Stem Celll

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23-11405-00 Rev. A
4/2010
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Gua de utilizacin del Kit
BD Stem Cell Enumeration
para los citmetros de flujo BD FACSCanto II
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2010 BD
Historial
Revisin Fecha Cambio realizado
23-11405-00 Rev. A 4/2010 Versin inicial.
Contenido
Captulo 1: Prefacio 1
Acerca de esta gua . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
Convenciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
Asistencia tcnica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Captulo 2: Introduccin 7
Descripcin general de la enumeracin de clulas madre . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Carga de tubos en el citmetro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Descarga de tubos del citmetro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
Flujo de trabajo diario . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
Captulo 3: Configuracin del software 17
Flujo de trabajo para configurar el software . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Opciones de configuracin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
Introduccin de la informacin sobre el lote de microesferas de calibracin . . . . 21
Introduccin de los ID de los lotes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Visualizacin de los objetivos de adquisicin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
Captulo 4: Calibracin del citmetro 27
Arranque del sistema . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Calibracin del citmetro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
Calibracin de la aplicacin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32
Gua de utilizacin del Kit BD Stem Cell Enumeration para citmetros de flujo BD FACSCanto II iv
Captulo 5: Adquisicin 35
Adquisicin de controles de proceso . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
Marcado y adquisicin de muestras . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
Nueva rea de seleccin manual en un grfico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41
Captulo 6: Directrices sobre reas de seleccin y ejemplos 43
Directrices sobre reas de seleccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44
Descripcin general de los ejemplos de definicin de rea de seleccin . . . . . . . . 46
Muestra de leucofresis (fresca) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
Muestra de leucofresis (descongelada) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
Muestra de mdula sea (fresca) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
Muestra de mdula sea (descongelada) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67
Muestra de sangre de cordn (fresca) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
Muestra de sangre de cordn (descongelada) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81
Captulo 7: Revisin de informes 87
Revisin del Cytometer Setup Report (Informe de calibracin del citmetro) . . . 88
Revisin del Application Setup Report (Informe de calibracin
de la aplicacin) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 91
Revisin del Lab Report (Informe de laboratorio) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
Captulo 8: Solucin de problemas 95
Datos de contacto e informacin sobre solucin de problemas . . . . . . . . . . . . . . 96
Fallo de solapamiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
La lista de trabajo no se procesar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
No se produce ningn resultado . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
Se producen resultados incompletos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 99
La ubicacin del rea de seleccin es dudosa, pero se informa
de todos los resultados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100
Nmero insuficiente de eventos recopilados, pero se informa
de todos los resultados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102
Advertencias generales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 103
Anticoagulante de heparina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
1
Prefacio
Este captulo abarca los siguientes temas:
z Acerca de esta gua (pgina 2)
z Convenciones (pgina 3)
z Asistencia tcnica (pgina 5)
Gua de utilizacin del Kit BD Stem Cell Enumeration para citmetros de flujo BD FACSCanto II 2
Acerca de esta gua
Acerca de este tema Esta gua ofrece instrucciones para la adquisicin y el anlisis
de muestras marcadas con el kit BDStem Cell Enumeration
en un citmetro de flujo BD FACSCantoII, utilizando un
software clnico BD FACSCanto con el mdulo BD Stem
Cell Enumeration, v1.0.
Antes de empezar En esta gua, se asume que ha ledo las Instrucciones de uso
de BD FACSCanto II y el Manual de referencia del software
clnico BD FACSCanto y que se ha familiarizado con la
calibracin del citmetro.
Convenciones
Acerca de este tema Las siguientes tablas indican las convenciones utilizadas en
esta gua.
Smbolos de seguridad Estos smbolos de seguridad se muestran en esta gua y en las
etiquetas de seguridad para alertarle de posibles peligros.
Smbolo Significado
Alerta de precaucin
Identifica una prctica peligrosa o insegura que
podra provocar prdidas de datos, daos materiales,
lesiones leves o graves o incluso la muerte
Peligro biolgico
Convenciones tipogrficas
y de teclado
Convencin Uso
Notas Una nota describe funciones o instrucciones
importantes.
Negrita El formato de negrita se utiliza para indicar
opciones del software, como dilogos,
campos y botones.
Cursiva El formato de cursiva se utiliza para
destacar ttulos de libros.
Tambin se utiliza al describir software,
para indicar un texto especfico escrito en
una ventana o cuadro de dilogo.
> La flecha se utiliza para indicar rutas de
seleccin de mens. Por ejemplo, Select
File > Print significa que seleccione la
opcin Print (Imprimir) del men File
(Archivo).
Ctrl+X Cuando se utiliza con nombres de teclas, el
signo ms (+) significa que hay que pulsar
dos teclas de forma simultnea. Por ejemplo,
Ctrl+P significa que hay que mantener
pulsada la tecla Control mientras se pulsa
la letra p.
Asistencia tcnica
Acerca de este tema Este tema ofrece informacin sobre cmo obtener asistencia
tcnica.
Dnde encontrar
informacin de ayuda
Para resolver cuestiones tcnicas u obtener ayuda para la
solucin de un problema:
z Consulte Solucin de problemas (pgina 95).
z Consulte la seccin del Manual de referencia del
citmetro BD FACSCanto II, el Manual de referencia del
software clnico BD FACSCanto, o las Instrucciones de
uso de BD FACSCanto II especficas de la operacin que
est realizando.
z Consulte la ayuda en lnea en el software clnico
BD FACSCanto.
Para obtener ms
asistencia
Si necesita asistencia tcnica adicional, pngase en contacto
con el representante local del servicio tcnico o con su
proveedor de BD Biosciences. Visite nuestro sitio Web
(bdbiosciences.com) para obtener informacin de contacto
actualizada.
Cuando se ponga en
contacto con
BD Biosciences
Cuando se ponga en contacto con BD Biosciences, tenga
disponible la siguiente informacin:
z Nombre del producto, nmero de pieza y nmero de serie.
z Cualquier mensaje de error.
z Detalles sobre el funcionamiento reciente del sistema.
Necesita obtener informacin de forma ms
rpida?
Encontrar informacin sobre este producto tambin en el
sistema de Ayuda del software.
Puede mantener abierta la ventana Help (Ayuda) mientras
utiliza el software o imprime la informacin directamente de
la pantalla.
No se necesita acceso a Internet para utilizar el sistema de
Help (Ayuda).
2
Introduccin
z Descripcin general de la enumeracin de clulas madre (pgina 8)
z Carga de tubos en el citmetro (pgina 10)
z Descarga de tubos del citmetro (pgina 11)
z Flujo de trabajo diario (pgina 12)
Descripcin general de la enumeracin de clulas
madre
Acerca de este tema Este tema ofrece una descripcin general de la enumeracin
de clulas madre.
Descripcin general Cada vez se utiliza ms el transplante de clulas progenitoras
hematopoyticas en el tratamiento de afecciones sanguneas,
tumores malignos y anomalas genticas.
1-3
El antgeno
CD34 se encuentra presente en las clulas precursoras
hematopoyticas inmaduras y en las clulas hematopoyticas
de formacin de colonias en la mdula sea y la sangre,
incluidas las clulas progenitoras unipotentes y pluripotentes.
4

Se pueden utilizar anticuerpos monoclonales conjugados con
fluorocromo dirigidos contra la molcula CD34 para
identificar las clulas CD34
+
mediante citometra de flujo.
El BD Stem Cell Enumeration junto con la citometra de flujo
proporcionan una enumeracin simultnea de poblaciones
de clulas madre hematopoyticas viables doble positivas
CD45
+
/CD34
+
dentro de la poblacin de clulas CD34
+

(clulas/L), as como el porcentaje de leucocitos viables
totales que son CD34
+
(%CD34).
Las muestras marcadas con el kit BD Stem Cell Enumeration
se adquieren en un citmetro de flujo BD FACSCanto II y se
analizan con el software clnico BD FACSCanto con el
mdulo BD Stem Cell Enumeration v1.0. El software utiliza
un algoritmo automtico de definicin de rea de seleccin
para identificar y aislar las clulas madre. Los mtodos de
anlisis y adquisicin del software se basan en el mtodo
presentado en las directrices aprobadas H42-A2 del Clinical
and Laboratory Standards Institute.
5
Referencias
N Cita
1 Shpall EJ, Jones RB, Bearman SI, et al. Transplantation of enriched CD34-positive
autologous marrow into breast cancer patients following high-dose chemotherapy:
influence of CD34-positive peripheral-blood progenitors and growth factors on
engraftment. J Clin Oncol. 1994;12:28-36.
2 Langenmayer I, Weaver C, Buckner CD, et al. Engraftment of patients with lymphoid
malignancies transplanted with autologous bone marrow, peripheral blood stem cells
or both. Bone Marrow Transplant. 1995;15:241-246.
3 Zander AR, Lyding J, Bielack S. Transplantation with blood stem cells. Blood Cells.
1991;17:301-309.
4 Greaves MF, Titley I, Colman SM, et al. CD34 cluster workshop report. In:
Schlossman SF, Boumsell L, Gilks W, et al, eds. Leucocyte Typing V: White Cell
Differentiation Antigens. New York, NY: Oxford University Press; 1995;1:840-846.
5 Enumeration of Immunologically Defined Cell Populations by Flow Cytometry;
Approved Guideline-Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards
Institute; 2007. CLSI document H42-A2.
Carga de tubos en el citmetro
Acerca de este tema Este tema describe cmo cargar tubos en el citmetro de flujo
BD FACSCanto II.
Carga de un tubo Para cargar un tubo en el SIT:
1. Empuje el brazo aspirador hacia la izquierda cuando as
se lo indiquen.
2. Coloque el tubo en el SIT, asegrese de que el tubo est
recto y empuje con firmeza hacia arriba hasta que el
tubo toque el tope y est completamente asentado.
3. Centre el brazo aspirador debajo del tubo.
Hay tres pasadores de sensor en el brazo aspirador. La
parte inferior del tubo debera quedar centrada, por
encima de los pasadores.
Temas relacionados z Descarga de tubos del citmetro (pgina 11)
z Adquisicin de controles de proceso (pgina 36)
z Marcado y adquisicin de muestras (pgina 38)
Precaucin: Peligro biolgico. Lleve siempre guantes al cargar
manualmente las muestras en el citmetro. Se realiza un
lavado de la parte exterior del tubo de inyeccin de muestras
(SIT) entre muestras que podran contener residuos de
peligro biolgico.
Descarga de tubos del citmetro
Acerca de este tema Este tema describe cmo descargar tubos del citmetro de
flujo BD FACSCanto II.

Descarga de un tubo Para descargar un tubo del SIT:
1. Espere a que baje el brazo aspirador.
2. Cuando se lo indiquen, sujete el tubo de muestras
mientras empuja el brazo aspirador hacia la izquierda.
3. Extraiga el tubo del SIT.
4. Suelte el brazo aspirador.
La limpieza del SIT se produce cuando el brazo aspirador
se coloca en el centro.
Temas relacionados z Carga de tubos en el citmetro (pgina 10)
Precaucin: Peligro biolgico. Lleve siempre guantes al cargar
manualmente las muestras en el citmetro. Se realiza un
lavado de la parte exterior del tubo de inyeccin de muestras
(SIT) entre muestras que podran contener residuos de
peligro biolgico.
Precaucin: Para evitar un reflujo dentro del tubo, siga
exactamente la secuencia de extraccin del tubo.
Precaucin: Peligro biolgico Si no sostiene el tubo al
desplazar el brazo aspirador, el tubo podra caerse del
SIT y ocasionarle una exposicin a una muestra que
suponga un riesgo biolgico potencial.
Flujo de trabajo diario
Acerca de este tema Este tema le ayuda a organizar el flujo de trabajo diario al
procesar muestras para el anlisis y la adquisicin de clulas
madre.
Al procesar otros tipos de
paneles
Si va a adquirir otros tipos de paneles a lo largo del da,
optimice los parmetros despus de optimizar la aplicacin
BD Stem Cell Enumeration. Consulte Calibracin de la
aplicacin (pgina 32). No vuelva a procesar la Standard
Setup (Calibracin estndar) antes de adquirir las muestras
de clulas madre. Si lo hace, aparece un mensaje de error al
hacer clic en Run (Procesar), en el que se indica que los
parmetros del citmetro del panel BD Stem Cell + 7AAD no
se han optimizado. La lista de trabajo se detendr y no podr
proseguir hasta que vuelva a procesar la Standard Setup
(Calibracin estndar) seguida de la Application Setup
(Calibracin de la aplicacin).
Flujo de trabajo Los lseres del citmetro deben encenderse al menos
30 minutos antes de realizar la calibracin. Para aumentar la
eficiencia y dejar que se calienten los lseres, recomendamos
realizar las tareas en el orden indicado a continuacin.
Precaucin: La Application Setup (Calibracin de la
aplicacin) debe realizarse despus de la Standard Setup
(Calibracin estndar). El software no le permitir procesar
muestras si el archivo BD Stem Cell.opt es posterior al
archivo SetupResults.dat.
N Tarea Consulte
1 Encienda el citmetro. Arranque del sistema (pgina 28)
2 Inicie el sistema de fluidos. Arranque del sistema (pgina 28)
3 Marque los controles de proceso y de
optimizacin.
Prospecto del kit BD Stem Cell
Enumeration
4 Prepare las microesferas de
calibracin de 7 colores BD FACS.
Nota: Compruebe que los lseres del
citmetro se han calentado durante
30 minutos antes de preparar las
microesferas de calibracin.
Prospecto del kit de microesferas de
calibracin de 7 colores BD FACS
5 Ajuste lo siguiente:
z Opciones de impresin y
exportacin
z Tiempo de la cuenta atrs
z Ignore Loader (Ignorar cargador)
(cargar los tubos manualmente)
Opciones de configuracin
(pgina 19)
6 Introduzca la informacin sobre el
lote de microesferas de calibracin.
Introduccin de la informacin sobre
el lote de microesferas de calibracin
(pgina 21)
7 Verifique que el ID de lote y los
valores de microesferas/bolas
introducidos en el software coinciden
con los valores impresos en la bolsa
de las microesferas BD Trucount.
Introduccin de los ID de los lotes
(pgina 23)
8 Procese la Standard Setup (Calibracin
estndar) y compruebe que se ha
realizado correctamente.
Calibracin del citmetro
(pgina 29)
Calibracin de la aplicacin
(pgina 32)
9 Procese la Application Setup
(Calibracin de la aplicacin) con el
panel BD Stem Cell y compruebe que
se ha realizado correctamente.
Nota: Si necesita optimizar otros
paneles, hgalo despus de finalizar
la Application Setup (Calibracin de
la aplicacin), pero antes de salir de
la calibracin.
(pgina 32)
Revisin del Application Setup
Report (Informe de calibracin de la
aplicacin) (pgina 91)
N Tarea Consulte
10 Establezca una nueva Worklist (Lista
de trabajo) para los controles,
procese los controles de BD Stem
Cell y observe los grficos.
Adquisicin de controles de proceso
(pgina 36)
11 Compruebe que los valores de
control se encuentran dentro de los
rangos mostrados en la hoja de
valores de anlisis de los controles
BD Stem Cell Controls Assay Values.
Nota: Si se vuelve a procesar la
Standard Setup (Calibracin estndar)
tras la Application Setup (Calibracin
de la aplicacin), tendr que repetir
la Standard Setup (Calibracin
estndar) y, a continuacin, la
Application Setup (Calibracin de la
aplicacin).
Prospecto del kit de controles
BD Stem Cell Controls kit
Al procesar otros tipos de paneles
(pgina 12)
(pgina 32)
12 Marque las muestras de los pacientes.
Precaucin: No marque las
muestras hasta que los
controles se hayan procesado
correctamente y los resultados se
encuentren dentro del rango
establecido para los lotes de control
de procesos que est utilizando.
Prospecto del kit BD Stem Cell
Enumeration
13 Adquiera las muestras marcadas. Marcado y adquisicin de muestras
(pgina 38)
14 Revise los Lab Reports (Informes de
laboratorio).
Revisin del Lab Report (Informe de
laboratorio) (pgina 93)
N Tarea Consulte
15 Observe todos los grficos y vuelva a
definir el rea de seleccin si fuera
necesario.
Nueva rea de seleccin manual en
un grfico (pgina 41)
16 Resuelva cualquier problema que surja. Solucin de problemas (pgina 95)
17 Una vez que hayan terminado de
adquirir las muestras de clulas
madre, desactive la opcin Ignore
Loader (Ignorar cargador) para que
otros usuarios puedan utilizar el
BD FACS Cargador.
(pgina 19)
N Tarea Consulte
rpida?
la pantalla.
Help (Ayuda).
3
Configuracin del software
z Flujo de trabajo para configurar el software (pgina 18)
z Opciones de configuracin (pgina 19)
z Introduccin de la informacin sobre el lote de microesferas de calibracin
(pgina 21)
z Introduccin de los ID de los lotes (pgina 23)
z Visualizacin de los objetivos de adquisicin (pgina 24)
Flujo de trabajo para configurar el software
Acerca de este tema Este tema ofrece una descripcin general de las tareas que
han de realizarse a la hora de configurar el software. Antes
de utilizar el software para analizar muestras de clulas
madre, ajuste las opciones e introduzca la informacin
predeterminada.
Flujo de trabajo La configuracin del software incluye las siguientes tareas.
Tarea Descripcin
1
Opciones de configuracin (pgina 19).
2
Introduccin de la informacin sobre el lote de
microesferas de calibracin (pgina 21).
3
Introduccin de los ID de los lotes (pgina 23).
4
Visualizacin de los objetivos de adquisicin
(pgina 24).
Acerca de este tema Este tema describe cmo establecer las opciones del software
que agilizan la adquisicin y el anlisis. Con las opciones
puede determinar si desea o no:
z Imprimir los informes de laboratorio y de calibracin y
el nmero de copias
z Detener la vista de Lab Report (Informe de laboratorio)
y durante cunto tiempo
z Exportar archivos PDF
z Cargar manualmente los tubos en el citmetro
Procedimiento Para ajustar las opciones:
1. Seleccione Tools (Herramientas) > Options (Opciones).
2. Haga clic en cada icono y elija las opciones seleccionado
el botn o activando la casilla de verificacin.
Icono de la
opcin Parmetros
Nota: Debe seleccionarse o conectarse
una impresora.
3. Haga clic en OK (Aceptar) para guardar las selecciones y
cerrar la ventana Options (Opciones).
Temas relacionados z Introduccin de la informacin sobre el lote de
microesferas de calibracin (pgina 21)
Precaucin: Debido a los
requisitos de temperatura de
este ensayo, BD FACS
Cargador no puede utilizarse
para adquirir muestras.
Nota: Una vez que hayan terminado
de adquirir todas las muestras de
clulas madre, desactive esta opcin
para que otros operadores puedan
utilizar el Cargador.
Icono de la
opcin Parmetros
Introduccin de la informacin sobre el lote de
microesferas de calibracin
Acerca de este tema Este tema describe cmo introducir la informacin de lote las
microesferas de calibracin de 7 colores BD FACS. La
informacin del lote determina los valores objetivos del
detector y los factores de superposicin de espectros del
citmetro.
Antes de empezar Localice la tarjeta de valores de calibracin que se incluye
con el nuevo lote de microesferas de calibracin de 7 colores
BD FACS.
Procedimiento Para introducir la informacin sobre el lote de las nuevas
microesferas:
1. Seleccione Cytometer (Citmetro) > Setup (Calibracin) >
Standard Setup (Calibracin estndar).
Aparece la ventana Bead Lot Information (Informacin
de lote de microesferas). Si el lote de las microesferas ha
caducado, aparece un mensaje de error.
2. Introduzca la informacin del nuevo lote manualmente o
escaneando los cdigos de barras. Consulte las Instrucciones
de uso del BDFACSCanto II para obtener ms informacin.
Manualmente:
a. Haga clic en el botn New Lot ID (Nuevo ID de
lote), introduzca la informacin del lote y haga
clic en OK (Aceptar) para guardar los cambios.
b. Con la tarjeta de valores de calibracin del nuevo
lote de microesferas, introduzca los valores objetivo
en la pestaa Targets (Objetivos) y los valores de
superposicin de espectros en la pestaa Spectral
Overlap Factors (Factores de superposicin de
espectros).
Escaneando los cdigos de barras:
Haga clic en el botn Scan Barcodes (Escanear los
cdigos de barras), siga las indicaciones y haga clic en
OK (Aceptar) para guardar los cambios.
3. En la ventana Bead Lot Information (Informacin de
lote de microesferas), verifique que se ha seleccionado el
ID del nuevo lote.
4. Haga clic en Finish (Finalizar).
5. En el cuadro de dilogo Save Setup Bead Lot Info
(Guardar la informacin de lote de microesferas de
calibracin), haga clic en Yes (S) para guardar la
informacin que acaba de introducir.
Temas relacionados z Opciones de configuracin (pgina 19)
Introduccin de los ID de los lotes
Acerca de este tema Este tema describe cmo introducir los ID de los lotes de las
microesferas de recuentos absolutos BD Trucount y del kit
BD Stem Cell Enumeration.
Antes de empezar Tenga a mano la bolsa de las microesferas de recuentos
absolutos BD Trucount y la caja del kit BD Stem Cell
Enumeration para introducir los ID de los lotes.
Procedimiento Para introducir los ID de los lotes:
1. Seleccione Tools (Herramientas) > Lot IDs (ID de lotes).
Aparecer el cuadro de dilogo Lot IDs (ID de lotes).
2. Haga clic en la pestaa BD Stem Cell e introduzca el ID
del lote del kit BD Stem Cell Enumeration.
3. Haga clic en la pestaa Microesferas de recuentos
absolutos, introduzca el ID de lote de la bolsa de
microesferas BD Trucount e introduzca el valor de
microesferas por bola.
Pestaas
Precaucin Compruebe que los valores que introduce
coinciden con los valores impresos en la bolsa de
BD Trucount. Si se utiliza un recuento de microesferas
incorrecto se obtendrn recuentos absolutos imprecisos.
4. Haga clic en OK (Aceptar) para guardar la informacin.
Temas relacionados z Opciones de configuracin (pgina 19)
z Introduccin de la informacin sobre el lote de microesferas
de calibracin (pgina 21)
Visualizacin de los objetivos de adquisicin
Acerca de este tema Este tema describe cmo visualizar los objetivos de adquisicin
establecidos para los paneles BD Stem Cell + 7AAD y
BD Stem Cell. El responsable del laboratorio establece los
objetivos de CD45, CD34 y de tiempo. El objetivo de las
microesferas BD Trucount no lo puede ajustar el usuario.
Procedimiento Para ver los objetivos de adquisicin:
1. Seleccione Reagents (Reactivos) > BD Stem Cell + 7AAD
(o BD Stem Cell) > Acquisition Targets (Objetivos de
adquisicin).
Aparecer el cuadro de dilogo Reagents (Reactivos).
Pestaas
Los objetivos de adquisicin predeterminados se definen
con los siguientes criterios:
El mnimo de CD45 viables se establece en 75.000,
segn la recomendacin de las directrices aprobadas
H42-A2 del Clinical and Laboratory Standards
Institute.
1
El mnimo de CD34 viables se establece en 125 para
garantizar que se adquieren al menos 100 clulas
CD34 tras el anlisis final.
El tiempo mximo se establece en 900 segundos, para
asegurarse de que se alcanzan los valores objetivo de
adquisicin sin eliminar la muestra.
El recuento de microesferas BD Trucount se establece
en 1.000 para garantizar que se adquieren suficientes
microesferas para calcular con precisin los recuentos
absolutos.
2. Haga clic en OK (Aceptar) para cerrar el cuadro de dilogo.
1. Enumeration of Immunologically Defined Cell Populations by Flow Cytometry;
Approved Guideline-Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards
Institute; 2007. CLSI document H42-A2.
rpida?
la pantalla.
Help (Ayuda).
4
z Arranque del sistema (pgina 28)
z Calibracin del citmetro (pgina 29)
z Calibracin de la aplicacin (pgina 32)
Arranque del sistema
Acerca de este tema Este tema describe cmo arrancar el ordenador, el software y
el citmetro. Deje que los lseres del citmetro se calienten
durante 30 minutos antes de realizar la calibracin.
Procedimiento Para arrancar el sistema:
1. Encienda la alimentacin del ordenador y el citmetro de
flujo BD FACSCanto II.
2. Inicie el software clnico BD FACSCanto e inicie sesin.
3. Inicie el sistema de fluidos.
4. Deje que el citmetro se caliente durante 30 minutos
antes de realizar la calibracin.
Temas relacionados z Flujo de trabajo para configurar el software (pgina 18)
z Calibracin del citmetro (pgina 29)
Acerca de este tema Este tema describe cmo calibrar el citmetro.
Antes de empezar z Prepare microesferas de calibracin de 7 colores BD FACS
segn las instrucciones del prospecto de los reactivos.
z Lea las instrucciones en Carga de tubos en el citmetro
(pgina 10) y Descarga de tubos del citmetro (pgina 11).
Calibracin del citmetro Para calibrar el citmetro:
1. Compruebe que el citmetro est listo.
2. Seleccione Cytometer (Citmetro) > Setup (Calibracin) >
Standard Setup (Calibracin estndar).
Se abre la ventana Setup Lot Information (Informacin
de lote de calibracin) .
3. Seleccione el nmero de lote de las microesferas de
calibracin de 7 colores BD FACS que est utilizando en
el men Lot ID (ID de lote).
Si tiene que introducir informacin del nuevo lote,
consulte Introduccin de la informacin sobre el lote de
microesferas de calibracin (pgina 21).
4. Compruebe que las microesferas no han caducado.
(El software indicar si las microesferas han caducado).
5. Compruebe que los valores en las pestaas Targets
(Objetivos) y Spectral Overlap Factors (Factores de
superposicin de espectros) coinciden con los de las
microesferas de calibracin de 7 colores BD FACS que
est utilizando.
6. Haga clic en Next (Siguiente), compruebe que se encuentra
seleccionado Run setup in manual mode (Procesar
calibracin en modo manual) y, a continuacin, vuelva a
hacer clic en Next (Siguiente).
7. Cargue el tubo de microesferas en el citmetro cuando se
le indique y haga clic en OK (Aceptar).
El software adquiere los datos para calibrar el citmetro.
8. Cuando se le solicite, retire el tubo.
Comprobacin de la
calibracin
1. Compruebe que la calibracin se ha realizado correctamente.
Si la calibracin no se ha realizado correctamente,
consulte las Instrucciones de uso de BD FACSCanto II
para obtener informacin sobre la solucin de problemas.
2. (Opcional) Para ver el informe, haga clic en View Setup
Report (Ver informe de calibracin).
Para obtener una descripcin de los elementos en el
informe, consulte Revisin del Cytometer Setup Report
(Informe de calibracin del citmetro) (pgina 88).
3. Haga clic en el botn Close Preview (Cerrar vista previa)
para cerrar el informe y volver al asistente.
4. Haga clic en Next (Siguiente).
5. En el cuadro de dilogo Save Setup Results (Guardar
resultados de la calibracin), haga clic en Yes (S) para
continuar.
6. Haga clic en Next (Siguiente) para continuar con la
calibracin de la aplicacin.
Aparece la vista Setup Optimization (Optimizacin de la
calibracin).
Siguientes pasos Prosiga con Calibracin de la aplicacin (pgina 32).
z Calibracin de la aplicacin (pgina 32)
Botn Close Preview
Acerca de este tema Este tema describe cmo calibrar la aplicacin BD Stem Cell
Enumeration. Los valores de compensacin para el ensayo se
calculan con una muestra de optimizacin.
Al procesar otros tipos de
paneles
Si va a adquirir otros tipos de paneles a lo largo del da,
optimice los parmetros despus de optimizar la aplicacin
BD Stem Cell Enumeration (consulte paso 10 en la pgina 34).
No vuelva a procesar la Standard Setup (Calibracin estndar)
antes de adquirir las muestras de clulas madre. Si lo hace,
aparece un mensaje de error al hacer clic en Run (Procesar),
en el que se indica que los parmetros del citmetro del panel
BD Stem Cell + 7AAD no se han optimizado. La lista de
trabajo se detendr y no podr proseguir hasta que vuelva a
procesar la Standard Setup (Calibracin estndar) seguida de
la Application Setup (Calibracin de la aplicacin).
Antes de empezar z Marque el control alto o bajo de clulas madre de
BD Stem Cell con reactivo BD Stem Cell y 7-AAD para
utilizarlo como tubo de optimizacin.
Siga las instrucciones de marcado y consulte la tabla de
Resumen de marcado del prospecto del kit BD Stem Cell
Enumeration.
z Calibre el citmetro. Consulte la Calibracin del citmetro
(pgina 29).
Precaucin: La Application Setup (Calibracin de la
aplicacin) debe realizarse despus de la Standard Setup
(Calibracin estndar). El software no le permitir procesar
muestras si el archivo BD Stem Cell.opt es posterior al
archivo SetupResults.dat.
Procedimiento Para calibrar la aplicacin:
1. Seleccione BD Stem Cell en el men Panel Types (Tipos
de panel) en el asistente Setup Optimization (Optimizacin
de calibracin).
2. Haga clic en Next (Siguiente).
Aparece la vista BD Stem Cell Enumeration Setup
(Calibracin).
3. Haga clic en Start (Iniciar).
4. Cargue el control marcado con el tubo 7-AAD
(optimizacin) en el citmetro cuando se le indique y
haga clic en OK (Aceptar).
El software comienza a adquirir datos y, a continuacin,
calcula el solapamiento de 7-AAD en el canal PE.
5. Compruebe el mensaje de estado bajo la casilla de
verificacin Calculating Spillover (Clculo de solapamiento).
Si se determina que el solapamiento es correcto, vaya
al paso 6.
Si se determina que es incorrecto, haga clic en Cancel
(Cancelar) y repita el paso 1 hasta el paso 5. Adems,
consulte Solucin de problemas (pgina 95).
6. Haga clic en View Report (Ver informe).
a. Confirme que el Overall Result (Resultado general) es
PASS (Apto).
b. Observe el valor de superposicin de espectros
PE%7-AAD.
Un valor de 0,5% a 10,5% indica una optimizacin
correcta de la calibracin.
Para obtener una descripcin de los elementos en el
informe, consulte Revisin del Application Setup Report
(Informe de calibracin de la aplicacin) (pgina 91).
7. Para cerrar el informe y volver al asistente, haga clic en el
botn Close Preview (Cerrar vista previa).
8. Haga clic en Save (Guardar).
9. Cuando se le solicite, descargue el tubo.
10. (Opcional) Haga clic en Next (Siguiente) si va a optimizar
otros paneles.
11. Haga clic en Finish (Finalizar).
Los resultados de la calibracin optimizada se guardarn
en el archivo BD Stem Cell.opt, en la carpeta C:\Archivos
de programa\Archivos comunes\BD\Setup Results.
Temas relacionados z Revisin del Application Setup Report (Informe de
calibracin de la aplicacin) (pgina 91)
5
Adquisicin
z Nueva rea de seleccin manual en un grfico (pgina 41)
Adquisicin de controles de proceso
Acerca de este tema Este tema describe cmo adquirir controles de proceso de
marcado en el citmetro.
Precaucin:
Antes de empezar z Marque el control alto y el control bajo de clulas madre
de BD Stem Cell con el kit BD Stem Cell Enumeration,
pero no aada 7-AAD. Siga las instrucciones del
prospecto de los reactivos.
z Calibre la aplicacin. Consulte Calibracin de la aplicacin
(pgina 32).
Procedimiento Para adquirir controles de proceso:
1. Introduzca la informacin de control alto y bajo en la
Worklist (Lista de trabajo).
Nota: El ID y el Case Number (Nmero de caso) deben
ser exclusivos.
a. Indique Control en la columna Name (Nombre) para
los controles alto y bajo.
Nota: Si no indica Control en la columna Name
(Nombre), el panel BD Stem Cell se desactivar.
b. Escriba el nmero de ID del lote en la columna ID.
El Name (Nombre) y el ID se convierten en el nombre
del archivo.
c. Indique el tipo de control (High (Alto) o Low (Bajo))
en la columna Case Number (Nmero de caso).
Precaucin: Debido a los requisitos de temperatura de este
ensayo, el cargador no puede utilizarse para adquirir muestras.
d. Seleccione BD Stem Cell en el men Panel.
Nota: Si elige el panel BD Stem Cell + 7AAD para
procesar el control, aparecer un mensaje de error.
2. Haga clic en Run (Procesar) ( ) para adquirir los
controles High (Alto) y Low (Bajo).
3. Una vez finalizada la adquisicin, inspeccione todos los
grficos y verifique que las reas de seleccin incluyen las
poblaciones adecuadas. Realice los ajustes necesarios.
Nota: Debido a que los controles de proceso se procesaron
con el panel BD Stem Cell (sin 7-AAD), los dos grficos
de viabilidad (7 y 8) no aparecen en el informe de
laboratorio.
4. Compruebe que los resultados se encuentran dentro del
intervalo establecido para los lotes de controles de proceso
que est utilizando.
Consulte las hojas de anlisis de los controles para
conocer los intervalos de valores.
Siguiente paso Prosiga con Marcado y adquisicin de muestras (pgina 38).
Marcado y adquisicin de muestras
Acerca de este tema Este tema describe cmo adquirir muestras marcadas en el
citmetro.
Precaucin:
Antes de empezar z Lea las instrucciones en Carga de tubos en el citmetro y
Descarga de tubos del citmetro (pgina 11).
z Adquiera los controles de proceso. Consulte Adquisicin
de controles de proceso (pgina 36).
z Consulte la Directrices sobre reas de seleccin (pgina 44)
y la Descripcin general de los ejemplos de definicin de
rea de seleccin (pgina 46) para el tipo de muestra que
est adquiriendo.
Procedimiento Para marcar y adquirir muestras:
1. Siga las instrucciones del prospecto del kit BD Stem Cell
Enumeration para diluir las muestras cuanto sea
necesario y mrquelas.
2. Seleccione el panel BD Stem Cell + 7AAD del men
Panel en la Worklist (Lista de trabajo).
No utilice el panel BD Stem Cell (sin 7-AAD) para muestras
de pacientes. Este panel slo es para procesar controles.
3. Aada las muestras a la Worklist (Lista de trabajo).
Utilice nombres exclusivos en la columna Sample ID (ID
de muestra).
Precaucin: No marque las muestras hasta que los controles
se hayan procesado correctamente.
Precaucin: Debido a los requisitos de temperatura de este
ensayo, el cargador no puede utilizarse para adquirir muestras.
4. Si la muestra requiere dilucin, aada el factor de dilucin
a la columna Dilution (Dilucin) de esa muestra. Aada
la informacin especfica de la muestra que sea necesaria.
Para muestras sin diluir, utilice el valor predeterminado
de 1.
5. Haga clic en Run (Procesar) ( ).
6. Cuando se lo indiquen, elija guardar los cambios a la
Worklist (Lista de trabajo).
7. Agite suavemente y al completo las muestras marcadas,
a baja velocidad, para volver a suspender las clulas y las
microesferas.
8. Cuando se solicite, instale el tubo que contiene la primera
muestra de la lista de trabajo en el citmetro y haga clic
en OK (Aceptar).
Aparece la pestaa Acquisition (Adquisicin) y los eventos
se representan en los grficos.
9. Una vez que se alcanzan los objetivos de adquisicin,
aparece el Lab Report (Informe de laboratorio).
10. Imprima todos los informes de laboratorio.
Consulte Opciones de configuracin (pgina 19) para
definir las opciones de impresin.
11. Revise todos los grficos para verificar que todas las
reas de seleccin incluyen las poblaciones adecuadas.
Consulte Nueva rea de seleccin manual en un grfico
(pgina 41) si es necesario volver a definir las reas de
seleccin.
12. Una vez que hayan terminado de adquirir las muestras
de clulas madre, desactive la opcin Ignore Loader
(Ignorar cargador) para que otros usuarios puedan
utilizar el Cargador.
Consulte Opciones de configuracin (pgina 19).
Nueva rea de seleccin manual en un grfico
Acerca de este tema Puede modificar las reas de seleccin deteniendo la Worklist
(Lista de trabajo) en el Lab Report (Informe de laboratorio)
o bien puede acabar de procesar la lista y, a continuacin,
modificar las reas de seleccin durante el anlisis.
Procedimiento Para modificar las reas de seleccin deteniendo la Worklist
(Lista de trabajo) en el Lab Report (Informe de laboratorio):
1. Haga clic en Pause (Pausa) durante la cuenta atrs entre
las muestras.
2. Haga clic en cualquier grfico para ajustar el rea de
seleccin.
El grfico seleccionado aparecer en una vista ampliada.
3. Ajuste las reas de seleccin cuanto sea necesario.
Lea las instrucciones en la Directrices sobre reas de
seleccin y ejemplos (pgina 43).
Para que las reas de seleccin vuelvan a sus posiciones
originales, haga clic en Autogate (rea de seleccin
automtica).
4. Haga clic en Continue (Continuar) para cerrar el grfico
5. Haga clic en Run (Procesar) para continuar con la
adquisicin.
Temas relacionados z Marcado y adquisicin de muestras (pgina 38)
z Directrices sobre reas de seleccin y ejemplos (pgina 43)
rpida?
la pantalla.
Help (Ayuda).
6
Directrices sobre reas de seleccin y
ejemplos
z Directrices sobre reas de seleccin (pgina 44)
z Descripcin general de los ejemplos de definicin de rea de seleccin (pgina 46)
z Muestra de leucofresis (fresca) (pgina 47)
z Muestra de leucofresis (descongelada) (pgina 52)
z Muestra de mdula sea (fresca) (pgina 62)
z Muestra de mdula sea (descongelada) (pgina 67)
z Muestra de sangre de cordn (fresca) (pgina 76)
z Muestra de sangre de cordn (descongelada) (pgina 81)
Directrices sobre reas de seleccin
Acerca de este tema Este tema muestra un ejemplo de cmo el Software clnico
BD FACSCanto procesa una muestra marcada con el kit
BD Stem Cell Enumeration y analizada en un citmetro de
flujo BD FACSCanto II. Las reas de seleccin mostradas son
reas de seleccin automticas definidas por el software. No
fue necesario ajustar de forma manual el rea de seleccin. La
muestra marcada en este ejemplo es sangre fresca perifrica
movilizada.
Cmo utilizar esta
informacin
Utilice esta informacin para revisar los grficos de datos,
comprobar la ubicacin y los lmites de cada rea de seleccin
y ajustar dichas reas cuanto sea necesario.
Ajuste las reas de seleccin nicamente si es necesario.
Trminos clave Los trminos clave en la tabla de pautas sobre reas de seleccin
corresponden a la siguiente informacin:
z N de paso. El orden en el que el algoritmo de definicin
de rea de seleccin procesa los datos.
z N de grfico. El orden en el que el grfico aparece en el
Lab Report (Informe de laboratorio).
z Tipo de grfico. Las etiquetas de los ejes del grfico.
z Accin del software. Cmo procesa los datos el algoritmo
de definicin de rea de seleccin.
z Nombre de rea de seleccin. El nombre del rea de
seleccin tal y como aparece en el Lab Report (Informe
de laboratorio).
z Accin del usuario. Qu se debe buscar en el grfico y
cmo ajustar manualmente el rea de seleccin (si fuera
necesario).
Ejemplo de Lab Report
(Informe de laboratorio)
Los grficos se muestra en el Lab Report (Informe de laboratorio)
en el siguiente orden.
Specimen
ALP16-BD1
BD Stem Cell + 7AAD
7f1f2008 10:3+:08 AN
7f16f2008 6:+9:06 PN
12007
S2000
OK
PAL
01072008.csv
Panel:
Acquired:
Analyzed:
TruC Lot !D:
BeadfPellet:
Status:
Operator:
Reviewer:
Results:
Director: BD
Dilution Factor: +.0 Column #2: Column #3:
BD FACSCanto !! v9632200+ BD FACSCanto v.2.+.31SS.23769
BD Stem Cell + 7AAD
Total Events: 8S211
3 2 4 5
6 7 8
1
N de
grfico rea(s) de seleccin
N de
grfico rea(s) de seleccin
CD45Pos, Lymphs (Linfocitos) Microesferas
CD34Pos Debris (Detritos)
CD45Pos, CD45Dim Viable
Viable CD34 Viable
1 5
2 6
3 7
4 8
Descripcin general de los ejemplos de definicin
de rea de seleccin
Acerca de este tema Este tema presenta ejemplos de definicin de reas de seleccin
para datos adquiridos a partir de diferentes tipos de muestras:
z Muestra de leucofresis (fresca) (pgina 47)
z Muestra de leucofresis (descongelada) (pgina 52)
z Muestra de mdula sea (fresca) (pgina 62)
z Muestra de mdula sea (descongelada) (pgina 67)
z Muestra de sangre de cordn (fresca) (pgina 76)
z Muestra de sangre de cordn (descongelada) (pgina 81)
Muestra de leucofresis (fresca)
BD FACSCanto procesa una muestra de leucofresis fresca
teida con el kit BD Stem Cell Enumeration y analizada en
un citmetro de flujo BD FACSCanto II. Las reas de
seleccin mostradas son reas de seleccin automticas
definidas por el software. No fue necesario ajustar de forma
manual el rea de seleccin. Para obtener ms informacin,
consulte Directrices sobre reas de seleccin (pgina 44).
Cmo utilizar esta
informacin
Paso 1, grfico 6
Debris (Detritos)
Paso 2, grfico 8
Paso 3, grfico 7
Viable
Viable
Paso 4, grfico 1
Paso 5, grfico 2
CD45Pos
Lymphs
(Linfocitos)
CD34Pos
Paso 6, grfico 3
Paso 7, grfico 4
CD45Pos
CD45Dim
Viable CD34
Paso 8, grfico 5
Micro-
esferas
Muestra de leucofresis (descongelada)
BD FACSCanto procesa una muestra de leucofresis
descongelada teida con el kit BD Stem Cell Enumeration y
analizada en un citmetro de flujo BD FACSCanto II (los
grficos llevan la etiqueta Auto gating (Definicin automtica
de reas de seleccin)). Un segundo conjunto de grficos (con
la etiqueta Manual gating (Definicin manual de reas de
seleccin)) muestra un ejemplo de cmo ajustar manualmente
cada rea de seleccin. Para obtener ms informacin,
Cmo utilizar esta
informacin
y ajustar dichas reas cuanto sea necesario. Consulte Lab
Report (Informe de laboratorio) de la definicin automtica
del rea de seleccin (pgina 60) y Lab Report (Informe de
laboratorio) de la definicin manual del rea de seleccin
(pgina 61) para ver los Lab Reports (Informes de laboratorio)
de esta muestra.
Paso 1, grfico 6
Definicin automtica de rea de seleccin Definicin manual de rea de seleccin
Aumente el rea de seleccin de Debris (Detritos)
No incluya los eventos de microesferas. Los
siguientes grficos mostrarn menos detritos y la
poblaciones de inters sern ms visibles.
El rea de seleccin de Debris (Detritos) es
demasiado pequea.
Debris (Detritos) Debris (Detritos)
Paso 2, grfico 8
Paso 3, grfico 7
Definicin automtica de rea de seleccin
No es necesario ajustar de forma manual el rea de seleccin.
Viable
Viable
Paso 4, grfico 1
Ajuste manualmente el rea de seleccin
Lymphs (Linfocitos) para que slo incluya los
linfocitos.
El rea de seleccin Lymphs (Linfocitos) muestra
demasiados eventos que no son de linfocitos.
CD45Pos CD45Pos
Lymphs
(Linfocitos)
Lymphs
(Linfocitos)
Paso 5, grfico 2
CD34Pos
Paso 6, grfico 3
CD45Dim para que incluya todos los eventos
CD45Dim.
El rea de seleccin CD45Dim no incluye la
poblacin CD45Dim en su totalidad.
CD45Pos CD45Pos
CD45Dim CD45Dim
Paso 7, grfico 4
Ajuste el rea de seleccin Viable CD34 para
que incluya el extremo izquierdo y el tercio
superior de los linfocitos viables. Las clulas
con un FSC bajo y un SSC ms alto no son
viables, tal y como se define por dispersin.
El rea de seleccin Viable CD34 depende de la
definicin correcta del rea de seleccin de los
linfocitos viables en el grfico 1. Ajuste siempre el
rea de seleccin Viable CD34 si el rea de seleccin
de linfocitos se ajust anteriormente.
Viable CD34 Viable CD34
Observe que los dos grficos son muy diferentes. Los cambios realizados en las reas de seleccin anteriores
afectan al modo en el que aparecen las poblaciones en los grficos posteriores.
Paso 8, grfico 5
Micro-
esferas
Lab Report (Informe de
laboratorio) de la
definicin automtica del
rea de seleccin
Specimen
ALP004-BD1
BDStemCell+7AAD
7f1f2008S:37:S9PN
7f16f20082:+7:S3PN
12007
S2000
OK
PAL
16072008.csv
Panel:
Acquired:
Analyzed:
TruCLot!D:
BeadfPellet:
Status:
Operator:
Reviewer:
Results:
Director:BD
DilutionFactor:11 Column#2: Column#3:
BDFACSCanto!!v9632201+ BDFACSCantov.2.+.31SS.23769
BDStemCell+7AAD
TotalEvents:29S630
ALP00+-BD100S.001.fcs KitLot!D:!UO2+371
CD3++viableAbsCnt(cellsfl) +787.3+
CD+S+viableAbsCnt(cellsfl) 83S22.63
CD3++viableEvents +322
CD+S+viableEvents 7S+0+
BeadEvents S16+
viableCD3++viableCD+S+ S.73
CD3+viability() +8.72
viableCD3++Cv() 1.S2
QC Messages
!nspectalldotplots.
Comments
Lab Report (Informe de
laboratorio) de la
definicin manual del
rea de seleccin
Specimen
ALP004-BD1
BDStemCell+7AAD
7f1f2008S:37:S9PN
7f16f20082:S3:3SPN
12007
S2000
OK
PAL
16072008.csv
Panel:
Acquired:
Analyzed:
TruCLot!D:
BeadfPellet:
Status:
Operator:
Reviewer:
Results:
Director:BD
DilutionFactor:11 Column#2: Column#3:
BDFACSCanto!!v9632201+ BDFACSCantov.2.+.31SS.23769
BDStemCell+7AAD
TotalEvents:29S630
ALP00+-BD100S.001.fcs KitLot!D:!UO2+371
CD3++viableAbsCnt(cellsfl) +039.67
CD+S+viableAbsCnt(cellsfl) S9838.+6
CD3++viableEvents 36+7
CD+S+viableEvents S+022
BeadEvents S16+
viableCD3++viableCD+S+ 6.7S
CD3+viability() +1.90
viableCD3++Cv() 1.66
QC Messages
NanualGateisineffect.
!nspectalldotplots.
Comments
Muestra de mdula sea (fresca)
BD FACSCanto procesa una muestra de mdula sea fresca
teida con el kit BD Stem Cell Enumeration y analizada en
un citmetro de flujo BD FACSCanto II. Las reas de
Cmo utilizar esta
informacin
comprobar la ubicacin y los lmites de cada rea de
seleccin y ajustar dichas reas cuanto sea necesario.
Paso 1, grfico 6
Debris (Detritos)
Paso 2, grfico 8
Paso 3, grfico 7
Viable
Viable
Paso 4, grfico 1
Paso 5, grfico 2
Lymphs
(Linfocitos)
CD45Pos
CD34Pos
Paso 6, grfico 3
Paso 7, grfico 4
CD45Pos
CD45Dim
Viable CD34
Paso 8, grfico 5
Micro-
esferas
Muestra de mdula sea (descongelada)
BD FACSCanto procesa una muestra de mdula sea
analizada en un citmetro de flujo BD FACSCanto II (los
grficos llevan la etiqueta Auto gating (Definicin automtica
de reas de seleccin)). Un segundo conjunto de grficos (con
la etiqueta Manual gating (Definicin manual de reas de
seleccin)) muestra un ejemplo de cmo ajustar manualmente
cada rea de seleccin. Para obtener ms informacin,
Cmo utilizar esta
informacin
Paso 1, grfico 6
Aumente el rea de seleccin de Debris (Detritos).
Los siguientes grficos mostrarn menos detritos y
las poblaciones de inters sern ms visibles.
El rea de seleccin de Debris (Detritos) es
demasiado pequea.
Debris (Detritos)
Debris (Detritos)
Paso 2, grfico 8
Ajuste manualmente el rea de seleccin Viable
para que slo incluya los linfocitos y los
monocitos.
El rea de seleccin Viable es demasiado ancha.
Viable Viable
Paso 3, grfico 7
Viable
Paso 4, grfico 1
CD45Pos
Lymphs
(Linfocitos)
Paso 5, grfico 2
CD34Pos
Paso 6, grfico 3
CD45Dim, de modo que incluya el grupo de
clulas, pero no los linfocitos ms brillantes.
El extremo derecho del rea de seleccin CD45Dim
no incluye todas las clulas en el grupo.
CD45Pos CD45Pos
CD45Dim CD45Dim
Paso 7, grfico 4
Viable CD34
Paso 8, grfico 5
Micro-
esferas
Muestra de sangre de cordn (fresca)
BD FACSCanto procesa una muestra de sangre de cordn
fresca teida con el kit BD Stem Cell Enumeration y analizada
en un citmetro de flujo BD FACSCanto II. Las reas de
Cmo utilizar esta
informacin
Paso 1, grfico 6
Debris (Detritos)
Paso 2, grfico 8
Paso 3, grfico 7
Viable
Viable
Paso 4, grfico 1
Paso 5, grfico 2
CD45Pos
Lymphs
(Linfocitos)
CD34Pos
Paso 6, grfico 3
Paso 7, grfico 4
CD45Pos
CD45Dim
Viable CD34
Paso 8, grfico 5
Micro-
esferas
Muestra de sangre de cordn (descongelada)
BD FACSCanto procesa una muestra de sangre de cordn
analizada en un citmetro de flujo BD FACSCanto II. Las
reas de seleccin mostradas son reas de seleccin
automticas definidas por el software. No fue necesario
ajustar de forma manual el rea de seleccin. Para obtener
ms informacin, consulte Directrices sobre reas de
seleccin (pgina 44).
Cmo utilizar esta
informacin
Paso 1, grfico 6
Debris (Detritos)
Paso 2, grfico 8
Paso 3, grfico 7
Viable
Viable
Paso 4, grfico 1
Paso 5, grfico 2
CD45Pos
Lymphs
(Linfocitos)
CD34Pos
Paso 6, grfico 3
Paso 7, grfico 4
CD45Pos
CD45Dim
Viable CD34
Paso 8, grfico 5
Micro-
esferas
rpida?
la pantalla.
Help (Ayuda).
7
Revisin de informes
z Revisin del Cytometer Setup Report (Informe de calibracin del citmetro)
(pgina 88)
z Revisin del Application Setup Report (Informe de calibracin de la aplicacin)
(pgina 91)
z Revisin del Lab Report (Informe de laboratorio) (pgina 93)
Revisin del Cytometer Setup Report (Informe de
calibracin del citmetro)
Acerca de este tema Este tema describe la informacin que se encuentra en el
Cytometer Setup Report (Informe de calibracin del citmetro).
Cytometer Setup Report El Cytometer Setup Report (Informe de calibracin del
citmetro) se genera tras procesar la calibracin del citmetro.
Cytometer Setup Report
Cytometer:
Serial Number:
Software:
Date:
BD FACSCanto !!
v96300098
BD FACSCanto v.2.+.31SS.23769
07f07f2007 3:08:1S AN
!nstitution:
Director:
Operator:
Overall Result:
USERS
PASS
Setup Beads
Bead Product: BD FACS 7-Color Setup Beads, Catalog Number: 33S77S
Lot !nformation: Lot !D S+321, Exp.: 2007-11-28
Detectors
Detector Laser FL Target voltage Lvoltage Sensitivity Spec PfF*
FSC Blue +S6 201 0 NA NA PASS
SSC Blue SSS 399 -1 NA NA PASS
F!TC Blue +60 +71 0 29 1S PASS
PE Blue +02 ++9 0 167 80 PASS
PerCP Blue +90 677 0 10 9 PASS
PerCP-CyS.S Blue +80 62+ 0 28 2S PASS
PE-Cy7 Blue +1S SS3 0 311 120 PASS
APC Red +1S S99 0 110 +0 PASS
APC-Cy7 Red +11 S3S 0 37 16 PASS
*Lvoltage (change from previous setup): < S0 volts. Sensitivity: > Spec
Compensation
Fluorophores ( spectral overlap) PASS spec: all values S 100
Detector F!TC PE PerCP PerCP-CyS.S PE-Cy7 APC APC-Cy7
F!TC 100.00 1.86 0.00 0.00 0.2+ 0.30 0.0+
PE 11.7+ 100.00 0.0+ 0.01 2.07 0.22 0.01
PerCP 3.S9 3+.60 100.00 100.00 22.91 1.62 0.9S
PerCP-CyS.S 3.S9 3+.60 100.00 100.00 22.91 1.62 0.9S
PE-Cy7 0.18 1.69 3.83 11.71 100.00 0.17 3.62
APC 0.02 0.17 S.16 +.+S 0.00 100.00 21.+S
APC-Cy7 0.00 0.03 0.+S 8.27 6.02 3.23 100.00
Lasers
Laser Power (mW) Spec. (mW) PfF Current (A)
Blue 20.02 16.S-2+.76 PASS 1.S7
Red 27.19 22.73-3+.09 PASS NA
Fluidics
FACSFlow Pressure
Pressure +.S PS!
Spec +.S +f- 0.1 PS!
PfF PASS
Sample Pressure (PS!)
High Nedium Low
1.S 0.8 0.3
Comments
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Contenido del informe La siguiente tabla describe la informacin que aparece en el
Cytometer Setup Report (Informe de calibracin del citmetro).
Los nmeros se corresponden con los que aparecen en el
informe de ejemplo.
N Nombre Funcin
1 Encabezado del
informe
Contiene el nombre del citmetro y el nmero de serie, la versin
de software, la fecha y la hora de la calibracin, la institucin, el
director, el operador y el resultado general (PASS (Apta) o FAIL
(No apta)).
2 Microesferas de
calibracin
Enumera el producto de microesferas utilizado, el nmero de catlogo,
el ID de lote y la fecha de caducidad.
3 Detectors
(Detectores)
Proporciona la siguiente informacin:
z Laser (Lser) (a). Indica qu lser ha activado la partcula
teida para que emita la luz recogida por ese detector.
z FL Target (Objetivo de fluorescencia) (b). El valor objetivo de
fluorescencia en formato de registro. El software ajusta la
tensin para que la microesfera de calibracin se encuentre en
el valor objetivo. Para obtener ms informacin sobre el FL
Target, consulte el prospecto de las microesferas.
z Voltage (Tensin) (c). Indica la tensin necesaria para ajustar
las microesferas en los valores objetivo de fluorescencia (b).
z Voltage (d) indica el cambio en voltios desde la ltima
calibracin. La diferencia entre los dos valores debe ser inferior
a 50 voltios. Con una diferencia inferior a 50 ser apta (g).
Con una diferencia de 50 o superior a 50, no ser apta.
z Sensitivity (Sensibilidad) (e). Medida de la capacidad del
citmetro para resolver clulas dbilmente teidas. La medicin
incluye contribuciones de eficiencia de recopilacin de fotones,
seal de fondo y brillo intrnseco de cada fluorforo.
z Spec (Especificacin) (f). Un valor de sensibilidad superior al de
Spec significa que el detector cumple la especificacin de
sensibilidad (g).
z P/F (g). Indica si la Sensitivity (Sensibilidad) (e) o Voltage
(Tensin D) (d) es apta o no apta. Un fallo de cualquiera de las
categoras producir un resultado general Fail (No apto) (g)
para ese detector.
Informacin sobre la
resolucin de problemas
Para obtener ayuda con los valores que se encuentran fuera
del rango en el Cytometer Setup Report (Informe de
calibracin del citmetro), consulte el Manual de referencia
del software BD FACSCanto o bien el prospecto de las
microesferas de calibracin de 7 colores BD FACS.
Temas relacionados z Calibracin del citmetro (pgina 29)
4 Compensation
(Compensacin)
Muestra los valores de superposicin de espectros calculados
durante la calibracin a los voltajes actuales. Los valores 100%
sern aptos. Los valores >100% no sern aptos.
5 Lasers (Lseres) Ofrece informacin sobre cada lser y si cumple o no las
especificaciones de potencia (en milivatios) determinadas por
BD Biosciences. Tambin se indica la corriente del lser (medida en
amperios).
6 Fluidics (Sistema
de fluidos)
Muestra si la presin del lquido de revestimiento cumple o no las
especificaciones determinadas por BD Biosciences. Tambin
muestra la tensin de la presin para velocidades de flujo baja,
media o alta, lo que resulta de utilidad al solucionar problemas.
7 Comments
(Comentarios)
Proporciona un rea para indicar informacin adicional.
8 Revisor Proporciona un espacio para que el revisor firme el informe.
N Nombre Funcin
Revisin del Application Setup Report (Informe de
calibracin de la aplicacin)
Acerca de este tema El Application Setup Report (Informe de calibracin de la
aplicacin) muestra los parmetros del citmetro especficos
del ensayo. El software utiliza estos parmetros si opta por
no optimizar con los controles de procesos.
Application Setup Report El Application Setup Report (Informe de calibracin de la
aplicacin) se genera tras procesar la calibracin del citmetro.
A continuacin se muestra un informe de calibracin.
Application Setup Report
BD Stem Cell
Cytometer:
SerialNumber:
Software:
Date:
BDFACSCanto!!
v96300098
BDFACSCantov2.+.31SS.23769
7f16f2007 0+:37:00AN
!nstitution:
Director:
Operator: USERS
Cytometer Setup
CytometerSetupReport:7f16f2007 0+:37:00AN,OverallResult: PASS
BeadProduct:BDFACS7-ColorSetupBeads,CatalogNumber:33S77S
Lot!nformation:Lot!D76697,Exp.:2007-09-30
Detectors
Detector Laser voltage
FSC Blue 317
SSC Blue +07
F!TC Blue 3S7
PE Blue 396
7AAD Blue +38
Trucountbeads Red S16
Compensation
Fluorophores(spectraloverlap)
Detector F!TC PE 7AAD Trucountbeads
F!TC 100.00 0.+8 0.00 0.01
PE 2+.67 100.00 S.S0 0.01
7AAD 2.+0 10.81 100.00 0.S1
Trucountbeads 0.00 0.09 10.09 100.00
Threshold (Operator:And)
F!TC +00
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c
Application Setup Report (Informe de calibracin de la
aplicacin). Los nmeros se corresponden con los que
aparecen en el informe de ejemplo.
Temas relacionados z Calibracin de la aplicacin (pgina 32)
N Nombre Funcin
1 Encabezado del
informe
Contiene el nombre del citmetro y el nmero de serie, la versin de
software, la fecha y la hora del procesamiento, la institucin, el
director y el operador.
2 Resultados de
la calibracin
Indica la fecha y la hora en la que se ha realizado la calibracin y el
resultado (PASS (Apta) o FAIL (No apta)).
3 Microesferas de
calibracin
Enumera el producto de microesferas utilizado, el nmero de catlogo,
el ID de lote y la fecha de caducidad.
4 Detectors
(Detectores)
Proporciona la siguiente informacin:
z Laser (Lser) (a). Indica qu lser ha activado la partcula teida
para que emita la luz recogida por ese detector.
z Voltage (Tensin) (b). Indica la tensin necesaria para ajustar las
microesferas en los valores objetivo de fluorescencia.
5 Compensation
(Compensacin)
Muestra los valores de superposicin de espectros calculados
durante la calibracin a los voltajes actuales. Los valores 100%
sern aptos. Los valores >100% no sern aptos.
PE%7AAD value (Valor PE%7AAD) (c). Un valor de 0,5% a
10,5% indica una optimizacin correcta de la calibracin.
6 Threshold
(Umbral)
Indica el parmetro o los parmetros y el valor o los valores utilizados
como umbral durante la optimizacin. Tambin muestra el operador
lgico activo para el umbral o los umbrales. Los diferentes operadores
lgicos son:
z OR (nicamente un umbral)
z AND (todos los umbrales seleccionados)
7 Comments
(Comentarios)
8 Revisor Proporciona un espacio para que el revisor firme el informe.
Revisin del Lab Report (Informe de laboratorio)
Acerca de este tema El Lab Report (Informe de laboratorio) incluye grficos de
muestras, datos analizados y mensajes de control de calidad.
Lab Report Tras cada muestra se genera un Lab Report (Informe de
laboratorio).
Specimen
ALP16-BD1
BD Stem Cell + 7AAD
7f1f2008 10:3+:08 AN
7f16f2008 6:+9:06 PN
12007
S2000
OK
PAL
01072008.csv
Panel:
Acquired:
Analyzed:
TruC Lot !D:
BeadfPellet:
Status:
Operator:
Reviewer:
Results:
Director: BD
Dilution Factor: +.0 Column #2: Column #3:
BD FACSCanto !! v9632200+ BD FACSCanto v.2.+.31SS.23769
BD Stem Cell + 7AAD
Total Events: 8S211
ALP16-BD1003.001.fcs Kit Lot !D: !UO2+371
CD3++ viable Abs Cnt (cellsfl) +81.10
CD+S+ viable Abs Cnt (cellsfl) 123837.80
CD3++ viable Events 303
CD+S+ viable Events 7799+
Bead Events 1310
viable CD3++ viable CD+S+ 0.39
CD3+ viability () 99.3+
viable CD3++ Cv () S.7+
QC Messages
!nspect all dot plots.
Comments
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5
BD Stem Cell Lab Report. Los nmeros se corresponden con
los que aparecen en el informe de ejemplo.
Temas relacionados z Solucin de problemas (pgina 95)
N Nombre Funcin
1 Encabezado del
informe
Contiene informacin sobre el laboratorio, los reactivos, en ensayo
y la muestra, as como las fechas y horas de la adquisicin y el anlisis.
2 Ttulos de
columnas
Muestra los valores introducidos en las columnas especficas de los
paneles de la Worklist (Lista de trabajo).
3 Informacin del
software y del
citmetro
Indica el nombre del citmetro y el nmero de serie, as como el
nombre del software y el nmero de versin.
4 Grficos Muestra los grficos de los datos analizados, as como el nmero
total de eventos recopilados.
Nota: Los dos grficos de viabilidad se omiten del informe cuando
se procesan controles de proceso.
5 Nombre del
archivo de
muestra y nmero
de lote del kit
Indica el nombre del archivo de muestra y el nmero de lote del kit
BD Stem Cell Enumeration.
6 Resultados Proporciona los resultados del anlisis de cada tubo. El responsable
del laboratorio puede elegir qu resultados desea mostrar y cambiar
los rangos de alarma (consulte el Manual de referencia del software
BD FACSCanto II o las Instrucciones de uso de BD FACSCanto II).
7 Mensajes de
control de
calidad
Esta seccin muestra:
z Los valores de control de calidad seleccionados por el
responsable del laboratorio
z Un mensaje que indica si se ha producido un fallo
z Un mensaje si uno o ms resultados se encuentran fuera del
rango de alarma
8 Comments
(Comentarios)
8
Solucin de problemas
z Datos de contacto e informacin sobre solucin de problemas (pgina 96)
z Fallo de solapamiento (pgina 96)
z La lista de trabajo no se procesar (pgina 97)
z No se produce ningn resultado (pgina 97)
z Se producen resultados incompletos (pgina 99)
z La ubicacin del rea de seleccin es dudosa, pero se informa de todos los
resultados (pgina 100)
z Nmero insuficiente de eventos recopilados, pero se informa de todos los resultados
(pgina 102)
z Advertencias generales (pgina 103)
z Anticoagulante de heparina (pgina 105)
Datos de contacto e informacin sobre solucin
de problemas
Acerca de este tema Este tema ofrece sugerencias para ayudarle a solucionar
problemas que puedan surgir e incluye informacin de
contacto si se necesita asistencia adicional.
Cmo obtener asistencia Utilice la siguiente informacin para ponerse en contacto con
el servicio de asistencia.
z Para obtener asistencia en EE.UU., llame al (877) 232-8995.
z Para obtener asistencia en Canad, llame al (888) 259-0187.
z Para obtener asistencia fuera de EE.UU. y Canad,
pngase en contacto con su representante o distribuidor
local de BD.
z Consulte nuestro sitio Web (bdbiosciences.com), para
obtener informacin de contacto actualizada.
Fallo de solapamiento
Mensaje de control de
calidad Posible causa Solucin recomendada
Spillover failure. (Fallo
de solapamiento.)
z No ha aadido el
7-AAD al tubo.
z No utilizado
controles BD Stem
Cell para realizar la
calibracin.
z No ha aadido el
reactivo CD45/CD34
al tubo.
Vuelva a realizar el marcado y procese
los tubos de calibracin y optimizacin.
Compruebe el sistema de fluidos del
citmetro.
La lista de trabajo no se procesar
No se produce ningn resultado
Worklist will not run.
(La lista de trabajo no
se procesar).
Se ha procesado la
Standard Setup
(Calibracin estndar)
despus de la
Application Setup
(Calibracin de
aplicacin).
1. Vuelva a realizar el marcado de los
tubos de calibracin y optimizacin.
2. Vuelva a procesar la Standard Setup
(Calibracin estndar), seguida de la
Application Setup (Calibracin de la
aplicacin).
Lymph gate failure.
(Fallo del rea de
seleccin de los
linfocitos).
Nmero insuficiente de
linfocitos en la
muestra.
a
Vuelva a definir el rea de seleccin
manualmente.
Poblacin de linfocitos
sin resolver.
manualmente.
CD45 gate failure.
(Fallo en el rea de
seleccin CD45).
clulas CD-45 en la
muestra.
a
manualmente.
CD34Pos gate failure.
(Fallo en el rea de
seleccin CD34Pos).
clulas CD34Pos en la
muestra.
a
manualmente.
Viable CD34 gate
failure. (Fallo en el rea
de seleccin CD34
viable).
clulas CD34 viables en
la muestra.
a
manualmente.
CD34 gate failure.
(Fallo en el rea de
seleccin CD34).
clulas CD34 en la
muestra.
a

manualmente.
Viability gate failure.
(Fallo en el rea de
seleccin de viabilidad).
clulas viables en la
muestra porque todas
las clulas estn
muertas.
Repita el marcado y, a continuacin,
adquiera la muestra recin marcada.
muestra porque se
aadi 7-AAD al
control de proceso.
1. Repita el marcado segn el prospecto
del kit BD Stem Cell Enumeration.
(No aada 7-AAD a los controles de
proceso).
2. Adquiera controles de proceso recin
marcados.
a. Compruebe los objetivos de adquisicin de los valores establecidos. Consulte Visualizacin de
los objetivos de adquisicin (pgina 24).
Se producen resultados incompletos
No beads detected.
(No se han detectado
microesferas).
z No se ha utilizado
un tubo
BD Trucount.
z El tubo no tena
bola.
Repita el marcado con un tubo
BD Trucount y adquiera la muestra
recin teida.
Less than 1,000 beads
collected.
a
(Se han
recopilado menos de
1.000 microesferas).
No se ha utilizado un
tubo BD Trucount.
BD Trucount y adquiera la muestra
recin teida.
Concentration of white
blood cells is too high.
(La concentracin de
leucocitos es demasiado
alta).
La concentracin de
leucocitos es
>45.000 clulas/L.
Diluya la muestra y vuelva a marcar y a
adquirir la muestra recin marcada.
La ubicacin del rea de seleccin es dudosa, pero
se informa de todos los resultados
Viability gate suspect.
(Duda de viabilidad en
el rea de seleccin).
Ubicacin del rea de
seleccin poco
habitual.
manualmente.
Beads gate suspect.
(Duda en el rea de
seleccin de
microesferas).
Ubicacin del rea de
seleccin poco
habitual.
manualmente.
z No se ha utilizado
un tubo
BD Trucount.
z El tubo no tena
bola.
BD Trucount y adquiera la muestra recin
teida.
CD34Pos gate suspect.
(Duda en el rea de
seleccin CD34Pos).
Ubicacin del rea de
seleccin poco
habitual.
manualmente.
CD45 gate suspect.
(Duda en el rea de
seleccin CD45).
Ubicacin del rea de
seleccin poco habitual.
manualmente.
CD45Dim gate suspect.
(Duda en el rea de
seleccin CD45Dim).
Ubicacin del rea de
seleccin poco habitual.
manualmente.
Lymphs gate suspect.
(Duda en el rea de
seleccin de linfocitos).
Ubicacin del rea de
seleccin poco
habitual. (En este
ejemplo, el rea de
seleccin incluye
monocitos).
1. Vuelva a definir el rea de seleccin
manualmente.
2. Ajuste manualmente el rea de seleccin
de CD34.
Nmero insuficiente de eventos recopilados, pero
se informa de todos los resultados
Less than 100 Viable
CD34 events
collected.
a
(Menos de
100 eventos de CD34
viables recopilados).
Recuento de CD34
bajo. La adquisicin
super el tiempo de
espera tras 15 minutos.
1. Revise los grficos y los resultados de
los informes.
2. Vuelva a marcar la muestra, aumente
el tiempo de detencin, adquiera la
muestra recin teida.
Less than user-requested
a

Viable CD34 events
collected. (Se han
recopilado menos
eventos CD34 viables
de los solicitados por el
usuario).
Recuento de CD34
bajo. La adquisicin
super el tiempo de
3. Revise los grficos y los resultados de
los informes.
4. Vuelva a marcar la muestra, aumente
el tiempo de detencin, adquiera la
Insufficient Viable
CD45 events collected.
(Eventos CD45 viables
recopilados
insuficientes).
muestra. La adquisicin
super el tiempo de
Revise los grficos y los resultados de los
informes.
en la muestra. La
adquisicin super el
tiempo de espera tras
15 minutos.
z Revise los grficos y los resultados de
los informes.
z Compruebe que la antigedad de la
muestra es de <24 horas.
La muestra se ha
diluido demasiado.
Utilice un factor de dilucin menor.
Advertencias generales
Less than user-requested
Viable CD45 events
collected. (Se han
recopilado menos
de los solicitados por el
usuario).
en la muestra. La
adquisicin super el
tiempo de espera tras
15 minutos.
Revise los grficos y los resultados de los
informes.
La muestra se ha
diluido demasiado.
Utilice un factor de dilucin menor.
Cytometer settings
were generated from a
failed setup result.
(Los parmetros del
citmetro se generaron
a partir de un resultado
de calibracin
incorrecta).
Fallo de calibracin del
citmetro
1. Vuelva a procesar la calibracin del
citmetro y compruebe que se
completa con xito.
2. Vuelva a procesar las muestras.
Setup optimization
failed. (Fallo de
optimizacin de
calibracin).
No se ha aadido
7-AAD al tubo.
Aada 7-AAD al tubo de optimizacin y
vuelva a procesar la calibracin.
No se ha aadido el
reactivo BD Stem Cell
reagent al tubo.
Vuelva a marcar la muestra y adquiera la
Se ha utilizado una
muestra de control
incorrecta.
Vuelva a marcar y a adquirir los
controles.
One or more results are
outside the alarm
range. (Uno o ms
resultados se
encuentran fuera del
rango de alarma).
La concentracin de
leucocitos es
>45.000 clulas/L.
Diluya la muestra y vuelva a marcar y a
adquirir la muestra recin teida.
Stem cell controls are
out of range. (Los
controles de clulas
madre se encuentran
fuera del rango).
Fallo de calibracin del
citmetro.
Vuelva a procesar la calibracin del
citmetro y compruebe que es correcta
(Pass) y, a continuacin, vuelva a marcar
y a procesar los controles.
Error de pipeteado. Vuelva a marcar y a procesar los controles.
Los controles no se han
vuelto a suspender
correctamente antes del
pipeteado.
Abra un nuevo tubo de controles
BD Stem Cell controls, vuelva a marcar y
a procesarlos.
Research Use Only - Not
for use in diagnostic or
therapeutic procedures
(Slo para
investigacin - No es
apto para uso en
procedimientos
diagnsticos o
teraputicos).
Se ha utilizado un
BD FACSCanto
cytometer y/o Cargador
para adquirir muestras.
Cargue los tubos manualmente y
adquiera las muestras con un
BD FACSCanto II flow cytometer.
Manual gate is in effect
(Se est utilizando un
rea de seleccin
manual).
Las reas de seleccin
se han vuelto a definir
manualmente.
NA. Para volver a aplicar el algoritmo de
rea de seleccin, haga clic en Autogate
(rea de seleccin automtica).
Inspect all dot plots.
(Inspeccionar todos los
grficos de puntos).
Deben revisarse los
grficos de puntos para
verificar que las reas
de seleccin se han
definido correctamente
y las poblaciones de
clulas aparecen tal y
como se esperaba.
NA.
Anticoagulante de heparina
Observacin Posible causa Solucin recomendada
Franja de
plaquetas.
Se ha recopilado una
muestra en
anticoagulante de
heparina.
1. En el grfico 1, desplace el lmite izquierdo
del rea de seleccin de CD45Pos a la
derecha para excluir las plaquetas.
2. Al ajustar el rea de seleccin de los linfocitos
en el grfico1, la franja de plaquetas en el
grfico 2 se ha eliminado parcialmente.
Grfico 1 antes de volver a
definir el rea de seleccin
Grfico 1 tras volver a
definir el rea de seleccin
CD45Pos CD45Pos
Linfocitos Linfocitos
Franja de plaquetas
Grfico 2 antes de volver
a definir el rea de
seleccin
Grfico 2 tras volver a
definir el rea de
seleccin
CD34+ CD34+
rpida?
la pantalla.
Help (Ayuda).

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