ESCOLA TCNICA ESTADUAL MONTEIRO LOBATO CIMOL Curso Tcnico em Qumica

Tcnicas de Anlises de Protenas

Ana Paula Lauck, Bruna Fernanda Ermel Dauve, Caroline Sabrina Batista Weber, Ettiely Buchmann, Priscila Costa Arnhold
Anlise de alimentos uma rea muito importante no ensino de qumica, pois ela atua em vrios segmentos do controle de qualidade, do processamento e do armazenamento dos alimentos processados. Ao realizar essa pesquisa tivemos como objetivo especfico, comparar a eficcia dos diferentes mtodos espectrofotomtricos para deteco de protenas e diferenciar os mtodos existentes e especificar para que estes so indicados. Muitos mtodos espectrofotomtricos ao longo dos anos, tm sido propostos para a determinao de protenas totais, mas no existe uma metodologia considerada de uso universal. Palavras Chave: anlise, protenas, mtodos.

INTRODUO
O estudo dos diferentes mtodos espectrofotomtricos para a determinao de protenas sempre foram de grande interesse na indstria alimentcia, nutricional e analises clinicas. Apesar da pesquisa no ser muito diferente das dvidas dos profissionais da rea, a questo que fica a seguinte: Qual seria o mtodo mais eficaz para a anlise de protenas? A pesquisa em questo tem por objetivo geral, estudar de forma mais ampla os diferentes mtodos de deteco de protenas. As protenas desempenham papis extremamente importantes, na maioria dos processos biolgicos, atuando como enzimas, hormnios, neurotransmissores, transportadores atravs das membranas celulares e outros. As metodologias desenvolvidas para determinar protenas totais, tm se tornado cada vez mais fundamental em vrias reas do conhecimento, relacionando o comportamento alimentar com a quantidade de protena ingerida dos alimentos, favorecendo o entendimento dos vrios aspectos na rea de qumica de protenas.

Anlise Qualitativa de Protenas em Alimentos por Meio de Reao do on Cprico. As protenas se caracterizam por ser o grupo mais abundante de macromolculas, encontradas dentro e fora das clulas, e de importncia vital aos seres vivos. Suas funes vo desde catlise de reaes qumicas (enzimas), transporte de outras molculas, transmisso de impulsos nervosos, proteo imunitria e at mesmo funo hormonal, entre outras. A alimentao humana deve incluir protenas que so encontradas em carne, peixe, ovo, leite e derivados, entre outros. O conhecimento mostra que os alimentos mais ricos em protenas so aqueles de origem animal. A grande maioria dos alimentos vegetais, como cereais, verduras, frutas, tubrculos, pobre em protena, com exceo das leguminosas. Os compostos de coordenao, ou complexos metlicos, so estruturas qumicas compostas de um tomo central (sendo este um metal) envolto por um determinado nmero de molculas, ons, ou ainda outros tomos chamados ligantes. Os compostos de coordenao so indicados pelo uso de colchetes, por exemplo, o on tetramincobre(II) [Cu(NH3)4]2+, espcie em que o on Cu2+ se encontra coordenado por quatro molculas de amnia. Uma caracterstica muito comum a alguns compostos de coordenao que eles so capazes de absorver radiao eletromagntica na regio do visvel, resultando em compostos coloridos. Os compostos de Cu2+ apresentam comumente coloraes azuis ou verdes e, em geral, a cor de um composto de coordenao depender do metal, do seu estado

METODOLOGIA
Muitos mtodos, quantitativos ou qualitativos, so utilizados para a determinao de protenas, mas no existe uma metodologia considerada de uso universal para todos os meios. Os mtodos utilizados no decorrer da pesquisa em questo so: Anlise qualitativa de Protenas em alimentos por meio de reao de complexao do on Cprico; e Anlise Quantitativa por mtodo do Biureto.

de oxidao e dos ligantes que o coordenam (Lee, 1999). Ao adicionar o sulfato de cobre em gua, a colorao azul obtida o resultado da complexao do on Cu2+ por seis molculas de gua. Em soluo aquosa, o on cprico encontra-se hexacoordenado [Cu(H2O)6]2+. A colorao azul passa a azul intenso quando os ligantes amnia substituem os ligantes gua, formando o ons como [Cu(H2O)2(NH3)4]2+, [Cu(H2O)3(NH3)3]2+ e [Cu(H2O)4(NH3)2]2+. Como cita Lee (1999), em soluo aquosa, difcil adicionar o quinto e o sexto grupo amnia ao on cprico, mas possvel obter o on [Cu(NH3)6]2+ usando amnia lquida como solvente. Mtodo de Biureto O mtodo se baseia na reao do reativo do biureto, que constitudo de uma mistura de cobre e hidrxido de sdio com um complexante que estabiliza o cobre em soluo, sendo o tartarato de sdio o recomendado. O cobre, em meio alcalino, reage com protenas formando um complexo quadrado planar com a ligae peptdica. O produto de reao apresenta duas bandas de absoro, uma em 270nm e outra em 540nm. Apesar da banda na regio de 270nm aumentar em seis vezes a sensibilidade do mtodo do biureto, a banda na regio de 540nm a mais utilizada para fins analticos, porque diversas substancias, normalmente presentes na maioria dos meios analisados, absorvem na regio de 270nm causando muita interferncia no mtodo. Este mtodo tem sido aplicado para determinar a concentrao de protenas totais. Apesar de ser rpido, utilizar reagentes de baixo custo e no apresentar grande variao da absortividade especifica para diferente protenas, este mtodo no muito sensvel, colocando-o em grande desvantagem, em relao a outras metodologias, e por isto tem sido, ao longo dos anos, substitudo por mtodos mais sensveis. Mesmo assim, o mtodo de biureto continua sendo recomendado para a determinao da concentrao de protenas totais em plasma sanguneo, bem como para a determinao de

protenas totais em saliva, quando comparado com outros mtodos.

RESULTADOS E DISCUSSES
Ao estudar estas diferentes formas de analises de protenas, podemos concluir que a analise qualitativa boa para determinar quais alimentos possuem protena em sua sntese e a analise do biureto demonstrou quais dos alimentos possuem maior quantidade de protena. Na analise qualitativa de protenas pode-se perceber que os alimentos que no continham protena a amostra ficava somente azul, por causa do sulfato cprico, no entanto observou-se colorao violeta nos tubos que continham amostras que demonstravam protena em sua composio, A colorao violeta observada aps as reaes descritas com alguns alimentos se deve ocorrncia de um composto de coordenao que se forma a partir de interaes entre o on cprico e os tomos de nitrognio presentes nas protenas. O on Cu2+, por exemplo, capaz de estabelecer ligaes com ligantes capazes de contribuir com quatro pares de eltrons. Nesse caso, as protenas atuam como ligantes do on cprico, e o par de eltrons disponvel em cada tomo de nitrognio exerce interao com o metal de modo a mantlo envolto, protegido, permitindo a estruturao do composto de coordenao.

O reagente de biureto com sulfato de cobre possui colorao azul. Se o cobre forma um complexo com os aminocidos, estabelecendo interaes com os tomos de nitrognio da cadeia peptdica ele obtm colorao violeta. Quanto maior for quantidade de protenas, maior ser a intensidade da cor. CONCLUSO Ao interpretar os resultados obtidos com determinadas reaes percebemos que todas as protenas reagem intensamente de forma semelhante, nas mesmas condies. REFERNCIAS

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