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UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO

Divisin de Docencia Direccin de Planeacin y Desarrollo Educativo MANUAL DE PRCTICAS Instituto: INSTITUTO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Licenciatura en:

INGENIERA AGROINDUSTRIAL 1.- Nombre de la asignatura: BIOQUMICA I 2.Semestre: TERCERO 3.- Carga horaria semanal: 10 4.- Nombre de quienes elaboraron el manual: DRA. ELIA NORA AQUINO BOLAOS INTRODUCCIN 5.- Fecha de ltima actualizacin: 8 De DICIEMBRE DEL 2004

INDICE PRACTICA Pg.

1.- Nombre de la asignatura:.....................................................................................................................................1 PREPARACIN DE UNA SOLUCIN AMORTIGUADORA.............................................................................3 Introduccin...............................................................................................................................................................3

UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL ESTADO DE HIDALGO INSTITUTO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS INGENIERIA AGROINDUSTRIAL BIOQUIMICA I Dra. Elia Nora Aquino Bolaos

PRACTICA # 2 PREPARACIN DE UNA SOLUCIN AMORTIGUADORA Introduccin La concentracin de los iones hidrgeno en los diferentes medios es de particular importancia para todos los organismos vivos. Cambios pequeos en la concentracin de iones hidrogeno en la sangre, pueden dar lugar a cambios considerables en la composicin qumica de sta, trayendo como consecuencia alteraciones en procesos fisiolgicos tales como la respiracin, y hasta el comportamiento. Variaciones mnimas en el pH pueden afectar la capacidad cataltica de las enzimas y por lo tanto el buen funcionamiento de los sistemas metablicos. De aqu que el uso de soluciones amortiguadoras sea de gran importancia en el estudio de la actividad enzimtica o de las reacciones involucradas en los procesos metablicos. Una solucin amortiguadora (tampn o buffer) puede definirse como una solucin de un par conjugado cido base en tal proporcin que resiste los cambios en pH cuando se le adicionan iones H+ o iones OH-. La capacidad amortiguadora de este tipo de soluciones es mxima cuando la concentracin de la especie cida es igual a la concentracin de la especie bsica. El pH de la solucin en este punto se conoce como el pK del sistema. Cuando la solucin amortiguadora est formada por un compuesto que presenta varias etapas de disociacin, dicho compuesto tendr un pK diferente para cada grupo disociable. Objetivos. 1. Conocer los principios en los que se basa la preparacin y la accin de una solucin amortiguadora. 2. Llevar acabo los clculos necesarios para preparar una solucin amortiguadora con ciertas caractersticas, y con estos datos preparar esta solucin. 3. Verificar la estabilidad de la solucin amortiguadora en cuanto al cambio del pH.

Materiales y mtodos. 2 agitadores de vidrio 2 buretas de 50 ml 2 matraces aforados de 500 ml 1 pinzas para bureta 2 vasos de precipitados de 1 000 ml Soluciones Acido ctrico monohidratado 0.1 M (300 ml) Fosfato de sodio dibsico (Na2HPO4) 0.2 M (250 ml) Amortiguador de referencia pH 4 y 7 NaOH 0.1 M (500 ml) HCl 0.1 M (500 ml) Equipo Potencimetro Metodologa 1. Preparacin de una solucin amortiguadora de c. ctrico-fosfto de sodio pH 4.5. 1.1 Realizacin de los clculos. Llevar a cabo los clculos necesarios para preparar las soluciones de: cido ctrico 0.1 M, Na2HPO4 0.2 M, NaOH 0.1 M y HCl 0.1 M 1.2 Preparacin de la solucin amortiguadora mezclando 272.9 ml de cido ctrico 0.1 M con 227.1 ml de Na2HPO4 0.2 M. Medir el pH de la solucin en un potencimetro que haya sido previamente calibrado. Reportar el resultado obtenido y las observaciones hechas. 2. Verificacin de la estabilidad de la solucin amortiguadora en cuanto al cambio en pH. 2.1 Elevacin de pH de la solucin amortiguadora A 50 ml de la solucin amortiguadora preparada en 1.2, adicionar con una bureta diferentes volmenes de la solucin de NaOH 0.1 M. (en incrementos de 10 ml hasta 50 m l). Agitar perfectamente la solucin y en seguida determinar el pH de la misma. Reportar los resultados obtenidos 2.1 Disminucin del pH de la solucin amortugiadora A 50 ml de la solucin amortiguadora preparada en 1.2, adicionar con una bureta diferentes volmenes de la solucin de HCl 0.1 M. (en incrementos de 10 ml hasta 50 m l) Agitar perfectamente la solucin y en seguida determinar el pH de la misma. Reportar los resultados obtenidos.
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2.2 Elevacin del pH del agua. Medir 50 ml de H2O destilada mediante el uso de un matraz volumtrico. En seguida, medir el pH de la misma. Adicionar al agua 20 ml de solucin de NaOH 0.1 M y agitar vigorosamente, para despus medir el pH de la mezcla. 2.3 Disminucin del pH del agua Medir 50 ml de H2O destilada mediante el uso de un matraz volumtrico. Adicionar al agua 20 ml de solucin de HCl 0.1 M y agitar vigorosamente, para despus medir el pH de la mezcla. Comparar el resultado obtenido en esta prueba, con el que se obtuvo con la solucin amortiguadora reportar los resultados obtenidos. Realizar una grfica con los valores de titulacin del amortiguador. Cuestionario 1. Porque el cido actico se considera un cido dbil y al cido clorhdrico se le considera un cido fuerte 2. Calcular el pH de una mezcla cido actico 0.1 M y de acetato de sodio 0.2 M. El pka del cido actico es de 4.76 3. En funcin a que se selecciona una sustancia reguladora en los procesos bioqumicas. Bibliografa 1. Conn E. Stumpf P. K. 1976. Outlines of Biochemistry Cap.1 Wiley internacional (Edicin en Espaol. Ed. Limusa 1976 bioqumica fundamental). 2. Suttie J. W. 1976. Fundamentos de Bioqumica Cap.1 Nueva Ed. Interamericana. 3. Calbiochem, 1975 ( D.E.Gueffroy, editor) A guide for the preparation and use of buffers in biological systems. Calbioche, Cal. 4. Williams B. L..Wilson K. 1975. Principales and techniques of practical Biochemistry Cap.1 Arnold publishers. 5. Cowgill W. Pardee B. 1964. Tcnicas de investigacin bioqumica. Ed. Alhambra.