soluciones no nutritivas de ClNa y soluciones nutritivas de glucosa y la linealidad del efecto de saciedad con la hipertonicidad. Adems cuando las soluciones cargadoras se liberaron en varios sitios del TGI, el duodeno fue el ms sensible a los efectos de saciedad. Todo esto induce a pensar que existe un sistema osmorreceptor de control de saciedad a nivel de duodeno. Este sistema se activa por el aumento de la osmolaridad a este nivel (debido principalmente a la presencia de compuestos que pueden ser absorbidos) originando una depresin del tamao del bocado que es proporcional al grado de hipertonicidad. En el caso de las aves, se ha estudiado que el suministro de alimentos o de soluciones hipertnicas a travs de un tubo o de un carcter estomacal produce una distensin del buche que reduce el consumo de alimento. Sin embargo, a diferencia de los cerdos ,el suministro de soluciones de glucosa (nutritiva) y ClNa (no nutritiva) tiene efectos diferentes, ya que el ClNa disminuye ostensiblemente el consumo voluntario, en tanto que la glucosa no. Esto se debe a que en las aves la glucosa se absorbe rpidamente del intestino delgado, por lo que no acta el tiempo necesario para estimular la distensin intestinal o a los osmorreceptores que se producen con los solutos que no se absorben como el ClNa y que resulta en una disminucin del consumo voluntario. As, la estimulacin en los receptores de distensin en cualquier punto a travs del tracto digestivo origina una hipofagia (saciedad) y esta distensin durante y despus de las comidas es un factor en el control del bocado y la frecuencia.

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Teora glucosttica Inicialmente Mayer (1953) sugiri que el consumo voluntario en los cerdos se controlaba por los niveles de glucosa, para lo que se bas en la estabilidad relativa de la concentracin de este nutriente y en el hecho que la concentracin de glucosa se elevaba despus de las comidas y disminua antes de la prxima comida. La glucosa se ha considerado como un componente del sistema de control de consumo de alimentos en los monogstricos. El consumo de alimentos y la concentracin de glucosa en sangre, o ms bien la tasa de utilizacin de glucosa que se mide por la concentracin arteriovenosa) se hallan muy relacionados. Se ha demostrado que cuando se reduce la tasa de utilizacin de glucosa por administracin de insulina o de anlogos de glucosa se experimenta sensacin de hambre, mientras que los incrementos producen hiperglicemia y no afecta el consumo. Contrariamente, en los rumiantes, las concentraciones de glucosa sangunea, las diferencias arteriovenosa en la concentracin glucosa y las tasas de utilizacin disminuyen cuando se incrementa el consumo. El suministro de insulina disminuye el nivel de glucosa en el plasma y en los tejidos, particularmente en el sistema nervioso central, ya que sta es la principal fuente sino la nica de energa que recibe el cerebro, por lo que el animal comienza a experimentar hambre. Los resultados con los cerdos han sealado que la insulina produce inicialmente un aumento con el consumo debido a la hipoglicemia y posteriormente, este efecto se compensa con una disminucin. En los cerdos recin nacidos, la insulina no es capaz de estimular el consumo de alimentos porque el sistema de control an no se ha desarrollado. El efecto de gluco-privacin cerebral se demostr cuando se inyect en los ventrculos cerebrales el 2-deoxi-D-glucosa. Este compuesto aunque no se metaboliz, priv competitivamente el cerebro de glucosa. Estos resultados sugieren que los cerdos como otros mamferos, responden a la disminucin de glucosa con un aumento del consumo de alimentos. Este mecanismo es un control de emergencia y quizs no tenga ningn papel en la determinacin del bocado, aunque ltimamente se ha postulado que la insulina puede actuar como una seal de saciedad En las aves, la 2-deoxi-glucosa, que previene la toma y utilizacin de glucosa en los mamferos y estimula el consumo voluntario debido a la glucoprivacin, realmente disminuye el consumo en los pollos. Desafortunadamente., no se sabe si la 2-deoxiglucosa, tiene el mismo efecto en las aves que en los mamferos. La incorporacin de 100g L-1 de glucosa en el agua de bebida para los pollos en crecimiento, no disminuye el consumo de alimentos, ni se incrementa la ganancia en peso. Se observ sin dudas un incremento en la grasa de la canal Teora termosttica. Los animales comen para mantenerse calientes y dejan de comer para prevenir la hipertermia. Se observ que los animales comen ms en el invierno que en el verano. Ingram (19 ) seal que haba una relacin positiva entre la temperatura hipotalmica y el consumo de alimentos.

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La teora termosttica es verdadera en el sentido que los mamferos y aves mantienen una relativa constancia en la temperatura corporal y que la produccin de calor es proporcional al peso del alimento consumido; cuando el consumo de alimentos es muy bajo, disminuye la produccin de calor, aunque las reservas corporales se movilizarn para evitar la hipotermia, de igual forma la sobrealimentacin incrementar la produccin de calor. Por lo que se activarn los mecanismos para prevenir la hipertermia .Slo en las condiciones donde las prdidas de calor no se pueden incrementar ms es que el consumo voluntario no previene la hipertermia. Regulacin a largo plazo Teora liposttica Se ha propuesto (Kennedy, 1966) la teora liposttica de que para que los animales adultos mantengan su peso corporal es necesario que se controle el consumo de alimentos para regular el contenido de grasa corporal. El contenido de peso se mantiene ms o menos constante, independientemente de los cambios en l a calidad de los alimentos y el clima. El mecanismo responsable para la regulacin del depsito de grasa no se ha dilucidado completamente, aunque se cree que es un factor presente en el torrente sanguneo el que acta en el control central de los depsitos de grasa perifrica. El sistema de control central modifica el consumo de alimentos para compensar los desplazamientos en el balance energtico que se hallen fuera del equilibrio sanguneo. En los cerdos, .la teora liposttica no se aplica como tal y el consumo est limitado por la mxima velocidad de sntesis de grasa., por encima de la cual, los precursores se acumularn y evitarn altos niveles de consumo. En las aves, un factor importante que afecta el consumo es el tamao del depsito de grasa. Las aves sometidas a alimentacin forzada a un nivel que ocasion incremento en el depsito de grasa, manifestaron una completa ausencia de consumo voluntario por 10 das y tardaron an 23 das para recuperar los niveles de consumo pre-experimental. Las concentraciones de triglicridos plasmticos se elevaron durante el perodo de alimentacin forzada. Como el consumo voluntario se increment durante la alimentacin forzada, no es posible un control liposttico completamente efectivo. Para concluir, es necesario destacar que las teoras glucostticas, liposttica, termostticas se hallan asociados a los centros del hipotlamo involucrados en el control del consumo voluntario. Este mecanismo de control cerebral ser analizado posteriormente
Teoras multifactoriales.

Ninguna de las teoras mencionadas pueden por s solas explicar cmo se puede controlar el consumo en todas las circunstancias. As Balch ( ) plante que el consumo voluntario no se puede regular por un solo mecanismo y que a travs del sistema nervioso central, sensaciones orofarngeas, contracciones gstricas y distensin, cambios en la produccin de calor y los cambios en los metabolitos circulantes todos los cuales estn concentrados. Con excepcin de la distensin gstrica como bien dijimos con anterioridad, todas las teoras clsicas tienen en comn la idea de que alguna funcin de consumo de energa o almacenamiento est regido por el cerebro, el que controla el consumo para preservar la constancia de la funcin corporal (utilizacin de glucosa, temperatura corporal, reserva de grasa corporal). Debido a ello, cualquier intento de formular una hiptesis ms compleja, tendr en cuenta la

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energa como componente principal. No es posible que el cuerpo mida le energa per se, aunque algunas teoras que se esgrimieron implicaron monitoreo de flujo de energa. Energostasis. Esta teora plantea el criterio que es posible monitorear el suministro de energa a algunos tejidos y controlar el consumo voluntario. As se observ que la rata durante el da tena una menor velocidad metablica que durante la noche y especularon que esto poda ser la causa ms que el resultado de la disminucin de las frecuencias de comidas durante el da, comparado con la noche. Factores sensoriales La palatabilidad influye en el consumo voluntario. Cuando se les ofreci a un grupo de ratas alimentos muy palatables, stas comieron al menos 0.3 veces ms que ratas similares a las que se les haba ofrecido los pellets estndar del laboratorio, como resultado ganaron ms peso. La grasa extra realiz una retroalimentacin, disminuy el consumo voluntario y mantuvo un contenido de grasa y peso corporal constante. Integracin de mltiples feedback o retroalimentacin Adems de la energostasis, es necesario incluir otros factores, particularmente el llenado fsico del tracto digestivo y las caractersticas del alimento. Hay muchas formas en que estas seales se pueden combinar para generar el proceso de alimentacin, ellas se pueden sumar o multiplicar. La aditividad es un fenmeno general que involucra factores que afectan el consumo de alimento, no slo por retroalimentacin negativa en las vsceras, adems el consumo y el peso corporal, son los resultados netos de los efectos de estos factores. Mediante esta teora se integran todos los factores que afectan el consumo y se hallan involucrados en su control. A partir de esta integracin se han desarrollados modelos matemticos que tratan de ofrecer una explicacin al fenmeno complejo del consumo voluntario, entre los que sobresalen el modelo del cerdo formulado por Tyberk en 1989. que planteaba como hiptesis fundamental que la regulacin del consumo en el cerdo se hallaba limitada por dos factores: 1) la capacidad que oosea para el recambio de nutrientes ( regulacin metablica) 2) la capacidad intestinal ( regulacin fsica).fig..
Vas de retroalimentacin negativa.

Son las vas mediante las cuales se transmiten al cerebro los cambios en el cuerpo causados por la ingestin de alimentos. Entre ellos se hallan los receptores orofarngeos, los mecanorreceptores del estmago e intestino, los quimiorreceptores, osmorreceptores, termoreceptores y los receptores hepticos. Los receptores orofarngeos se hallan en la cavidad bucal y la garganta y son importantes en la percepcin sensorial del alimento por el animal. Los mecanorreceptores en el estmago e intestinos, son los que llevan la seal al cerebro cuando por ejemplo tiene lugar una distensin gstrica o intestinal. En el pollo se hallan situados en el estmago muscular y en el buche y son inervadas por ramas del nervio vago. Entre los s quimiorreceptores, se puede contar con la glucosa, que disminuye el consumo voluntario en el cerdo cuando se infunden soluciones de la misma en el duodeno, mientras que la infusin de soluciones de grasa neutra o de aminocidos no tiene efecto. En el pollo, como la glucosa se absorbe

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rpidamente, no hay tiempo para producir una distensin o estimulacin de los osmorreceptores, por lo que la infusin de soluciones de glucosa no afecta el consumo voluntario. Los receptores hepticos, tiene gran importancia en el control del consumo voluntario en el pollo , no as en el caso del cerdo , en el que se observ que la infusin de glucosa en la vena porta no tiene efecto en el consumo voluntario. En el caso del pollo si se observ que cuando se infundi la glucosa en la vena porta y el alimento se mantuvo hasta el final de la infusin, se hall gran inhibicin dosis dependiente del consumo voluntario. Este efecto de la glucosa se mantuvo despus de la infusin, por lo que se plantea que se puede deber a cambios en el glucgeno heptico o contenido de glucosa, ms que en el efecto de concentracin de glucosa en sangre que perfunde al hgado. Los termorreceptores se hallan en todas las partes del cuerpo, especialmente en la piel y en el hipotlamo anterior. Factores presentes en la circulacin general.
Metabolitos

Glucosa. Anteriormente se estudi el efecto de la glucosa en el consumo voluntario y se lleg a la conclusin que no existe un control directo de la concentracin de glucosa por el cerebro, sino que la glucosa afecte el consumo estimulando los osmorreceptores en el duodeno y los quimiorreceptores del hgado.
Hormonas.

Hormonas metablicas Las hormonas que tienen un posible papel en el control del consumo voluntario y en la regulacin del balance energtico son de origen pancretico, la insulina y el glucagn. El glucagn origina una hiperglicemia en apariencia al estimular la glucgenolisis o sea el desdoblamiento del glucgeno en el hgado y se considera el mecanismo de accin para la saciedad o inhibicin en el consumo de alimentos. Esto se comprob por un incremento observado en el consumo de alimentos con la infusin de un anticuerpo de glucagn a ratas. Alrededor de las ltimas dcadas la hiptesis de la insulina involucrada en el control del consumo de alimentos ha variado. Mientras una hipoinsulinemia no resulte en anorexia, el consumo se puede inducir por la inyeccin de insulina pero solamente despus que ocurra una severa hipoglicemia. Se ha propuesto que la insulina se considera como una seal en los adipocitos. Los factores que influencian el control del consumo voluntario se clasifican en dos categoras: (1) factores que causan un patrn de alimentacin con cambios independientemente de las reservas corporales y (2) factores que son sensitivos a los cambios en la masa adiposa. La segunda categora involucra la insulina como la seal que mantiene el balance de energa. Este propsito se basa en que la concentracin de insulina plasmtica aumenta con el dao del adipocito. Los niveles de insulina varan frecuentemente dentro de un perodo de 24 horas, es probable que algunos medios esenciales para obtener una respuesta integrada con un tiempo constante relativamente bajo. Se ha planteado que la insulina en el fluido cerebro espinal (FCE) posee tal

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medio ya que las concentraciones de insulina aqu cambian con las concentraciones en el plasma a mucha menor velocidad.

1)Se ha planteado , desde hace tiempo, que una pequea dosis de insulina, disminuye la concentracin de glucosa en sangre,y es capaz de causar tambin, la sensacin de hambre en el animal.Estos criterios han variado en los ltimos aos como veremos posteriormente. Hormonas estimuladoras e inhibidoras del consumo de alimentos. Segn Bray (2000), existen numerosas hormonas que actan en el control del consumo voluntario. La figura muestra su efecto sobre este mecanismo.
Hormonas Estimuladoras Neuropptido y insulina orixina melanina Hormonas Inhibidoras Colecistoquinina Conticotropina/uroconti na Enterostatina l ti

Consumo

Figura 5. Hormonas estimuladoras e inhibidoras del consumo de alimentos.

En los ltimos aos tambin se han descubierto pptidos cerebrales que actan como neurohormonas o neurotransmisores en el hambre y la saciedad. Estos pptidos denominados opioides y se han implicado en otras funciones de comportamiento ingestivo. Desde 1953, Kennedy postulada la existencia de un factor normal que regulara el peso y la cantidad de tejido adiposo. A partir de all, la hormona de la tiroide, factores de crecimiento (como el factor de microsis tumoral), factores hepticos y la insulina fueron fuertes candidatos. En 1994, Zhang postul que la leptina, de la palabra griega leptos (delgado), responde activamente a los cambios nutricionales y metablicos. Es una protena de 167 aminocidos cuyo amino terminal constituye una seal durante su secrecin y circula como un pptido de 146 aminocidos. Su produccin aumenta con la alimentacin y con el contenido adiposo del cuerpo (Animan y Mattari, 1996) y se describi como el factor de la saciedad. En los mamferos la producen los adipocitos y la placenta (Hoggard et al, 1998), en las ratas tambin el tejido gstrico (Bado et al, 1998) y en los pollos se ha encontrado que se produce en el hgado (Tasnis et al, 1998) La razn de secrecin de leptina y su concentracin en plasma se correlacionan con la masa de grasa corporal. Sin embargo, esta hormona circula a travs del organismo como una seal interna que indica la talla de las reservas de grasa corporal su secuencia de aminocidos exhibe gran homologa. Existen al menos seis isoformas del receptor de leptina (ob-r) que se han encontrado en diferentes tejidos a lo largo del cuerpo y con diferentes niveles de expresin. El receptor se expresa en el hipotlamo, corteza cerebral, cerebro, plexo coroideo, rin, pulmn, msculos esqueltico, hgado, pncreas, tejido adiposo y mdula adrenal (Reidy y Weber, 2000)

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La leptina es un importante regulador de otros procesos fisiolgicos tales como la pubertad y la reproduccin. Adems regula el metabolismo lpido y energtico, as como sus sistemas relacionados. Esta informacin ha sido posible gracias a diferentes modelos animales. Los roedores y sus contrapartes se han utilizado con simples, notaciones genticas que causan la supresin de la produccin normal de leptina y la expresin de receptor disfuncional de la leptina. Estos animales ob/ob exhiben una obesidad severa debido a una hiperfagia, hipometabolismo y un almacenaje preferencial de grasa y son usualmente resistentes a la insulina. En los ratones ob/ob el gen que codifica para la leptina es mutado y produce una forma de la hormona prematuramente terminada y que no es reconocida por los receptores. En el ratn obeso db/db la mutacin es en el gen que especficamente transcribe para la isoforma larga hipotalmica del receptor de leptina por la que se suprime la expresin de esta isoforma. De esta manera, se incrementa la expresin de muchas otras isoformas cortas que son incapaces de activar la protena responsable de la seal de transduccin y activacin de transcripcin (prot STAT). Las ratas Zucher fa/fa tienen tambin un receptor disfuncional de leptina.
LEPTINA CEREBRO (-) apetito Mdul (+) Nervios simpticos (+) TIROID

ADIPOCITO S Cels pancreticas

insulina

T3

Figura 6. Diagrama esquemtico representativo de las rutas a travs de las cuales la leptina ejerce su efecto en el metabolismo lipdico, energtico y consumo de caloras.

AGL cidos grasos libres, CAT-cafecolamina, T3 tiyodotironina, TAG-triacilgliad Se han demostrado que el tratamiento de animales con leptina causa una disminucin en el consumo de alimento de una manera dosis dependiente, prdida en el peso corporal, disminucin de los depsitos grasos y un incremento del metabolismo energtico (Lewin et al, 1996; Honseknecht et al, 1998). En

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este estudio, las prdidas potenciales de peso corporal se ven incrementadas dado el aumento en la tasa metablica. El efecto de la inyeccin intracerebroventricular (i. c .v) de leptina fue investigado usando broilers y Single comb White Lighorm. Estos representan un engorde rpido y lento respectivamente. La inyeccin i. c. v de leptina disminuy el consumo de alimentos en ambos. La dosis ms eficaz fue de 10mg en ambos tipos, disminuyendo el consumo de alimentos (Denbow et al, 2000) Integracin del Sistema nervioso Central (SNC) La prehensin y masticacin se hallan bajo control directo del SNC. El cerebro es el principal regulador del consumo de alimentos. As, las lesiones electrolticas en el hipotlamo ventromedial aumenta el consumo de alimento y el peso corporal. Estas regiones se corresponden con el denominado centro de saciedad y se puede considerar como una estacin reveladora que integra la informacin sobre la saciedad (seal de realimentacin). SENAL DE SACIEDAD (Estmulo) Centro ventromedial (Inhibicin) Centro lateral facilitador de la alim. (Estmulo) Consumo de alimento

Nombre

Saciedad Lesin Ventromental

Estmulo Ventromendial

Lesin del rea lateral

Estmulo del rea lateral

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Figura 7. Diagrama del papel desempeado por el hipotlamo en el consumo de alimento

Cualquier lesin claramente suprime la influencia inhibitoria en el consumo de alimento y origina una hiperfagia. Cuando las lesiones se localizan en las reas laterales del hipotlamo, que se denominan centros de alimentacin, hay un efecto opuesto en el consumo de alimento y entonces se produce una afagia intensa. Los animales dejan de comer totalmente y morirn a menos que se les obligue a ingerir alimentos, incluso llegan a ensalivarlos, indicando que persisten activos algunos reflejos precisos para la ingestin, aunque no comern voluntariamente. Se ha estipulado que la infusin de algunos depresores neuronales como el pentobarbitato de sodio en la regin lateral del hipotlamo disminuye el consumo de alimentos, mientras que en la regin ventromedial lo estimula. Las infusiones de los iones Ca y Mg que tambin deprimen la actividad neuronal en los ventrculos cerebrales del cerdo (a travs de su efecto en la zona ventromedial de hipotlamo que es adyacente a ellos), aumenta el consumo de alimentos. Mediante estimulacin elctrica se puede lograr unos efectos opuestos a los producidos por las lesiones anteriores. As, el estmulo del rea lateral induce al consumo de alimentos y el estmulo de la zona ventromedial produce la saciedad. Hay que sealar que el centro de alimentacin integra los complejos visuales, auditivos, olfativos, tctiles, gustativos y del tubo digestivo relacionados con el comportamiento para el consumo de alimentos. Balance energtico y estado fisiolgico El contenido energtico del cuerpo se halla relacionado con el control del consumo voluntario que mantiene un balance entre la entrada y salida de energa en condiciones normales y por tanto tambin se mantiene el peso corporal. Luego, la regulacin del balance energtico depender en primer trmino del consumo de energa que pueda hacer el animal, la que a su vez es una funcin del estado fisiolgico. El destete precoz (2 a 3 personas) ocasiona un stress social, fisiolgico y ambiental que reduce el consumo voluntario y la velocidad de crecimiento. Cuando los cerdos se destetan a mayor edad. El consumo de energa digestible aumenta. Durante el crecimiento los animales presentan un mayor consumo de alimentos por unidad de peso metablico (pkg. 0.75) que el adulto no lactante. Las cerdas consumen un 13.8% ms de energa post destete que las cochinatas. En la gestacin se requiere una restriccin en el consumo de energa para obtener un mejor comportamiento en tanto que la lactacin supone un aumento en el consumo de energa para poder mantener el peso y la produccin de leche. Factores extrnsecos Nutricionales El cerdo ajusta en la medida de lo posible el consumo de alimentos a sus necesidades energticas. Existe una relacin entre el consumo voluntario y el balance de energa y ambos son regulados por el

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hipotlamo. La va mediante la cual viaja la informacin a los receptores del balance de energa al hipotlamo no est bien definida, aunque se ha sugerido que pudiera ser el torrente sanguneo. La cantidad de alimentos que consumo el cerdo se determina por la densidad energtica de la dieta de manera que a medida que la densidad energtica de la dieta aumenta, disminuye el alimento consumido para mantener constante el consumo de energa. Los cerdos destetados a los 14-21 das de edad y que se alimentan con dietas que varan en la densidad energtica tienen una capacidad limitada para regular el consumo. Debido a ello, se han realizado estudios aadiendo grasa a la dieta en un intento para mantener una velocidad de crecimiento apropiada durante el perodo post-destete, pero los resultados no fueron favorables. Sin embargo, cuando se destetaron a los 21 das y se les dio tiempo para recuperarse del stress, el incremento de densidad energtica condujo a una mejora de la eficiencia alimenticia. Las diferencias o excesos de nutrientes en las dietas en general pueden disminuir el consumo de alimentos. Estos cambios requieren concentraciones extremas que generalmente no se encuentran en la prctica. Por ejemplo, para cerdos en crecimiento, dietas con niveles de protena entre 25 y 30%, o menores que 10 a 12 % trae como resultado una disminucin del consumo ED, pero niveles entre estos extremos no tienen efecto. En contraposicin, deficiencias de ciertos aminocidos pueden deprimir el consumo de alimentos rpida y severamente. Los antibiticos pueden incrementar el consumo voluntario a un 8,6 y 2 % ms que los controles durante las etapas de inicio, crecimiento y finalizacin respectivamente. La pelletizacin de alimentos produjo una disminucin del consumo a un 9% en los cerdos destetados y de 3.1% en el perodo de finalizacin Tambin la ingestin de alimentos se ve reducida por la presencia de sustancias poco palatables o incluso txicas. Factores ambientales La temperatura es probablemente el componente ambiental que ms afecte el consumo de alimentos. Los animales homeotermos como el cerdo aumentan su consumo de alimentos en ambiente fro y lo reducen cuando hay calor. As, la elevacin de la temperatura ambiental supone una reduccin en la ingestin de alimentos siguiendo una relacin prcticamente lineal desde temperaturas bajas hasta la zona de neutralidad trmica. Normalmente la reduccin de la ingestin de energa es un poco ms acentuada que la disminucin de las necesidades energticas, por lo que el animal se encuentra por tanto en balance de energa cada vez menos positivo a medida que la temperatura se eleva, lo que se traduce en una reduccin de su crecimiento por encima de la temperatura de neutralidad trmica el apetito disminuye rpidamente y el animal se encuentra en una situacin de dficit alimenticio cada vez ms acentuado. Esta situacin se puede remediar aumentando la densidad energtica de la racin. La temperatura ambiente es modificada por varios factores fsicos y generalmente se usa el trmino temperatura efectiva del ambiente (TEA) para corregir el consumo de alimentos (por desviacin de la temperatura ptima)

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El contenido de humedad del aire y la temperatura del ambiente interactan para influir en el consumo de alimentos y comportamiento animal. As por ejemplo, durante el stress calrico el cerdo depende de las prdidas de calor, por evaporacin (jadeo) para perder calor, se reduce el consumo de alimentos y se requiere adems energa adicional para liberar calor, disminuyendo por tanto el crecimiento Otros aspectos importantes son el movimiento del aire, los tipos de peso (concreto, paja, capacidad de aislamiento de las paredes de las naves todos ellos pueden ser utilizados para estimar la TEA Se ha planteado que la temperatura orgnica del cerdo interviene en la regulacin del consumo voluntario (teora termosttica). La ingestin de alimentos aumenta la produccin de calor orgnico de tres formas como mnimo. La primera y ms aparente es la accin dinmica especfica ADE aumento en la produccin de calor pocas horas despus de comer; la segunda es el incremento de la tasa metablica y la tercera es el aumento observado en la produccin de calor cuando aumenta el peso corporal. En esta hiptesis no se hace distincin entre el calor producido por ADE y el obtenido por la oxidacin que tiene lugar en los tejidos. Esta teora tiene la ventaja de reunir los efectos de las protenas, grasa hidrato de carbono como integrantes de la seal de saciedad. Sensoriales El gusto en los cerdos es importante como un sesgo positivo o negativo en el control de consumo voluntario. Se ha informado respuestas a sustancias dulces. An los cerditos recin nacidos muestran preferencia para las so0luciones de glucosa y sacarosa. Cerdos adultos tambin prefieren la glucosa, sacarosa, lactosa y soluciones de sacarina. En el sentido negativo se halla la habilidad de los cerdos para desarrollar una aversin al gusto asociado a la enfermedad. La bulboctoma del olfato en los cerdos no tiene efecto en el patrn de consumo, ni en el consumo diario. Otros factores Parte de la variabilidad que se de cerdos Duroc tiende a consumir ms alimentos que otras razas. Existe diferencia en el consumo voluntario entre machos castrados y cochinatas. Los machos castrados consumen aproximadamente un 4.9% ms de alimentos que las cochinatas. Los verracos tambin consumen menos que los machos castrados. El nmero de cerdos por corral y el espacio disponible por cerdo puede influir en el consumo de alimento y en el comportamiento de los cerdos. Resumiendo, se ha investigado considerablemente los mecanismos de control de consumo voluntario y la regulacin del balance energtico. Hasta hace poco, las investigaciones se enfocaron principalmente hacia los cambios en las funciones gstricas, as como la respuesta de los metabolitos asociadas con el alimento. Ahora el inters es el papel principal del SNC y las diversas formas de modificar el consumo voluntario. Con una mayor, comprensin de los sistemas de control, el comportamiento alimentario y el nivel en el cual se mantiene el contenido energtico constante en los animales adultos o la velocidad con la que se incrementa en el animal en crecimiento, ste se puede modificar. Estas modificaciones conducirn a un mejoramiento de las eficiencias bioenergticas y disminuir las condiciones de

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manejo. Adems permitir la prevencin de ciertas enfermedades si se estimula el hambre suficientemente para compensar la carencia del suministro de nutrientes. Estas modificaciones conducirn a mejorar las eficiencias y permitir una mayor produccin de alimento y fibra para los animales. Bibliografa a consultar Bado, A.S., Lewvasseur, S., Kermorgant, J.P. Laigneau, M.N, Bortoluzzi, L., Moizo, T., Leby, M., Guerre-Millo, Y., Le March-Brustel, M.J. 1998. The stomach is a source o leptin. Nature.394: 790 793. Bray, G.A. 2000. Reciprocal relation of food intake and sympathetic activity :experimental observations and clinical implications Endocrinology of obesity : basic , clinical and terapeuti aspects. Satellite symposium of the 8th International Congress of Obesity , Venie, Italy, September 1998. International Journal of Obesity. 24(2):8-17. Chaudyhary, M., Mandir,N. , Fitzgerald, A.J.,Howard, J.K.,Lord,G..M.Ghatel, M.A., Bloom,S.R y Goodlad, R.A.2000.Starvation, Leptin and Epithelial Cell Proliferation in the Gastrointestinal Tract of the Mouse.Digestion.61:223-229. Cole, D.J.A Cole y Chadd, S.A.1989.Voluntary food intake of growing pigs. Occasional Publication No. 13. pag 61-70 .British Society of Animal Production. Editors: J.M Forbes , M.A. Varley Forbes, J..M. 1989. The voluntary feed intake. London Editorial Butterworths,206 p. Hoggard, N., Hunter, L.Duncan, S:; Williams, M., Trayhurn, P y Mercer, J.G. 1997. Leptin and leptin receptor mRNA and protein expression in the murine fetus and placenta . Proc. Natl. Acad. Sci. USA.94: 11073-11078. Kennedy, G.C. 1953. The role of depot fat in the hypothalamic control of food intake in the rat. Proc. Roy. Soc. 140: 578-592 National Research Council. Predicting feed intake of food producing .Committee on Animal Nutrition Board on Agriculture., 1987. Rayner, D. V. 1992. Symposium on Satiety. Gastrointestinal satiety in animals other than man. Proceedings Nutrition Society.51:1-6. Ruiz, Z.; Murphy,B . y Olivera, M. 1999. Interaccin reproduccin-nutricin en los animales domsticos: esla leptina la clave? Tybirk, P. 1989. A model of food intake regulation in the growing pig. Occasional Publication No. 13 page 105-109.British Society of Animal production. Editors. J.M Forbes , M. A. Varley and T.L.J Lawrence. Zhang, Y. , Proenca, R., Maffel, M., Barone, M Leopold, L y Friedman, J.M. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Nature. 1994, 372:425-432.

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Alimentacin no convencional de especies monogstricas: Utilizacin de alimentos altos en fibra

Dra. Lourdes Savn .

Contenido
Introduccin...........................................................................................................................................................................246 Cmo valorar la utilizacin de una fuente alta en fibra en la alimentacin de monogstricos?...........................................247 Qu es la fibra diettica?......................................................................................................................................................247 Caracterizacin de la matriz fibrosa ......................................................................................................................................250 Propiedades fsico-qumicas de la fibra diettica...................................................................................................................252 La fibra diettica y sus efectos fisiolgicos en el TGI de aves y cerdos................................................................................254 Tratamientos ..........................................................................................................................................................................256 Utilizacin de la fibra diettica y aprovechamiento energtico. ............................................................................................258 Mtodos para mejorar la utilizacin de la fibra. ....................................................................................................................263 Consideraciones finales y perspectivas futuras......................................................................................................................264

Introduccin El uso de materias primas alternativas en la alimentacin animal para sustituir importaciones y reducir la competitividad con la alimentacin humana y preservar el ambiente constituye un reto para los nutricionistas, pequeos y medianos productores en la bsqueda de soluciones para lograr producciones avcolas, porcinas y cuncolas ecolgicamente sostenibles y eficientes (Montilla 1994, Lon Wo 1995 y Belmar,1998). En las zonas tropicales existe disponible una amplia variedad de recursos que son factibles de ser utilizados en la alimentacin animal. Entre estas opciones se incluyen los alimentos voluminosos de alto contenido fibroso. Los resultados obtenidos con relacin a la inclusin de estos insumos en las raciones de aves, cerdos y conejos no son muy abundantes y se hallan un poco dispersos. Adicionalmente estos resultados han sido encaminados a la sustitucin parcial de los cereales en experimentos de comportamiento productivo que han propiciado la mxima eficiencia econmica, pero no biolgica. Sin embargo hay aspectos que no se han estudiado y se deben analizar detalladamente como son: 1) el valor nutritivo y caracterizacin que es fundamental para poder utilizar la fibra eficientemente (origen, composicin qumica, morfolgica y estructural, propiedades fsico-qumicas), as como el contenido de factores antinutricionales 2) interaccin de estos factores y sus efectos en los procesos digestivos y en el fisiologismo animal que pueden limitar su incorporacin a las dietas. 3) optimizacin del uso de las fuentes fibrosas (nivel de fibra, especie, raza y categora animal) 4) mejoramiento de su potencial energtico y su contribucin al metabolismo animal.
El anlisis de estos aspectos, las tcnicas empleadas en su evaluacin, los retos que implica la utilizacin de fuentes alternativas altas en fibras en las dietas de especies monogstricas y sus perspectivas futuras constituyen los objetivos de esta conferencia.

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Cmo valorar la utilizacin de una fuente alta en fibra en la alimentacin de monogstricos? Segn Rodrguez (1994) para incluir cualquier materia prima alternativa en la prctica productiva es necesario conocer las caractersticas analticas del producto, su repercusin en la fisiologa digestiva del animal y mediante tcnicas adecuadas EVALUAR / INTERACTUAR / MODIFICAR / REEVALUAR el producto sucesivamente hasta lograr que sea ptimamente aprovechado. La evaluacin de una fuente alta en fibra comprende la determinacin de su valor nutritivo y la caracterizacin de su fraccin fibrosa. En la tabla 1 se seala la composicin bromatolgica de algunos follajes de leguminosas, gramneas y otras plantas, as como residuos de cosecha agrcolas. Tabla 1. Composicin bromatolgica de las fuentes fibrosas (% MS) Fuente fibrosa
Follaje leguminosas Vigna unguiculata Canavalia ensiformis Stizolobium aterrimum Follaje no leguminosas Manihot esculenta Ipomea batata Musa paradisiaca Residuos de cosecha Harina de ctricos (deshidratada) Cscara de caf

MS
15.3 10.8 19.5 86.60 88.50

PB
18.5 22.0 17.5 24.2 18.5 11.4 5.6 11.20

Indicadores PV FB
14.0 14.0 14.0 18.2 34.0 30.0 30.0 20.7 10.2 28.9 12.2 18.9

EE
2.5 2.5 2.5 6.4 3.7 1.05 2.3

Cz
8.5 9.5 6.5 10.8 12.3

Autores
Daz (1997) Daz (1997) Daz (1997) Buitrago (1990) Domnguez (1990) Garca (1996) Ponce de Len (1997) Fialho y Pinto (1997)

Adems se ha sealado que la composicin bromatolgica de estos productos fibrosos no reflejan su valor nutritivo potencial. Los factores que se han asociado con la disminucin de la calidad nutricional de estas fuentes y por tanto de su utilizacin son: la presencia de fibra diettica y los denominados factores antinutricionales. A continuacin se analizarn estos aspectos. Qu es la fibra diettica? Se puede considerar que las paredes celulares de las plantas son las fuentes principales de consumo de fibra diettica en la mayora de los alimentos. Ello permite definir la fibra desde el punto de vista nutricional como una fraccin heterognea cuyos componentes son resistentes a la actividad enzimtica del tractogastrointestinal (Trowel) Otros autores prefieren una definicin ms prxima a la fisiologa de la planta, as la fibra comprender a los polisacridos y la lignina que pertenece a la pared celular. A pesar de numerosas investigaciones, no se ha obtenido un acuerdo universal. De hecho esta falta de uniformidad para definir la fibra en los alimentos ya sean para el hombre o los animales se atribuye a la estructura compleja de su pared celular, la que se halla compuesta por varios polmeros. Entre ellos se destacan cinco componentes mayoritarios: Los polisacridos estructurales que constituyen las paredes celulares de los vegetales que son los homopolisacridos (celulosa) y heteropolisacridos (hemicelulosa y pectina) y que forman los carbohidratos insolubles llamados polisacridos no almidones, las gomas (polisacridos de reserva) y la lignina, compuesto fenlico que une los grupos anteriores. Tambin se hallan presentes alginatos, xiloglucanos, dextrana, inulina, glucanos y

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polisacridos no sintticos, as como pequeas cantidades de protena, polifenoles de alto peso molecular, cutinas, cido ftico y almidn resistente (Penago, 1993 y Polty, 1996) (figura 1).Es mas, la estructura qumica, as como la organizacin de los polmeros en la pared difiere ampliamente de acuerdo con el origen botnico de la planta ( por ejemplo leguminosas o gramneas) Bsicamente, la pared celular de la planta est compuesta de microfibrillas de celulosa que forma un fuerte enrejado que le da rigidez a la planta. Estas microfibrillas estn embebidas en una matriz compuesta de un enrejado de lignina (unidades de fenilpropano) que cementan otra matriz de polisacridos (ms alguna glicoprotena), tal como hemicelulosas (arabinoxilano, xiloglucano y pectinas. Estos polmeros tienen diferentes proporciones de acuerdo a la estructura de la pared celular). Por ejemplo, a medida que la planta envejece, el enrejado de lignina de la pared secundaria se agranda hacia la pared primaria la que desaparece, incrustando las microfibrillas que, lo que conducen a una menor accesibilidad (fig 2.)
PLANTA Tipo de tejido Parenquima Borde de la pared Almacenamiento Sntesis Transporte Xilema Esclernquima No-Xilema Colnquima

Clulas especializadas Tipos de pared celular: pared primaria/pared secundaria Ajuste de los Biopolmeros en la pared de la matriz (uniones y enlaces)

No covalente

Covalente

Puentes de H (celulosa y xiloglucano)

Enlaces inicos (Puentes de Ca++ entre pestinas)

Esterificacin de Azcares (Pectinas)

Uniones fenlicas Cruzadas (entre lignina y PNC pectina-lignina

Biopolmeros

Polisacridos

Glicoprotena

Polifenlicos

Celulosas, PNC, pectinas Azcares

Glicoprotena Aminocidos

Suberina, Cutina, lignina Fenil propanoides Ceras, cidos grasos

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Figura 1. Estructura y composicin qumica de la pared celular de los alimentos( Tomado de McDoughall 1996 ). Entre los numerosos tipos de polmeros de la pared celular , hay que destacar 4 clases de polmeros insolubles en agua(lignina, celulosa, hemicelulosa y sustancias pcticas) y una clase de varios polisacridos no almidones solubles en agua ( arabinoxilanos solubles, pectinas y oligosacridos. La lignina es el nico polmero sacrido de la pared celular Es un enrejado complejo, ramificado y tridimensional construido por tres unidades de fenilpropano La lignina tiende a fijar a otros polmeros en su lugar, excluye el agua y hace la clula ms rgida y resistente contra varios agentes como las enzimas bacterianas. la mayora de los alimentos y los forrajes inmaduros contienen menos del 5% de lignina. Cuando se envejece la pared celular de la planta puede alcanzar hasta 12 % en el forraje. La celulosa es el mayor polmero estructural de la pared de la planta y el polmero ms abundante en la tierra. Es un homopolmero formado por cadenas lineales beta 1-4 unidas a unidades de glucopirasonil . Tiene un grado de polimerizacin de 8000 a 10000Las cadenas individuales agregan enlaces de hidrgeno para formar microfibrillas . que sirven como esqueleto de las plantas. La celulosa es soluble y parcialmente hidrolizada en soluciones fuertes de cido sulfrico (72%). Representa del 40-50% de las cscaras de las leguminosas y semillas oleaginosas; 10al 30% de los forrajes ; 3 al 5 % de las semillas de leguminosas. La mayora de los cereales contiene pequea cantidad de celulosa.) 1 al 5%) con excepcin de la avena.( 10% ). Las hemicelulosas son un grupo de polisacridos con menor grado de polimerizacin que la celulosa. Tiene un esqueleto de beta 1-4 unido a residuos de xilosa, manosa o glucosa que pueden formar una gran cantidad de enlaces de hidrgeno con la celulosa. Los xiloglucanos son la principal hemicelulosa de las paredes primarias en las plantas dicotiledneas ( en los vegetales y semillas), en tanto que la unin de glucanos mixtos beta,3 4 y los arabinoxilanos son las hemicelulosas predominantes en las semillas de cereales( los dos ltimos incluyen en parte los polmeros insolubles y solubles en agua. Las henicelulosas incluyen otros hetropolmeros ramificados entre los que se hallan los arabinogalactanos ( en la soya) ,galactomananos (semillas de legumbres ). Cuantitativamente, las hemicelulosas constituyen entre 10 a 25% de la materia seca (MS) de los forrajes y subproductos agroindustriales ( afrecho, cscaras, semillas y pulpas ). Y alrededor de 2 al 12% de los granos y races. Las pectinas se componen de un esqueleto lineal de cido poligalacturnico siempre ramificado con azcares neutras (principalmente arabinosa y galactosa). Este esqueleto lineal se interrumpe de vez en cuando, por unidades de l-ramnosa , lo que conduce a una desvicin del eje. Las sustancias pcticas corresponden con varias clases de polmeros, incluyendo las pectinas (esqueletos de ramnogalacturanos y cadenas laterales de arabinosa y galactosa.) y polisacridos neutros (arabinanos, galactanos y arabinogalactanos que se asocian frecuentemente a las pectinas. Las sustancias pcticas se hallan en la capa media de las clulas de la pared, especialmente en la pared celular primaria (tejidos jvenes) de las plantas dicotiledneas. Las pectinas de la capa media sirve en el tejido de las plantas como goma cementante que une a las clulas. Las pectinas se hallan en relativamente alto nivel en las plantas leguminosas y en la pared de los frutos. Una de las principales fuentes de pectinas en la alimentacin animal es la pulpa de ctricos y de remolacha. Las plantas leguminosas contienen 5-10%, por ejemplo la alfalfa. En los cotiledones de las semillas de legumbres, las pectinas total (insoluble y soluble) alcanza 4-14% de la MS, tal como guisante, lupimo blanco etc. Los polisacridos solubles y oligosacridos incluyen molculas con un grado de polimerizacin que de 15 a ms de 2000 ( beta glucanos ). La mayora de ellos son insolubles en agua : etanol 80:20. Se hallan

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en bajos niveles en los ingredientes de los alimentos animales. Se hallan hemicelulosa soluble tal como arabinoxilanos en trigo, avena y cebada aproximadamente de 2--4% MS). Y beta glucanos (en cebada y centeno 1-3% MS), oligosacridos tales como alfa galactsidos (en lupino, guisantes o semillas de soya, 5-8% de la MS).y sustancias pcticas solubles ( pulpas de frutas o remolachas, 10% MS ). As, es importante tener en cuenta que la fibra diettica no es una simple suma de compuestos aislados, sino que es una UNIDAD BIOLGICA que segn el tipo de planta o alimento, variar la presencia o proporcin en que estos se combinan entre s; con sus propiedades intrnsecas e influyan de manera importante en la fisiologa digestiva de los animales y la consuman. Caracterizacin de la matriz fibrosa
La complejidad de la matriz fibrosa de los alimentos ha dificultado su caracterizacin. En un taller realizado en Holanda 1998 por el proyecto PROFibra de la Comunidad Econmica Europea, se plante que la caracterizacin de la fibra diettica comprenda el conocimiento de la composicin qumica de los componentes de la pared celular (estructura primaria), de los aspectos estructurales de los polisacridos constituyentes (estructura secundaria) y la denominada estructura terciaria o arquitectura de la fibra que se refiere a la relacin estructura y comportamiento funcional de los componentes de la pared celular y sus efectos fisiolgicos. Esta estructura ha sido poco explorada y ello constituye la principal limitacin para conocer el comportamiento de la fibra diettica en los alimentos durante el trnsito digestivo.

No obstante, el primer reto a que se enfrentan los fisilogos para una mejor comprensin acerca del papel de la fibra en las especies monogstricas es encontrar tcnicas analticas apropiadas para estudiar la composicin qumica de la fibra dietaria. Un resumen de los principales mtodos utilizados se muestran en la tabla 2. Tabla 2. Mtodos utilizados para la determinacin de fibra y su especificidad relativa al mtodo de Prosky (1984) Indicadores
Mtodo Fibra bruta (Weende, 1887) Fibra neutra detergente (FND) (Goering y Van Soest, 1970) Fibra cido detergente (FAD) (Goering y Van Soest, 1970) Enzimtico gravimtrico (Prosky, (1984 Enzimtico qumico (Engliyst, 1989) determinados Celulosa, lignina, hemicelulosa Celulosa, lignina, hemicelulosa, pectina Celulosa, lignina, hemicelulosa (-) Fibra diettica total soluble e insoluble Determina y diferencia los polisacridos de la fibra diettica

% del nivel terico estimado

Celulosa 75 100 100 Hemicelulosa 25 75 75 Lignina Pectina 50 100 100 0 0 0

Relacin
A FDT Menos Menos Menos

Mtodo de referencia Ms

100

100

100

100

Fuente: Scheeman(1989) y Savn (1996)

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Los mtodos enzimticos gravimtricos y/o enzimtico-qumico al representar los procesos digestivos que tienen lugar en el tracto, permiten determinar con ms exactitud el contenido de fibra diettica en los alimentos.

Por otra parte, en las especies monogstricas la fibra diettica no se clasifica slo atendiendo a su composicin ,sino al grado de solubilidad en agua con lo que se asumen los conceptos de fibra diettica soluble y fibra diettica insoluble composicin qumica de los componentes de la pared celular (estructura primaria), de los aspectos estructurales de los polisacridos constituyentes (estructura secundaria) y la denominada estructura terciaria o arquitectura de la fibra que se refiere a la relacin estructura y comportamiento funcional de los componentes de la pared celular y sus efectos fisiolgicos. Estas fracciones se caracterizan por tener efectos fisiolgicos diferentes (ver Fig 2) debido a lo cual constituye una necesidad conocer sus componentes cualitativa y cuantitativamente para predecir desrdenes nutricionales y de salud.
FD FDS FDI

glucanos
Pectinas Gomas Muclagos Hemicelulosas solubles

Celulosa Lignina Hemicelulosa insoluble

Maz, trigo Ctricos Vegetales

Harinas integrales Follaje de leguminosas Gramneas

ANTINUTRIENTES Reguladora de la funcin del tracto gastrointestinal

Figura 2. Clasificacin de la fibra diettica, fuentes de procedencia y principales efectos fisiolgicos (Tomado de Potty 1996) La composicin qumica de la pared celular de los alimentos fibrosos pueden variar segn la naturaleza y origen de la fibra (Mastrapa et al. 1996 y Savn et al. 1998). Estos ltimos, caracterizaron la pared celular de las harinas de follaje tropicales y las compararon con el maz y la alfalfa encontrando que la fibra diettica total de las harinas del follaje de pltano y canavalia duplicaban el valor informado para la alfalfa (tabla 3).

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Tabla 3. Fraccionamiento de la fibra dietaria en harinas de follajes tropicales Fuente Fibrosa

Medicago sativa Canavalia ensiformis Lablab purpureum Vigna unguiculata Variedad Habana 82 Variedad Trpico Musa paradisiaca Tricantera gigantea Zea mays

FDtotal
39.87 74.05 69.92 48.89 57.81 71.08 45.26 28.02

FB
30.0 32.0 25.5 43.2 -

FND
27.61 52.79 43.46 40.13 68.57 35.33 27.36

FAD Lignina
25.54 46.17 41.08 38.28 27.71 40.64 27.26 13.20 7.75 11.92 12.20 9.9 6.34 6.05 10.76 2.73

Celulosa
12.09 35.08 31.07 19.32 22.12 15.61 13.21

Hemicelulosa
5.87 17.46 16.12 14.58 11.44 27.83 6.76 14.16

Fuente: Savn et al., 1999 Otro aspecto fundamental es la determinacin de la estructura de los componentes de la pared celular de la fibra. En el caso de los alimentos fibrosos no convencionales es notorio el trabajo realizado en Cuba por Marrero (1998) quien compar la estructura de la fibra neutra detergente de la harina de caa con la del maz y otro producto obtenido por un procesamiento biotecnolgico de la harina de caa (Saccharina) mediante microscopa electrnica y procesamiento digital de imgenes. Como resultado observ que el tipo de fuente y el procesamiento tecnolgico influan en la estructura de la fibra. Adems, las fuentes no convencionales tuvieron un mayor contenido de esclernquima, como ha sido descrito en otras harinas y forrajes tropicales, lo cual sugiere un mayor grado de madurez o engrosamiento de la planta, lo que puede hacer menos aprovechable a la harina de caa respecto al maz. En otro experimento Savn et al (2000) estudiaron los grupos funcionales de la fibra neutro detergente de harina de follaje de Vigna unguiculata y la de la harina de follaje de alfalfa y hallaron una gran similitud en las absorciones debido a la presencia de polisacridos (celulosa) pero las absorciones del grupo ster fueron ms intensas en la alfalfa en tanto que la Vigna unguiculata, var. Habana82 la present para el grupo amida. Con respecto a la estructura terciaria que determina la relacin estructura funcin de los componentes de la pared celular y sus efectos fisiolgicos (Mc Doughall et al 1996) el problema se centr en las tcnicas fsicas disponibles para el estudio de la matriz fibrosa y sus propiedades en el sitio de accin propuesto. En la actualidad se han manejado dos mtodos para estudiar la arquitectura de la fibra: el propuesto por Gidley (1998 ) que utiliza la espectroscopa de resonancia magntica nuclear y el de Chesson (1998 ) que emplea la adsorcin de gas y las tcnicas de imgenes .Estos mtodos se han investigado en alimentos fibrosos convencionales y hasta el momento no se ha realizado ningn trabajo en fuentes fibrosas no convencionales. Propiedades fsico-qumicas de la fibra diettica Los mecanismos especficos por los que la fibra diettica acta sobre diversas funciones gastrointestinales y metablicas no han sido totalmente aclaradas . Se considera que las propiedades fsicas de la FD son una de las causas principales de los efectos fisiolgicos que se producen al

252

administrar los alimentos fibrosos a los animales monogstricos. Por ello, la determinacin de estas propiedades tiene un valor preponderante, aunque no nico, en la prediccin de la influencia de las funciones del tracto gastrointestinal de los animales (Ruz, 1991 y Southgate, 1998). La calidad de la fibra se modifica considerablemente por sus propiedades fsicas, las que pueden ser independientes de su composicin qumica. Factores como tamao de partculas, volumen, solubilidad y propiedades de superficie como la capacidad de adsorcin de agua, capacidad bufferante o tampn, capacidad de intercambio catinico, viscosidad y fermentabilidad, pueden influir en procesos biolgicos como el consumo y digestin de nutrientes. De ah, la importancia de su determinacin, si se pretende introducir alimentos altos en fibra en la alimentacin de aves y cerdos, aunque en la literatura consultada no existe ningn trabajo al respecto. Recientemente, Savn et al (1999) recopilaron, modificaron y validaron las tcnicas para determinar algunas propiedades fsico qumicas de alimentos fibrosos y las utilizaron en el anlisis de fuentes tropicales no convencionales. Los resultados se muestran en la Tabla 4. En general se observ un aumento del volumen de la fibra y de la capacidad de absorcin de agua en las fuentes no convencionales respecto al maz, lo que demuestra que estos alimentos tienen menor probabilidad de solubilizarse en agua y su mayor capacidad de adsorcin de agua pudiera ser favorable para la fibra, ya que la humedad facilita la hidrlisis de las enzimas celulasas. Tabla 4. Propiedades fsicas de la fibra dietaria de fuentes fibrosas tropicales
Fuente fibrosa
Leguminosas Harina de follaje Medicago sativa Lablab purpurea Canavalia ensiformes Vigna unguiculata Variedad Habana 82 Leucaena leucocephala Variedad Per Cajanus cajan Harina integral Styzolobium aterrimun Lablab purpurea Gramneas Saccharum officinarum Variedad Jaron 62 Otras fuentes fibrosas Centrosema pubescens B Trichantera gigantea Zea mays Harina de ctricos Alimentos obtenidos por va biotecnolgica Saccharina Citrona

Solubilidad Volumen % ml/g

Capacidad adsorcin agua g/g FND

7.49 6.06 6.58 7.84 5.52 6.08 6.07 6.73

Capacidad bufferante meq meq de base de cido

0.36 0.30 0.30 0.20 0.28 0.24 0.53 0.36 0.35 0.02 0.29 0.39

Capacidad Intercambio catinico meq/g FND

26.50 22.50 23.50 22.00 16.02 18.58 22.50 20.00

3.10 5.93 4.4 2.35 1.89* 4.75 3.04 3.09

0.64 0.93 -

39.00 21.32 49.50 22.00 23.00 25.50

7.94 3.43 2.31 1.71 2.42 7.01 2.27

6.99 6.82 5.57 1.39 7.45 7.57 6.53

0.30 0.55 0.67 0.33 -

0.64 0.65 0.63 0.51 -

0.20 0.59 0.63 0.19 -

253

En cuanto a las aves y cerdos, las caractersticas sealadas podran afectar el tiempo medio de retencin de las digestas, a travs de un efecto mecnico o laxativo en el tracto gastrointestinal con un aumento del peso y volumen de las excretas (Sosulski y Cadden, 1982 y Eastwood, 1992). Adems, el aumento del trnsito intestinal provocar una menor absorcin de nutrientes y energa (Saura-Calixto, 1988). Tambin se hall una disminucin de la CIC de las fuentes ms voluminosas, lo que se relacion con la menor composicin en fibra diettica soluble respecto al cereal tradicional y un aumento en el contenido de lignina con menor nmero de sitios intercambiables libres. Esta caracterstica puede contribuir al incremento del poder tampn de estas fuentes fibrosas en el TGI. El anlisis de correlacin realizado entre el fraccionamiento qumico de la porcin fibrosa y las propiedades fsicas de estos alimentos mostr altas correlaciones para algunos indicadores (tabla 5).
Tabla 5. Correlaciones de mayor inters entre los indicadores qumicos y las propiedades fsicas de algunas leguminosas tropicales

Fuente fibrosa
Medicago sativa

Indicadores
Capacidad buffer FAD CAA - lignina CAA Fe Lignina Fe Lignina celulosa Volumen-FAD CAA Solubilidad Hemicelulosa Mn Capacidad bufer cida FND Solubilidad Ca Capacidad buffer cida volumen Celulosa Na Lignina Mn Volumen FAD Volumen Fe

Coeficiente de correlacin (r)

0.94* 0.93* 0.98** 0.97**

Lablab purpurea

0.99** 0.97** 0.91* -0.89* 0.88* 0.97** 0.90** 0.93** 0.95** 0.95* 0.97* ** P < 0.01

Stizolobium aterimum

Vigna unguiculata Variedad Habana 82 P < 0.05

La fibra diettica y sus efectos fisiolgicos en el TGI de aves y cerdos

El conocimiento de las propiedades fsico qumicas de la fibra diettica y sus implicaciones en la fisiologa digestiva de los animales permite optimizar su utilizacin en la dieta.

Se ha planteado que la fibra diettica, a travs de sus propiedades fsico qumicas de sus componentes solubles e insolubles puede ejercer varios efectos fisiolgicos a lo largo del tracto gastrointestinal de aves y cerdos. La magnitud con que esto tiene lugar depende de la forma fsica y naturaleza qumica (fuente y procedencia, tipo de fibra de que se trate, procesamiento a que fue sometida, adems de la adaptacin y caractersticas del animal (edad y peso vivo). Los efectos fisiolgicos ms importantes son el efecto en el consumo voluntario en las secreciones digestivas y absorcin en el trnsito intestinal y metabolismo lipdico. Un resumen de lo anterior se muestra en la tabla 6.

254

Tabla 6.

Propiedades fsicas de la fibra diettica y posibles mecanismos involucrados en la modificacin de los estados fisiolgicos de asimilacin.

Proceso fisiolgico
Consumo

Propiedades de la Fibra diettica

Volumen Capacidad de adsorcin de agua Dilucin energtica Volumen Tamao de partculas Capacidad de adsorcin de agua Capacidad de adsorcin de agua Capacidad de intercambio catinico Arquitectura Carcter hidrfobo Relacin Hemicelulosa Celulosa Estructura de la pared celular Capacidad de intercambio catinico

Mecanismo de accin
Mecnico Viscosidad Sabor hormonal Mecnico Viscosidad hormonal Viscosidad Adsorcin hormonal Velocidad de trnsito Crecimiento microbiano Potencial fermentativo

Velocidad de trnsito

Hidrlisis enzimtica y absorcin

Actividad microbiana

Fuente. Graham (1988). As, la inclusin de fibra en las raciones de aves y cerdos generalmente produce un incremento en el consumo de alimento para mantener el consumo de energa digestible. Sin embargo, el conocido efecto de limitacin en el consumo con altas concentraciones de fibra se atribuye a la voluminosidad de estas raciones y a la capacidad de retencin de agua de las porciones solubles de la fibra. Esto ltimo pudiera alterar los estmulos que regulan en consumo de alimentos. Los efectos de la fibra diettica en las secreciones digestivas son considerables. Trabajos clsicos de Zebrowska (1983) y Low (1989) refirieron incrementos en las producciones biliares y pancreticas de los cerdos que recibieron dietas altas en fibra. Las secreciones pancreticas se acompaaron de una mayor produccin de electrolitos y una mayor actividad de las proteasas y amilasas. Los mecanismos por los que puede influenciar las secreciones digestivas estn relacionados con la voluminosidad de la digesta y la capacidad de retencin de agua, aunque tambin se plantea un control hormonal, a travs de la secretina. Ciertos tipos de fibra diettica aumentan la viscosidad de la racin y de los contenidos intestinales, ocasionando un incremento en la secrecin del nitrgeno endgeno constituido por protena y DNA. Esto sugiere una exfoliacin de las clulas de la mucosa intestinal debido a una erosin mecnica. Por otra parte, las fuentes fibrosas pueden alterar el trnsito intestinal en diferentes secciones del tracto gastrointestinal dependiendo de su habilidad para formar geles. Se ha demostrado que la fibra diettica soluble afecta la motilidad intestinal y atrasa el paso de la digesta en el intestino. Esto no parece ofrecer beneficio alguno, ya que sus propiedades hidrfobas y adsortivas retardan la digestin y absorcin de los nutrientes (Periago et al., 1993). En tanto, la fibra diettica insoluble puede acelerar el trnsito intestinal. Esta aceleracin disminuye el tiempo disponible para la digestin y absorcin de nutrientes por lo que restringe la utilizacin de los mismos. As, los efectos de la fibra diettica insoluble (FDI) en

255

la motilidad intestinal depende de su nivel en la dieta y el tipo de fuente. Un alto consumo, por lo general, reduce el tiempo de trnsito, lo cual se atribuye a un aumento de su motilidad, debido a que las celulosas segn Cherbut et al. (1994) son las responsables de agrupar las contracciones en el complejo mioclectrico. Se puede decir que exista una relacin directa entre el contenido de FDI en la dieta (principalmente hemicelulosa y celulosa) y la velocidad a la cual los nutrientes transitan por el TGI. Adems, es necesario considerar que este incremento en el trnsito intestinal por la presencia de fibra se halla ntimamente relacionado con el tamao de partculas. De manera que una reduccin en el tamao de partculas o el volumen de las fuentes fibrosas disminuye la velocidad de trnsito de las digestas en el TGI del ave. Para comprobar lo planteado con anterioridad Marrero (1998) realiz un experimento in vivo donde evalu el efecto de las caractersticas de la FND de los alimentos no convencionales altos en fibra (la harina de caa fresca o biofermentada por un proceso biotecnolgico sencillo: Saccharina) en la velocidad del trnsito intestinal del pollo de ceba los nutrientes. Se pudo observar efectos del tipo de fuente fibrosa en el TMR de las partculas, el cual disminuy de manera significativa en la saccharina respecto a la harina de caa. Otro aspecto interesante es que en este experimento las dietas fueron formuladas a partir del consumo de FB y como se aprecia en un mismo intervalo de tiempo, el consumo de las fuentes fibrosas vari entre tratamientos.(Tabla7) Estas variaciones no tuvieron repercusin en la FB, pero s en la FND, lo que sugiere la menor idoneidad de la FB, para formular los piensos avcolas, sino la necesidad de hacerlo considerando el contenido de FND en la racin. Tabla 7. Efecto de las dietas experimentales en el consumo y tiempo medio de retencin de los alimentos en el pollo de ceba. Tratamientos Almidn, maz, soya desc.
114.32c 90.72 15.05c

Indicadores
Consumo de MS (g/da) Consumo de FB (g/da) Consumo de FND (g/da) Excrecin de MS (g) TMR (horas)

Almidn, maz. Harina Almidn,maz, Saccharina Sig. de caa Soya desc. Soya desc..
117.38b 7.31 10.65 84.79 16.95 122.02 7.60 12.84 86.66 16.07b ***

***

Ab valores medias con letras distintas en una misma columna son estadsticamente diferentes.
Fuente. Marrero, 1998

La fermentacin es otra caracterstica fsico qumica de la fibra que se ha comprobado que desarrolla un efecto fisiolgico en el TGI. Se ha observado diferencias en la capacidad de fermentacin entre diferentes tipos de fibra. Existe una relacin inversa entre la fermentacin de la fibra y el volumen fecal. A menor digestibilidad y fermentabilidad se obtendr un mayor volumen y peso de las heces. La utilizacin de fibras ms degradables con menor retencin de agua es favorable para la disminucin del volumen fecal, por lo que es necesario conocer la forma fsica del alimento. Las dietas ricas en polisacridos no almidn ( PNA ) provocan modificaciones en la morfologa intestinal, tanto en el cerdo como en las aves. En dependencia de la fuente se puede alterar la longitud y nmero de vellosidades en el intestino, as como la velocidad de proliferacin celular. En el pollo, por

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lo general, la inclusin de FDS provoca una aumento del recambio celular. La fibra dietaria puede afectar el tamao y peso del intestino. El uso de fibra diettica en los piensos de los pollos origina un alargamiento de los ciegos que segn Eastwood (1993) es la respuesta de un ajuste fisiolgico normal provocado por el aumento de tiempo de permanencia de las fibras en estos rganos y de la masa microbiana y productos finales de la fermentacin. En investigaciones realizadas por Hansen et al. (1992) y Zhao et al. 1995 se demostr que los cerdos que consumen dietas altas en fibra presentan un incremento del peso del hgado, rin y segmentos vacos del TGI con relacin al peso corporal. Estos resultados se han confirmado en dietas no convencionales altas en fibra, tanto en aves como en cerdos en diversos experimentos realizados por Rodrguez (1990), Ly (1995); Marrero (1999) y Savn (2000). Con relacin a las dietas fibrosas y la microflora del TGI de aves y cerdos se ha planteado que en dependencia de la fuente la presencia de fibra diettica provoca un aumento en la concentracin de bacterias celulolticas que a la vez se incrementaron a expensas de otros microorganismos. Este comportamiento es el signo ms importante de adaptacin en la utilizacin de la fibra. Contrariamente, las bacterias viables pueden no afectarse por la presencia de fibra. En general, hay ms de 500 especies de bacterias celulolticas en los ciegos y colon de aves, cerdos y conejos cuya actividad depende de los residuos indigestibles en esta zona, entre los que se encuentran almidones, carbohidratos y grasas (Varel, 1987). En los ltimos aos se ha sealado la presencia de hongos celulolticos y protozoos en el intestino grueso de especies monogstricas que reciben dietas fibrosas. Al respecto Rodrguez (1996) logr aislar hongos celulolticos analizados en el ciego de pollos a los que se les suministraba una dieta de pienso con niveles crecientes de un alimento alto en fibra (Saccharina). Como result se comprob que exista una relacin lineal entre el nmero de hongos celulolticos (r=0.72, P<0.001) y el nivel de fibra en la dieta, lo que confirm desde el punto de vista biolgico que el sustrato fibroso presente determina tanto el nmero como el grupo fisiolgico que en l se desarrolla. Lpez y Rodrguez (1996) tambin encontraron resultados similares en cerdos. Con respecto a los microorganismos ciliados se ha apuntado que estos provocan un incremento en la digestin de compuestos lignocelulsicos y la materia orgnica: como reguladores al reducir la intensidad de la fermentacin de los almidones y ejercer un efecto amortiguador evitar una produccin de AGCC que inhibe la actividad celuloltica. Se ha demostrado que niveles elevados de fibra en las raciones de las aves producen una reduccin en la absorcin del colesterol y de los lpidos al nivel intestinal Marrero 1997; datos inditos) Este efecto fisiolgico se debe a la fraccin soluble de la fibra (pectinas) y tambin a la lignina. Similarmente, la FDS puede disminuir indirectamente la sntesis de colesterol y de la insulina hormonal que interviene en su sntesis. Adems tienen caractersticas hipocolesterolmica los cidos grasos de cadena corta (acetato, propionato y butirato) que se producen en el coln como consecuencia de la fermentacin de la FDS (Lairon 1996). Por otra parte, la propiedad de intercambiar cationes de las fibras parecen restringir los movimientos de los Minerales. Tambin las dietas altas en fibras incrementan la excrecin fecal de calcio, hierro, magnesio y zinc. El cobre, el calcio y el zinc son pobremente absorbidos en el lumen intestinal (Prosky y De Vries, 1992).

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Utilizacin de la fibra diettica y aprovechamiento energtico. Se han utilizado diversos trabajos relacionados con la utilizacin de la fibra diettica y el aprovechamiento de las dietas en aves y cerdos. La eficiencia de utilizacin de la fibra depende de la fibra, depende de varios factores.

Naturaleza y nivel de fibra Vaciado gstrico y velocidad de trnsito Especie, raza, categora y estado fisiolgico Localizacin y grado de fermentacin de los microorganismos Extensin de la absorcin de los cidos grasos de cadena corta producidos

La fuente y el contenido de fibra de la racin influye en la digestibilidad de este nutriente. La magnitud de redaccin de la digestibilidad estar influenciado por el origen y composicin de la fibra y su nivel de inclusin en la dieta, y segn Chabeauti et al (1991) existe una alta correlacin (N=0.98) entre la digestibilidad aparente de energa y la de los polisacridos no amilceos contenidos en la dieta, sobre todo si haban sustancias pcticas en las dietas.

Adems de la pectina, la hemicelulosa es otro constituyente de la pared celular de los vegetales que considerablemente degradada por los cerdos. La hemicelulosa est presente en un promedio de 10-25 % en la MS de los forrajes de muchos subproductos individuales y en apenas 2-12 % en las races. De acuerdo con Ferrera (1990) esa mayor digestibilidad de la hemicelulosa probablemente se deba a una mayor reactividad de algunos de sus enlaces qumicos a la acidez gstrica, de tal forma que los productos resultantes queden expuestos a la digestin intestinal. Con relacin al nivel de fibra se conoce que por lo general, un aumento en el contenido de este nutriente en las raciones de monogstricos, conlleva a una disminucin del tiempo disponible para la fermentacin en el intestino, lo que finalmente deprime la digestibilidad de las fracciones fibrosas. Un ejemplo de lo anterior se muestra en la tabla 8. Tabla 8: Fraccionamiento de la fibra de las heces de cerdos que reciben las dietas experimentales. Indicador
FND FAD Hemicelulos a Celulosa Lignina Rel. H/C Rel. H/L
*** p<0.001

Control (trigo /soya)

42.92b 23.34 19.58b 10.64 3.93c 1.84 4.98
*p < 0.05

Tratamientos trigo /soya trigo /soya 10 % Vig ung. 20 % Vig ung

46.70 26.60b 20.10b 18.09b 5.98b 1.11 3.36 45.86ab 30.13c 15.73b 20.05c 6.23b 0.78 2.52

trigo /soya 30% Vig ung

48.42 32.44d 15.98 19.01d 6.78 0.84 2.35

ES+ Sing
1.05* 0.63*** 0.73*** 0.28*** 0.10***

abc: medias con superndices distinto difieren a p<0.05 Duncan (1955).

Fuente. Savn 2000 Llama la atencin un experimento realizado por Marrero et al 1995 en pollos de ceba a los que se incluy niveles crecientes de 1.5 unidades de FND en la MS aportada por la Saccharina. Como resultado obtuvieron que la digestin se vio influida por el nivel de fibra diettica y que contrariamente

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a lo sealado por Carr et al (1990), los pollos utilizaron con cierta eficiencia las fracciones insolubles de los alimentos (tabla 9). Tabla 9. Retencin aparente de los componentes de la pared celular del pienso en pollo de ceba. Indicador %
Retencin aparente FB Retencin aparente FND Retencin aparente FAD Hemicelulosa Celulosa

Tratamiento (% FND en la MS) 14.01 15.01 16.07 17.58

35.06 35.74

ES
3.20*** 2.20++ 2.80** 2.26*** 3.40**

32.52 38.41

34.57 35.54

3.20b

26.39

27.44

37.53 41.83 40.8b

43.28 31.14b 66.88

26.87b 14.58c 36.18c

28.36b 48.47b

Obsrvese que la utilizacin de la celulosa se increment de modo proporcional al consumo de FND hasta el tratamiento III (16-07) para poder explicar lo anterior se deben considerar varias cosas.
En trminos de tracto gastrointestinal y su funcin las aves presentan sitios de reciclaje de las partculas fibrosas que les permite hacer un uso ms eficiente de la fibra diettica, al atrasar el trnsito a travs del tracto, reexponer la digesta a las secreciones gstricas e incrementar su digestibilidad (Rodrguez, 1995). El tamao de partculas de los piensos, (< de 1 mm) produjo un mayor estmulo mecnico que debi favorecer la funcin del esfinter ileocecal. Incremento de la actividad de los microorganismos del ciego con una adaptacin fisiolgica que aumente su capacidad digestiva ante la presencia del tipo y nivel de fibra. Disminucin de la cristalinidad de la celulosa. Inclusin de fibra dietaria mejorada respecto al control. La no afectacin de las proporciones de MS consumida en relacin al consumo de FND.
Diversos trabajos realizados con otras fuentes fibrosas han demostrado que la digestibilidad aparente de materia seca, de energa y de protena bruta disminuye significativamente con el aumento del nivel de fibra (Van Soest 1985, Rodrguez et al 1988, Savn et al 1994, Marrero 1999 y Savn 2000 (indito).

Con respecto a los mtodos utilizados para la determinacin de la disponibilidad de nutrientes, tradicionalmente se han empleado tcnicas in vivo y ello demanda animales, instalaciones y alimentos, que aumenta los costos y el rechazo por parte de los especialistas. Esto ha conllevado que durante los ltimos aos se hayan desarrollado procedimientos in vitro que simulan los procesos digestivos en animales de estmago simple y permitan determinar a corto plazo la biodisponibilidad de las materias primas utilizadas en la alimentacin de animales monogstricos. Estos incluyen trabajos realizados por varios autores Graham et al 1985, Lowgren et al 1992 en cerdos y Sakamoto y Asoor (1980) y Clunies y Leeson (1984) en aves. Estos mtodos se basan en una simulacin de la digestin intestinal obtenida de un cerdo canulado a la que es sometida el alimento en cuestin. Estas tcnicas in vitro fueron validadas contra los mtodos in vivo y se obtuvieron correlaciones aceptables 0.87 y 0.90 respectivamente.
El reconocer la similitud existente entre la eficiencia digestiva de las especies monogstricas el contenido intestinal del cerdo in vitro se puede extrapolar a otros animales de estmago y en principio hace una buena estimacin de los procesos digestivos in vivo, ya que la biodisponibilidad de los sustratos es el factor

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determinante, aunque como en otros mtodos in vitro, al no considerar los factores antinutricionales o estados fisiolgicos de los animales, los valores obtenidos pueden ser sobreestimados.

En realidad estas tcnicas se han utilizado en la evaluacin de alimentos convencionales por lo que en el Instituto de Ciencia Animal, Savn et al 1997 propusieron una metodologa basndose en el mtodo de Lowgren para la evaluacin de alimentos fibrosos para cerdos. Posteriormente Marrero (1998) propuso la utilizacin del inculo fecal de cerdo para determinar la digestibilidad de los nutrientes en pollos de ceba. En ambos casos los autores obtuvieron errores de sesgos y de regresin aceptables entre los coeficientes de digestibilidad de FND. Ver tabla 10. Tabla10. Validacin in vitro e in vivo para la digestibilidad total de la FND en aves y cerdos* Indicadores Aves
FND Media real Media estimada Proporcin del error Sesgo Regresin Aleatorio 24.51 24.05 0.000006 0.32 0.67

Especies Cerdos
42.77 42.85 0.000028 0.36 0.63

* Se evaluaron el maz, harina de caa y Saccharina en cerdos y el maz y saccharina en las aves. Tambin Ly et al 1997 concluyeron varios experimentos en Vietnam donde desarrollaron un nuevo mtodo in vitro para estimar la digestibilidad de la MS de alimentos tropicales (entre los que se encontraron los ricos en pared celular vegetal) a partir de su valor de lavado. Con relacin a la utilizacin de los nutrientes, al parecer, en las aves domsticas no existe limitacin para la utilizacin de la celulosa, sino a ciertos niveles de fibra en el pienso. Segn Ruiz (1991) entre el 10 y el 80 % de la fibra que escapa a la accin enzimtica del TGI superior sufre un proceso de fermentacin en los ciegos, bajo determinadas condiciones de pH (6.7-7.8) y de temperatura (39-41C). Existe diferencia entre especies de aves en la capacidad para asimilar determinados niveles de fibra. As, las ocas y patos consumen grandes cantidades de forraje si se le suministra; otro tanto ocurre con los guineos y patos. La eficiencia de utilizacin se relaciona estrechamente con la velocidad de trnsito intestinal, la que presenta grandes variaciones entre las aves de corral. As, en pollos y pavos, el tiempo medio de retencin es de 12-24 horas; menos de 12 horas en patos y gansos y los avestruces muestran un tiempo de pasaje muy lento, lo que le garantiza mayores posibilidades para digerir materiales lignocelulsicos (Smith y Sales, 1996). El punto crtico en la utilizacin de dietas con alimentos alternativos ricos en fibra es el consumo. Es evidente que sea por falta de capacidad de un tracto no distendido se limita el consumo de una dieta diluida el animal quedar por debajo de sus requerimientos. La adaptacin a dietas fibrosas puede demorar ms de 4 meses en ponedoras (Rodrguez y Velazco, 1995), y sta es la causa de que estos autores recomendaban incluir volmenes mayores de fibra en el alimento de las pollonas durante el crecimiento, si despus en la madurez van a recibir dietas no convencionales. Tambin la edad y peso vivo tienen efecto en la digestibilidad de la fibra. Los animales jvenes son ms sensibles a la utilizacin de altos niveles de fibra (Carr, 1984; Debner et al 1968). Cuando se

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compara los cerdos en crecimiento con las cerdas, los coeficientes de utilizacin digestiva de la fibra son ms altos para las cerdas. Las cerdas estn ms adaptadas al uso de la energa de los alimentos altos en fibra. Estas diferencias fueron ms pronunciadas a medida que se incrementa el nivel de fibra. Entre los factores que favorecen la digestin de la fibra en las cerdas se halla el poseer un mayor nmero intestinal con un menor trnsito digestivo debido a menor nivel de ingestin. Sin dudas, la restriccin de alimento relacionada al consumo voluntario es ms alta para las cerdas que los cerdos en crecimiento. Las dietas altas en fibra son ms utilizadas durante la gestacin, debido a las elevadas necesidades de la lactacin. Se ha valorado la introduccin de alimentos no convencionales altos en fibra (Daz et al 1993) sin efectos perjudiciosos en el comportamiento reproductivo. Sin embargo, los estudios de digestin de la fibra tienden a disminuir de los inicios de la gestacin al perodo intermedio y disminuye de ste al perodo final de la gestacin. Con relacin al sitio de digestin de la fibra aunque durante mucho tiempo se ha conocido que el ciego y el colon son los lugares donde tiene lugar la fermentacin de la fibra, estudios realizados con cerdos canulados han revelado que existe alguna degradacin especialmente con algunas leguminosas fcilmente fermentables como la pulpa de ctricos (Dierick 1989). Savn, et al (1994) encontraron valores ms elevados de degradacin a nivel ileal de componentes de la pared celular en dietas no convencionales de harina de caa Estos autores hallaron bacterias y hongos celulolticos (1011 ufc/ml/ en esta regin, lo que pudiera explicar estos resultados. El intestino grueso de las aves es el nico lugar posible para la fermentacin microbiana de las fibras. Con frecuencia la longitud de los ciegos ha sido relacionada directamente con la capacidad de digestin de la fibra. De la fermentacin microbiana de la fibra se obtienen como productos finales los cidos grasos de cadena corta (AGCC) los que constituyen entre el 0.2 y 1 % del contenido cecal a partir de la glucosa. Se obtiene en primer lugar acetato y en menor cantidad propionato y butirato, los cidos isovalrico, valrico, lactico y gases como H., CO2 y metano. El metano carece de importancia biolgica en los monogstricos solucionado en las aves. La produccin de AGCC en el intestino grueso de aves y cerdos est relacionada con el tipo y nivel de fibra en la dieta. La concentracin de AGCC en el intestino grueso aumenta linealmente con el incremento de FND. En general, un aumento significativo en los niveles de fibra de la dieta origina un incremento en la razn acetato/propionato. Las dietas que contienen forrajes tienden a producir una preponderancia del cido actico, el que puede variar entre 60-75 %. Las variaciones pueden deberse al tipo de forraje y a su estado de madurez. En estos casos el cido propinico tiende a ser 17-19 % y el butrico 8-12 %. El propinico y el butrico estn inversamente correlacionados con el metano lo que pudiera favorecer un aumento de la relacin propinico: butrico. En ocasiones la inclusin de fuentes fibrosas en sustitucin parcial del maz en las aves es mucho menor que en otras especies y por tanto pudiera favorecer el patrn de fermentacin propinico.

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Tambin hay que tomar en cuenta que en el ciego de los pollos el Propionibacterium fue identificado como uno de los ms abundantes (Salanitro et al 1978). Tambin se ha observado en otras especies monogstricas como el conejo, la conversin del actico a butrico y el predominio de este ltimo por dominancia del Butirivibrium Spp (Bellier et al 1995). Algo similar pudiera ocurrir en las aves. Estos resultados proporcionan beneficio para el ave, ya que el cido propinico es de naturaleza glucognica lo que hace que se relacione de modo positivo con la produccin de carne. Otro aspecto interesante sera el papel del cido butrico, ya que las clulas del ciego tienen preferencia por el mismo como fuente energtica. Los AGCC producidos en el TGI se metabolizan en la mucosa, stos son transportados eficientemente y cantidades considerables pueden llegar a sangre para su metabolizacin posterior. Se considera que el aporte de los AGCC es de 25-30 % para los requerimientos energticos del mantenimiento en el cerdo, 50 % en el conejo y 17 % en los pollos. La produccin de AGCC en los gansos no es significativa respecto a la que se produce en los pollos en los que la tasa de produccin mayor es para los acetatos, mientras que la tasa de absorcin mayor corresponde al butrico. En el avestruz el 70 % de la energa de mantenimiento se puede obtener de los AGCC (Smith y Salis, 1996). Tales aportes tienen importancia en los animales adultos alimentados con plano nutricional normal, ya que en los animales en crecimiento este aporte es menor. Los datos sobre la utilizacin por las especies monogstricas de la energa de la porcin fibrosa son escasos. En la tabla 11 se observa un trabajo realizado en el que se muestran los aspectos sealados. Tabla 11. Efecto del nivel de fibra diettica en el patrn fermentativo y el aporte energtico de los AGCC en el ciego de los pollos
INDICADOR TRATAMIENTOS % FND en la MS alimento 14.01 15.51 16.07 17.58 57.82 21.53 10.16 22.23a 2.08 2.20 11.23 60.23 20.06 14.46 16.70b 2.13 2.13 11.37 58.46 23.56 15.03 23.09 2.22 2.22 12.95 58.98 20.48 17.01 14.31b 1.87 1.87 11.01

% Molar Actico Propinico Butrico AGCC Producidos/100 g dieta Aporte energtico de los AGCC, MJ/100 g de dieta Aporte energtico como % de la EM consumida Aporte energtico de los AGCC a la energa de mantenimiento,%

a,b Letras diferentes de una misma fila difieren estadsticamente Fuente. Marrero (1998)

Para la determinacin del aprovechamiento energtico de la fraccin fibrosa se han seguido varios mtodos. En el Instituto de Ciencia Animal se ha desarrollado un mtodo in vitro que permiti a partir del anlisis de AGCC totales e individuales calcular el balance estequiomtrico de sus porcentajes molares segn Hungate (1966) y realizar estimaciones del aporte energtico al metabolismo animal.

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De todas formas, la eficacia de transformacin de AGCC en energa mediante la fermentacin de la fibra es menor que la eficacia de aprovechamiento de los carbohidratos solubles como la glucosa en el proceso de digestin enzimtica. En los cerdos la primera representa el 75 % de la segunda. Debido a lo expuesto anteriormente se desprende que se debe establecer la bsqueda de varias vas en la optimizacin del uso de las fibras dietticas para transformar las dificultades del proceso digestivo de cada especie. Mtodos para mejorar la utilizacin de la fibra. Se han ensayado varios mtodos con el objetivo de intentar la solucin a las dificultades nutricionales que aporta la fibra diettica y a la vez incrementar su aporte energtico. Entre ellos se hayan los mtodos mecnicos, fsicos (calor, presin) qumicos (tratamiento con NaOH, urea y amonaco). Recientemente se ha estudiado el uso de suplemento enzimtico (gluconasa, pectinasa, pentosanas y fitasas) que aumenta la capacidad digestiva de los animales degradan los polisacaridos no almidones formadores de geles, las paredes celulares y las protenas, adems de facilitar el rompimiento de las sustancias antinutricionales (Flachowsky 1999; Harberer et al 1999). Esta suplementacin reduce los costos de alimentacin y mejora los desordenes digestivos sobre todo en animales pequeos a la vez que aumenta la velocidad de crecimiento y utilizacin de los alimentos en cerdos y aves. De los numerosos trabajos revisados en la literatura se puede estimar que la suplementacin enzimtica mejora la conversin en un 4 % en cerdos, 5-10 % en aves e incrementa la ganancia diaria en 5 % en ambas especies, reduce el costo/kg de ganancia y tonelada de alimento sin empeorar el comportamiento productivo estudiado. Otros mtodos analizados han sido la inoculacin de bacterias y hongos celulticos y protozoos que deslignifican la fuente fibrosa y permite un uso ms eficiente de ellas por el animal. Al respecto en el Laboratorio de Biotecnologa del Instituto de Ciencia Animal Valio et al han logrado aislar cepas hiperproductores de celulasa del gnero Trichoderma y Penicillium que incluso puede degradar componentes de alto peso molecular de la lignina como es el caso de este ltimo. As Valio et al (2000) lograron disminuir el contenido de FND, incrementar la digestibilidad de la celulosa y reducir a la mitad el contenido de taninos condensados en la harina de follaje de Vigna unguiculata con la inoculacin de la cepa Trichoderma viride 137 MCX, (Ver tabla 12) Tabla 12. Indicadores de fibra en la combinacin (80/20) de vigna-bagazo durante la fermentacin slida con el hongo T. viride 137 MCXI. Indicadores (%) 0 24 48 72 96 120 144
FND FAD Celulosa Lignina Hemicelulosa Contenido celular 66.02 53.67 36.27 14.48 12.35 33.98 65.78 49.21 33.14 11.71 16.56 34.23 64.35 52.84 33.84 12.20 11.51 36.65 61.8 49.22 31.81 13.20 12.58 38.20 53.22 45.48 27.17 12.74 7.74 46.78 58.86 47.46 27.65 12.78 11.38 41.16 58.88 52.64 29.35 13.5 6.30 41.06

P<0.001 (Valio et al 2000 (Indito)

El efecto positivo de la digestin de los nutrientes por el uso de fuentes fibrosas fermentadas haba sido estudiada con anterioridad por Sandberg y Svanberg, 1991, Svanberg et al 1993 y Yodov y Khetapoul 1995 a partir de esas fermentaciones del alimento con Saccharomyces diastaticus, S. cerevisiae y lactobacilos se observaron mejoras en la biodisponibilidad del hierro y eliminacin de factores antinutricionales. Tambin Yodov y Khetapoul (1995) observaron que la fermentacin de las

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leguminosas provoc una disminucin de los inhibidores de proteasas y amilasas, as como la destruccin de fitatos taninos y polifenoles. En general, en estas fuentes fibrosas mejoradas se ha obtenido un aumento importante en la digestin de almidones, protenas y cenizas. El efecto se logra por dos mecanismos: eliminacin de factores antinutricionales o por ataque directo de los microorganismos a la fraccin fibrosa. Finalmente en los ltimos aos las investigaciones sobre el mejoramiento de la utilizacin de la fibra dietaria ha sido encaminada hacia la identificacin de los genes que son responsables de la sntesis, modificacin y recambio en el desarrollo de las paredes celulares de las plantas. Esta forma a medida que se conoce ms de la diquetectura de la planta se puede comenzar a modificar su composicin polimtrica y sus interacciones en la planta transgnica (Vergara, 1998). Otra va es la introduccin de genes de Clostridium thermocellium en embriones de cerdo para obtener animales con mayor capacidad de degradacin de la celulasa.Las clulas E.del Clostridium contiene una endoglucanasa capaz de hidrolizar los xilanos. Esto es sin dudas un reto que ofrece la biotecnologa, ya que el animal transgnico posee una mayor habilidad para degradar la celulasa. De todas formas queda por comprobar todos estos procedimientos en el metabolismo energtico de las aves y cerdos. Consideraciones finales y perspectivas futuras La determinacin de las caractersticas fsico qumicas (solubilidad, volumen, capacidad bufferante, capacidad de intercambio catinico, capacidad de adsorcin de agua ) son imprescindible para la estimacin del valor nutritivo de alimentos fibrosos para especies monogstricas. Las investigaciones futuras deben ofrecer informaciones que permitan esclarecer las relaciones entre la composicin qumica, las propiedades fsicas y los efectos fisiolgicos de los diferentes tipos de fibra para optimizar su utilizacin en la dieta de aves y cerdos. Es necesario estimar el valor energtico de las fuentes fibrosas y su aporte al metabolismo animal con el objetivo de optimizar su uso Es necesario dirigir investigaciones en las que se evale con criterio de eficacia econmica los diferentes procedimientos utilizados ( fsicos ,qumicos biolgicos y biotecnolgicos ) para incrementar el potencial energtico de las fuentes fibrosas y su contribucin al metabolismo en especies monogstricas Conocer las caractersticas nutricionales y antinutricionales de las fuentes fibrosas tropicales y las vas ms idneas para contrarrestar o corregir el efecto de stas ltimas. Se recomienda formular las raciones de aves y cerdos a partir del concepto de FND.

REFERENCIAS SELECCIONADAS

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Metodologa para la determinacin del valor nutritivo de pastos y forrajes

Dr. Orestes LaO Len

Contenido
Valor nutritivo. Concepto. ................................................................................................................................................................ 266 Tcnica de produccin de gas in vitro. ......................................................................................................................................... 270

Aplicaciones del mtodo de produccin de gases................................................................................... 270

Mtodo "in vivo". ......................................................................................................................................................................... 272 Bioensayos.................................................................................................................................................................................... 272 Mtodo in vitro......................................................................................................................................................................... 273 Mtodos enzimticos. ................................................................................................................................................................... 273 Mtodo in situ o Bolsas mviles. .............................................................................................................................................. 274 Metodologas para la determinacin del valor nutritivo de pastos y forrajes ................................................................................... 276 Bibliografa a consultar..................................................................................................................................................................... 279

Introduccin. La importancia de los pastos y forrajes en la alimentacin del ganado ha sido destacada por la literatura, coincidiendo en que son los alimentos ms baratos y abundantes de que se dispone para producir leche y carne. Pero la biomasa producida vara mucho con la poca del ao y la produccin de los rebaos queda sujeta a esta misma fluctuacin (Santana 2000). Como alternativa barata, actual y sostenible para mejorar el valor nutritivo de las raciones para los animales se ha venido haciendo nfasis, desde hace relativamente poco tiempo, en el empleo de las leguminosas, tanto autctonas como introducidas. Esto genera cambios en los conceptos del uso y optimizacin de los diferentes recursos naturales y autctonos que pudieran utilizarse en la alimentacin animal, por lo que constituye un reto para investigadores y productores en los momentos actuales la determinacin del potencial nutritivo de diferentes alimentos entre los que se encuentran los pastos y forrajes.
Valor nutritivo. Concepto.

Los trminos calidad, valor nutritivo, valor nutricional y valor alimenticio son utilizados indistintamente sin tener en cuentas su significacin y cada uno puede ser aplicado en condiciones especificas. Segn Herrera (1983) calidad puede definirse como el conocimiento y la relacin existente entre las sustancias qumicas, la digestibilidad y la produccin de materia seca (MS) del pasto. Esto responde al criterio (segn el autor) de que la composicin qumica brinda informacin sobre el contenido de los constituyentes qumicos. La digestibilidad sugiere la utilizacin de alimento animal y la produccin de MS ofrece la cantidad de alimento disponible en diferentes condiciones. Por otra parte, se ha demostrado en numerosos trabajos (Herrera 1983, Santana 2000, Pedraza 2000, La O 2001) que los experimentos para medir el valor nutritivo de los pastos y forrajes son trabajos a largo plazo, donde deben uniformarse un conjunto de informaciones en las que estn implcito estudios en las plantas, el animal y la combinacin de ambos con el ambiente en el que se desarrollan. Desde finales del siglo XIX Wilson (citado por Herrera 1983) introduce en algunos trabajos el trmino valor nutritivo. Pero en sus inicios se consideraba este valor como los rendimientos de

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productos animales (carne, lana, leche, etc), considerndose ms tarde como la relacin de estos productos con la cantidad de alimentos consumidos. Algunos autores como Raymond (1969) asegura que el valor nutritivo en trminos de los factores que determinan el nivel de consumo por los animales es el resultado de tres variables: Consumo de alimentos, digestibilidad del alimento y eficiencia de utilizacin del alimento digerido. Sin embargo, Waldo (1985), al trabajar con ensilajes de leguminosas cuantific y caracteriz el comportamiento de la fermentacin, la preservacin del contenido de protenas y la respuesta animal (consumo, digestibilidad, utilizacin de la energa y las protenas y los resultados productivos). En revisiones efectuadas por Herrera (1983) y ms tarde por Santana (2000) y Pedraza (2000) se enfoca el valor nutritivo como la relacin existente entre los componentes qumicos, la digestibilidad de esos nutrientes y la produccin animal que se obtenga, como principales parmetros de este trmino. Otros autores como Gutteridge y Shelton, (1994) plantean el valor nutritivo como una funcin del consumo de alimentos y la eficiencia de extraccin de los nutrientes durante la digestin (digestibilidad) la cual est relacionada con la proporcin de los elementos de la pared celular de la dieta. De forma general la literatura cientfica demuestra que el valor nutritivo no es un concepto sencillo y calculable de manera fcil, sino que es necesario hacer nfasis en toda una serie de parmetros que lo determinan y para los que se utilizan mtodos, a los que se har referencia mas adelante. Antecedentes y estado actual de algunas tcnicas de evaluacin de alimentos para rumiantes. Los trabajos de Garca-Trujillo en los aos 80 y Pedraza (2000) hacen una revisin sobre las diferentes etapas por las que han pasado los diferentes mtodos de laboratorio para estimar el valor nutritivo de los alimentos, los que se han mejorado desde las primeras ideas en 1725, cuando los alimentos para rumiantes eran evaluados como Unidades de Paja (Blaxter, 1986). Sin embargo el estudio de la alimentacin con un criterio cientfico comienza con la obra del genial qumico francs Lavosier en el siglo XVIII, el cual demostr que los alimentos son utilizados por el organismo y que al ser oxidados liberan una cantidad de calor semejante al que produce la combustin de las sustancias orgnicas en el laboratorio. El trabajo de Lavosier dio inicio a los estudios del metabolismo energtico de los animales en lo cual se ha trabajado intensamente hasta nuestros das. Otro descubrimiento de gran importancia lo fue la existencia del nitrgeno en los tejidos de los animales, demostrada por Berthollet en 1776. Mas tarde Mulder le denomin protenas y las consider como las sustancias orgnicas ms importantes (ver Revuelta 1963 y Garca-Trujillo 1980). Posteriormente el agrnomo Boussingault en el siglo XIX al tratar de predecir el valor alimenticio de las raciones consumidas por los animales, reconoci la importancia nutritiva de otros compuestos no nitrogenados como las grasas y los hidratos de carbono, as como, la sustancia mineral. Hebig en este mismo siglo plantea que la diferencia entre alimentos nitrogenados y no nitrogenados no era solo de origen qumico sino que tenan una profunda significacin fisiolgica, ya que las grasas y los hidratos de carbono se empleaban preferentemente como fuente de energa.

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Tambin desde finales del siglo XIX se precis cada vez ms la significacin de los elementos minerales, mientras que ya desde 1880 Bunge comprob que los alimentos contenan ciertos elementos indispensables para la vida, las que ms tarde fueron denominadas vitaminas. Inicialmente, las tcnicas fueron diseadas mas para caracterizar el valor nutritivo que para predecir la produccin de los animales. La mejora de los mtodos de evaluacin de alimentos tiene que seguir los nuevos conceptos de la qumica y la fisiologa animal, as como los nuevos conocimientos de la microbiologa del rumen y otros campos afines del saber (Pedraza 2000). La evaluacin de los alimentos debe definir las caractersticas de los forrajes que determinan la produccin animal, por ejemplo la ganancia de peso, la produccin de leche, el crecimiento de la lana, etc. (Blmmel et al, 1997). De particular relevancia es la prediccin del consumo, el cual es un importante aspecto relacionado con el uso de los forrajes (Minson, 1990). En la prctica, la prediccin del consumo de forrajes an presenta dificultades (Blmmel y Becker, 1997). El desarrollo futuro de los sistemas de evaluacin deben incorporar nuevas informaciones de la relacin entre los productos finales de la digestin y la produccin de los animales, as como informacin del metabolismo animal y microbial, la composicin de los alimentos y el efecto de los factores de la utilizacin de alimentos (Pedraza 2000 y La O 2001). Un adecuado anlisis diettico de cualquier tipo necesita que los mtodos empleados identifiquen los componentes qumicos con la clasificacin nutritiva (van Soest y Robertson, 1985). Hoy, la tcnica de la bolsa en rumen o in sacco es probablemente uno de los mtodos ms utilizados, a pesar que se le han sealado algunos inconvenientes (Michalet-Doreau y Ould-Bah, 1992). Otros procedimientos son utilizados tambin; el anlisis proximal y su procedimiento alternativo para la fibra (van Soest, 1967; Goering y van Soest, 1970; van Soest, 1983, 1994), as como modernos mtodos instrumentales (absorcin atmica con induccin de plasma, espectroscopia cercana al infrarrojo, electroforesis, microscopa electrnica); la prueba de solubilidad de la protena, la tcnica de digestibilidad in vitro (Tilley y Terry, 1963), el mtodo enzimtico (Jones y Hayward, 1975), la tcnica de simulacin del rumen, RUSITEC (Czerkawski y Brekenridge, 1977), as como la tcnica de produccin de gases in vitro (Menke et al, 1979; Menke y Steingass, 1988). En los ltimos aos se retoman y desarrollan con vigor tcnicas de evaluacin de alimentos que no involucren daos a la integridad fsica de los animales y que de forma relativamente rpida y barata brinden resultados confiables. Tal es el caso de la identificacin de derivados del metabolismo animal, bsicamente de purinas, excretados en la orina para cuantificar la produccin microbiana en el rumen (Chen et al, 1990, Chen y Gomes, 1995) o el uso de los alcanos como marcadores para estimar las proporciones de plantas consumidas por los animales (Mayes, 1993). Se destacan tambin algunas tcnicas in vitro para valorar la digestibilidad intestinal de los alimentos (Calsamiglia y Stern, 1995; Stern et al, 1997, La O 2001), que veremos ms adelante. Muchas de estas tcnicas se encuentran an en desarrollo y perfeccionamiento y estn igualmente sujetas al reto de representar, lo ms fielmente posible, en el laboratorio aquellos procesos que involucran a los animales en su interaccin con los alimentos.

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Estimacin del valor nutritivo. La evaluacin de los alimentos le suministra a los nutricionistas la informacin necesaria para formular una dieta desde el punto de vista fisiolgico y econmico, con vistas a optimizar la productividad del animal. La necesidad para precisar las caractersticas nutritivas de los alimentos para rumiantes debe aumentar en el futuro debido a: los avances en biologa molecular, particularmente el desarrollo de plantas transgnicas. los programas de mejoras de cosechas, las limitaciones ecolgicas y econmicas relacionadas con el uso y/o vertimiento de los residuos y subproductos de las cosechas (Theodorou et al, 1994). En las condiciones tropicales la base fundamental de la alimentacin animal, son los pastos naturales o cultivado; adems se cuenta con una biodiversidad de plantas que normalmente los animales las consumen ya sea en bancos establecidos o al incursionar por reas con vegetacin natural. Sin embargo, la eficiencia de su utilizacin esta sujeta al conocimiento de las caractersticas nutricionales, donde los principales parmetros de evaluacin son el contenido de nutrientes, el consumo y la digestibilidad del material. Existen numerosos mtodos para la determinacin de la digestibilidad de los alimentos en rumiante; sin embargo, para la correcta evaluacin de materiales es necesario que se validen las tcnicas que se usan comparndolas con estimaciones obtenidas por otros mtodos. Digestibilidad de los alimentos. La composicin qumica de un alimento no es suficiente para el conocimiento del valor nutritivo, por lo que hay que considerar los procesos de digestin, absorcin y metabolismo animal. Las pruebas de digestibilidad, permiten estimar la proporcin de nutrientes presentes en una racin, que pueden ser absorbidos por el aparato digestivo y quedan disponibles para el animal. Generalmente la digestibilidad depende en mayor medida de la composicin nutritiva de la racin en estudio, as como a su vez es afectada por el hecho de que las heces contienen importantes cantidades de materiales de origen no diettico, como los compuestos nitrogenados, grasos, minerales y glusidos no fibrosos de origen endgeno. A esto se debe que los coeficientes de digestibilidad determinados por diferentes mtodos se denominen aparentes. Mtodos utilizados para la estimacin del valor nutritivo.
Tcnica in sacco para estudiar la degradabilidad ruminal.

El mtodo in sacco, tambin denominado de la bolsa de nylon o in situ, tiene como objetivo fundamental medir la desaparicin de materia seca, orgnica u otro nutriente de las bolsas adecuadamente incubadas en el rumen a travs de una cnula permanente en el saco dorsal del rumen. Los primeros experimentos (Quins et al, 1939) se usaron bolsas de seda, las que fueron reemplazadas posteriormente por otros tejidos como el Nylon, el Poliester y el Dacrn. Inicialmente el mtodo se utiliz exitosamente para evaluar diferentes alimentos y para determinar la efectividad del tratamiento con formaldehdo a los suplementos proteicos (Erwin y Elision, 1959; Rodrguez, 1968; Demarquilly y Chenost, 1969; entre otros). Los resultados de dichos estudios eran obtenidos a partir de un solo tiempo de incubacin, lo cual result presentar algunos puntos dbiles.

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Mehrez y rskov (1977) propusieron el uso de este mtodo como rutina para evaluar el rango de degradabilidad ruminal de las protenas, incubando varias bolsas con vistas a obtener una evaluacin cintica de la degradacin. van Soest et al (1978) y rskov et al (1988) han sugerido el uso de los datos de la cintica de degradacin para mejorar la estimacin del valor nutritivo de los alimentos cuando se utilizan, tanto mtodos in vitro o in sacco. Este enfoque dinmico mejor marcadamente el potencial de esta tcnica, como fue demostrado por rskov et al (1980) en la evaluacin de forrajes. Algunos elementos que deben estandarizarse: Caractersticas de la bolsa y la muestra. Especie animal y dieta a utilizar. Condiciones y tiempo de incubacin, lavado de las bolsas. En Cuba en los ltimos aos algunos autores (Pedraza 2000, La O 2000, Delgado et al 2002, La O et al 2003) han utilizado satisfactoriamente esta tcnica en la determinacin de la degradabilidad efectiva ruminal de nutrientes en diversas leguminosas de inters para la ganadera. Constituyendo una de las tcnicas de gran importancia en la evaluacin del valor nutritivo de alimentos forrajeros promisorios en nuestras condiciones. Tcnica de produccin de gas in vitro. La relacin entre la fermentacin ruminal y la produccin de gas es bien conocida; en un temprano intento en 1939 se trat de medir la produccin de gas directamente a travs de la cnula ruminal en ovinos, la tcnica era muy difcil de aplicar y de baja reproducibilidad (Blmmel et al, 1997). Al estudiar la estequiometra de la fermentacin ruminal con un sistema cerrado de jeringuilla Menke y Ehrensvrd (1974), citados por Theodorou et al (1994), notaron una produccin de gas muy reproducible cuando un mismo substrato fue incubado en diferentes corridas experimentales. En el sistema publicado por Menke et al (1979) el substrato es incubado en una jeringuilla calibrada, en la que el desplazamiento de su pistn permite realizar mediciones del volumen de gas producido durante un periodo de 96 horas; el medio de incubacin incluye lquido ruminal, solucin de nutrientes y un buffer. La mayor innovacin del mtodo fue que se media la produccin de gas de la muestra en lugar de su degradacin; el mismo postulado contina hasta hoy, an cuando el mtodo ha sido simplificado y mejorado. Algunos elementos que deben estandarizarse: Preparacin y tamao de la muestra. Inculo y buffer. Condiciones de incubacin y tiempo de lectura. Entre otros. Aplicaciones del mtodo de produccin de gases. La cantidad de gas producido por la incubacin in vitro de un substrato esta ntimamente relacionada con su digestibilidad y por tanto con su valor energtico (Menke et al, 1979; Menke y Steingass, 1988). La produccin de gas puede predecir la degradacin efectiva de la materia orgnica in sacco (Deaville y Givens, 1998). El primer uso de esta tcnica fue evaluar el valor energtico de los forrajes; no obstante, ha sido tambin utilizada para evaluar la presencia de compuestos antinutritivos en algunos

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alimentos y ms recientemente se han realizado intentos para valorar el efecto de inculos y enzimas en las caractersticas de la fermentacin de los ensilajes (Davies et al, 1999), as como para predecir la desaparicin aparente de almidn en el rumen (Rymer y Givens, 1999). Diferentes artculos han sido publicados del uso de la tcnica de produccin de gas in vitro como mtodo para estudiar el efecto de factores antinutritivos. El uso de compuestos acomplejantes con los taninos, como el polyvinylpolypyrrolidone, fue inicialmente propuesto por Andersen y Sowers (1968) como indicador indirecto para determinar taninos en plantas. Los primeros trabajos utilizando este principio en la produccin de gas in vitro se realizaron por Makkar y colaboradores, los cuales se publicaron algunos aos despus (Makkar et al, 1995). Otros trabajos se han publicados tambin por Khazaal y rskov (1994), Khazaal et al (1994), Wood y Plumb (1995) y Khazaal et al (1996). Los mayores inconvenientes de este procedimiento son: parece ser ms efectivo en forrajes con alto contenido de taninos, as como que otras sustancias antinutritivas no pueden ser estudiadas. El mtodo de produccin de gas in vitro se ha utilizado, tambin, para evaluar la contribucin nutritiva de las fracciones solubles e insolubles de los forrajes (Schofield y Pell, 1995; Stefanon et al, 1996; Blmmel y Becker, 1997; Pedraza, 1998). El desarrollo de un procedimiento rpido de laboratorio que involucra la medicin de la produccin de gas in vitro por los microbios del rumen ofrece una promisoria y efectiva tcnica para el estudio de la gran variedad de leguminosas arbustivas (Devendra, 1995). En Cuba los primeros estudios fueron desarrollados por Pedraza (1998) en leguminosas, y ha constituido una de las premisas fundamentales para la estandarizacin y empleo de est tcnica como un elemento de rutina en la estimacin del valor nutritivo de alimentos tropicales en nuestras condiciones. Particularidades de la determinacin de la digestibilidad de nitrgeno en rumiantes. La reduccin de la degradacin de protenas de alimentos en el rumen solamente ser beneficiosa para el animal, cuando la protena que escapa a la degradacin en el rumen es absorbida en el intestino delgado. La cantidad total de protena disponible y la absorcin de esta en el intestino delgado (ID) depende entre otros factores del flujo microbiano y de la protena dietaria que llega al duodeno, con su respectiva digestibilidad Intestinal. Se ha demostrado (Clark et al 1992) que la protena microbiana suministra un promedio de 59 % de la protena que pasa al intestino delgado de la vaca lechera con valores que oscilan entre 34 y 89 % dependiendo del tipo de dieta. Sin embargo, los requerimientos del animal para produccin deben ser suplidos en alguna medida con protena indegradable en rumen. Sobre el efecto de alimentacin con protenas de baja degradabilidad ruminal en el suministro intestinal y el comportamiento animal los resultados han sido variables. Esta falta de respuesta es atribuida frecuentemente a una inadecuada proteccin de protenas, reduccin de la digestin intestinal o inherente a la limitacin de aminocidos de la protena dietaria. Los subproductos de origen animal tales como harina de sangre, harina de carne y hueso y harina de pluma hidrolizada son altos en protena indegradable en rumen (National Research Council, 1989), y los datos en la digestibilidad intestinal de varias de estas fuentes proteicas son limitados, dentro de los que tambin pueden estar las protenas vegetales de rboles y leguminosas de baja degradabilidad ruminal.

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Desde el punto de vista prctico, sera conveniente otorgar un valor nico de degradabilidad ruminal a cada suplemento proteico con el fin de confeccionar tablas de composicin y calidad de los alimentos. Sin embargo, el proceso de degradacin de las protenas en el rumen es complejo ya que se ve afectado por numerosos factores como la velocidad de degradacin, velocidad de trnsito ruminal, solubilidad y estructura de las protenas, actividad proteoltica de los microorganismos, pH, etc. Desde los aos 80 del pasado siglo el NRC (1989) plante que la digestin intestinal de suplementos proteicos puede diferir, sin embargo se hacia necesario el uso de un dato emprico, para el clculo de los requerimientos proteicos de las diferentes formulaciones y proponen el uso de 80 % de digestibilidad intestinal de protenas para los suplementos proteicos. No obstante el nuevo NRC (2001) ha incorporado valores tabulados de digestibilidad intestinal de protenas no degradables en rumen, lo que permite reducir los errores de valoracin proteica de alimentos, con el inconveniente de que tambin existe importantes variaciones en digestibilidad intestinal entre suplementos proteicos y entre muestras de un mismo suplemento. ltimamente se han realizado muchos esfuerzos para incorporar estimaciones ms actuales de digestin intestinal de protenas dentro del sistema, pero el principal problema con la incorporacin de estos estimados est dado por la falta de tcnicas analticas confiables para su estimacin. Dentro de estos mtodos se encuentran mtodos in vivo e in vitro. Mtodo "in vivo". La estimacin in vivo de digestin intestinal de protenas, es un mtodo laborioso, requiere el uso de animales tratados quirrgicamente y la digestin aparente de las protenas es calculada como la desaparicin de PB o AA entre el duodeno e leon, el cual esta sujeto a errores de consideracin, asociados con la muestra y el uso de marcadores en la digesta, as como por variaciones inherentes al animal. Por esto han sido desarrollados en las dos ltimas dcadas algunos procedimientos alternativos para la estimacin intestinal de protenas. Este mtodo es muy utilizado para medir el grado de utilizacin de diferentes metabolitos de la dieta y es usado como patrn de comparacin con otras tcnicas Bioensayos. Se han desarrollado modelos animales para disminuir la labor, costo y mantenimiento del ambiente fisiolgico de los procesos de digestin, algunos de ellos han sido adaptados y aplicados para rumiantes. Por ejemplo, Tirgemeyer et al (1990) uso una prueba de precisin de alimento cecotomizado de gallo como modelo para estimar la digestin intestinal de AA en vacunos, en la que se utilizaron muestras duodenales liofilizadas obtenidas de toros con cnulas duodenal e leal para validar esta tcnica (Titgemeyer et al, 1989). Los datos del ensayo con gallo fueron altamente correlacionados (r=0.94) con estimaciones de digestin aparente in vivo de AA. Esta tcnica tambin fue utilizada por Henning et al (1989) para determinar la digestin de nitrgeno utilizable (nitrgeno total menos cidos nucleicos, amoniaco, urea y cido rico (NU= Nt(AN+A+U+AU). Los resultados fueron comparados en ovinos con cnulas en duodeno e leon y la digestin fue variable (alta y baja) en los ensayos con gallo lo cual fue probablemente al resultado de la pobre relacin entre el nitrgeno utilizable y el nitrgeno aminoacdico contenido de la digesta. Titgemeyer et al (1989) indicaron que el ensayo con gallo poda no ser apropiado para estimar la

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digestin de protenas porque los gallos excretan contenidos de orina y heces juntos. Aunque el contenido de AA en la orina de las aves es pequeo y constante por lo que la tcnica puede ser usada para predecir la digestin de AA. Otros estudios se han desarrollado en ratas en crecimiento para determinar la calidad de la protena indegradable en rumen (Rooke, 1985). Los cambios en las velocidades de crecimiento fueron altamente correlacionadas (r=0.96) con los estimados de digestin intestinal obtenidos usando la tcnica de las bolsas mviles en rumiantes, ya que el valor biolgico de las protenas depende de los requerimientos de la especie animal bajo estudio. La extrapolacin de los datos deriv en asumir que los requerimientos de ratas y vacunos son similares, afirmacin que puede ser dudosa. Aunque, la tcnica puede ser de uso preliminar en estudios para medir la digestin y el valor biolgico de la protena indegradable en rumen. Mtodo in vitro Fluido intestinal. Desde pocas tempranas se ha tratado de usar fluido intestinal, por ejemplo Furuya et al, (1979) indicaron que la incubacin in vitro con fluido yeyunal poda ser utilizada para estimar la digestin proteica en el intestino delgado. Las muestras de alimentos fueron incubadas con una solucin cidopeptica para simular la digestin proteica en el estomago seguida de una incubacin con fluido yeyunal. Estimados de digestin intestinal de PB de 7 dietas fueron altamente correlacionadas (r=0.98, n=7), para digestin intestinal medido en duodeno e leon de cerdos canulados. Sin embargo estudios de otros autores (Graham et al, 1989; Lowgren et al, 1989) notaron bajas correlaciones entre la incubacin en fluido microbial y la digestin de PB estimada in vivo probablemente por el resultado del incremento de la materia microbial en la media. Aunque la tcnica disminuye costo y labor comparada con mtodos in vivo, los resultados no son muy confiables para medir la digestin proteica intestinal y requiere de animales para obtener el lquido yeyunal. Para datos o resultados no similares han sido conducidos experimentos en rumiantes. Mtodos enzimticos. Una gran variedad de sistemas de digestin enzimticas para la estimacin de la digestin intestinal de protenas han sido probados ( Akeson and Stahmann, 1964; Buchanan, 1969; Rhinchart, 1975; Hsu et al, 1977, Calsamiglia y Stern 1995, La O et al 2003). Muchas tcnicas siguen un protocolo similar, muestras de alimentos son incubadas a T y pH ptimos con una enzima o combinacin de enzimas. Despus del perodo de incubacin la digestin de protenas es medida como la cantidad de AA y peptidos liberados de la protena dividido por la cantidad de protena de la muestra original ((AA+Peptidos)/Protena Muestra). Los productos finales de la digestin en el intestino es una mezcla de AA libres y pequeos peptidos. La determinacin de la digestin proteica requiere que el mtodo usado pueda estimar la cantidad de esos AA y pptido liberados. Varias tcnicas difieren en la enzima o combinacin de enzimas, as como en el mtodo seleccionado para determinar la protena digerida. Sistemas de enzimas simples han sido usados con xito variable (Buchanan, 1969; Saunders et al, 1973; Rhinehart, 1975). La AOAC (1984) obtuvo una estandarizacin del procedimiento de digestin con pepsina para determinar el nitrgeno no disponible en el tracto. El nitrgeno insoluble en pepsina fue altamente correlacionado con el nitrgeno no disponible de forrajes en el tracto total (Goering et al, 1972; Yu y Veira, 1977 y Shelford et al, 1980) y otros suplementos proteicos (Loerch et al, 1983). Por

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el contrario Zinn y Owens (1982), informaron que ms del 20 % del nitrgeno que sale del leon fue soluble en solucin cido-peptica sugiriendo que el nitrgeno insoluble en pepsina puede sobrestimar la protena no disponible en el alimento. La falta de confiabilidad encontrada con la tcnica de enzimas simples es el resultado de un limitado espectro de especificidad para una enzima simple, porque muchas enzimas tienen especificidad por enlaces de pptidos individuales y la digestin de protenas puede ser dependiente en el nmero de enlaces sensitivos para que la enzima acte en la protena. Aunque el uso de una combinacin de enzimas mejora la correlacin con mtodos in vivo, los estimados no son confiables en la prediccin de la digestin intestinal en una amplia variedad de alimentos (Saunders et al,1973; Rhinehart, 1975 y Rich, 1978), probablemente como resultado de diferencias en la actividad y especificidad de la combinacin de enzimas comparadas con estas encontradas en el intestino delgado. Es evidente que en una tcnica in vitro para estimar la digestin de protenas debe incluir enzimas con actividad y especificidad similar a los encontrados en el tracto digestivo de animales. El uso ms comn de tcnicas enzimticas fue desarrollado por Akeson y Stahmann (1964). El sistema fue diseado para simular la digestin abomasal (pepsina) e intestinal (pancreatina). Los resultados fueron ampliamente correlacionados (r=0.99, n=12) con estudio de crecimiento en ratas y la tcnica fue exitosamente probada por otros investigadores (Buchanan, 1969; Saunders et al, 1973; Stahmann y Woldegiorgis, 1975; Gabilois y Savoie, 1987, Calsamiglia y Stern 1995 y La O et al 2003)). Este sistema mejora el ambiente fisiolgico para la digestin y contiene enzimas proteolticas con especificidad y actividad similar a las encontradas en el TGI. Uno de los ms importantes factores que afectan estimados de digestin intestinal de protenas es el mtodo usado para determinar protena digerida dentro de los que se encuentran elementos que han sido estudiados desde hace ms de 30 aos, la filtracin (Sheffner et al 1956), precipitacin con cidos fuertes seguidos de centrifugacin (Akeson y Stahmann, 1964), centrifugacin seguida de filtracin (Saunders et al, 1973), cromatografa (Ford y Salter, 1966) y dilisis (Mauron et al, 1955). Mtodo in situ o Bolsas mviles. La tcnica de las bolsas mviles fue desarrollada para la determinacin de la digestibilidad en cerdos (Sauer, et al, (1983). Algunas investigaciones se han realizado para modificar esta tcnica y usarla en rumiantes (Hvelplund, 1985; Rae y Smithard, 1985; De Boer, et al, 1987). En general las bolsas estn formadas por material pegado y con aproximadamente 1 g de muestra de alimentos. Estas son preincubadas en rumen e insertadas en el duodeno con la correspondiente recuperacin en las heces. Una vez recuperadas, son lavadas y sometidas a digestin para la determinacin de nitrgeno usando el procedimiento Kjeldahl. Un estudio reciente de Erasmus, et al, (1990) demostraron que las bolsas mviles permiten estimar la digestibilidad intestinal de protenas en alimentos durante el pasaje a travs del intestino de rumiantes (bovinos) por ser una medicin rpida, econmica y con suficiente confiabilidad. Aunque muchas variables deben ser controladas antes del uso de esta tcnica como son tamao de muestra, tamao de bolsas, variacin animal y dieta animal, adems de existir otra fuente de variacin de mayor peso relacionada con la fermentacin en el ltimo compartimento del TGI del rumiante, que provoca una sobreestimacin en la digestibilidad y absorcin real de nitrgeno en el Intestino. (Ver tabla 1)

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Resultados de la digestin intestinal de alimentos con el uso de la tcnica de las bolsas mviles fueron coleccionadas de diferentes laboratorios (Hvelplund, 1985; De Boer, et al, 1987; Verite et al, 1987; Tamminga y Ketelaar, 1988) y en general se observ en los forrajes una digestin intestinal mucho menor que en los concentrados. Esta diferencia probablemente este dada ya que las protenas de las hojas de forrajes es largamente degradada en rumen y la que escapa est asociada con la pared celular, la cual no puede ser digerida en el ID y solamente una pequea extensin es aprovechada en el intestino grueso. En ingredientes de concentrados la protena que escapa de la degradacin en el rumen es principalmente protena de reserva no protegidas por la pared celular. Tabla. 1. Desaparicin de la materia seca (MS) y protena bruta (PB) en rumen, Intestino delgado y tracto total. De ensilaje de gramneas, csped completo, raygras y Clover con el mtodo de las bolsas mviles (Van Straalen et al, 1993). Sitio
Rumen Intestino Tracto Total

Componente
MS PB MS PB MS PB

Ensilaje de gramnea
48.2 70.6 28.0 81.4 62.4 94.6

Csped completo
38.5 57.5 40.8 83.4 63.4 92.8

Rygrass
38.8 57.4 41.9 84.3 64.3 93.3

Clover
54.5 57.8 68.9 91.4 85.7 96.3

ES
2.1 2.1 1.4 1.0 0.8 0.5

La tcnica de bolsas mviles puede dar sobreestimaciones cuando las bolsas son recuperadas en las heces, por la desaparicin de nitrgeno en el intestino grueso (Hvelplund, 1985; Voigt et al, 1985). La desaparicin "in vivo" de nitrgeno amoniacal y de nitrgeno de aminocidos en el intestino grueso esta en rangos de 11 a 34 y de -3 a 37 % respectivamente (Santos et al, 1983 y Maller, 1985). Aunque en la mayora de los alimentos la fraccin de protenas que no desaparece en el intestino delgado es muy pequea y la sobreestimacin es limitada.
Procedimiento in vitro e in situ de los tres pasos.

El procedimiento de los tres pasos fue desarrollado por Calsamiglia y Stern (1995), para estimar la digestin de protenas en rumiantes. Esta tcnica fue creada segn sus autores para cumplir 4 objetivos bsicos: Simular condiciones fisiolgicas de rumiantes, incluyendo el efecto potencial de la fermentacin. Ser rpida confiable y de poca labor. Tener aplicabilidad a una amplia variedad de suplementos proteicos. Alta confiabilidad y reflejar diferencias en la digestin de protenas. La tcnica consiste en 3 pasos fundamentales. 1- Las bolsas de dacron conteniendo muestras de alimentos se suspenden en rumen por 16 horas. 2- El residuo es incubado por 1 hora en solucin 1n de HCl conteniendo 1g/l de pepsina, 3- despus de la incubacin el pH se neutraliza con NaOH 1N y a pH 7.8 conteniendo buffer fosfato 3g/l de pancreatina posterior incubacin a 38 C por 24 horas, luego adiciona solucin de TCA 100 % (peso/volumen) para precipitar las protenas indigestibles. Al utilizar este procedimiento se ha observado que la digestin intestinal de PB de la harina de soya y de harina de soya tratada con lignosulfonato fue similar en el mtodo de las bolsas mviles y en el de

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los tres pasos. Aunque hubo diferencia sustancial entre los dos procedimientos para la estimacin digestin de la digestin intestinal. Los estimados fueron diferentes en 22 unidades porcentuales (99.4 vs 77.8 %) entre el procedimiento de las bolsas mviles y el de los tres pasos respectivamente con una completa desaparicin de PB siempre en las bolsas mviles (Tabla 2). Las diferencias entre mtodos puede ser un resultado de la digestin proteica que ocurre en el intestino grueso. Hvelplund (1985) indic que el 50 % de la harina de soya que llega al ileum fue digerida en el intestino grueso y observ una diferencia significativa en el sitio de coleccin (ileum vs heces) por alimentos (harina de soya vs harina de canola). Tabla. 2. Efecto del mtodo usado en la digestin de nitrgeno en harina de soya extractada con solventes (SES) y tratada con lignosulfonato (STLS). Digestin de PB %
Ruminal Intestinal Tracto total

Bolsas Mviles SES STLS

73.1 99.3 99.8 29.1 99.5 99.9

Mtodo Procedimiento de los tres pasos SES STLS

80.6 77.6 95.9 31.3 77.9 85.1

La O et al (2003) recomiendan este mtodo para la determinacin de la digestibilidad intestinal de nitrgeno no degradado en rumen, en leguminosas tropicales, con buenos resultados. Pero sugieren tener presente la influencia de algunos compuestos secundarios como los taninos, los que pueden limitar o favorecer la utilizacin de las diferentes macromolculas como protenas y el complejo lignocelulsico. Metodologas para la determinacin del valor nutritivo de pastos y forrajes La mayora de los estudios para medir la variacin en especies agroforestales se concentran en mediciones de crecimiento y produccin en ensayos de campo replicado, ya sea en estaciones experimentales o en campos de productores; adems de las producciones de biomasa, los ensayos frecuentemente incluyen la evaluacin de otras caractersticas agronmicas importantes, respuestas a diferentes cortes, tolerancia ambiental (suelos cidos, salinos, etc) y estacionalidad de la produccin de forrajes (Stewart, 1999). Si bien todas estas medidas son importantes en el desarrollo de suministros constantes y sostenibles de forrajes, no son toda la historia, por lo que se necesita de estudios que avalen el grado de aceptacin y la digestin de estos alimentos por los animales; sin renunciar a las caractersticas agronmicas y fenotpicas que tienen una importancia primordial en los diferentes sistemas de alimentacin. Por esto, el objetivo de algunas metodologas actuales esta encaminado a trazar una opcin viable, en la evaluacin del valor nutritivo de rboles arbustos forrajeros y forrajes tropicales en los que se tenga en cuenta el grado de aceptacin por los animales de conjunto con otros mtodos "in vitro" e "in situ". Para esto se desarrollan pruebas de aceptabilidad relativa, anlisis qumicos, estudios de degradabilidad ruminal "in situ"; as como experimentos con agentes manipuladores de la fermentacin ruminal y estudios "in vitro" para medir la digestibilidad de compuestos como el nitrgeno dietarios no degradable en rumen.

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Los resultados indican el grado de aceptabilidad relativa entre alimentos; as como en los indicadores relacionados a la fibra. Estas variaciones estn ligadas con la interaccin del ambiente; y, probablemente, con las propias variaciones intra especies; aunque las diferencias estadsticas, en algunos casos especficos de alimentos, en los indicadores qumicos estudiados parecen no tener importancia biolgica en los animales rumiantes. Por ejemplo La O (2001) al realizar estudios con el gnero Leucaena (ver figura 1) encontr que, en los ecotipos ms seleccionados por los animales, existi una alta degradabilidad de MS y compuestos nitrogenados, con menores contenidos de compuestos nitrogenados soluble, respecto a los ecotipos de baja aceptabilidad; relacionado posiblemente con la alta concentracin de N- NH3 en las primeras horas de consumida la leguminosa. Tambin los parmetros de degradabilidad de MS y la velocidad de degradacin de las fracciones nitrogenadas (FN) tuvieron altos coeficientes de variacin, vinculados con el posible efecto de los taninos en sus relaciones con la protena y la fibra; aunque se recomiendan estudios que permitan avalar este planteamiento. Por otra parte se destac una degradabilidad potencial de los compuestos nitrogenados (CN) en los ecotipos estudiados, entre 76.18 y 89.36 % con un valor medio de 78.44% y se informan resultados de la degradabilidad en diferentes fracciones de nitrgeno ligados a la fibra, as como el efecto del PEG como agente manipulador de la fermentacin ruminal. En la digestibilidad intestinal "in vitro" de los CN se obtuvieron valores de 47.3 y 67.23 % para 24 y 48 h de preincubacin ruminal; sin embargo, al utilizar PEG la digestibilidad intestinal con 48 h de preincubacin ruminal tuvo incrementos de hasta alrededor de 20 unidades porcentuales. Los resultados obtenidos permitieron aseverar que el follaje de los ecotipos de L. leucocephala estudiados, hacen poca contribucin a la protena dietaria digestible en el intestino, en relacin con el alto nivel de protena bruta que presenta. Esta conducta abre un espacio en investigaciones futuras, que permitan hacer predicciones reales del papel de las FN microbianas y dietarias; as como, el efecto beneficioso o no de los taninos en trminos de digestibilidad y valor nutritivo. Otras metodologas incluyen elementos como pasaje de nutrientes, efecto del tipo de fibra, y otros elementos ya sea desde el punto de vista agronmico, fisiolgico en el animal o productivo. Por lo que, de forma general, el valor nutritivo no es un concepto sencillo, absoluto y calculable de manera fcil, sino que es necesario toda una serie de elementos que lo determinan y para los que se utilizan mtodos, mediante los cuales se obtienen resultados, en el alimento y en el animal, que combinndolos se logran elementos ms confiables y prcticos.

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Ecotipos del gnero Leucaena

Aceptabilidad relativa de ecotipos en condiciones de pastoreo

Frecuencia de consumo aparente
Composicin qumica en lluvia y seca de ecotipos con mayor aceptabilidad relativa
Compuestos antinutritivos o secundarios

Constituyentes qumicos

Degradabilidad ruminal de nutrientes en ecotipos seleccionados

Dinmica de degradacin de nutrientes

Resultados productivos
Fraccionamiento del nitrgeno y degradabilidad ruminal de las diferentes fracciones

Parmetros a, b, c , a+b y fase lag.

Dinmica de degradacin de las diferentes fracciones de nitrgeno

Digestibilidad intestinal in vitro de nitrgeno no degradado en rumen

Uso de agentes manipuladores de la fermentacin ruminal.

Metodologa de investigacin propuesta.

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