B I O T E C N O L O G I A

BIOTECNOLOGIA APLICADA
A LA ACUICULTURA
Por Igor I. Solar, Instituto de Acuicultura, Facultad de Pesqueras y Oceanografa, Universidad Austral de Chile, Puerto Montt, Chile.

e acuerdo a proyecciones de las Naciones Unidas, la poblacin mundial llegar en el ao 2025 a cerca de 8 billones (Fig.1). La disponibilidad de tierras cultivables y el aumento de la eficiencia en la produccin de alimento de origen terrestre ha llegado a sus lmites. Condiciones geogrficas, climticas, de calidad de suelos y diversos otros usos humanos determinan que los cultivos terrestres sern incapaces de proveer alimento para la siempre creciente poblacin humana. Por otra parte, los ocanos y otros ecosistemas dulceacucolas cubren mas del 70% de la superficie del planeta, y constituyen cerca del 95% del volumen de la bisfera. Se reconoce, por lo tanto, que los ecosistemas acuticos son una reserva casi 6

ilimitada de alimentos, substancias de importancia industrial y biomdica, y tambin una fuente de degradacin y dilucin de desechos antropognicos e industriales. Estadsticas de la FAO (ao 1999) indican que la produccin de alimentos provenientes del medio acutico es cercana a 137 millones de toneladas mtricas, de las cuales casi el 31% provienen de actividades de cultivo. La FAO tambin proyecta que para satisfacer las necesidades de la poblacin humana del 2025, la produccin total debera aumentar a 165 millones de toneladas mtricas. Este aumento significativo no puede provenir de las capturas de especies silvestres sin causar serios daos a los ecosistemas marinos, lagos y ros. En consecuencia, el au-

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control del sexo, incubacin y desarrollo la produccin larvario, desarrollo embrionario y metamundial y soPOBLACIN MUNDIAL (EN BILLONES) morfosis, nutricin, conversin alimentibrepasando cia y crecimiento, salud, gentica, identi(52%) el valor 10 ficacin de stocks, bancos de genes y de las exportatransgnesis. ciones de harina 9 de pescado y 8 otros productos Induccin de maduracin 7 marinos. La mayora de las especies acuticas no La producmaduran normalmente en condiciones de 6 cin de alimencautiverio, especialmente cuando las va5 1995 2005 2015 2025 2035 tos acuticos riables ambientales que condicionan el La poblacin mundial continuar aumentando durante el que pueda satisdesarrollo gonadal y la maduracin de gasiglo XXI a una tasa de 90 millones de personas por ao. facer efectivametos estn alteradas o ausentes. En cierFuente: ONU (1996) mente las necetas circunstancias es necesario acelerar o sidades de la retrasar la maduracin, a fin de optimimento en la produccin de alimentos de poblacin humana en la primera mitad zar y sincronizar la produccin de gameorigen acutico debe necesariamente prodel siglo 21, no puede estar exclusivatos de machos y hembras, de adelantar o venir de un aumento significativo en la mente basada en especies de alto valor y desfasar el desarrollo embrionario y la eficiencia productiva de los cultivos. Los consumo restringido a segmentos de produccin de juveniles, o facilitar la hipases ms populosos del mundo, (Chipoblaciones de mayores recursos. Es nebridizacin de especies o cepas que difiena, India, Indonesia), o carentes de suficesario expandir la capacidad productiren en sus perodos de maduracin. cientes reas terrestres cultivables (Java a un amplio rango de recursos acutiEl desarrollo de tcnicas de induccin pn), recurren mayormente a la acuiculcos incluyendo algas, peces, moluscos y de maduracin ha superado varias etatura para la produccin de alimentos crustceos. Esto slo se puede lograr a pas. Desde el uso de preparaciones cru(Fig.2). travs de amplios esfuerzos en investidas de extractos pituitarios conteniendo En efecto, en 1997, por primera vez la gacin en acuicultura en el mbito gonadotrofinas, preparaciones de gonaproduccin mundial de salmn cultivamundial, basados en una slida base dotrofinas semipurificadas hasta el uso de do sobrepas la captura total mundial de biotecnolgica. compuestos que estimulan la sntesis y salmn silvestre. En el 2000, la salmoniNumerosas reas en las ciencias biolliberacin de gonadotrofina endgena. Incultura produjo ms de 1,1 millones de gicas estn participando en el desarrollo vestigaciones sobre los mecanismos fisiotoneladas equivalentes al 61% de la prode tcnicas para aumentar la eficiencia y lgicos que regulan la maduracin y los duccin total de salmn en el mundo. sustentabilidad de la acuicultura. La mamtodos farmacolgicos que permiten su Esta tendencia es especialmente evidenyora tiene que ver con biotecnologas remanejo en condiciones artificiales han te en Noruega, donde la combinacin de productivas, de crecimiento y gentica. dado la posibilidad de desarrollar y sinreduccin en la disponibilidad de recurEntre las reas de investigacin estn la tetizar compuestos bioactivos anlogos a sos silvestres y el aumento sostenido de maduracin de reproductores, manejo de hormonas de mamferos o peces, que son los cultivos ha resultado en que la progametos, manipulaciones cromosmicas, efectivos en peces telesteos. Actualmenduccin de salmn del Atlnte, existen varias alternatiFIGURA 2 tico cultivado es 100 veces suvas, usando vehculos inyecPRODUCCIN MUNDIAL DE ACUICULTURA 1999 perior a las capturas silvestres. tables o implantables, va in(TOTAL 33,96 MILLONES TON. MTRICAS) En Canad, la declinacin de tramuscular o intraperitolos stocks naturales de salneal, e incluso oral. En numn del Atlntico y del Pacmerosas especies de agua China fico ha provocado severas resdulce, especialmente carpas, India tricciones en las capturas de es necesario co-administrar Japn especies silvestres, resultando Indonesia factores antagonistas a la doTailandia en que el valor actual de la pamina (agente inhibitorio Vietnam produccin cultivada es supede la liberacin de la gonaUSA rior al valor de las capturas dotrofina), a fin de potenciar Noruega Filipinas silvestres. En Chile, el cultivo la liberacin de gonadotroOtros de especies salmnidas ha aufina por la pituitaria. EstuFuente: FAO (1999) mentado sostenidamente, aldios recientes investigan (Excluye algas marinas) canzando en el 2000 el 27% de tambin el uso de ferohorFIGURA 1

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monas como alternativa natural para estimular la maduracin de los peces. A medida que avanza el conocimiento de los aspectos endocrinolgicos que regulan la reproduccin de organismos acuticos, podemos esperar que se perfeccionen los mtodos para promover la maduracin de especies en cautiverio, incluyendo peces y moluscos, y el desarrollo de estrategias reproductivas en crustceos.

Control del sexo

En varias especies de peces y en algunos crustceos, los animales de un sexo poseen mejores caractersticas productivas que aquellos del otro sexo. Estas caractersticas pueden incluir crecimiento ms acelerado, maduracin tarda, o ambas. Las hembras de los peces planos, como el turbot, crecen ms rpido que los machos. Por otra parte, los machos de los salmnidos maduran en promedio un ao antes que las hembras. Los cambios secundarios causados por la maduracin reducen el valor de mercado y obligan al productor a cosechar el producto antes de que haya logrado su crecimiento potencial completo. En algunos casos, como en el cultivo de tilapias, el cultivo monosexo, preferentemente machos, permite impedir la reproduccin precoz durante la fase de crecimiento. La aplicacin de tcnicas de control de sexo tambin es necesaria para el aislamiento reproductivo de organismos genticamente manipulados, OGMs, impidiendo as interacciones con especies silvestres. El control del sexo en organismos acuticos cultivados puede ser logrado usando mtodos endocrinos, manipulacin de complementos cromosmicos o combinacin de ambas tcnicas. El uso de compuestos andrognicos o estrognicos en el momento apropiado durante las primeras etapas de desarrollo, permite dirigir la diferenciacin sexual de los peces hacia el sexo deseado, sobrepasando la determinacin sexual gentica. En ciertas especies es tambin posible usar esteroides sexuales para la inversin sexual de peces, que pueden producir gametos monosexo (carentes de cromosomas que determinan el sexo opuesto), producien-

seleccin gentica y manejo. Sin embargo, tambin se ha procurado aumentar el apetito, acelerar el crecimiento y mejorar la tasa de eficiencia en la conversin alimenticia en salmnidos, a travs de algunos mecanismos biotecnolgicos. Los niveles endgenos de hormona de crecimiento (somatotropina) son inferiores a los necesarios para el mximo crecimiento en la mayora de los peces, incluyendo los salmnidos. Para contrarrestar esta limitacin natural se han realizado investigaciones con enfoque farmacolgico, como la administracin de factores inhibidores de la somatostatina (que tiene efecto opuesto a la somatocrinina o factor liberador de la hormona de crecimiento). Tambin se ha investigado el uso de compuestos recombinados de hormona del crecimiento de aves y mamferos, los que han demostrado ser efectivos en peces. Otro compuesto con efecto anablico que est bajo estudio es el lactgeno placental (aislado de la placenta de bovinos y humanos), FIGURA 3 que ha demosSISTEMA DE PRODUCCIN PARA LA GENERACIN trado ser altaDE POBLACIN TODAS HEMBRAS O TRIPLOIDES mente eficiente TODOS HEMBRA en acelerar el crecimiento y la caAndrgeno pacidad osmoreHembra Hembras gulatoria, faciliPoblacin Triploidizacin Neomachos monosexo tando y aceleranhembra Ovas normales do de esta maneSemen Hembras femenino triploides ra la esmoltificacin en salmniCosecha Peces antes de dos y su rpido hembra Cosecha a madurar conveniencia traslado a jaulas de engorda en el Produccin Reproductores ambiente marino. nerados tambin en Chile con el objeto No obstante la promesa demostrada de optimizar caractersticas productivas por las investigaciones en el uso de comy eliminar maduracin precoz (Fig. 3). La puestos recombinados para mejorar el esterilizacin de moluscos cultivados, crecimiento de los peces, aspectos regucomo las ostras, va induccin de triploilatorios impiden su aplicacin en peces da, permite mantener la calidad del proen cultivo destinados al consumo humaducto durante la estacin de maduracin. no. Cabe considerar que la agencia estadounidense Food and Drugs Administration, FDA, aprob en 1993 el uso de soCrecimiento matotrofina bovina recombinada para auy conversin alimenticia mentar la produccin de leche, lo que poLos mejoramientos de estas caractersdra facilitar obtener autorizacin de ticas productivas han sido principalmenagencias regulatorias para el uso de prote enfocados por medio de programas de

do, de esta manera, descendencias para cosecha que no han sido sometidas a tratamiento hormonal. Por ejemplo, el uso de neo-machos (o machos productores de semen que contienen cromosomas generadores de hembras solamente), tcnica actualmente en uso en Chile para la produccin de poblaciones hembra solamente en truchas y en salmn del Atlntico. El empleo de sondas genticas para la deteccin de las secuencias que identifican al cromosoma Y (determinante de masculinidad) ha facilitado la seleccin de peces segn sus caractersticas sexuales genticas (genotipo), independientemente de su sexo funcional o fenotipo. Las tcnicas de manipulacin de complementos cromosmicos suelen ser usadas en combinacin con mtodos endocrinos. La induccin de hembras triploides (con tres sets completos de cromosomas) permite generar individuos estriles. Salmones y truchas triploides de sexo femenino solamente, han sido ge-

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tenas recombinadas de la familia hormona de crecimiento-prolactina, una vez que las mejores dosis y mecanismos de administracin hayan sido determinados y se compruebe su inocuidad para el consumidor humano.

Gentica molecular y diagnstico

Los procedimientos desarrollados en los ltimos aos para simplificar estudios, ensayos y diagnsticos en el mbito molecular, en especial el uso de PCR (reaccin en cadena de polimerasa), han permitido aumentar y perfeccionar los estudios basados en diagnstico de ADN en reas de gentica y reproduccin, agentes patgenos y evaluacin del estado sanitario de los peces . Entre las aplicaciones en gentica y reproduccin est la posibilidad de deteccin de pequeas variaciones estructurales en el genoma, a fin de determinar cambios resultantes de programas de seleccin o aumento en los niveles de homocigocidad por consaguineidad. Tambin se han desarrollado tcnicas de identificacin genmica suficientemente sofisticadas para permitir la deteccin de salmones escapados de jaulas de cultivo viviendo en el ambiente natural, a fin de evaluar posibles impactos ambientales. Por otra parte, un ensayo basado en PCR para establecer las secuencias nucleotdicas correspondientes al cromosoma Y, permite la rpida deteccin del sexo gentico en varias especies de salmnidos, incluyendo salmn plateado (coho) y rey (chinook), aunque an no ha sido descrita para trucha y salmn del Atlntico. Los organismos acuticos cultivados pueden ser afectados por una variedad de patgenos incluyendo virus, bacterias y parsitos. La deteccin temprana de estas patologas puede ser difcil mientras la carga patognica es baja y los sntomas de la enfermedad no son evidentes. Sin embargo, tcnicas moleculares y pruebas basadas en ADN permiten conocer las secuencias especficas de ciertos patgenos e identificar estas secuencias forneas en el ADN de los organismos huspedes y expuestos a infeccin. En la ltima dcada se han desarrollado

pruebas de ADN para varios virus y bacgicas como las enzimas endonucleasas de terias, incluyendo los agentes causantes restriccin para disectar secuencias de de Necrosis Hematopoytica Infecciosa, ADN en sitios especficos y la utilizacin IHN; Septicemia Viral Hemorrgica, de plsmidos, o molculas de ADN cirVHS; Enfermedad Bacteriana del Rin, culares que pueden sobrevivir en bacteBKD; y Vibrio, entre otros. Recientemenrias y que permiten el transporte de gete, en nuestro pas, un equipo de investines, han facilitado la aislacin y clonacin gadores liderados por la Fundacin Ciende secuencias gnicas que controlan cacia para la Vida, ha definido las secuenractersticas comercialmente importantes cias genticas que caracterizan a la bacen numerosos organismos (Fig. 4). Las teria Piscirickettsia salmonis, agente cautcnicas de microinyeccin permiten la sal de la enfermedad Sndrome Rickettinsercin de estas secuencias, generalsial del Salmn, SRS, lo que permitir demente al citoplasma, en ovocitos fertilisarrollar una serie de herramientas para zados de organismos receptores. La inel diagnstico y prevencin de esta grasercin exitosa del gen al genoma del reve enfermedad. ceptor involucra su integracin o incorOtra aplicacin de informacin genporacin en un locus cromosmico, su tica a nivel molecular es el moFIGURA 4 nitoreo de la exDEFINICIONES presin de ciertos genes capaces de responder BIOTECNOLOGIA: La aplicacin de ciencia e ingeniera en el a estresores amuso directo o indirecto de organismos vivos como partes o probientales, productos de otros organismos vivos para la produccin de bienes y duciendo las llaservicios. madas proteORGANISMO ACUATICO GENETICAMENTE MODIFICADO: nas de estrs. Organismo en el cual el material gentico ha sido alterado en una Estas protenas, forma que no ocurre naturalmente por cruzamiento o recombinaentre las que se cin natural. cuenta la metaORGANISMO TRANSGENICO: Un organismo que lleva en su lotionina, perADN copias de construcciones nuevas de ADN que han sido introducidas mediante tecnologa de ADN recombinado. Esto inmiten detectar y cluye el uso de construcciones de la misma especie (insertos homarcar otras mlogos) o transferencias inespecficas (insertos heterlogos). protenas celulares daadas por condiciones ambientales anormales como niveles bajos de oxgeno o metales pesados y otros txicos qumicos. Las tcnicas moleculares permiten tambin detectar la expresin de genes que codifican enzimas involucradas con la excrecin de compuestos orgnicos nocivos como compuestos aromticos policlorados, PCBs, compuestos aromticos polinucleados, PAHs, y dioxinas, que pueden provenir de fuentes naturales o industriales. De esta manera es posible determinar si los organismos acuticos han sido expuestos a contaminacin ambiental.

Organismos transgnicos
El desarrollo de herramientas tecnol-

transmisin o incorporacin efectiva en las clulas germinales del organismo transgnico para su transferencia a la descendencia, y su expresin o funcionamiento en base al control de secuencias reguladoras que controlan su actividad (Fig. 5). Entre los objetivos de la generacin de peces transgnicos estn la transferencia de fenotipos ventajosos, como la tolerancia a temperaturas bajas, la resistencia a enfermedades o determinadas capacidades metablicas. Entre los enfoques ms investigados y exitosos de la tecnologa de transgnicos est el incremento de fenotipos como el aumento de tasas de conversin alimenticia y crecimiento. Otras

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alternativas en consideracin para su desarrollo futuro son la reduccin o eliminacin de fenotipos relacionados con reproduccin, como control de la expresin de genes para la sntesis y liberacin de gonadotrofinas y enzimas gonadales a fin de retardar o suprimir la maduracin indeseada. Finalmente, la tecnologa transgnica podra facilitar la creacin de organismos con modificacin de la composicin nutricional de la carne, en particular la relacin de los importantes cidos grasos de las series omega 3 y omega 6. La induccin de organismos acuticos transgnicos es una biotecnologa todava en experimentacin y cuya aplicacin a nivel comercial no se estima posible o conveniente en el corto plazo. Diversas consideraciones de carcter tico, ambiental o de percepcin de los consumidores en cuanto a la inocuidad de los productos transgnicos reducen el inters del uso de stos de parte de los productores.

productos, en respuesta a las LNEA GENERACIONAL EN EL PROCESO DE inquietudes de PRODUCCIN DE PECES TRANSGNICOS agencias guberMicroinyeccin Evaluar Evaluar por Establecer Produccin namentales y de de gene clonado integracin transmisin a lneas de de triploides los consumidoy expresin descendencia reproductores transgnicos (fenotipo) transgnicos res. A fin de evitar posibles impactos ambien3n tales ser necesario desarrollar y aplicar las ms eficientes y riguOvas G0 G1 G2 Produccin rosas tcnicas de Comercial contencin fsica (Modificado de Donaldson y Devlin 1996) y biolgica que impidan interacAntes que la promesa de aumentos imciones reproductivas de transgnicos con portantes en la eficiencia productiva y su organismos silvestres. impacto en la economa de los cultivos
FIGURA 5

llegue a realizarse, ser necesario el desarrollo y cumplimiento de estrictas regulaciones en relacin con aspectos nutricionales, sanitarios y ambientales de los

Igor I. Solar, Instituto de Acuicultura, Facultad de Pesqueras y Oceanografa, Universidad Austral de Chile, Casilla 1327, Puerto Montt, Chile.

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