Determinacin de cido rico los mtodos de determinacin de acido rico se basan en el poder reductor del urato, tanto en medio

acido como alcalino. Se puede medir el cido rico por mtodos qumicos o por mtodos enzimticos. Mtodos qumicos En medio acido, el acido rico se descompone en aloxano y urea; en medio alcalino la oxidacin del urato produce lanolina y peroxido de hidrogeno. La cuantificacin se realiza por procedimientos colorimtricos empleando un cromgeno, como al acido fosfotungstico, iones ferricos o la neocuproina, que se reduce de manera simultanea con la oxidacin del urato. Su principal inconveniente era la falta de especificidad, por la que han quedado relegados a un segundo plano. Mtodos enzimticos. La enzima uricasa aislada de tejidos de mamferos degrada el acido rico en presencia del oxigeno del aire, en alantoina y perxido de hidrogeno. Las restantes reacciones analticas parten del perxido de hidrogeno formado. Acido urico uricasa alantoina H2O2

El mtodo de Kageyama, el perxido de hidrogeno oxida, presencia de catalasa, el metanol a formaldehido, el cual reacciona con la acetilcolina en presencia de iones amonio, dando un cromgeno amarillo, cuyo mximo de absorcin se situa a 410 nm. En el mtodo de Haeckel, el perxido de hidrogeno oxida etanol a acetaldehdo en presencia de la catalasa. El acetaldehdo es oxidado a acetato por la enzima aldehdo deshidrogenasa, y el NADP pasa a NADPH, que absorbe a 340 nm. En el mtodo de trinder, el perxido de hidrogeno reacciona un derivado fenolico clorado o sulfocrado y 4- aminofenazona, dando una quinonimida roja, cuyo mximo de absorcin se encuentra en 500 nm. La determinacin de la concentracin de acido urico se debe realizar nicamente en muestras sericas extraidas por la maana en condiciones de ayunas. De esta manera evitamos modificaciones circadianas en los niveles de uratos y la interferencia de los sueros turbios por presencia de triglicridos exgenos (quilomicrones).1 La urea es el principal producto de desecho del metabolismo de las protenas, representando la forma mayoritaria de eliminacin de nitrgeno. La urea es un compuesto relativamente inocuo para el organismo comparado con el amonio y es muy soluble en agua.

Los mtodos para determinar urea pueden clasificarse en grandes grupos; mtodos directos basados en la reaccin de condensacin de Fearon, segn, la cual la urea se condensa con la diacetilmonoxima, para dar un compuesto coloreado; y mtodos indirectos basados en la determinacin del amonio liberado por accin de la ureasa sobre la urea. Actualmente solo presentan intereses los mtodos enzimticos basados en la accin cataltica de la enzima ureasa. La urea es hidrolizada por la ureasa, liberando anhdrido carbonico y amoniaco segn la reaccin: Urea + H2O ureasa CO2 + 2NH3

La urea se cuantifica a partir del amonio liberado, que puede ser medido en varios reactivos. La reaccin de Berthelot es la mas utulizada: en ella el amonio reacciona con el hipoclorito dando cloramina que en presencia de fenol y catalizado por el nitroprusiato produce un derivado indofenolico de color azul en medio alcalino, cuya intensidad es proporcional a la cantidad de urea. Existe un mtodo enzimtico cintico de medicin de la urea que utiliza las enzimas ureasa y glutamato deshidrogenasa. El amonio liberado es convertido en glutamato por accin de la glutamato deshidrogenasa, en presencia de NADH y alfacetoglutarato, segn la reaccin: NH4 + NADH + alfacetoglutarato + H2O glutamato deshidrogenasa NAD + glutamato

Referencias bibliogrficas: 1- Diaz J., Fernandez M., Parede F., 1997, Aspectos Basicos de Bioquimica Climica, Espaa, Editorial Diaz de Santos, pp- 83 y 95.