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c a p t u l o

25

Sntesis de glucgeno

25.1 El glucgeno se sintetiza y se degrada mediante rutas distintas 25.2 El metabolismo en su contexto: La descomposicin y la sntesis del glucgeno se regulan de forma recprocaRegulated

La pasta y la pizza son buenas fuentes de energa para un gran nmero de competiciones deportivas. Estos alimentos ricos en carbohidratos, consumidos en los das previos a una prueba de resistencia como un maratn, garantizan la presencia del glucgeno muscular necesario para una carrera intensa. [Suzanne Dechillo/The New York Times/Redux.]

omo ya hemos visto en el caso de la glicolisis y de la gluconeognesis, es muy raro que las rutas de degradacin y de biosntesis funcionen llevando a cabo exactamente las mismas reacciones en una direccin y en la contraria. El metabolismo del glucgeno ha sido el primer ejemplo conocido de este importante principio. Las rutas separadas permiten una flexibilidad mucho mayor, tanto en la energtica como en el control. Comenzaremos estudiando el sustrato para la biosntesis de glucgeno y las enzimas necesarias para sintetizar este polmero ramificado. Despus, veremos cmo se controla la sntesis del glucgeno, prestando especial atencin a la coordinacin regulada de la sntesis y la degradacin del glucgeno. Por ltimo analizaremos cmo utiliza el hgado el metabolismo del glucgeno para mantener la homeostasis de la glucosa que circula por la sangre.

3 Describir los pasos de la sntesis deglucgeno e identificar las enzimas necesarias.


de glucgeno.

25.1 El glucgeno se sintetiza y se degrada mediante rutas distintas


Un aspecto comn de las rutas biosintticas que encontraremos a lo largo de nuestro estudio de la bioqumica es la necesidad de un precursor activado. Este axioma tambin se cumple en el caso de la sntesis de glucgeno. El glucgeno se sintetiza por medio de una ruta que utiliza la uridina difosfato glucosa (UDP-glucosa) en vez de la

4 Explicar la regulacin de la sntesis

437

438 25 Sntesis de glucgeno


CH2OH O OH HO

O O

HO P

glucosa 1-fosfato como donador de la glucosa activada. Recordemos que la glucosa 1-fosfato tambin es el producto de la glucgeno fosforilasa. Al estudiar el metabolismo de la galactosa (p. 284) ya nos hemos encontrado con la UDP-glucosa. El tomo de carbono C-1 de la unidad de glucosa de la UDP-glucosa est activado porque su grupo hidroxilo se encuentra esterificado al componente difosfato del UDP. Sntesis: Glucgenon 1 UDP-glucosa h glucgenon11 1 UDP

O P O O O N HN

Degradacin: Glucgenon11 1 Pi h glucgenon 1 glucosa 1-fosfato

La UDP-glucosa es una forma activada de la glucosa


La UDP-glucosa, el donador de glucosa en la biosntesis de glucgeno, es una forma activada de la glucosa, al igual que el ATP y el acetil-CoA son formas activadas del ortofosfato y el acetato, respectivamente. La UDP-glucosa se sintetiza a partir de la glucosa 1-fosfato y del nucletido uridina trifosfato (UTP) mediante una reaccin catalizada por la UDP-glucosa pirofosforilasa. Esta reaccin libera los dos residuos fosforilos ms externos del UTP en forma de pirofosfato.
CH2OH O O P O O
2 2

HO

OH

Uridina difosfato glucosa (UDP-glucosa)

CH2OH O OH HO OH O O P O O OO P O
UTP

O O uridina

OH HO OH O P OO O P OO O uridina + PPi

Glucosa 1-fosfato

UDP-glucosa

Esta reaccin es fcilmente reversible. Sin embargo, gracias a la pirofosfatasa inorgnica, el pirofosfato se hidroliza rpidamente in vivo para formar ortofosfato. La hidrlisis prcticamente irreversible del pirofosfato impulsa la sntesis de UDP-glucosa. Glucosa 1-fosfato + UTP m UDP @glucosa + PP i PP i + H 2O h 2 Pi Glucosa 1-fosfato + UTP + H 2O h UDP @glucosa + 2 P i La sntesis de UDP-glucosa es un ejemplo de otro de los aspectos recurrentes de la bioqumica: muchas reacciones biosintticas estn impulsadas por la hidrlisis del pirofosfato.

La glucgeno sintasa cataliza la transferencia de glucosa desde la UDP-glucosa a una cadena creciente de glucgeno
Las nuevas unidades de glucosa se aaden a los residuos terminales no reductores del glucgeno. La unidad de glucosa activada de la UDP-glucosa se transfiere al grupo hidroxilo del C-4 de un residuo terminal de una cadena de glucgeno para formar un enlace glicosdico a-1,4. El UDP resulta desplazado por el grupo hidroxilo terminal de la molcula creciente de glucgeno. Esta reaccin est catalizada por la glucgeno sintasa, la enzima reguladora clave de la sntesis de glucgeno. La glucgeno sintasa solo puede aadir residuos de glucosa a una cadena de polisacrido que ya tenga ms de cuatro residuos. Por tanto, la sntesis de glucgeno necesita un cebador. Esta funcin de cebador la desempea la glucogenina, una enzima formada por dos subunidades idnticas de 37 kDa. Cada subunidad de la glucogenina cataliza la adicin de ocho unidades de glucosa a la otra subunidad. Estas unidades de glucosa forman polmeros cortos de glucosas unidas entre s mediante enlaces a-1,4, que se encuentran unidos covalentemente al grupo hidroxilo de un residuo especfico de tirosina de cada una de las subunidades de la glucogenina. En esta reaccin, el donador de la UDP-glucosa. Llegados a este punto, la glucgeno sintasa recoge el testigo

25.1Sntesis439
CH2OH O OH HO OH O P O O O P OO
Glucgeno (n residoes)

CH2OH O + O uridina HO OH OH O

CH2OH O OH OR OH

UDP-glucosa

CH2OH
2

CH2OH O OH O O OH
Glucgeno (n + 1 residuos)

CH2OH O OH OR OH

O O

P O

P OO
UDP

O uridina + HO OH OH

para hacer crecer la molcula de glucgeno. De este modo, en la regin ms profunda de cada molcula de glucgeno hay un ncleo de glucogenina (Figura 25.1).

Una enzima ramificante forma enlaces alfa-1,6


La glucgeno sintasa solo cataliza la sntesis de enlaces a-1,4. Para formar los enlaces a-1,6 que hacen del glucgeno un polmero ramificado se necesita otra enzima. La ramificacin tiene lugar despus de que la glucgeno sintasa haya unido un cierto nmero de residuos de glucosa mediante enlaces a-1,4. Mediante la ruptura de un enlace a-1,4 y la formacin de un enlace a-1,6 se crea una ramificacin. Un bloque de residuos, normalmente de siete, se transfiere a un lugar situado ms hacia el interior de la molcula de glucgeno. La enzima ramificante que cataliza esta reaccin es bastante precisa (Figura 25.2). El bloque de ms o menos 7 residuos tiene que incluir el extremo no reductor y debe proceder de una cadena que tenga, al menos, una longitud de 11 residuos. Adems, el nuevo punto de ramificacin tiene que estar situado a una distancia mnima de 4 residuos de otro punto de ramificacin ya existente.
enlace -1,4 NCLEO INTERNO

Figura 25.1 Seccin transversal de una molcula de glucgeno. El componente


representado mediante una letra G es la glucogenina.

UDP-glucosa + glucgeno sintasa

NCLEO INTERNO

Enzima ramificante

enlace -1,6 NCLEO INTERNO

La sintasa alarga ambos extremos no reductores y, despus, se introducen ms ramificaciones

Figura 25.2 Reaccin ramificante. La enzima ramificante extrae un oligosacrido de aproximadamente 7 residuos del extremo no reductor y genera un enlace a-1,6 interno.

440 25 Sntesis de glucgeno


La ramificacin es importante porque incrementa la solubilidad del glucgeno. Adems, la ramificacin crea un gran nmero de residuos terminales, los lugares donde actan la glucgeno fosforilasa y la sintasa (ver la Figura 25.1). Por tanto, la ramificacin incrementa la velocidad de sntesis y degradacin del glucgeno.

La glucgeno sintasa es la enzima reguladora clave de la sntesis de glucgeno


La actividad de la glucgeno sintasa, al igual que la de la fosforilasa, se puede encontrar de dos formas: una forma a activa no fosforilada y una forma b fosforilada, que normalmente es inactiva. De nuevo, al igual que la fosforilasa, la interconversin de las dos formas se encuentra regulada mediante modificacin covalente. Sin embargo, recientes estudios sugieren que la principal forma de regular la glucgeno sintasa es mediante la regulacin alostrica de la forma fosforilada de la enzima, la glucgeno sintasa b. La glucosa 6-fosfato es un potente activador de la enzima, ya que estabiliza el estado R de la enzima en vez del estado T. Parece ser que la modificacin covalente de la glucgeno sintasa se parece ms a un mecanismo de ajuste fino. La sintasa se fosforila en multitud de lugares gracias a varias protena quinasas sobre todo, la glucgeno sintasa quinasa (GSK), que est sometida al control de la insulina (p. 443) y la protena quinasa A. El cambio que se produce en las cargas de la protena da lugar a su desactivacin. La fosforilacin provoca efectos opuestos en la actividad enzimtica de la glucgeno sintasa y de la glucgeno fosforilasa.

supone una ventaja el hecho de que lafosforilacin tenga efectos opuestos en la sntesis y en la degradacin del glucgeno?

PREGUNTA RPIDA 1 Por qu

El glucgeno es una eficaz forma de almacenar glucosa


Cul es el coste de convertir la glucosa de la dieta en glucgeno y, posteriormente, en glucosa 6-fosfato? Antes de realizar este clculo, tenemos que hablar de otra enzima, la nuclesido difosfoquinasa. Esta enzima cataliza la regeneracin de UTP a partir de UDP, un producto que se libera cuando el glucgeno crece mediante la adicin de glucosa procedente de la UDP-glucosa. La difosfoquinasa utiliza el ATP para fosforilar el UDP. La suma de las reacciones de sntesis del glucgeno es: Glucosa + ATP h glucosa 6@fosfato + ADP Glucosa 6@fosfato h glucosa 1-fosfato Glucosa 1-fosfato + UTP h UDP @glucosa + PP i PP i + H 2O h 2 Pi UDP @glucosa + glucgeno n h glucgeno n + 1 + UDP UDP + ATP h UTP + ADP
Hay estudios que han demostrado que cuando se agota el glucgeno muscular, el rendimiento del msculo se reduce a aproximadamente el 50% del mximo. El rendimiento disminuye a pesar de disponer de amplias reservas de grasa, lo que sugiere que las grasas slo pueden aportar alrededor del 50% del esfuerzo aerbico mximo. Si, tras haber agotado el glucgeno, se consumen alimentos ricos en carbohidratos, las reservas de glucgeno se reponen rpidamente; de hecho, la sntesis de glucgeno contina, incrementando las reservas de glucgeno por encima de lo normal. Este fenmeno se denomina supercompensacin o, vulgarmente, carga de carbohidratos.

(1) (2) (3) (4) (5) (6)

Suma: Glucosa + 2 ATP + glucgeno n + H 2O h glucgeno n + 1 + 2 ADP + 2 Pi Por tanto, se hidrolizan 2 molculas de ATP para incorporar la glucosa ingerida en la dieta al glucgeno. El rendimiento energtico obtenido a partir de la descomposicin del glucgeno formado a partir de la glucosa de la dieta es muy eficiente. Alrededor del 90% de los residuos se escinden fosforolticamente a glucosa 1-fosfato, que se convierte en glucosa 6-fosfato sin tener que consumir una molcula de ATP. El otro 10% son los residuos de las ramificaciones que se escinden hidrolticamente. Despus hay que utilizan una molcula de ATP para fosforilar cada una de estas molculas de glucosa a glucosa 6-fosfato. Como ya vimos desde el captulo 16 al 21, la oxidacin completa de la glucosa 6-fosfato genera alrededor de 31 molculas de ATP y el almacenamiento consume algo ms de 2 molculas de ATP por cada molcula de glucosa 6-fosfato; por tanto, solo se requieren 2 molculas de ATP para almacenar glucosa en forma de glucgeno, pero la glucosa procedente del glucgeno genera 31 molculas de ATP; por tanto, la eficiencia global del almacenamiento es de casi el 94%.

25.2 Regulacin recproca441

25.2 El metabolismo en su contexto: La descomposicin y la sntesis del glucgeno se regulan de forma recproca
Un importante mecanismo de control evita que se sintetice glucgeno al mismo tiempo que se est descomponiendo. Las mismas cascadas de cAMP puestas en marcha por el glucagn y la adrenalina que inician la descomposicin del glucgeno en el hgado y en el msculo, respectivamente, tambin desactivan la sntesis de glucgeno. El glucagn y la adrenalina controlan tanto la descomposicin del glucgeno como su sntesis a travs de la protena quinasa A (Figura 25.3). Recordemos que la protena quinasa A aade un grupo fosforilo a la fosforilasa quinasa, activando esa enzima e iniciando la descomposicin del glucgeno. La glucgeno sintasa quinasa y la protena quinas A aaden un grupo fosforilo a la glucgeno sintasa, pero esta fosforilacin de lugar a una disminucin de la actividad enzimtica. De esta forma, la descomposicin del glucgeno y su sntesis se encuentran reguladas de forma recproca. Cmo se revierte la actividad enzimtica de la glucgeno fosforilasa de forma que se detenga la descomposicin del glucgeno y comience su sntesis?
DURANTE EL EJERCICIO O EN AYUNO

5 Describir cmo se coordinan la movilizacin y la sntesis de glucgeno.

Glucagn (en el hgado) o adrenalina (en el msculo y en el hgado)

Adenilato ciclasa

GDP

GTP

ATP

AMP cclico Glucgeno sintasa quinasa Fosforilasa quinasa Glucgeno sintasa a Fosforilasa a Glucgenon Glucgenon 1 Glucgeno sintasa b

Protena quinasa A

Protena quinasa A

Figura 25.3 Control coordinado del metabolismo del glucgeno. El metabolismo


del glucgeno se regula, en parte, mediante cascadas de AMP cclico desencadenadas por hormonas. La secuencia de reacciones que da lugar a la activacin de la protena quinasa A activa, en ltima instancia, la degradacin del glucgeno. Al mismo tiempo, la protena quinasa A, junto con la glucgeno sintasa quinasa, desactiva la glucgeno sintasa, interrumpiendo la sntesis de glucgeno.

Fosforilasa quinasa

Fosforilasa b

Glucosa 1-fosfato

La protena fosfatasa 1 revierte los efectos reguladores que ejercen las quinasas sobre el metabolismo del glucgeno
Tymoczko: Biochemistry: A Short el Course, 2E debe cambiar de un estado en el que se est Tras un periodo de ejercicio, msculo Perm. Fig.: 25004 New Fig.: 25-03 degradando glucgeno a otro en el que hay que reponerlo. Un primer paso de esta taPUAC: 2011-08-22 rea metablica consiste en desactivar las protenas fosforiladas que estimulan la des2nd Pass: 2011-08-31 composicin del glucgeno. Este paso se lleva a cabo por medio de protena fosfatasas

442 25 Sntesis de glucgeno


que catalizan la hidrlisis de residuos de serina y de treonina fosforilados. La protena fosfatasa 1 (PP1) desempea funciones clave en la regulacin del metabolismo del glucgeno (Figura 25.4). La PP1 desactiva la fosforilasa a y la fosforilasa quinasa desfosforilndolas. De este modo, PP1 reduce la velocidad de descomposicin del glucgeno, ya que revierte los efectos de la cascada de fosforilacin. Adems, PP1 extrae grupos fosforilo de la glucgeno sintasa b para convertirla en la forma glucgeno sintasa a, ms activa. Por tanto, PP1 tambin acelera la sntesis de glucgeno y constituye otro dispositivo molecular para el control coordinado del metabolismo del glucgeno.

TRAS UNA COMIDA O EN REPOSO

Se tiene que sintetizar glucgeno

Protena fosfatasa 1

Inhibicin de la descomposicin del glucgeno

Fosforilasa b

Fosforilasa a

Estimulacin de la sntesis del glucgeno

Fosforilasa quinasa

Fosforilasa quinasa

Glucgeno sintasa

Glucgeno sintasa

Figura 25.4 Regulacin de la sntesis de glucgeno mediante la protena fosfatasa 1. La PP1 estimula la sntesis de glucgeno
al tiempo que inhibe su descomposicin.

Protena quinasa A

Glucagn o adrenalina

La subunidad cataltica de PP1 es una protena con un nico dominio. Normalmente, esta subunidad se encuentra unida a un miembro de una familia de subunidades reguladoras; en el msculo esqueltico y en el corazn, la subunidad reguladora Tymoczko: Biochemistry: A Short G Course, 2E ms abundante se denomina M, mientras que en el hgado, la subunidad reguladoPerm. Fig.: 25005 New Fig.: 25-04 ra ms abundante es GL. Estas subunidades reguladoras poseen mltiples dominios First Draft: 2011-08-22 que intervienen en interacciones con el glucgeno, con la subunidad cataltica de la 2nd Pass: 2011-08-31 protena fosfata y con enzimas diana. Por tanto, estas subunidades reguladoras actan como plataformas que acercan la protena fosfatasa a sus sustratos en el contexto de una partcula de glucgeno. La actividad fosfatasa de PP1 tiene que disminuir cuando hay que descomponer el glucgeno (Figura 25.5). En estos casos, la adrenalina o el glucagn han activado la cascada de AMP cclico y la protena quinasa A se encuentra activa. La protena quinasa A reduce la actividad de PP1 mediante dos mecanismos. Primero, en el msculo, se fosforila GM, lo que da lugar a la liberacin de la subunidad cataltica. Se reduce as, en gran medida, la desfosforilacin. En segundo lugar, casi todos los tejidos contienen pequeas protenas que, al ser fosforiladas, inhiben la subunidad cataltica de PP1. De este modo, cuando se activa la degradacin del glucgeno por medio de cAMP, la fosforilacin de estos inhibidores desactiva las protena fosfatasas, manteniendo la glucgeno fosforilasa en su forma activa a y la glucgeno sintasa en su forma inactiva b.

25.2 Regulacin recproca443


DURANTE EL EJERCICIO O EN AYUNO

Adrenalina o glucagn

Protena quinasa A activada


ATP ADP ATP ADP

Activa PP1 GM Regin de unin al glucgeno 

PP1 Inhibidor

 Inhibidor

PP1 Inactiva

Figura 25.5 En el msculo, la regulacin de la protena fosfatasa 1 tiene lugar en dos pasos. La fosforilacin de GM por parte
de la protena quinasa A disocia la subunidad cataltica de sus sustratos en la partcula de glucgeno. La fosforilacin de la subunidad inhibidora por parte de la protena quinasa A desactiva la subunidad cataltica de PP1.

Menos activa 
P

GM

La insulina estimula la sntesis de glucgeno desactivando la glucgeno sintasa quinasa


Tras hacer ejercicio, la gente suele consumir alimentos ricos en carbohidratos para reponer sus reservas de glucgeno. De hecho, en los seres humanos, la principal forma de retirar glucosa de la sangre consiste en convertirla en glucgeno muscular. Cmo se estimula la sntesis de glucgeno? Cuando los niveles de glucosa en sangre son elevados, la insulina estimula la sntesis de glucgeno. Esta estimulacin tiene dos componentes. En primer lugar, recordemos que la insulina provoca un aumento de la Insulina concentracin intracelular de glucosa incrementando el nmero de transportadores de glucosa (GLUT4) en la membrana celular (p. 291). La entrada de glucosa y su posterior conversin en glucosa 6-fosfato activa alostricamente la glucgeno sintasa b. En segundo lugar, la insulina provoca la desactivacin de la glucgeno sintasa quinasa, la enzima que mantiene la glucgeno sintasa en su forma fosforilada, menos activa (Figura 25.6). Cmo ejerce la insulina sus efectos? El primer paso de la accin de la insulina es su unin a un receptor, una tirosina quinasa de la membrana plasmtica (p. 227). La unin de la insulina estimula la actividad tirosina quinasa del receptor de manera que fosforila los sustratos del receptor de la insulina. Estas protenas fosforiladas ponen en marcha rutas de transduccin de seales que, en ltima instancia, provocan el movimiento de transportadores de glucosa hacia la membrana celular y la activacin de protena quinasas que fosforilan y desactivan la glucgeno sintasa quinasa. La quinasa inactiva ya no puede mantener la glucgeno fosforilasa en su estado fosforilado, menos activo. Mientras tanto, la protena fosfatasa 1 desfosforila la glucgeno sintasa, estimulando an ms la enzima y reponiendo las reservas de glucgeno. El efecto neto de la insulina consiste en el restablecimiento de las reservas de glucgeno.

IRS IRS
P

Protena quinasas

Glucgeno sintasa quinasa Glucgeno sintasa PP1

Glucgeno sintasa quinasa

Glucgeno sintasa

En el hgado, el metabolismo del glucgeno regula el nivel de glucosa en la sangre


Tras una comida rica en carbohidratos, los niveles de glucosa en sangre aumentan y se intensifica la sntesis de glucgeno en el hgado. Aunque la insulina es la principal seal para la sntesis de glucgeno, otra seal es la concentracin de glucosa en sangre, que normalmente oscila entre 80 y 120 mg por cada 100 ml (4,4-6,7 mM). El hgado detecta la concentracin de glucosa en sangre y capta o libera glucosa para mantener un nivel normal. Cuando aporta glucosa a la sangre, la cantidad de fosforilasa a del hgado disminuye (Figura 25.7). De hecho, la fosforilasa a es el sensor de glucosa de las

Figura 25.6 La insulina desactiva la glucgeno sintasa quinasa. La insulina


pone en marcha una cascada que da lugar ala fosforilacin y desactivacin de la glucgeno sintasa quinasa, con lo que evita la fosforilacin de la glucgeno sintasa. Laprotena fosfatasa 1 (PP1) extrae grupos fosforilo de la glucgeno sintasa, con lo que activa la enzima y permite la sntesis de glucgeno. Abreviatura: IRS, sustrato del receptor de la insulina.

Fosforilasa
a a

Glucosa aadida
b 0 2 4 6

Sintasa
b 8

Minutos

Figura 25.7 En el hgado, la glucosa presente en la sangre regula el metabolismo del glucgeno. La liberacin
de glucosa en el torrente sanguneo provoca la desactivacin de la fosforilasa, que va seguida de la activacin de la glucgeno sintasa heptica. [Tomada de W. Stalmans,
H.de Wulf, L. Hue y H. -G. Hers. Eur. J. Biochem. 41:117-134, 1974.]

loque explica el hecho de que la fosforilasa del hgado sea un sensor de glucosa, mientras que la fosforilasa del msculo no?

PREGUNTA RPIDA 2 Qu es

clulas hepticas. La unin de glucosa a la fosforilasa a desplaza su equilibrio alostrico de la forma activa R a la forma inactiva T. Este cambio conformacional convierte al grupo fosforilo de la serina 14 en un sustrato para la protena fosfatasa 1. La PP1 se une fuertemente a la fosforilasa a solo si la fosforilasa se encuentra en el estado R pero, cuando est unida, PP1 es inactiva. Cuando la glucosa induce la transicin hacia la forma T, PP1 se disocia de la fosforilasa y se vuelve activa, convirtiendo la fosforilasa a del hgado en la forma b. Recordemos que la transicin R m T de la fosforilasa a muscular no se ve afectada por la glucosa y, por tanto, no le afecta el aumento de los niveles de glucosa en sangre (p. 428). Tras un periodo en el que el nivel de glucgeno fosforilasa a est disminuyendo, la cantidad de glucgeno sintasa a aumenta, lo que da lugar a la sntesis de glucgeno a partir de la glucosa que ya ha llegado al hgado. Cmo activa la glucosa la glucgeno sintasa? La fosforilasa b, a diferencia de la fosforilasa a, no se une a la fosfatasa. Por consiguiente, la conversin de a en b va acompaada de la liberacin de PP1, de modo que ya puede activar la glucgeno sintasa y desactivar la glucgeno fosforilasa (Figura25.8). La extraccin del grupo fosforilo de la glucgeno sintasa b inactiva la convierte en la forma a, activa. Al principio, hay alrededor de 10 molculas de fosforilasa a por cada molcula de fosfatasa. En consecuencia, la mayora de la fosforilasa a se convierte en b antes de que se libere la fosfatasa. Por tanto, la actividad de la glucgeno sintasa comienza a aumentar solo cuando la mayora de la fosforilasa se encuentra desactivada (ver la Figura 25.7). El desfase entre la degradacin y la sntesis evita que las dos rutas operen de forma simultnea. Este extraordinario sistema sensor de la glucosa depende de tres elementos clave: (1) la comunicacin entre el lugar alostrico para la glucosa y la serina fosfato, (2) la utilizacin de PP1 para desactivar la fosforilasa y activar la glucgeno sintasa y (3) la unin de la fosfatasa a la fosforilasa a para evitar la activacin prematura de la glucgeno sintasa.

Actividad enzimtica

Glucgeno fosforilasa a (estado T) H2O Pi

Glucgeno fosforilasa b (estado T)

Figura 25.8 En el hgado, la glucosa regula el metabolismo del glucgeno.


Enel hgado, la glucosa se une a la glucgeno fosforilasa a y la inhibe, ya que favorece la formacin del estado T de la fosforilasa a. En este estado, la fosforilasa a no se une a la protena fosfatasa 1 (PP1), con lo que PP1 se disocia de la glucgeno fosforilasa a y se activa. La PP1 libre desfosforila la glucgeno fosforilasa a y la glucgeno sintasa b, desactivando la descomposicin del glucgeno y activando la sntesis de glucgeno.

Glucgeno fosforilasa a (estado R)

P P

P P


Regin de unin a la fosforilasa PP1 GL H2O Glucgeno sintasa b

PP1 GL

Regin de unin al glucgeno

Glucosa ( )

Pi Glucgeno sintasa a

Aspecto clnico
La diabetes mellitus es el resultado de una deficiencia de insulina y un exceso de glucagn
La diabetes melittus es una enfermedad compleja que se caracteriza por un uso de los combustibles extremadamente fuera de lo normal: el hgado produce glucosa en exceso, que es infrautilizada por los dems rganos. La incidencia de la diabetes melittus (o, sencillamente, diabetes) es de aproximadamente el 5 % de la poblacin mundial. De hecho, la diabetes es la enfermedad metablica grave ms frecuente del mundo; afecta a cientos de millones de personas. La diabetes de tipo 1, o diabetes melittus dependiente

444

25.2 Regulacin recproca445

de la insulina (DMDI), se debe a la destruccin autoinmune de las clulas b del pncreas que secretan la insulina y, normalmente, aparece antes de cumplir los 20aos. La dependencia de la insulina significa que la persona afectada necesita que se le administre insulina para vivir. Por el contrario, la mayora de los diabticos presentan un nivel de insulina normal en su sangre o un nivel ms elevado que el de las personas no afectadas, pero estos diabticos apenas responden a la hormona, una circunstancia que se conoce con el nombre de resistencia a la insulina. Como ya se coment en el captulo 17, esta forma de la enfermedad, denominada diabetes de tipo 2, o diabetes melittus no dependiente de la insulina (DMNDI), suele aparecer a edades ms tardas que la forma dependiente de la insulina. En la diabetes de tipo 1, la produccin de insulina es insuficiente y, por consiguiente, el glucagn est presente a niveles ms altos de lo normal. Como hay insuficiencia de insulina, la glucosa no puede entrar en las clulas adiposas y musculares. El hgado se atasca en un estado gluconeognico y cetognico, es decir, en un estado en el que metaboliza grasas (captulo 27). Bsicamente, la persona diabtica se encuentra en un estado bioqumico de inanicin, a pesar de la elevada concentracin de glucosa en su sangre. El excesivo nivel de glucagn en comparacin con el de insulina provoca una disminucin de la cantidad de fructosa 2,6-bisfosfato (F-2,6-BP) en el hgado. Por tanto, se inhibe la glicolisis y se estimula la gluconeognesis a causa de los efectos recprocos que ejerce la F-2,6-BP sobre la fosfofructoquinasa y la fructosa 1,6-bisfosfatasa (p. 306). La elevada proporcin entre glucagn e insulina que tiene lugar en la diabetes tambin provoca la descomposicin del glucgeno. Por tanto, en el hgado se produce una cantidad excesiva de glucosa, que es liberada a la sangre. Cuando su concentracin en sangre supera la capacidad de reabsorcin de los tbulos renales, la glucosa se excreta por la orina. La glucosa excretada va acompaada de agua y, por tanto, en la fase aguda de la enfermedad, un diabtico no tratado est hambriento y sediento.

Areteo de Capadocia, un mdico del s. II d. C. escribi: Se ha asignado el epteto diabetes a la enfermedad, que viene aser algo as como el paso del agua a travs de un sifn. Con mucha perspicacia, defini la diabetes como elderretimiento de la carne y de las extremidades en orina. Mellitus procede del latn y significa endulzado con miel.

Aspecto clnico
Se pueden comprender, a nivel bioqumico, las enfermedades relacionadas con el almacenamiento del glucgeno
En 1929, Edgar von Gierke describi la primera enfermedad relacionada con el almacenamiento del glucgeno. Un paciente con esta enfermedad tiene un abdomen enorme provocado por un agrandamiento masivo del hgado. Entre comidas hay una hipoglucemia muy acusada. Adems, los niveles de glucosa en sangre no aumentan tras la administracin de adrenalina y glucagn. Un nio con esta enfermedad del almacenamiento del glucgeno puede presentar convulsiones a causa del bajo nivel de glucosa en sangre. El defecto enzimtico causante de la enfermedad de von Gierke se descubri en 1952 gracias a Carl y Gerty Cori. Observaron que el hgado de los pacientes con esta enfermedad carece de glucosa 6-fosfatasa. Este descubrimiento fue la primera demostracin de una insuficiencia hereditaria de una enzima del hgado. El glucgeno heptico tiene una estructura normal pero se encuentra en cantidades anormalmente elevadas. La ausencia de glucosa 6-fosfatasa en el hgado provoca hipoglucemia porque no se puede formar glucosa a partir de glucosa 6-fosfato. Este azcar fosforilado no abandona el hgado porque no puede atravesar la membrana plasmtica. La presencia de un exceso de glucosa 6-fosfato desencadena un aumento de la glicolisis en el hgado, lo que da lugar a niveles elevados de lactato y piruvato en la sangre. Los pacientes con la enfermedad de von Gierke tambin presentan una mayor dependencia del metabolismo de las grasas. Esta enfermedad tambin se puede producir por una mutacin en el gen que codifica el transportador de glucosa 6-fosfato. Recordemos que la glucosa 6-fosfato tiene que ser transportada al lumen del retculo endoplasmtico para ser hidrolizada por la fosfatasa (p. 305). Anlogamente, las mutaciones en las otras tres enzimas esenciales de este sistema pueden dar lugar a la enfermedad de von Gierke. Desde la primera caracterizacin de la enfermedad de von Gierke se han caracterizado otras siete enfermedades relacionadas con el almacenamiento del glucgeno

Tabla 25.1 Enfermedades relacionadas con el almacenamiento del glucgeno


Tipo I Enfermedad de von Gierke II Enfermedad de Pompe III Enfermedad de Cori IV Enfermedad de Andersen V Enfermedad de McArdle Enzima defectuosa Glucosa 6-fosfatasa o el sistema de transporte a-1,4-Glucosidasa (lisosmica) Amilo-1,6-glucosidasa (enzima desramificante) Enzima ramificante (a-1,4 a-1,6) Fosforilasa rgano afectado Hgado y rin Todos los rganos Msculo e hgado Hgado y bazo Msculo Glucgeno en el rgano afectado En mayor cantidad; estructura normal Incremento masivo en la cantidad; estructura normal En mayor cantidad; ramas externas cortas Cantidad normal; ramas externas muy largas Incremento moderado en la cantidad; estructura normal Caractersticas clnicas Agrandamiento masivo del hgado. Falta de desarrollo. Hipoglucemia grave, cetosis, hiperuricemia, hiperlipemia. Un fallo cardiorrespiratorio provoca la muerte, normalmente antes de cumplir 2 aos. Como el tipo I, pero con sntomas ms suaves. Cirrosis progresiva del hgado. Un fallo heptico provoca la muerte, normalmente antes de cumplir 2 aos. Capacidad limitada para realizar ejercicios intensos a causa de los dolorosos calambres musculares. Por lo dems, el paciente est normal y bien desarrollado Como el tipo I, pero con sntomas ms suaves. Como el tipo V. Agrandamiento moderado del hgado. Hipoglucemia moderada.

VI Enfermedad de Hers VII VIII

Fosforilasa Fosfofructoquinasa Fosforilasa quinasa

Hgado Msculo Hgado

En mayor cantidad En mayor cantidad; estructura normal En mayor cantidad; estructura normal

Nota: desde el tipo I al tipo VII, se trata de rasgos autosmicos recesivos. El tipo VIII es un rasgo ligado al sexo.

(A) Control normal


300

(B)

Paciente con la enfermedad de McArdle

[ADP], M

200

100

0 Reposo Ejercicio

Reposo Ejercicio

Figura 25.9 Estudio de RMN de los niveles de ADP en el msculo del brazo humano. Se midieron los niveles de ADP
Tymoczko: Biochemistry: A Short Course, 2E con la enfermedad de McArdle, una Perm. Fig.: 25010 New Fig.: 25-09 enfermedad relacionada con el PUAC: 2011-08-22 almacenamiento del glucgeno (B), tanto en 2nd Pass: 2011-08-31

enun individuo normal (A) y en un paciente

reposo como haciendo ejercicio. Durante el ejercicio, el nivel de ADP aumenta mucho ms que en los controles normales pero disminuye significativamente tras una aclimatacin al ejercicio. Cdigo de colores: en reposo (verde); ejercicio moderado (rosa); ejercicio intenso (rojo), aclimatacin al ejercicio (rosa claro). [Tomada de G. K. Radda.
Biochem. Soc. Trans. 14:517525, 1986.]

y se han desvelado las razones bioqumicas que explican los sntomas de estas enfermedades (Tabla 25.1). El matrimonio Cori descubri el defecto bioqumico de otra enfermedad relacionada con el almacenamiento del glucgeno (la enfermedad de tipo III), que ahora lleva su nombre. En la enfermedad de tipo III, la estructura del glucgeno del hgado y del msculo no es normal y est presente en cantidades notablemente ms altas. Lo ms sorprendente es que las ramas externas del glucgeno son muy cortas. Los pacientes que presentan este tipo de enfermedad relacionada con el almacenamiento del glucgeno carecen de la enzima desramificante (a-1,6-glucosidasa), de modo que solo se pueden utilizar eficazmente las ramas ms externas del glucgeno. Por tanto, solo una pequea fraccin de este glucgeno anormal es funcionalmente activo como reserva de glucosa accesible. En la enfermedad de McArdle (de tipo V) se observa un defecto del metabolismo del glucgeno que afecta exclusivamente al msculo. La actividad de la fosforilasa muscular no existe y la capacidad del paciente para llevar a cabo un ejercicio intenso es limitada a causa de los dolorosos calambres musculares. Aparte de eso, el paciente es normal y est bien desarrollado. Por tanto, la utilizacin eficaz del glucgeno muscular no es esencial para la vida. Estudios de resonancia magntica nuclear (RMN) con fsforo-31 realizados en estos pacientes han resultado muy reveladores. El pH de las clulas del msculo esqueltico de personas normales disminuye durante un ejercicio intenso debido a la produccin de lactato. Por el contrario, las clulas musculares de los pacientes con la enfermedad de McArdle se vuelven ms alcalinas durante el ejercicio a causa de la descomposicin de la creatina fosfato (p. 254). En estos pacientes no se acumula lactato porque la velocidad de la glicolisis en sus msculos es mucho menor de lo normal; su glucgeno no se puede movilizar. Los resultados de los estudios de RMN tambin han demostrado que los dolorosos calambres caractersticos de esta enfermedad estn relacionados con elevados niveles de ADP (Figura 25.9). La aclimatacin al ejercicio da lugar a un descenso de la concentracin de ADP y a la desaparicin de los calambres. La espectroscopa de RMN es una valiosa tcnica de espectroscopa no invasiva que permite evaluar las terapias contra esta enfermedad basadas en la dieta y en el ejercicio.

446

Respuestas a las preguntas rpidas447

Resumen
25.1 El glucgeno se sintetiza y se degrada mediante rutas distintas El glucgeno se sintetiza mediante una ruta distinta a la de su descomposicin. La UDP-glucosa, el intermediario activado de la sntesis de glucgeno, se forma a partir de glucosa 1-fosfato y UTP. La glucgeno sintasa cataliza la transferencia de glucosa desde la UDP-glucosa al grupo hidroxilo del C-4 de un residuo terminal de una molcula de glucgeno en crecimiento. El cebador de la sntesis es la glucogenina, una protena que se autoglucosila y que presenta una unidad de oligosacrido unida covalentemente a un residuo especfico de tirosina. Una enzima ramificante convierte algunos enlaces a-1,4 en enlaces a-1,6, con lo que aumenta el nmero de extremos y, de este modo, el glucgeno se puede fabricar y descomponer con ms rapidez. 25.2  El metabolismo en su contexto: La descomposicin y la sntesis delglucgeno se regulan de forma recproca La sntesis y la degradacin del glucgeno estn coordinadas mediante varias cascadas de reacciones de amplificacin. La adrenalina y el glucagn estimulan la descomposicin del glucgeno e inhiben su sntesis incrementando el nivel de AMP cclico en el citoplasma, lo que activa la protena quinasa A. Esta protena activa la descomposicin del glucgeno aadiendo un grupo fosforilo a la fosforilasa quinasa e inhibe la sntesis de glucgeno fosforilando la glucgeno sintasa. Los efectos de la protena quinasa A sobre la movilizacin del glucgeno son revertidos por la protena fosfatasa 1, que est regulada por medio de varias hormonas. La adrenalina inhibe esta fosfatasa bloqueando su unin a las molculas de glucgeno y activando un inhibidor. La insulina, por el contrario, desencadena una cascada que fosforila y desactiva la glucgeno sintasa quinasa, una de las enzimas que inhibe la glucgeno sintasa. Por tanto, la sntesis de glucgeno disminuye por la adrenalina y aumenta por la insulina. La glucgeno sintasa y la glucgeno fosforilasa tambin est reguladas mediante interacciones alostricas no covalentes. La glucgeno sintasa b se activa por la glucosa 6-fosfato, mientras que la glucgeno fosforilasa es un componente clave del sistema sensor de glucosa de las clulas hepticas. El metabolismo del glucgeno es un ejemplo del poder y la precisin de la fosforilacin reversible a la hora de regular procesos biolgicos.

Trminos clave
uridina difosfato glucosa (UDPglucosa) (p. 437) glucgeno sintasa (p. 348) glucogenina (p. 438) glucgeno sintasa quinasa (GSK) (p. 440) protena fosfatasa 1 (PP1) (p. 441)

Respuestas a las PREGUNTAS RPIDAS


2. La fosforilasa a del hgado es inhibida por la glucosa, que facilita la transicin R T. Esta transicin libera la protena fosfatasa 1, que desactiva la descomposicin del glucgeno y estimula su sntesis. La fosforilasa del msculo no es sensible a la glucosa.

1. Evita que la sntesis y la descomposicin tengan lugar de forma simultnea, lo que provocara un gasto intil de energa. Ver el problema 9 en la seccin de Problemas.

448 25 Sntesis de glucgeno

Problemas
1. Ying y Yang. Asigne a cada trmino la descripcin correspondiente. 3 (a)UDP-Glucosa 1. Uno de sus sustratos es la glucosa 1-fosfato. (b)UDP-Glucosa pirofosfo 2. Potente activador de la rilasa glucgeno sintasa b. (c)Glucgeno sintasa 3. Sensor de glucosa en el hgado. (d)Glucogenina 4. Sustrato activado para la (e)Enzima ramificante sntesis de glucgeno. 5. Sintetiza enlaces a-1,4 (f)Glucosa 6-fosfato entre molculas de glucosa (g)Glucgeno sintasa 6. Provoca la desactivacin quinasa de la glucgeno sintetasa (h) Protena fosfatasa 1 quinasa. 7. Sintetiza enlaces a-1,6 (i)Insulina entre molculas de (j)Glucgeno fosforilasa a glucosa 8. Cataliza la formacin de glucgeno sintasa b. 9. Cataliza la formacin de glucgeno sintasa a. 10. Proporciona el cebador para la sntesis de glucgeno. 2. Trabajo de equipo. Qu enzimas se necesitan para la sntesis de una partcula de glucgeno a partir de glucosa 6-fosfato? 3 y 4 3. El ATP est detrs de todo! La UDP-glucosa es el precursor activado de la sntesis de glucgeno pero, en ltima instancia, es el ATP el que aporta la energa que impulsa la sntesis de glucgeno. Demuestre esta afirmacin mostrando las reacciones que se necesitan para convertir la glucosa 6-fosfato en una unidad de glucgeno con la consiguiente regeneracin del UTP. 3 4. Haz que vaya hacia adelante. La siguiente reaccin explica la sntesis de UDP-glucosa. Esta reaccin es fcilmente reversible. Cmo se hace que sea irreversible in vivo? 3 Glucosa 1-fosfato 1 UTP m UDP-glucosa 1 PPi 5. Si insistes. Por qu la activacin de la forma b fosforilada de la glucgeno sintasa mediante concentraciones elevadas de glucosa 6-fosfato es una buen idea desde el punto de vista bioqumico? 4 6. Iniciar y extender. Describa las distintas funciones de la glucogenina y de la glucgeno sintasa durante la sntesis de glucgeno. 4 7. Un ATP ahorrado es un ATP ganado. La oxidacin completa de glucosa 6-fosfato procedente de glucosa libre genera 30 molculas de ATP mientras que la oxidacin completa de la glucosa 6-fosfato procedente del glucgeno genera 31 molculas de ATP? Explique esta diferencia. 5 8. Papel dual. La fosfoglucomutasa es esencial tanto para la descomposicin del glucgeno como para su sntesis. Explique el papel de esta enzima en cada uno de los dos procesos. 9. Trabajando con distinto fin. Escriba una reaccin ajustada que muestre el efecto de la activacin simultnea de la glucgeno fosforilasa y la glucgeno sintasa. Incluya las reacciones catalizadas por la fosfoglucomutasa y la UDP-glucosa pirofosforilasa. 5 10. Lograr la inmortalidad. La glucgeno sintasa necesita un cebador. En un principio se crea que el cebador proceda de grnulos de glucgeno ya existentes que se repartan entre las clulas hijas durante la divisin celular. En otras palabras, parte de la molcula original de glucgeno sencillamente se transmita de una generacin a la siguiente. Hubiera tenido xito esta estrategia a la hora de transmitir la reserva de glucgeno de una generacin a la siguiente? En base a los conocimientos actuales, cmo se sintetizan las nuevas molculas de glucgeno? 4 11. Seal para la sntesis. Cmo estimula la insulina la sntesis de glucgeno? 4 12. Reservas excesivas. Sugiera una explicacin para el aumento de la cantidad de glucgeno que se observa en la enfermedad relacionada con el almacenamiento del glucgeno de tipo I (la enfermedad de von Gierke). 4

Problemas de integracin de captulos

13. Mutantes metablicos. Pronostique la principal consecuencia de cada una de las siguientes mutaciones. 5 (a) Prdida del lugar de unin al AMP de la fosforilasa muscular. (b) Mutacin de la Ser14 a Ala14 en la fosforilasa del hgado. (c) Sobreexpresin de la fosforilasa quinasa en el hgado. (d) Prdida del gen que codifica el inhibidor 1 de la protena fosfatasa 1. (e) Prdida del gen que codifica la subunidad de la protena fosfatasa 1 que interacciona con el glucgeno. (f) Prdida del gen que codifica glucogenina. 14. Ms mutantes metablicos. Comente brevemente las principales consecuencias de cada una de las siguientes mutaciones que afectan a la utilizacin del glucgeno. 5 (a) Prdida de la actividad GTPasa de la subunidad a de la protena G. (b) Prdida de la actividad fosfodiesterasa. 15. Mismos sntomas, distinta causa. Con frecuencia, la enfermedad de von Gierke es el resultado de un defecto en la glucosa 6-fosfatasa. Sugiera otra mutacin en el metabolismo de la glucosa que provoque sntomas similares a los de la enfermedad de von Gierke. 16. Otra vez von Gierke. Las personas que padecen la enfermedad de von Gierke liberan una pequea cantidad de glu-

Problemas449

cosa en la sangre tras inyectarles glucagn. Cmo es esto posible? 17. Esa cara me suena. La UDP-glucosa es la forma activada de la glucosa que se utiliza durante la sntesis del glucgeno. Sin embargo, a lo largo de nuestro estudio del metabolismo ya hemos visto otras formas activadas de los carbohidratos parecidas. En qu otro sitio hemos visto un UDP-carbohidrato? 18. Conversin de carbohidratos. Escriba una reaccin ajustada para la formacin de glucgeno a partir de galactosa. 3
Problemas de integracin de captulos y de interpretacin de datos para atrevidos

(b) Qu efecto se observa al tratar las muestras con a-amilasa? Explique los resultados. (c) Cite otras protenas que esperara encontrar asociadas al glucgeno. Por qu no se ven otras protenas? 22. Purificacin de glucgeno 2. Mediante transfeccin, se introdujo el gen de la glucogenina en una lnea celular que normalmente solo almacena pequeas cantidades de glucgeno. A continuacin, las clulas fueron manipuladas segn el protocolo explicado ms adelante. Despus, se purific el glucgeno y se analiz mediante SDS-PAGE y transferencia Western utilizando anticuerpos contra la glucogenina (ver el captulo 5). Los resultados se muestran en la siguiente ilustracin.
212 158 116 97 66 56 43 37 Calle 1 2 3 + + 4 1 2 -Amilasa + 3 + 4

20. Productos reveladores. Una muestra de glucgeno procedente de un paciente con una enfermedad heptica se incuba con ortofosfato, fosforilasa, la transferasa y la enzima desramificante (a-1,6-glucosidasa). La proporcin entre glucosa 1-fosfato y glucosa que se forma en esta mezcla es de 100. Cul es la insuficiencia enzimtica ms probable en este paciente? 3 21. Purificacin de glucgeno 1. El hgado es uno de los principales lugares donde se almacena glucgeno. Obtenido a partir de dos muestras de hgado humano, el glucgeno fue tratado (1) o no (2) con a-amilasa y analizado posteriormente mediante SDS-PAGE y transferencia Western utilizando anticuerpos contra la glucogenina (ver el captulo 5). Los resultados se muestran en la siguiente ilustracin.
212 158 116 97 66 56 43 37 + +

[Cortesa del Dr. Peter J. Roach, Escuela de Medicina de la Universidad de Indiana.]

Muestra 1 Muestra 2 -Amilasa

[Cortesa del Dr. Peter J. Roach, Escuela de Medicina de la Universidad de Indiana.]

(a) Por qu no se ven protenas en las calles correspondientes a las muestras no tratadas con a-amilasa?

El protocolo: Las clulas cultivadas en un medio de crecimiento con glucosa 25 mM (calle 1) fueron transferidas a un medio que no tena glucosa durante 24 horas (calle 2). Se volvi a suministrar glucosa a las clulas privadas de ella, introducindolas en un medio con glucosa 25 mM durante una hora (calle 3) o 3 horas (calle 4). Antes de aplicarlas sobre el gel, las muestras (12 mg de protena) fueron tratadas (1) o no (2) con a-amilasa, segn se indica en la figura. (a) Por qu la transferencia Western da lugar a una estela en otras palabras, a la tincin que se observa en la zona de alto peso molecular de la calle 1 (2)? (b) Qu significa la menor tincin que se observa en la zona de alto peso molecular en la calle 2 (2)? (c) Qu significa la diferencia entre las calles 2 (2) y 3 (2)? (d) Sugiera una posible razn para que apenas haya diferencia entre las calles 3 (2) y 4 (2) (e) Por qu las bandas de 66 kDa que se observan en las calles tratadas con amilasa son iguales, a pesar de que las clulas han sido sometidas a tratamientos distintos?

En la direccin www.whfreeman.com/tymoczko2e se pueden encontrar lecturas recomendadas para este captulo.

Kilodaltons

Kilodaltons

19. Eliminando cualquier rastro. En extractos de hgado humanos, la actividad cataltica de la glucogenina solo se poda detectar tras un tratamiento con a -amilasa, una enzima que hidroliza enlaces glicosdicos a-1,4. Por qu se necesitaba la a-amilasa para poner de manifiesto la actividad de la glucogenina?

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