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Introduo; Confiabilidade dos resultados; Pontos crticos do controle de qualidade de um laboratrio; Medidas de eficincia de um mtodo analtico; Mtodos instrumentais.

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O que anlise qumica? o conjunto de tcnicas de laboratrio utilizadas na identificao das espcies qumicas e tambm na quantidade delas.

INTRODUO

Quais caractersticas precedem anlise qumica? Amostragem e preparo da amostra. O que amostragem? o estudo de uma poro limitada de material retirada de um conjunto.

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INTRODUO

Quais so as principais funes da amostragem?

Reduzir a amostra;
Homogeneizar a amostra.

Depende de alguns fatores: Preciso; Exatido; Especificidade; Sensibilidade.

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CONFIABILIDADE DOS RESULTADOS

Coleo e preparao da amostra:

Amostragem; Documentao; Controle de contaminao; Preservao; Transporte para o laboratrio.

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PONTOS CRTICOS

Mtodos de anlise da amostra: Mtodo deve ter exatido, preciso, especificidade e sensibilidade; Mtodo deve ser prtico, econmico e rpido.

PONTOS CRTICOS

Erros: Erros de mtodo; Erros operacionais: amostragem, leitura de medidas, preparao de padres, diluies, limpeza indevida de vidrarias. Erros pessoais: clculos, interpretao. Erros por uso de reagentes impuros e de qualidade duvidosa.

a) Erros determinados

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PONTOS CRTICOS

b) Erros indeterminados:

No podem ser medidos.

No podem ser localizados e corrigidos. Ideal: tratamento estatstico (valor mais exato e preciso das medidas). Instrumentao:

Manuteno peridica: padronizao.

Uso indevido dos equipamentos.

PONTOS CRTICOS

Analista: o indivduo que trabalha com os instrumentos. Deve ser capaz de determinar com exatido e preciso os componentes.

Habilidade do analista: exame interlaboratorial e intralaboratorial de uma mesma amostra.

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Material de referncia: comparao com o mtodo em estudo.

Relaes interlaboratoriais: amostra analisada por outros laboratrios (estudo colaborativo).

Iniciao ao controle de qualidade: clculos estatsticos (exatido e preciso).

Os principais so: Cromatografias; Gasosa; Coluna; Lquida; Em camada delgada. Fotocolorimetria; Absoro atmica. Espectrometria de massas.

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um mtodo fsico de separao.

Componentes a serem separados so divididos em duas fases: fixa (estacionria) e mvel.

Lquida: cromatografia lquida
FASE MVEL

Gasosa: cromatografia gasosa

CROMATOGRAFIAS

Objetivos da cromatografia

Separao e isolamento Posteriormente identificao

Tipos de cromatografia: gasosa (GC ou CG), lquida em coluna, lquida de alta eficincia HPLC ou CLAE), camada delgada (CCD).

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Separao e identificao de componentes presentes na amostra.

Fase mvel: (inerte). gs, geralmente hlio

Todo o processo realizado em vcuo. A amostra volatilizada e inserida em uma coluna cromatogrfica extensa.

CROMATOGRAFIA GASOSA

1. Garrafa de gs 2. Injetor da amostra 3. Coluna cromatogrfica. 4. Detector. 5. Amplificador de sinal. 6. Registrador.

Esquema de um cromatgrafo gasoso

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CROMATOGRAFIA GASOSA

Esquema de injeo da amostra no equipamento

CROMATOGRAFIA GASOSA

- Coluna capilar a mais utilizada. - Comprimento mdio de 30 metros. - Dimetro mdio de 0,5 m.

Esquema de coluna capilar no equipamento

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CROMATOGRAFIA GASOSA

Todo o processo registrado em computador: programa especfico (banco de dados).

Detector, amplificador de sinal e registrador

uma das tcnicas mais utilizadas no fracionamento do extratos vegetais.

Uso

de colunas preenchidas geralmente com slica e de diversos tamanhos e dimenses.

vidro, de inox, etc... de presso maior que a atmosfrica.

Coluna de Uso

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CROMATOGRAFIA EM COLUNA

Colunas da cromatografia em coluna

HPLC

ou CLAE

Usado Fase Fase

na separao e identificao de substncias presentes em uma amostra. mvel: solvente. estacionria: coluna de HPLC de tamanho menor que a de cromatografia gasosa.

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CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

Esquema de um equipamento de HPLC

CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

Seringa e injetor do CLAE

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CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

OBS:

SERINGAS

Diferem Pode

das seringas do GC: no podem ter ponta. danificar o selo: vazamento e inviabilidade da anlise (perda de vcuo). no devem possuir bolhas: resoluo ruim dos picos.

Amostras

CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

Colunas para HPLC

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CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

OBS: COLUNAS
10 a 30 cm. de 5 mm.

Comprimento de

Dimetro interno: mximo

Suporte

de slica (SiO2) ou alumina

de slica modificada

(Al2O3): polares (fase normal).

Suporte

quimicamente: objetivo de deix-la mais

apolar (fase reversa).

CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

Todo o processo registrado em computador: programa especfico (banco de dados).

Detector, amplificador de sinal e registrador

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CROMATOGRAFIA LQUIDA DE ALTA EFICINCIA

Cromatograma de um extrato analisado por HPLC

CCD Mtodo

de separao e identificao de substncias presentes em uma amostra. de placas de CCD: podem ser sintetizadas em laboratrio. Ex: gel de slica. mvel: solvente.

Uso

Fase

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CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

Desenvolvimento: cuba fechada e previamente saturada com a fase mvel.

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

Aplicao

das amostras com capilares

de vidro.
Migrao Uso

de componentes e adsoro na fase estacionria. de substncias reveladoras: vapores de iodo, ninidrina, lmpada UV. execuo. com

Fcil compreenso e Tcnica rpida e

baixo custo.

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CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

Deteco da substncia a partir do ndice de reteno (Rf).

Rf: razo entre a distncia percorrida pela mancha do componente e a distncia percorrida elo solvente.
Rf = dc/ds
dc = distncia percorrida pelo componente da mistura. ds = distncia percorrida pelo solvente.

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CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

ndice de reteno: cada substncia possui um (banco de dados). Pode acontecer de duas substncias possurem o mesmo ndice de reteno. O mtodo no to especfico.

Tcnica de anlise quantitativa que envolve a medida de intensidade de absoro de luz monocromtica de um composto qumico em soluo.

Os comprimentos de onda utilizados esto entre 350 nm e 750 nm: solues coradas.

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FOTOCOLORIMETRIA

FOTOCOLORIMETRIA

Amostras lquidas incolores podem ser analisadas por fotocolorimetria? Sim, desde que ocorra uma reao qumica especfica na substncia em questo. Resultado: produto corado.

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FOTOCOLORIMETRIA

Como funciona o equipamento de fotocolorimetria?

FOTOCOLORIMETRIA

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FOTOCOLORIMETRIA

Lei de Lambert-Beer: Absorbncia: quantidade de luz absorvida ou refratada. Transmitncia: quantidade de luz que atravessa a soluo e chega ao detector.

FOTOCOLORIMETRIA

Existe uma relao no linear (logartmica) entre a absorbncia e a transmitncia:

A = 2 log T

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FOTOCOLORIMETRIA

O que deve ser feito para quantificar uma substncia da minha amostra? Saber qual a substncia a ser analisada. Preparar diversas solues padres com concentraes diferentes. Medir as absorbncias no equipamento. Criar a curva de calibrao. Analisar a amostra no equipamento.

FOTOCOLORIMETRIA

Exemplo de construo da curva de calibrao

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FOTOCOLORIMETRIA

Construo da curva de calibrao no Excel

O que absoro atmica? a interao (absoro) da radiao

eletromagntica (UV-visvel) com a matria (tomos individuais ou ons elementares no estado gasoso).

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ABSORO ATMICA

Quais so os princpios bsicos da absoro atmica? Todos os tomos absorvem luz. O comprimento de onda no qual a luz absorvida, especfico para cada elemento. A quantidade de luz absorvida proporcional concentrao das espcies.

ABSORO ATMICA

Aparelho realiza anlise quantitativa de metais. Como funciona o equipamento de absoro atmica?

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ABSORO ATMICA

tomos analisados so capazes de absorver energia no comprimento de onda da radiao que eles emitiriam se fossem excitados a partir do estado fundamental.
Luz absorvida: proporcional ao n de tomos no estado fundamental.

Espectrometria

de massa: identificao de picos cromatogrficos. CG ou CLAE. que forma um pico bombardeada com feixe de eltrons. substncia em ons.

Encontra-se acoplado ao Substncia

Fragmentao da

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ESPECTROMETRIA DE MASSAS

ons

separados por um analisador por campo eltrico (quadrupolo). o processo de cromatografia gasosa e espectrometria de massa realizado em vcuo.

Todo

ESPECTROMETRIA DE MASSAS

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1) Qual a diferena existente entre preciso e exatido? 2) Quais caractersticas devem ser consideradas para realizar o controle de qualidade de um laboratrio analtico? 3) Quais so os principais erros que um analista est sujeito?

EXERCCIOS

4) O equipamento de fotocolorimetria consegue caracterizar uma substncia presente na amostra? Por que? 5) A cromatografia em camada delgada um mtodo especfico? 6) A CG um mtodo sensvel e especfico? Por que? 7) Qual a funo do espectrmetro de massas?

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