TOXICOLOGIA AMBIENTAL 2.

1 Introduccin Cuando el txico llega al organismo, dependiendo de la va de exposicin, entra en contacto con las superficies epiteliales del tracto digestivo, del aparato respiratorio o de la piel. Cuando cruza esas membranas y alcanza el torrente sanguneo, se considera que el txico penetr al organismo. La sangre lo transporta a los distintos rganos y en uno o en varios de ellos puede llegar a causar un dao permanente. La cantidad de txico que penetra al organismo puede ser muy diferente de la cantidad inhalada o ingerida, debido a que la substancia no siempre est 100% biodisponible. Por ejemplo; el arsnico ingerido en el agua se absorbe casi totalmente, pero se absorbe mucho menos si el vehculo de ingreso es el suelo. El arsnico no est igualmente disponible cuando est absorbido en las partculas de suelo que cuando est disuelto en el agua. En este caso, para ingestas de la misma cantidad de arsnico, una persona tendr una concentracin mayor en sangre cuando el vehculo fue el agua potable. Para estudiar el transporte, modificaciones y destino de los txicos dentro del organismo es necesario determinar la concentracin de las especies qumicas que producen los daos, as como medir la magnitud de esos daos. Las substancias que llegan a las superficies de contacto del organismo con el medio ambiente lo penetran a velocidades diferentes, dependiendo de sus propiedades fisicoqumicas y de las condiciones que existan en la superficie de contacto, tales como, rea y permeabilidad de la membrana de contacto y magnitud del flujo sanguneo en la zona de contacto. El xenobitico es transportado por la sangre a los distintos rganos del cuerpo en los que se distribuye y en algunos de ellos puede llegar a producir un dao. Desde el momento en que el txico penetra en el organismo empieza a ser transformado por las distintas enzimas del organismo de las que pueden ser substrato. Al conjunto de reacciones que convierten los txicos en especies qumicas distintas que pueden ser menos o ms dainas que el txico original, se le da el nombre de biotransformacin. Si los convierten en substancias ms dainas se dice que el proceso fue una bioactivacin y si lo convierten en substancias menos peligrosas se dice que el proceso fue una destoxificacin. Los procesos de destoxificacin normalmente consisten en incrementar la polaridad de los xenobiticos lo cual los hace menos difundibles a travs de las membranas biolgicas y ms solubles en el agua, lo cual facilita su excrecin en forma de solucin acuosa (orina). Estos procesos reducen la cantidad de txico que penetra al tejido blanco, as como, el tiempo de permanencia del txico dentro del organismo y, por lo tanto reducen la magnitud del dao probable a las clulas del tejido blanco. Adems del tiempo y concentracin de contacto entre el txico y el tejido blanco tambin influyen en la magnitud del dao la toxicidad del agente y el estado del receptor. Los daos producidos pueden ser reversibles debido a que las clulas tengan capacidad de reparar los daos que sufran o bien pueden ser irreversibles y producir una transformacin permanente, incluyendo la muerte de la clula, en cuyo caso se dice que se produjo una respuesta txica. A partir del estudio de la relacin que existe entre la dosis contactada por un organismo y la magnitud de la respuesta txica se llega a la estimacin de los ndices toxicolgicos que son una medida de la peligrosidad de una substancia. Este parmetro es el que se usa para estimar los riesgos en la poblacin expuesta a los txicos, que se encuentran en los distintos medios que constituyen el ambiente de una determinada poblacin que, habita, trabaja o hace otros usos de un sitio contaminado. 2.2 Cuantificacin de txicos en el organismo. Como se mencion anteriormente, la respuesta txica en un rgano determinado depende de la exposicin de ese rgano al txico, o sea el dao depende de la concentracin de la substancia en el tejido blanco. Es evidente que si se desea estudiar cuantitativamente el efecto de los txicos ambientales en la salud del hombre es necesario poder estimar la cantidad de txico que realmente entr al

organismo, estudiar las transformaciones que le hace el metabolismo y las concentraciones en las que se encuentran las especies txicas en los distintos rganos del cuerpo. La estimacin de la concentracin de las especies txicas en los medios corporales se puede hacer de dos formas: por medio de muestreo biolgico y por el uso de marcadores biolgicos. 2.2.1 Muestreo biolgico El muestreo biolgico o dosimetra interna consiste en la determinacin cuantitativa de la concentracin del txico o sus metabolitos en uno o ms medios corporales del organismo expuesto. Esta informacin se usa para estimar la exposicin que experimentan cada uno de los tejidos del cuerpo, con el fin de estimar la magnitud de la exposicin ambiental y para demostrar que existi una exposicin efectiva. El simple hecho de que el txico se encuentre dentro del organismo es la prueba de que existi la exposicin. El diseo del muestreo biolgico consiste en seleccionar el medio biolgico que se va a muestrear, la especie qumica que se deber analizar y el tiempo al que se deber tomar la muestra. Es necesario asegurarse que las condiciones de muestreo sean las que proporcionen observaciones de valores representativos del nivel del txico en el organismo. Factores principales que se consideran al disear el muestreo. Tipo de Exposicin. En el caso de las exposiciones intermitentes el tiempo transcurrido desde la exposicin es muy importante debido a que la concentracin del agente puede variar rpidamente con el tiempo. La concentracin interna se incrementa al inicio de la exposicin y despus empieza a disminuir debido al efecto de los procesos de desintoxicacin del organismo (metabolismo y excrecin). El tiempo transcurrido no es tan importante si la exposicin es continua, ya que la concentracin del compuesto estar prcticamente constante, cuando se establece el rgimen estacionario. Movilidad y metabolismo. Dependiendo de las propiedades fsicoqumicas y bioqumicas del txico ste se transportar a distintas velocidades hacia los rganos, se acumular y se transformar a velocidades diferentes en cada uno de los rganos en los que penetr. Si el compuesto original se biotransforma rpidamente, entonces su concentracin, en los medios biolgicos, ser muy baja y en ese caso es ms significativo seguir la concentracin de sus metabolitos. El compuesto se puede encontrar en la sangre, acumulado en grasa, pelo, uas, msculo o hueso, o encontrarse en las secreciones del organismo (orina, heces, leche, sudor) etc. Facilidad de muestreo. Se prefiere analizar los medios de los que se puedan obtener las muestras ms fcilmente, invadiendo el organismo lo menos posible. Se prefiere el medio en el que se encuentre la especie qumica relevante en forma ms fcil de analizar. El muestreo de cada medio tiene sus ventajas y desventajas y la seleccin del medio ms adecuado, en cada caso, depender del balance entre esas ventajas y desventajas. Los medios ms comnmente analizados son la orina, la sangre y el cabello. A continuacin se describen las caractersticas principales de los muestreo de estos medios. 2.2.1.1 Orina En este medio se encuentran los xenobiticos y/o sus productos de excrecin que sean solubles en agua. El muestreo es muy sencillo, no requiere de procedimientos invasivos ni de personal especializado. Como la orina es una solucin acuosa homognea es muy fcil estimar la recuperacin del analizando. Los cambios en flujo y composicin de la orina influyen sobre la concentracin de las substancias en este medio y por lo tanto los resultados se deben de corregir por estos factores. 2.2.1.2 Sangre Como se mencion anteriormente, la sangre se supone que est en equilibrio con todos los rganos del cuerpo y, por lo tanto, es el medio que mejor refleja la exposicin de los diferentes rganos en un momento dado. El factor que ms afecta la representatibidad de los resultados del muestreo de sangre es la

distribucin del txico entre el plasma y las clulas que puede variar con el periodo de exposicin y el lapso transcurrido desde que sucedi. Como se ver ms adelante, la distribucin depende de las propiedades fsicoqumicas del compuesto. Los liposolubles normalmente se encuentran en las clulas y los compuestos ionizados en el plasma. En cada uno de estos compartimentos el compuesto se puede encontrar libre o asociado a diferentes ligandos como protenas, cloruros, glutatin. El muestreo de sangre requiere de entrenamiento especializado y se deben de tener los siguientes cuidados: no contaminar la muestra con la aguja o con el recipiente seleccionar procedimientos de muestreo y preparacin que no afecten los resultados. Por ejemplo, si se usa EDTA como anticoagulante no se podr hacer la determinacin del nivel de plomo plasmtico. La concentracin de plomo que se determine en una muestra preparada en esta forma ser un valor ms alto que el real, debido a que el EDTA redistribuye el ion al provocar su emigracin de las clulas al plasma hacer la determinacin del hematocrito para estimar la recuperacin del analizando 2.2.1.3 Cabello La mayora de los compuestos que se incorporan al cabello son los que tienen afinidad por los grupos sulfhidrilo de la queratina El cabello crece lentamente, as que su muestreo no es adecuado para evaluar exposiciones recientes. Se sabe que slo en una de las fases de crecimiento del cabello (anagenia) se incorporan los xenobiticos, presentes en el cuerpo, al eje del cabello y se sabe tambin que la velocidad de crecimiento en esa fase es de 0.37 mm/da. Esta informacin se usa para reconstruir, con buena exactitud, la historia de exposiciones pasadas por perodos prolongados. Desafortunadamente solo se tiene datos para muy pocas substancias que nos permitan estimar el coeficiente de particin sangre-pelo. El principal problema que se tiene con el muestreo del cabello es la contaminacin proveniente de fuentes externas como partculas suspendidas en el aire, contaminantes presentes en el agua, productos de limpieza y cosmticos. El muestreo de cabello no es un procedimiento invasivo. 2.2.1.4 Otros medios Se pueden seleccionar otros medios biolgicos para tomar muestras, tales como, aire exhalado (v.g. en la determinacin de alcohol etlico), clulas exfoliadas de la piel, uas, sudor, saliva, hueso y leche materna. El anlisis de leche materna se utiliza principalmente para estimar exposiciones de infantes, ms que para estimar concentraciones corporales en la madre. 2.2.2 Biomarcadores Los marcadores biolgicos o biomarcadores son los cambios medibles, ya sean estos bioqumicos, fisiolgicos o morfolgicos, que se asocian a la exposicin a un txico. Un nivel anormalmente bajo de colinesterasa es un biomarcador de la exposicin a plaguicidas organofosforados. Los biomarcadores se utilizan para: detectar la presencia de una exposicin determinar las consecuencias biolgicas de la exposicin detectar los estados iniciales e intermedios de un proceso patolgico identificar a los individuos sensibles de una poblacin fundamentar la decisin de intervenir, tanto a nivel individual como ambiental En el diseo de una rutina de muestreo es necesario considerar lo siguiente: especificidad y sensibilidad del biomarcador dificultad de muestreo cintica de la formacin del biomarcador y estabilidad del biomarcador Los biomarcadores ms tiles son los que se pueden obtener menos invasivamente, por eso es

que se prefieren los que se encuentran en sangre. A continuacin se describen varios tipos de biomarcadores 2.2.2.1 Marcadores internos de dosis Indican que el txico ha entrado al organismo. Proporcionan informacin cuantitativa sobre la exposicin y corroboran el ingreso de txicos al organismo. Son los resultados de la dosimetra interna, o sea la concentracin de los xenobiticos y sus metabolitos en los medios biolgicos. 2.2.2.2 Marcadores de dosis biolgicamente efectivas Indican que el txico ya ha producido daos en el organismo . Son los compuestos de adicin estables que forman el txico o sus productos de bioactivacin con los cidos nucleicos y protenas. Cuando se encuentran compuestos de adicin del ADN se puede concluir lo siguiente: que el txico ha llegado a su blanco. que ha reaccionado con l y que probablemente ha producido una lesin la cual puede ser reparada o conducir a un dao permanente. Los productos de la bioactivacin normalmente tienen una vida media muy corta y es difcil medir directamente su concentracin. En este caso se determinan los marcadores de dosis biolgicamente efectivas que producen. Los compuestos de adicin de hemoglobina y albmina son biomarcadores de dosis biolgicamente efectivas muy convenientes debido a que se pueden obtener fcilmente de la sangre. 2.2.2.3 Marcadores de respuesta biolgica Representan estados avanzados del proceso de dao. Son ms persistentes y a menudo representan alteraciones genticas. Ejemplos de estos son las mutaciones de ciertos oncogenes y los intercambios entre cromatinas hermanas. 2.2.2.4 Marcadores de enfermedades Son manifestaciones preclnicas o tempranas de enfermedades, representan el ltimo paso antes de que se establezca la enfermedad que produce la exposicin. Los plipos en el colon son un marcador de enfermedad ya que la continuacin de la exposicin puede conducir a la generacin de un cncer.. 2.2.2.5 Marcadores de susceptibilidad Se utilizan para identificar a los individuos ms susceptibles a daos en una poblacin . Algunos individuos tienen probabilidades ms altas que otros de recorrer completo el camino exposicin-enfermedad. Esto se puede deber a que tienen ms activos los procesos de bioactivacin o a que tienen disminuidas sus capacidades de destoxificar, de excretar o de reparar daos. Ejemplo de un marcador de susceptibilidad es la actividad de la Nacetiltransferasa (NAT). Los individuos con una alta actividad NAT tienen un riesgo ms alto si son expuestos a los compuestos que son bioactivados por NAT (por ejemplo 2aminofluoreno). Resumen. Los biomarcadores son muy tiles, pero es necesario validar la relacin entre el nivel del biomarcador y la exposicin. Los marcadores de respuesta biolgica y de enfermedad no pueden identificar el txico que produjo el dao, pero s indican al investigador qu el dao ha ocurrido y es necesario iniciar la intervencin.