Importancia del mantenimiento en cromatografa gaseosa.

Resolucin de problemas tpicos en GC y GC/MSD

Jaume Santamaria Especialista de producto GC-MS

Objetivo del cromatografista: La Obtencin de Resultados Cromatogrficos Robustos. Cmo?

Tener un buen mtodo cromatogrfico Realizar un Mantenimiento adecuado Tener un Excelente cromatgrafo

Cromatografa Robusta

Buenas Prcticas para la Creacin de un Mtodo Cromatogrfico Robusto: 1. Optimizacin del inyector S/SL
- El inyector es la fuente de muchos problemas de un sistema GC o GC-MS -Requiere optimizacin -Usar programa FlowCalc

Diagrama de flujo en modosplit: Problema de Sobrecarga del liner

Si la muestra vaporizada no cabe en el liner : 1.Prdida de repetibilidad cuantitativa 2. Contaminacin (carryover).
(SEPTUM) VALVULA DE PURGA FLUJO TOTAL

= GAS PORTADOR = MOLECULAS DE MUESTRA = MOLECULAS DE DISOLVENTE

VALVULA DE SPLIT

(ENTRADA) VALVULA DE PURGA

Evitar la sobrecarga del inyector

Una inyeccin de disolvente de gran expansin de volmen puede provocar una sobrecarga del liner del portal de inyeccin Esto puede resultar en la prdida de muestra por la VALVULA DE PURGA as como contaminacin de la lnea de gas portador entrante.
COLUMNA

Tabla de los Volmenes de Vaporizacin de los Disolventes ms utilizados

Los volmenes de vapor son valores aproximados del volumen que ocupa 1 l del disolvente con el inyector a 1bar de presin y 250C:
Disolvente (1l) Isooctano Hexano Ciclohexano Tolueno Acetato de Etilo Cloroformo Isopropanol Acetona Cloruro de Metileno Acetonitrilo Metanol Agua Volumen de Vapor (l) 131 165 200 203 221 268 284 294 337 413 535 1198

Clculo aproximado del volumen de vapor para otras condiciones de Presin y Temperatura:

VP,T,Y = YVol.Iny V(1bar, 250C, 1l) [2/(1+Pbars) ] [(273+TC) /523 ]

La muestra vaporizada NO debe ocupar ms del 80% del volumen del liner

Inlet Liners
Utilizar un tipo de liner adecuado a las condiciones de trabajo

Diagnsticos Tpicos por Mala Instalacin Columna: Columna mal instalada en inyector: dar problemas con picos no retenidos o del principio del cromatograma. Columna mal instalada en detector: suelen dar ms bien problemas los picos del final del cromatograma.

Modo de Inyeccin SPLIT (con divisin)

Flow limiting frit Total flow control loop Septum nut Pressure sensor
PS

Septum purge regulator

SPR

104 mL/min
Proportional valve 1

Septum purge vent

FS

3 mL/min
Column head pressure control loop

Flow sensor

muestra, la relacin de split deber ser lo suficientemente grande como para proporcionar una inyeccin puntual (tiempo de barrido del liner despreciable con respecto al ancho del pico). Mnimo Split ratio recomendado: 0.18- 0.25mm : 1:10 1:20 0.32mm : 1:8 1:15 0.53mm : 1:2 1:5

Si no se emplean tcnicas de focalizacin de

Trap Purge valve (open) Proportional valve 2

Split vent

100 mL/min

Con un volumen de liner de 300-900 L se recomienda un split flow de al menos unos 20 ml/min para efectuar una inyeccin puntual. Las frrulas de grafito/vespel se deben de reapretar despus de utilizarlas por primera vez (las de grafito slo no lo requieren)

1 mL/min

Modo de Inyeccin splitless (sin divisin)

Inlet pressure control loop Flow limiting frit Septum nut
PS

Septum purge regulator

SPR

3 mL/min
Septum purge vent

4 mL/min
Proportional valve 1

FS

Flow sensor

Pressure sensor

En splitless para focalizar la muestra (introducida lentamente en la columna) se deber: trabajar con una temperatura inicial de horno 10-20 C por debajo del punto de ebullicin del disolvente de la muestra (no utilizar mezclas de disolventes). Si la temperatura es demasiado baja (30-60C por debajo del p.eb.) pueden deformarse los picos ms voltiles. y/o bien, los puntos de ebullicin de los analitos estn ms de 150 C por encima de la temperatura inicial de la columna.
1 mL/min

Trap Purge valve (closed) Proportional valve 2

Split vent

0 mL/min

isooctano con p.eb. de 99C), permite acortar los ciclos de enfriamiento al no tener que empezar a temperaturas prximas a la ambiente. En splitless con el tiempo se requerir cortar de 0.51m de columna para restablecer sus prestaciones. La optimizacin fina (en intevalos 0.1 min) del tiempo de inicio de la purga puede permitir reducir el tamao del pico del disolvente

El empleo de disolventes no muy voltiles (como el

Vlvula en posicin cerrada (CLOSED) Todo el flujo, excepto el de la purga de septum, va a la columna

pg.: 8

Inyectores : Inyeccin splitless (sin divisin)

Cuando se requiere Mxima Sensibilidad Trabajar en modo Splitless

Un tiempo de splitless insuficiente afectar a la sensibilidad y reproducibilidad del mtodo El tiempo de splitless deber ser tanto mayor cuanto menor sea el flujo por columna, mayor el volumen

que ocupe la muestra vaporizada en el liner y cuanto mayor sea el volumen de ste, por tanto tambin depende del tipo de liner usado.

pg.: 9

Cmo Aumentar el Volumen de Inyeccin? Ventajas de la Programacin de Pulsos de Presin durante la Inyeccin
V = nRT / P (1 ul hexano a 250C y 1 atm ocupa 329 l) Volumen splitless liner clsico: 250 ul / tapered/split: 800-900 ul. Volmenes iny. mx. splitless liner clsico: 1 ul / tapered/split: 2 ul. 1 ul hexano a 250C y 5 atm ocupa 66 ul=> poder inyectar con EPC p.e. hasta 5ul
Posibilidad de mejorar la resolucin cromatogrfica. Incrementa la vida media del liner

Mejorar lmites deteccin (poder inyectar volmenes mayores)

Transferencia ms rpida de muestra de inyector a columna Disminucin de la degradacin trmica Disminucin de la discriminacin

200 Kpa.
0.3 min.

Reduce la posibilidad de prdida de voltiles por la purga de septum. Facilita la transferencia a la columna de los compuestos ms pesados. Al poder trabajar con relaciones de split mucho ms pequeas f. col.= 0.5 split vent = 10 ===> relacin split 1:20 Se inyecta 6 veces ms f. col.= 2.5 split vent = 8 ===> relacin split 1:3 Poder "ensuciar" menos el "liner" inyectando volmenes ms pequeos.

50 Kpa.
t

Reducir la necesidad de empleo de la tcnica splitless

pg.: 10

Beneficios de la Inyeccin en modo Splitless con Pulso de Presin

% Recuperacin de cada pesticida usando inyeccin en modo Splitless y On - column
120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 Correccin por ISTD

% Recuperacin (on column=100)

1 2 3 4 5 6 7

Metamidofos Acefato Azobenceno Ometoato Diazinon Dimetoato Clorpirifos

5 7 1 6 2 4 3

on column

70 psi pulsed splitless

22.5 psi pulsed splitless

splitless

Tipo de Inyeccin

pg.: 11

Inyectores - Inyeccin Split a Pulsos

Seleccionar el modo "Pulsed Split" Introducir todos los parmetros

Cuanto mayor es la presin del pulso: se puede inyectar un mayor volumen de muestra se efecta una inyeccin ms puntual. menor degradacin trmica menor discriminacin se puede trabajar con relaciones de split ms pequeas (mejor sensibilidad)*

* SI al terminar el pulso el Total Flow se reduce a menos de 15-20mL/min. activar el Gas Saver justo cuando termine el pulso.
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Control del Inyector para una Inyeccin Reproducible: jeringa y lavados

La muestra vaporizada NO debe ocupar ms del 80% del volumen del liner

Establecer el volumen de inyeccin y los lavados de jeringa Pulsar Configure para fijar el tamao de jeringa Pusar More para fijar la velocidad de la jeringa

Lavados microjeringa

Subir a 2 - 3 segundos para disolventes con una cierta viscosidad

Solvent A (wetting solvent): Metanol, Tolueno, Isooctano, o mezcla miscible con disolvente inyeccin. Evitar dry solvents tipo: Acetona, Diclorometano o Hexano. Acortan la vida de la jeringa Solvent B : disolvente de la muestra utilizado en la inyeccin
pg.: 13

Reproducibilidad en los Tiempos de Retencin:

Retention Time Locking, RTL
La posibilidad de reproducir de manera muy precisa los tiempos de retencin de un sistema Agilent 6850, 6890 o 7890 a otros cromatografos Agilent 6850, 6890 o 7890 con el mismo tipo y dimensiones de columna e incluso con distintos detectores o inyectores.
Con la misma configuracin de instrumento las desviaciones entre distintos GCs sern de tan slo

unas pocas centsimas de minuto. Permite utilizar bases de datos de tiempos de retencin: se dispone de bases de pesticidas (567HP5ms), PCBs (209-HP5ms), organo-estnnicos (15--HP5ms), aromas (409-HP5ms), toxicolgica (277-DB-17MS.), cidos grasos (37-DB-Wax y DB-23), VOCs ,...., y propias. Facilita muy considerablemente la operacin con muestras complejas: Mantenimiento de programaciones en el tiempo (condiciones de Integracin / tablas calibracin / SIM con MSD) Envejecimiento / Recortes de columna.

pg.: 14

2. Mantenimiento Bsico en GC (S/SL-FID). Problemas habituales

Mantenimiento Inyector de Capilares

Operacin en modo split
Mantenimiento Bsico Inyector:" Cambiar Peridicamente Septum Cambiar Peridicamente Liner Cambiar Peridicamente los Filtros de Gases Cambiar /limpiar Gold Seal (y arandela de cierre) Cambiar trampa del inyector
Sensor de presin Vlvula Propocional Sensor de flujo Regulador de Purga de septum

Filtros Purificacin Gases Fuente de gas Iny. de capilares

Septum Liner Gold Seal

Septum Vent
Trampa

Vlvula on/off ON

Split Vent

Flujo bajo Flujo alto Columna

Vlvula Proporcional

Al Detector

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Mantenimiento de detector de Ionizacin de Llama (FID)

Detector FID aire Extremo columna capilar (1-2 mm desde la parte superior del jet) H2+ gas auxiliar Jet

Recomendaciones:
agua)

No encender Llama si T<150C (evitar condensacin

Si se cambia a menudo de columna, mejor usar frulas vespel-grafito que 100% grafito (no dejan residuos) Al intercambiar los jets de packed y capilares apretar sin forzar en exceso
(si se cambia con frecuencia con el tiempo se deber renovar)

Extremo de salida de la columna

Limpiar el jet slo cuando se requiera

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Flujos habituales del FID

Gas Type Carrier Gases (H2, He, N) Packed columns Capillary columns Hydrogen Air Column + Makeup

Flow Range 10 60 ml/min 0.5 5 ml/min 24 60 ml/min 200 600 ml/min 10 60 ml/min

Typical Flow 30 ml/min (1/8 column) 1.5 ml/min (0.32 mm column) 40 ml/min 400 ml/min 30 ml/min

Detector Gases

Problemas habituales del FID

La llama se apaga o no se enciende
Comprobar los valores de los parmetros del detector (teclado) Flows (Flujos) Flame ON (llama encendida) Detector ON (detector encendido) Comprobar el jet Comprobar el encendedor (ignitor) Comprobar las conexiones de la columna Comprobar las presiones de suministro de los gases Comprobar el disolvente y el volumen de inyeccin

Ruido Poca sensibilidad Deriva

Slide 19

Resolucin de problemas de ruido del FID

Cerrar H2 y aire

Sigue haciendo ruido?

No

Comprobar/limpiar/sustituir: Conexin de interconexin o del colector Colector y aislantes Interconexin del detector Tarjeta del detector

Comprobar/limpiar/sustituir: Filtros, trampas y gases Jet del FID Columna y sus conexiones Inyector y fungibles

Problema elctrnico

Problema de contaminacin
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Mantenimiento rutinario del FID

Controlar la seal de fondo Comprobar presiones y flujos Limpiar o cambiar el jet Inspeccionar el encendedor (ignitor) Limpiar el colector Retirar, cortar y volver a instalar la columna

Slide 21

3. Mantenimiento Bsico en GC/MS. Problemas habituales

Consejos generales:
En la medida de lo posible, deberamos conocer los niveles de concentracin de los analitos que queremos analizar y siempre inyectar la menor cantidad posible. Si no es posible y disponemos de un sistema GCFID, analizarlo previamente en ste. Evitar columnas de dimetro ancho Evitar columnas de gran espesor de pelcula. Usar patrones para evaluar el sistema Realizar tareas de mantenimiento preventivo para minimizar los posibles problemas. Mantener un registro (logbook)

pg.: 23

Revisin y Mantenimiento MSD

Frequency
Autotune PFTBA Mechanical Pump Oil Weekly Monthly check Weekly: check level and appearance. Semi-annually: change oil and foreline trap. Diffusion Pump Oil Ion Source Electron Multiplier HED Vent plug O-ring Filaments Annually As needed As needed As needed As needed As needed 05971-80103 G1099-80001 0905-1217 05971-60571 Litre: 6040-0834 Gallon: 6040-0789 Foreline trap pellets: 9301-1104 (5971 & 5972 only) 6040-0809 Replace if needed Clean as necessary. Keep under vacuum. Use lowest possible voltage Replace if needed Replace if needed Use solvent delay to prolong filament use

Part #

Remarks
Keep as record of system performance Refill as necessary. DO NOT overfill. Replace as scheduled

05972-60053, G2590-60053

pg.: 24

Sintonizado (Tuning) MS con PFTBA

Espectro Perfluorotributilamina (PFTBA: C12F27N PM:671)
Scan: 10.00 - 650.00 Samples: 16 Thresh: 500 117 peaks Base: 69.00 Abundance: 1974784
100

69
50 131

F3 C - F2C - F2C - F2 C

219

.. N

CF2 - CF2 - CF2 - CF3

F3 C - F2C - F2C - F2 C

Vial/Electrovlvula para introduccin vapores de solucin de sintonizado: PFBTA

264 0 50 100 150 200 250 300 350 400

414 (GCD)
450 500

502
550 600

614 650

Mass Abund Rel Abund Iso Mass Iso Abund Iso Ratio

69.00 1974784 100.00 219.00 1161216 58.80 502.00 56648 2.87

70.00 503.00

20344

1.03 3.96

219.95 45968

5690 10.04

Peridicamente (y al poner en marcha) se deber efectuar un sintonizado del MSD.

pg.: 25

Revisin del Informe Sintonizado Automtico (Atune)

Anchos de pico de masa consistentes Perfiles simtricos de los picos de masa

Aspectos a controlar
El chequeo automtico que se obtiene despus del sintonizado revisa todos estos aspectos a controlar

Apropiado voltaje del EM

Adecuada abundancia absoluta Bajo background Bajo contenido en agua y aire (<20 / <10%) Asignacin correcta de masas Tpica abundancia relativa Adecuada relacin de istopos INFLUENCIA C13: 69/70 =C1 1.1% 219/270 =C4 4.4% 502/503 =C9 9.9%

pg.: 26

Evaluacin / Verificacin del Sintonizado

Early Maintenance Feedback (EMF)

Set limits and counters Each time a method is run, the limits will be checked An alert box is displayed if the EMF check indicates a limit has been reached If the system is running a sequence, any EMF alerts will be logged into the sequence log

Problemas comunes en GC/MS

Problema
Baja sensibilidad

Causa Probable
GC conditions/problems Nivel de ruido alto Problemas de vaco Tuning Muestra Carrier gas GC MS Fugas de aire Flujo de columna Bombas Impaciente No entrenado

Contaminacin

Problemas de vaco

Usuario

Remember to use the MSD Hardware Manual's Troubleshooting section!

pg.: 29

Troubleshooting: Baja sensibilidad y contaminacin

Baja sensibilidad
GC: Septum, liner, gold seal, temperatura de la columa, parmetros de split/splitless, jeringa, etc. MS: Revisar tune reports, parmetros de data acquisition (tune file, EM voltage), vaco.

Contaminacin
Conexin y estado de Inyector/columna- puntos activos! Septum/column bleed Disolventes de limpieza Huellas dactilares (guantes!)
Determine source of contamination from spectra

Verify site of contamination by isolating MS from GC

pg.: 30

Troubleshooting: Problemas de Vaco

Cmo se mide el vaco? Qu vaco es normal?
Mediante un tubo de vaco y un medidor. La presin debe estar en el rango bajo de 10-5 torr. Debemos conocer el vaco de nuestro sistema en condiciones standard.

Con qu eficiencia funciona el sistema de vaco?

Velocidad de eliminacin PFTBA despus de un tune

Fugas
Examinar Standard Spectra Tune report (masa 28<10 %, por lo menos) Localizar posibles fubas a travs de Manual Tune/Repeat Profile con algn gas como:
Argn - masa 40 CO2 - masa 44

pg.: 31

Troubleshooting: Prdida de sensibilidad y/o contaminacin. Cmo identificar un fuente sucia?

Mala reproducibilidad El equipo no sintoniza con Standard Spectra Tune (STUNE.U): STUNE es el tune de control de calidad de nuestro espectrmetro de masas STUNE.U presenta:
Low high-mass abundance (502) Improper isotope ratios (M + 1) High background High EM voltage

Cunto tiempo hace que no se ha limpiado la fuente? Cuntas muestras hemos analizado?

pg.: 32

Procedimiento de Limpieza de la Fuente de Iones

1.- Hacer una pasta slurry de MicroGrit con agua 2.-Usando los bastoncillos suministrados con el MS, aplicar la pasta y pulir cada parte hasta eliminar de su superficie todo resto de material y coloracin (este tratamiento no rayar la superficie metlica). 3.-Lavar minuciosa!!! y repetidamente!!! con AGUA USAR LOS VIDEOS DE MANTENIMIENTO!

Limpieza de la Fuente de Iones

Enjuagar con Disolvente

NO EXPONER a Disolvente

Limpieza de la Fuente de Iones

Agua Metanol Acetona Hexano

Sonicar 5 min
Elimina sales

Sonicar 5 min

Sonicar 5 min

Sonicar 5 min
Elimina compuestos apolares

Elimina compuestos polares

Los disoventes deben estar muy limpios! Especiamente el hexano !!

pg.: 35

Iones tpicos procedentes de contaminacin y background en GC/MS

15,

, 68, 69, 76, 77 94, 168, 170, 186, 262, 278, 354, 446 Diffusion Pump Oil

Para reducir background (H2O,N2,O2,..) es til empezar los brridos desde masa 29 o 33

GC Problem 1 - Tuning

Increasing no of peaks Mass 207 Column bleed Isolation !!

GC Problem 2 - Tuning
Vacuum down

Mass 502 low

Column flow ?

4. Instalacin, Cuidado y Mantenimiento de Columnas Capilares para Cromatografa de Gases

o... No es lo que tu columna pueda hacer por t, sino lo que tu puedas hacer por tu columna"

Mantenimiento Bsico de la Columna GC

Acondicionar la columna antes de usarla Cortar cuando se requiera (p.e. por colas en picos) un trozo de cabeza de columna (p.e. 50cm). Tpico en splitless. Uso de RTL! Los cortes en los extremos de la columna deben ser adecuados Limpiar trmicamente o con disolvente cuando se requiera

Corte de la Columna
Cortar con cuidado el recubrimiento de poliimida. No intentar cortar el vidrio. Herramientas recomendadas: Lpiz con punta de diamante o de carburo, herramienta de zafiro para cortes o cortador cermico Proteccin ocular No usar: Tijeras, lima, etc.

Bien cortada

Instalacin de la Columna
Midiendo la distancia correcta

INYECTOR: la columna debe sobresalir unos 4 o 5 mm del extremo de la conexin

Marcar con Tipp-ex o

Septum (mejor)

GC/MS

Colocar la columna hasta que sobresalga 1 mm de la punta de la interfase.

Comprobacin de Fugas y de la Instalacin de la Columna:

Inyectar un compuesto no retenido

Detector FID ECD NPD TCD MS

Compuesto (para columnas apolares) Metano o Butano CH2Cl2 (headspace o disuelto*) CH3CN (headspace o disuelto*) Aire Aire o Butano
El pico debe ser estrecho y simtrico (sino se inyecta un exceso)
* Inyectar una baja concentracin

Formas de Picos No Retenidos

Buena Instalacin
Comprobar: Fuga en el inyector o en el septum Una relacin de split demasiado baja

Instalacin no apropiada o fuga en el inyector

Problemas en el liner (roto, fugas, mal colocado) Posicin de la columna en el inyector y en el detector

Acondicionado Diario de la Columna

Las impurezas del gas portador se preconcentran en la columna cuando sta se mantiene a bajas temperaturas durante periodos de inactividad

1.- Si el cromatgrafo estaba parado: para eliminar el oxgeno de su interior, dejar durante 10-20 minutos la columna a temperatura ambiente con el gas portador abierto y asegurarse que ste fluye a travs de la columna. 2.- Abrir gases del detector y empezar a calentar inyector y detector. 3.- Incrementar la temperatura de la columna hasta 20-25 C por encima de la temperatura mxima de trabajo (sin llegar a superar la temperatura mxima de la columna) y mantenerla durante 15-30 min.

Despus de largos perodos de inactividad de la columna o si sta no est limpia convendr aumentar considerablemente el tiempo de acondicionado.

Perfil Tpico de Sangrado de la Columna

Hacer un programa de temperaturas a la columna sin inyectar*
1.3e4 1.2e4 1.1e4 1.0e4 9000 8000 7000

Si la columna est limpia y en buen estado, el perfil NO debe contener picos y debera ser repetitivo

Sangrado: seal de fondo normal generada por la elucin de los productos de una degradacin normal de la fase estacionaria de la columna
2 1

Tpico sangrado GC/MS de columnas apolares 2

6000

Tiempo (min.)

10

15

20

25

*DB-1 30m x .32mm I.D., .25m Programa de Temperatura // 40C, esperar 1 min // 20/min a 320C, esperar 10 min.

pg.: 46

Evaluacin del Rendimiento de la Columna

1225032 PART NO: COLUMN I.D. NO.: 3303121 LIQUID PHASE: DB-5 FILM THICKNESS: 0.25 m COLUMN DIMENSIONS: 30 mX 0.252 mm TEMPERATURE LIMITS: -60 C TO 325 C ( 350 C PROGRAM)
COMPOUND
Approximately 5-10 ng on column

RETENTION TIME

PARTITION PEAK RATIO (k) WIDTH (W 1/2)

1,6-HEXANEDIOL 4-CHLOROPHENOL METHYL NONANOATE 4-PROPYLANILINE

2.51 2.95 3.21 3.81 4.20 5.52 8.00 9.58

0.9 1.3 1.5 1.9 2.2 3.3 5.2 6.4

0.019 0.022 0.022 0.026 0.027 0.036 0.053 0.062

THEORETICAL PLATES/METER: PENTADECANE COATING EFFICIENCY: PENTADECANE RETENTION INDEX: 1-UNDECANOL ACENAPHTHYLENE PEAK HEIGHT RATIO: 4-CHLOROPHENOL/ METHYL NONANOATE 4-PROPYLANILINE/ METHYL NONANOATE
MIN SPEC

MIN SPEC

ACTUAL

3900 90.0
MAX SPEC

4389 95.5
ACTUAL

TRIDECANE 1-UNDECANOL ACENAPHTHYLENE PENTADECANE

1371.04 1459.34

1372.04 1460.34

1371.43 1459.53

0.83

To

1.29

1.14

Compuestos
Hidrocarburos Alcoholes FAMEs, PAHs Acidos Bases

Propsito
Eficacia y Retencin Actividad Retencin Carcter cido Carcter Bsico

Para usos especficos evaluarlo con un patrn de los compuestos analizados

Causas Comunes de la Degradacin del Rendimiento de una Columna

Deterioro del recubrimiento de poliamida Dao trmico Oxidacin (deterioro por O2) Dao qumico debido a muestras Contaminacin

Dao Trmico
excesivamente elevadas

Dao Trmico: Degradacin rpida de la fase estacionaria debido a temperaturas

Cmo evitarlo?: no superar lmites de temperatura

Lmite isotrmico = se puede aplicar un tiempo indefinido Lmite para programacin de temperaturas = mx. 5-10 min. /mta

Cmo intentar solucionarlo?

Desconectar la columna del detector Acondicionar durante toda la noche en el lmite isotrmico Cortar 10-15 cm del final de la columna (suele ser la zona de la columna sometida a mayor temperatura).

Dao debido al Oxgeno

Dao por Oxidacin: el oxgeno en el gas portador degrada rpidamente la fase
estacionaria. El dao se acelera a temperaturas elevadas.

Se puede solucionar?:
Dao rpido a la columna . Normalmente se trata de un dao irreversible a la columna.

Cmo prevenirlo?:
Gas portador de elevada calidad (99.999 mnimo). Trampas para impurezas de gases adecuadas. Inyector, septum y lneas libres de fugas. Purgar la lnea si ha entrado aire (p.e. durante cambio botellas) Mantenimiento de la instalacin y de los reguladores de gas.

Dao Qumico debido a las muestras

Las columnas ligadas y entrecruzadas tienen una resistencia qumica excelente excepto para cidos y bases inorgnicas:

HCl NH3 KOH H2SO4 H3PO4 HF

NaOH etc.

Los no voltiles afectarn mayoritariamente al liner

El dao qumico se hace evidente mediante un sangrado excesivo, prdida de su capacidad inerte o prdida de resolucin/retencin

Cmo intentar solucionarlo?

Cortar 1/2 - 1 metro del inicio de la columna Los casos severos es posible que requieran un corte de hasta 5 metros

Contaminacin de la Columna
Todas las muestras contienen residuos!

Sntomas de Contaminacin:
Colas en los picos Prdida de separacin (resolucin) Cambios en la retencin Reduccin del tamao y ensanchamiento del pico Distorsiones en la lnea de base (causadas por semivoltiles)

Cmo solucionar la contaminacin por Semivoltiles?:

Efectuar una limpieza del inyector, liner, Limpiar trmicamente la columna.

Contaminacin por NO-Voltiles

Cmo intentar evitarla?
Utilizar liners con lana de vidrio silanizada. Cambiar frecuentemente el liner

Cmo intentar solucionarla?

No acondicionar la columna Efectuar mantenimiento: limpiar o cambiar el liner del liner del inyector limpiar el inyector cortar 1/2 -1 metros de cabeza de columna Dar la vuelta a la columna Lavar la columna con disolvente ltimo recurso: cortar la columna en dos y evaluar la parte final de la columna.
pg.: 53

Troubleshooting Chromatograms 1
Pasa autotune
Concentracin de muestra inadecuada No hay analitos presentes Jeringa mal instalada, daada o no instalada en el inyector automtico Inyeccin realizada accidentalmente en split mode en lugar de splitless mode Sin muestra o poca muestra en el vial Inyector muy sucio Inyector con fugas Columna desonectada de inyector/rota

No hay picos

No pasa autotune
No hay muestra de calibracin (PFTBA) Presin muy alta en el sistema de vaco

Troubleshooting Chromatograms 2
Puntos activos en el camino que recorre la muestra

(sample path)
Picos con colas

Volumen de inyeccin muy grande Temperatura del inyector incorrecta Flujo de columna inadecuado Temperatura de la interfase GC/MSD muy baja Temperatura de la fuente iones demasioda baja

Troubleshooting Chromatograms 3
Picos frontales Espesor de pelcula de la columna inadecuado a la concentracin de los analitos (column overload) Temperatura inicial de la columna demasiado baja Puntos activos (Active sites in the sample path) Volumen de inyeccin muy elevado Presin GC inlet demasiado elevada Insuficiente flujo de columna

Troubleshooting Chromatograms 4
Picos saturados Insuficiente solvent delay Incorrecta escala Inyeccin demasiado grande Voltaje del multiplicador demasiado elevado

Picos dobles

Mala tcnica de inyeccin Inyeccin demasiado grande Inyeccin lenta

Troubleshooting Chromatograms 5

Linea de base con deriva

Sangrado-Column bleed Contaminacin diversa

Linea de base alta

Sangrado-Column bleed Contaminacin diversa Voltaje del multiplicador demasiado elevado

Page 58

Troubleshooting Chromatograms 6
Indicativo de que la contaminacin est desapareciendo. Esperar hasta que se estabilice. Causas: Agua y aire residual (hace poco que el equipo se ha encendido despus de un venting) Column bleed Septum bleed Tiempo de inyeccin Splitless demasiado largo (el inyector no se ha purgado con gas adecuadamente, transfirindose demasiado disolvente a la columna)

Linea de base con deriva negativa (drift)

Presin baja (Insufficient carrier gas supply pressure)

Linea de base oscilante (Baseline wander)

No funciona el control de presin o flujo adecuadamente Fuga intermitente en el inyector

Troubleshooting Chromatograms 7

Los tiempos de retencin de todos los picos se adelantan

La columna se ha cortado Cambio en la temperatura inicial del horno (aumento) La columna ha envejecido Mal funcionamiento del horno Mal funcionamiento del control de presin Obstruccin en la linea de split/liner sucio El flujo ha cambiado (disminucin) Cambio en la temperatura inicial del horno (disminucin) Puntos activos en el sistema Fugas en el inyector

Los tiempos de retencin de todos los picos se atrasan

Pgina Web MyGCColumns Un unico sitio donde encontrar todo www.agilent.com/chem/myGCcolumns

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My brain is full. May I be excused please?

Muchas Gracias