N: IT-75-APA-21D

ANATOMIA PATOLOGICA

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas Modificaciones
Revisin
A

Fecha
15/07/09 Primera edicin

Descripcin

Preparado
Nombre: Magdalena Garca Bonaf Cargo: Jefe de Servicio A. Patolgica Fecha: 15/07/09 Firma:

Revisado
Nombre: Montserrat Garca Minguilln Cargo: Resp. Gestin de Procesos y U. de Calidad Fecha: 15/07/09 Firma:

Aprobado
Nombre: Luis Alegre Latorre Cargo: Director Gerente Fecha: 15/07/09 Firma:

El TEAP encargado de tcnicas especiales mirar en el listado de microtoma las tcnicas pendientes de realizar, comprobar si ya estn los cristales preparados para ello y, si no

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
proceder a cortarlas, para la realizacin de las tcnicas, las cuales se realizarn con control positivo para evaluacin de la tcnica. Para ello hay que seguir una serie de normas: . . . . En las tcnicas argnticas no utilizar objetos metlicos para su realizacin. Antes de empezar revisar si se tienen todos los reactivos en condiciones. Leer y seguir detalladamente los protocolos. Limpiar bien los alcoholes especialmente en el Rojo Congo.

AZUL ALCIN FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10%. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. cido actico 3% durante 3 minutos. Solucin de Azul Alcin durante 45 minutos en estufa a 60 C. Agua corriente en varios pases. Hematoxilina de Harris durante 2 minutos. Agua corriente en varios pases. Deshidratar en alcoholes crecientes (70, 96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos.

SOLUCIONES:
SOLUCIN CIDO ACTICO 3% cido actico Agua destilada SOLUCIN AZUL ALCIN 3 ml 97 ml

Azul alcin 1 gr Agua destilada 97 ml cido actico 3 ml Timol 1 cristal Disolver primero el azul alcin en agua destilada, una vez disuelto aadir el timol y esperar a su disolucin. Filtrar la solucin y posteriormente aadir el cido actico.

RESULTADOS:
Mucina, clulas caliciformes y gramelos de mastocitos Ncleos Citoplasma azul oscuro rojo a rosado rosado plido

AZUL ALCIN - PAS FIJACION: Formalina neutra tamponada al 10%.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
PROCEDIMIENTO:
1. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. 2. Teir con la solucin de Azul Alcin durante 30 minutos. 3. Lavar en agua corriente durante 5 minutos. 4. Oxidar en la solucin de cido peridico 0.5 % durante 10 minutos. 5. Lavar en agua corriente. 6. Colocar en el reactivo de Schiff durante 5 minutos. 7. Lavar con agua corriente tibia durante 10 minutos. 8. Deshidratar en alcoholes crecientes (70, 96 y absoluto) durante 2 minutos. 9. Xilol durante 5 minutos. 10. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCION ACIDO PERYDICO AL 0.5 % cido peridico Agua destilada REACTIVO DE SCHIFF 0.5 g 100 ml Comercial

RESULTADOS:
cido hialurnico y mucina salivar Polisacridos y muicinas neutras Azul Prpura-rojo

GROCOTT FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner sobre el corte la solucin A durante 20 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin B durante 1 minuto. Lavar en agua corriente. Lavar en agua destilada dos veces durante 5 minutos. Introducir en el contenedor 17 ml de agua destilada, 20 gotas del reactivo C, 10 gotas del reactivo D y 20 gotas del reactivo E. Agitar bien la solucin. Colocar los cortes en el contenedor e incubar durante 50 minutos en estufa a 60 C (ES FUNDAMENTAL QUE LA ESTUFA EST A 60 C Y NO A MENOS). Dejar enfriar durante 10 minutos. Lavar dos veces en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin F durante 3 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin G durante 5 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin H durante 30 segundos.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
17. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. 18. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) pasos rpidos para no perder el verde luz. 19. Xilol durante 5 minutos. 20. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN AOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN A (comercial) B (comercial) C (comercial) D (comercial) E (comercial) F (comercial) G (comercial) H (comercial)

RESULTADOS:
Hongos Mucina Fondo Negro Gris oscuro Verde

TINCIN DE PERLS PARA EL HIERRO FIJACION: Formalina neutra tamponada al 10%. PROCEDIMIENTO:
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner la SOLUCIN DE TRABAJO de ferrocianuro de potasio durante 30 minutos. Lavar con agua destilada. Contrastar con Carmn de Mayer o con Rojo Nuclear durante 5 minutos. Lavar bien con agua corriente durante 2 minutos. Deshidratar con alcoholes crecientes (96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCIN CIDO CLORHDRICO 20 % cido clorhdrico Agua destilada SOLUCIN FERROCIANURO DE POTASIO 10% Ferrocianuro de potasio Agua destilada 10 gr 100 ml 20 ml 80 ml

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
SOLUCIN TRABAJO DE FERROCIANURO DE POTASIO cido clorhdrico 20 % Solucin ferrocianuro de potasio SOLUCIN CARMIN DE MAYER cido crmico Sulfato de aluminio y potasio Agua destilada Formol 40% SOLUCIN ROJO NUCLEAR Rojo nuclear 0.1 gr Solucin sulfato aluminio 5% 100 ml Llevar a hervor lentamente, enfriar y aadir 1 cristal de Timol. 1 gr 10 gr 200 ml 1 ml 50ml 50 ml

RESULTADOS:
Hemosiderina, algunos xidos y sales de hierro Ncleos y citoplasma azul rosa a rojo

MOVAT FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner el corte en solucin de cido perydico durante 10 minutos. Lavar en agua destilada en varios pases durante 10 minutos. Poner los cortes en la SOLUCIN ARGNTICA DE TRABAJO en estufa a 60 C durante 40 minutos. (ES FUNDAMENTAL QUE LA ESTUFA EST A 60 C Y NO A MENOS). El corte debe tener un color tabaco. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin de tiosulfato sdico durante 5 minutos. Sin lavar, decantar el cristal y poner la solucin de acetona durante 5 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin de hematoxilina de Harris durante 5 minutos. Lavar en agua corriente durante 2 minutos. Decolorar con alcohol-cido al 1 % durante 10 segundos. Lavar en agua corriente durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin de eosina durante 10 minutos. Lavar en agua corriente durante 2 minutos. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos. Montar con DPX.

SOLUCIONES:

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
SOLUCIN RGENTICA Hexametileutetramina(Metenamina) 3% (ha de conservarse en nevera) Hexametileutetramina 3 gr Agua destilada 100 ml Nitrato de plata 10 % Nitrato de plata 10 gr Agua destilada 100 ml Solucin de borax 2 % Borax (tetraborato sdico) 2 gr Agua destilada 100 ml SOLUCIN ARGNTICA DE TRABAJO (DEBE SER SIEMPRE TRANSPARENTE) Hexametileutetramina Nitrato de plata Agua destilada Borx SOLUCIN CIDO PERYDICO 1 % cido perydico Agua destilada SOLUCIN TIOSULFATO SDICO 3 % Tiosulfato sdico Agua destilada SOLUCIN ACETONA 10 % Acetona Agua destilada SOLUCIN HEMATOXILINA DE HARRIS Solucin comercial de Merck SOLUCIN ALCOHOL-CIDO 1 % cido clorhdrico Alcohol etlico 70 % SOLUCIN DE EOSINA SOLUCIN EOSINA MADRE Eosina Agua destilada Alcohol 96 % 10 gr 200 ml 800 ml 1 ml 99 ml 10 ml 90 ml 3 gr 100 ml 1 gr 100 ml 80 ml 5 ml 5 ml 10 ml contenedor 8 ml 0.5 ml 0.5 ml 1 ml

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
SOLUCIN DE EOSINA DE TRABAJO Eosina madre Alcohol 80 % cido actico 500 ml 1500 ml 10 ml

PAS FIJACION: Formalina neutra tamponada al 10%. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Oxidar en la solucin de cido peridico 0.5 % durante 10 minutos. Lavar en agua corriente. Colocar en el reactivo de Schiff durante 20-30 minutos. Lavar con agua corriente templada durante 5 minutos. Contrastar con la solucin de hematoxilina de Harris durante 1 minuto. Lavar con agua corriente durante 5 minutos. Diferenciar con alcohol cido 1 % 10 segundos. Lavar en agua corriente 2 minutos. Deshidratar en alcoholes crecientes (70, 96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCION ACIDO PERYDICO AL 0.5 % cido peridico Agua destilada SOLUCION DE ACIDO CLORHIDRICO 1 % cido clorhdrico Alcohol 70 REACTIVO DE SCHIFF SOLUCION DE HEMATOXILINA DE HARRIS 1 ml 100 ml 0.5 g 100 ml

RESULTADOS:
Ncleos Glucgeno, mucina y algunas membranas bsales Hongos Azul. Rojo a prpura. Rojo a prpura.

GIEMSA FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10%. PROCEDIMIENTO:

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
1. 2. 3. 4. 5. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner los cortes en la solucin de Giemsa de trabajo 1 hora a temperatura ambiente. Lavar con solucin agua cida durante 30 segundos. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) con pasos breves. Xilol con pases breves y montar con DPX inmediatamente.

SOLUCIONES:
SOLUCIN GIEMSA DE TRABAJO Giemsa Agua destilada SOLUCIN AGUA CIDA cido actico glacial Agua destilada 4 gotas 100 ml 20 ml 80 ml

RESULTADOS:
Ncleos Citoplasma Eritrocitos Azul Rosa Rojo

MUCICARMIN DE MAYER FIJACION: Formalina neutra al 10 % PROCEDIMIENTO:

Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Colocar en la solucin diaria de hematoxilina de hierro de Weigert durante 7 minutos. 3. Lavar brevemente con agua corriente. 4. Lavar con la solucin diluida de alcohol cido durante 1 minuto. 5. Lavar con agua corriente durante 10 minutos. 6. Teir durante 30 minutos con la SOLUCIN DE TRABAJO DEL MUCICARMIN (esta se debe preparar en el da y despus se ha de tirar). 7. Lavar rpidamente con agua destilada. 8. Contrastar con la solucin de amarillo de metanilo durante 1 minuto. 9. Deshidratar en alcoholes crecientes (70, 96 y absoluto) durante 2 minutos. 10. Xilol durante 5 minutos. 11. Montar con DPX. 1 2.

SOLUCIONES:
SOLUCIN MADRE DEL MUCICARMIN Carmn 1 gr.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
Hidrxido de Aluminio 1 gr. Alcohol etlico 50 % 100 ml Poner los reactivos en una botella o matraz de 500 ml y agitar hasta su total disolucin. Agregar en pequeas cantidades, poco a poco y agitando : Cloruro de Aluminio Anhidro 0.5 gr. Preparar un bao mara con agua a punto de ebullicin. Colocar el matraz en el bao, cuando empiece a hervir la solucin dejar 3 minutos (no ms). Enfriar rpidamente con agua del grifo. Cuando est fra, filtrar y rotular. SOLUCIN DE TRABAJO DEL MUCICARMIN Solucin madre del mucicarmin Agua destilada SOLUCIN DILUDA DE ALCOHOL-CIDO Alcohol cido al 1% Agua destilada SOLUCIN AMARILLO DE METALINO Amarillo de metalino Agua destilada cido actico glacial 0.25 gr. 100 ml 0.25 ml 10 ml 90 ml 1 parte 9 partes

SOLUCIN HEMATOXILINA DE WEIGERT (temporalmente usar la solucin A y B del kit del Tricrmico de Masson). Mezclar a partes iguales la solucin A y B.

RESULTADOS:
Mucina Cpsula de criptococos Ncleos Fondo Rosado oscuro Rosado oscuro Negro Amarillo

ORCENA FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner la solucin mordiente durante 5 minutos. Decolorar con solucin cido oxlico durante 1 minuto. Lavar en agua corriente durante 3 minutos.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
5. 6. 7. 8. 9. Lavar en agua destilada durante 3 minutos. Poner en solucin de orcena durante 30 minutos. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCIN MORDIENTE Permanganato potsico cido sulfrico 3% Agua destilada SOLUCIN DE ORCEINA orcena Alcohol 70 cido clorhdrico pH de 1-2 SOLUCIN DE CIDO OXLICO cido oxlico Agua destilada 2 gr 100 ml 1 gr 99 ml 1 ml 0.5 gr 5 ml 95 ml

RESULTADOS:
Fibras y membranas elsticas Pardo Negruzco

PAS DIASTASA FIJACION: Formalina neutra tamponada al 10%. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Colocar los cortes en solucin diastasa (previamente puesta a temperatura ambiente) en estufa durante 45 minutos a 60 C. Lavar en agua corriente durante 5 minutos. Oxidar en la solucin de cido peridico 0.5% durante 10 minutos Lavar en agua corriente durante 5 minutos. Colocar en el reactivo de Schiff durante 20-30 minutos. Lavar con agua corriente templada durante 5 minutos. Contrastar con la solucin de hematoxilina de Harris durante 1 minuto. Lavar con agua corriente durante 5 minutos. Diferenciar con alcohol cido 1% 10 segundos. Lavar en agua corriente 2 minutos. Deshidratar en alcoholes crecientes (70, 96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
14. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCION ACIDO PERYDICO AL 0.5% cido peridico Agua destilada SOLUCION DE ACIDO CLORHIDRICO 1 % cido clorhdrico Alcohol 70 REACTIVO DE SCHIFF SOLUCION DE HEMATOXILINA DE HARRIS SOLUCIN FOSFATO ESTABILIZADORA pH 6.0 Cloruro de sodio Fosfato de sodio dibsico Fosfato de sodio monobsico Agua destilada SOLUCIN DIASTASA Diastasa Solucin fosfato estabilizadora 0.1 gr 100 ml 8 gr 0.28 gr 1.97 gr 100 ml 1 ml 100 ml 0.5 gr 100 ml

RESULTADOS:
Ncleos Mucina y algunas membranas bsales Hongos Glucgeno Azul Rojo a prpura Rojo a prpura Sin color

TRICRMICO DE MASSON FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Mezclar en placa de petri la misma cantidad de gotas de la solucin A que de la solucin B, poner dicha mezcla sobre el corte durante 10 minutos. Sin lavar, decantar el cristal y poner sobre el corte la solucin C durante 4 minutos. Lavar rpidamente en agua destilada dejando el corte de color amarillo, poner sobre el corte la solucin D durante 4 minutos. Lavar en agua destilada y poner sobre el corte la solucin E durante 10 minutos.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
Sin lavar, decantar el cristal y poner sobre el corte la solucin F durante 20 minutos. 7. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. 8. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) con pasos muy rpidos para no perder el contraste del verde luz. 9. Xilol pases breves. 10. Montar con DPX rpidamente. 6.

SOLUCIONES:
SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN A (comercial) B (comercial) C (comercial) D (comercial) E (comercial) F (comercial)

RESULTADOS:
Ncleos y gametos Citoplasma, queratina y msculo Colgeno y moco Eritrocitos Negro Rojo Verde Amarillo

FIBRAS RETICULARES FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Mezclar en placa de petri la misma cantidad de gotas de la solucin A que de la solucin B, poner dicha mezcla sobre el corte durante 5 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin C durante 3 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin D durante 3 minutos. Lavar dos veces en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin E durante 3 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin F durante 5 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Poner sobre el corte la solucin G durante 5 minutos. Lavar en agua corriente durante 5 minutos. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos.

SOLUCIONES:
SOLUCIN A (comercial)

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN B (comercial) C (comercial) D (comercial) E (comercial) F (comercial) G (comercial)

RESULTADOS:
Fibras reticulares y nerviosas Tejido conectivo Colgeno negro pardo amarillo

GRAM FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 % o alcohol 96 para citologas PROCEDIMIENTO:

1. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. 2. Solucin Violeta de Metilo al 1 % durante 3 minutos. 3. Lavar con agua destilada. 4. Solucin yodada de Gram durante 3 minutos. 5. Lavar con agua destilada. 6. Decolorar con acetona durante10 segundos. 7. Lavar con agua destilada. 8. Solucin Rojo Neutro al 1 % durante 2 minutos. 9. Lavar en agua destilada. 10.Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) durante2 minutos. 11.Xilol durante 5 minutos. 12.Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCIN VIOLETA DE METILO AL 1 % Violeta de metilo Agua destilada SOLUCION YODADA DE GRAM Yodo Yoduro potsico Agua destilada SOLUCION ROJO NEUTRO AL 1 % Rojo neutro Agua destilada 1g 100 ml 1g 2g 100 ml 1g 100 ml

RESULTADOS:

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
Grmenes Gram + Grmenes Gram Ncleos Azul/Negro Rojo Rojo

ROJO CONGO FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Colorear con una solucin filtrada de Rojo Congo 1% durante 60 minutos. Diferenciar en solucin de hidrxido potsico al 0.2% durante 4 segundos. Lavar con agua corriente durante 5 minutos. Contrastar con la solucin de hematoxilina de Harris durante 10 segundos. Lavar con agua corriente durante 5 minutos. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) durante 2 minutos. Xilol durante 5 minutos. Montar con DPX.

SOLUCIONES: SOLUCIN DEL ROJO CONGO AL 1% Rojo Congo Agua destilada SOLUCIN DE HIDRXIDO DE POTASIO AL 0.2 % Hidrxido de potasio Alcohol 80 SOLUCIN DE HEMATOXILINA DE HARRIS RESULTADOS: Amiloide polarizada Ncleos rosado a rojo, y manzana verdoso bajo luz azul 0.2 gr 100 ml 1 gr 100 ml

PLATA METENAMINA FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:

1. 2. 3. 4. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner sobre el corte la solucin A durante 30 minutos. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. Preparar una cmara hmeda.

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
5. Mezclar 10 gotas de la solucin B, 10 gotas de la solucin C y 10 gotas de la solucin D. 6. Agitar bien la solucin. 7. Colocar los cristales en la cmara hmeda y poner la solucin, incubando en estufa a 60 C durante 30 minutos. 8. Dejar enfriar durante 5-10 minutos. 9. Poner sobre el corte la solucin E durante 1 minuto. 10. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. 11. Poner sobre el corte la solucin F durante 1 minuto. 12. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. 13. Contrateir con solucin verde luz durante 20 segundos. 14. Lavar en agua destilada durante 2 minutos. 15. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) con pases rpidos para no perder el verde luz. 16. Xilol durante 5 minutos 17. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN SOLUCIN A (comercial) B (comercial) C (comercial) D (comercial) E (comercial) F (comercial) VERDE LUZ (comercial)

RESULTADOS: Hongos Fondo ZIEHL NEELSEN FIJACIN: Formalina neutra tamponada al 10 %. PROCEDIMIENTO:
1. 2. 3. 4. Desparafinar e hidratar hasta llegar al agua destilada. Poner el corte en fucsina a temperatura ambiente 30 minutos. Lavar en agua corriente durante 2 minutos. Poner el corte en la solucin de alcohol cido al 1 % hasta que el corte no suelte colorante. 5. Lavar en agua corriente durante 2 minutos. 6. Poner el corte en la solucin de azul de metileno de Merck durante 5 segundos. 7. Lavar en agua corriente durante 5 minutos. 8. Lavar en agua destilada. 9. Deshidratar en alcoholes crecientes (96 y absoluto) observando el corte que debe quedar con un tono azul plido (para poder ver los bacilos). 10. Xilol durante 5 minutos.

Negro Verde

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Instruccin tcnica
Realizacin de tcnicas histoqumicas
11. Montar con DPX.

SOLUCIONES:
SOLUCIN DE FUCSINA (comercial) SOLUCIN DE ALCOHOL CIDO 1% SOLUCIN AZUL DE METILENO (comercial)

RESULTADOS:
Ncleos Bacilos de Koch Azul Rojo