DETERMINACION DE MOHOS Y LEVADURAS

1. INTRODUCCION

Los mohos y levaduras se encuentran ampliamente distribuidos por el medio ambiente, se encuentran como flora normal de un alimento, o como contaminantes ya que estos estn constituidos por sustancias que son un excelente medio para la sustentacin y reproduccin de varias especies fngicas. Los alimentos ms propensos a esta contaminacin son aquellos que tengan bajos niveles de pH, baja humedad, alto contenido en sales o carbohidratos, baja temperatura de almacenamiento o la presencia de antibiticos. Los mohos ms importantes en alimentos son: Mucor, Rizhopus, Aspergillus y Penicillum El crecimiento de los mohos en los alimentos es fcil de reconocer por su aspecto aterciopelado o algodonoso, a veces pigmentado. Los hongos producen micotoxinas a las que el hombre es susceptible, provocando infecciones o reacciones alrgicas. Las levaduras en los alimentos pueden poseer caractersticas benficas o perjudiciales. Benficas: cuando se utilizan para la elaboracin de alimentos como pan, cerveza, vinos, vinagre y quesos, adems se utilizan en la obtencin de enzimas y la fermentacin de alimentos. Perjudiciales: cuando producen la alteracin de zumos de frutas, jarabes, melaza, miel, carnes, vino, cerveza y de otros alimentos. Las levaduras crecen mejor con un alto contenido de humedad. La mayora de las levaduras necesitan mayor humedad que los mohos; la temperatura de crecimiento es parecido al de los mohos, con una temperatura optima en torno a los 25 a 30C y una temperatura mxima en torno a los 35 a 47C. Crecen mejor en aerobiosis, aunque las levaduras de tipo fermentativo son capaces de crecer en anaerobiosis. Los azucares son la fuente energtica ms apropiada para las levaduras, aunque las oxidativas, pueden oxidar los cidos orgnicos y el alcohol.

2. OBJETIVOS

Realizar mediante el mtodo de cuenta en placa, el nmero de mohos y levaduras presentes en productos de consumo humano. Evaluar la calidad microbiolgica de los alimentos de consumo humano. Realizar diluciones que permitan desconcentrar las muestras e identificar ms asertivamente la cantidad de mohos y levaduras presentes en los alimentos.

3. MATERIALES, MEDIOS DE CULTIVO Y EQUIPOS.

Agar Papa Dextrosa (PDA) Solucin amortiguadora de fosfatos de pH 7.2 o agua Peptonada 0.1% Solucin estril de cido tartrico al 10%. Matraz Erlenmeyer. Pipetas graduadas estriles. Cajas de Petri. Incubadora. Autoclave.. Contador de colonias.

METODOLOGIA.

DILUCIONES SERIADAS (1:100, 1: 1.000, 1: 10.000) Pesar 10.0g de muestra y pasarla a un matraz Erlenmeyer que contenga 90.0 ml de una solucin amortiguadora de fosfatos pH 7.2 o agua Peptonada al 0.1%. Homogenizar la mezcla anterior aproximadamente durante un minuto por agitacin. De la solucin anterior tomar 1.0 ml y transferirlo a un tubo de ensayo que contenga 9.0 ml de solucin amortiguadora de fosfatos de pH 7.2, agitar y repetir la operacin tantas veces como diluciones sean necesarias. Se deben utilizar pipetas estriles para cada dilucin.

SIEMBRA Colocar por duplicado en cajas de Petri estriles, 1.0ml de cada una de las diluciones de la muestra, utilizando una pipeta estril. Para acidificar los medios a un pH de 3.5, adicionar por cada 100ml de agar, 1.4ml de cido tartrico al 10% esterilizado. En cada caja de Petri con inoculo, verter de 15 a 20 ml de agar papa dextrosa acidificado fundido y o mantenido a +/- 45C. el tiempo transcurrido entre la preparacin de las diluciones y el momento del vertido el medio de cultivo no debe de exceder de 20 minutos. Mezclar cuidadosamente el medio con seis movimientos de derecha a izquierda, seis en el sentido de las manecillas del reloj, seis en sentido contrario y seis de atrs hacia adelante, sobre una superficie lisa, teniendo cuidado de no derramar el contenido de la caja. Dejar solidificar sobre una superficie lisa. Invertir las cajas y colocarlas en la incubadora a 25+/- 1C durante 5 das.

TABLA DE RESULTADOS