Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
Parte 1. Teoria Geral da Cromatografia Parte 2. Fase Estacionria: Uma viso geral dos suportes de HPLC Parte 3. A seletividade em funo da fase mvel Parte 4. Cuidado e uso da coluna
Fase mvel
Fase estacionria
O processo de separao
Analitos
O processo de separao
Fase mvel Polar/Aquoso
N
Benzo(a)pyrene
Ethyl sulfate
Interaes Hidrofbicas
Funil de separao
Fase orgnica
Benzo(a)pyrene Ethyl sulfate
Mecanismos de interao
Em qualquer separao, quase nunca possvel obter um modo nico de separao. Em fase reversa, as principais interaes so as seguintes: 1. Interaes Hidrofbicas 2. Interaes Polares 3. Interaes Inicas Mtodo de desenvolvimento = Mudar as condies das fases estacionria e mvel para otimizar estas interaes e alcanar uma separao especfica. Tapentadol
OH
Interaes Hidrofbicas
CH3
CH3
Hidrofbica
OH
CH3 3 Interaes fracas e progressivas entre uma fase estacionria no polar e as molculas
H C
CH3
Interaes hidrofbicas e van Der Waals A reteno ser prevista pelos valores de Log P
H 3C O Si H 3C HO O OH Si O HO Si
Si H C Si 3 CH3 C H 3O O Si O OH O
OH
OH Si O O HO
H 3C S i O Si
H 3C C HO 3 Si
Si
CH3 O Si
Si O OH
Si OH
O OH
O OH
10
Interaes Polares
CH3
CH3
Polar
H3C CH3 N H3C
CH3 3 Interaes entre grupos funcionais polares dos analitos e os silanis residuais e os grupos polares do mdia
H C
H3C
HO
H 3C O Si H 3C HO O OH Si O HO Si
Si H C Si 3 CH3 C H 3O O Si O OH O
OH
OH Si O O HO
H 3C S i O Si
H 3C C HO 3 Si
Si
CH3 O Si
Si O OH
Si OH
O OH
O OH
11
CH3
CH3 3 Interaes entre grupos funcionais ionizveis do analito e contracarga na fase estacionria.
H C
Troca inica
OH
CH3 H3C
+
H 3C O Si H 3C HO O OH Si O HO Si
Si H C Si 3 CH3 C H 3O O Si O OH O
H3C
HN
CH3
OH
OH Si O O HO
H 3C S i O Si
H 3C C HO 3 Si
Si
CH3 O Si
Si O OH
Si OH
O OH
O OH
12
Medidas cromatogrficas
13
Medidas cromatogrficas
14
Asym
O volume morto
Os analitos, que no interagem com o absorvente, eluem da coluna com um volume igual ao volume morto da coluna. O volume morto da coluna a quantidade da fase mvel na coluna entre as partculas e nos poros das partculas porosas.
15
O volume morto
Um composto que no interage com o adsorvente de forma alguma elui no que denominado o volume morto ou a frente do solvente. O tempo que leva os compostos no retidos o tempo do volume morto ou t0.
16
tR t0 t0 t0
17
18
19
Assimetria de Pico
O valor de assimetria (Asym) para um pico uma medida da divergncia do pico a partir de uma forma perfeita do pico de Gauss. Os picos com valores de assimetria maiores do que 1,0 so conhecidos como de alargamento, aqueles com valores de assimetria menores do que 1,0 so conhecidos como frente. Os picos assimtricos podem ser atribudos a um nmero de fatores: (1) Interaes fortes secundrias(ex: interaes inicas entre compostos bsicos e silanis residuais) (2) Sobrecarga de amostra (3) Incompatibilidade do solvente da amostra (4) Empacotamento ruim
20
CH3
CH3
H 3C
Troca de ons
OH
CH3 H 3C HN
+
H 3C O Si H 3C HO O OH Si O HO Si
Si H C Si 3 CH3 C H 3O O Si O OH O
H 3C
CH3
OH
OH Si O O HO
H 3C S i O Si
H 3C C HO 3 Si
Si
CH3 O Si
Si O OH
Si OH
O OH
O OH
21
22
): 264.2/191.1 Da ID: Protrip from Sample 28 (Halo C18-50x2, 2.7 um, MeOH:0.1% ...
Max. 1.1e5 cps. XIC of +MRM (8 pairs): 278.2/191.2 Da ID: Amitrip from Sample 7 (TCA-Kin-XB-C18, 50x2, 2.6, MeOH 50.... 1 5 5 4 1 4
6 2 3 7
3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 Time, min 4.4 4.6 4.8 5.0 5.2
8
5.4 5.6 5.8 6.0
3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 Time, min
2
4.4
3
4.6
7
4.8
8
5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0
): 264.2/191.1 Da ID: Protrip from Sample 28 (Halo C18-50x2, 2.7 um, MeOH:0.1% ... 4
Max. 1.1e5 cps. from Sample 13 (Kinetex XB-C18-50x2, 2.6 um, MeO... XIC of +MRM (8 pairs): 264.2/191.1 Da ID: Protrip
4
3.4
3.6
3.8
4.4
4.6
4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
3.4
3.6
3.8
4.4
4.6
4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
23
Fase mvel: A = 0,1% cido frmico em gua, B = 100% Metanol, Gradiente: 15 a 60% B em 5 min, retido por 1 min Fluxo: 400 L/min 1. Amoxapine 2. Imipramina 3. Desipramine 4. Protriptyline* 5. Amitriptyline 6. Nortriptyline* 7. Clomipramine 8. Norclomipramine
20
15
pKa 9,7
10
50
40
30
20
10
100
80
60
40
20
24
2000
1750
1500
1250
1000
750
500 1.905 2.145 1.8 1.9 2 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 min
250 1.745 0
25
Hydromorphone
Frente
0 .2 4
Morphine
1 .0 6
4 .0 e 4
Norhydrocodone 1 .7 7
1 .5 2 .0 2 .5 3 .0 3 .5 4 .0
1 .3 6
2 .0 e 4
1 .7 9 1 .7 1
0 .9 7 0 .5 1
0 .5 1 .0 0 .0 0 .5 1 .0 1 .5
1 .8 5 2 .1 5
2 .0 2 .5 3 .0
3 .2 13 .3 6
3 .5
3 .9 7
4 .0
26
Seletividade ( ()
A seletividade uma medida da diferena na interao de dois compostos com a fase estacionria. A seletividade uma funo tanto da fase estacionria quanto da fase mvel.
= k2/k1
27
Seletividade ( ()
A escolha da fase estacionria geralmente causar um efeito radical sobre OH a seletividade dos analitos. CHO CH
3
H H HO Estrone
m A U
H
H
H HO Estradiol
1 7 5
Coluna C18
1+2
1 5 0
1 2 5
1 0 0
= 1,0
7 5
5 0
2 5
0 1 2 3 4 5 m in
m A U
1 0 0
Coluna Phenyl
1 2
8 0
6 0
= 2,3
4 0
2 0
0 1 2 3 4 5 m in
28
Seletividade ( ()
Porm a fase mvel uma ferramenta muito poderosa para ajustar a seletividade.
Coluna: Gemini C6-phenyl de 5 m 150 x 4,6 mm Fase mvel: 20mM KH2PO4, pH 2,5; % orgnica como observado Fluxo: 1,0 mL/min Deteco: UV em 220nm 1. Saccharin 2. p-Hydroxybenzoic Acid 3. Sorbic Acid 4. Dehydroacetic Acid 5. Methylparaben
35% Metanol
20% Acetonitrila
29
w1/2
tR
Banda de amostra injetada
30
tR
As colunas que causam um importante alargamento do pico possuem poucos pratos tericos. As colunas que produzem picos muito estreitos (alargamento de pico baixo) tm um grande nmero de pratos tericos.
W1/2
W 31
*
e e
Verso simplificada:
H = A dp + B/ + C de2
Tamanho da partcula Tamanho da partcula Velocidade linear (Fluxo) Transferncia de massa
Eficincia Presso
33
3 m
w1/2
Core-Shell
w1/2
Sub-2 m
34
w1/2
10 cm
15 cm
25 cm
35
*Use colunas empacotadas com partculas menores para reduzir o tempo de analise enquanto mantm/melhora a eficincia !!
36
a b
37
Fluxo zero
w1/2
Fluxo muito baixo
6
tR
w1/2
Fluxo timo (ideal) ou maior
5
tR
38
CoreCore-Shell ~2 mL/min
30000
25000
N (Plates/column)
3 ~1,5 mL/min
20000
15000
10000
5 ~1 mL/min
5000
39
Resumo
As medies cromatogrficas que discutimos at agora iro desempenhar um papel significativo no desenvolvimento do mtodo. 1. Fator de reteno (k) (k) reteno de analito relativo ao tempo morto t0 Controlado pelos ajustes da % da fase mvel forte 2. Assimetria de pico forma do pico (de frente, alargamento, simtrico) Resultado das interaes secundrias (ex: inicas no modo RP) Sensvel a carga de amostras e efeitos do solvente da amostra 3. Seletividade () diferena no k de dois analitos Ser determinado pela composio da fase mvel e da natureza da fase estacionria 4. Eficincia (N) funo da largura do pico e reteno Determinada pelo tamanho da partcula, o comprimento da coluna e o fluxo O empacotamento da coluna afetar a eficincia (fornecedor)
40
41
O objetivo e a finalidade da cromatografia lquida separar os componentes individuais de uma amostra, de modo que eles possam ser identificados e/ou quantificados.
42
43
(1) O tempo de reteno para os dois picos ser uma funo do fator de reteno (k). (1) A seletividade () tambm afetar os valores do tempo de reteno para os dois picos. (1) A largura do pico ser uma funo da eficincia da coluna (N) e da assimetria (Asym (Asym). Asym).
N, Asym
44
Seletividade
importante observar que voc (o analista) tem controle sobre cada um desses fatores por meio da sua escolha da coluna HPLC e as condies de analises:
1. 2. 3.
45
Eficincia (N) tamanho da partcula/morfologia e comprimento da coluna Seletividade () Fase estacionria e fase mvel Fato de reteno (k) Fase estacionria e fase mvel
O efeito de k, e N na resoluo
Determinante mais importante da resoluo!!
46
Relative Resolution
1.5
0.5
49
50
51
52
Exerccio de Desenvolvimento de Mtodo 1: Otimizao para reduzir o tempo de anlise e aumentar a produtividade
53
Compostos:
Mupirocin
54
7 5
150
125
100
75
50
~16min 6
25
0 12 14 16 min
55
Etapa 1. Reduzir a % orgnica para aumentar k': Aumenta Rs Aumenta o tempo de corrida
56
Eficincia dp 5 m
Eficincia dp 3 m
57
Etapa 2. Troca para um acoluna de150x4,6mm 3 m: Reduz o tempo de anlise Mantm a eficincia
Core-Shell 2.6
30000
Luna 3u
25000 N (Plates/column)
Luna 5u
20000
15000
10000
5000
Etapa 3. Aumenta o fluxo para 1,5 mL/min: Otimizar a eficincia para partcula de 3 m
58
7
80
60
40
k = 9; Rs 3/4 = 1,6 2 3 4
10 12
20 min 6
20
0 0 2 4 6 8 14 16 18 min
3 m C8(2) 150 x 4,6mm 80/20 0,1M Acetato de Amnio pH 5,7/THF 1,5 mL/min
Etapa 4. Trocar para as particulas CoreCore-Shell 100x4,6 2,6 m : Reduz o tempo de anlise Aumenta a eficincia
60
7
250
200
150
1
100
50
0 0 1 2 3 6 7 8 9 min
CoreCore-Shell 2,6 m C8 100 x 4,6mm 80/20 0,1M Acetato de amnio pH 5,7:THF 1,5 mL/min (2ml/min se a presso permitir)
1 50
5 Rs 3/4 = 0,63 1 2 34
0 2 4 6 8 10
1 25
1 00
75
16 min 6
12 14 16 m in
50
25
200
150
Rs 3/4 = 2,3 1 2
0 1 2 3
100
8 min 3 4
4 5
50
6
6 7 8 9 min
62
Fim da parte I
63
Parte 1. Teoria Geral da Cromatografia Parte 2. Fase Estacionria: Uma viso geral dos suportes de HPLC Parte 3. A seletividade em funo da fase mvel Parte 4. Cuidado e uso da coluna
64
65
Alkaline
Tetraethoxysilane
Silica SolSol-Gel
66
67
68
69
Desvantagens: Menos fases estacionrias disponveis em comparao com a slica convencional (ex: ciano e amino)
70
71
72
73
Journal of Chromatography B, Volume 854, Edies 1-2, 1 de julho de 2007, Pginas 158-164
Partcula CoreCore-Shell
74
Partcula CoreCore-Shell
CoreCore-Shell de 2,6 m: 2,6 m dimetro total da partcula Presso ~50% menor do que sub-2 m totalmente poroso Eficincia = 260 300,000 P/m Eficincia da UPLC usando sistemas de HPLC convencionais*
CoreCore-Shell UPLC 1,7 m: 1,7 m dimetro total da partcula Eficincia = 280 320.000+ P/m Mdia de maior eficincia atualmente disponvel
75
Partcula CoreCore-Shell
Tradicional 3 m C18 150 x 4,6 mm CoreCore-Shell 2,6 m C18 150 x 4,6 mm
N = 166.502 p/m
N = 295.343 p/m
Agilent 1100
Agilent 1100
76
Partcula CoreCore-Shell
Totalmente porosa 1,7 m C18 50 x 2,1 mm 0,6 mL/min Eficincia = 272.080 p/m CoreCore-Shell 1,7 m C18 50 x 2,1 mm 0,6mL/min Eficincia = 318.680 p/m
77
Partcula CoreCore-Shell
Vantagens: 3x a eficincia das partculas 5 m totalmente porosas e 2x a eficincia das partculas 3m Presso compatvel com os sistemas convencionais de HPLC* Desvantagens: A presso ainda maior do que as partculas de 3 m Mais sensvel aos extravolumes do sistema Mais sensvel a sobrecarga em alguns casos
78
Partcula CoreCore-Shell
Perfil de impureza da droga:
MP: A = 40mM KH2PO4 pH 7,2, B = Acetonitrile Gradiente: 5-35%B em 30min Fluxo: 0,2 mL/min
634 Bar
10.50
11.00
11.50
12.00
12.50
13.00
14.50
15.00
15.50
16.00
16.50
17.00
372 Bar
0.04 AU 0.02 0.00 10.50 11.00 11.50 12.00 12.50 13.00 13.50 14.00 Minutes 14.50 15.00 15.50 16.00 16.50 17.00
79
Resumo
Partcula de Slica Totalmente Porosa: Uso geral Muitos tamanhos de partculas e fases estacionrias Pouca sensibilidade ao volume morto do sistema Partcula CoreCore-Shell Desempenho de UPLC usando sistemas convencionais de HPLC Deve ser a escolha para o desenvolvimento do mtodo no lugar dos suportes totalmente porosos Partcula Hbrida de Organoslica: Faixa de estabilidade de pH estendida Mesmas caractersticas de desempenho que a totalmente porosa tima para aplicaes de pH alto Tubo Monoltico: Baixa Presso; suscetibilidade entupimento reduzido Ideal para anlise de amostras "sujas" (ex: plasma) Eficincia de ~3um da slica esfrica totalmente porosa
80
81
Fases Ligadas
Uma vez que voc decidiu sobre o tipo de partcula de HPLC, a prxima deciso ser escolher uma fase estacionria apropriada. Esta escolha influenciar consideravelmente a seletividade final de sua separao.
Escolha da Fase Ligada: Ligada: Fases alkil Fases fenil Fases com grupos polares Escolha da tecnologia de partcula: partcula: Totalmente porosa CoreCore-Shell Tubo monoltico UPLC
82
O Processo de Ligao
HCl
Fuso
Hidro
F F F
84
Fases Alkyl
85
Interaes Hidrofbicas
O principal mecanismo de reteno em cromatografia de fase reversa baseado nas interaes hidrofbicas entre os analitos e a fase ligada. Portanto, as fases que apresentam uma natureza fortemente hidrofbica oferece um bom desempenho.
CH3
CH3
CH3
OH
H 3C
CH 3 CH 3 N H 3C CH 3
H 3C O Si H 3C HO O OH Si O HO Si
Si H C Si 3 CH3 O C H 3O Si O OH O
OH
OH Si O O HO
H 3C S i O Si
H 3C C HO 3 Si
Si
CH3 O Si
Si O OH
Si OH
O OH
O OH
86
Seletividade de Metileno
Ns usamos o teste de seletividade de metileno para determinar a capacidade da fase estacionria para separar molculas com base nas diferenas no seu carter hidrofbico. De modo geral, as fases ligadas muito hidrofbicas (por exemplo, C18) iro exibir nveis mais elevados de seletividade de metileno do que as fases menos hidrofbicas.
m AU 250
C18 Phenyl
87
10
m in
3 0 0
2 0 0
1 0 0
0 2 4 6 8 1 0 m in
Seletividade de Metileno
0.200
0.180
0.160
0.140
0.120
0.100
0.080
0.060
0.040
0.020
0.000
Luna C18(2)
Synergi Hydro-RP
Jupiter C18
Synergi Max-RP
Luna C8(2)
Luna C5
Luna Phe-Hex
Jupiter C4
Synergi Polar-RP
Prodigy Phenyl
Luna Cyano
Luna Amino
88
Seletividade de Metileno
Colunas: 5m C18 150x4,6mm 5m C8 150x4.6mm 5m Fenil 150x4.6mm 65:35 Acetonitrila: gua 1 mL/min Dois esterides: 1. Testosterona 2. Metiltestosterona
OH CH3 CH3 H O Testosterone H H
89
Seletividade de Metileno
Testosterone
MetMet-Testosterone
90
Fases Fenil
As fases Fenil so consideravelmente menos hidrofbicas do que as fases C18, porm oferecem uma seletividade potencial que pode ser bastante diferente devido a capacidade da fase a oferecer interaes pipi-pi com os analitos. Ela deve ser considerada como uma seletividade complementar as fases alkil convencionais (ex: C18).
Modos de interao
F F
91
Seletividade Fenil
Enquanto as fases C18 se sobressaem ao separar molculas que diferem principalmente na natureza hidrofbica, a fase fenil, muitas vezes, exibe uma melhor capacidade para separar molculas que diferem nos grupos funcionais polares. Esta seletividade polar melhorada provavelmente atribuvel interao com a nuvem de eltrons Pi do anel fenil.
92
Seletividade Fenil
Colunas: C18 Fenil 150 x 4,6 mm 75:25 Metanol: gua 1 mL/min
OH CH3 H
H O CH3
Componentes:
1. Estrone 2. Estradiol
H HO Estradiol
H
HO
Estrone
93
Seletividade Fenil
OH CH3 H H HO H
HO H H H O CH3
C18
Estradiol
mAU
Estrone
175
C18
150
1+2
125
100
75
50
25
0 1 2 3 4 5 m in
Phenyl
mAU
100
Phenyl
1 2
80
60
40
20
0 1 2 3 4 5 m in
94
95
0 2 4 6 8 10 12
0
Day 2
10
12
Day 6
Colapso da fase!
0 2 4 6 8 10 12 14 min
0 2 4 6 8 10 12 14
96
1.00 e5 9.50 e4 9.00 e4 8.50 e4 8.00 e4 7.50 e4 7.00 e4 6.50 e4 6.00 e4 5.50 e4 5.00 e4 4.50 e4 4.00 e4 3.50 e4 3.00 e4 2.50 e4 2.00 e4 1.50 e4 1.00 e4 500 0.00 0.00 0 .5 49 1.0 96 1 .5 144 2.0 19 1 2.5 239 3.0 2 87 3.5 334 T im e, m in 4.0 3 82 4.5 429 5 .0 477 5.5 525 6 .0 572 6.5 62 0
ETS ETG
1. 2.
1.10 e4
ETG
I n t e n s it y ,c p s
1.00 e4
ETG
900 0.00
ETS
800 0.00
700 0.00
600 0.00
500 0.00
400 0.00
300 0.00
ETS
200 0.00
100 0.00
0.00 0 .5 49 1.0 96 1.5 1 44 2.0 191 2.5 2 39 3.0 287 3.5 3 34 T im e, m in 4.0 382 4.5 4 29 5.0 477 5.5 5 25 6.0 572 6.5 6 20
97
C18 150x4,6mm
150
125
100
75
50
25
0.5
1.5
2.5
m in
120
100
80
60
40
20
98
Oxymetazoline
3 .3 3 6 3 .9 0 2
4 3 2 1 0 -1 -2 -3 2
3 .2 3 3
C18
4 3 2
Fenil
3 .6 8 4
6 5 4
Rs 1,45
1 0 -1 -2 -3
Rs 2,1
3 .5 6 3
mAU
mAU
mAU
3 2 1 0 -1
Rs 3,2
2.5
3.5
4.5
min
2.5
3.5
4.5
min
2.5
3.5
4.5
min
99
Coluna monoltica
Resoluo insuficiente?
101
102
CH3 CH3 H O H
OH
Testosterone, C19H28O2
Massa monoisotpica: 288,21 Da
Epitestosterone, C19H28O2
Massa monoisotpica: 288,21 Da
103
Seleo de Partcula
A amostra requer + de 97% de fase mvel aquosa? No A amostra requer uma fase mvel de pH bsico? No A sua matriz extremamente suja? No
Partculas CoreCore-Shell
100x2,1mm; C18, XBXB-C18, C8
104
CoreCore-Shell XBXB-C18
CoreCore-Shell C8
105
Comprimento e tamanho da partcula Fluxo Escolha da fase estacionria Otimizao da fase mvel
Resoluo insuficiente?
106
CoreCore-Shell PFP
107
108
Mtodo Final
CoreCore-Shell XBXB-C18 (Primrio)
Colunas: CoreCore-Shell 2,6 m XBXB-C18 100x2,1mm Partcula de slica hbrida 3 m C18 100x2,1mm FM A: FM B: Fluxo Etapa 0 1 2 3 0,1%FA, 1mM Formato de amnio em gua 0,1%FA, 1mM Formato de amnio em ACN 0,4 mL/min Tempo (min) %B 0 30 1 75 3 75 3.1 30
109
Fim da Parte II
110
Corrida de 50 min
Corrida de 20 min
Bondapak e Waters so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
112
~15 h ~950 mL
~6 h ~370 mL
Aumento da produtividade e reduo do consumo de solvente por um fator de quase 2,5 vezes
113
As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Corrida de 20 min
Corrida de 3 min
114
Plano
I. O desenvolvimento da Tecnologia CoreCore -Shell II. A Vantagem Kinetex III. Kinetex para HPLC IV. Kinetex para UHPLC V. Fases estacionrias e processo de qualidade VI. Dicas para Desenvolvimento de Mtodo
1970
1980
1990
2000
2010
Slica Irregular
Kinetex CoreCore-Shell
tR
As colunas que causam um importante alargamento do pico possuem poucos pratos tericos. As colunas que produzem picos muito estreitos (alargamento de pico baixo) tm um grande nmero de pratos tericos.
W1/2
W 119
A Vantagem Core-Shell
As colunas que contm partculas Core Core-Shell oferecero eficincia (N) significativamente maior do que as colunas que contm partculas totalmente porosas do mesmo dimetro.*
w1/2 tR
Banda de amostra injetada
* Gritti et al., Dirio de cromatografia A, 1.217 (2010) 1.589
A Vantagem Core-Shell
As colunas que contm partculas Core Core-Shell oferecero eficincia (N) significativamente maior do que as colunas que contm partculas totalmente porosas do mesmo dimetro.*
w1/2
tR
A Vantagem Core-Shell
As colunas que contm partculas Core Core-Shell oferecero eficincia (N) significativamente maior do que as colunas que contm partculas totalmente porosas do mesmo dimetro.*
A Vantagem Core-Shell
As colunas que contm partculas Core Core-Shell oferecero eficincia (N) significativamente maior do que as colunas que contm partculas totalmente porosas do mesmo dimetro.*
Fully Porous
Core-Shell
Efficiency( p/m)
A Vantagem Core-Shell
A equao de Van Deemter para a altura de prato torico (H):
Incorpora as propriedades fsicas, cinticas e termodinmicas das separaes Descreve as relaes entre a altura de prato e a velocidade da fase mvel Descreve as 3 origens de disperso do pico ou da amplitude de banda de uma coluna
A Vantagem Core-Shell
H = A dp + B/u + C de2 u
Difuso de Eddy Efeito multimulticaminhos
w1/2 tR
A Vantagem Core-Shell
H = A dp + B/u + C de2 u
Difuso longitudinal
w1/2
Very low flow
6
tR
A Vantagem Core-Shell
H = A dp + B/ + C de2
Transferncia de massa (cintica)
Disperso devido resistncia transferncia de massa
a b
127
A Vantagem Core-Shell
H = A dp + B/ + C de2
Transferncia de massa (cintica)
Disperso devido resistncia transferncia de massa
a b
A Vantagem Core-Shell
H = A dp + B/ + C de2
15
15
0 0 5 10 15 20
0 0 5 10 15 20
Reduced velocity
Reduced velocity
A Famlia Kinetex
Partcula Kinetex Compatibilidade do sistema Eficincia tpica (p/m) Totalmente Porosas Eficincia (p/m)
Kinetex 2.6 m C18 150x4,6mm Mesma Seletividade Eficincia Maior Presso Maior
13 min
2.5
DAD1 A, Sig=235,4 Ref=360,100 (JL042712\ASPIRIN000003.D) 2 . 0 7 5
Shimadzu LCLC-20A Kinetex 5 m C18.250 x 4,6 mm Tempo de corrida = 13 min Rs 1/2 = 3,98
5.0
7.5
10.0
12.5
6 .2 8 1
7 min
Agilent 1100 Kinetex 2.6 m C18 150 x 4,6 mm Tempo de corrida = 7 min Rs 1/2 = 4,13
1 .5 7 2
1 .7 1 9
2 .6 9 0
2,5 min
0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.25 2.276 m in
Agilent 1290 Kinetex 1,7 m C18 50 x 3,0 mm Tempo de corrida = 2,5 min Rs 1/2 = 2,95
0.25
0.293
0.5
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. Shimadzu uma marca registrada da Shimadzu Corporation. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies ou Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
A partcula 5 m mais eficiente disponvel:
Eficincia no Agilent 1200SL Eficincia no Agilent
200000 180000 160000
1200SL
Eficincia (p/m)
Placas por metro
F-P 5 W
F-P 5 Z
F-P 3 X
F-P 3 L
F-P 3 Z
Kinetex 5
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
A partcula 5 m mais eficiente disponvel:
Comparison of Efficiency Shimadzu Eficincia noon Shimadzu LC-LC-20A 20A LC
160000 140000
40000 20000
C 8m 8 8 1
8 1
C 3
mC
0
5 t e
tr
r ao
3 .5
i3
x e
in
rF e
c k
n 5
id r
Su
Lu
XB
s el
ir
Todas as marcas registradas pertencem a seus respectivos proprietrios. Phenomenex no afiliada a estas empresas. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
UC
LO E S
m C
Kinetex de 5 m
Eficincia 3 m com presso de 5 m :
Comparao Presso Comparison ofde Pressure
140 120
100
80
60
40
5C
(2
20
)8
3 8
C1 8
C 1
ir e m C
5 O m
m 3
rC o 18
m X
S LI L E
te x
il
ua n
in
ac k P
Bi dr
Todas as marcas registradas pertencem a seus respectivos proprietrios. Phenomenex no afiliada a estas empresas. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
137
M C
am
5 m
C 3
82 )(
.C 5
Kinetex de 5 m
Resoluo e sensibilidade melhoradas versus 5 m totalmente porosa:
VWD1 A, Wavelength=295 nm (JL052412\JEFF 2012-05-25 08-14-13\PAR000001.D) 12.899 m AU VWD1 A, Wavelength=295 nm (JL052412\JEFF 2012-05-25 08-14-13\PAR000001.D) 12.899
Rs = 0,98
12.282
60
5.942
40
20
12.282
18.232
11.728
12.708
13.266
7.318
15
17.5
19.142
20
min
11
12
13
160
140
120
100
Rs = 2,23
10.744 11.283
80
5.276
60
40 17.131
9.180
12.274
6.538
18.054
20
11.283 11.619
10.744
1 0
1 0 .5
1 1
1 1 .5
11.619
11.918
m AU
11.918
1 2
1 2 .5
13.266
bc
12.708
11.728
1 3
m in
Agilent e ZORBAX so marcas registradas da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Resoluo e sensibilidade melhoradas versus 5 m totalmente porosa:
Agilent ZORBAX 5 m SBSB-C18 150 x 4,6 mm Presso = 120 bar Rs = 1,29 *HPLC otimizado (Agilent 1100)
10
12
14
m in
aumento de 22% em Rs
10
12
14
m in
Agilent e ZORBAX so marcas registradas da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Resoluo e sensibilidade melhoradas versus 5 m totalmente porosa:
VW D1 A, W avelength=280 nm (JL051712\JEFF 2012-05-17 07-37-30\OMEP000006.D) m AU 8
Waters Symmetry 5 m C18 250 x 4,6 mm Presso = 190 bar Rs = 0,88 *HPLC no otimizado (Agilent 1100)
10
15
20
25
30
35
m in
Kinetex 5 m XBXB-C18 250 x 4.6 mm Presso = 188 Bar Rs = 1,98 125% de aumento na resoluo !
10
15
20
25
30
35
m in
Waters e Symmetry so marcas registradas da Waters Corporation. Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies ou Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Melhor desempenho versus Slica do tipo A
V W D 1 A , W a v e l e n g th = 2 8 0 n m (Y :\1 \D A T A \J L 0 5 1 7 1 2 \ JE F F 2 0 1 2 -0 5 -1 7 1 4 - 3 0 - 4 5 \O M E P 0 0 0 0 0 2 .D )
m AU
28.130
m AU
2 00
1 00
50 30.665 33.951
14.008 14.290
17.630
0 0 0
5
19.356
31.788
12.810
2.169
9.186
10
10
1 5 15
20
20
2 5 25
30
30
3 5 35
m in
m in
V W D 1 A , W a v e l e n g th = 2 8 0 n m (Y :\1 \D A T A \J L 0 5 1 7 1 2 \ JE F F 2 0 1 2 -0 5 -1 7 0 7 - 3 7 - 3 0 \O M E P 0 0 0 0 0 4 .D )
8 2 00
Slica do tipo A
4 2.291 13.347 1 00 8.348 17.061 32.875 A re a2 :1
.9 5 1 8
6 1 50
0 0 5 10 15 20 25 30 35 m in
Hypersil uma marca registrada da Thermo Hypersil Keystone, Inc. Phenomenex no afiliada Thermo Hypersil Keystone. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
28.024 er a1 :1 1 36 5
m AU
Kinetex de 5 m
Desempenho de 3 m na metade da presso:
VWD1 A, Wavelength=210 nm (JL051612\JEFF 2012-05-16 09-44-20\LCOL000001.D) m AU 250 200
150
100
50
0 6 8 10 12 14 m in
250
200
Kinetex 5 m C18 150 x 4,6 mm *HPLC otimizado (Agilent 1100) Rs = 1,57 Presso = 120 Bar
150
100
~ 1/2 Presso
6 8 10 12 14 m in
50
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Desempenho de 3 m na metade da presso:
VWD1 A, Wavelength=278 nm (JL042712\JEFF 2012-04-27 06-59-24\VERAP000009.D) m AU 3 5 .2 7 2 25 30 35 3 5 .7 5 2 0 5 10 15 20 1 7 .8 3 4 60 50
40
30
20
10
0 40
VWD1 A, Wavelength=278 nm (JL042712\JEFF 2012-04-27 06-59-24\VERAP000001.D) 13.635 34.600 m AU 70 16.094 40.129 35.106 0 5 10 15 20 25 30 35 m in
60
50
40
30
20
10
*HPLC no otimizado
(Agilent
1100)
Xbridge uma marca comercial e Waters uma marca registrada da Waters Corporation. Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies ou Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Melhor desempenho e tempo de vida para uso no LC/MS:
Aminas heterocclicas de salmo por LC/MS/MS
XIC of +MRM (13 pairs): 183.100/183.100 Da ID: Harman from Sample 19 (Sunfire 3.5um C18 50x2_amines) of DataSET1.wiff (Turbo ... Max. 2.6e6 cps. XIC of +MRM (13 pairs): 183.100/183.100 Da ID: Harman from Sample 16 (Kinetex 5u C18 C18 50x2_amines) of DataSET1.wiff (Turbo... Max. 2.7e6 cps.
3.35
2.98
In ten sity, cp s
1.4e6 1.2e6 1.0e6 8.0e5 6.0e5 4.0e5 2.0e5 0.0 0.5 93 1.0 185 1.5 278 2.0 370 2.5 462 3.0 554 3.5 647 Time, min 4.0 739 4.5 831 5.0 923 5.5 1015 6.0 1108 6.5 1200
Max. 1.3e6 cps.
1.4e6 1.2e6 1.0e6 8.0e5 6.0e5 4.0e5 2.0e5 0.0 0.5 93 1.0 185 1.5 278 2.0 370 2.5 462 3.0 554 Time, min 3.5 647 4.0 739 4.5 831 5.0 923 5.5 1015 6.0 1108
XIC of +MRM (13 pairs): 228.100/228.100 Da ID: 7,8-/4,8-DiMeIQx from Sample 19 (Sunfire 3.5um C18 50x2_amines) of DataSET1.wiff ...
XIC of +MRM (13 pairs): 228.100/228.100 Da ID: 7,8-/4,8-DiMeIQx from Sample 16 (Kinetex 5u C18 C18 50x2_amines) of DataSET1.wif...
2.55
1.7e6 1.6e6 1.5e6
2.25
1.4e6 1.3e6
2.37
1.2e6 1.1e6 8.0e5 In ten sity, cp s 7.0e5 6.0e5 In ten sity, cp s 1.0e6 9.0e5 8.0e5 7.0e5 6.0e5 4.0e5 3.0e5 2.0e5 1.0e5 0.0 0.5 93 1.0 185 1.5 278 2.0 370 2.5 462 3.0 554 3.5 647 Time, min 4.0 739 4.5 831 5.0 923 5.5 1015 6.0 1108 6.5 1200 5.0e5
2.69
5.0e5
4,84,8- e 7,87,8-DiMeDiMe-IQx
6.18
4.0e5
6.42
6.54
3.0e5 2.0e5 1.0e5 0.0 0.5 93 1.0 185 1.5 278 2.0 370 2.5 462 3.0 554 Time, min 3.5 647 4.0 739 4.5 831 5.0 923 5.5 1015 6.0 1108
SunFire uma marca comercial e Waters uma marca registrada da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Melhor desempenho e tempo de vida para uso no LC/MS:
Canabinides sintticos por LC/MS/MS
XIC of +MRM (10 pairs): 342.200/155.100 Da ID: JWH-018 from Sample 35 (XSelect 2.5u HSS C18_50x2_20-100% ACN in 4min) of Dat... Max. 4.9e4 cps.
XIC of +MRM (10 pairs): 342.200/155.100 Da ID: JWH-018 from Sample 32 (KNX 5u C18_50x2_20-100% ACN in 4min) of DataSET1.wif... Max. 6.0e4 cps.
1.00e5
6.00e4
In ten sity, cp s
1.5e4 1.0e4 5000.0 0.0 0.5 56 1.0 110 1.5 165 2.0 219 2.5 274 Time, min 3.0 328 3.5 383 4.0 437 4.5 492
Max. 6.9e4 cps.
2.00e4 1.50e4 1.00e4 5000.00 0.00 0.5 56 1.0 110 1.5 165 2.0 219 2.5 274 Time, min 3.0 328 3.5 383 4.0 437 4.5 483 5.0
XIC of +MRM (10 pairs): 344.200/155.200 Da ID: JWH-073 - 3HB from Sample 35 (XSelect 2.5u HSS C18_50x2_20-100% ACN in 4min) ...
XIC of +MRM (10 pairs): 344.200/155.200 Da ID: JWH-073 - 3HB from Sample 32 (KNX 5u C18_50x2_20-100% ACN in 4min) of DataSE...
7.0e4 6.5e4
2.99
2.73
2.94
6.0e4 5.5e4 5.0e4 4.5e4 4.0e4 3.5e4 3.0e4 2.5e4 2.0e4 1.5e4 1.0e4
2.85
4.0e4 3.5e4 3.0e4 2.5e4 2.0e4 1.5e4 1.0e4 5000.0 0.0 0.5 56 1.0 110 1.5 165 2.0 219 2.5 274 Time, min 3.0 328 3.5 383 4.0 437 4.5 492
5000.0 0.0 0.5 56 1.0 110 1.5 165 2.0 219 2.5 274 Time, min 3.0 328 3.5 383 4.0 437 4.5 445 5.0
XSelect uma marca comercial e Waters uma marca registrada da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
A primeira e nica partcula CoreCore-Shell disponvel para PREP LC:
Analtica Tamanho da coluna: 50 x 4,6 mm Mdia: Kinetex 5 m C18 2,4 mg na coluna
VWD1 A, Wavelength=254 nm (Y:\1\DATA\JL081511\JEFF 2012-08-16 06-54-27\PTM000009.D) 2 .0 6 7 2 .6 2 9 mAU 3500
Are a : 94 85 0.3
3000
2500
2000
1500
1000
A2 r e a. 4 2 6 : 12 96 9. 2
1000
500 0 .6 3 6 1 .5 0 0
4 .7 1 8
0 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 2.00 2.25 2.50 2.75 3.00 3.25 3.50 3.75 4.00 4.25 4.50 4.75
Kinetex de 5 m
Carregamento excelente sob condies preparativas:
Carregamento de Amitriptilina
1.2
KNX 5 C18
1
Amplitude de pico
0.8
Xbridge uma marca comercial e Waters uma marca registrada da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Amplitude de pico
0.6
0.4
0.2
0 1 10 100 1000
Kinetex de 2,6 m
Eficincia de UHPLC na presso da HPLC:
BEH Technology uma marca comercial e ACQUITY uma marca registrada da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 2,6 m
Desempenho de UHPLC em um sistema de HPLC convencional:
VWD1 A, Wavelength=210 nm (JL051112\JEFF 2012-05-11 15-45-18\ZORB180000002.D) m AU
60
50
40
30
20
10
0 7 8 9 10 11 12 13 14 m in
500
400
300
200
100
0 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 m in
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 2,6 m
Desempenho de UHPLC em um sistema de HPLC convencional:
V W D 1 A , W a v e l e n g th = 2 1 0 n m ( J L 0 5 1 1 1 2 \ J E F F 2 0 1 2 - 0 5 -1 1 1 6 - 2 7 - 3 5 \K N X 5 0 0 0 0 0 2 .D ) m AU 800
600
400
200
0 7 8 9 10 11 12 m in
V W D 1 A , W a v e l e n g th = 2 1 0 n m ( J L 0 5 1 1 1 2 \J E F F 2 0 1 2 - 0 5 - 1 1 1 6 -3 0 -1 7 \Z O R B 1 8 0 0 0 0 0 0 2 .D ) m AU 70
60
50
40
30
20
10
0 7 8 9 10 11 12 13 m in
Agilent e ZORBAX so marcas registradas da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 2,6 m
Melhora a produtividade e a resoluo
Coluna: C8 250 x 4,6mm 5 m
Fase mvel: 70 / 30 0,1M Acetato de Amnio / THF Fluxo: 1,0 mL/min Compostos: 1-6 = Impurezas A - G 7. Mupirocin
Mupirocin
Kinetex de 2,6 m
Melhora a produtividade e a resoluo
DAD1 A, Sig=240,10 Ref=off (Z:\1\DATA\MT050211\DJGSK 2011-05-02 15-34-44\MUPIROCIN000001.D) mAU
175
150
125
100
75
50
Rs 3 e 4 = 0,63 2 34 6
~16 min
25
0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 min
5 m C8 totalmente poroso 250 x 4,6 mm 70/30 0.1 M Acetato de amnio pH 5,7 / THF 1,0 mL/min
Kinetex de 2,6 m
Melhora a produtividade e a resoluo
VWD1 A, Wavelength=240 nm (JL050211\MUPI0006.D) mAU
250
200
150
1
100
Rs 3 e 4 = 2,3 2 3 4
4 5
8 min 6
50
0 0 1 2 3 6 7 8 9 min
Coluna: Kinetex 2,6 m C8 100 x 4,6 mm Fase mvel: 80/20 0,1 M Acetato de amnio pH 5,7 / THF Fluxo: 1,5 mL/min *HPLC otimizado (Agilent 1100)
Rs aumentado de 0,6 para 2,3 Tempo de anlise diminui de 20 min para 8 min
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
154
Otimizao do Sistema
300000
Hypersil GOLD 5 m ODS Luna 3 m C18(2) Kinetex 2.6 m C18
18.4%
3.9%
15.6%
250000
33.8%
200000
150000
~ Aumento de 50%!
100000 50000
Unoptimized
Acquisition Rate
Tubing
Flow Cell
Hypersi GOLDl uma marca registrada da Thermo Hypersil Keystone. Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies ou Thermo Hypersil Keystone. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Potencial para a eficincia de UHPLC em sistemas de HPLC convencionais Eficincia tpica = 280.000 pratos/m Aumenta a resoluo e reduz o tempo de anlise Presso operacional tpica de 200200-350 Bar
Todas as marcas registradas pertencem a seus respectivos proprietrios. Phenomenex no e afiliada a qualquer uma destas empresas.
Kinetex de 2,6 m
0.060
0.040
A U
0.030
Waters ACQUITY 1,7 m BEH C18 50 x 2,1 mm 0,6 mL/min Capacidade de Pico = 343 Presso = 565 Bar
0.020
0.010
0.000
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1 .3 4 0
1.40
1.60
1 .6 7 7
1.80
1 .7 8 9
4.00
4.20
4.40
4.60
4.80
5.00
1 .0 5 9
0.060
0.050
0.040
A U
0.030
1 .8 9 7
0 .6 6 3
0.010
1 .1 4 4
0.000
-0.010 0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1 .2 1 9
1.40
1 .3 9 3
1.60
1.80
2.00
2.20
2.80
3.00
3.20
3.40
3 .5 0 2
3.60
0.020
1 .4 9 4
2 .0 6 7
2 .9 1 0
Kinetex de 2,6 m C18 50 x 2,1 mm 0,6 mL/min Capacidade de Pico = 360 Presso = 320 Bar
0 .1 7 8
1 .2 8 1
1 .0 0 8
2 .2 5 6
3.80
4.00
4.20
4.40
4.60
4.80
5.00
BEH Technology uma marca comercial e ACQUITY e Waters so macas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 1,7 m
Kinetex de 1,7 m
Aumento da eficincia de 20% versus 1,7 m totalmente porosa:
DAD1 A, Sig=220,8 Ref=360,100 (JL071811\KINP6000014.D) mAU
100
80
60
40
Rs = 1,19
20
0.5
1.5
2.5
3.5
m in
DAD1 A, Sig=220,8 Ref=360,100 (JL071811\KINP6000010.D) mAU 140 120 100 80 60 40 20 0 -20 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 m in
Rs = 2,15
CSH uma marca comercial e ACQUITY e Waters so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 1,7 m
Melhor resoluo versus Waters ACQUITY BEH 1,7 m: m:
Gritti and Guiochon, Chemical Engineering Science, Volume 65, Volume 23, 1 de dezembro de 2010, pginas 6310-6319
BEH Technology uma marca comercial e ACQUITY e Waters so macas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
ACQUITY e UPLC so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation.
Kinetex de 1,3 m
Kinetex 1,3 m versus Waters ACQUITY 1,7 m BEH
(Agilent 1290)
VWD1 A, Wavelength=214 nm (JL072512\JEFF 2012-07-25 15-19-08\BSA0000001.D) m AU 60
N o 1 r m .
50
40
Kinetex de 1,3 m
30
20
10
4 0
0
BEH 1,7 m
-10
-20
m in
3 0
50
40
30
20
10
1 0
-10
-20
0
0 1 2 3 4 5 m in
3 .0 5
3 .1
3 .1 5
3 .2
3 .2 5
3 .3
m in 3 .3 5
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. BEH Technology uma marca comercial e ACQUITY e Waters so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies ou Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 1,3 m
Kinetex de 1,3 m versus Waters ACQUITY 1.7 m BEH
(Agilent 1200SL)
DAD1 A, Sig=210,10 Ref=360,16 (JL072512\JEFF 2012-07-25 14-41-04\GING000002.D) m AU 175 150 125 100 75 50 25 0 -25 3 3.5 4 DAD1 A, Sig=210,10 Ref=360,16 (JL072512\JEFF 2012-07-25 15-08-45\GING000003.D) m AU 175 150 125 100 75 50 25 0 -25 3 3.5 4 4.5 5 5.5 m in 4.5 5 5.5 m in
Rs = 3,2
Rs = 4,3
Agilent uma marca registrada da Agilent Technologies, Inc. BEH Technology uma marca comercial e ACQUITY e Waters so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies ou Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Kinetex de 5 m
Presso: 100100-250 Bar 170.000 p/m
Kinetex de 2,6 m
270.000 p/m
Shimadzu LCLC-20A
Waters Alliance
Agilent 1100
Agilent 1290
Todas as marcas registradas pertencem a seus respectivos proprietrios. Phenomenex no e afiliada a qualquer uma destas empresas.
C18
XB-C18
C8 2013
Phe-Hex
PFP
HILIC
Controle de Qualidade
Todos os suportes e as colunas empacotadas Kinetex so sujeitos as testes rigorosos e abrangentes para garantir o mais alto nvel de desempenho e reprodutibilidade:
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Distribuio do tamanho da partcula Distribuio do tamanho do poro e rea de superfcie Carga de carbono e rea de cobertura SRM870 (atividade de silanol silanol, , reteno hidrofbica e contaminao de metal) Drogas bsicas Testes especficos da fase (ex: ismeros posicionais) PTM (qualidade da embalagem) Teste de vazamento Teste de queda (transporte)
Controle de Qualidade
Sua opinio muito importante para ns! Por favor, reserve alguns minutos para preencher nosso questionrio
1. Reteno de Core-Shell
a b
176
1. Reteno de Core-Shell
Restek Ultra 5 m C18 150 x 4,6 mm
Maior Sensibilidade
Kinetex 5 m C18 150 x 4,6 mm Menor tempo de anlise Larguras de pico mais estreitas
1. Reteno de Core-Shell
Isocrtico 65:35 Acetonitrila: gua
VW D1 A, W avelength=254 nm (JL071112\JEFF 2012-07-11 09-41-44\HYP000004.D) m AU 6 . 4 2 8
Kinetex 5 m C18
tR = 6,5 min
400
300
200
100 2 . 1 2 1
3 . 3 5 7
5 . 4 3 8
10
m in
160
200 140
120
6.184
tR = 7,2 min
1 0 .0 8 5
7.219
tR = 10,1 min
100
100
80
60
2 .0 3 8
40
20
00
0 0
22
44
66
88
8 .2 3 4
1010
m in 12
Symmetry e Waters so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
1. Reteno de Core-Shell
Gradiente 10% 85% AcCN em 20min
VWD1 A, Wavelength=254 nm (JL0712112\JEFF 2012-07-12 12-42-04\HYP000001.D) m AU
Kinetex 5 m C18
80
60
11.841
tR = 17,8 min
17.883
0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 m in
6.443
20
1.651
80
60 13.552
10.398 10.572
40 5.051
tR = 19,9 min
19.871
20
0 0 12.5 15 17.5 20
Symmetry e Waters so marcas registradas da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
1. Reteno de Core-Shell
Gradiente 10% 50% B 2,5 min; Cadenza 3 m C18 50x2,1mm
Gradiente10% 5% 10% 50% 50% B B 2,5 2,5 min; min; ;; Kinetex Kinetex 5u 5 C18 m 50x2,1mm 50x2,1mm min Kinetex Gradiente 50% B 2,5 min; Kinetex 5 m C18 C18 50x2,1mm min Kinetex
Hydromorphone
Frente
0 .2 4
Morphine
1 .0 6
4 .0 e 4
Norhydrocodone 1 .7 7
1 .5 2 .0 2 .5 3 .0 3 .5 4 .0
1 .3 6
2 .0 e 4
1 .7 9 1 .7 1
0 .9 7 0 .5 1
0 .5 1 .0 0 .0 0 .5 1 .0 1 .5
1 .8 5 2 .1 5
2 .0 2 .5 3 .0
3 .2 13 .3 6
3 .5
3 .9 7
4 .0
Agilent e ZORBAX so marcas registradas da Agilent Technologies, Inc. Phenomenex no afiliada Agilent Technologies. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
Muito forte !
Adequao do sistema
Solvente = 50% Metanol
4. Carregamento de Amostra
XBridge uma marca comercial da Waters Corporation. Phenomenex no afiliada Waters Corporation. As comparaes das separaes podem no ser representativas para todas as separaes.
186
4. Carregamento de Amostra
Reduz a carga de amostra para bases que apresentam alargamentos:
DAD1 C, Sig=254,4 Ref=300,100 (DJ040611\DJGSK 2011-04-06 12-28-48\GSK000010.D) m AU 1 4 .1 5 7 100 80
pKa 9,7
60
40
20
50
40
30
20
10
30
25
20
15
10
Protege contra contaminantes qumicos e micropartculas. No altera a cromatografia Fcil de usar Compatvel com praticamente todas as colunas de UHPLC, Core-Shell e sub-2 m de 2,0 a 4,6 mm ID Presso limite de 20.000 psi (1.378 bar)
Aonde voc prefere reter as micro partculas, as partculas do sistema e os contaminantes bacterianos?
Fim Perguntas?