UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS CATEDRA DE FISIOLOGIA ANIMAL

Informe de Prctica de Laboratorio:

DETERMINACIN DE LA DIURESIS OSMTICA EN RATAS ALBINAS A CONCENTRACIONES HIPOTNICAS, ISOTNICAS E HIPERTNICAS

Docente: FELIX CASTILLO VIERA

2012

INTRODUCCION Diuresis osmtica, es el aumento de la miccin debido a la presencia de ciertas substancias en el lquido filtrado por los riones (este lquido finalmente se convierte en orina) 1. La diuresis osmtica se refiere al aumento de la miccin causada por la presencia de ciertas substancias en los tbulos renales, como la glucosa (azcar en la sangre) en cantidades excesivas o medicamentos como el Manitol. La diuresis, est controlada por la hormona antidiurtica (ADH), esta hormona es segregada por la neurohipfisis y regula la permeabilidad al agua del tbulo contorneado distal y colector controlando la cantidad de agua que se elimina por la orina. Cuanto mayor sea el nivel de ADH en la sangre, ms permeable ser la pared epitelial del TCD y colector y, por tanto, ms agua extraer de la orina. El nivel de ADH de la sangre es una funcin de la presin osmtica del plasma. Neuronas sensibles a la osmolaridad con cuerpos celulares localizados en el hipotlamo responden a un aumento de la osmolaridad con cuerpos celulares localizados en el hipotlamo responden a un aumento de la osmolaridad del plasma con una mayor frecuencia de descarga. Son clulas neurosecretoras que envan sus axones a la neurohipfisis, la mayor actividad neural de estas clulas aumenta la tasa de liberacin de la ADH a la sangre a partir de sus terminales axnicos, incrementando as el nivel sanguneo de ADH3. As si la osmolaridad de la sangre aumenta como resultado de una deshidratacin, la actividad de las neuronas neurosecretoras se incrementa, se libera ms ADH,

los tbulos renales TCP y TC se vuelven ms permeables y el agua se extrae osmticamente de la orina a una tasa mayor. As la excrecin de la orina es ms concentrada, es decir, hipertnica. La formacin de orina diluida o hipotnica, se produce por una mayor reabsorcin de solutos, adems disminuye la secrecin de ADH (hormona antidiurtica o vasopresina) lo que determina que las clulas de la pared del TCD y TC impidan que el agua abandone el filtrado por osmosis2. El presente trabajo, tiene como objetivo la determinacin de la diuresis osmtica a concentraciones hipotnicas, isotnicas e hipertnicas en roedores, para la comprobacin del buen funcionamiento de los riones evaluando la cantidad de sales que se eliminan.

II.

MATERIALES Y METODOS La Determinacin de la diuresis osmtica en ratas albinas a concentraciones hipotnicas, isotnicas e hipertnicas cada 30 minutos, se realizo en el laboratorio G-103 de la Escuela de Microbiologa y Parasitologa de la Universidad Nacional de Trujillo. TRABAJO DE LABORATORIO De una forma completamente al azar, se eligieron tres ratas albinas para la realizacin del experimento.

Elegidas las ratas, se procedi a designarles que solucin y a que concentracin se le hara tomar. Luego a cada una de ellas y por separado se las peso en una balanza con el nico fin de saber cunto de volumen de cada solucin se les hara tomar. Para saber cunto de solucin aplicarle a cada roedor, el peso de cada uno de ellos se multiplico por un 8% que representa a la volemia, es decir, al volumen de sangre que el corazn expulsa en un minuto. La rata N1, pes 115 gramos, por lo que fue sometida a 9.2 ml. de una solucin HIPOTONICA. La rata N2, pes 110 gramos, por lo que fue sometida a 8.8 ml. de una solucin ISOTONICA. La rata N3, pes 134.5 gramos, por lo que fue sometida a 10.76 ml. de una solucin HIPERTONICA. Cada solucin se le suministro con el mximo cuidado posible, a cada unidad experimental (las tres ratas albinas) para que no exista algn contratiempo que conllevase a algn edema pulmonar. Cada roedor, fue colocado (con sus jaulas para evitar que puedan escapar) en un embudos grande sostenido por un trpode. Al final del tubo del embudo, se coloco un pequeo beaker para recoger la orina eliminada por el roedor. Durante los prximos 30, 60 y 90 minutos se realizo el recojo y medicin de volumen de la orina de cada rata albina; as como la medicin de su grado de acidez o alcalinidad (pH) y de sus concentraciones de cloruro de sodio (NaCl). Con una cinta indicadora de pH se midi el grado de acidez o alcalinidad y mediante el test de fantus se midi la concentracin de cloruro de sodio, el cual consiste en aplicar a 10 gotas de orina, 1gota de cromato de potasio como

indicador y como agente titulante nitrato de plata, endonde las gotas gastadas en la titulacin representa el numero de gramos de NaCl por Litro de orina (el color debe virar de amarillo a bruo o blanco). III. RESULTADOS Cuadro N 01: Determinacin de la diuresis osmtica en ratas a concentracin hipotnica, isotnica e hipertnica, respectivamente, cada 30, 60 y 90 minutos en ratas albinas de laboratorio.

DIURESIS PARCIAL GRUPO DE ANIMALES 30 minutos Volumen pH (ml.) HIPOTONICA ISOTONICA HIPERTONICA g/L (ml.) [NaCl] 60 minutos Volumen pH g/L (ml.) [NaCl] 90 minutos Volumen pH g/L [NaCl] DIURESIS ACUMULATIVA

0.4 0 0

5 0 0

2 0 0

1.5 1.3 0.8

7 6 5.5

2 11 12

0.5 1.1 1

7 6 5.5

0 9 12

2.4 2.4 1.8

IV.

DISCUSION El pH de la orina suele fluctuar entre 4,6 y 8,0 con un promedio de 6,0. Normalmente el cuerpo de un mamfero elimina en la orina de 5 a 8 g/L de NaCl. La ingestin de una solucin con bajos contenidos de sales (Hipotnica), produce una mayor reabsorcin de solutos y una mayor eliminacin de agua, disminuyendo

la secrecin de ADH, lo cual da la formacin de orina diluida o hipotnica (Niveles muy bajos de NaCl) La ingestin de una solucin con altos contenidos de sales (Hipertnica), produce que la osmolaridad de la sangre aumente como resultado de la deshidratacin, lo que hace que se libera ms ADH y se produzca una mayor reabsorcin de agua y una mayor eliminacin de solutos . As la excrecin de la orina es ms concentrada, es decir, hipertnica. A los primeros 30 minutos, se observo que la rata N1, elimino 0.4 ml. de orina con un pH de 5 y una concentracin de NaCl de 2 g/L. La rata N2, no elimino orina, por lo que se obvio la media de pH y concentracin de NaCl. La rata N3, no elimino orina, por lo que tambin se obvio la media de pH y concentracin de NaCl. A los 60 minutos la rata N1 elimino aun ms orina de la que haba eliminado anteriormente (1.5 ml.), cuyo pH aumento a 7. La rata N2 elimino 1.3 ml. de orina con un pH de 6. La rata N3 elimino 0.8 ml. de orina con un pH de 5.5. Y a los 90 minutos La rata N1 elimino 0.5 ml. de orina con un pH de 7. La rata N2 elimino 1.1 ml. de orina con un pH de 6. La rata N3 elimino 1 ml. de orina con un pH de 5.5.

V.

CONCLUSIN Cada vez que se ingiere soluciones con bajos contenidos de sales como NaCl, se producir una diuresis hipotnica con un pH menor que 6.0 y una concentracin de NaCl menor que el rango (5 a 8 g/L). El volumen de orina ser menor. Y cada vez que se ingiere soluciones con altos contenidos de sales como NaCl, se producir una diuresis hipertnica con un pH mayor que 6.0 y una concentracin de NaCl mayor que el rango (5 a 8 g/L). El volumen de orina ser mayor.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFCAS

1. http://diccionario.medciclopedia.com/s/2008/osmolaridad-diuresis/.

2. Teresa Audesirk - Gerald Audesir, Biologa La Vida En La Tierra, 6 edicin, Editorial Pretince Hall, Mxico 2003, Pg. (776,777 y 782).

3. Tortora Derrickson, Principios de anatoma y Fisiologa, 11 edicin, Editorial Medica Panamericana, Mxico marzo del 2007, Pg. (1003 y 1004).

ANEXOS Imagen 01: Designacin de la solucin hipotnica, isotnica y e hipertnica a cada rata albina.

Imagen 03: Solucin hipotnica, isotnica y e hipertnica.

Imagen 05: Sistema completo de la determinacin de la diuresis osmtica.

Imagen 06: Determinacin del volumen de la orina.

Imagen 08: Determinacin de gramos de NaCl por litro de orina, mediante el test de fantus.