DEFINICION DE MICROBIOLOGIA Es la ciencia que estudia los microorganismos.

Microbiologa clnica

Dr. Alfredo Guilln Oneeglio

RAMAS DE LA MICROBIOLOGIA

CAMPOS DE TRABAJO

Bacteriologa Virologa Micologa Parasitologa

Mdica o clnica Odontolgica (oral, (oral bucal) Veterinaria Inmunologa Industrial Farmacutica Alimentaria o bromatologa Agrcola Fitopatologa Ingeniera sanitaria

CLASIFICACIN DE LOS MICROORGANISMOS

MICROBIOLOGIA MEDICA
Es el estudio de las interacciones entre los humanos y los microorganismos con los que coexisten

Comensales
Colonizan el cuerpo sin causar dao Microbiota o flora microbiana normal

Patgenos
Producen dao en el husped humano
Invasin

directa e injuria Por la produccin de una toxina

INTERACCIN HUSPED PARSITO

CLASES DE MICROORGANISMOS PATOGENOS

Defensas del husped e inmunidad natural

Sistema multifactorial

Por su posibilidad de cultivarse

No exigentes Exigentes Parsitos intracelulares obligados

de mecanismos protectivos Evitan la entrada y limitan la diseminacin

Trauma fsico directo, medicamentos y toxinas

Bacterias oportunistas. p

Tipo
Priones Virus Bacterias Hongos Parsitos

Virulencia microbiana
Habilidad intrnseca relativa de un microorganismo

de

causar enfermedad.

Priones
Son protenas con capacidad patognica Encefalitis espongiforme

Enfermedades de las

Virus
Parsitos intracelulares obligados muy pequeos No se puede ver con microscopio de luz No tienen sistema de produccin de energa Un solo tipo de cido nucleco: ADN o ARN Replicacin viral utilizando clulas husped.

vacas locas Enfermedad de Kreutzfeld Jacob Kuru

Bacterias

Hongos
Clulas Eucariticas Reproduccin por gemacin o formando colonias (mohos) Saprofitos ambientales y no necesitan producir infeccin humana

Procariotes pues no tienen membrana nuclear Tienen un solo cromosoma en la forma de un nucleoide Tienen ambos tipos de cidos nuclecos Presentan pared celular Se reproducen por fisin binaria Necesidades nutricionales son variables

Parsitos
Protozoarios y organismos eucariticos multicelulares Ciclo de vida complejo con varios huspedes.

CLINICA Y TRATAMIENTO DE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS

Presentacin clnica

Diagnstico
Clnico: signos y sntomas Epidemiolgico: poblacin Microbiolgico: identificacin del agente etiolgico

Forma de inicio: brusca o insidiosa Sntomas: dolor, sensacin de alza trmica, debilidad progresiva Sgnos: fiebre, perdida de peso, hepatomegalia, petequias, etc. C bi en f Cambio funcin i fi fisiolgica i l i Pruebas anormales de laboratorio

Buen diagnstico: tratamiento adecuado Sin diagnstico: tratamiento emprico

Estrategias del Diagnstico

Anlisis microbiolgico

Historia clnica y epidemiolgica Examen clnico Localizacin anatmica Microorganismo sospechoso Pruebas microbiolgicas: coloraciones, cultivos, y pruebas de susceptibilidad. Exmenes histopatolgicos Exmenes inmunolgicos Exmenes radiolgicos

Un resultado acadmicamente exacto en microbiologa clnica no es muy til para un paciente que ya esta muerto

Filogenia

PROCARIOTES Y EUCARIOTES
Dr. Alfredo Guilln Oneeglio

DIVISIO SIONES

Procariotae i t Protista

Eucariotae

REINO Bacteria Archae TIPO UniDE celular CLUo LAS colonias de clulas

Fungi

Plantae

Animalia

UniUnicelular MultiMulticelulares (algunos) celulares celulares (mayora) MultiMulticelulares celulares (mayora) (algunos)

Estructura bacteriana
Relacin entre los diferentes sujetos y la resolucin del ojo humano, el microscopio ptico y el microscopio electrnico

Clula tipo: bacteria Microorganismo unicelulares Divisin simple o fisin binaria. Pared celular diferente:
Gram positivas Gram negativas Micobacterias. Micobacterias

Algunas bacterias presentan cpsulas, flagelos, fimbrias o pili sexual.

ORGANIZACION CELULAR DE PROCARIOTES

Coloracin de Gram
Desarrollada por Christian Gram en 1884 B. Pasos: 1. Cristal violeta tincin primaria 2. Iodo de Gram - mordiente 3. 3 Alcohol agente decolorante 4. Safranina - contracolorante

Cromosoma circular nico compuesto t por ADN y no presentan membrana nuclear Membrana citoplasmtica
Transporte Produccin de energa g Biosntesis especializada.

Algunas bacterias presentan mesosomas. Ribosomas pequeos 70S

26

Coloracin de Gram

Gram

27

28

Bacterias espiriladas

Nombre de las bacterias

C. Nomenclatura (ejemplos)
1. 1 Cocos

Vibrios

Espirilos

Espiroquetas
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pyogenes Staphylococcus aureus Micrococcus luteus Neisseria meningitidis 2. Bacilos Bacillus anthracis Escherichia coli
30

Streptococcus

Glicocalix

Estructuras externas
Cpsula y Capa mucosa Flagelos Fimbrias y Pili
31

Estructura formada por carbohidratos en la superficie de la bacteria Presente solo en algunas bacterias (Gram + y Gram -)

Cpsula: p formadas p por carbohidratos o en algunos g

casos por protenas. Esta bien adherido Capa mucosa (slime layer): adherencia laxa, formada por carbohidratos extracelulares
32

Glicocalix

Glicocalix: Cpsula
Composicin: polisacridos complejos o por polipptidos Localizada en la superficie de la clula, se encuentra envolviendo a una o ms clulas Da un aspecto viscoso a la colonia. No tiene afinidad por los colorantes Microscopa: montajes hmedos con tincin negativa (tinta china), halos bordeando las clulas. Su presencia se puede demostrar (serotipia) con sueros especficos anticapsulares.
34

Cpsula
33

Slime layer

Funciones de la cpsula

Klebsiella pneumoniae

Adherencia Evitar la fagocitosis Resistencia a la desecacin Reservorio para algunos nutrientes Depsito de productos de desecho.

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Flagelos

Estructura de los flagelos

Estructuras proteicas filamentosas largas, largas delgadas Dimetro uniforme: 12 a 30 nm Longitud es varias veces el tamao de la clula. Microscopio electrnico:
flagelos se originan en la membrana celular Estn adheridos mediante un gancho, un cilindro y varios anillos

que anclan el flagelo con cada capa de la membrana y a la pared celular.

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38

Disposicin de flagelos

Atricos
Shigella

Monotricos
Vibrio

Anfitricos
Campylobacter

L f ti Lofotricos
Pseudomonas

Peritricos
Escherichia
39

10

Deteccin de flagelos

Filamentos axiales

Observando su presencia:
Coloraciones: aumentar el dimetro de los flagelos usando

mordientes para luego colorearlos flagelina Microscopia electrnica

Inmunofluorescencia:

Observando el movimiento:
Microscopio de campo oscuro, de contraste

de fases, o gota pendiente Crecimiento en medios de cultivo semislidos (0,3-0,5% de agar).

Se encuentran solamente en espiroquetas: Treponema, Leptospira y Borrelia. Composicin: protenas fibrilares que encuentran alrededor de las bacterias adheridos a ambos polos de la clula. Localizacin: debajo de la membrana externa Funcin: dar movimiento rpido a las espiroquetas Nmero:
T. microdentium tiene dos filamentos por clula. T. reiteri tiene de 6 a 8.

Serotipia con sueros flagelares especficos

41

42

Espiroquetas

Pili o Fimbrias
Apndices filamentosos cortos, ms rectos y delgados que los flagelos y que cubren a las bacterias Gram negativas. Tamao: 4 a 8 nm Nmero: 100 a 200 fimbrias Composicin: protenas (lectinas) dispuestas en forma h li id l helicoidal. Funcin: adherencia bacteriana a lugares especficos de la superficie de las clulas.
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Filamento axial

Cubierta externa
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Pared celular

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Aeromonas hydrophila flagelos y fimbrias

Pili sexual
Son morfolgica y qumicamente similares a las fimbrias Menor nmero: 1 - 4 por bacteria Distribucin al azar en la superficie de la bacteria. Funcin: transferencia del DNA durante la conjugacin bacteriana.

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Pili sexual

Pared Celular
Pared rgida
Proteccin en medios de baja presin osmtica Da la forma a las bacterias Ausente en pocos casos (micoplasmas)

Compuesto por peptidoglicn Peso seco de la pared celular es 20-30% del peso total de la bacteria. El contenido de Ca y Mg es de 0.016% Espesor: 0.15 a 0.5 nm (0.8 en Lactobacillus acidophilus).
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12

Pared Celular

Peptidoglicn

Gram positivo
49

Gram negativo
50

Composicin del peptidoglicn

Coloracin de Gram en Bacterias

Hexosas: N-acetilglucosamina cido N-acetil-murmico. En NAM se fijan tetrapptidos. L-alanina cido D-glutmico cido diamino pimlico D-alanina

Gram positivo
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Gram negativo

13

Pared Celular de las bacterias Gram Positivas

Pared Celular de las bacterias Gram Negativas

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Membrana Citoplasmtica

Membrana Citoplasmtica
Funciones:
Tiene permeabilidad selectiva Controla el transporte

de la mayora de compuestos que ingresan o salen de la clula. Sistema de transporte de electrones y protones liberados durante la oxidacin bacteriana (sistema de energa). Contiene enzimas para la sntesis de la pared celular y segrega enzimas hidrolticas extracelulares. Asegura la separacin de material nuclear (DNA) a las clulas hijas durante la divisin celular.

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56

14

Transporte activo

Mesosomas
Invaginaciones de la membrana membrana, usualmente de forma irregular. Se observan sobre todo en bacterias Gram positivas Funciones
posiblemente ibl t sirven i para aumentar t lla superficie fi i

d de lla membrana celular (respiracin y transporte) posiblemente servir de sitio de unin al nucleoide.
57 58

Mesosomas

Citoplasma
Composicin:
80 % de agua, cidos nuclecos, protenas,

carbohidratos, iones inorgnicos Compuestos de bajo peso molecular, Ribosomas.

lpidos,

En especies fotosintticas se pueden encontrar pigmentos en los cromatforos

Piocianina en Pseudomonas aeruginosa Fluorescena en P. fluorescens.

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Se forman endospora en algunas especies.

60

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ADN Bacteriano
No tiene membrana nuclear: Procariotes Concentrado en el cromosoma bacteriano como un nucleoide. Presentando una larga molcula de DNA circular de doble cadena. Representa 2 a 3% del peso de la clula y ocupa el 10% del volumen celular.

Plsmidos
Molcula o unidad gentica extracromosomal no esencial Capacidad de replicacin autnoma Cadenas dobles de DNA circular. Son ms pequeos que los cromosomas bacterianos. La mayora de los plsmidos estan entre 1/10 y 1/100 del tamao del cromosoma bacteriano.
62

61

Ribosomas

Ribosomas

Son estructuras complejas compuestas de varias molculas de RNA y protenas. Miden aproximadamente 20 nm de dimetro. Composicin: dos subunidades
una con un coeficiente

de sedimentacin de 50 unidades Svedberg o 50S y otra que mide 30 S. S

Funcin: sntesis proteica. Sitio de accin de algunos antibiticos que impiden la sntesis de protenas.
63 64

16

Inclusiones Citoplasmticas

Esporas

Almacn temporal de exceso de metabolitos Su presencia y cantidad varia con el tipo de bacteria y su actividad metablica. Tipos:
Grnulos de glicgeno, cido polihidroxibutrico, fosfatos

inorgnicos, azufre o compuestos de nitrgeno. Grnulos de volutina o metacromticos: polmeros de fosfatos de alto peso molecular, de color rojizo cuando se colorea con azul de metileno, se presentan en Corynebacterium diphtheriae.

Cuerpos ovales de pared gruesa, que es una clula de alta resistencia. Caracterstico de Bacillus y Clostridium. Sntesis de dentro del citoplasma vegetativo de un nuevo citoplasma destinado a convertirse en espora. Formacin de cido dipicolnico (que no se encuentra en la clula vegetativa), y grandes cantidades de Calcio. Cortex: complejo Ca++- cido dipicolnico-peptidoglican En su interior se encuentra el material gentico.

65

66

Esporas

Partes de la espora

La localizacin de la espora:
central paracentral subterminal terminal.

Forma: oval o esfrica. Su dimetro puede ser mayor o menor que el de la bacteria y puede deformar a la bacteria. Las esporas son muy resistentes a los agentes fsicos y qumicos adversos.
67 68

Core - Citoplasma deshidratado, contiene DNA, DNA ribosomas, ribosomas enzimas, etc. Lo que necesita para cuando vuelva a la forma vegetativa. Cortex - Capa de pared celular/peptidoglican. Cubierta -capas capas de protena impermeables a muchas sustancias qumicas (resistencia)

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Patogenicidad bacteriana

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Conceptos generales

Tipos de patgenos

Capacidad de producir una enfermedad Es muy poco frecuente Requisitos

Oportunistas

Trasmisibilidad: entre 2 huspedes o un reservorio a un husped Infectividad: capacidad de romper las defensas del husped Virulencia: variable multifactorial, que denota la capacidad del patgeno de daar al husped

Virulencia clnica: relacin compleja husped parsito, en que la capacidad de producir dao esta en relacin con la resistencia del husped.

Rara vez causan enfermedad en un husped con defensas inmunolgicas y anatmicas intactas Alteracin por enfermedad congnita, uso de terapia inmunosupresiva o ciruga. Muchos son parte de la flora normal Introduccin a otros lugares anatmicos o eliminacin de la flora competitiva por el uso de antibiticos Pueden producir una enfermedad en personas sanas con defensas inmunolgicas intactas Producen enfermedades mas graves en inmunosuprimidos

Primarios

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Factores de virulencia
Facilitan la patognesis Corrientemente la bacteria necesita varios Intervienen en diferentes estadios de la enfermedad No todas las cepas son igualmente virulentas Pueden causar enfermedades diferentes dependiendo del tipo de factor de virulencia Regulacin coordinada para evitar expresin de factores innecesarios y desperdicio de energa

Proceso de la infeccin
Ingreso Colonizacin Invasin Evitar los mecanismos de defensa Produccin de toxinas Otros mecanismos de agresin

Vas de ingreso
Tracto respiratorio Tracto gastrointestinal Vas urinarias Va genital Piel y mucosas Trauma en piel y mucosas: picadura de insectos, ciruga,

Como ingresan
Contacto directo Contacto indirecto Vehculos o fomites Reservorios Flora normal de la piel

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Colonizacin
Adherencia a clulas blanco Multiplicacin por adquisicin de nutrientes del husped Resistencia a los mecanismos de defensa del husped destinados a combatir la infeccin

Adherencia a una superficie de una clula de la mucosa Evita mecanismos inespecficos con peristalsis o los sistemas de lavado del mucus, saliva u orina que elimina a los MO no adheridos Que intervienen

Receptores en la membrana celular de las clulas que son usualmente carbohidratos. Ligandos o receptores en las bacterias que son protenas. Propiedades no especificas de la pared celular de las bacterias: carga elctrica de superficie, hidrofobicidad

Colonizacin

Colonizacin

Pili o fimbrias
Superficie de bacterias Gram negativas Identificacin por composicin

Adhesinas no pili

antignica, morfologa y especificidad del receptor Divisin entre sensibles o no a la D-mannosa

Flagelos
Penetracin en la mucosa intestinal en Vibrio cholerae

Hemaglutinina filamentosa en B. pertussis Hemaglutinina mannosa resistente en S. typhimurium Hemaglutinina fibrilar en Helicobacter pylori Protenas de membrana externa (OMPs) en N. gonorrhoeae y EPEC Exopolisacridos en bacterias Gram positivas: S. mutans en caries, S. epidermidis en prtesis Glicoproteina multifuncional presente en plasma y asociado a superficies de clulas de la mucosa S. pyogenes, S. aureus, Treponema pallidum

Unin a Fibronectina

y Campylobacter jejuni Funciones compartidas de adhesin y movilidad

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Invasin

Mecanismos de defensa
Defensas fsicas y qumicas Inmunidad no especfica Inmunidad especfica

Una vez adheridas algunas bacterias pueden

Produccin de toxinas que pueden producir dao local

Evitar los mecanismos de defensa Produccin de toxinas Otros mecanismos de agresin

Aspectos histricos

Salmonella (Gafky 1884, 1884 Schroeter 1886)

Bacillus typhosus Bacilo de Eberth Eberthella typhosa Salmonella typhosa Salmonella typhi Salmonella choleraesuis biovar typhi Salmonella enteritidis serovar Typhi Salmonella enterica subsp.

Taxonoma Bacteriana

enterica ser. Typhi

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21

Definiciones
Taxonoma: Es la ciencia de la clasificacin, clasificacin identificacin y nomenclatura. Clasificacin: arreglo ordenado de las bacterias en grupos

Ordenes Familias Gneros Especies Subespecies

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Definiciones

Identificacin: es el uso prctico de los criterios de clasificacin

Aislar e identificar una bacteria que produce una enfermedad Distinguir unas bacterias de otras Confirmar la identificacin Uso de determinadas cepas o reacciones en la biotecnologa

Nomenclatura
Como se definen las caractersticas

de una especie y se

comunican entre microbilogos

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Definicin: Especie

Observacin de colonias

Bacteria con determinadas caractersticas o un grupo de bacterias que se parecen unas a otras en los aspectos ms importantes

87

22

Definiciones

Cepa bacteriana: Poblacin de organismos que se origina de un slo organismo o de un aislamiento en cultivo puro. Biovar: Variantes bacterianos, caracterizados por diferencias bioqumicas o fisiolgicas. Serogrupo y serovar (serotipo): Identificacin de antgenos somaticos y flagelares, flagelares utilizando sueros especficos. Fagovar: Identificacin de antgenos de superficie especficos, utilizando fagos.
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Caractersticas usadas en clasificacin e identificacin

Rasgos estructurales Rasgos fisiolgicos Rasgos bioqumicos y nutricionales Anlisis qumico Rasgos ecolgicos Rasgos genticos y caractersticas moleculares

Rasgos estructurales
Coloracin de Gram
Gram positivo Gram negativo No se colorea con Gram

Disposicin
Diplo Estrepto Estafilo Tetrada Sarcina Empalizada Letras chinas

Morfologa
Cocos Bacilos Cocobacilos Espirales

91

92

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Rasgos bioqumicos y nutricionales

Rasgos fisiolgicos
Temperatura Requerimiento R i i t d de oxgeno pH

Accin sobre diversos compuestos como carbohidratos protenas. carbohidratos, protenas

Utilizacin de carbohidratos

Metabolismo oxidativo: necesita O2 para degradar la glucosa Metabolismo fermentativo: Glucosa es degradada anaerobicamente No fermentadores ni oxidadores

Rasgos ecolgicos
Medio ambiente Componentes de una determinada flora

Produccin de enzimas

Detoxificantes u oxidativas: Catalasa, Oxidasa, etc. Enzimas proteolticas: Hemolisina, Coagulasa, etc.
93 94

Dendograma
50 Porcentaje de similaridad 60 70 80

Rasgos genticos

90 100

Homologa o hibridizacin del ADN / ADN

Comparacin de secuencias completas del cromosoma

bacteriano

C. freundii Citrobacter C diversus C. 1

Contenido de G-C:
Fraccin molar % G-C =

G+C G+C+A+T

Posibilidad de intercambio de material gentico:

Transformacin, conjugacin, transduccin.

Escherichia coli 3 Gnero y especie

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Estudio de protenas y cidos nucleicos: ADN, ARN ribosomal

96

Cepa

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Requerimientos nutricionales para el crecimiento bacteriano

Nutricin bacteriana

Cultivo de microorganismos
Factores
Disponibilidad de nutrientes apropiados Oxgeno u otros gases Humedad pH ptimo Temperatura apropiada Medio libre de inhibidores Se debe prevenir la contaminacin

El crecimiento se define como un incremento de los constituyentes celulares. celulares Se puede producir un incremento del tamao del microorganismo, del nmero de bacterias o de ambos.

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Cultivo de microorganismos

Requerimiento de oxgeno

Componentes de los medios

Fuente F t de d carbono b Fuente de nitrgeno Fosfato y sulfuro inorgnico: Trazas de metales Agua Vitaminas

siderforos

Aerobias obligados Microaeroflas Anaerobias estrictas Anaerobias facultativas Anaerobios aerotolerantes

Medio tioglicolato fluido

Rasgos fisiolgicos: Temperatura

Mnima Mxima
Psicrfilos

pH

Optima
15 C C 20-30 C 20-40 C 55-65 C 80 C

0 0 Mesfilos 15-20 Termfilas 45 Hipertermfilos 55

Psicotrofos

20 35 45 100 113

Muchas bacterias crecen a pH neutro Algunas pueden sobrevivir / crecer en pH cido o pH alcalino

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Curva de crecimiento

Tiempo de generacin
Tiempo que necesita una bacteria para aumentar su nmero al doble El tiempo de generacin es variable dependiendo de la especie bacteriana:
Escherichia coli: 20, Mycobacterium

tuberculosis: 14-18 h.

Formula: Recuento (f) = Recuento (i) x 2 T/TG

Ejemplo

Al tiempo 0 haban presentes 100 bacterias El tiempo de generacin es de 2 horas Despus de 8 horas la masa bacteriana es de: 100 x 28/2 = 1600 bacterias = 1,6 x 103

Medicin de bacterias viables

Medicin de la masa b t i bacteriana ( (viva i + muerta) t ) en medio de cultivo lquido
Turbidez (opacidad) Unidades formadoras de colonias (UFC)

Metabolismo bacteriano

colonias

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Definicin

Metabolismo

Metabolismo es el conjunto de reacciones bioqumicas que permiten el crecimiento de un organismo y creacin de nuevas clulas.

Coenzimas y Cofactores

CATABOLISMO

Coenzimas

Cofactores

Son orgnicos por naturaleza Una porcin no-proteca de la molcula enzimtica Muchos son sintetizados a partir de vitaminas:

Inorgnicos por naturaleza Mejoran la unin de la enzima con su substrato Iones de

NAD es producido desde la niacina niacina.

Mg Zn Mn

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Catabolismo de carbohidratos
Los azucares son degradados para generar energa. Se utiliza algo de ATP pero se produce mucho mas Las bacterias utilizan 3 vas

Va glicoltica

o Embden-Meyerhof-Parnas Va Pentosa fosfato paralela a la glicoltica Va Entner-Doudoroff - alternativa a la glicoltica y a la de la pentosa fosfato

Glucosa

Va Glicoltica Embden-Meyerhof-Parnas
Va comn No requiere oxgeno Usado por bacterias aerobias y anaerobias, animales y plantas Puntos clave:

Fosforilacin de la glucosa Ruptura de una molcula de glucosa de 6 carbonos en

ATP ADP

Va Glicoltica

Glucosa 6 Fosfato

Fructosa 6 Fosfato
ATP ADP

Fructosa 1-6 Di Fosfato

Dihidroxiacetona Fosfato

Gliceraldehido 3 Fosfato
NAD NADH

3 Fosfo Glicerol Fosfato

NAD NADH ADP ATP

NAD

NADH

3 Fosfo Glicerato

Glucosa
C6 ADP

Piruvato
C3 ATP

2 Fosfo Glicerato
H2O

2 molculas de 3 carbonos Transferencia de electrones a la coenzima NAD Captura de energa en la forma de ATP

2 Fosfo Enol Piruvato

ADP ATP

Piruvato

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Va Pentosa Fosfato (Shunt Hexosa Monofosfato)

Va Entner-Doudoroff
Alternativa a las vas glicolticas y pentosa fosfato Glucosa va a una serie de reacciones cortas hasta gliceraldehido 3-P Gliceraldehido 3-P sigue los 5 ltimos pasos de la gliclisis Se genera 1 ATP Ejemplo

Pseudomonas aeruginosa

Corre en forma paralela con la gliclisis Comn en bacterias, plantas y animales Provee de precursores para biosntesis: Ej. Ribosa para cidos nucleicos, eritrosa para sntesis de aminocidos. Provee de poder reductor en forma de NADPH para uso en la biosntesis. Genera 1 ATP Ejemplos:

E. coli B. subtilis

Que sigue despus de la gliclisis?

Respiracin En presencia de O2
Piruvato entra la ciclo de los ATC [Krebs] Decarboxilacin oxidativa Acetil-CoA Acetil-CoA + Oxalacetato = Citrato Serie de reacciones oxidativas Regreso a oxalacetato Producto final: 2 moles de CO2, 3 moles de NADH, 1 FADH2, 1 GTP

Respiracin
El aceptor del electrn final es una molcula inorgnica

(ej. oxidacin de cido pirvico a CO2 y H2O)

Fermentacin
El aceptor del electrn final es una molcula orgnica

(ej. oxidacin de cido pirvico a etanol, cido lctico, etc.)

30

Ciclo de Krebs

Respiracin aerbica
NADH y FADH2 entran a la cadena de transporte de electrones (cadena respiratoria) Electrones son pasados de portador a portador Cada portador es reducido cuando toma los electrones y es oxidado cuando lo pasa al siguiente portador en la cadena La energa liberada es capturada en molculas de ATP El aceptor final de los electrones es el O2 H2O

31

En ausencia de O2

Respiracin anaerbica

Fermentacin

Aceptor de electrones que no sea O2:

Aceptor de electrones es un compuesto orgnico:

NO3SO4CO2

Menos eficiente que la respiracin i i aerbica bi en lla produccin de ATP

cido lctico cido propinico cido butrico cidos mixtos

ANABOLISMO

No se produce ATP

Relevancia clnica

32

Pruebas de fermentacin en el laboratorio clnico

Medios que contienen azucares son inoculados con bacterias Si ocurre fermentacin Se produce piruvato y lactato El medio se pone cido El cido baja el pH El indicador de pH cambia de color

Rojo de fenol

rojo amarillo

Shigella flexneri

Relevancia Clnica
Clostridium perfringens:
Fermenta

glucosa Produce cido butrico El cido butrico causa dao tisular

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Inhibicin competitiva

Produccin de hidrgeno sulfurado

Las sulfas compiten con el PABA por la enzima que la convierte en cido flico Penicilinas compiten con el substrato de la enzima para la transpeptidacin durante la sntesis de la pared celular bacteriana

Prueba para identificacin de bacterias

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Gentica microbiana

Gentica microbiana

Las bacterias no presentan un ncleo definido N l id zona d Nucleoide: de l la b bacteria t i d donde d esta t presente el material gentico El nucleoide puede ser diferenciada por microscopia electrnica. La mayor parte de las bacterias presentan un solo cromosoma Se han descrito algunas especies que presentan dos cromosomas
Brucella

melitensis

Accin de la ADN Girasa

Coloreando los genomas bacterianos

E. coli tiene 4.6 x 106 bases, esto hara que el cromosoma midiera 1400 m de largo, largo sin embargo la bacteria tiene 2-3 m. Cromosoma super enrollado por serie de enzimas ADN girasa: tuerce el ADN hasta lograr una estructura muy compacta. t Topoisomerasa II

Sitio de accin de las Quinolonas

Muy complejo: Haemophilus influenzae > de 1,700 genes

Extremadamente simple: Mycoplasma genitalium tiene cerca de 470 genes

35

Dogma central

Genes
Fenotipo: representa las caractersticas observables Gentipo: caractersticas genticas, genticas mapa gentico

Produccin de protenas en eucariotes y procariotes

Genes Inducibles Modelo Opern

Definicin: Genes que se expresan solo por la presencia de alguna sustancia.
Lactosa induce la expresin de los genes lac Un antibitico induce la expresin de un gen de

resistencia

Vas Catablicas

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Opern Lactosa

Opern Lactosa

Genes reguladores Promotor Operador Genes estructurales

lac z, lac y,

Inductor: lactosa
Ausencia
i
p

Ausencia de lactosa

o
Activo

Gen Regulador

Operon
p

ADN m-ARN Protena

Represor Activo No expresin

No lac mARN

& lac a

Presencia

Presencia de lactosa i
p

Represor Inductor: lactosa

-Galactosidase Transacetylase Permease

Inactivacin del represor Expresin

Control Negativo

Inactivo
-Galactosidasa Permeasa Transacetilasa

Transduccin
Descrita p por Zinder y Lederberg en 1952 Transferencia gentica de un donante a un receptor por medio de un bacterifago Resistente a las nucleasas ambientales

Replicacin de los bacteriofagos

37

Transformacin
Descrito por Frederick Griffith en 1928. Definicin: Transferencia gentica por obtencin de ADN de un donante. Factores que afectan la transformacin

Tamao del ADN y estado

Sensibilidad a las nucleasas

Competencia del receptor (Bacillus,

Neisseria, Streptococcus):

Haemophilus,

Factor de competencia Competencia inducida

Conjugacin
Definicin
Transferencia de genes entre

un donante y un receptor a travs del contacto fsico entre las clulas

Donante

Conjugacin bacteriana

Tipos pos de bacte bacterias as

Donante: Factor F (Fertilidad)

Pili sexual Receptor: No tiene factor F

Receptor

38

Pili sexual

Taxonoma bacteriana
Grupos bacterianos

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Bacterias de importancia clnica

Cocos Gram positivos

Bacilos Gram positivos

Bacterias que no se colorean

Cocos Gram negativos

Bacilos Gram negativos

Aerobios y anaerobios facultativos

Anaerobios

Exigentes

No exigentes

Bacteroides

Porphyromonas

Haemophilus Brucella

Fermentadores de glucosa

Enterobacterias Vibrio Pseudomonas Acinetobacter Etc.

Fusobacterium

Prevotella

Campylobacter Helicobacter

Oxidadores y no fermentadores

Bartonella

40

41