Anaerobios A bi Gnero Clostridium

Dr. Alfredo Guilln Oneeglio Profesor Asociado Facultad de Tecnologa Mdica

Cl t idi Clostridium

Bacilos B il G Gram positivos iti Anaerobios Forman esporas Producen toxinas muy potentes Reservorio

Medio ambiente (especialmente suelo) I t ti del Intestino d l hombre h b y animales i l

C d clnicos Cuadros l i

Clostridium tetani

Ttanos, exotoxina producida durante el crecimiento en tejidos Botulismo, exotoxina producida en Botulismo alimentos contaminados Infecciones tisulares secundarias a heridas o trauma Intoxicacin alimentaria y enfermedad gastrointestinal

Clostridium botulinum

Clostridios histotxicos

Clostridios enterotoxignicos

Clostridium tetani

Cl t idi tetani Clostridium t t i

Se encuentra S t frecuentemente f t t en el l suelo. l Contaminacin de las heridas produce colonizacin y tetanos La exotoxina ( (tetanoespasmina) p ) se une a los receptores de ganglisido de las neuronas inhibitorias en el SNC

El neurotransmisor es comnmente Glicina La exotoxina impide p la transmisin del impulso p nervioso y produce parlisis esptica Se producen continuas contracciones musculares severas y espasmos que pueden ser fatales

Cl t idi tetani Clostridium t t i

Bacteria no invasiva con infeccin local Tasa de letalidad 40-80% P i d d Periodo de i incubacin: b i 7 7-10 10 d das Tratamiento

Antitoxina tetnica Toxoide tetnico Vacunacin en las madres (transmisin materna pasiva de anticuerpos) Vacunacin en nios DPT 3 dosis Vacunacin en adultos

Prevencin

C tetani C.

Tetanos neonatal neonatal. Rigidez y espasmos con alta mortalidad, Infeccin en el cordn umbilical, CDC

Ttanos en el adulto Los msculos en espalda y las piernas estn muy tensos. Los espasmos musculares pueder romper los huesos de la persona, CDC

Di ti de Diagnstico d laboratorio l b t i

C. C botulinum

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SEM left x15,400, right x12,800 Dr Dennis Kunkel, University of Hawaii.

Clostridium botulinum
Morfologa

Bacilo recto o ligeramente curvo, Gram positivo con extremos redondeados T Tamao d de 3 3.4 4 - 8.6 8 6 por 0 0.5 5 - 1.3 1 3 um, puede d variar i de acuerdo al tipo serolgico y al medio de cultivo utilizado Mvil con flagelos peritricos Esporas termoresistentes, ovales, subterminales que tienden a deformar al bacilo; se producen mejor en medios alcalinos con glucosa entre 20 a 25 C T Temperatura t ptima ti de d crecimiento: i i t 35 C Algunas cepas pueden crecer y producir toxina entre 1 a 5C

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C d clnico Cuadro l i y patogenia t i

Intoxicacin alimentaria rara pero fatal causada por una exotoxina: toxina botulnica. La toxina se une a receptores en nervios perifricos que usan acetilcolina como neurotransmisor. neurotransmisor La toxina inhibe los impulsos nerviosos y se produce una parlisis flcida descendente y muerte por paro respiratorio y/o falla cardiaca. La bacteria no crece en el intestino y se produce en alimentos mal esterilizados (enlatados) ( ) o en embutidos

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Cl i y tratamiento Clnica t t i t

Botulismo B t li d de h heridas: id muy ocasional i l Botulismo infantil y neonatal:

C. botulinum no crece en el intestino del adulto por la competencia con la flora normal En el neonato donde no se ha establecido la flora se puede producir la colonizacin por C. Botulinum B t li Botulismo i f til es poco f infantil frecuente t Antitoxina botulnica polivalente A, B y E Antibiticos sobre todo para neonatos Tratamiento de soporte

Tratamiento

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T Transmisin i i neuromotora t normal l

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A i de Accin d la l t toxina i botulnica b t l i

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Toxina botulnica

Tipos: A A, B B, Calfa, Cbeta, D, D E E, F y G Tipo de estructura A-B C t l gentico: Control ti f fago Receptor en clula blanco: posiblemente ganglisido GD1b A ti id d enzimtica: Actividad i ti E Endopeptidasa d tid Zi Zinc d dependiente di t Dosis letal por kg de peso: N Neurotoxina t i ti tipo A ratn t 1 2 ng i 1,2 i.p. cobayo 0,6 ng conejo 0,5 ng mono 0,5-0,7 ng 0,000000060 g humano aprox. 1 ng

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Toxina botulnica

Sensible al calor: 100C x 10 80C x 30 60C x 5 La toxina cristalina presenta dos fracciones:

Neurotoxina (PM 150,000) Hemaglutinina (PM 500,000)

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Sintetizadas como protoxinas y activadas por una proteasa La neurotoxina presenta dos polipptidos unidos por puentes disulfuro, separados son inactivos Antignicamente diferentes, mecanismo de accin similar Actan a p pH cido y son inactivadas en p pH alcalino No penetra la barrera hematoenceflica

Clostridium botulinum R i t i de Resistencia d l las esporas

La resistencia L i t i al l calor l es mayor que l la d de cualquier otro anaerobio, la resistencia a los elementos l t f fsicos i y qumicos i depende d d d de l la cepa especfica y el tipo serolgico El tipo A es ms resistente que los tipos B, C y D; el tipo E es el menos resistente Las esporas pueden sobrevivir durante horas a 100C y hasta 10 minutos a 120C Son resistentes a las radiaciones y pueden sobrevivir a temperaturas de -190C 190 C

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Diagnstico clnico

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Hipotensin Hi t i postural t ld de causa no definida Pupilas dilatadas no reactivas Diplopia Sequedad q en las membranas mucosas Parlisis descendente con dificultad respiratoria progresiva Ausencia de fiebre Datos epidemiolgicos

C Casos reportados t d
Ao 1983 1988 1996 1996 1997 1998
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Lugar Lambayeque Huancayo Lima Trujillo Lima Barranca

Alimento involucrado Queso Embutido Esprragos Embutido Pastel de Alcachofas Infantil

Afectados (en riesgo) 3 15 (70) 3 1 1 1

Fallecidos 1 2 0 0 0 0

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Diagnstico de laboratorio

Determinar la presencia de toxina en suero, heces y alimentos Determinar el tipo de toxina Aislamiento de Clostridium botulinum de heces y alimentos En botulismo infantil obtener muestras de heces para aislamiento i l i t yd determinacin t i i d de t toxinas i En botulismo por heridas determinar la presencia de toxinas en el suero y cultivar una muestra de biopsia de la herida o con un hisopo obtener una muestra del fondo de la herida

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Determinar la presencia de la toxina

Materiales

Ratones 20 a 30 g de peso J i Jeringas d de t tuberculina b li Suero del paciente 1.6 mL Suero normal 0.8 0 8 mL

Mtodo

Inocular i i.p. p 0 0.8 8 mL de suero del paciente en 2 ratones Inocular i.p. 0.8 mL de suero normal en 1 ratn Poner un ratn sin inocular Observar por 4 das si mueren los ratones con signos sugestivos de botulismo (especialmente el 1 da)

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Brote de Botulismo - Huancayo 1988

Determinacin de la presencia de la toxina
Paciente Cuadro clnico 1 2 3 4 5 2a Grave Grave Moderado Leve Testigo * Horas de observacin 12 24 48 72 96 M E M SV SV SV SV SV SV SV SV Resultado

E SV SV SV

M SV SV SV SV SV SV

Positivo Positivo Positivo Negativo Protegido

* Muestra del paciente 2 extrada 24 horas despus de haber recibido antitoxina tit i b botulnica t l i polivalente li l t A A, B B, E E.
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Determinar el tipo de toxina

Materiales

Ratones 20 a 30 g de p peso Suero del paciente 5 mL Suero normal 0 0,8 8 mL Antitoxinas monovalentes A, B, E y F

Distribuida por el CDC 10 U.I. por mL; 0.1 mL = 1 U.I. 1 U.I. neutraliza 10,000 LD50 i.p. de toxina A, B, C, D, F 1,000 LD50 de toxina tipo E

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Inocular los ratones va IP con sueros o extractos, solos o mezclados con antitoxina

Determinar el tipo p de toxina

Mtodo

Colocar 1 mL de suero en c/u de 5 tubos y aadir 0,25 mL de cada antitoxina en los ltimos 4 tubos, mezclar Incubar las mezclas en bao mara a 37C por 30 Suero tratado: 2 ratones con 0,5 mL de cada mezcla S Suero no t tratado: t d Inocular I l 2 ratones t I.P. I P con 0,4 0 4 mL L Marcar cada ratn con colorantes para identificacin Observar si los ratones mueren con signos de botulismo: dificultad respiratoria, polipnea, parlisis del tren posterior. Si hay y presencia p de toxina botulnica en concentracin suficiente, todos los ratones morirn en 96 horas excepto los que estn protegidos por la antitoxina monovalente correspondiente

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Brote de Botulismo - Huancayo 1988 D t Determinacin i i d del l tipo ti de d t toxina i

Mezcla suero Antitoxina Suero+Antitox. A Suero+Antitox. B Suero+Antitox. E Suero+Antitox. F Suero solo SV= sin variacin Horas de observacin 12 24 48 72 96 SV SV E SV SV M SV M M SV Resultado

SV

SV

SV

No protegido Protegido No protegido No protegido

M M=muerte del ratn

E= enfermo

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TRATAMIENTO P i id d Prioridades

Eliminar Eli i l la t toxina i no absorbida b bid d del l estomago y del tracto gastrointestinal Neutralizar la toxina no fijada usando una antitoxina polivalente

Tomar precauciones para evitar la hi hipersensiblidad iblid d por uso d de suero heterlogo Uso de suero

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Dar tratamiento de soporte p y cuidado intensivo cuando sea necesario

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