Mara Fernanda Gonzlez Medina. Mara Rico Martnez. Araceli Guerrero Rodrguez. Irving Rivera Soto. Erick Soto.

Evidencia *1. 1.- Leer y analizar la situacin y clarificar los conceptos que en ella aparecen. CONCEPTOS: Up-stream:

Down-stream:

Nanopartcula:

Intracelular:

Proceso fermentativo:

Comportamiento reolgico:

Cepa bacteriana:

Peso:

Densidad:

Masa:

Desechos:

Medio:

2.- Establecer el problema a resolver: Definir la operacin unitaria que le sigue a la etapa de la ruptura celular en el proceso de downstream.

3.- Analizar el problema. Definir lo que se conoce: Es un proceso fermentativo. Se producen nanopartculas de xido de Hierro intracelularmente. El medio est concentrado. Hay una diferencia significativa de peso entre desechos y medio. Se sabe que ya se encontr la operacin de ruptura celular.

Definir lo que no se conoce: La reologa del medio. El tamao especfico de las nanopartculas. Compuestos que conforman los desechos. La cepa bacteriana usada. El Peso del medio y los desechos, as como su densidad. Cantidad de biomasa generada. Volumen de operacin. El tipo de lisis celular realizada. Las condiciones en las que se realiz la lisis.

Lluvia de ideas: Mtodos de separacin fsicos o qumicos. Sedimentacin. Filtracin. Ultrafiltracin. Tipo de Ruptura celular. Biomasa hmeda o seca. Precipitacin. Floculacin. Imantacin. Reglas heursticas.

4.- Hacer una clasificacin sistemtica de las ideas y definir preguntas que deben ser contestadas para resolver el problema. Proceso Fermentativo Biomasa + Medio Ruptura celular Separacin Medio + Desecho celular + ? xido de Hierro

Qu mtodo de separacin usar? Se debe considerar separar lo ms abundante y lo ms fcil. Qu mtodo de lisis se us? Qumico o Mecnico. Cul es el presupuesto? Qu volumen de operacin se maneja?

5.- Formular objetivo de aprendizaje. Encontrar la operacin unitaria que facilite y se adapte a una separacin ptima para la obtencin de nanopartculas de xido de Hierro intracelulares, una vez que se ha hecho la ruptura.

6.- Hacer una lista de lo que necesitan saber, en base a esa lista hacer autoestudio. * Investigar que cepa lo produce (FER) * Investigar que tipo de xido de hierro es (ARA) * Investigar en qu se precipita (MARY) *Investigar qu mtodos de lisis se pudo haber utilizado (ERICK)

Mtodos mecnicos Homogenizadores de alta presin - Es uno de los mas utilizados para disrupcin celular a gran escala. - Se aplica una elevada presin a una suspensin de clulas (se trabaja en rangos de presiones de 2,5-30 MPa), forzndolas a pasar por una especie de vlvula aguja, sometiendo as a las clulas a un alto estrs de corte, rompiendo las membranas. - Se debe tener en cuenta la presin hidrulica que se le aplica a la suspensin; la temperatura que se alcanza durante el proceso; el tipo de clula a romper; el nmero de ciclos.

Mtodos mecnicos Homogenizadores Microfluidizadores (microfluidizer homogenizer) -En los microfluidizadores, el lquido se divide en dos o ms corrientes que se bombean a elevadas presiones (en algunos equipos ms de 270 MPa) y grandes velocidades, unas contra otras en un ngulo de 180 cayendo repentinamente la presin tras chocar ambas corrientes. -El mecanismo de disrupcin realizado por este equipo genera partculas de mayor tamao que el homogenizador de alta presin.

Bead mills (molinos a esferas) - Son de los mas utilizados a gran escala. - Bsicamente consiste en un agitador a discos montado sobre un motor central que gira en una cmara central, la cual es cargada con esferas de vidrio, metal u otro material. La molienda con bead mills puede generar enormes cantidades de calor. Mientras que la transformacin del material termolbil, la molienda puede llevarse a cabo a bajas temperaturas, es decir, mediante la adicin de un poco de nitrgeno lquido en el recipiente. Esto se conoce como molienda con perlas criognicas. Un enfoque alternativo es el uso de equipo enfriado con glicol. Un molino de perlas puede ser operado en un modo por lotes o en un modo continuo y se utiliza comnmente para interrumpir las clulas de levadura y para la molienda de tejido animal. Uso de una unidad de pequea escala operado en un modo continuo, a pocos kilogramos de clulas de levadura pueden ser interrumpidos por hora. Unidad ms grande puede manejar cientos de kilogramos de clulas por hora.

Sonicadores (ultrasonido)- El ultrasonido utiliza frecuencias entre 20 y 50 kHz. - Las ondas de ultrasonido crean muchas micro-burbujas en muchos sitios de nucleacin dentro de la suspensin celular. Estas micro-burbujas luego colapsan implosionando durante el perodo de rarefaccin (compresin) de la onda. - Este fenmeno, denominado cavitacin, produce un shock de ondas muy intenso, generando un fuerte estrs local, deformando al lmite las clulas y produciendo as su consecuente ruptura.