Prof. Eduardo Furtado Flores VACINAS I. Introduo.........................................................................................................................3 II. O sistema imunolgico......................................................................................................4 1. Defesas Inespecficas..........................................................................................4 2. Resposta Imunolgica Especfica......................................................................11 omponentes do !istema Imunolgico 1. "rgos...............................................................................................................1 4 2. #lulas...............................................................................................................1 $ 3. %agocitose.........................................................................................................2 2 4. O papel dos %agcitos na imunidade especfica..................................................23 &. 'infcitos..........................................................................................................2 & III. (nticorpos...................................................................................................................... 31 itocinas )Interleucinas*........................................................................................................4+ I,. (ntgeno.........................................................................................................................42 Recon-ecimento de antgeno...................................................................................4& %ases da resposta imunolgica...............................................................................................&1 Resposta .rim/ria e !ecund/ria.............................................................................................&2 1 Imuni0ao............................................................................................................................& 4 E1pectati2as imunolgicas da 2acinao................................................................................&$ O34eti2os da ,acinao.........................................................................................................&5 Imunidade contra 2rus..........................................................................................................&6 7ecanismos de escape...........................................................................................................$4 Imunidade contra 3act#rias.................................................................................................... $& 7ecanimos de escape.............................................................................................................$8 ,(I9(! ,:RI(!.............................................................................................................$6 ,acinas replicati2as )2rus 2i2o*..............................................................................$6 ,acinas 2i2as recom3inantes...................................................................................53 ,acinas com 2rus inati2ado....................................................................................82 ,acinas de su3unidade...........................................................................................84 ,acinas de protenas recom3inantes.......................................................................8& ,acinas de peptdeos sint#ticos..............................................................................85 ,acinas de D9(....................................................................................................62 ,acinas de R9(....................................................................................................64 Imuni0ao contra enfermidades 3acterianas.........................................................................64 ;o1ides................................................................................................................6& <acterinas..............................................................................................................6$ ,acinas 3acterianas................................................................................................65 (d4u2antes...........................................................................................................................65 ;estes de 2acinas=controle de >ualidade ,acinao )2ias? 2acina@es poli2alentes? idade? etc...* %al-as de 2acinas Efeitos colaterais <i3liografia 2 3 I. INT!D"#$! ( 2acinao tem sido e1tremamente importante no controle de 2/rias enfermidades infecciosas -umanas e animais? constituindoAse em uma das formas mais efica0es e com relao custoA3enefcio mais fa2or/2el no controle de doenas em popula@es. (tualmente? e1istem mais de uma centena de 2acinas de uso 2eterin/rio e de0enas de 2acinas -umanas em uso. (l#m dessas? 2/rias 2acinas esto em fase de desen2ol2imento ou testes e em 3re2e algumas delas de2ero estar em uso. (lgumas enfermidades 4/ foram erradicadas do mundo pela 2acinao? como # o e1emplo da 2arola. Outras encontramAse so3 controle ou em 2ias de erradicao? como a poliomielite e sarampo. Em animais? enfermidades como a %e3re (ftosa? Doena de (u4es0BC e .este !una l/ssica 4/ foram ou esto sendo erradicadas de continentes inteiros por programas 3aseados em 2acinao. ( era moderna da 2acinao iniciou em torno de 2++ anos atr/s? >uando EdDard Eenner demonstrou >ue poderia proteger pessoas da enfermidade Fsmallpo1F )2arola* pela pr#2ia e1posio ao agente da FcoDpo1F 3o2ina. Ele o3ser2ou >ue pessoas >ue tra3al-a2am com 3o2inos leiteiros )orden-adores* eram mais resistentes G 2arola )smallpo1*. omo os agentes dessas enfermidades pertencem G mesma famlia de 2rus (POXVIRIDAE) e possuem alguns antgenos em comum? a imuni0ao )ou e1posio* de pessoas com o 2rus o3tido a partir de crostas de les@es de 3o2inos protegia parcialmente contra o 2rus -umano em e1posi@es su3se>Hentes. Essas o3ser2a@es e e1perimentos condu0idos por Eenner constituramAse nos passos iniciais da 2acinologia moderna. (tualmente? t#cnicas sofisticadas de 3iologia molecular tIm sido empregadas com o o34eti2o de aperfeioar as 2acinas 4/ e1istentes e de desen2ol2er no2as 2acinas. Em especial? a manipulao gen#tica de agentes infecciosos tem permitido um a2ano muito grande na /rea de produo de 2acinas. ,acinas o3tidas por manipulao gen#tica? tam3#m con-ecidas como 2acinas recom3inantes? 4/ esto em uso para o controle de doenas -umanas )-epatite <* e animais )-erpes2rus 3o2ino tipo 1? 2rus da Doena de (u4es0BC? cinomose*. O nJmero de 2acinas recom3inantes de2e aumentar significati2amente nos pr1imos anos? pois 2/rias esto atualmente em fase de desen2ol2imento ou testes. Dentre estas? destacamAse 2acinas e1perimentais contra o KI,. ( o3teno de 2acinas efica0es contra microorganismos como 2rus? 3act#rias e proto0o/rios representa um marco na -istria natural das doenas e no com3ate reali0ado pelo -omem para controlar e=ou erradicar enfermidades de popula@es -umanas e animais. .or isso? a 2acinologia # um dos segmentos das ciIncias 3iom#dicas >ue mais demanda recursos e tem apresentado a2anos nas Jltimas d#cadas. II. ! SISTEM% IM"N!&'(I)! 4 ( principal funo do sistema imunolgico de um animal # protegIAlo de uma ampla 2ariedade de agentes infecciosos potencialmente patogInicos encontrados no meio am3iente. O funcionamento ade>uado do sistema imunolgico # essencial para os animais e para seres -umanosL a vida incompatvel com um sistema imunolgico afuncional. ;odos os animais tIm >ue enfrentar e com3ater os patgenos )3act#rias? 2rus? fungos? parasitas e proto0o/rios? >ue causam doenas* com os >uais eles compartil-am o meio am3iente. O sistema imunolgico protege os animais das infec@es definindo consistente e precisamente o >ue # p!p!ioF A as c#lulas e antgenos normais do animal A e defendendo contra microorganismos e outras su3stMncias est!an"as )noAprprias*. (lgumas defesas usadas pelo corpo so relati2amente 32ias? como a tosse ou o espirro? >ue permitem eliminar partculas de p inaladas. ( resposta imunolgica # muito menos 32ia e muito mais comple1a. En2ol2e o recon-ecimento molecular de estruturas >umicas nos antgenos estran-os por c#lulas especiali0adas? as >uais montam uma resposta especfica contra a)s* estruturas >umicas recon-ecidas no agente estran-o. 9um animal saud/2el? -/ dois sistemas 3/sicos de defesa. Estes sistemas operam constante e simultaneamente? protegendo o animal de agentes infecciosos. Eles soL 1. Defesas inespecficas? naturais ou inatas )3arreiras fsicas? c#lulas? -umorais* 2. Resposta imunolgica especfica ou ad>uirida. *. Defesas inespec+ficas (s primeiras e mais 32ias defesas so as defesas mec#nicas ou fsicas. .ara produ0ir uma enfermidade? os microorganismos precisam penetrar no corpo do animal. ( pele$ p%los e mucosas constituemAse em 3arreiras >ue protegem os animais dos agentes patogInicos. (s l&g!imas$ a saliva e o muco do aparel-o respiratrio? digesti2o e urogenital a4udam a la2ar e eliminar os agentes patogInicos ingeridos? inalados ou introdu0idos in2oluntariamente no animal. Essas secre@es tam3#m cont#m su3stMncias >umicas le2emente 'acte!icidas )>ue matam 3act#rias*. !e agentes patogInicos entrarem no corpo )por e1emplo? 4unto com o ar inalado*? eles podem ficar presos por um camada de muco >ue re2este as 2ias a#reas. Eles podem ento ser remo2idos pelo mo2imento ondulatrio contnuo dos clios )minJsculas estruturas semel-antes a fios de ca3elo* encontrados na superfcie das c#lulas >ue re2estem as 2ias a#reas. Esses clios mo2em o muco contaminado )su4o*? como uma escada rolante? para um local de onde ele possa ser deglutido? ou eliminado pela tosse ou por espirro. 5 O pK 3ai1o do estNmago tam3#m representa uma 3arreira contra alguns microorganismos. (lguns 2rus e 3act#rias? aps serem deglutidos? so inati2ados ao passarem pelo estNmago. Isso infeli0mente no ocorre com todos os microorganismos? pois alguns resistem ao pK 3ai1o e so capa0es de atingir o intestino e esta3elecer infeco nesse local. O segundo con4unto de defesas # constitudo por clulas. ,/rios tipos de leuccitos )c#lulas 3rancas do sangue*? atacam? fagocitam? destroem e eliminam agentes infecciosos ou partculas >ue eles recon-eam como estran-as )3act#rias? 2rus? c#lulas tumorais? c#lulas infectadas? restos celulares? comple1o antgenoAanticorpo? etc*. (s principais c#lulas en2ol2idas nesse processo so os neutrfilos? moncitos=macrfagos? e c#lulas natu!al (ille!)Essas c#lulas esto geralmente no sangue e so recrutadas para os tecidos onde iro com3ater o agente patogInico. (l#m de fa0er parte das defesas inespecficas? os macrfagos e c#lulas 9O tam3#m participam da resposta imunolgica especfica. ( inflama*+o >ue resulta de dano tecidual causado pelo agente patogInico facilita o acesso de c#lulas do sistema imunolgico e de su3stMncias ati2as )mediadores >umicos* / /rea infectada. #lulas e mediadores >umicos tIm um papel fundamental na restrio e com3ate ao agente patogInico nesses locais. Esses fatores tam3#m so fundamentais no reparo e cicatri0ao do tecido lesado? aps a infeco ter sido com3atida. Os inte!fe!ons )I%9s* so su3stMncias >umicas produ0idas por c#lulas infectadas por 2rus e=ou por linfcitos e outras c#lulas do sistema imunolgico em resposta G e1posio a 6 antgenos. E1istem duas classes de I%9L alfa )* e 3eta )* )tam3#m c-amados de I%9 noA imunes ou inespecficos* e I%9 gama )*. 9a imunidade inespecfica? os I%9s e desempen-am papel importante. !o produ0idos por c#lulas infectadas por 2rus )2irtualmente >ual>uer c#lula infectada por um 2rus produ0 esses I%9s*. Os I%9s so produ0idos e secretados no meio e1tracelular? sendo captados por c#lulas 2i0in-as. ( captao do I%9 por essas c#lulas confere a elas um estado de resistIncia contra o 2rus. Os mecanismos de resistIncia antiA2iral conferidos pelo I%9 so comple1os e en2ol2em degradao de R9( 2iral e ini3io da sntese prot#ica nas c#lulas. Em infec@es 2ricas? as primeiras defesas orgMnicas >ue limitam e restringem a infeco so e1ercidas pelos I%9s. O sistema complemento # uma s#rie de protenas plasm/ticas cu4a ati2ao ocorre em forma se>uencial? como uma cascata? sempre >ue -/ leso de tecidos ou parede de 2asos ou alterao dos componentes sanguneos? presena de microorganismos? ou reao antgenoA anticorpo. Os componentes do sistema complemento so mediadores do processo inflamatrio? constituindoAse? ao lado dos anticorpos? os principais efetores da resposta imune -umoral. (s principais fun@es resultantes da ati2ao do complemento so a destruio de c#lulas alteradas )ou infectadas*? facilitao da fagocitose )opsoni0ao* e retirada de imunocomple1os da circulao. (s protenas >ue comp@e o sistema complemento atuam na resposta inespecfica? como tam3#m participam de mecanismos ligados G resposta imunolgica ad>uirida )especfica*. (s principais fun@es 3iolgicas dos componentes do complemento soL 1. ,itlise )lise de 3act#rias ou c#lulas infectadas por parasitas intracelulares*P 2. Opsoni-a*+o de antgenos )microorganismos ou partculas*? facilitando a fagocitoseP 3. Ativa*+o da inflama*+oP 4. .uimiota/ia )atrao de leuccitos para os locais de inflamao*P &. Remo*+o e solu'ili-a*+o de imunocomple/os) Os componentes do complemento solJ2eis no plasma incluem mJltiplas en0imas proteolticas? >ue so ati2adas se>uencialmente. ( cli2agem de uma protena tornaAa ati2a. Esta cli2a uma outra en0ima? ati2andoAa e assim por diante. Em3ora as protenas do complemento este4am presentes no plasma sangHneo? elas so normalmente inati2as e no podem ser ati2adas espontaneamente na circulao. ( ati2ao do sistema complemento ocorre apenas em certos locais e em resposta a determinados estmulos. 7 (ti2ao do complemento 1Q A 7ol#culas de imunoglo3ulinas )anticorpos*? >uando ligamAse a antgenos especficos podem ati2ar o complemento. .or esta ra0o? o complemento ser2e como um importante mecanismo efetor da imunidade -umoral especfica. ( se>HIncia de ati2ao do sistema complemento iniciada por comple1os antgenoAanticorpo # c-amada de via cl&ssica do complemento ) 2Q A (lguns componentes do complemento so diretamente ati2ados ao ligarAse diretamente G superfcie de microorganismos? desencadeando diretamente a via alte!nativa do complemento. Essa 2ia # ati2ada independentemente da presena de anticorpos e produ0 uma forma solJ2el de 3 con2ertase e associada a mem3rana >ue catalisa a protelise do 3. 9a 2ia alternati2a? a 3 con2ertase # formada na superfcie de c#lulas micro3ianas. ( ati2ao dessa 2ia tam3#m le2a G produo de 2/rios fragmentos com ati2idade 3iolgica e pode culminar com a formao do comple1o de ata>ue G mem3ranas )mem'!ane attac( comple/ ou 7(* e a conse>Hente destruio do microorganismo )ou da c#lula*. ( cascata do complemento O componente central do sistema complemento # uma protena c-amada 3? >ue # um fator crtico para as fun@es efetoras desse sistema. (s formas 3iolgicas ati2as da 3 so produtos de cli2agem proteoltica. (s 2ias cl/ssica e alternati2a incluem diferentes protenas >ue so ati2adas por diferentes camin-os para gerar en0imas c-amadas 3 con2ertases >ue so capa0es de cli2ar a 3 e produ0ir 3a e 33. Em est/gios iniciais da via cl&ssica? mol#culas de anticorpos ligadas a antgenos especficos ati2am a ati2idade proteoltica de trIs protenas do complemento? c-amadasL 1? 8 4 e 2? le2ando a formao do comple1o 432a >ue funciona como a 3 con2ertase da 2ia cl/ssica. 9a 2ia alternati2a? o 33 # gerado espontaneamente em 3ai1os n2eis ligaAse ao componente do complemento c-amado <3 gerada pela cli2agem proteoltica da protena c-amada fator <. O comple1o 33<3 # c-amado de 3 con2ertase da 2ia alternati2a. ( 3 con2ertase cli2a a 3 gerando 33. O pr1imo passo # a ligao do 33 a 3 con2ertase formando o comple1o & con2ertase >ue catalisa a cli2agem proteoltica da protena &. Em3ora as & con2ertases das duas 2ias se4am molecularmente distintas? elas catalisam rea@es idInticas e atuam em su3stratos idInticos. Rma 2e0 cli2ado o &? am3as 2ias terminam no mesmo passo. O e2ento terminal no en2ol2e protelise mas? ligao se>Hencial de 2/rias protenas solJ2eis do complemento c-amadas de $? 5? 8 e 6. ( associao dessas protenas le2a G formao de poros nas mem3ranas? c-amados de comple1o de ata>ue G mem3rana )7(*? >ue causa lise osmtica das c#lulas. %un@es 3iolgicas das protenas do complemento (s fun@es do sistema complemento esto agrupadas em duas grandes categoriasL 1. lise celular pelo 7( e 2. efeitos 3iolgicos dos fragmentos proteolticos gerados na cascata de ati2ao. Esses fragmentos ati2os podem permanecer aderidos G mem3rana onde o complemento foi ati2ado ou podem ser li3erados na corrente sangHnea ou fluido e1tracelular. 9esse caso? eles mediam seus efeitos pela ligao em receptores especficos presentes em uma 2ariedade de c#lulas. ( resposta -umoral especfica a microorganismos gera anticorpos >ue ligamAse a estes organismos. Esses anticorpos ati2am localmente o complemento na sua superfcie e le2am G lise pela formao do 7(. (lguns microorganismos podem ati2ar a 2ia alternati2a na ausIncia de anticorpos tam3#m le2ando a lise celular. 1. omple1o de ata>ue G mem3rana )7(*L ( & con2ertase gerada tanto na 2ia cl/ssica como na 2ia alternati2a inicia a ati2ao dos componentes terminais da cascata do complemento >ue culmina com a formao do 7(. O processo de formao do 7( inicia com a cli2agem do & pela & con2ertase. Este # o Jltimo passo en0im/tico da cascata do complemento. & # cli2ada em &a >ue # li3erada e &3 >ue permanece associado G mem3rana. (ps? ocorre a ligao se>uencial da $ e 5? comple1o >ue se insere na mem3rana e em seguida associaAse ao 8. Ento? a 6 ligaAse ao comple1o &A8 para formar o 7(. O 7( # composto de 12 a 1& mol#culas de 6 associadas a um comple1o &A8. Esse poliA6 forma poros na mem3rana plasm/tica. Os poros formados pelo 7( permitem a sada passi2a de mol#culas solJ2eis? ons e /gua mas no permitem a sada de mol#culas grandes como as protenas. Essa situao resulta no influ1o 9 de /gua e ons nas c#lulas? le2ando G lise osmtica. <act#rias ou c#lulas infectadas por microorganismos intracelulares? como os 2rus? so destrudas desse modo. 2. Opsoni0ao e promoo de fagocitoseP 33 e i33 ligamAse G superfcie das c#lulas infectadas e atuam como opsoninas? por ligaremAse especificamente a receptores na superfcie de neutrfilos e macrfagos. Essas c#lulas possuem receptores de mem3rana? >ue recon-ecem o 33 e i33. O recon-ecimento e ligao nesses receptores promo2e um contato pr1imo entre o fagcito e as partculas a serem fagocitadas? o >ue facilita a fagocitose. Receptores para o complemento e receptores para a poro %c cooperam para mediar a ligao e a fagocitose das partculas opsoni0adas. 3. (nafiloto1inas e ati2ao da inflamaoL 3a? 4a e &a so c-amados de anafiloto1inas por >ue indu0em a li3erao de mediadores inflamatrios solJ2eis >ue causam r/pido aumento na permea3ilidade 2ascular. Receptores para 3a e 4a so e1pressos em mastcitos? 3asfilos? c#lulas do mJsculo liso e linfcitos. Receptores para &a so e1pressos nos mastcitos? 3asfilos? neutrfilos? moncitos e macrfagos e c#lulas do endot#lio 2ascular. O maior efeito das anafiloto1inas ao ligarAse em 3asfilos e mastcitos # a li3erao de grMnulos 10 contendo aminas 2asoati2as como a -istamina e -eparina. ( -istamina aumenta a permea3ilidade 2ascular e estimula a contrao da musculatura lisa dos 2asos? aumentando o flu1o de sangue para os locais de inflamao. 4. Suimiota1ia para leuccitos T a &a # >uimiot/tica para neutrfilos e estimula a migrao direta dessas c#lulas so3 um gradiente de concentrao. Em resposta ao estmulo >uimiot/tico? os leuccitos saem do sangue atra2#s de espaos entre as c#lulas endoteliais e migram nos tecidos em direo ao local da inflamao. 9esse local? eles e1ercero suas ati2idades de com3ate ao agente agressor. ( &a tam3#m pode ter um efeito direto no endot#lio dos 2asos causando aumento da permea3ilidade 2ascular independente da li3erao de -istamina pelos mastcitos. ( com3inao desses efeitos ser2e para promo2er o acJmulo de protenas plasm/ticas e c#lulas para uma resposta inflamatria aguda efeti2a a infec@es e partculas estran-as. &. !olu3ili0ao e fagocitose de imunocomple1osL os imunocomple1os podem ser lesi2os por se depositarem na parede dos 2asos? ati2ar o complemento e le2ar a rea@es inflamatrias nos tecidos 2i0in-os. ( limpe0a dos imunocomple1os pode ser mediada pelo complemento pelas c#lulas do sistema monofagoctico fagocit/rio. Essa funo # largamente mediada pelo 1 na superfcie de eritrcitos. omple1os so adsor2idos pelo cR1 e1presso na superfcie dessas c#lulas de2ido a alta afinidade entre o R1 e 33. #lulas fagocit/rias do fgado e 3ao so as respons/2eis pela remoo dos imunocomple1os das mol#culas de r1 na superfcie dos eritrcitos >uando esses passam pelos sinusides desses rgos. ;rIs propriedades caracteri0am a resposta natural ou inataL 1. U inespecfica. Ou se4a? # desencadeada e e1erce suas fun@es independentemente do agente en2ol2ido. 2. U desencadeada independente de e1posio pr#2ia ao agente. 3. 9o aumenta de intensidade em e1posi@es su3se>Hentes )no possui memria*. 11 O3ser2aoL ,/rios componentes da resposta natural ou inata )macrfagos? 9O? complemento* atuam tam3#m durante a resposta imunolgica ad>uirida? complementando e interagindo com os fatores respons/2eis por a>uela resposta )anticorpos? linfcitos*. Ou se4a? esses componentes so efetores tanto da resposta natural como da resposta ad>uirida. esposta imunol,-ica espec+fica O segundo con4unto de defesas do organismo contra agentes estran-os # constituido pela !esposta imunolgica especfica ou ad0ui!ida) U especfica por>ue resulta da e1posio a agentes patogInicos e # direcionada especificamente contra o agente >ue a indu0iu. omo resultante? os seus mecanismos efetores sero direcionados especificamente esse agente. Esse tipo de resposta # c-amado genericamente de resposta imunolgica e a resistIncia especfica associada a ela # c-amada de imunidade) ( imunidade? ou resistIncia ad>uirida? pode ser ad>uirida ativamente )pela 2acinao ou pela e1posio ao agente*? ou passivamente )rece3ida da me atra2#s do colostro ou pela placentaP ou ainda pela administrao de soro imune especfico*. (s respostas imunolgicas especficas esto associadas a outros tipos de leuccitos? diferentes dos en2ol2idos na resposta natural inespecfica. Os leuccitos en2ol2idos nesse tipo de resposta so os linfcitos e so encontrados em maior >uantidade e a maior parte do tempo no tecido linf/tico )linfonodos? 3ao? acJmulos linfides nos tecidos* e tam3#m circulando no sangue. ( circulao dos linfcitos no sangue e a sua locali0ao nos tecidos linfides # importante para a sua funo de encontrar? recon-ecer e com3ater os agentes patogInicos. Em3ora possa parecer >ue os linfcitos so c#lulas predominantemente sanguneas? a sua grande maioria est/ locali0ada nos tecidos linfides. U nesses locais >ue eles e1ercem as suas fun@es principais. Rma 2e0 >ue os linfcitos encontrem o agente agressor )microorganismos? por e1emplo*? o seu contato com o agente desencadeia uma s#rie de altera@es? >ue incluem ati2ao? proliferao e diferenciao celularP comunicao >umica com outros componentes do sistema imunolgico? produo de imunoglo3ulinas )anticorpos*. ;odas essas ati2idades tIm por o34eti2o com3ater o agente patogInico encontrado. K/ dois tipos principais de resposta imunolgica especficaL A Imunidade "umo!al ou sist%mica. Esse tipo de imunidade # mediado por imunoglo3ulinas )Igs* s#ricas? tam3#m c-amadas de anticorpos. Esses anticorpos possuem 2/rias ati2idades direcionadas ao com3ate aos agentes patogInicos. (s imunoglo3ulinas so produ0idas por 12 uma classe especial de linfcitos )linfcitos <*? >ue se diferenciam em plasmcitos )c#lulas produtoras de anticorpos* aps contato e estimulao por um antgeno especfico. Ou se4a? o contato com o antgeno estimula os linfcitos 1? >ue se diferenciam em plasmcitos >ue passam a produ0ir imunoglo3ulinas )anticorpos* especficos contra o agente >ue os estimulou. A Imunidade celula! ou I2, )imunidade mediada por c#lulas*. U mediada por linfcitos especficos )linfcitos ; au1iliaresP linfcitos ; citot1icos*? os >uais atacam diretamente c#lulas infectadas )linfcitos citot1icos* e=ou li3eram su3stMncias >umicas )interleucinas* >ue ati2am e estimulam outras c#lulas a com3ater o agente infeccioso )linfcitos ; au1iliares*. Rm dos resultados da resposta imunolgica especfica # a produo de c#lulas de memria T linfcitos ; e < A >ue so especficos para o agente >ue indu0iu a sua produo. Essas c#lulas tem um tempo de 2ida prolongado? podendo durar 2/rios anos ou por toda a 2ida do animal. !e o agente patogInico for no2amente encontrado T mesmo anos depois A as c#lulas de memria au1iliam o organismo a responder mais depressa. ( produo de c#lulas ; e < de memria ocorre apenas >uando a imunidade foi ad>uirida ati2amente? atra2#s de uma infeco natural ou de 2acinao. ( gerao de uma induo a formao de c#lulas de memria constituiAse em um dos o34eti2os principais da 2acinao. Ento? >uando -/ e1posio a um agente patogInico? o sistema imunolgico responde atra2#s da produo de linfcitos < e ; de duas categoriasL 1. Efetores? >ue iro responder diretamente contra o agente )se4a atra2#s da produo de anticorpos? interleucinas ou agindo diretamente contra o agente* e 2. De memria? >ue so especificos contra o agente? mas no iro agir nessa ocasio. %icaro como uma populao Vde reser2aW? para >uando o organismo for e1posto no2amente ao agente? consiga responder mais rapidamente e efeti2amente. ;rIs propriedades caracteri0am a resposta imunolgica ad>uiridaL 1. U especfica para o agente >ue a indu0iu. 2. Depende de e1posio pr#2ia ao agente 3. (umenta de intensidade em e1posi@es su3se>uentes )possui memria* Resposta imunolgica )resumo* Suando um agente patogInico penetra no organismo e comea a se multiplicar? o sistema imunolgico comea uma corrida contra o tempo. O o34eti2o # com3ater e eliminar o patgeno e c#lulas infectadas ou lesadas antes >ue a infeco supere as defesas do corpo? tendo como resultado a progresso da infeco >ue pode resultar em doena se2era e 13 e2entualmente a a morte. .odem ser necess/rios 5 a 1+ dias para o desen2ol2imento de uma resposta imunolgica especfica )linfcitos ; citot1icos? ; au1iliares? anticorpos* contra o agente. En>uanto isso? o organismo defendeAse atra2#s de respostas imunolgicas inespecficas ou naturais. 'euccitos procuram o agente patogInico? c#lulas 3acterianas ou partculas 2irais? e tentam destruAlo. !o ati2adas defesas como o sistema complemento? >ue ati2a o processo inflamatrio e au1ilia no com3ate G infeco )opsoni0ao? lise de 3act#rias? etc...*. !o produ0idos mediadores como os I%9s >ue conferem resistIncia aos 2rus. #lulas e mediadores inflamatrios so recrutados ao local da infeco para com3ater e controlar o agente. Os mecanismos desencadeados pela resposta natural tem dois o34eti2osL 1. ontrolar ou limitar a infeco? at# >ue as defesas especficas este4am prontas e 2. .reparar e au1iliar no desen2ol2imento da resposta especifica. Em muitos casos? a resposta inespecfica consegue limitar e com3ater a infeco? mesmo antes da resposta imunolgica ad>uirida estar desen2ol2ida totalmente. ( partir dos 4A& dias aps a infeco? comeam a aparecer os componentes da resposta imunolgica ad>uirida )>ue foram indu0idos pela e1posio ao agente*. (t# ento? foram os componentes da resposta inespecfica >ue limitaram e com3ateram o agente patogInico. O tempo >ue le2a para o aparecimento da resposta especfica # tempo necess/rio para o recon-ecimento do antgeno? ati2ao das c#lulas imunolgicas )<? ;*? proliferao dessas c#lulas e finalmente diferenciao. Esse perodo # de apro1imadamente 4A& dias para linfcitos ; e de 5A1+ dias para linfcitos <. Ento? fica e2idente a importMncia da imunidade inespecfica? >ue encarregaAse de controlar e limitar o agente en>uanto a resposta especfica no est/ totalmente desen2ol2ida? e isso le2a alguns dias. ( partir do desen2ol2imento da resposta especfica? esta passa a com3ater o agente e # respons/2el pela eliminao do agente e recuperao clnica do animal na infeco prim/ria. Suando de uma segunda e1posio ao agente? a resposta # muito mais r/pida? pois os componentes especficos )linfcitos ; e <* ati2ados e proliferados durante a e1posio prim/ria? 4/ esto em maior nJmero. .or isso? na resposta imunolgica secund/ria os componentes especficos so os maiores respons/2eis pelo com3ate ao agente. )omponentes do sistema imunol,-ico 14 *. 'r-.os O sistema imunolgico # um sistema comple1o de rgos? c-amados genericamente de rgos linfides? distri3uidos pelo corpo do animal. De acordo com a sua funo? os rgos do sistema imunolgico so classificados em 1.prim/rios e 2. secund/rios. Os !g+os p!im&!ios ou cent!ais so os principais locais de linfopoiese )produo de linfcitos*. 9esses locais os linfcitos so produ0idos a partir de c#lulas progenitoras? se diferenciam? proliferam e sofrem maturao? tornandoAse c#lulas funcionais. 9o perodo em3rion/rio? a -ematopoiese inicia no saco 2itelnico e fgado fetal. U nesses rgos >ue os linfcitos ad>uirem seus receptores de superfcie? >ue iro permitir o recon-ecimento e ligao especfica com os antgenos. U tam3#m nos rgos prim/rios >ue os linfcitos reati2os contra antgenos prprios do organismo so destruidos ou inati2ados )seleo negati2a*. Os rgos linfides prim/rios dos mamferos so a medula ssea )principalmente de ossos c-atos*? onde todos os linfcitos so produ0idos );? < *P o fgado no perodo fetal? >uando apresenta funo de -ematopoieseP e o timo? onde os linfcitos ; amadurecem e atingem a sua competIncia funcional. 9as a2es? os linfcitos < originamAse na 1u!sa de 3a'!icius? da a denominao linfcitos <. 9os mamferos? o rgo e>ui2alente / <ursa # a medula ssea. ( medula ssea do esterno? das 2#rte3ras? dos ossos ilacos e da costela # a principal respons/2el pela -ematopoiese. Os !g+os linfides secund&!ios incluem os linfonodos? 3ao? amgdalas? assim como acJmulos no encapsulados de c#lulas linfides distri3uidos pelo organismo. Os agregados linfides locali0ados so3 as superfcies mucosas )2ias a#reas? trato digesti2o? urogenital* so denominados 2A45 )mucosa6associated l7mp"oid tissue*? cu4o e1emplo mais con-ecido so as placas de .eCer no intestino delgado. Os linfcitos produ0idos e amadurecidos nos rgos linfides prim/rios migram at# os rgos secund/rios? onde iro residir e interagir entre si e com antgenos? pro2ocando um processo denominado de e1panso clonal. Essa e1panso de clones especficos de linfcitos ocorre em resposta ao recon-ecimento e contato com antgenos especficos e tem como o34eti2o aumentar a populao de c#lulas reati2as contra um agente determinado. 15 Os rgos secund/rios esto locali0ados estrategicamente? 4unto aos poss2eis locais de entrada de agentes patogInicos. Os linfonodos se distri3uem por todo o corpo? de modo >ue a linfa drenada dos mais diferentes locais se4a direcionada e filtrada nesses rgos. Os linfonodos? assim como os outros rgos secund/rios so os locais onde as c#lulas linfocit/rias )linfcitos < e ;* entram em contato com os antgenos dos agentes infecciosos. .raticamente todos os rgos e 2/rios tecidos de sustentao possuem agregados pouco definidos de tecido linfide. Dessa forma? todo o antgeno >ue penetrar no organismo? por >ual>uer 2ia? ser/ primeiro condu0ido pela 2ia linf/tica a algum tecido linfide. (li inicia a interao entre o antgeno e as c#lulas do sistema imunolgico. .ortanto? praticamente nen-um antgeno de2e ter acesso a circulao sangunea sem antes ter sido in2estigado e atacado pelo sistema imunolgico em um rgo linfide secund/rio. (ntgenos >ue forem direta ou indiretamente introdu0idos na corrente 16 sangHnea sero XfiltradosY no 3ao onde -a2er/ o contato antigInico com as c#lulas do sistema imunolgico. /. )0lulas (s c#lulas en2ol2idas na resposta imune pertencem G lin-agem -emacitopoi#tica? cu4as c#lulas progenitoras )c#lulas tronco ou -emocito3lastos* encontramAse na medula ssea. Essas c#lulas podem dar origem a >ual>uer das c#lulas sanguneas )%igura*. O processo de -ematopoiese inicia na fase fetal e continua por toda a 2ida do animal. (s c#lulas mais importantes no sistema imunolgico so os leuccitos? os >uais diferenciamAse a partir de duas lin-agens L linfide e mielide. Da lin-agem linfide diferenciamAse os linfcitos <?; e as c#lulas 9O. Da lin-agem mielide diferenciamAse os moncitos? macrfagos? neutrfilos? eosinfilos e 3asfilos. Os leuccitos podem ser classificados morfologicamente conforme a presena de grMnulos no citoplasma em granulcitos )neutrfilos? 3asfilos? eosinfilos* e agranulcitos )linfcitos? moncitos*. Outra forma de classificao # >uanto a forma do nJcleoL polimorfonucleares e mononucleares. Os linfcitos 5 e 1 so componentes do sistema imunolgico especfico? en>uanto as outras c#lulas tam3#m atuam como efetoras das defesas inespecficas do organismo. 17 ( primeira lin-a de defesa celular # composta pelos fagcitos) O termo fagcito refereAse Gs c#lulas com ati2idade fagoctica. Os mac!fagos teciduais )deri2ados dos moncitos sanguneos* e neutrfilos so as c#lulas >ue possuem ati2idade fagocit/ria rele2ante. Essas c#lulas so produ0idas pela medula ssea? circulam pelo sangue e saem da circulao e in2adem os tecidos orientadas por mediadores >umicos li3erados nos locais de inflamao. O mo2imento de sada dos 2asos e in2aso dos tecidos # c-amado de diapedese. 9o local da inflamao? >ue # produ0ida em resposta ao agente patogInico? os fagcitos iro e1ercer suas fun@es de fagocitose e li3erao de en0imas proteolticas? >ue au1iliam no processo de resoluo do processo inflamatrio e reorgani0aotecidual. Os linfcitos constituem a principal lin-a de defesa do sistema imunolgico? se4a atra2#s da imunidade mediada por c#lulas )I7* ou pela produo de anticorpos. E1istem 2/rios tipos de linfcitos. Os linfcitos 5 au/ilia!es )-elper* coordenam toda a resposta imune? recon-ecendo o agente agressor e ati2ando as diferentes fun@es efetoras atra2#s de 18 su3stMncias >umicas )linfocinas*. Os linfcitos 5 citot/icos atuam diretamente so3re as c#lulas anormais? se4am elas infectadas ou tumorais? destruindoAas. Os linfcitos 1 ati2ados pela resposta imunolgica )contato com o antgeno e linfocinas* proliferam e diferenciamAse em plasmcitos. Os plasmcitos produ0em grande >uantidade de anticorpos especficos )imnoglo3ulinas* >ue possuem papel muito importante no com3ate ao agente agressor. (ranul,citos )polimorfonucleares ou .79s* Os g!anulcitos so assim c-amados pela presena de grandes grMnulos no seu citoplasma. Eles desempen-am um importante papel como a primeira lin-a de ata>ue contra agentes patogInicos in2asores? principalmente 3act#rias. O seu tempo de 2ida # relati2amente curto. Duram em m#dia de seis a oito -oras no sangue e de dois a trIs dias nos tecidos? aps a diapedese? ao contr/rio dos macrfagos teciduais >ue podem durar meses. Os granulcitos representam apro1imadamente $+ a 5+Z dos leuccitos do sangue perif#rico. !o3 estmulo de fatores inflamatrios como a I'A8 )interleucina 8*? saem da circulao para os tecidos. Suando os granulcitos entram em contato com um agente patogInico? li3eram o conteJdo do seus grMnulos para destruir os patgenos. (s su3stMncias >umicas li3eradas ser2em para 2/rios propsitos? >ue incluem a destruio do patgeno e a comunicao >umica da in2aso do patgeno a outros componentes do sistema imunolgico. 9o entanto? muitas 2e0es essas su3stMncias tam3#m lesam tecidos e c#lulas saud/2eis? contri3uindo para o agra2amento da leso inflamatria. ( funo predominante dos granulcitos # a fagocitose. Os granulcitos podem ser diferenciados em trIs su3tipos de acordo com sua afinidade por corantesL Os neut!filos tIm este nome por>ue seus grMnulos no se coram com corantes 3/sicos ou eosina )portanto? eles so neutros[neutrfilos*. OriginamAse da medula ssea a partir da 19 maturao da lin-agem mielide. .osteriormente? passam para o compartimento medular de reser2a onde podem persistir por um perodo de tempo 2ari/2el? at# >ue -a4a um estmulo perif#rico inflamatrio >ue desencadeie o seu recrutamento? pro2ocando sua sada para a circulao sangHnea. !o os granulcitos predominantes da circulao sangHnea. Eles circulam constantemente pelo sangue? representando em torno de 6+Z dos granulcitos circulantes. O nJcleo # geralmente 3iA ou trilo3ulado. O nJmero de l3ulos indica a idade do neutrfilo. ;anto no sangue como nos tecidos? os neutrfilos no so capa0es de se di2idir e tIm 2ida curta. Os grMnulos no citoplasma dos neutrfilos cont#m en0imas como -idrolases /cidas? mielopero1idase e liso0ima. Os grMnulos podem ser de dois tiposP prim/rios )a0urfiros* >ue aparecem precocemente e apresentam a morfologia tpica dos lisossomas e >ue contIm mielopero1idase e os secund/rios )especficos* >ue so pero1idase negati2os e >ue contIm lactoferrina? liso0ima e fosfatase alcalina. 9o citoplasma? e1istem ainda grandes depsitos de glicogInio? >ue podem ser utili0ados na gliclise possi3ilitando o funcionamento da c#lula >uando esta est/ em condi@es de anaero3iose. Os neutrfilos so particularmente responsi2os a agente >uimiot/ticos? c-egando rapidamente aos locais de inflamao. Suando eles detectam um sinal >umico? podem dei1ar a corrente sangHnea? entrar nos tecidos infectados e destruir patgenos e partculas estran-as por fagocitose. 9a fagocitose? a partcula estran-a ou o patgeno # cercado? ingerido e digerido. (l#m de lise intracelular aps fagocitose? os neutrfilos podem destruir partculas e agentes infecciosos no meio e1tracelular? atra2#s de suas en0imas proteolticas. Os neutrfilos so particularmente importantes na infeco aguda e principalmente na defesa contra 3act#rias. Os eosinfilos tIm este nome por>ue os seus grMnulos so facilmente corados pela eosina. Eles tam3#m circulam pela corrente sangHnea? constituindo de 2 a &Z dos leuccitos circulantes. (presentam 2/rios grMnulos citoplasm/ticos e o nJcleo costuma ser 3ilo3ulado. Os eosinfilos apresentam alguma capacidade de fagocitar e tam3#m podem sair da corrente sangHnea e penetrar em tecidos. ( sua funo principal # a destruio de agentes patogInicos >ue so muito grandes para serem fagocitados? como certos parasitas como os -elmintos. 9esses casos? os eosinfilos li3eram o conteJdo de seus grMnulos >ue causam les@es na superfcie )mem3rana* do agente. O contato dos eosinfilos com o 2erme ser/ maior se este esti2er reco3erto com anticorpos do tipo IgE ou Ig\? pois os eosinfilos possuem receptores para essas imunoglo3ulinas em sua mem3rana. Os 'asfilos tIm este nome por>ue so facilmente corados com corantes 3/sicos 20 )alcalinos*. Eles tam3#m circulam pela corrente sangHnea? por#m com pouca fre>uIncia e tIm um papel menos direto na defesa contra agentes patogInicos. Eles so capa0es de li3erar su3stMncias )-istamina? -eparina* >ue estimulam a inflamao e respostas al#rgicas. .ossuem receptores para IgE na sua mem3rana e li3eram seus grMnulos >uando entram em contato com o antgeno. ( li3erao de -istamina e outras su3stMncias # respons/2el pelos efeitos clnicos o3ser2ados na resposta al#rgica. <asfilos >ue in2adem e fi1am residIncia nos tecidos do origem aos mastcitos. ( principal funo dos mastcitos #? pro2a2elmente? participar da defesa contra parasitas no tu3o digesti2o. Mon,citos e macr,fa-os O sistema mononuclear fagoctico )antigo sistema retculoAendotelial* consiste de c#lulas da lin-agem monocticaAmacrof/gica. Estas c#lulas apresentam morfologia semel-ante e origem comum. .ossuem nJcleo arredondado e so ati2amente fagocticos. Os moncitos no tIm grMnulos no citoplasma e? 4untamente com os linfcitos? so c-amados de agranulcitos. !o deri2ados das c#lulas tronco na medula ssea e tIm como principais fun@es a fagocitose e a apresentao de antgenos aos linfcitos ; au1iliares )os macrfagos e1pressam mol#culas do 7K classe II na sua superfcie*. (l#m dessas fun@es? os macrfagos secretam mol#culas >ue amplificam a resposta imune? controlam a inflamao? contri3uem diretamente para o reparo de danos teciduais atra2#s da remoo de tecido morto? em processamento de morte e danificado e au1iliam no processo de cicatri0ao. ( mol#cula respons/2el por mediar grande parte dessas fun@es # a interleucina T1 )I'A1* >ue # secretada pelos macrfagos. Os moncitos no fagocitam ati2amente? at# dei1arem a corrente sangHnea e entrarem nos tecidos. Ento eles amadurecem e se tornam mac!fagos? >ue atacam e fagocitam agentes patogInicos e partculas estran-as. En>uanto >ue os neutrfilos podem ser mais ati2os nas fases iniciais de uma infeco? os macrfagos so capa0es de manter um ata>ue duradouro contra os agentes patogInicos. 9os tecidos podem permanecer por dias at# meses? possuem meta3olismo ati2o e so capa0es de se multiplicar. Suando ocorre uma infeco? os moncitos so atrados para a /rea da infeco por su3stMncias >umicas li3eradas no processo inflamatrio. ] medida >ue eles se deslocam para os tecidos? so3 a ao de mediadores >umicos? eles crescem? amadurecem e se tornam macrfagos. Ou se4a? sofrem um processo de modificao >ue os transforma em c#lulas 21 preparadas para a sua funo. ,/rios estmulos originados no local da inflamao so capa0es de atrair e estimular=ati2ar macrfagos. .or causa da sua migrao atra2#s dos tecidos para os locais de infeco? estas c#lulas so algumas 2e0es c-amadas de mac!fagos ci!culantes. K/ outros macrfagos >ue esto sempre locali0ados em certos tecidos e rgos do corpo do animal. Estes so c-amados mac!fagos fi/os ou !esidentes e de acordo com os tecidos onde se encontram rece3em denomina@es diferentes L c#lulas de 89pfe! no fgado? mac!fagos alveola!es nos pulm@es? c#lulas da mic!glia no sistema ner2oso central? osteoclastos nos ossos? "isticitos na derme? c#lulas de 4ange!"ans na epiderme. (l#m disso so tam3#m encontrados no 3ao? nos gMnglios linf/ticos? na medula ssea e na ca2idade peritoneal? onde esto os rgos a3dominais. Estes macrfagos desempen-am um papel particularmente crtico na luta contra agentes patogInicos? >ue tendem a formar colNnias num determinado lugar do corpo? como a 22 coloni0ao dos al2#olos pulmonares )pe>uenas 3olsas de ar* durante uma pneumonia. (o contr/rio dos linfcitos? >ue podem penetrar nos tecidos e recircular no sangue? os macrfagos so raramente recirculantes )e1ceoL c#lulas foliculares dendrticas*. Ou se4a? e1iste uma populao de moncitos ci!culantes )sem ati2idade fagoctica* >ue podem e2entualmente ser recrutados a locais de inflamao. 9esse processo so ati2ados? tornandoAse fagocticos )mac!fagos*. (l#m dos moncitos >ue em resposta a estmulos inflamatrios tornamAse macrfagos? e1iste uma populao de macrfagos 4/ residentes nos tecidos )em cada tecido rece3e uma denominao diferente*. Em resposta a um processo infeccioso? tanto os moncitos=macrfagos recrutados do sangue como os 4/ residentes so ati2ados e passam a com3ater o agente patogInico. Fa-ocitose O processo da fagocitose # crtico para um sistema de defesa inespecfico efica0 e tam3#m apia o desen2ol2imento da imunidade especfica. Ocorre em 2/rias etapasL 1. (derInciaL a mem3rana celular do fagcito adere G superfcie do patgeno. (lguns agentes patogInicos tIm grande c/psulas ou camadas prot#icas de re2estimento >ue dificultam a aderIncia. ( aderIncia fica mais f/cil se o patgeno ti2er sido opsoni-ado )re2estido por protenas do complemento ou por anticorpos*. Os macrfagos possuem receptores na sua mem3rana para componentes do complemento e para anticorpos? o >ue facilita a fagocitose de partculas opsoni0adas. .artculas opsoni0adas so fagocitadas com eficiIncia muito maior do >ue partculas no opsoni0adas. :) Ingest+o; a mem3rana plasm/tica do fagcito 23 estende pro4e@es c-amadas pseudpodos )pseudo[falsoP podo[p#*? >ue en2ol2em o patgeno? >ue fica ento dentro de uma 2. 2escula c-amada fagosoma. <) Digest+oL o fagosoma agora li2raAse da mem3rana celular e entra no citoplasma. 9o citoplasma? eles entram em contato e fundeAse com lisossomas )2esculas >ue contIm en0imas digesti2as e su3stMncias 3actericidas*? formando um fagolisossoma. O fagolisossoma destroi a maioria dos tipos de 3act#rias em 1+ a 3+ minutos. O fagolisossoma agora cont#m apenas material no diger2el? sendo ento c-amado do corpo residual. Este corpo mo2eAse na direo da mem3rana celular e descarrega o seu li/o para fora da c#lula. ! papel dos fa-,citos na imunidade espec+fica O principal papel dos fagcitos # como um mecanismo de defesa inespecfico. Os fagcitos cercam e atacam >ual>uer agente patogInico? c#lula ou partcula )como o plen*? recon-ecidos como estran-os? os ingerem e tentam destruAlos. Ento? uma das principais fun@es dos fagcitos # a fagocitose) ;oda2ia? os fagcitos tam3#m desempen-am um papel fundamental no desen2ol2imento da imunidade especfica. 'em3ramos >ue uma resposta imunolgica especfica representa o desen2ol2imento de defesas dirigidas contra um agente patogInico especficoP a 2elocidade e a efic/cia da resposta imunolgica especfica mel-oram a cada in2aso su3se>Hente do agente patogInico. Rma 2e0 >ue um patgeno ten-a sido ingerido e digerido por um macrfago? fragmentos desse patgeno? 2em G superfcie do macrfago sendo apresentados )e1postos* por 24 mol#culas con-ecidas como 7K? ou ,omple/o 2aio! de =istocompati'ilidade? aos linfcitos ;. .rotenas de 3act#rias? fungos? 2rus? proto0o/rios? al#m de outros microorganismos so apresentadas pelos macrfagos aos linfcitos ;. Dependendo do tipo de antgeno e do tipo do 7K )classe I e II* >ue o apresenta? o antgeno ser/ recon-ecido por um tipo de linfcito ; )au1iliar ou citot1ico*? desencadeando um de dois tipos 3/sicos de imunidade especfica )-umoral ou celular*. (s clulas ap!esentado!as de antgeno (AP,s) so uma populao -eterogInea de leuccitos com capacidade imunoestimulatria. Essas c#lulas so encarregadas de processar e apresentar antgenos aos linfcitos. (l#m dos fagcitos? c#lulas epiteliais? c#lulas dendrticas e endoteliais? al#m de linfcitos < tam3#m podem apresentar antgenos aos linfcitos ; au1iliares. (s c#lulas apresentadoras de antgeno encontramAse principalmente na pele e rgos linfides. ( encontramAse as c#lulas de 'anger-ans? c#lulas foliculares dendrticas )linfonodos? 3ao? 7(';*. (s c#lulas dendrticas apresentam pro4e@es na mem3rana citoplasm/tica semel-antes a espin-os. Entre essas c#lulas esto as c#lulas dendrticas interdigitantes e as c#lulas foliculares dendrticas. (s c#lulas dendrticas interdigitantes esto presentes no interstcio de 2/rios rgos. !o a3undantes nas /reas ricas em c#lulas ; do linfonodo e do 3ao. 9a epiderme? rece3em a denominao de c#lulas de 'anger-ans. !o c#lulas muito eficientes na apresentao de antgenos a linfcitos ; au1iliares. !o capa0es de carrear antgenos desde a epiderme at# o linfonodo mais pr1imo para dar incio G resposta imune. (s c#lulas foliculares dendrticas esto presentes no centro germinati2o dos folculos linf/ticos dos linfonodos? 3ao e dos agregados linfocit/rios associados Gs mucosas )7(';*. 25 &inf,citos Os linfcitos so deri2ados da lin-agem linfide de c#lulas >ue deri2aAse das c#lulas tronco da medula ssea. Desen2ol2emAse nos rgos linfides prim/rios e transitam pelo sangue at# os rgos linfides secund/rios. Os linfcitos esto distri3uidos pelo organismo? principalmente nos rgos linfides como linfonodos? 3ao e medula ssea. (l#m disso? essas c#lulas esto constantemente recirculando pelo sangue. Os linfcitos so as c#lulas respons/2eis pelo recon-ecimento do antgeno e pela montagem da resposta imunolgica. omo -/ diferentes formas de resposta imunolgica 26 )mediada por anticorpos? por c#lulas? memria imunolgica*? e1istem tam3#m diferentes tipos de linfcitos. E1istem 2/rias popula@es e su3popula@es de linfcitos? cada >ual com caractersticas e fun@es efetoras diferentes. (s su3popula@es de linfcitos no podem ser distinguidas com 3ase na sua estrutura e morfologia )no so distingH2eis ao microscpio ptico* e sim atra2#s de marcadores )protenas* de superfcie. .or isso? muitas 2e0es as popula@es de linfcitos so denominadas pelos marcadores de mem3rana >ue os mesmos possuem )e1LD8? D4*. Em geral? as popula@es de linfcitos no podem ser distinguidas pela microscopia. ( e1ceo est/ nos linfcitos grandes com grMnulos no citoplasma c-amados de c#lulas 9O )natural Biller*. Dentre os linfcitos? trIs popula@es principais podem ser recon-ecidasL linfcitos <? linfcitos ; e 9O. (s duas primeiras so encarregadas da resposta imunolgica especfica e a Jltima # en2ol2ida na resposta inespecfica. Os linfcitos < apresentam como marcadores de superfcie as imunoglo3ulinas )Igs*? das classes IgD e Ig7. Os linfcitos ; apresentam como marcadores o ;R )V5 cell !ecepto!W* e D3. Diferentes popula@es de linfcitos ; podem apresentar outros marcadores? al#m do ;R e D3 >ue as diferenciam. (s c#lulas 9O no apresentam marcadores de superfcie. .or isso so tam3#m c-amadas de c#lulas nulas )Vnull cellsW*.( especificidade da resposta imunolgica # determinada pelos linfcitos por >ue essas c#lulas tIm a capacidade de recon-ecer especificamente os diferentes antgenos. Os linfcitos 1 originamAse na medula ssea e completam a sua maturao nos linfonodos e outros acJmulos linfides perif#ricos? aps contato com o antgeno. Os linfcitos < caracteri0amAse por apresentar imunoglo3ulinas )classes IgD e Ig7* em sua superfcie. Essas imunoglo3ulinas funcionam como receptores para esta3elecer contato e permitir o recon-ecimento de antgenos. O prprio linfcito sinteti0a essas imunoglo3ulinas e as insere na mem3rana. (s imunoglo3ulinas so receptores antigInicos e cada c#lula possui um grande nJmero )mil-ares* dessas mol#culas na superfcie. .ara cada linfcito <? todas as imunoglo3ulinas presentes na mem3rana so idInticas entre si. Desta forma? um determinado linfcito < s se con4ugar/ e responder/ a um Jnico determinante antigInico. Rma populao de linfcitos >ue deri2aAse de um Jnico linfcito pela sua multiplicao? estimulada pelo encontro com o antgeno? # denominada de clone. .or serem deri2adas de um Jnico progenitor? todos os linfcitos >ue comp@e um clone apresentam as imunoglo3ulinas idInticas na sua superfcie. Os linfcitos < so encontrados no crte1 dos linfonodos? 0ona marginal do 3ao? 27 medula ssea e placas de .eCer do intestino? al#m de outros acJmulos linfides. (penas um pe>ueno nJmero dessas c#lulas circula no sangue. Os linfcitos < so respons/2eis pela imunidade "umo!alL em contato com antgenos especficos? eles proliferam )multiplicamAse? originando mil-ares de linfcitos ^clones_ com especificidade idIntica* e se diferenciam em plasmcitos. Os plasmcitos ento produ0em grande >uantidade de antico!pos especficos para o antgeno >ue originou a sua proliferao e diferenciao. (lgumas das c#lulas especficas >ue proliferaram em resposta ao antgeno no diferenciamAse em plasmcitos? permanecendo no centro germinati2o dos linfonodos. Essas c#lulas constituem as clulas de mem!ia. Diante de uma reAe1posio ao mesmo antgeno? as c#lulas de memria iro responder mais r/pida e eficientemente? pois grande parte dos processos de recon-ecimento? ati2ao e proliferao 4/ ocorreram durante a resposta inicial )prim/ria*. ( maturao=competIncia funcional dos linfcitos < s ocorre aps o contato com o antgeno especfico >ue geralmente ocorre nos rgos linfides secund/rios )linfonodos? 3ao? timo? 7(';*. ( maioria dos linfcitos < e1pressa protenas do 7KAII na mem3rana e apresenta tam3#m outros marcadores? como D16? D2+ e D22. omo os linfcitos < e1pressam em sua superfcie o 7KAII? podem funcionar como apresentadores de antgeno para os linfcitos ; au1iliares )2erL apresentao de antgeno*. Receptor antigInico de c#lulas <L cada linfcito < # reco3erto por cerca de 2++.+++ a &++.+++ receptores antigInicos idInticos. (l#m de se con4ugar com o antgeno especfico e sinali0ar para a c#lula < responder? esses receptores tam3#m mediam a internali0ao )fagocitose* de antgenos. ( fagocitose resulta em protelise e processamento dos antgenos e a e1presso de fragmentos peptdicos pelas mol#culas do 7KAII da mem3rana. Esses receptores so mol#culas de imunoglo3ulinas )anticorpos* >ue esto inseridas na mem3rana. omo as imunoglo3ulinas nesse caso funcionam como receptores de c#lulas <? so tam3#m denominadas de receptores de c#lulas < )V< cell receptorsW? <R*? para diferenciar das imunoglo3ulinas circulantes. Em outras pala2ras? os anticorpos so formas solJ2eis dos <R secretados pelas c#lulas <=plasmcitos nos fludos corpreos. Os <Rs so estruturalmente semel-antes ao ;R )receptores de c#lula ;* e podem ser di2ididos em dois componentes funcionalmente diferentes. Rm componente se con4uga ao antgeno )regio 2ari/2el* e o outro en2ia o sinal apropriado para o interior da c#lula <. Os sinais en2iados para o interior da c#lula <? aps o contato com o antgeno? so os respons/2eis pela ati2ao? proliferao e diferenciao dos linfcitos < em plasmcitos. 28 Os linfcitos 5 so respons/2eis pela imunidade celular. OriginamAse na medula ssea e completam a sua maturao no timo )por isso so denominados de linfcitos 5*. Recon-ecem o antgeno aps processado? na superfcie de c#lulas apresentadoras de antgeno )(.s*. !emel-ante aos linfcitos <? aps o contato com o antgeno? esses linfcitos proliferam e se tornam efetores? no entanto? algumas c#lulas ; tam3#m permanecem como c#lulas de memria. E1istem 2/rias su3popula@es de linfcitos ; >ue so funcionalmente distintas e e1pressam diferentes marcadores de superfcie )marcadores fenotpicos*. Esses linfcitos recon-ecem e respondem a antgenos associados G superfcie de outras c#lulas? apresentados por mol#culas do 7K. (s c#lulas ; no recon-ecem antgenos solJ2eis? em sua conformao natural. ! recon-ecem antgenos prot#icos )antgenos ; dependentes*? aps serem processados pelas c#lulas apresentadoras de antgeno )(.s*. Os linfcitos ; podem ser di2ididos em duas popula@es principaisL 1. 4infcitos 5 au/ilia!es ); -elper? ;-*. !o c#lulas reguladoras da resposta imune. oordenam a ati2idade de 2/rios tipos de c#lulas en2ol2idas na resposta imunolgica. Esses linfcitos apresentam como marcador de mem3rana a mol#cula D4. .or isso? so tam3#m c-amados de linfcitos ; D4. Em contato com o antgeno? proliferam e li3eram as interleucinas >ue atuam so3re outras c#lulas do sistema imunolgico )linfcitos <? linfcitos citot1icos e macrfagos*? ati2ando essas c#lulas. Os ;- so mediadores tanto da resposta imune celular )linfcitos ; citot1icos* como da resposta -umoral )ati2idade dos linfcitos < e anticorpos*. E1istem duas popula@es principais de linfcitos ;D4? >ue diferem entre si pelas interleucinas >ue produ0emL a* 4infcitos 5">) !ecretam interleucinas >ue atuam principalmente estimulando a resposta celular )estimulam ;-? ;citot1icos? macrfagos? 9O*P 3* 4infcitos 5":. !ecretam interleucinas )I' T 4? &? 1+* >ue atuam principalmente estimulando a resposta -umoral )estimulam a proliferao e diferenciao de linfcitos < ` produo de anticorpos*. (s c#lulas ;- s recon-ecem um antgeno >uando este for apresentado em associao com uma mol#cula do 7K classe II. O 7K II se con4uga ao D4 e ao receptor de c#lula ; );R*. (s c#lulas >ue e1pressam 7K II na sua superfcie so as c#lulas apresentadoras de antgeno )(.s*. 29 2. 4infcitos 5 citot/icos );'s*. !o c#lulas ; >ue recon-ecem antgenos prot#icos produ0idos dentro de c#lulas infectadas )por 2rus ou 3act#rias intracelulares* ou tumorais e destroem essas c#lulas )citoto1icidade celular*. .ossuem como marcador de superfcie a mol#cula D8. .or isso so tam3#m c-amados de linfcitos ;D8. O mecanismo de destruio das c#lulas infectadas # c-amado de citoto/icidade e por isso so c-amados de linfcitos ; citot1icos ou ;'s )c7toto/ic 5 l7mp"oc7tes*. ( citoto1icidade # um processo dependente de estimulao pelas c#lulas ; au1iliares? atra2#s de interleucinas especficas. ( morte da c#lula infectada ocorre por apoptose ou por c-o>ue osmtico pro2ocados pelo ;'..ara se tornar citot1ico? o linfcito ;D8 depende de dois sinaisL 1.ontato com o antgeno e 2. Estmulo por interleucinas )deri2adas dos linfcitos ;D4*. Essa diferenciao )de D8 inati2o para ;'* ocorre nos tecidos? aps o contato com o antgeno. O estmulo antigInico para o D8 tornarAse citot1ico ocorre atra2#s da interao entre o ;RaD8 )da mem3rana do linfcito* com o 7KAIapeptdeo )na mem3rana da c#lula infectada*. O ;' s recon-ecer/ um peptdeo estran-o se este for apresentado em associao com uma mol#cula de 7K classe I. O 7KA I interage com o D8 a ;R. O 7KAI # e1presso 2irtualmente por todas as c#lulas? com e1ceo dos neurNnios. .or isso? 2irtualmente todas as c#lulas ^e1ceoL neurNnios_ >ue 2en-am a ser infectadas por um 2rus podem apresentar antgenos 2irais ao ;' e serem destrudas. Os D8=;'s desempen-am um papel muito importante na resposta imunolgica contra 2rus. (l#m de destruir as c#lulas infectadas? os ;'s podem ini3ir ou 3lo>uear a replicao do 2rus no interior da c#lula? atra2#s da secreo de interferons e fator de necrose tumoral );9%*. ( lise das c#lulas infectadas pelos ;'s ocorre por dois mecanismos principaisL >) 4ise osmtica) O ;'? em contato com a c#lula infectada? li3era no meio e1tracelular 30 su3stMncias denominadas de pe!fo!inas) Essas perforinas produ0em poros )a3erturas* na mem3rana plasm/tica da c#lula al2o. om isso? ocorre influ1o de /gua para o interior celular? le2ando G morte celular por lise osmtica. :) Apoptose. Os poros a3ertos pelas perforinas permitem a entrada de su3stMncias granulares )c-amadas de g!an-imas*? tam3#m secretadas pelos ;'s? para o interior das c#lulas al2o? le2ando G morte por apoptose) Receptor antigInico de c#lulas ; );R*L !o encontrados na superfcie dos linfcitos ;. ada linfcito possui de 1+.+++ a 2+.+++ ;Rs idInticos. .or outro lado? linfcitos diferentes possuem ;Rs com especificidades diferentes. .or isso? um linfcito s se con4ugar/ e responder/ a um Jnico epitopo. Diferentes epitopos so recon-ecidos por diferentes linfcitos. ada ;R consiste de duas cadeias peptdicas con4ugadoras de antgenos associadas a outras glicoprotenas >ue amplificam o sinal gerado pela con4ugao a um antgeno e transmitem ao interior da c#lula ;. Rm tipo de ;R consiste de duas cadeias c-amadas de e . Outro tipo de cadeias c-amadas e . De 6+ T 66Z dos ;R so =. Os ;R = podem recon-ecer o antgeno so0in-o T sem a participao do 7K. ( 2ariedade de ;Rs dispon2eis em um animal # cuidadosamente regulada. Rm animal de2e possuir uma populao de c#lulas ; diferentes >ue podem responder a tantos antgenos diferentes >uanto poss2el. (o mesmo tempo? no pode possuir ;Rs >ue se associem com antgenos prprios. (s c#lulas ; >ue possuem ;Rs >ue recon-ecem autoAantgenos so destrudas dentro do timo )deleo clonal*. Isso ocorre durante a 2ida fetal e ser2e para impedir a resposta imune contra antgenos prprios. E1iste uma terceira populao de c#lulas ;? >ue so c-amadas 4infcitos 5 sup!esso!es cu4a funo no est/ 3em esta3elecida. (parentemente so moduladores ou ini3idores da resposta imunolgica. ,lulas ?atu!al 8ille! )9O*L Rma terceira populao de linfcitos so as c-amadas c#lulas citot1icas naturais )Vnatural BillerW* ou simplesmente 9O. !o linfcitos grandes granulares? no fagocticos. (s c#lulas 9O no recirculam e no so encontradas no ducto tor/cico. !o encontradas principalmente nos rgos linfides secund/rios. De2ido G ausIncia de marcadores especficos de linfcitos < e ; na mem3rana )no possuem imunoglo3ulinas? D8 ou D4*? essas c#lulas eram inicialmente c-amadas de Fnull cellsF )c#lulas nulas T sem marcador*. (s c#lulas 9O tem a capacidade de recon-ecer e destruir de modo inespecfico c#lulas com altera@es na superfcie )c#lulas tumorais e c#lulas infectadas com 2rus*. 31 Representam uma importante lin-a de defesa nas infec@es 2ricas? so3retudo nos primeiros dias? >uando ainda no e1istem linfcitos ; e < especficos para o agente. ( morte celular indu0ida pelas 9O ocorre por apoptose >uando a 9O ati2ada li3era seus grMnulos para o meio e1tracelular? no espao entre a prpria 9O e a c#lula al2o. Essas c#lulas diferenciamAse dos ;'s por destrurem as c#lulas alteradas de modo inespecfico? independente do recon-ecimento de antgeno con4ugado com o 7K. ( ati2ao das c#lulas 9O ocorre >uando essas c#lulas entram em contato com a interleucina 2 )I'A2*? secretada pelos linfcitos ; D4.. ( ati2idade das c#lulas 9O # aumentada logo aps a infeco? por ao do interferon do tipo I )I%9A1*. ( citoto1icidade das c#lulas 9O pode ser aumentada se as c#lulasAal2o forem reco3ertas por anticorpos. (s c#lulas 9O possuem receptores >ue recon-ecem a regio constante )%c* das imunoglo3ulinas? facilitando a sua ligao e ati2idade citot1ica. Esse tipo de citoto1icidade associada a anticorpos # c-amada de (D (anti'od7 dependent cellula! citoto/icit7F*. (ssim? al#m de desempen-ar um papel importante de modo inespecfico no incio das infec@es? as c#lulas 9O tam3#m participam da resposta imunolgica especfica? tendo a sua funo facilitada pelos anticorpos. III. %NTI)!P!S Os antcorpos so protenas pasmtcas da fama das gobunas (por sso tambm chamados de munogobunas, Igs), produzdas peos pasmctos, que so cuas que dervam-se dos nfctos B, em resposta estmuos antgncos. As munogobunas tm a capacdade de gar-se especfcamente ao antgeno que nduzu a proferao dos nfctos que os produzem. A gao das munogobunas nos antgenos pode resutar na natvao ou destruo dos mesmos, por ao dreta ou com a partcpao de outros componentes do sstema munogco (cuas, compemento). Os antcorpos medam uma sre de funes na resposta munogca adqurda e consttuem-se no prncpa mecansmo efetor da resposta munogca humora. omo citado anteriormente? so as formas solJ2eis dos receptores de linfcitos < e possuem a mesma especificidade. Ou se4a? o <R de um determinado linfcitos < possui a mesma especificidade antigInica de um anticorpo secretado por esse linfcito. Da mesma forma? todos os <Rs e anticorpos secretados por um mesmo 32 linfcito < possuem a mesma especificidade. Os seus stios de ligao no antgeno so idInticos e por isso recon-ecem e ligamAse no mesmo antgeno. .or outro lado? <Rs e anticorpos de diferentes clones de linfcitos < diferem em sua especificidade? ligandoAse em diferentes antgenos. Diferentemente dos linfcitos <? >ue permanecem grande parte do tempo no tecido linfide? os anticorpos so li3erados no plasma sanguneo e fluidos teciduais? onde podem rapidamente locali0ar e ligarAse aos antgenos. ( presena de anticorpos especficos para um determinado antgeno no sangue # uma indicao segura da e1posio pr#2ia a esse antgeno. .ortanto? >uando se fa0 um teste sorolgico para 2erificar ttulos )n2eis* de anticorpos para um determinado agente? podeAse estar 2erificando se -/ anticorpos suficientes para garantir proteo ou simplesmente se o animal 4/ foi e1posto anteriormente ao agente. Estrutura das imunoglo3ulinas (s Igs ou anticorpos possuem uma estrutura 3/sica comum? >ue # composta por duas cadeias prot#icas pesadas e duas cadeias prot#icas le2es. Essas cadeias so ligadas entre si por pontes dissulfeto? assumindo a forma de um b. 9a figura a seguir? as cadeias le2es esto desen-adas em escuro e as cadeias pesadas em claro. O tratamento das Igs com proteases como a papana resulta na cli2agem da mol#cula na regio da do3radia )2#rtice*? resultando em dois fragmentos com fun@es distintas )%igura*L a regio %c )assim c-amada pois # a regio >ue fi1a ^ligaAse_ no complemento* e a regio %a3 )antigen 3inding [ ligaAse no antgeno*. ( regio %c # respons/2el por muitas fun@es dos anticorpos? como ati2ao do complemento? transferIncia de imunidade passi2a? recon-ecimento por fagcitos? citoto1icidade celular mediada por anticorpos? etc... ( regio %a3 # a respons/2el pelo recon-ecimento e ligao no antgeno )stio con4ugador do antgeno*. omo os dois stios con4ugadores antigInicos em cada regio do %a3 so idInticos? as imunoglo3ulinas so capa0es de se ligar com dois antgenos ao mesmo tempo. 'ogo? as mol#culas de anticorpo podem grumar 3act#rias em con4unto T aglutinao. A rego Fc constante, ou se|a, no vara entre os antcorpos produzdos por dferentes nfctos. O sto con|ugador do antgeno, que composto por parte da cadea eve e parte da cadea pesada, em suas extremdades, atamente varve. Essa varao deve-se a dferentes seqncas de amnocdos que podem compor essa rego. A grande varao nesse sto que permte que os antcorpos se|am capazes de 33 reconhecer e gar-se em vrtuamente quaquer antgeno exstente na natureza. Como exste uma enorme varedade de antgenos, deve exstr uma grande varedade de stos con|ugadores. Cada antcorpo possu um sto dferente, que capaz de reconhecer um antgeno dferente. esse sto que confere a especfcdade ao antcorpo. Ou se|a, um sto com determnada sequnca de amnocdos e conformao reconhece e ga-se especfcamente, e to somente, a um determnado antgeno. Cada cone de nfctos B produz antcorpos com um sto especfco, que dferente dos stos dos antcorpos produzdos por outros cones. Por outro ado, todos os antcorpos (e BCRs) de um determnado cone de nfctos B possuem o sto con|ugador dntco. Ou se|a, a especfcdade desses stos (e o antgeno ao qua va gar-se) caracterstca de cada cone de nfcto. lasses de imunoglo3ulinas Exstem cnco casses de munogobunas (IgM, IgG, IgA, IgE e IgD), que dferem entre s em sua estrutura (sobretudo na cadea pesada, 34 rego Fc). As dferenas na estrutura refetem-se em dferentes propredades bogcas e funes. Imunoglo3ulina 7 )Ig7*1 .ossuem estrutura pentam#rica? com cinco monNmeros ligados entre si por uma cadeia. De2ido ao seu taman-o? as Ig7 so predominantemente intra2ascularesL permanecem nos 2asos sanguneos e no penetram nos tecidos? placenta ou colostro. !o encontradas na segunda maior concentrao no soro )inferior G Ig\*. (s Ig7 so os primeiras Igs >ue aparecem em resposta a uma e1posio prim/ria a um antgeno )Ig7 alta [ sinNnimo de infeco aguda*. Os n2eis de Ig7 aumentam rapidamente na resposta prim/ria? atingem picos entre os 1& e 2+ dias e declinam tam3#m rapidamente? atingindo n2eis muito 3ai1os algumas semanas aps. 9a resposta secund/ria )>ue # a resposta montada frente a uma reAe1posio ao antgeno*? os n2eis de Ig7 so muito pouco )ou nada* alterados. Ou se4a? a Ig7 # uma imunoglo3ulina predominantemente da infeco prim/ria. Em3ora estando presente em concentra@es menores >ue a Ig\? a Ig7 # mais eficiente na ati2ao do complemento. ;am3#m possui ati2idade na opsoni0ao? neutrali0ao de 2rus? aglutinao de agentes patogInicos. (ps ligao G parede 3acteriana? pode desencadear a destruio da 3act#ria? diretamente ou com au1lio do complemento. 7onNmeros de Ig7 tam3#m so encontrados inseridos na mem3rana dos linfcitos <? onde desempen-am o papel de receptores )<Rs? 4untamente com a IgD*. Imunoglo3ulinas \ )Ig\*L so as Igs mais numerosas? representando at# 8+Z dos anticorpos presentes no sangue. .elo seu taman-o e por e1istirem mecanismos especficos de transferIncia? as Ig\s tam3#m esto presentes na maioria dos fludos corpreos e 35 ocasionalmente em secre@es. U a menor das imunoglo3ulinas e? por isso? pode sair facilmente dos 2asos sangHneos. .odem atra2essar a placenta de algumas esp#cies e tam3#m esto presentes no colostro )primeiro leite*? propiciando uma imunidade tempor/ria ao rec#m nascido. 9a inflamao? -/ um aumento da permea3ilidade 2ascular >ue permite >ue as Ig\ participem da defesa nos fluidos teciduais e superfcies corpreas. .ossuem a estrutura de um monNmero )um Jnico b*. ( ligao de Ig\ na superfcie micro3iana pode pro2ocar a aglutinao e tam3#m le2ar G opsoni0ao. Os anticorpos da classe Ig\ protegem contra 3act#rias e 2rus circulantes )lise mediada por anticorpos e complemento? neutrali0ao? aglutinao*? neutrali0am to1inas 3acterianas? ati2am o complemento e mel-oram a efic/cia da fagocitose )opsoni0ao*. ;am3#m promo2em a lise de c#lulas infectadas por 2rus? facilitando o contato de c#lulas 9O com a superfcie das c#lulas infectadas )(D*. (parecem tardiamente )aps a Ig7* na resposta prim/ria? mas atingem n2eis mais altos e duradouros. onstituemAse na principal Ig na resposta secund/ria? aparecendo mais rapidamente e atingindo n2eis altos e duradouros. Em algumas esp#cies )-umano? camundongo*? as Ig\s di2idemAse em su3classes )Ig\1? Ig\2? Ig\1a? Ig\23? etc...*. ( di2iso em su3classes de2eAse G pe>uenas diferenas na regio constante das cadeias pesadas da poro %c. Imunoglo3ulinas ( )Ig(*L representam apenas 1+A1&Z dos anticorpos do sangue. 9o entanto? constituemAse nos anticorpos mais numerosos e importantes nas mucosas e secre@es corpreas? como o muco? sali2a? l/grimas? colostro e leite.E1istam duas formas estruturais diferentes de Ig(L a Ig( s#rica circula no sangue como um monNmero. Entretanto? a forma mais efica0 # a Ig( secretora? >ue tem a forma dimerica )dois monNmeros conectados entre si por uma cadeia proteca*. ( Ig( secretora # produ0ida por plasmcitos locali0ados nos acJmulos linfides das su3mucosas. ada mol#cula ad>uire um componente secretor? >ue a protege das en0imas proteolticas. ( principal funo da Ig( secretora # e2itar a ligao de agentes patogInicos G superfcie das c#lulas epiteliais >ue re2estem as mucosas respiratria? digesti2a e urogenital. .ortanto? as Ig( constituemAse nos principais componentes da imunidade de mucosas ou imunidade local. 36 ( Ig( no ati2a o complemento e no funciona como opsonina. .ode aglutinar antgenos particulados e neutrali0ar 2rus. O principal mecanismo de ao das Ig( # impedir a aderIncia dos microorganismos Gs superfcies mucosas do organismo. Imunoglo3ulinas E )IgE*L desempen-am um papel importante nas alergias e infec@es parastras. Os antcorpos da casse IgE podem gar-se em parastas mutceuares (fungos, hemntos). Basfos e eosnfos contm receptores que reconhecem a rego Fc da IgE. Com sso, essas cuas gam-se nos parastas atravs da IgE e beram substncas que esonam a membrana do parasta e causam nfamao. As IgE geramente esto com os nves aumentados em processos argcos. Possuem a estrutura de um monmero smpes (trs reges nas cadeas pesadas na regio %c*? podendo ser encontradas em secre@es como a sali2a? fludo intestinal? leite? colostro? urina e secre@es do sistema urogenital. .ossuem a meia 2ida mais curta de todas as imunoglo3ulinas e esto presentes em concentra@es 3ai1as no soro. Imunoglo3ulinas D )IgD*L so encontradas inseridas na superfcie das c#lulas <? onde desempen-am a funo de receptores )<Rs*? 4untamente com imunoglo3ulinas da classe Ig7. .ossuem a estrutura de um monNmero e podem tam3#m ser encontrados no sangue e no tecido linf/tico. (s fun@es do IgD no so 3em con-ecidas? mas parecem estar en2ol2idas em desencadear uma resposta inicial a antgenos. Dstrbuo das munogobunas Em3ora os anticorpos se4am encontrados principalmente na poro fluda do sangue? eles podem ser encontrados em 2/rios outros compartimentosL 1. Em compartimentos citoplasm/ticos )\olgi? RE* e na superficie de linfcitos < )IgD? Ig7*P 2. 9o plasma sanguneoL Ig\ )5+A5&Z*? Ig( )1&A2+Z*? Ig7 )1+Z*? IgE )+?++4Z*? IgD )+?2Z*P 3. 9o l>uido intersticial dos tecidos onde os plasmcitos acumulamAseP 4. 9a superfcie de algumas c#lulas efetoras? >ue possuem receptores para a poro %c )9O? mastcitos*P &. Em secre@es como o leite? muco )principalmente Ig(*. Funes dos antcorpos As munogobunas so produzdas em resposta a um antgeno e 37 desempenham vras funes especfcamente contra esse antgeno. O mecansmo de ao dos antcorpos vara, mas os dferentes mecansmos dependem fundamentamente da gao especfca do antcorpo (atravs da rego varve) com o antgeno. Abaxo so stadas as prncpas funes dos antcorpos: 1. Receptores de nfctos B. Monmeros de IgM e IgD encontram-se nserdos na membrana pasmtca de nfctos B e servem de receptores, atravs dos quas essas cuas reconhecem antgenos. O contato entre os nfctos B e os antgenos, ento, ocorre atravs das munogobunas de superfce. Essas munogobunas gam-se nos antgenos atravs da rego varve (sto con|ugador de antgeno). O contato com o antgeno produz snas qumcos que so envados pea poro transmembrana das munogobunas para o nteror do nfcto. Esses snas que determnam a atvao, proferao e dferencao dos nfctos B em pasmctos. 2. Inatvao de toxnas Toxnas bacteranas ou de outra orgem podem ser natvadas pea gao especfca com antcorpos. Essa natvao pode ocorrer pea gao propramente dta, ou ndretamente atravs do estmuo de outros mecansmos efetores do sstema munogco (compemento, cuas). A gao de antcorpos em toxnas pode factar a fagoctose e remoo das toxnas por cuas fagoctcas que possuam receptores para a poro Fc. 3. Neutrazao de vrus A gao de antcorpos em protenas da superfce dos vrons (capsdeo ou enveope) pode mpedr que o vron se gue no receptor ceuar e consga penetrar na cua para ncar a nfeco. Esse um dos prncpas mecansmos de neutrazao vra por antcorpos. A neutrazao de vrus compexos (herpesvrus, poxvrus) geramente requer um grande nmero de mocuas de antcorpo por vron; nmero que pode ser bem pequeno para vrus smpes no enveopados (parvovrus, poovrus, vrus da Febre Aftosa). A gao de antcorpos na superfce de vrus enveopados tambm pode atvar o compemento, resutando na se ou natvao da nfectvdade da 38 partcua vra peo compemento. Agutnao de partcuas vras prncpamente por IgM tambm pode ocorrer. Embora se consdere no nteror da cua avo os vrus so nacessves a antcorpos, tem sdo demonstrado para aguns vrus (cnomose, sarampo) que mesmo aps a entrada do vrus na cua, os antcorpos podem nterferr na repcao vra. O mecansmo responsve anda no fo determnado. 4. Lse de bactras - A IgM tem a capacdade de sar dretamente agumas bactras. Lse bacterana tambm pode ocorrer atravs da gao do antcorpo e atvao do compemento na membrana bacterana. Com sso, ocorre a formao do MAC (compexo de ataque membrana) peos componentes do compemento, evando se osmtca. 5. Opsonzao - Bactras e outros antgenos partcuados so mas efcentemente fagoctados por macrfagos e neutrfos se forem revestdos por substncas que factem o contato entre a membrana da cua fagoctca e a superfce da partcua. Substncas que exercem esse pape so chamadas genercamente de opsonnas, e o processo chamado de opsonzao. Dentre as opsonnas naturas, destacam-se o fragmento C3b do compemento e munogobunas (prncpamente IgG). Para que a opsonzao facte a fagoctose necessro que a cua fagoctca possua receptores para as opsonnas (C3b ou IgG) na sua membrana. Os prncpas fagctos possuem esses receptores. $. itoto1icidade mediada por anticorpos )(D*L U a lise de c#lulas tumorais ou c#lulas infectadas por 2rus? pelos neutrfilos? macrfagos e principalmente c#lulas 9O. .ara isso? os anticorpos )Ig\* de2em recon-ecer e ligarAse em antgenos tumorais ou 2irais na superfcie da c#lula afetada. omo as c#lulas mencionadas possuem receptores para a poro %c da Ig\ )c-amados de receptores de %c*? ligamAse especificamente na c#lula atra2#s do anticorpo e desencadeiam o processo de destruio celular )li3erao de perforinas? apoptose? lise osmtica*. 9esses casos? o recon-ecimento )e a conse>Hente lise* das c#lulas afetadas depende da interao entre a c#lula efetora )atra2#s do receptor de %c* com a poro %c da Ig\ locali0ada na mem3rana. .or isso? o mecanismo # denominado de Anti'od7 Dependent ,ellula! ,itoto/icit7 )(D*. ( funo do anticorpo nesse mecanismo # proporcionar o 39 recon-ecimento e um maior contato entre a c#lula efetora e a c#lula al2o? facilitando o processo de citoto1icidade. ( (D # um dos principais mecanismos de com3ate G infec@es 2ricas. Os eosinfilos mediam uma forma especial de (D. .arasitas reco3ertos por IgE? Ig( ou Ig\ so recon-ecidos )atra2#s de receptores de %c* pelos eosinfilos? >ue ao ligaremA se no parasita atra2#s da Ig li3eram protenas 3/sicas e1istentes em seu grMnulos. Essas protenas tem a capacidade de danificar a mem3rana do parasita le2andoAo G morte. 5. itoto1icidade dependente de anticorpos mediada por complemento. ( ligao de anticorpos em antgenos na superfcie de c#lulas tumorais ou infectadas por 2rus pode le2ar G lise dessas c#lulas por outro mecanismo? >ue no a lise mediada por c#lulas. ( interao antgenoAanticorpo na mem3rana das c#lulas ati2a o complemento na superfcie da mem3rana? le2ando G formao do comple1o 7( )&A6*. Esse comple1o forma poros na mem3rana? le2ando G sada de solutos e pe>uenas mol#culas e entrada de /gua na c#lula afetada. om isso? essas c#lulas so destrudas por lise osmtica. Esse mecanismo funciona em c#lulas tumorais e infectadas? assim como em 3act#rias. 8. (ti2ao do complemento. ( interao anticorpoAantgeno? se4a em soluo ou em mem3ranas? pro2oca a ati2ao da cascata do complemento? com a gerao de fragmentos com di2ersas ati2idades 3iolgicasL opsoni0ao? >uimiota1ia? ati2idade inflamatria )aumento da perme3ilidade 2ascular? 2asodilatao? etc...*? (D e lise celular e 3acteriana mediada por complemento? entre outros. 9esses casos? os anticorpos agem recrutando as fun@es do complemento >ue atuam no processo inflamatrio e no com3ate ao agente infeccioso. 6. Kipersensi3ilidade imediata. 7ediada por IgE e 3asfilos=mastcitos. ( introduo de determinados antgenos no organismo causa associao=agregao de IgE. om isso? os 3asfilos=mastcitos? atra2#s de receptores de %c para IgE? ligamAse nesses anticorpos e li3eram seu grMnulos >ue cont#m su3stMncias 2asoati2as )-eparina? -istamina? leuBotrienes? prostaglandinas* >ue pro2ocam as rea@es tpicas da -ipersensi3ilidade )contrao da musculatura lisa das 2ias a#reas e 2asos? 2asodilatao capilar? edema*. 1+. Imunidade de mucosas. (s imunoglo3ulinas da classe Ig( so muito importantes na imunidade de mucosas )ou de superfcie*. Essas Ig(s so produ0idas nos acJmulos linfides da su3mucosa e transportadas atra2#s do epit#lio para a lu0 do rgo. 9o lJmen dos rgos )tu3o digesti2o? respiratrio? urogenital*? essas imunoglo3ulinas atuam neutrali0ando microorganismos. 11. Imunidade fetal. Em 2/rias esp#cies animais )-umanos? primatas? carn2oros? roedores*? ocorre a transferIncia de imunoglo3ulinas )so3retudo Ig\* atra2#s da placenta para os fetos. 40 Essas Igs so importantes para conferir resistIncia ao rec#mAnascido contra poss2eis infec@es periAnatais. ( imunidade transmitida pela placenta aos fetos # dita imunidade passi2a. 9o entanto? a estrutura placent/ria de 2/rias esp#cies )e>Hideos? ruminantes? sunos* no permite a passagem de imunoglo3ulinas aos fetos. 9essas esp#cies? o rec#mAnascido )antes de mamar o colostro* # 2irtualmente despro2ido de imunidade passi2a. 12. Imunidade neonatal pelo colostro. Rec#mAnascidos de mamferos >ue no transferem anticorpos atra2#s da placenta nascem 2irtualmente despro2idos de imunidade especfica. Da mesma forma? o seu sistema imunolgico ainda no est/ totalmente capa0 de produ0ir uma resposta imunolgica eficiente. %eli0mente? anticorpos maternos so deslocados da circulao materna para a glMndula mam/ria no final da gestao e ficam altamente concentrados no colostro. ( ingesto de colostro? e a conse>Hente a3soro das imunoglo3ulinas )principalmente Ig\* pelo sistema digesti2o do rec#m nascido )nas primeiras 24A3$-* confere a estes animais imunidade nas primeiras semanas de 2ida. ( imunidade passi2amente ad>uirida )anticorpos transmitidos atra2#s da placenta ou pelo colostro* # tempor/ria? durando de semanas a meses. (s imunoglo3ulinas so a3sor2idas e ficam no sangue por semanas a meses? sendo respons/2eis pela imunidade -umoral passi2a nesses animais. Em sunos? al#m das imunoglo3ulinas a3sor2idas pela corrente sangunea? Ig\ e Ig( ingeridas com o colostro permanecem alguns dias no lJmen intestinal e podem conferir imunidade local contra microorganismos. Outras fun@esL retirada do e1cesso de antgeno dos l>uidos corporais? interao com outros componentes do sistema imunolgico? participao em rea@es al#rgicas e autoAimunes. )itocinas )ou interleucinas* (s c#lulas do sistema imunolgico secretam uma 2ariedade de su3stMncias prot#icas >ue regulam a resposta imunolgica. Essas su3stMncias? genericamente denominadas de interleucinas )interleuBinas? linfocinas ou citocinas*? atuam atra2#s da modulao da ati2idade 3iolgica de 2/rias c#lulas do sistema imunolgico. (s citocinas secretadas pelos linfcitos so tam3#m c-amadas de linfocinas ou interleucinas. (s citocinas so protenas solJ2eis circulantes? atra2#s das >uais as c#lulas do sistema imunolgico podem se comunicar entre si. !o produ0idas por diferentes c#lulas do sistema imunolgico? sendo geralmente nomeadas pela sua ati2idade 3iolgica. ( denominao original interleucina foi esta3elecida por>ue elas esta3elecem comunicao entre leuccitos )inter[entre? leucinas[leuccitos*. 41 (s citocinas mediam uma rede comple1a de intera@es entre todos os tipos celulares do sistema imunolgico. ;ipos de citocinasL InterleucinasL citocinas >ue regulam intera@es entre os linfcitos e outros leuccitos. Originalmente? as interleucinas foram identificadas como produto de secreo dos linfcitos ;D4? cu4a funo efetora # 4ustamente secretar essas interleucinas? >ue por sua 2e0 regulam a ati2idade de 2/rias c#lulas do sistema imunolgico. ( inte!leucina > )produ0ida principalmente por macrfagos* pode indu0ir fe3reP ela estimula c#lulas ; D4a -elper >uando antgenos esto presentesP atrai fagcitos para o local da inflamao. ( inte!leucina : pode aumentar a proliferao das c#lulas ; D4a estimuladas por um antgenoP aumenta a proliferao e a diferenciao de c#lulas <? ati2a c#lula ; D8a )c#lulas ; citot1icas* e c#lulas 9O )natural Biller*. (s interleucinas 4 e & estimulam a proliferao e diferenciao de linfcitos < em plasmcitos e a conse>Hente produo de anticorpos. 7ais de 2+ interleucinas )secretadas por linfcitos* 4/ foram identificadas. Inte!fe!onsL so glicoprotenas sinteti0adas em resposta G infeco 2iral? a uma estimulao imune ou a 2/rios estimuladores >umicos. Ini3em a replicao 2iral por interferirem com o R9( e a sntese das protenas 2irais. Recon-ecemAse cinco tipos de interferonsL interferonAalfa? interferonA3eta? interferonAgama? interferonAomega e interferonAtau. Os interferons so protenas anti2irais produ0idas por c#lulas infectadas por um 2rus. Os interferons fa0em as c#lulas sadias pr1imas tomar medidas para ini3ir replicao 2iral? atra2#s da produo de protenas anti2irais. Os interferons podem ini3ir a replicao 2iral em concentra@es muito 3ai1as A to 3ai1as >ue elas no ao t1icas para as c#lulas sadias. 3ato!es de nec!ose tumo!alL so duas citocinas relacionadas sendo uma deri2ada dos macrfagos e outra das c#lulas ;. ;Im a capacidade de pro2ocar morte celular programada )apoptose* em algumas c#lulas tumorais e aumentar a ati2idade de c#lulas fagocit/rias. (lgumas citocinas podem agir como >uimiocinasL famlia de protenas >ue tem importante papel na inflamao. Outras agem como fatores de crescimento e estimulam muitas c#lulas a crescer. (s citocinas agem em 2/rios al2os celulares. .odem se con4ugar com receptores da c#lula >ue as produ0iram T efeito autcrinoP podem se con4ugar com receptores de c#lulas em pro1imidade ntima das c#lulas >ue as produ0iram T efeito par/crino e podem se espal-ar por todo o corpo T efeito endcrino. .ropriedades gerais das citocinasL A so produ0idas durante a fase efetora da imunidade especfica e natural e ser2em como 42 mediadoras e reguladoras da resposta imunolgica e inflamatria. A 7uitas citocinas podem ser secretadas por diferentes tipos celulares. A itocinas tam3#m estimulam a sntese de outras citocinas. A (s a@es das citocinas podem ser redundantes? isto #? muitas fun@es atri3udas a uma citocina podem ser tam3#m caractersricas de outras citocinas. A .ara >ue a citocina consiga estimular uma c#lula # necess/rio >ue ela se con4ugue com receptores especficos nas c#lulas al2o. A ( e1presso de receptores especficos # reguladas por sinais especficos. A 7uitas respostas celulares Gs citocinas so lentas? ocorrendo durante um perodo de -oras e re>uerem sntese de mR9( e protenas. A .ara muitas c#lulas al2o? citocinas atuam como reguladoras da di2iso celular? isto #? como fatores de crescimento. .rincipais fun@es das citocinasL A mediadoras da resposta imuneP A reguladoras da ati2ao? crescimento e diferenciao dos linfcitosP A ati2adoras das c#lulas inflamatrias inespecficasP A estimuladoras do crescimento e diferenciao dos leuccitos imaturos. IV- ANTGENO A funo bsca do sstema munogco defender o organsmo contra mcroorgansmos patogncos. Ento, essenca que esses mcroorgansmos se|am reconhecdos to ogo penetrem no corpo do anma. O organsmo deve ser capaz de reconhecer que esses agentes so estranhos (no prpros) e desencadear uma resposta especfca contra os mesmos. O sstema munogco capaz de reconhecer componentes especfcos desses agentes patogncos, chamados antgenos. Casscamente, antgeno tem sdo defndo como quaquer substnca (ou mocua) capaz de gar-se especfcamente em componentes do sstema munogco (antcorpos, receptores de cuas T). No entanto, tem sdo demonstrado que pequenas mocuas so ncapazes de estmuar a resposta munogca. Por outro ado, 43 macromocuas como protenas, carbohdratos, pdeos, possacardeos e cdos nuccos so capazes de estmuar a resposta munogca, atravs da nterao com os componentes do sstema munogco. Esse tpo de mocua chamada de mungeno. Para smpfcar, denomnar- se- antgeno quaquer mocua de nteragr com os componentes do sstema munogco e nduzr uma resposta munogca. Dentre estes, necessro dstngur-se os antgenos prpros dos no-prpros. Os agentes patogncos (vrus, bactras, fungos, protozoros), por mas smpes que se|am, so compostos por vros antgenos. Os vrus mas smpes, por exempo, possuem de 4 a 5 protenas no capsdeo. Cada uma dessas protenas consttu-se em um antgeno. Os vrus mas compexos possuem mas de 100 protenas dferentes, cada uma consttundo-se em um antgeno. Bactras so compostas centenas ou mhares de protenas, popossacardeos e outras macromocuas. Cada uma dessas macromocuas representa um antgeno. Ou se|a, os mcroorgansmos possuem, dependendo de sua compexdade, de aguns a mhares de macromocuas que ndvduamente so capazes de estmuar a resposta munogca e por sso so denomnados de antgenos. Dentre os antgenos de um mcroorgansmo, aguns so atamente munogncos (tambm chamados de antgenos munodomnantes), enquanto outros podem ser moderada ou fracamente munogncos. Ou se|a, a capacdade de estmuar a resposta munogca vara entre os antgenos de um determnado mcroorgansmo. Geramente os antgenos (protenas, possacardeos) ocazados na superfce do agente (capsdeo, enveope vra; parede ou cpsua bacterana) so os mas munogncos. Aspectos estruturas As cuas do sstema munogco, atravs de seus receptores de superfce (TCR, BCR), reconhecem ocas ou stos especfcos de cada antgeno e no o antgeno ntero. Isso deve-se ao fato dos stos de reconhecmento do antgeno peos TCR e BCR serem pequenos e s 44 estabeecerem contato com uma pequena rego do antgeno. Os stos con|ugadores de antgeno (rego varve das Igs), por exempo, s estabeecem contato com uma seqnca de 6 a 8 amnocdos de um antgeno protco. Esses stos de reconhecmento e gao so chamados de eptopos ou determnantes antgncos. Cada antgeno pode conter um ou vros eptopos, dependendo do seu tamanho. Mocuas grandes de protena geramente possuem dezenas de eptopos. Em um mesmo antgeno, aguns eptopos so mas efetvos do que outros na nduo de resposta munogca. Esses eptopos so chamados munodomnantes. Os eptopos munodomnantes esto geramente ocazados na superfce dos antgenos e so hdrofcos. Pores ocazadas nternamente na mocua e hdrofbcas tm pouca chance de ser um eptopo munognco. Os eptopos podem ser consttudos de amnocdos ou resduos de acar dspostos nearmente ou fazendo parte de uma estrutura trdmensona. Eptopos com estrutura trdmensona podem ser denaturados por ao do caor ou determnados qumcos. Ouando o eptopo formado pea sequnca near de amnocdos, chamado de eptopo near, contnuo ou sequenca. Esse tpo de eptopo geramente reconhecdo por nfctos T. Lnfctos TCD8 reconhecem eptopos 45 neares de 8 a 12 (mda 9) amnocdos; nfctos TCD4 reconhecem eptopos neares de 16-20 amnocdos. Ouando a estrutura que reconhecda peo sstema munogco uma estrutura trdmensona, com um certo formato, denomnado de eptopo conformacona. Esses tpos de eptopos so reconhecdos por nfctos B, atravs de seus receptores (antcorpos) de superfce. Nesses casos, o que reconhecdo a forma (conformao), e no a sequnca de amnocdos. Lnfctos B reconhecem eptopos formados por 6 a 8 amnocdos. Denomna-se munogencdade a capacdade de um determnado antgeno de nduzr uma resposta munogca. A munogencdade de um determnado antgeno vara com vros fatores: 1.Composo qumca As protenas geramente so os mehores mungenos. Estmuam a resposta humora (atravs da estmuao dreta de nfctos B) e ceuar (nfctos TCD4). Protenas grandes geramente so mehores mungenos do que protenas pequenas. Possacardeos raramente so bons mungenos. Possuem aguma atvdade antgnca quando gados protenas (gcoprotenas). Estmuam apenas nfctos B (estmuao dreta pea gao aos BCRs). No nduzem resposta por nfctos TCD4. Lpdos no so bons mungenos quando no esto gados protenas. So muto comuns no organsmo e so facmente degradves. Acdos nuccos (RNA, DNA) tm aouma atvdade antgnca, sobretudo quando con|ugados protenas. Em agumas doenas automunes ocorre formao de antcorpos ant-DNA. 2. Tamanho da mocua ;eoricamente? >uanto maior a mol#cula do antgeno? maior ser/ o nJmero epitopos e conse>Hentemente maior ser/ a sua imunogenicidade. 7ol#culas maiores tam3#m so mais facilmente fagocitadas por macrfagos? facilitando o seu recon-ecimento e apresentao. Os imungenos mais potentes so geralmente protenas com peso molecular superior a 1++ BDa. 7ol#culas pe>uenas e solJ2eis no so facilmente fagocitadas? o >ue pre4udica o seu processamento e recon-ecimento pelo sistema imunolgico. 3. Dose do antgeno 46 ( intensidade da resposta imunolgica aumenta em resposta a um aumento da dose de antgeno? at# um certo limite. Suando esse limiar # ultrapassado? no -/ aumento da resposta e pode -a2er o esta3elecimento de um estado de noAresposta c-amado genericamente de tolerMncia. Doses macias de antgeno podem le2ar G imunotolerMncia. 4. omple1idade >umica e esta3ilidade Suanto mais comple1a for a estrutura molecular do antgeno? maior ser/ a sua capacidade de indu0ir uma resposta imunolgica eficiente. 7ol#culas de polissacardeos e protenas comple1as so 3ons imungenos. Da mesma forma? >uando mais est/2el for um antgeno? mais intensa ser/ a resposta imunolgica produ0ida contra ele. (ntgenos >ue so facilmente e rapidamente meta3olisados no constituemAse em 3ons imungenos pois no permanecem longo tempo estimulando o sistema imunolgico. O uso de ad4u2antes pode aumentar a resposta imunolgica a esses tipo de antgeno. Antgenos T dependentes e ndependentes Antgenos T dependentes: So antgenos que dependem das cuas T (nfctos TCD4) para estmuar a resposta munogca. Antgenos protcos no nduzem a formao de antcorpos sem a partcpao de TCD4. A proferao de nfctos B para orgnar pasmctos secretores de antcorpos para um antgeno protco depende de dos snas: 1. Um sna resutante da gao dreta do BCR com o antgeno protco; 2. Outro sna (ntereucnas 4, 5, 10) envado peos nfctos TCD4 ao reconhecerem o mesmo antgeno. Ou se|a, nfctos B e TCD4 reconhecem smutaneamente o antgeno e respondem: o nfcto B profera auxado peas ntereucnas produzdas peo nfcto TCD4. O resutado a produo de pasmctos secretores dos antcorpos especfcos para oantgeno em questo. A capacdade de nduzr resposta mune ceuar medada por nfctos T caracterstca dos antgenos T dependentes. As protenas so nfctos T dependentes. Antgenos T ndependentes: So antgenos que podem estmuar a resposta mune sem estmuar os nfctos TCD4. Esses antgenos so reconhecdos dretamente peos BCR/antcorpos na superfce dos nfctos B, desencadeando sua proferao e produo de antcorpos 47 especfcos. So capazes de estmuar dretamente os nfctos B, atuando como mtgenos. So mocuas grandes, pomrcas com undades repetdas em sua superfce. So geramente possacardeos bacteranos, mas tambm agumas protenas pomrcas de patemntos. Estmuam somente a resposta humora, pos no estmuam os nfctos T (T ndependentes). Reconhecimento de antgeno A dstno entre o que prpro e o que estranho (no-prpro) ao organsmo consttu-se no ponto chave da resposta munogca. Antgenos prpros devem ser reconhecdos como ta e no devem nduzr resposta munogca, sob rsco de desenvover-se enfermdades auto- munes. Por outro ado, antgenos estranhos (no-prpros) devem nduzr uma resposta munogca capaz de emn-os do organsmo. Por sso, o reconhecmento de antgenos no-prpros (dstngundo-os dos prpros) o evento centra da resposta munogca. atravs desse reconhecmento que cuas B e T so estmuadas e proferam, orgnando cuas efetoras (pasmctos, Th, CTL) que ro agr especfcamente contra o antgeno que as estmuou. O reconhecmento de antgeno a etapa nca da resposta munogca e geramente ocorre no oca de contato entre o antgeno e as cuas nfdes, ou se|a, nos nfonodos, acmuos nfdes (MALT, Pacas de Peyer) e bao. Os nfctos B, TCD4 (auxares) e TCD8 (ctotxcos) reconhecem antgenos de formas dferentes. Em todos os casos, o reconhecmento feto por receptores especfcos ocazados na superfce das cuas. Nos nfctos B, os receptores para antgeno (BCRs) so as mocuas de antcorpos (IgM e IgD) ocazadas na membrana desses nfctos. Os receptores dos nfctos T so os " T cell receptors" (TCR), que so mocuas semehantes s munogobunas, ocazadas na membrana dessas cuas. a nterao entre o antgeno e os receptores (BCRs e TCRs) que gera o estmuo qumco ntraceuar para a proferao e dferencao dos nfctos. A proferao e dferencao, por sua vez, gera os 48 mecansmos efetores da resposta munogca (pasmctos, antcorpos; CTLs, ntereucnas). Lgaes pouco especfcas, ou "frouxas" no geram estmuo sufcente e conseqentemente no desencadeam o processo de proferao e dferencao ceuar. Como ser vsto a segur, as formas de reconhecmento de antgeno por nfctos B e T so dferentes, mas compementares. Reconhecmento de antgenos por nfctos B: Lnfctos B reconhecem antgenos em souo, na sua conformao natura ou natva. Esse mecansmo mportante para o reconhecmento de patgenos extraceuares, como bactras e vrus vres, am de protenas e outros antgenos no protcos. O smpes contato entre o antgeno com os BCRs pode desencadear o estmuo para o nfcto B proferar. Para sso necessro que esse nfcto possua BCRs que reconheam e guem-se especfcamente no antgeno, atravs de suas reges varves (sto con|ugador de antgeno). A uno do antcorpo com o antgeno mas do tpo mo-uva do que do tpo chave-fechadura. Ou se|a, um dos componentes pode aterar um pouco a sua conformao para a|ustar-se conformao do outro. Dessa fonna, os antcorpos produzdos contra um antgeno vra ou bacterano podem posterormente reconhecer o antgeno na superfce do agente e neutraz-o dretamente, por agutnao, ou com a partcpao do compemento pode dretamente sar vrons e bactras. Em resumo: os nfctos B so capazes de reconhecer e reagr a antgenos protcos e no-protcos, que so reconhecdos sem processamento prvo, em sua forma natva, pea rego varve de seus receptores. A gao especfca BCR-antgeno gera snas ntraceuares que evam a proferao dos nfctos e eventuamente a gerao de pasmctos produtores de antcorpos especfcos para o antgeno que os estmuou. 49 Reconhecmento de antgeno por nfctos T. Ao contrro dos nfctos B, os nfctos T no so capazes de reconhecer antgenos em sua forma natura, sem prvo processamento e apresentao. Esses nfctos reconhecem e reagem apenas contra antgenos protcos e somente aps processamento. Antgenos extraceuares (protenas soves, vrus, bactras) so ncamente fagoctados por cuas especazadas (APCs), processados em pequenos peptdeos e apresentados aos nfctos TCD4+ combnados com mocuas do MHC-II. Os nfctos TCD4 reconhecem os peptdeos+MHC-II atravs de seu TCR+CD4. Antgenos produzdos dentro das cuas (protenas vras, por exempo) so degradados em pequenos peptdeos e apresentados aos nfctos TCD8 combnados com mocuas do MHC-I. Lnfctos TCD8 reconhecem os peptdeos+MHC-I atravs de seu TCR+CD8. Dessa forma, tanto protenas extraceuares como ntraceuares so capazes de nduzr uma resposta munogca por nfctos T. Lembrando que apenas antgenos protcos so capazes de nduzr resposta medada por nfctos T. 50 Reconhecmento de antgenos por nfctos TCD8. Esses nfctos reconhecem protenas de mcroorgansmos produzdas dentro das cuas do organsmo. Protenas estranhas produzdas dentro das cuas durante a repcaro de vrus e agumas bactras ntraceuares so ncamente processadas, orgnando peptdeos (fragmentos protcos) de 8 a 10 amnocdos. Esses peptdeos assocam- se a mocuas de MHC-I em determnados compartmentos ceuares e posterormente os compexos MHC-I+peptdeos so envados at a superfce da cua, onde fcam expostos. Os nfctos TCD8 reconhecem esses compexos (MHC-I+peptdeo) atravs de seu TCR+CD8. O 51 estmuo gerado por essa gao envado para o nteror do nfcto, sendo responsve por sua atvao e proferao. Lnfctos TCD8 atvados tornam-se ctotxcos e destroem as cuas nfectadas. Todas as cuas do organsmo (possve exceo: neurnos) possuem MHC-I. Portanto, quaquer cua nfectada por um vrus ou bactra ntraceuar pode apresentar os antgenos do protcos do agente e ser destrudo por CTLs. Esse um dos prncpas mecansmos de defesa contra nfeces vras. Mesmo aps a penetrao nas cuas, e mesmo sem expressar seus antgenos na superfce da cua nfectada, os vrus podem ser combatdos peos nfctos T ctotxcos. Em resumo: nfctos TCD8 reconhecem antgenos protcos produzdos dentro de cuas nfectadas por vrus (ou bactras), aps processamento e apresentao em assocao com mocuas do MHC-I. O reconhecmento ocorre atravs do TCR+CD8 e resuta na atvao do CD8, evando atvdade ctotxca. 52 Reconhecmento de antgeno por nfctos TCD4. Esses nfctos reconhecem antgenos protcos (protenas soves, protenas de vrus, bactras, etc.) que so ncamente fagoctados e processados por cuas chamadas de cuas apresentadoras de antgeno (APCs). Aps a fagoctose, as protenas do agente so processadas no nteror do fagcto, dando orgem a peptdeos de 12 a 16 amnocdos. No nteror de determnados compartmentos ntraceuares, esses peptdeos assocam-se a mocuas do MHC-II. Os compexos MHC-II+peptdeo so transportados superfce da cua, onde so reconhecdos peos nfctos TCD4 atravs do TCR+CD4. Essa gao gera um estmuo para a proferao dos nfctos TCD4. A apresentao de antgenos protcos aos nfctos TCD4 uma tarefa de um grupo especazado de cuas, chamadas genercamente de cuas apresentadoras de antgeno (APCs). Am de possur atvdade fagoctca (ou de nternazao de antgenos), uma cua deve expressar mocuas de MHC-II para ser um APC. No organsmo, apenas um grupo seeto de cuas expressa MHC-II e funcona como APC para nfctos TCD4. Essa cuas ncuem os macrfagos, cuas focuares dentrtcas, Langerhans, nterdgtantes e nfctos B. As APCs esto dstrbudas por todo o organsmo, prncpamente nos acmuos nfdes e rgos nfdes secundros. Os nfctos B so consderados os APCs mas efcentes. Lgam-se no antgeno atravs dos 53 BCRs/Igs, nternazam, processam e apresentam os peptdeos+MHC-II aos nfctos TCD4, recebendo destes as ntereucnas responsves pea sua atvao e dferencao em pasmctos. Em resumo: os nfctos TCD4 reconhecem protenas exgenas (de mcroorgansmos ncusve) aps serem fagoctadas, processadas e apresentadas em forma de peptdeos assocados com mocuas de MHC-II na superfce de cuas apresentadoras de antgeno. O reconhecmento se d atravs do TCR+CD4 e resuta na atvao e proferao dos nfctos, com a conseqente produo de ntereucnas que ro coordenar a ao de vras cuas na resposta munogca. Tpos de resposta nduzda por dferentes antgenos (resumo): Vrus vvo: 1. Reconhecdo por nfctos B: nduz formao de antcorpos. 2. .rotenas 2irais fagocitadas por (.sL antgenos so processados e apresentados associados ao 7KAII aos linfcitos ;D4aL produ0 cito>uinas >ue aumentam resposta -umoral e celular. 3. Produz antgenos ntraceuares: so degradados e os peptdeos assocados ao MHC-I so apresentados aos nfctos TCD8 ctotxcos que destroem a cua nfectada. Vrus natvado: Apenas 1 e 2 (antcorpos e nfctos T CD4+) 3. No nfecta a cua, no gerando resposta de nfctos T ctotxcos. Bactras: Apenas 1 e 2. No nduz resposta de nfctos T ctotxcos. Protenas (antgenos protcos): Apenas 1 e 2. 54 Outros (pdos, carbohdratos, DNA). Apenas nduzem a formao de antcorpos, pea nterao dreta com os nfctos B |sem auxo de TCD4). Fases da resposta imno!"gica A resposta munogca a um determnado antgeno ocorre em vras etapas, que ncam com o processo de reconhecmento do antgeno, passam pea atvao, proferao e dferencao das cuas efetoras (nfctos B, T, CTLs) e cumnam com os mecanmos efetores que ob|etvam emnar o agente. Dependendo dos mecansmos envvdos, pode-se dvdr essa resposta em trs fases ou etapas: 1. Fase cogntva; 2. Fase de atvao; 3. Fase efetora. 1. Fase cogntva: a fase nca da resposta munogca e envove os processos de reconhecmento do antgeno peos nfctos T e B. Nessa fase os antgenos so reconhecdos peos nfctos B, e so processados e apresentados aos nfctos T. O reconhecmento de antgenos por essas cuas produz estmuos para que se tornem atvada e proferem em resposta ao antgeno. Essa fase dura horas a poucos das. 2. Fase de atvao ; Em resposta ao estmuo gerado peo contato com o antgeno, os nfctos sofrem ateraes metabcas mportantes, preparando-os para a proferao (mutpcao) e posterormente dferencao. Essa fase pode ser dvdda em 2.1. Atvao propramente dta: Caracterzada peos eventos boqumcos ncas que modfcam o metabosmo das cuas, preparando-as para os eventos subseqentes. Essa atvao resutado do contato com o antgeno. 2.2.Proferao (mutpcao): Nessa fase os nfctos se mutpcam ntensamente, produzndo mhares de nfctos com especfcdade dntca (mesmos BCRs da cua parenta). Esse processo de mutpcao ceuar em resposta ao antgeno chamado de expanso cona. O resutado que o nmero de nfctos especfcos para um determnado antgeno mutpca-se mhares de vezes. 2.3. Dferencao: Aps a mutpcao, os nfctos resutantes sofrem um processo de dferencao, que os 55 torna preparados para a sua atvdade efetora. Os nfctos B dferencam-se em pasmctos, que so cuas com grande capacdade de secretar antcorpos. Os nfctos TCD4 produzdos pea expanso cona passam a produzr mas ntereucnas, que coordenam a atvdade de vras cuas. Os nfctos TCD8 tornam-se capazes de destrur cuas nfectadas (tornam-se CTLs). Cabe ressatar, que aps a mutpcao, uma parcea dos nfctos resutantes dessa mutpcao no se dferenca em cuas efetoras, e permanece como cua de memra. So essas cuas de memra que daro nco resposta munogca em exposes subseqentes ao antgeno. 3. Fase efetora: a fase em que os mecansmos efetores da resposta munogca atuam para emnar o agente. Os antcorpos so secretados peos pasmctos e exercem suas varadas funes (ver: funes dos antcorpos). Os nfctos TCD4 secretam ntereucnas e estas exercem suas funes. Lnfctos TCD8 destroem as cuas nfectadas. Nessa fase, todos os mecansmos efetores (especfcos e no-especfcos) auxam a combater o agente (cuas, compemento, etc...). Resposta prim#ria e secnd#ria E1istem diferenas >ualitati2as e >uantitati2as entre a resposta imunolgica montada frente G uma primeira e1posio ao antgeno )resposta prim/ria* e e1posi@es su3se>Hentes )resposta secund/ria*. 9a primeira 2e0 >ue um antgeno penetra no organismo e entra em contato com os linfcitos <? e1istem poucos linfcitos com receptores )<Rs=Igs* 56 especficos para a>uele determinado antgeno. Os linfcitos >ue possuem <Rs especficos para a>uele antgeno ento recon-ecem o antgeno )atra2#s dos <Rs*? ficam ati2ados e proliferam? originando mil-ares de linfcitos com a mesma especificidade )mesmos <Rs*. ( maioria desses linfcitos diferenciaAse em plasmcitos? >ue so c#lulas secretoras de anticorpos. Esses plasmcitos por sua 2e0? iniciam a produo de anticorpos? >ue so especficos para o antgeno >ue inicialmente indu0iu a sua ati2ao e proliferao. (lguns linfcitos especficos para o antgeno no diferenciamAse em plasmcito e permanecem como c#lulas de memria? >ue possuem 2ida longa. a3e ressaltar >ue o processo de ati2ao? proliferao e diferenciao dos linfcitos < em plasmcitos necessita dois sinaisL o primeiro # produ0ido pelo prprio mecanismos de recon-ecimento do antgeno pelo linfcitoP o segundo sinal # en2iado pelos linfcitos ;D4 )au1iliares*? >ue ao entrarem em contato e recon-ecerem o mesmo antgeno? produ0em interleucinas >ue au1iliam o processo de ati2ao=proliferao=diferenciao dos linfcitos <. (s principais interleucinas en2ol2idas nesse processo so a I'A4? I'A& e I'A1+. Ento? al#m do contato com o antgeno? os linfcitos < necessitam sinais >umicos dos ;D4 para o processo final de produo de anticorpos. O processo de recon-ecimento? ati2ao? proliferao? diferenciao e produo de anticorpos le2a algum tempo. Dessa forma? os anticorpos especficos para o agente comeam a aparecer aos poucos? a partir de um certo perodo aps a infeco? at# atingir um certo platN. Em infec@es 2ricas? anticorpos especficos para o agente comeam a ser detectados 5 a 8 dias aps a infeco. Inicialmente so detectadas imunglo3ulinas da classe Ig7. (s Ig\ aparecem mais tardiamente. Os n2eis aumentam gradati2amente at# atingir um platN? ao redor dos dias 14 a 2+. Esse platN dura poucos dias? a partir do >ual os n2eis de anticorpos comeam a redu0irAse gradati2amente. 57 Estes e2entos >ue ocorrem aps a e1posio inicial ao antigeno so c-amados de resposta -umoral prim/ria. U esse tipo de resposta >ue ocorre aps a 2acinao com um determinado antgeno. ( resposta -umoral prim/ria # caracteri0ada por um aumento gradati2o e lento? noA imediato? de magnitude e durao moderadas nos n2eis de anticorpos s#ricos especficos. O tempo >ue demora para o aparecimento dos anticorpos # de2ido aos processos de recon-ecimento? ati2ao? proliferao e diferenciao e sntese de anticorpos >ue le2a algum tempo. Em exposes subseqentes ao mesmo antgeno, a resposta munogca dfere quatatvamente, quanttatvamente e em reao ao tempo necessro para ser detectada. Na segunda vez que o antgeno entra em contato com o organsmo, o nmero de nfctos B com receptores especfcos para esse antgeno muto maor do que na resposta prmra. O que ocorreu na resposta prmra, em readade, fo uma expanso na popuao de nfctos especfcos para aquee antgeno (expanso cona). A maora dos nfctos resutantes da expanso cona dferencou-se em pasmctos, mas um nmero sgnfcatvo permaneceu como cua de memra (especfcas para o antgeno). Com sso, em uma segunda exposo ao agente, o processo de reconhecmento do antgeno, atvao e proferao de nfctos B, que | ocorreu anterormente, bastante abrevado. O nmero de nfctos sensbzados muto maor, resutando em uma resposta proferatva rpda, de grande magntude, com um aumento rpdo e ntenso nos nves de antcorpos. A resposta munogca a uma re- exposo ao antgeno denomnada de resposta secundra. A resposta secundra caracterza-se por um aumento rpdo, de grande magntude e de onga durao dos nves de antcorpos. Na resposta secundra, as 58 munogobunas predomnantes so as IgGs. esse tpo de resposta que ocorre quando um anma vacnado posterormente exposto ao agente nfeccoso. Mutas vezes, a resposta secundra sufcentemente rpda e ntensa para mpedr que o agente repque e dssemne-se no organsmo causando doena. Tipos de imni$a%&o A nduo de mundade a um determnado agente nfeccoso pode ser feta de duas maneras: 1. Imunzao atva; 2. Imunzao passva. Imunzao atva pode ser obtda pea exposo do anma ao agente nfeccoso (ou antgeno), se|a pea admnstrao do agente deberadamente (nfeco expermenta ou vacnao) ou pea exposo do anma a outros anmas nfectados. Esse tpo de munzao chamada de munzao atva, pos provoca a resposta do sstema munogco em resposta ao agente. Ouando se munza com o agente vvo, a forma de munzao mas efetva, pos a que mas se assemeha nfeco natura. Dependendo do tpo de antgeno e do agente nfeccoso utzado, a mundade nduzda pode ser humora, ceuar ou ambas. Am da vacnao tradcona com vacnas vvas ou natvadas, outras prtcas de munzao atva, atravs de exposo ao agente ou a ndvduos nfectados tm sdo utzadas ao ongo dos anos, com agum sucesso. Por exempo, etoas antes de serem cobertas so coocadas em baas ou em contato com porcas mas vehas para entrarem em contato com o parvovrus suno. A nfeco das etoas com o vrus no traz conseqncas para a sua sade, mas confere proteo contra uma nfeco subseqente quando estverem prenhes. Infeces de fmeas soronegatvas prenhes com o parvovrus suno freqentemente evam a perdas embronras ou fetas. Prtca semehante tem sdo utzada para munzar fmeas bovnas com o vrus 59 da Darra Vra Bovna (BVDV), as quas so coocadas em contato com anmas nfectados antes da temporada de monta. A transfernca de antcorpos pr-formados atravs da pacenta, coostro ou por admnstrao de soro hpermune confere proteo temporra. Nesses casos, o anma (ou feto) recebe antcorpos formados em outro anma mune. Como a mundade ndepende da resposta munogca do anma, esse tpo de munzao chama-se munzao passva. Como regra, a mundade passva humora. H trs tpos possves de munzao passva: transpacentra, coostra e pea admnstrao de soro mune especfco. Imundade transferda atravs da pacenta: Vras espces anmas, ncundo humanos, prmatas, roedores e carnvoros transferem munogobunas (prncpamente IgG) atravs da pacenta, para o feto. O ob|etvo prover o recm-nascdo de mundade contra mcroorgansmos nas prmeras semanas de vda. Os recm-nascdos dessas espces so menos dependentes da mundade conferda peo coostro. Em espces como eqdeos, sudeos e rumnantes, no ocorre passagem sgnfcatva de antcorpos pea pacenta. Em conseqnca, os recm-nascdos dessas espces so desprovdos de mundade ao nascer e so muto dependentes da mundade conferda peo coostro para sobrevverem. A capacdade de transfernca de antcorpos pea pacenta depende do tpo de pacenta de cada espce. Pacentas do tpo endoto-cora (humanos, prmatas e carnvoros) e hemocora (roedores) so atamente permeves a munogobunas e permtem a passagem de antcorpos da me para os fetos. Por outro ado, pacentas do tpo epto-cora (eqdeos) e sndesmo-cora (rumnantes, sudeos) so vrtuamente mpermeves passagem de munogobunas. Imundade coostra: Em vrtuamente todas as espces de mamferos, no fna da gestao ocorre uma passagem sgnfcatva de munogobunas (prncpamente IgG e IgA) do soro para a gndua mamra. Com sso, ocorre uma concentrao muto grande de antcorpos no coostro. O ob|etvo dessa concentrao de antcorpos no coostro a de conferr 60 mundade ao recm-nascdo. Estes, ao ngerrem o coostro, ngerem e absorvem munogobunas especfcas para vros agentes nfecosos para os quas a me possu antcorpos. Grande parte das munogobunas (IgG, prncpamente) so absorvdas no trato gastrontestna do recm- nascdo (prmeras 24-36h) ndo para o sangue. Uma parte (IgA) pode permanecer no men ntestna onde confere proteo contra agentes nfeccosos nesse oca. Tanto a mundade adqurda pea pacenta como a coostra so passageras: duram de semanas a aguns meses, que o tempo de durao dos antcorpos recebdos. Em reao a mundade coostra, os fatores que determnam a sua durao no recm-nascdo ncuem: 1. Nves de antcorpos maternos; 2. Nves de antcorpos no coostro; 3. Ouantdade de coostro ngerda; 4. Ouantdade de munogobunas absorvda e 5. Taxa de crescmento corpora do recm- nascdo. Em certas craes de eqnos e bovnos eteros, tem sdo recomendada a utzao de "bancos de colostro", ou se|a, armazenagem de coostro de vras fmeas para posteror admnstrao recm- nascdos como forma de aumentar os seus nves de munogobunas. A munzao passva pode tambm ser feta artfcamente, pea admnstrao de soro especfco (anttetnco, antofdco, soro hpermune especfco para vrus, etc.. ). A exempo da mundade transpacentra e coostra, esse tpo de mundade essencamente humora e tem durao mtada. Exempos: soro contra Costrdum tetan e Costrdum perfrngens produzdo em equnos; soro anttetnco; soro ant-ofdco. Esse soro rco em antcorpos (hpermune) produzdo atravs da admnstrao repetda de doses crescentes de antgeno no anma. Os nves de antcorpos so montorados, e quando atngem determnados vaores o sangue coetado para a obteno do soro. Uma das mas mportantes apcaes da munzao passva quando h a necessdade de uma resposta rpda contra determnado antgeno ou toxna. A admnstrao do soro hpermune confere mundade medata, pos o mesmo geramente possu atas concentraes de antcorpos. A admnstrao repetda de soro hpermune, por outro ado, 61 desaconsehve, pos pode provocar reaes anaftcas. E'pectati(as imno!"gicas de ma (acina 1. Gerao de grande nmero de cuas T e B de memra. So essas cuas que ro responder quando de uma re-exposo ao agente e desencadear uma resposta munogca protetora. 2. Resposta sufcente de cuas T e B na maora da popuao (>90%). Essa proteo, chamada "mundade de popuao" conferr proteo ao restante da popuao. 3. .ersistIncia do antgeno nos locais onde as c#lulas < de memria so recrutadas para originar os plasmcitos. Desta maneira a produo de anticorpos prossegue mesmo por longo tempo aps a imuni0ao. O)*eti(os da (acina%&o 1. Prevenr (evtar) a nfeco- O dea de uma vacna que a sua admnstrao nduzsse uma resposta munogca capaz de evtar totamente a penetrao e repcaro do agente quando de uma exposo posteror. Esse tpo de mundade "absoluta" chamada de mundade esterzante. No entanto, esse ob|etvo extremamente dfc de se obter. Vrtuamente nenhuma vacna atua confere esse grau de mundade. Mesmo em ndvduos com sda mundade, o agente consegue penetrar e ncar a sua repcaro. nessa fase ento que o sstema munogco boquea a progresso da repcaro e a dssemnao da nfeco peo organsmo. Vacnas que vsem esse ob|etvo devem nduzr uma resposta oca (de mucosas) muto efcente, para reduzr ou mesmo abor a penetrao do agente nas cuas ocazadas na porta de entrada da nfeco. 2. Prevenr (atenuar) a doena cnca- Vsto que mpedr a nfeco um ob|etvo vrtuamente mpossve de obter-se pea vacnao, a preveno ou atenuao da doena cncas ou de seus efetos passa a ser o ob|etvo maor da vacnao. Esse ob|etvo acanado pea restro da extenso e magntude da nfeco, de modo que a repcao do agente se|a a ta 62 ponto mtada que no ocorram eses ou patoogas ceuares, tecduas e orgncas. Ou se|a, no ocorre doena cnca, ou se ocorrer, esta ser branda. Mutas vezes a repcaro do agente fca restrta ao oca de entrada, sem dssemnao sstmca peo organsmo. Nesses casos, os efetos da nfeco so mnorados. Sem doena cnca, os anmas no dexam de amentar-se, de ganhar peso, produzr ete, crescer. Da mesma forma, sem estar doentes, as pessoas no dexam de trabahar, r escoa, produzr. Nesses casos, os ob|etvos prtcos da vacnao so acanados. No entanto, nem sempre esses ob|etvos so acanados. Mutas vezes, a vacnao apenas dmnu a ntensdade da enfermdade cnca. Em bovnos vacnados e posterormente desafados com o herpesvrus bovno tpo 1 (BHV-I), por exempo, pode haver manfestaes cncas de rnotraquete. Essas manfestaes, no entanto, so geramente suaves e de curta durao, se comparadas s manfestaes em anmas no vacnados. Em cranas vacnadas contra a coqueuche, em ces vacnados contra a cnomose, pode ocorrer o mesmo, entre outras. Em resumo, a vacnao nem sempre e snnmo de proteo tota contra a doena. Mesmo assm, se a ntensdade e a durao da doena forem reduzdos sgnfcatvamente, o sado ser postvo. 3. Proteger o feto- Em agumas enfermdades nfeccosas, as conseqncas maores da nfeco ocorrem sobre o feto, com mortadade feta, abortos, maformaes, natmortadade. Nesses casos, um dos ob|etvos maores da vacnao deve ser a proteo feta. So exempos dsso a bruceose, nfeco peo BVDV, parvovrose suna, ruboa em humanos, entre outras. 4.Proteger o recm-nascdo - Em agumas nfeces, o perodo per-nata ou as prmeras semanas de vda so crtcos para sobrevvnca da proe. Nesses casos, a munzao das mes, antes ou mesmo durante a prenhez, vsa produzr mundade que se|a transferda atravs da pacenta ou peo coostro, conferndo mundade nos prmeros das (meses) de vda. 63 5. Prevenr a atnca vra - Para os afaherpesvrus (herpes smpex de humanos, BHV-1 de bovnos, doena de Au|eszky de sunos), a nfeco atente um ponto fundamenta na sua perpetuao na popuao. Por sso, am de proteger da doena cnca, as vacnas contra esses vrus tambm tm como ob|etvo a reduo ou at mesmo a preveno do estabeecmento e reatvao da atnca. Infezmente, anda no h vacnas que mpeam totamente o estabeecmento de atnca por esses vrus. 6. Auxar na convaescena - Em certos casos, a vacnao pode ser utzada como aternatva para auxar para auxar na recuperao da enfermdade cnca. Nesse casos, as vacnas teram pape teraputco e no preventvo. So exempos as munoterapas contra a papomatose bovna, equna e canna e munoterapa contra a Ptose eqna. H tambm reatos de uso de vacnas contra o vrus da Infuenza para auxar na recuperao cnca de pacentes dosos. 7. Reduzr a emnao do agente - Um dos componentes obrgatros de quaquer vacna contra vrus ou bactras a capacdade de reduzr a emnao do agente peos ndvduos nfectados. Dessa forma, reduz-se a quantdade do agente crcuante na popuao e conseqentemente o nmero de anmas nfectados. Vacnas efetvas devem reduzr a quantdade de vrus emnado e tambm o tempo de emnao vra. 8.Excur o agente da popuao- Mutas vezes, a vacnao maca da popuao utzada como mtodo de controe ou erradcao de enfermdades nfeccosas. Pea reduo ou mesmo emnao dos susceptves (todos munes), a possbdade da manuteno do agente na popuao reduzda. Mesmo aps a erradcao do agente de uma determnada rea geogrfca, a manuteno de uma grande parcea dos anmas munzada dfcuta a rentroduo do agente. No caso da Febre Aftosa no su do Bras, a manuteno da vacnao nos prmeros anos aps a eradcao era crtca, pos podera mpedr ou dfcutar a rentroduo do agente a partr de reas vznhas. Nos casos de vroses humanas como a poomete e sarampo, a vacnao maca contnuada 64 vsa reduzr ao mxmo o nmero de susceptves, tornando a popuao um ambente pouco favorve manuteno do agente. Imunidade contra v+rus A resposta munogca contra nfeces vrcas pode ser dvdda em duas categoras: 1. Resposta nata ou nespecfca e 2. Resposta adqurda ou especfca. Essas duas respostas desempenham paps mportantes em tempos dstntos, com o ob|etvo de controar a nfeco. A resposta nespecfca nca quase medatamente aps a nfeco, com a nduo de nterferons do tpo I (IFN afa, beta) e nves aumentados de atvdade de cuas NK. Am dsso, outros componentes da resposta nespecfca partcpam, como cuas (neutrfos, macrfagos), compemento e nfamao. Essa resposta precoce no especfca crtca para controar a repcao vra e dssemnao da nfeco. Am de controar a nfeco nos estgos ncas, enquanto a resposta especfca anda no est formada, aguns componentes da resposta nespecfca preparam/auxam na formao da resposta especfca. Cuas fagoctcas (macrfagos prncpamente) fagoctam e apresentam antgenos aos nfctos TCD4, por exempo. A resposta munogca nespecfca no consegue emnar o vrus, mas fornece uma nha nca de defesa, especamente na nfeco de anmas soronegatvos. A resposta especfca essenca para a emnao competa da nfeco, mas demora peo menos uma semana para desenvover-se. Em gera, a atvdade de cuas efetoras do tpo nfctos TCD4 e CD8 nca a partr do 4 - 5 e reduz-se aps aguns das. Os antcorpos produzdos em resposta ao agente, no entanto, duram por vroas meses ou anos. Resposta nespecfca Ctocnas: Vras ctocnas desempenham mportantes paps no combate nfeces vrcas. Vras deas so produzdas precocemente na nfeco e partcpam da resposta nespecfca. 65 Interferons e (tambm chamados de IFNs tpo I): Esses IFNs so produzdos por cuas nfectadas por vrus e dretamente nduzem um estado de resstnca ant-vra nas cuas vznhas. Os mecansmos de resstnca so compexos e envovem dos camnhos prncpas: 1. Degradao de mRNA: com sso o vrus no pode expressar suas protenas e competar o cco repcatvo; 2. Inbo da sntese protca: mesmo efeto. (l#m desses efeitos antiA2irais os I%9s e possuem efeitos modulatrios na resposta imunolgicaL alteram a distri3uio e ati2am c#lulas 9O? indu0em e1presso de 7KAI? regulao da produo de citocinas e seus receptores. Os I%9s e cosntituemAse num dos principais mecanismos de defesa inespecfica contra infec@es 2ricas? so3retudo nos est/gios iniciais da infeco. Fator de necrose tumora (TNF) e nterferon : So produzdas precocemente peas cuas NK em agumas nfeces. Os efetos dessas ctocnas so semehantes aos dos IFNs do tpo I. Am dsso, o IFN um potente atvador dos mecansmos antvras ntraceuares desencadeados 66 por macrfagos. Cuas: Cuas NK: As cuas NK foram descobertas por sua atvdade de matar espontaneamente certas cuas tumoras. Posterormente fo demonstrado que possuem a mesma atvdade contra cuas nfectadas por vrus. A sua atvdade ctotca atvada peos IFNs e e ocorre aps nfeco com uma grande varedade de vrus. Os mecansmos de se ceuar medada peas NK no esto bem escarecdos, mas parecem ser smares aos desencadeados peos nfctos TCD8 (perfornas, granzmas, apoptose)., com a dferena que as NK reconhecem a cua nfectada de modo nespecfco, no gado ao MHC-I. Am de destrur cuas nfectadas de modo nespecfco, as cuas NK podem tambm partcpar da resposta especfca. Essas cuas possuem receptores de Fc e podem destrur cuas nfectadas recobertas por antcorpos (ADCC). Como requer a partcpao de antcorpos especfcos, esse mecansmo s ocorre tardamente na nfeco prmra ou em re-nfeces. Am de medar a destruo de cuas nfectadas, as NK secretam vras ctocnas, como IFN , TNF e GM-CSF (estmuante de dferencao de macrfagos e granuctos). Macrfagos: Parecem desempenhar um mportante pape na resposta contra vrus. No entanto, tambm contrbuem para a dssemnao de certos vrus no organsmo, possbtando a nfeco de determnados ocas, como o crebro. Os mecansmos de ao dos macrfagos no combate aos vrus so controversos. Podem secretar IFN afa, fagoctar e destrur partcuas vrcas e restos ceuares. Possuem mecansmos de produo de cdo ntroso (NO) com atvdade ant-vra demonstrada contra vros vrus. Em ado atvdade ant-vra, os macrfagos podem moduar mportantes mecansmos de defesa, atravs da produo de vras ctocnas (IL-1, IL-12, TNF). Am dsso partcpam decsvamente no processamento e apresentao de antgeno aos nfctos TCD4, como 67 parte da resposta especfca. Compemento: Os componentes da cascata do compemento, atvada dretamente peo contato com as partcuas vrcas (va aternatva) ou pea gao antgeno-antcorpo (va cssca) possuem mportantes funes na resposta nespecfca contra nfeces vrcas. Dentre as funes destacam-se a opsonzao e estmuo a fagoctose, se de vrus enveopados, estmuao da nfamao, qumotaxa para macrfagos e neutrfos. |untamente com as cuas NK e nterferons, desempenham mportante pape na resposta precoce s nfeces vrcas. Tambm possuem pape como efetores da resposta especfca que aparece tardamente na nfeco prmra e tambm em re-nfeces. esposta a2uirida ou espec+fica Os linfcitos ;D4 e D8 e anticorpos so os respons/2eis pelos principais mecanismos efetores da resposta especfica. omo mencionado anteriormente? >uando um organismo # infectado pela primeira 2e0 com um agente? esses mecanismos le2am alguns dias para desen2ol2erAse e tornaremAse ati2os. 'infcitos ;D4 e D8 especficos comeam a aparecer 4 a & dias aps a infeco 2iralP anticorpos da classe Ig7 iniciam a ser detectados aos dias 5 T 8. .or desen2ol2erAse tardiamente? a resposta especfica tem papel importante na fase final da infeco prim/ria e na pre2eno G reinfeco? em e1posi@es su3se>Hentes. Antcorpos: Os antcorpos medam uma sre de mecansmos destnados combater o agente nfeccoso. Em gera, os antcorpos atuam em partcuas vrcas enquanto eas esto no meo extraceuar, no sangue ou em fudos tecduas. A ao dos antcorpos neutraza partcuas vrcas mtando a sua dssemnao e prevenndo a nfeco de tecdos vznhos ou dstnca. Dentre as funes dos antcorpos contra nfeces vrcas destacam-se: opsonzao, se medada por antcorpos e compemento, atvao do compemento, ADCC (se medada por antcorpos e cuas NK, neutrfos), neutrazao e agutnao vra. 68 Lnfctos T CD8 (ctotxcos): Os nfctos TCD8, aps reconhecmento de peptdeos estranhos apresentados por mocuas de MHC-I na superfce de cuas nfectadas, desencadea o processo de ctotoxcdade, evando morte da cua nfectada. Os mecansmos de se envovem a ao de perfornas, granzmas e evam morte ceuar por se osmtca e/ou apoptose. Como vrtuamente todas as cuas do organsmo (exceo: neurnos) expressam MHC-I, podem ser avo dos CTLs quando nfectadas. A se de cuas nfectadas peos CTL representa um dos mas mportantes mecansmos de combate s nfeces vrcas. Desempenha pape mportante na fase fna da nfeco prmra e tambm em re- nfeces. Lnfctos TCD4: Os nfctos auxares (ou heper) possuem pape fundamenta na resposta especfca contra vrus. A sua funo secretar ntereucnas (ctocnas) que agem estmuando outras cuas do sstema munogco a combaterem o agente nfeccoso. Lnfctos Th1 secretam prncpamente ntereucnas que atvam nfctos TCD4, TCD8 (CTLs), macrfagos e cuas NK. Lnfctos Th2 secretam ntereucnas votadas a mundade humora, pos estmuam a proferao e dferencao dos nfctos B e produo de antcorpos. 69 +em"ria imno!"gica ,in-"citos . e T (ps a estimulao de linfcitos maduras por um determinado antgeno? ocorre a proliferao e diferenciao dessas c#lulas em c#lulas efetoras )linfcitos < secretam anticorposP linfcitos au1iliares secretam interleucinasP ;'s destroem c#lulas infectadas*. 9o entanto? uma pe>uena parcela dessas c#lulas >ue proliferou no se torna efetora e permanece como c#lula de memria? as >uais possuem 2ida longa )meses a anos*. Em contatos su3se>Hentes com o mesmo antgeno? as c#lulas de memria especficas proliferam e respondem rapidamente? tornandoAse efetoras. ( resposta # mais r/pida pois no precisam passar pelo processo de diferenciao. (l#m disso? o nJmero de c#lulas especficas para um determinado agente aumentam muito em e1posi@es su3se>Hentes. (s c#lulas de memria so3re2i2em por um longo tempo no organismo? mesmo na ausIncia do antgeno >ue as estimulou. %oi demonstrado recentemente >ue as c#lulas de memria so capa0es de di2idirAse? em3ora lentamente? o >ue pode e1plicar a sua longe2idade. Mecanismos de escape Ao ongo de sua evouo, os vrus desenvoveram estratgas para evadr-se (escapar) de aguns mecansmos de defesa do anma. Isso permte que esses vrus consgam perpetuar-se no organsmo e/ou na popuao. 1. Latnca: Aps a nfeco prmra, quando repcam prxmo ao oca 70 de penetrao, os herpesvrus penetram no sstema nervoso e estabeecem nfeco atente nos gngos sensoras e autonmcos. Durante a nfeco atente, no h repcao vra ou produo de antgenos vras. Com sso, o vrus permanece fora do acance do sstema munogco. A nfeco atente dura a vda toda do anma. A ntervaos mas ou menos freqentes, o vrus reatvado, vota a repcar e excretado e pode nfectar novos anmas susceptves. A capacdade de estabeecer e perodcamente reatvar a nfeco atente cruca para a perpetuao dos herpesvrus na natureza. 2.Varabdade antgnca: A nduo de antcorpos com atvdade neutrazante por parte do hospedero crtca para a sobrevvnca do vrus na popuao. No entanto, aguns vrus possuem a capacdade de mutar as protenas de superfce (capsdeo ou enveope), de modo a no serem mas reconhecdos peos antcorpos. Com sso, escapam da neutrazao e conseguem estabeecer nfeco nesses anmas. A cada nova nfeco, novos antcorpos especfcos para as protenas mutadas so formados, neutrazando o vrus. No entanto, a cada cco de repcao, novos mutantes que escapam da neutrazao so novamente formados. Dentre os vrus com maor varabdade antgnca destacam-se o vrus da nfuenza, HIV, rnovrus, BVDV, vrus da Febre Aftosa. 3. Infeco de stos de prvgo. Stos de prvgo so ocas do organsmo onde os mecansmos efetores do sstema munogco (cuas, prncpamente) tm acesso restrto. Por sso, vrus que nfectam esses stos permanecem reatvamente protegdos da resposta munogca. Os hespervrus nfectam o sstema nervoso centra, oca de dfc acesso s cuas efetoras da resposta munogca. Por outro ado, os neurnos nfectados no expressam MHC-I, no podendo ser sados por CTLs. Vros vrus nfectam o feto, que tambm consderado um sto de prvgo (BVDV; ruboa, parvovrus). Os papomavrus nfectam camadas profundas da pee, de dfc acesso aos mecansmos munogcos. Os eptos em gera, e prncpamente o rena, consttuem- 71 se tambm em stos de prvgo e permtem uma repcao vra reatvamente pouco montorada peo sstema munogco. 4. Imunossupresso e/ou nterfernca com a resposta munogca : Aguns vrus afetam dretamente o sstema munogco, pos nfectam e ateram a funo de cuas mportantes na resposta mune. O exempo mas cssco o HIV, que nfecta e destr grandes quantdades de nfctos TCD4. Como os CD4 esto entre as cuas mas mportantes do sstema mune, a resposta munogca dos ndvduos nfectados peo HIV fca extremamente pre|udcada. Vros outros vrus (BVDV, Dengue, Febre Amarea), nfectam monctos/macrfagos, podendo tambm nterferr na resposta munogca. Os adenovrus nterferem de manera dferente: nbem a expresso de mocuas de MHC-I peas cuas nfectadas. Com sso, as cuas nfectadas no so reconhecdas peos CTLs e o vrus pode repcar produtvamente. Os poxvrus codfcam substncas que so secretadas peas cuas peas cuas nfectadas e nterferem/boqueam a ao de IFNs, IL-1 e TNF. 5. Induo de toernca: O termo toernca refere-se fata de resposta (ou resposta nsufcente) a determnados antgenos. O vrus da Darra Vra Bovna (BVDV), quando nfecta fmeas prenhes entre os das 40 e 120 das de gestao nduz um estado de toernca no feto. Esse feto desenvove-se e nasce cncamente sado, porm abrga o vrus que repca persstentemente no organsmo sem resposta do sstema munogco (esses anmas so soronegatvos= no apresentam antcorpos contra o BVDV). O mecansmo de nduo de toernca anda no perfetamente conhecdo. No entanto, acredta-se que no momento da nfeco, o sstema munogco do feto este|a na fase de "aprendzado", ou se|a, na fase de reconhecer e dstngur os antgenos prpros dos no-prpros. Nessa fase, no entanto, o vrus est presente no organsmo feta que ento consdera os antgenos vras como prpros e no responde munoogcamente a ees. 72 Imunidade contra bact0rias1 O meo ambente rco em mcroorgansmos patogncos, aos quas os anmas esto constantemente expostos. A prncpa funo do sstema munogco proteger o hospedero contra esses mcroorgansmos, evtando a nfeco e a doena. Os prmeros e mas mportantes mecansmos de defesa de nosso organsmo consstem nas barreras compostas pea pee ntegra, a camada de muco de aguns eptos, tosse e perstatsmo ntestna, movmentos dos cos da traqua, renovao de cuas epteas, cdos e enzmas produzdos peas cuas do organsmo, pH vagna e fora mcrobana norma. A resposta munogca contra nfeces bacteranas pode ser dvdda em duas categoras: 1. Resposta nata ou nespecfca e 2. Resposta adqurda ou especfca. Essas duas respostas desempenham paps mportantes em tempos dstntos, com o ob|etvo de controar a nfeco. A resposta inespecfica a prmera a agr e pode ser consderada a mas efetva em mpedr a penetrao do patgeno no organsmo. Inca quase medatamente aps a nfeco. Entre os mecansmos de defesa naturas esto os fatores gentcos, as barreras fsco-qumcas (anterormente ctadas), o sstema compemento e as cuas fagoctcas. Os fatores gentcos esto reaconados resstnca nata de determnados ndvduos ou espces. A atvao do sstema compemento pea va nespecfca se d atravs da atvao da va aternatva do compemento. O componente C3B ga-se superfce da cua bacterana e ancora o compexo de ataque membrana (MAC) evando se bacterana e, am dsso, facta a fagoctose peas cuas que apresentam receptores do compemento. As cuas encarregadas de emnao das bactras peas cuas fagoctcas so os macrfagos (tecdos) e os neutrfos (sangue). Tanto os macrfagos quanto os neutrfos reconhecem as bactras atravs de receptores para o compemento e de receptores para carbohdratos consttuntes comuns da 73 superfce bacterana, mas ausentes nas cuas do organsmo. Aps a gao dessas cuas com as bactras, as bactras so fagoctadas e posterormente dgerdas peas enzmas sossomas. Bactras ntraceuares facutatvas so capazes de sobrevver dentro da cua fagoctca uma vez que conseguem escapar do fagossoma nbndo a formao do fagosossoma ou resstndo ao das enzmas proteotcas aps a formao do fagosossoma. Durante o processo de reconhecmento e fagoctose das bactras, os macrfagos ncam a sntese de ctocnas que apresentam uma funo mportante na estmuao da resposta mune especfca. As bactras GRAM negatvas apresentam popossacardeo (LPS) que capaz de estmuar dretamente os macrfagos sntetzar dversas ctoqunas, como o fator de necrose tumora (TNF) e dversas ntereucnas. Os macrfagos aps fagoctarem, desempenham uma funo mportante para o desenvovmento de uma resposta especfca, que a apresentao de fragmentos da bactra fagoctada assocados ao MHC-II aos nfctos TCD4 (auxares). Os neutrfos apresentam capacdade fagoctca mtada, uma vez que os grnuos se esgotam, essas cuas morrem, ocorrendo a formao de pus. Am dsso, o processo de destruo dos neutrfos gera metabtos que contrbuem para o processo nfamatro. A resposta especfica gerada atravs do prmero contato do agente com o sstema mune especfco, resutando em uma resposta imunolgica primria (produo de antcorpos) e o desenvovmento de clulas de memria especfcas, que podero ser estmuadas em um contato posteror com o antgeno, determnado a resposta imune secundria. A resposta humora muto mportante na defesa contra nfeces bacteranas, prncpamente aqueas causadas por patgenos extraceuares e assm, os antcorpos secretados peos nfctos B formam a resposta mas mportante contra bactras. Dentre as funes desempenhadas peos antcorpos em nfeces bacteranas esto: - Proteo das mucosas: a IgA prevne a adernca de bactras a mucosas e tambm neutraza toxnas. A IgA partcpa da proteo 74 efetva do trato respratro, gastrontestna e gento-urnro, mpedndo a adernca e coonzao bacterana desde que o ndvduo tenha tdo um contato prvo com o antgeno. - Opsonzao: as IgG ao se garem s bactras factam o processo de fagoctose peos macrfagos e neutrfos srcos e tecduas que apresentam receptores para a poro Fc das munogobunas. - Atvao do compemento: a IgM e IgG, ao se garem superfce da cua bacterana desencadeam a va cssca do compemento, atravs da gao do componente C1 poro Fc da Ig. - Neutrazao de enzmas e toxnas: a IgG a prncpa munogobuna responsve pea neutrazao de toxnas, protegendo as cuas contra toxnas e enzmas bacteranas. - Ctotoxcdade ceuar dependente de antcorpo: a IgG pode se gar as cuas que apresentem antgenos bacteranos na superfce e estmuar a destruo dessas atravs de macrfagos, neutrfos, nfctos T e cuas NK por meo de receptores para a poro Fc. ( imunidade celular # desen2ol2ida atra2#s da apresentao de antgenos a 7KAII pelos macrof/gos Gs c#lulas ;D4 >ue por sua 2e0 secretam citocinas >ue estimulam a coordenam a resposta imune. (s citocinas produ0idas pelo linfcitos ;-1 estimulam a produo de linfcitos < e aumentam o poder ltico de macrfagos? neutrfilos e 9O. A resposta s bactrias intracelulares um pouco dferente. As bactras ntraceuares uma vez estando dentro de uma cua, tornam- se nacessves aos antcorpos crcuantes e sua emnao requer que o organsmo ance mo de outra estratga. A prpra resposta mune nata contra essas bactra menos efcente, uma vez que a maora deas resste fagoctose. As bactras ntraceuares atvam cuas NK que produzem IFN-afa que atva macrfagos. O prncpa e mas efcente mecansmo de defesa contra bactras ntraceuares a mundade ceuar atravs de dos mecansmos prncpas: - Atvao dos macrfagos peas ctocnas secretadas peos nfctos Th1; - Lse das cuas nfectadas peos nfctos TCD8 (CTL) prevamente 75 estmuados pea apresentao dos fragamentos bacteranos + MHCI peos macrfagos aos nfctos TCD8. Mecanismos de escape - Presena de cpsua antfagoctca: a cpsua nbe o processo de fagoctose e nterfere com a opsonzao peo compemento. Smarmente a camada de protenas S do Campylobacter fetus tambm mpede a fagoctose; - Evaso dos componentes do compemento: protena M do Streptococcus equi ga-se ao fbrnogno escondendo os stos de gao do C3B. Smutaneamente, a protena M ga-se ao fator H atvando o fator I que nbe o C3B que tenha se gado superfce bacterana. Salmonella typhimurium nbe a nsero do compexo de ataque membrana na sua superfce; - Produo de protenas e eucotoxnas: vras bactras secretam substncas antfagoctcas. Mycobacterium tuberculosis, coli, !aemophilus pleuropneumoniae, " multocida, Mora#ella bo$is, " aeruginosa entre outras secretam substncas chamadas eucotoxnas que destroem as cuas fagoctcas tanto da resposta nata como adqurda. Staphylococcus aureus produz a protena A que se ga poro Fc da IgG, mpedndo a gao da IgG com as cuas fagoctcas. Am dsso, produz protenas de gao com o cogeno que auxam na evaso do sstema compemento. !aemophilus influen%ae e S& pneumoniae produzem enzmas que dgerem a IgA; - Varao antgnca: agumas bactras substtuem componentes de superfce de ta forma que conseguem escapar dos antcorpos presentes; - Sobrevvnca ntraceuar: S& aureus sobrevve exposo respratra da cua fagoctca pea presena de carotendes. 'rucella abortus e Mycobacterium bo$is por dferentes mecansmos nbem a fuso do fagossoma com o sossomo, resstndo ao das enzmas sossomas. (isteria monocytogenes escapa do fagossoma nvadnco o 76 ctopasma ceuar. Corynebacterium pseudotuberculosis sobrevve no fagosossoma; - Imunossupresso: a enterotoxna do S. aureus atua como um superantgeno gando-se s mocuas do MHCII e nduzndo a secreo de ctocnas determnado um quadro de exausto do sstema munogco e conseqente munossupresso. VA/INA0 VRI/A0 Vros tpos de vacnas tm sdo formuadas para proteger anmas e pessoas de enfermdades vrcas. Em comparao com enfermdades bacteranas, o mpacto das vacnas vrcas sobre a hstra natura dessas enfermdades tem sdo muto maor. Enfermdades como a varoa | foram erradcadas do mundo pea vacnao. Outras, como o sarampo e poomete tveram sua ncdnca drastcamente reduzda e espera-se sua erradcao nos prxmos anos. Vroses anmas como a Febre Aftosa, Peste Suna Cssca, Doena de Au|eszky, entre outras, tem sdo controadas e eventuamente erradcadas de contnentes nteros peo uso da vacnao. As vacnas vrcas dvdem-se em vvas (repcatvas) e no- vvas (no-repcatvas), com dversas varaes descrtas a segur. Vacinas replicativas 3v+rus vivo4 Vacnas que contm o vrus vve repcam no organsmo, resutando em ampfcao da quantdade de antgeno apresentado ao sstema munogco. Essas vacnas so denomnadas genercamente de $acinas $i$as, $acinas com $rus $i$o modificado (VVM) ou anda $acinas atenuadas& Em gera, a vacnas com vrus vvo so as mas efcazes para a nduo de proteo, pos a repcao do vrus vacna mmetza o que ocorre na nfeco natura. Por sso, a resposta munogca a essas vacnas muto semehante resposta produzda em resposta nfeco natura, e resuta em mundade humora (nfctos B, antcorpos) e ceuar (nfctos TCD4+ e CTLs). A maora das vacnas repcatvas admnstrada peas vas subcutnea ou ntramuscuar. No entanto, 77 vacnas de admnstrao ora (dretamente ou na gua ou amentos) e ntranasa (dretamente ou atravs de aerosss) tambm tm sdo utzadas na veternra. O sucesso das vacnas atenuadas basea-se em trs caracterstcas prncpas: 1. O vrus vacna repca com uma certa efcnca no hospedero; 2. Possu capacdade reduzda de dssemnar-se a partr do oca de nocuao e 3. Possu capacdade reduzda de produzr sntomatooga cnca. Essas vacnas geramente nduzem resposta sda e duradoura e poucas vezes requerem revacnaes freqentes. De manera dea, a repcao do vrus vacna devera mmetzar uma nfeco natura subcnca. Embora se|am consderadas geramente as mas efcazes, as vacnas com vrus vvo podem apresentar probemas, o que restrnge o seu uso em agumas stuaes. A maor restro ao seu uso refere-se possbdade de reverso ao fentpo vruento e produo de doena cnca nos anmas vacnados. .ara serem utili0ados como 2acina? os di2ersos agentes 2irais de2em ser apatogInicos ou pouco patogInicos )atenuados* para a esp#cie animal em >uesto. Em3ora 2ariantes 2irais pouco patogInicos possam ocorrer na nature0a e 4/ ten-am sido identificadas para 2/rios 2rus? mutantes atenuados para a produo de 2acinas so geralmente o3tidos por manipulao e=ou seleo em la3oratrio. Em geral? os 2rus atenuados utili0ados em 2acinas podem ter origem emL 1. 2ariantes )mutantes* naturalmente atenuadosP 2. atenuao por passagens mJltiplas em culti2o celularP 3. (tenuao por passagens em o2os em3rionados ou em animaisP 4. !eleo de 2ariantes cold6adapted ou temperaturaAsens2eisP &. (tenuao por manipulao gen#tica. Esses Jltimos sero a3ordados em outra seco. >) 2utantes natu!almente atenuados. .ara 2/rios 2rus -umanos e animais? 4/ foi poss2el se identificar 2ariantes naturais >ue so apatogInicos ou pouco patogInicos para a esp#cie -ospedeira. Em tese? a identificao destes 2ariantes dependeria apenas de triagem de um nJmero grande de amostras de 2rus de campo. Em alguns casos? se utili0a um 2rus de uma determinada esp#cie animal para imuni0ar outra esp#cie contra um 2rus relacionado >ue acomete essa Jltima. O primeiro uso desse tipo de 2acina foi feito por Eenner? -/ mais de dois s#culos. ( primeira 2acina contra a 2arola -umana foi produ0ida com o v!us da va!ola 'ovina? >ue era pouco patogInico para -umanos. 9o entanto? a replicao desse 2rus em pessoas conferia proteo contra o 2rus da 2arola -umana? >ue # muito parecido com o 2rus 78 de 3o2inos. Da mesma forma? uma 2acina contra a Doen*a de 2a!e( de galin-as foi produ0ida com um -erpes2rus semel-ante? de perus. .roteo contra a !otavi!ose suna foi o3tida atra2#s de 2acinao com um rota2rus de 3o2inos. .roteo contra o v!us da pa!ainfluen-a 3 )-.IA3* -umana foi o3tida em crianas imuni0adas com um .IA3 3o2ino. 9a Europa? uma das 2acinas utili0adas em programas de erradicao da Doena de (u4es0BC foi produ0ida a partir de um mutante atenuado do -erpes2rus suno causador da doena. Esse mutante natural possui uma deleo no gene >ue codifica uma glicoprotena do en2elope )gE*? o >ue o torna pouco patogInico. ( identificao de mutantes naturais atenuados tam3#m foi a 3ase para a produo das 2acinas atuais contra a %e3re (marela )cepa 15D* e polio2rus )!a3in? polio2rus tipo 2*. 9esses casos? os mutantes naturalmente atenuados foram posteriormente mais atenuados por passagens em o2o em3rionado e animais. Em3ora mutantes naturais atenuados pro2a2elmente e1istam para grande parte dos 2rus? na maioria das 2e0es a atenuao # reali0ada em la3oratrio? a partir de cepas 2irulentas. :) Atenua*+o po! passagens em cultivo celula!. U o m#todo mais utili0ado para atenuao de 2rus destinados G produo de 2acinas. ( maioria das 2acinas com 2rus 2i2o de uso -umano e animal foram produ0idas por esse m#todo. \eralmente utili0aAse c#lulas -eterlogas )de outra esp#cie animal* ou ocasionalmente c#lulas da mesma esp#cie? por#m de outro tecido )e1emploL para 2rus respiratrio utili0aAse c#lulas renais? etc...*. Esse m#todo 3aseiaAse na o3ser2ao emprica de >ue a replicao repetida de 2rus em c#lulas de culti2o # fre>Hentemente acompan-ada da perda progressi2a de fun@es necess/rias para a sua patogenicidade=2irulIncia no -ospedeiro de origem. Em3ora os mecanismos respons/2eis pela atenuao geralmente se4am difceis de se determinar? acreditaAse >ue as replica@es sucessi2as resultam na acumulao de muta@es e na seleo de 2ariantes mais adaptados aos culti2os. ( adaptao gradati2a aos culti2os? em contrapartida? resulta na perda progressi2a da capacidade de causar infeco clnica )doena* na esp#cie -ospedeira natural. O nJmero de passagens necess/rias para uma atenuao satisfatria depende do 2rus e 2aria amplamente. (lguns 2rus? mesmo aps centenas de passagens? conser2am a patogenicidade e 2irulIncia para a esp#cie -ospedeira. .ortanto? esse m#todo no # efeti2o para atenuao de todos os 2rus. .or outro lado? alguns 2rus no replicam 3em em culti2os celulares )2rus da -epatite < e ? papiloma2rus animais e -umanos? 2rus da 'ngua (0ul*? o >ue impossi3ilita a utili0ao desse m#todo. Da mesma forma? a reali0ao de um nJmero muito grande de passagens pode resultar em uma atenuao e1cessi2a do agente? com a perda da capacidade de replicar eficientemente no -ospedeiro natural. 9esse caso? a replicao deficiente poderia resultar em 79 estmulo insuficiente do sistema imunolgico. O n2el de atenuao dese4ado pode ser monitorado periodicamente? testandoAse os 2rus de diferentes passagens )e1emplosL passagem 2+? 4+? 8+* em relao a sua patogenicidade=2irulIncia. .ara isso? inoculaAse esses 2rus em animais de la3oratrio ou no -ospedeiro natural e monitoraAse a replicao e a poss2el produo de sinais clnicos. (ps atingirAse a atenuao dese4ada? esse 2rus poder/ ser considerado um candidato a 2rus 2acinal. 3. Atenua*+o po! passagens em ovos em'!ionados ou em animais T O procedimento # similar ao descrito acima? com a diferena >ue multiplicaAse o 2rus sucessi2as 2e0es em o2os em3rionados )o 2rus replica no em3rio* ou em animais de la3oratrio. .ara a replicao em animais de la3oratro? muitas 2e0es # necess/rio adaptarAse o 2rus nessa esp#cie animal. \eralmente so utili0ados coel-os? co3aios? camundongos. .ara alguns 2rus? incluindo 2rus de mamferos >ue replicam em o2os em3rionados )influen0a? por e1emplo*? n2eis satisfatrios de atenuao podem ser o3tidos com essa estrat#gia. 80 4.!eleo de 2ariantes coldAadapted ou temperaturaAsens2eis A ( replicao de 2rus em culti2o celular )ou no prprio -ospedeiro* ocasionalmente resulta na produo de 2ariantes >ue no so capa0es de replicar G temperaturas pr1imas G temperatura corporal )38 + *. 9o entanto? esses 2rus so capa0es de replicar eficientemente G temperaturas mais 3ai1as )33A34 + *. Esses 2ariantes so c-amados de temperaturaA sens2eis );!*. ,ariantes ;! so Jteis para 2acinao intranasal ou intra2aginal? para 2rus cu4as conse>HIncias de disseminao e replicao sistImica se4am gra2es. 9esse caso? o 2rus 2acinal ;! s 2ai replicar pr1imo G superficie corporal )onde a temperatura # 3ai1a* e no 2ai ser capa0 de replicar internamente no organismo. Esses tipos de 2acinas tIm uso potencial importante no caso da influen0a )gripe* em -umanos e para alguns 2rus animais )por e1emploL <K,A1? cu4a 2acinao com 2rus atenuado con2encional pode causar a3ortos*. 9o entanto? tIm sido demonstrado >ue as muta@es >ue conferem o fentipo ;! podem re2erter facilmente? resultando na re2erso G capacidade de replicar G temperatura corporal e causar doena. Recentemente? uma 2ariao nessa estrat#gia foi adotada para a produo de 2acinas contra a gripe )influen0a*. O 2rus # adaptado a replicar somente so3 3ai1as temperaturas )2&A3+ + * e ento # utili0ado como 2acina. Esses 2rus? c-amados de Vcold adaptedW geralmente possuem 2/rias muta@es no genoma e a re2erso a 2irulIncia )deri2ada da capacidade de replicar G temperatura corporal* # pouco pro2/2el. ,acinas cold adapted para a influen0a? de administrao nasal? esto em fase final de testes e de2em ser licenciadas nos pr1imos anos nos ER(. Outra 2antagem dessas 2acinas para uso -umano # a facilidade de administrao. (s maiores 2antagens das 2acinas com 2rus 2i2o modificado referemAse G magnitude e durao da resposta imunolgica indu0ida. Isso de2eAse G capacidade replicati2a do agente? >ue resulta em amplificao do antgeno e estimulao dos diferentes mecanismos efetores da resposta imunolgica. (s maiores restri@es ao seu uso referemAse ao risco potencial de re2erso ao fentipo 2irulento e a conse>Hente produo de doena clnica pelo 2rus 2acinal. Em 2rus atenuados por m#todos tradicionais? como os descritos acima? as 3ases gen#ticas da atenuao so descon-ecidas. !e as muta@es respons/2eis pela atenuao forem em nJmero pe>ueno? # poss2el >ue ocorram re2ers@es durante a replicao do agente no organismo do animal 2acinado. O risco de transmisso do 2rus 2acinal a outros indi2duos tam3#m est/ entre as des2antagens desse tipo de 2acina. 81 .or outro lado? muitas 2e0es no se consegue o3ter uma atenuao completa do agente. Ou se4a? a replicao do 2rus 2acinal pode produ0ir sinais clnicos? geralmente 3randos? da infeco. .or isso # fre>Hente >ue animais ou crianas 2acinadas com esse tipo de 2acina apresentem temperatura ele2ada? irrita3ilidade? apatia? aps a administrao da 2acina. Esses sinais podem ser mais acentuados em indi2duos imunocomprometidos? idosos ou su3nutridos. .ara alguns 2rus? mesmo cepas 2acinais 3em atenuadas podem produ0ir conse>HIncias indese4/2eis. ,acinas com 2rus atenuado contra o 2rus da Diarr#ia ,iral <o2ina )<,D,* e -erpes2rus 3o2ino tipo 1 )<K,A1*? por e1emplo? se administradas a 2acas pren-es podem infectar o feto e causar a3ortos? al#m de outras perdas reproduti2as. Rma comparao entre as principais propriedades das 2acinas replicati2as )2i2as* e noAreplicati2as est/ apresentada na ;a3ela 1. (l#m das 2acinas com 2rus atenuados por m#todos tradicionais? outras 2acinas >ue utili0am o 2rus 2i2o podem ser o3tidas por manipulao gen#tica. Essas 2acinas so apresentadas a seguir? na seo Vvacinas geneticamente manipuladas@. Vacinas vivas recombinantes1 vetores virais e bacterianos ( manipulao gen#tica de microorganismos tem muito sido utili0ada nos Jltimos anos com o o34eti2o de o3terAse 2acinas mais seguras e efica0es. ( manipulao gen#tica de microorganismos permiteL 1. Deleo de genes respons/2eis pela patogenicidade? tornando a cepa 2acinal ade>uadamente atenuadaP 2. Deleo de genes >ue codificam protenas de superfcie? para diferenciar animais 2acinados dos infectados naturalmente )2acinas com marcadores antigInicos*P 3. onstruo de 2rus recom3inantes )2etores* >ue carregam )codificam* genes de protenas de outros 2rusP 4. onstruo de 2rus recom3inantes >ue codificam genes de interleucinas? >ue estimulam diferentes mecanismos da resposta imunolgicaP &. onstruo de 3act#rias recom3inantes? >ue podem codificar protenas )antgenos* de 2rus de interesse. (l#m da construo de 2rus recom3inantes e de 2rus e 3act#rias 2etores para serem usadas como 2acinas 2i2as? essas t#cnicas tam3#m permitem a produo de protenas )antgenos 2irais ou 3acterianos* recom3inantes em sistemas -eterlogos )E.coli? le2edura? 3aculo2rus e c#lulas eucariotas* para serem usadas como imungenos noA2i2os. Essa Jltima aplicao ser/ a3ordada em outra seco. 9o presente captulo sero apresentadas as 2acinas recom3inantes )2ricas? 3acterianas* a serem utili0adas como 2acinas com 2rus 2i2o. 82 1. Vacnas atenuadas por deeo (vacnas deetadas). Para os vrus cu|as bases gentcas da patogencdade e vrunca so conhecdas, possve natvar ou deetar os genes responsves por essas propredades. Com sso, o agente torna-se apatognco/pouco patognco (atenuado). O agente atenuado pea deeo/natvao do gene ento utzado como vacna. Na manpuao gentca, preserva- se os genes necessros para as funes essencas do agente, para permtr que ee se|a capaz de nfectar, repcar no organsmo do anma e nduza uma boa resposta munogca. Da mesma forma, os genes que codfcam as protenas responsves pea nduo da resposta munogca (protenas de superfce) so preservados. Como resutado, o vrus vacna capaz de nfectar, repcar e nduzr uma resposta munogca por parte do hospedero sem produzr enfermdade cnca. O agente vacna comporta-se exatamente como uma vacna com vrus atenuado (vvo), porm com poucos rscos reatvos possve produo de doena. A grande vantagem desse tpo de vacna a boa atenuao e segurana (baxo rsco de reverso ao fentpo vruento). Geramente so removdos grandes segmentos genmcos ou mesmo genes nteros. Dessa forma, a possbdade do agente manpuado readqurr a vrunca so muto pequenas. Ao contrro das vacnas atenuadas por mtodos tradconas (passagens em cutvo, por exempo), as bases gentcas da atenuao desses vrus bem conhecda e o seu gentpo conseqentemente estve. Por sso, essas vacnas so seguras e representam uma aternatva promssora para as vacnas atenuadas por mtodos tradconas. O nmero de agentes vras que tem sdo manpuado genetcamente por deeo gentca para a produo de vacnas tem aumentado muto nos tmos anos. Os exempos mas csscos so os herpesvrus e os poxvrus. Nos herpesvrus, so vras as protenas que determnam a patogencdade/vrunca, entre as quas as gcoprotenas do enveope, enzmas codfcadas peos vrus (tmdna knase |TK|, rbonuceotdeo 83 redutase|RR|, dUTPase, etc...) e protenas do capsdeo. .ara o 2rus da pseudorai2a ).R,P Doena de (u4es0BC de sunos* e 2rus da rinotra>uete infecciosa 3o2ina )I<R, ou <K,A1*? a en0ima timidina Binase );O* # um dos principais fatores de 2irulIncia. ( funo da ;O est/ associada G capacidade dos -erpes2rus replicar em neurNnios no sistema ner2oso central. Suando o gene >ue codifica a ;O # inati2ado? o 2rus mutante ret#m a sua capacidade de replicar nas c#lulas do epit#lio nasal e genital do animal? mas replica muito ineficientemente )muito pouco* em neurNnios. om isso? a neuro2irulIncia e neuropatogenicidade do agente fica muito redu0ida. epas ;O negati2as );OA* demonstraram ser seguras e efica0es na induo da proteo. 7utantes nos genes >ue codificam a RR? dR;.ase e algumas glicoprotenas do en2elope )g? gE* tam3#m so atenuados e poderiam ser usados como 2acinas. 7utantes ;OA de po12rus tam3#m apresentam fentipo atenuado. ( produo de 2rus mutantes atenuados por deleo=inati2ao de genes depende inicialmente da identificao do )s* gene )s* respons/2eis pela patogenicidade e 2irulIncia. .ara muitos 2rus? a patogenicidade e 2irulIncia so multifatoriais? ou se4a? so dependentes de 2/rios genes? o >ue impossi3ilita a sua deleo. 9o caso da patogenicidade=2irulIncia serem determinadas por apenas um )ou poucos genes*? a deleo s pode ser feita se esse )s* gene )s* no # essencial para a replicao do agente. Do contr/rio? a sua deleo implicaria na inati2ao do agente. .ara 2/rios 2rus )-erpes em geral? po12rus? adeno2rus* genes importantes para o fentipo 2irulento e >ue no so essenciais para o 2rus )podem ser deletados* 4/ foram identificados e 2acinas produ0idas por essa metodologia 4/ encontramAse no com#rcio. Em tese? 2acinas 2ricas atenuadas por deleo=inati2ao podem ser o3tidas para >ual>uer 2rus em >ue se4a poss2el identificar produtos gInicos respons/2eis pela patogenicidade e >ue esses produtos )e a manipulao reali0ada para inati2/Alos* no forem essenciais para a replicao 2iral. .or isso? a lista de poss2eis candidatos para esse tipo de 2acina # longa. 2. Vacnas com marcadores antgncos (vacnas dferencas). Para a grande maora das vacnas de uso humano e anma no possve dstngur-se a resposta sorogca nduzda pea vacnao da resposta produzda em resposta nfeco natura. Ou se|a, quando o teste sorogco postvo, os antcorpos presentes no soro podem ter sdo nduzdos tanto por vacnao prva como por nfeco natura. A 84 mpossbdade de dstngur-se antcorpos vacnas dos antcorpos nduzdos pea nfeco natura partcuarmente crtca para vrus que estabeecem nfeco atente ou persstente. Nesses casos, a deteco de antcorpos ndca que o anma um potenca portador. Procedmentos de comrco, mportao/exportao de reprodutores e programas de erradcao de vras enfermdades anmas tm sdo afetados por esse probema. Os prncpas vrus envovdos so os herpesvrus suno (vrus da Doena de Au|eszky) e bovno (BHV-1, BHV-5). Programas de erradcao da Peste Suna Cssca da Europa tambm tem demonstrado a necessdade e utdade de vacnas com marcadores antgncos. No caso da vacna natvada oeosa para a Febre Aftosa, possve dferencar-se a resposta natura da resposta vacna, atravs de um teste sorogco (VIA). Esse teste detecta antcorpos formados contra uma protena no-estrutura do vrus (uma enzma envovda na repcao do agente), que s produzda na nfeco natura. Ento, resutado postvo no teste ndca que os anmas reagentes foram nfectados peo vrus de campo. No entanto, para a maora das vacnas, no possve fazer essa dstno. Por sso, h mutos anos tem se nvestdo no desenvovmento de vacnas que permtam dstngur anmas vacnados dos nfectados naturamente. Os avos prncpas so os herpesvrus ctados acma. As prmeras vacnas com marcadores antgncos para o PRV foram desenvovdas no fna dos anos 70. Atuamente, exstem vacnas dferencas para o BHV-1 e PRV no comrco dos EUA, Canad, aguns pases europeus e |apo. Programas de erradcao do PRV nos EUA e pases europeus so baseados no uso de vacnas dferencas. O mesmo apca-se erradcao do BHV-1 de aguns pases europeus. No Bras, uma vacna dferenca para o BHV-1 fo recentemente produzda e est atuamente em fase de testes em anmas. A EMBRAPA/CNPSA Concrda/SC est desenvovendo uma vacna dferenca para o PRV, com o ob|etvo de us-a em um programa de erradcao da doena do Estado. 85 A estratga para a produo de vacnas dferencas consste na natvao ou deeo de um gene que codfca uma gcoprotena (ou protena) do enveope vra e o uso do vrus deetado como vacna. A dferencao da resposta sorogca feta peo uso de um teste sorogco (ELISA) que detecta antcorpos contra a protena deetada. No entanto, no quaquer protena do vrus que pode ser deetada, pos mutas so essencas para a repcao vra. Ento, a protena-canddata a ser deetada e consttur-se no marcador antgnco deve preencher aguns requstos: 1. No ser essenca para o vrus; 2. Ser munognca; 3. No ser necessra para a nduo de proteo; 4. A deeo deve contrbur para a atenuao; 5. Deve ser conservada entre amostras de campo. Para o PRV e BHV-1, as protenas mas utzadas como marcadores so as gcoprotenas C (gC) e E (gE). Essa tma parece ser a mas adequada, pos am de um bom marcador antgnco, a sua deeo contrbu para a atenuao do vrus. Atuamente, a maora das vacnas dferencas para o PRV e BHV-1 so gE negatvas (gE - ). ( figura a3ai1o ilustra o princpio das 2acinas diferenciais. Em resumoL 1. DeletaAse ou inati2aAse o gene de uma glicoprotena 2iral noAessencial )e1emplo gE*P 2. RsaAse o 2rus deletado )gE 5 * como 2acinaP 3. Os animais 2acinados iro desen2ol2er anticorpos contra todas as protenas 2irais? com e1ceo da gEP 4. Rtili0aAse um teste sorolgico >ue detecta anticorpos contra a protena deletada )E'I!( antiAgE*P &. Os animais >ue reagirem positi2amente nesse teste apresentam anticorpos contra a gE. Ou se4a? foram infectados com o 2rus de campo ou 2acinados com 2acinas tradicionais. Os animais >ue no reagirem nesse teste no foram infectados com o 2rus de campo. (nimais 2acinados com a 2acina gE 5 tam3#m so negati2os. (s glicoprotenas do -erpes2rus mais su4eitas a deleo total ou parcial soL g? gE? ou gI. (s >ue so essenciais para a replicao e? >ue no podem ser deletadas soL g<? gD? gK e g'. 9o .R,? as glicoprotenas >ue podem ser deletadas para a formulao de um 2acina diferencial soL g? gc ou gE. (s 2acinas diferenciais com 2rus 2i2o )atenuado por manipulao gen#tica* possuem as mesmas 2antagens gerais das 2acinas 2ricas 2i2as? como duas 2antagens principaisL 1. .ermitem a diferenciao entre 2acinados e infectadosP 2. ( deleo torna essas cepas mais 86 est/2eis geneticamente e portanto mais seguras >ue as 2acinas atenuadas por m#todos tradicionais. Em3ora a maioria das 2acinas diferenciais em uso ou em testes se4am para uso como 2acinas 2i2as? # poss2el tam3#m utili0ar esses 2rus delatados para a produo de 2acinas diferenciais inati2adas. Da mesma forma? a maioria das 2acinas diferenciais tem sido produ0idas atra2#s de manipulao gen#tica. 9o entanto? m#todos tradicionais de selao de mutantes naturais defecti2os em alguma glicoprotena noAessencial 4/ foram usados. Rma das 2acinas diferenciais para o <K,A1 )gE 5* utili0ada na Europa foi o3tida de um mutante natural gE 5 e no por manipulao gen#tica. 3. Vacnas de vetores vras .ara alguns 2rus? a resposta imunolgica >ue confere proteo # indu0ida por apenas uma ou poucas protenas 2irais. 9esses casos? # poss2el o3terAse n2eis ade>uados de proteo utili0andoAse apenas essa )s* protena )s* imunogInicas como 2acina. Essa )s* protena )s* # )so* purificadas dos 2rions )2acinas de su3unidades* ou produ0idas como protenas recom3inantes. 9o entanto? o uso dessas protenas como imungeno 2acinal possui as limita@es das 2acinas noA2i2as? em termos de proteo. .rincipalmente? a incapacidade de indu0ir resposta especfica por linfcitos D8a citot1icos );'s*? to importante para a proteo contra 2/rios agentes 2irais? constituiAse em uma limitao importante dessas 2acinas. Estrat#gias para contornar esse pro3lema incluem o uso de ad4u2antes ou carreadores especiais. 9o entanto? a estrat#gia mais eficiente para apresentao )e entrega* de antgenos 2irais para o organismo de modo a indu0ir uma imunidade slida e protetora # a introduo do gene dessa protena no genoma de outro 2rus )c-amado de 2etor*? e o uso do 2rus 2etor )2i2o* como 2acina. O 2rus 2etor 2acinal? ao ser administrado ao animal? ir/ replicar? produ0ir as suas protenas T e a protena do outro 2rus cu4o gene foi introdu0ido no seu genoma T indu0indo uma resposta imunolgica de magnitude e espectro caracterstica de 2acinas 2i2as )D4a? anticorpos? ;'s*. (s protenas do 2rus patogInico so apresentadas para o sistema imune em uma infeco no patogInica promo2ida pelo 2rus 2etor. Infeli0mente? esse tipo de estrat#gia s tem sucesso para os 2rus em >ue os antgenos >ue indu0em resposta imunolgica protetora esto concentrados em poucas protenas >ue podem ser identificadas. (ssim? os genes de interesse? ou se4a? a>ueles >ue codificam esta protena? so clonados no genoma de outro 2rus >ue # utili0ado como 2acina. A grande vantagem das vacnas de vetores vras que munoogcamente eas funconam como uma vacna de vrus vvo. Ou 87 se|a, o vrus vetor mantm a capacdade de repcar. Com sso, a resposta munogca nduzda ncu a formao de antcorpos e a atvao de nfctos TCD4+ e TCD8+ ctotxcos. A capacdade de mutpcao do agente, com a conseqente ampfcao do antgeno, resuta em uma resposta munogca de grande magntude. Outra vantagem a de que pode-se eventuamente ntroduzr genes de vros vrus de nteresse no genoma de um s vrus vetor. Assm, uma vacnao nca com um nco vetor podera conferr mundade contra vros agentes Por outro ado, podem exstr probemas nerentes s vacnas vvas, como reverso da vrunca, recombnao com vrus de campo, transmsso para o meo ambente, e nstabdade gentca. No entanto, o maor probema com essas vacnas a nterfernca com mundade pr-exstente contra o vrus vetor. Se o vrus vetor um vrus dssemnado na popuao em questo, possve que grande parte dos anmas | tenha sdo exposto e apresente mundade contra o vrus. Com sso, a mundade pr-exstente pode restrngr a repcao do vrus vacna e conseqentemente reduzr a resposta munogca. Da mesma forma, se o vrus vetor for utzado em revacnaes, a mundade produzda em resposta prmera munzao pode restrngr a resposta s revacnaes. Dos probemas em especa, devem ser consderados quando vetores vras vvos so utzados como vacna. Prmero: na grande parte dos casos, o hospedero monta uma resposta munogca contra o antgeno de nteresse bem como contra o vetor vra.. Como resutado, a utzao posteror desse mesmo vetor pode resutar em resposta nadequada ou nefcente. Segundo: a ntroduo de vetores vras vvos, embora atenuados, pode determnar conseqncas adversas, prncpamente em ndvduos munocomprometdos. Deve-se consderar que aguns vetores podem produzr efetos patogcos especamente em ndvduos recm-nascdos, dosos e munocomprometdos. Os vrus a serem utzados como vetores devem possur agumas caracterstcas, como: 1. Serem apatogncos para a espce hospedera 88 ou de fc atenuao; 2. Possurem genoma grande e de fc manpuao; 3. Serem facmente manpuves em aboratro; 4. No serem dssemnados na popuao a ser vacnada. 5. Repcar (e nduzr resposta munogca) em ocas do organsmo equvaentes aos do vrus cu|a protena fo nserda no seu genoma. Essa estratga tem utzado prncpamente com vrus que possuem DNA como genoma (poxvrus, adenovrus e herpesvrus), mas tambm recentemente para vrus RNA (Sndbs, vrus da Febre Amarea). Os po12rus so os 2rus mais utili0ados como 2etor por apresentarem um genoma grande. (l#m disso? so # facilmente manipul/2eis? apatogInicos e de f/cil administrao. Rm dos grandes pro3lemas em se utili0ar o 2rus 2accinia como 2etor # >ue a grande maioria das pessoas e muitas esp#cies animais tIm anticorpos contra o 2rus e? com isso? o 2etor >uando inoculado pode ser eliminado muito rapidamente pelo sistema imune? resultando em uma replicao 2iral mnima e resposta imunolgica insuficiente. Exempos de vacnas utzando vetores vras: 1. Poxvrus como vetor: poxvrus expressando a gcoprotena G do vrus da rava. Utzada no controe da rava svestre em carnvoros na Europa. A vacna, de admnstrao ora, era msturada em pedaos de carne anados na foresta por hecpteros. Os carnvoros, ao ngerrem a carne com o vetor, suportaram a repcao do agente e a expresso da protena G, a qua nduza resposta munogca contra ea e conseqentemente contra o vrus da Rava. 2. Exste atuamente no comrco uma vacna contra a cnomose, na qua o vetor utzado o poxvrus de canro expressando as gcoprotenas HA e F do vrus da cnomose (Fgura). 3. Herpesvrus bovno tpo 1 (BHV-1) expressando eptopo da protena do capsdeo (VP1) do vrus da Febre Aftosa fusonado com a gC do BHV-1. Nesse caso, a munzao tanto contra o BHV-1 como contra o vrus da febre aftosa. 4. Vrus da febre amarea naturamente atenuado 17D (cepa vacna) como vetor para vrus heterogos: YF17D tem sdo utzado como vetor para genes que codfcam antgenos protetvos do vrus da Encefate |aponesa e vrus da Dengue. 5. Adenovrus suno expressando a protena VP1 do vrus da Febre Aftosa. Essa vacna expermenta fo 89 desenvovda nos EUA com o ob|etvo de ser utzada em stuaes de emergnca, no caso de aparecmento de focos de Febre Aftosa em pases vres da doena. Nesse caso, a admnstrao perfoca da vacna produzra uma resposta rpda (como com vrus vvo - o adenovrus) nos anmas das propredades vznhas ao foco, mtando e eventuamente mpedndo a dssemnao do agente a partr do foco. 6. Adenovrus bovno 3 recombnante expressando a gcoprotena E2 do vrus da Darra Vra Bovna (BVDV). 7. Vrus Sndbs, que um vrus humano vrtuamente apatognco, expressando antgenos (gp120) do HIV. Essa vacna est atuamente (2001-2002) em fase de testes em aguns pases afrcanos 4. Vrus recombnantes expressando genes de ntereucnas. A manpuao gentca de vrus tem permtdo no apenas a ntroduo de genes de outros vrus no seu genoma (vetores vras), como tambm a ntroduo de outros genes de nteresse. Entre estes, esto genes de substncas moduadoras da resposta munogca, como as ntereucnas. Nesse sstema, genes que codfcam ntereucnas de nteresse (IFNs , e , TNF, IL-2, IL-4 e IL-4) so ntroduzdos no genoma do vrus vetor. Ao ser nocuado no hospedero como vacna, o vrus vetor r expressar as suas protenas (antgenos, que ro estmuar a resposta munogca), am da protena de nteresse (ntereucnas ctadas acma, como exempo). A expresso da IL-2 em tecdos do anma, por exempo, r estmuar uma resposta mas forte de nfctos T heper (CD4+). A expresso de IFNs , r estmuar a resposta munogca nespecfca (neutrfos, macrfagos), aumentando a resposta ao antgeno vacna. Ou se|a, am dos antgenos de nteresse, o vrus vetor eva consgo genes que expressam ntereucnas estmuantes da resposta munogca. Recentemente, um adenovrus, que expressa a VP1 do vrus da Febre Aftosa, am do IFN , fo testado com sucesso em sunos. A funo do IFN produzdo peo vetor aps a vacnao conferr proteo nespecfca nas prmeras horas (e das), at o aparecmento da resposta 90 especfca, medada por nfctos CD4+ e CD8+ e antcorpos especfcos para o vrus da Aftosa. Ou se|a, o IFN conferra resposta medata at o aparecmento da resposta especfca. Essa estratga uma das mas promssoras em termos de vacnas de vetores. 5. Vetores bacteranos expressando antgenos vras. Bactras tambm podem ser utzadas como vetores, como estratga de entregar (apresentar) antgenos vras para o sstema munogco. O uso de bactras como vetores partcuarmente t quando se dese|a a nduo de resposta munogca em ocas especfcos como mucosas. O gene de nteresse nserdo no genoma da bactra, que ento admnstrada como vacna, geramente por va ora. A repcao da bactra (com a conseqente produo do antgeno de nteresse) no trato gastro-ntestna estmua resposta oca e sstmca. Custo reduzdo de produo, facdade de admnstrao, poucos efetos coateras e estabdade de armazenamento esto entre as vantagens dos vetores bacteranos. A maor vantagem, no entanto, refere-se nduo de mundade oca, geramente na mucosa gastro-ntestna. As bactras a serem utzadas devem ser comensas ou atenuadas. As mas utzadas em expermentos so a Samonea sp., Lstera monocytogenes, Vbro choerae, Shgea sp., am de actobacus. Vacnas expermentas contra o vrus da nfuenza, utzando a Samonea como vetor | foram desenvovdas. Nesta vacna, genes de duas protenas vras (HA e NP) foram nserdos no genoma da bactra. A admnstrao ora dessa bactra a camundongos gerou resposta humora (antcorpos) e ceuar (CD4+, CTLs) contra o vrus da nfuenza. Uma vacna expermenta contra o vrus da Sndrome Respratra e Reprodutva dos sunos (PRRSv) fo produzda utzando-se Mycobacterum bovs (expressando uma gcoprotena do vrus) como vetor. Camundongos e etes munzados por va parentera desenvoveram antcorpos especfcos contra o vrus. Vacnas expermentas contra o HIV e o papomavrus humano, utzando-se Lactobacus como vetor, foram recentemente descrtas na teratura. 91 Am de antgenos vras, os vetores bacteranos podem tambm ser utzados para entrega de outros antgenos de nteresse. 92 Vacinas com v+rus inativado So vacnas formuadas a partr do vrus orgna, geramente mutpcado em grandes quantdades em cutvo ceuar. Aps a obteno de um ttuo vra ato, a nfectvdade do agente destruda por mtodos qumcos ou fscos. O vrus natvado perde a sua vabdade e nfectvdade, sendo ncapaz de repcar no hospedero (vrus )morto*) porm as partcuas vrcas conservam a sua antgencdade. Ou se|a, o antgeno vacna consttu-se de uma quantdade grande de partcuas vrcas nvves. Essas vacnas so seguras. Porm, grandes quantdades de antgeno so necessras para obter-se uma resposta munogca satsfatra. Geramente, a vacnao prmra (prmovacnao) compreende duas ou trs doses, e revacnaes (reforos) so necessros a determnados ntervaos para manter o nve de mundade. Essas vacnas so tambm chamadas de $acinas inati$adas, $acinas com $rus morto ou smpesmente $acinas mortas e esto entre as mas utzadas em medcna humana e veternra 9o processo de inati2ao # importante >ue as caratersticas antigInicas das protenas estruturais )a>uelas >ue comp@e a partcula 2iral* do 2rus se4am preser2adas. (lguns m#todos de inati2ao? no entanto? podem alterar a estrutura de algumas protenas. om isso? o organismo monta uma resposta imunolgica contra as protenas alteradas? resultando em anticorpos >ue podem fal-ar em recon-ecer o agente >uando de uma e1posio posterior.. Os agentes qumcos mas utzados para natvao de vrus so: 1. Formadedo - age em protenas e no cdo nucco formando gaes qumcas cruzadas (cross+lin,ing) e nfexves; 2. Acetona ou etano - denaturam suavemente as protenas; 3. Agentes akantes (Beta- propoactona |vacna da rava|, etamna (vacna da Febre Aftosa); (etenemna, acetetenemna, etenemna bnra) - promovem gaes qumcas cruzadas no cdo nucco, natvando o agente sem (ou com mnmas) mudanas conformaconas nas protenas, nterferndo pouco na munogencdade; 4. Formana. Os agentes fscos mas utzados na natvao de vrus para produo de vacnas foram o caor, raos UV e raos gama. Atuamente os 93 mtodos fscos esto em desuso. U necess/rio >ue a inati2ao se4a completa e efica0? eliminando a 2ia3ilidade da totalidade das partculas 2ricas presentes na preparao. ( inati2ao completa # a 3ase da segurana dessas 2acinas? >ue podem ser utili0adas em crianas? idosos? imunodeprimidos e animais gestantes. (cidentes 2acinais de2idos G inati2ao incompleta do polio2rus )2acina inati2ada !alB* 4/ foram descritos nos Estados Rnidos. (lguns surtos de %e3re (ftosa ocorridos no passado tam3#m foram atri3uidos G infecti2idade residual de 2acinas inati2adas. 7esmo assim? as 2acinas inati2adas so amplamente utili0adas e so consideradas seguras por no re2erter a 2irulIncia. ( imuni0ao com 2acinas inati2adas no resulta em replicao do 2rus 2acinal no -ospedeiro. Dessa forma? no -/ amplificao do antgeno. .rotenas 2irais no so e1pressas na superfcie celular ou produ0idas dentro das c#lulasP e no ocorre apresentao dos antgenos aos linfcitos ; D8a );'s*. ( resposta imunolgica indu0ida pelas 2acinas inati2adas # predominantemente -umoral? mediada por anticorpos )principalmente da classe Ig\*. Resposta mediada por linfcitos ; D4a )au1iliares* tam3#m ocorre? pois os antgenos prot#icos so fagocitados por (.s e apresentados 4unto com o 7KAII aos linfcitos D4a. Vacnas natvadas no nduzem satsfatoramente a produo de IgA, fator ndspensve para proteo de mucosas e que consttu-se em mportante barrera contra a entrada de agentes nfeccosos no organsmo. Para vrus cu|a resposta munogca que confere proteo baseada em antcorpos, esse tpo de vacna pode ser utzada com sucesso. Prncpas desvantagens e desvantagens das vacnas natvadas: Desvantagens: 1. Geramente nduzem resposta munogca de magntude moderada e de curta durao; 2. Requerem revacnaes; 3. Exgem o uso de ad|uvantes; 4. No nduzem nfctos T ctotxcos e fraca (ou ausente) mundade de mucosas; 5. Possuem custo ato de produo, em comparao com as vacnas com vrus vvo; 6. A vacnao no raramente resuta em efetos coateras; 7. Exgem admnstrao parentera. 8. Efcnca muto afetada pea mundade passva. As prncpas vantagens referem-se a segurana (sem rsco de causar doena ou ser transmtda a outros ndvduos), estabdade e ausnca de rsco 94 de agentes contamnantes na vacna. Em comparao com as vacnas de subundades ou protenas recombnantes, possuem a vantagem de serem compostas peos vrons ntegros, com todas as protenas estruturas. Grande parte das vacnas de uso humano e veternro em todo o mundo so formuadas com vrus natvado Prncpas vacnas natvadas para anmas: - Bovnos: Febre Aftosa, IBR (rnotraquete nfeccosa bovna), Rotavrus, Coronavrus, Paranfuenza, Rava. - Ces e gatos: Rava, Parvovrose, Coronavrose, Paranfuenza. - Humanos: Infuenza, Hepatte A, poomete (Sak), Rava. Vacinas de subunidade (s 2acinas de su3unidade consistem em uma ou algumas protenas )geralmente as mais imunogInicas* purificadas de 2rions. .ara isso? o 2rus # multiplicado em culti2o celular ou o2o em3rionado e posteriormente su3metido ao processo de purificao ou e1trao das protenas de interesse. 9o caso da 2acina contra o 2rus da -epatite < )K<,*? as partculas no infecciosas )compostas apenas do antgeno de superfcie do 2rus* so purificadas do sangue de pessoas portadoras da infeco crNnica. Essas 2acinas podem ser efica0es para 2rus cu4a imunidade concentraAse na resposta imunolgica )geralmente anticorpos* direcionados contra poucas protenas do 2rus. (s protenas utili0adas nesse sistema so geralmente glicoprotenas de en2elope e=ou protenas do capsdeo. O processo de purificao das protenas en2ol2e sol2entes lipdicos para a solu3ili0ao dos 2rions e li3erao das protenas do capsdeo=en2elope. (s glicoprotenas K( e 9(? semiA purificadas de 2rions? 4/ foram utili0adas como 2acina contra a gripe. Essa 2acina foi menos t1ica e mel-or tolerada >ue as 2acinas inati2adas. 9o entanto? foi menos imunogInica >ue as 2acinas formuladas com o 2rus ntegro inati2ado. Essas 2acinas so tam3#m c-amadas de split vaccines$ pois so o3tidas pela separao=fracionamento de por@es imunogInicas dos 2rions. ,acinas desse tipo 4/ foram testadas e usadas contra -erpes2rus animais e -umanos? influen0a e corona2rus. ( 2acina de su3unidade mais importante # a 2acina tradicional contra o K<,? utili0ada por muitos anos no controle da -epatite < -umana. Essa 2acina # preparada a partir de su3A partculas 2irais noAinfecciosas >ue ocorrem no sangue de portadores crNnicos do K<,. 95 Essas partculas? compostas do antgeno de superfcie )K3s(g* so altamente purificadas a partir do plasma e ento utili0adas como imungeno. (pesar da 3oa efic/cia demonstrada ao longo de d#cadas? a maior restrio a essa 2acina refereAse ao custo de produo )m#todos de purificao* e a capacidade limitada de doses o3tidas. .or isso? recentemente est/ sendo su3stituda por uma 2acina recom3inante? na >ual o prprio K3s(g # produ0ido em grandes >uantidades em le2edura e utili0ado como imungeno. ( resposta imune conferida por essas 2acinas # geralmente inferior G produ0ida por 2acinas com 2rus inati2ado? pois apenas uma poro antigInica # utili0ada. Outra des2antagem # a produo limitada de doses. Esse pro3lema? feli0mente pode ser solucionado pela produo dessas protenas como recom3inantes. ustos e comple1idade para purificao dos antgenos? necessidade de grande >uantidade de antgeno para 3oa imuni0ao? doses repetidas e uso de ad4u2antes esto entre as limita@es dessas 2acinas. omo as 2acinas noAreplicati2as? essas 2acinas indu0em resposta mediada por linfcitos ;D4a )au1iliares* e anticorpos. ( fal-a em indu0ir a produo de linfcitos ;D8a );'s*? a e1emplo de outras 2acinas noAreplicati2as? limita o grau de proteo conferido por essas 2acinas. Vacinas de protenas recom)inantes: So vacnas confecconadas com protenas munogncas do agente produzdas em sstemas heterogos. Geramente so utzadas protenas do enveope ou do capsdeo, capazes de nduzr resposta munogca (medada prncpamente por antcorpos) capaz de proteger o ndvduo frente exposo subseqente ao agente. Esse tpo de vacna tem maor potenca para os vrus cu|a resposta munogca protetora se|a dreconada contra uma (ou poucas) protenas do vron. Os sstemas heterogos mas utzados para a produo das protenas recombnantes so Eschercha co, evedura, cuas eucarotas e bacuovrus. A prmera etapa na confeco da vacna consste na dentfcao da (s) protena (s) munodomnante (s) do agente e o gene que a codfca. Esse gene ento conado (nserdo) em uma mocua crcuar de DNA (pasmdeo), sob controe de um promotor de procarotas (no caso de expresso em E.co) ou eucarotas (para expresso em evedura, cuas eucarotas, bacuovrus). O pasmdeo contendo o gene de nteresse 96 ntroduzdo nas cuas hospederas (co, evedura). Dentro das cuas, o DNA do gene va ser transcrto (sntese de mRNA) e o RNA mensagero va traduzdo, resutando na produo da protena vra de nteresse. Essa protena ser ento purfcada por mtodos boqumcos e utzada como vacna. Esse mtodo muto t para a produo de grandes quantdades de antgeno. Recentemente, tem sdo demonstrado que possve produzr-se antgenos vras mesmo em pantas, como o mho. Esse sstema muto promssor em termos de produo de grandes quantdades de antgeno. Dentre os sstemas heterogos utzados, os mas promssores so eveduras, cuas de mamferos, e bacuovrus. Nesses sstemas, a estrutura trdmensona das protenas produzdas muto semehante estrutura natva da protena na partcua vrca. Com sso, os antcorpos nduzdos pea vacnao sero capazes de reconhecer e gar-se nas protenas vras. Gcoprotenas vras produzdas em E.co geramente no so gcosadas como em mamferos. Com sso podem assumr conformaes dferentes das protenas natvas. Antcorpos produzdos contra essas protenas podem no reconhecer as protenas natvas do agente e fahar em neutrazar o vrus. As prncpas vantagens dessas vacnas referem-se grande capacdade de produo (4 x 10 7 doses da vacna com VP1 do vrus da Aftosa so produzdas a partr de 10 tros de cutvo de E.co) e pureza do antgeno. As desvantagens so bascamente as mesmas das vacnas natvadas. Am dsso, as preparaes contm apenas uma ou poucas protenas munogncas na sua composo, o que pode conferr uma proteo nadequada e ncompeta para aguns vrus. A exempo das vacnas natvadas, para obter-se uma boa resposta munogca necessro uma grande quantdade de antgeno, am de ad|uvantes e reforos perdcos. Em gera, a mundade conferda por essas vacnas muto nferor conferda por vacnas natvadas, necesstando o uso de uma quantdade muto maor de antgeno para obter-se nves equvaentes de mundade. 97 O exempo mas atua de vacnas produzdas com protenas recombnantes a vacna contra o vrus da hepatte B (HBV). A vacna consste do antgeno de superfce do HBV (HbsAg) produzdo em evedura. Grande quantdade da protena produzda, purfcada e utzada como mungeno, con|ugada com um ad|uvante. Essa vacna fo a prmera vacna recombnante de uso humano e est sendo argamente utzada em todo o mundo, possundo boa efcca para conferr proteo contra o HBV. Am dessa, exste uma vacna contra o vrus da hepatte A produzda em cuas eucarotas em testes na Europa. Uma vacna para o vrus do herpes smpex humano (HSV) semehante ao sstema do HBV tambm est em testes na Europa. Uma vacna recombnante contra a grpe (nfuenza), formuada com as gcoprotenas HA e NA produzdas em evedura, tem sdo postuada como aternatva para as vacnas natvadas para pessoas argcas a protenas do ovo, sstema no qua o vrus ampfcado para posteror natvao. Exempos de vacnas utzando protenas recombnantes em veternra so: vacna para Febre Aftosa utzando-se a Vp1, prncpa protena do capsdeo, produzda em E.co (Fgura 1); vacna contra o vrus da eucema fena utzando-se a Vp 70 do enveope produzda em E.co; e vacna contra o parvovrus canno utzando a Vp2 expressa em bacuovrus. Em aguns desses sstemas (HBV, parvovrus, cacvrus, pcornavrus, coronavrus), as protenas do capsdeo se assocam e formam partcuas morfoogcamente semehantes s partcuas vrcas normas. Essas partcuas, chamadas de VLPs ($irus+li,e particles) so ocas, no contm o genoma e por sso no so nfeccosas. A formao dessas partcuas peas protenas recombnantes mehora a apresentao do antgeno e conseqentemente a resposta munogca contra esses antgenos. Vacinas de Pept+deos sint0ticos O conceito de >ue peptdeos podem indu0ir imunidade protetora contra doenas 98 infecciosas surgiu em 16$3? a partir da o3ser2ao de >ue fragmentos pe>uenos )peptdeos* de uma protena do 2rus do mosaico do ta3aco indu0iu anticorpos neutrali0antes em coel-os. Os antcorpos reconhecem e gam-se especfcamente em pequenas reges do antgeno que so necessras para estmuar uma resposta munogca. Essas reges so conhecdas como epitopos ou determinantes antig-nicos. Se a estrutura desses eptopos conhecda, torna-se possve sntetz-os artfcamente. Com o advento da botecnooga nos anos 80, tornou-se possve o desenvovmento de novas vacnas com a utzao de tcncas de booga moecuar. Tas tcncas permtem a ocazao e dentfcao exata de eptopos munogncos, tanto para nfctos T (ctotxcos e auxares) como para nfctos B, de dversos organsmos. Isso permte que para antgenos protcos, seqncas de amnocdos (peptdeos) correspondentes a esses eptopos se|am sntetzados em aboratro. Ento, possve formuar-se uma vacna na qua o antgeno, ao nvs de um vrus ntero (vvo ou natvado) ou protena (subundade ou recombnante), se|a consttuda apenas dos eptopos reevantes dos antgenos de um determnado agente. Os epitopos so geralmente definidos como contnuos ou descontnuos. Epitopos contnuos so formados por peptdeos >ue so especificamente recon-ecidos em sua forma linear de modo >ue a se>uIncia particular de amino/cidos cont#m a informao necess/ria para o recon-ecimento pelo sistema imunolgico. Epitopos descontnuos so constitudos de resduos >ue no so contguos na se>uIncia? mas apresentamAse na superfcie da protena por do3ramento da cadeia polipeptdica. Estudos em protenas glo3ulares tem demonstrado >ue e1iste? em m#dia? um determinante antigInico por & ODa de protena )apro1imadamente 4+ amino/cidos*. .or esta ra0o? macromol#culas prot#icas so carreadoras de um grande nJmero de epitopos? sendo >ue alguns indu0em resposta imunolgica protetora e outros no. (presentao ao sistema imunolgico Rma 2e0 >ue se ten-a produ0ido um peptdeo sint#tico? surge o pro3lema de como apresent/Alo eficientemente ao sistema imunolgico? 2isto >ue o peptdeo por si s poderia ser 99 pe>ueno e solJ2el? sendo impro2/2el a induo de uma resposta imunolgica ade>uada. Rm estmulo antigInico efeti2o re>uer >ue a estrutura tridimensional do epitopo na mol#cula natural de protena se4a preser2ada na 2acina. ( maioria dos epitopos >ue indu0em imunidade -umoral so conformacionais. omo peptdeos sint#ticos curtos perdem sua conformao terci/ria ou >uatern/ria? a maioria dos anticorpos indu0idos contra eles so incapa0es de se ligar ao 2rions? por recon-ecerem a protena em sua conformao natural. .or essa ra0o? essas 2acinas geralmente indu0em ttulos de anticorpos neutrali0antes de magnitude inferior G>ueles indu0idos por 2acinas de 2rus inati2ado ou por protenas intactas purificadas. Por outro ado, os eptopos reconhecdos por nfctos T so peptdeos neares curtos. Estes se gam a mocuas do MHC (compexo maor de hstocompatbdade) para serem apresentados ao sstema munogco (cuas T auxares e ctotxcas). Assm, pode-se sntetzar heteropomeros artfcas de eptopos de cuas T e B undos a um peptdeo, factando desta forma a fuso com a membrana ceuar e conseqentemente mehorando o seu reconhecmento. Por esta razo, evdente que peptdeos so munogncos em sua forma vre contendo stos capazes de nduzr auxo para a produo de antcorpos (eptopos de cuas T auxares) e stos para o reconhecmento especfco de antcorpos (eptopos de cuas B). Os eptopos de cuas T devem anda ser aptos a se gar mocuas de MHC-II na superfce de cuas apresentadoras de antgenos (APC) do hospedero e subseqentemente nteragr com receptores ceuares no sentdo de nduzr a proferao de cuas B. Am dsso, para um peptdeo nduzr uma resposta mune satsfatra, ee deve possur um eptopo aproprado para a espce receptora. Nesse sentdo, uma efcente vacna snttca provavemente dever consstr de uma mstura de peptdeos para superar o probema de hpervarabdade de seqncas e restres de MHC. Am dsso, dever conter eptopos de cuas B e T e possvemente uma rego ndutora de nfctos T ctotxcos. 100 101 )arreadores e ad6uvantes Acredta-se que carreadores e ad|uvantes se|am essencas para a adequada efcca de uma vacna de peptdeos snttcos. Como peptdeos snttcos geramente possuem baxa munogencdade, pode- se g-o a uma protena carreadora ou a um hapteno atravs de dferentes sstemas de gaes qumcas. O prncpa probema com esse sstema que a gao a uma protena carreadora tende a ser casua no evando em consderao a orentao do peptdeo. Assm, o sto antgnco do peptdeo pode no ser adequadamente apresentado ao sstema munogco. Outra abordagem sera a fuso da sequnca do peptdeo a uma protena carreadora atravs de engenhara gentca, sto , coocar o peptdeo em uma rego munodomnante da protena de fuso. Carreadores pdcos conhecdos como ISCOMs (compexos munoestmuatros) e outros sstemas como mceas e possomas auxam a promover o reconhecmento por macrfagos ou cuas avo atravs do aumento da munogencdade. Freqentemente carreadores por s s agem como ad|uvantes. Outro poderoso carreador a PPD (protena purfcada dervada da tubercuna), mas tem sdo usada somente expermentamente. O toxde tetnco tem sdo utzado mas freqentemente em humanos. Estudos tambm demonstram que protenas ntegras da membrana (IMPs) soadas de & Coli, quando covaentemente con|ugadas com peptdeos, mehoram sgnfcatvamente a resposta munogca. Protenas de choque trmco (HSP) tambm podem agr como mocuas carreadoras quando con|ugadas a peptdeos sem requerer ad|uvantes adconas. ,antagens No possu mcroorgansmos vvos ou natvados (segurana); Seqnca curta de amnocdos representando eptopos protetores; Segura, qumcamente defnda, no txca e estve; 102 Eptopos de cuas T podem ser facmente ncudos na vacna, pos so naturamente apresentados na forma de peptdeos neares; Podem ser construdos para conter eptopos de cuas B e T ou vros eptopos de uma ou mas protenas; Podem ser manpuados para remover-se domnos munossupressores presentes em protenas na sua forma orgna; Pode-se ncur vros eptopos em uma mesma formuao. Des2antagens O custo pode ser ato; Pobremente munogncas sendo necessro o uso de ad|uvantes, possomas, ISCOM ou pomerzao; A maora dos eptopos de cuas B so no neares (descontnuos) e por sso no so reproduzdos por peptdeos; Pode ser atamente especfca, no protegendo contra varantes naturas; Vacna com nco eptopo pode seeconar mutantes no campo; Ausnca de resposta em anmas que no possuem o MHC-II aproprado; Resposta por nfctos T ctotxcos (dese|ve em vacnas vrcas) neggve ou nexstente. (plica3ilidade Vrus: Nos tmos anos, tem se observado consderve progresso na nvestgao e desenvovmento de peptdeos snttcos ndutores de resposta mune antvra. | foram testadas vacnas para o vrus da Febre Aftosa (FMD) utzando-se peptdeos correspondentes a uma seqnca de amnocdos da protena vra VP1, obtendo-se resutados satsfatros. Fo descrto anda a proteo de ces contra desafo com amostra vruenta de parvovrus canno (CPV), utzando-se stos antgncos da rego amno- termna da protena VP2. Am dsso, | foram testadas vacnas contra 103 outros dversos tpos de vrus, entre ees, o HIV, papomavrus humano (HPV), vrus sncca respratro humano (HRSV), hepatte B, nfuenza, vrus nfotrpco humano (HTLV-1). Bactras e parastas: | foram reazados testes utzando-se antgenos de (isteria monocytogenes, toxnas de & coli e cera. Estudos mas recentes tem dentfcado mportantes eptopos munogncos do Mycobacterium tuberculosis que podem ser canddatos a antgenos vacnas. Bons resutados foram obtdos em um teste vacna contra cstcercose em sunos no Mxco. Tambm foram testadas com reatvo sucesso vacnas contra Mara. Para essa enfermdade, as vacnas de peptdeos snttcos parecem ser uma das mas promssoras. Outros: Am dos exempos ctados acma, esto sendo reazados estudos utzando peptdeos snttcos como canddatos vacnas ao desenvovmento de uma vacna contraceptva em humanos, para o tratamento de aergas medadas por IgE, na preveno de Myasthena gravs e terapa contra o cncer de prstata, entre outros. Vacinas de DN% As vacnas de DNA so uma das mas recentes e promssoras formas deazadas para a apresentao de antgenos ao sstema munogco com o ob|etvo de munzao. Esse tpo de vacna apresenta uma grande vantagem, pos fornece ao organsmo as nformaes gentcas necessras para que o mesmo produza o antgeno dentro de suas prpras cuas. Esse antgeno possur todas as caracterstcas necessras para a gerao de uma boa resposta munogca. Com sso, efetos coateras que podem ocorrer pea munzao com agentes patogncos so evtados. A prmera etapa na confeco de vacnas de DNA a dentfcao de antgeno(s) do agente que nduzam resposta munogca que este|a reaconada com proteo. Uma vez dentfcada essa protena e o seu 104 gene (segmento do DNA do agente que codfca a protena), faz-se uma conagem do gene. O gene nserdo em mocuas crcuares de DNA chamadas pasmdos. Os pasmdos so mocuas de DNA extracromossmcas que repcam autonomamente em bactras, podendo ser ampfcados em grande quantdade em E.co. Esse pasmdeo deve conter o gene da protena sob o controe de um promotor, que uma seqnca de DNA que drecona a transcro do gene e posterormente a produo da protena. O pasmdeo DNA ser ento usado como vacna e r dreconar a produo da protena antgnca no organsmo do hospedero. A forma mas usua de apcao atravs da nocuao do pasmdeo por n|eo ntramuscuar. Outra forma o bombardeamento ntradmco com partcuas de ouro recobertas com o pasmdeo. O pasmdeo ntroduzdo peo bombardeamento de cuas da derme ou camadas mas profundas. 105 reconhecmento eva a atvao dos nfctos, que tornam-se ctotxcos e eventuamente destroem a cua-avo. A se das cuas produtoras do antgeno vra eva ao extravasamento dessas protenas, que podem ser fagoctadas por macrfagos, processadas e apresentada aos nfctos TCD4+ (heper). Essa protena no meo extraceuar pode tambm ser reconhecda por nfctos B (atravs dos antcorpos de superfce) e gerar resposta por antcorpos. Com sso, a produo endgena da protena vra capaz de gerar resposta ceuar (CD4+, CD8+) e humora (cuas B, antcorpos).As vacnas de DNA, am da mundade humora (antcorpos) e ceuar especfca (CD4 e CD8), oferecem vantagens adconas em reao s vacnas csscas. Neas, a sntese dos antgenos endgenos ocorrem com caracterstcas estruturas muto semehantes mocua natva sntetzada peo patgeno quando nfecta o hospedero, gerando fragmentos protcos de conformao aproprada e necessros para nduo de uma resposta munogca mas efetva. A mundade adqurda persste por ongo perodo de tempo, devdo constante produo do antgeno dentro da cua hospedera e capacdade destes estmuarem nfctos de memra munogca. No pasmdeo contendo o gene do agente nfeccoso pode-se conar outros genes de nteresse. Introduo de genes de ntereucnas (IFN, IL-2) tem sdo preconzada para aumentar a resposta dos nfctos T e outras cuas envovdas na resposta munogca. Am da facdade de produo quando comparada com as vacnas recombnantes, peptdeos snttcos e outras, o custo de produo sgnfcatvamente menor. Essa vacna pode ser obtda em um nco processo de purfcao e pode ser estocada como sedmento seco e temperatura ambente, sendo que no momento da admnstrao necessro somente a ado de pequena quantdade de gua. Estas condes trazem vantagens econmcas para o estabeecmento de ampos programas de munzaes em reges de dfc acesso. Um rsco potenca assocado ao uso dessas vacnas a possbdade, embora remota, do pasmdo recombnar-se com o DNA cromossmco da ceua 106 hospedera podendo evar eventuamente a processos neopscos. Uma mtao a dfcudade de obter-se a ntroduo e captao do pasmdeo por um nmero grande de cuas, de modo a permtr uma resposta munogca de maor magntude. Processos que resutem na captao do pasmdeo em grande escaa peas cuas do hospedero so atuamente ob|eto de pesqusa e podem contrbur para uma mehor efcca e uso dessas vacnas em um futuro prxmo. ( figura a3ai1o # uma representao es>uem/tica do processo de o3teno e estimulao da resposta imune da 2acina de D9(. Mutos trabahos expermentas com vacnas de DNA tem sdo desenvovdos. Agumas esto em fase de testes e outras esto na fase de cencamento. Exempos: Mycobacterum tubercuoss, vrus da hepatte B, vrus da hepatte C, Samonea typh, vrus da rava,vrus sncca respratro, herpesvrus bovno, papomavrus, Schstosoma |aponcum, herpes smpex vrus, vrus da nfuenza, HIV, etc... Vacinas de RNA A munzao com vacnas de RNA ocorre de forma semehante vacnas de DNA. Ao nvs da nocuao do pasmdeo DNA, nocua-se o RNA mensagero (RNAm) que produzdo n vtro (em uma reao qumca reazada no aboratro). A partr desse mRNA a cua hospedera produz protena dese|ada. O tpo de resposta gerada por esse tpo de vacna semehante resposta nduzda por vacnas de DNA. Nesse tpo de vacna, no exste rsco de mutagnese nsercona como nas vacnas de DNA, uma vez que no h a possbdade de ntegrao do RNA no DNA cromossoma. Entretando, a dfcudade e ato custo de produo de RNA em grande escaa em aboratro e a reatva nstabdade do RNA, dfcutam a utzao desse tpo de vacna. A fgura a segur demonstra o esquema de munzao e a resposta munogca produzda. "rof& Agueda ,astagna de Va!gas 107 Imuni7a8.o contra enfermidades bacterianas ,acinas so su3stMncias utili0adas para suscitar resposta imune para pre2enir ou minimi0ar doenas produ0idas por agentes infecciosos. (s 2acinas podem ser compostas de agentes infecciosos propriamente )2i2os ou mortos* e ou produtos destes. Os produtos contendo 3act#rias inati2adas de2em ser mais apropriadamente c-amados 'acte!inas) .rodutos >ue possuem ati2idade t1ica so c-amados to1inas? e to1inas inati2adas so denominadas de to/ides) .ara ser efeti2a uma 2acina de2e estimular uma resposta imune >ue interfira com o ciclo de 2ida do agente infeccioso. To'"ides, )acterinas e (acinas )acterianas omo nas 2acinas 2ricas? as 3ases de um to1ide? 3acterina ou 2acina 3acteriana efeti2a est/ na -a3ilidade de indu0ir uma resposta imune ou resposta capa0 de esta3elecer proteo aos desafios de campo dos microrganismos patogInicos. O desen2ol2imento de um produto efica0 depende do entendimento da patogenia da doena 3acteriana >ue de2e ser pre2enida. Em temos gerais? as doenas produ0idas pelas 3act#rias podem agruparAse em trIs categoriasL 1* (>uelas resultantes da ao de to1ina 3acterianaP 2* (>uelas resultantes de se>Helas da multiplicao e1tracelular do agente 3acterianoP 3* (>uelas resultantes de se>Helas da multiplicao intracelular do agente 3acteriano. To9,ides (s to1inas 3acterianas so de duas classesL endo e e1oto1inas. Endoto1inas so estritamente definidas como por@es lipopolissacardicas da parede das c#lulas gramAnegati2as )# a poro do lipdeo ( respons/2el pelas manifesta@es t1icas*. O dipeptdeo muramCl presente na parede das c#lulas gram positi2as e? em menor >uantidade? nas gram negati2as tam3#m apresenta propriedades t1icas. ;anto endoto1ina como o dipeptdeo muramCl e1ercem sua ati2idade t1ica pela induo de 2/rias cito>uinas pelas c#lulas do -ospedeiro. (s e1oto1inas so protenas >ue interagem com as c#lulas do -ospedeiro )usualmente aps ligao a receptores especficos* resultando em desregulao da funo das c#lulas do -ospedeiro sem dano e1cessi2o? interferIncia com a fisiologia normal das 108 c#lulas do -ospedeiro? ou morte das c#lulas deste. Os anticorpos estimulados pNr 2/rios eptopos das to1inas >ue resultam na neutrali0ao das mesmas so denominados antito/inas) Estes anticorpos podem 3lo>uear a interao entre to1ina e seus receptores celulares ou alterao da configurao das to1inas para ento estas no atuarem nas c#lulas do -ospedeiro. Os anticorpos contra as e1oto1inas demonstram eficiIncia na pre2eno de doena. Os anticorpos contra as endoto1inas tem demonstrado resultados contro2ersos na pre2eno das doenas. Os to1ides so to1inas sem ati2idade t1ica >ue podem indu0ir uma resposta imune )anticorpos*. Os to1ides podem ser produ0idos por inati2ao >umica de uma to1ina ati2a ou pNr manipulao do gene >ue codifica a to1ina para ento a to1ina ser inati2ada )como e1emplo a to1ina (A< onde a su3unidade ( # respons/2el pela ati2idade t1ica e a su3unidade < # respons/2el pela ligao da to1ina ao -ospedeiro? o gene >ue codifica a su3unidade ( pode ser eliminado e o to1ide produ0ido composto somente pela su3unidade <*. (nticorpos contra lipopolissacardeos )endoto1ina* so estimulados pela imuni0ao com mutantes )c-amados mutantes rugosos* >ue produ0em muito pouco unidades O repetidas de lipopolissacardeos. ( principal 2antagem dos to1ides # >ue eles so seguros. Os to1ides administrados parenteralmente estimulam anticorpos )Ig7 e Ig\* >ue interferem com a interao da to1ina e c#lulas do -ospedeiro >ue no esto na superfcie das mucosas. .or outro lado a administrao de to1ides nas superficies mucosas estimulam anticorpos secretrios )sIg7 e sIg(* >ue interferem com a interao da to1ina e c#lulas do -ospedeiro na superfcie das mucosas. ( principal des2antagem dos to1ides utili0ados para imuni0ao pela 2ia das superfcies mucosas # sua meia 2ida e1tremamente curta. :acterinas <acterinas so 3act#rias patogInicas mortas. Elas so usualmente produ0idas pela morte >umica dos agentes infecciosos? com o o34eti2o de preser2ar a estrutura 3acteriana? e1pressando eptopos importantes para estimular uma resposta imune efeti2a. ( resposta imune # >uase sempre anticorpos. 109 interferiro com a interao do patgeno com as c#lulas do -ospedeiro. ( des2antagem # >ue sendo a principal resposta imune anticorpos? ento somente a proteo mediada por anticorpos ocorrer/. .ortanto? as 3acterinas administradas parenteralmente no so to efica0es contra patgenos intracelulares. (s 3acterinas utili0adas para imuni0ao pela 2ia das superfcies mucosas possuem uma meia 2ida e1tremamente curta. Outra des2antagem # >ue o crescimento do patgeno # reali0ado geralmente in 2itro? e a e1presso de eptopos pode ser diferente dos >ue e1pressos in 2i2o? o >ue pode resultar em um produto >ue estimule anticorpos com especificidade inapropriada. Vacinas )acterianas ,acinas 3acterianas so compostas de 2ers@es atenuadas dos patgenos )eles so 2i2os mas possuem 2irulIncia redu0ida*. ( atenuao pode ser o3tida de 2/rias formasL seleo de uma amostra em >ue naturalmente ocorreu mutaoP passagens repetidas em meios artificiais de culturaP eliminao de caractersticas de 2irulIncia por mutao do gene >ue as codifica. ( maior 2antagem das 2acinas 3acterianas est/ diretamente ligadas ao fato de serem 2i2as. (s 2acinas 2i2as no somente possuem uma longa meia 2ida )apesar da locali0ao*? mas e1pressaro eptopos >ue somente so e1pressos in vivo? portanto estimulando anticorpos contra eptopos >ue o patgeno e1pressar/ durante a infeco. Outra 2antagem # >ue as 2acinas 2i2as estimularo anticorpos e -ipersensi3ilidade celular. ( maior des2antagem # >ue as 2acinas 2i2as podem produ0ir doena? por e1emplo? atra2#s da re2erso a um fentipo 2irulento. ;am3#m? se o -ospedeiro 2acinado apresentar 3ai1a da resistIncia? ento a 2acina estar/ mais apta a produ0ir doena. %d6uvantes Ad|uvantes so substncas ntroduzdas na formuao de vacnas para aumentar ou modfcar as suas propredades muno-estmuantes, sobretudo a resposta por macrfagos, nfctos auxares e CTLs. Os ad|uvantes podem retardar a berao de antgenos no organsmo e conseqentemente manter o estmuo antgnco por mas tempo. Ou se|a, antgenos que teram a durao de aguns das no organsmo podem resstr por semanas ou at meses estmuando a resposta munogca. 110 H dos tpos prncpas: ad|uvantes de transporte (como possomas e emuses) que contrbuem para evar antgenos s cuas; e ad|uvantes estmuantes (como as ctoqunas e componentes das paredes de bactras), que podem ncar ou estmuar a resposta munogca. No caso da munzao atravs das mucosas, surge uma stuao especa, pos so necessros ad|uvantes mucosos para nduzr resposta efcente de IgA e nfctos ctotxcos. Na Tabea abaxo podem ser observados os tpos de ad|uvantes utzados em vacnas de uso veternro e o seu modo de ao. Tabea : tpos de ad|uvantes e modo de ao. Tipo Ad*(ante +odo de a%&o Sas de aumno Fosfato de aumno Hdrxdo de aumno Aumno Lberao enta do antgeno Emuso gua-eo Ad|vante ncompeto de Freund Lberao enta do antgeno Fragmentos bacteranos Corybactera anaerbco BCG Dptdeo muramy 'ordetella pertussis Lpopossacardeos Estmua macrfagos Estmua macrfagos Estmua macrfagos Estmua nfctos Estmua macrfagos Agentes atvo de superfce Saponna Lsoectna Detergentes purncos Estmua o processamento de antgenos Compexos de hdrocarbonos Sufato dextrano Gcanos Estmua macrfagos Ad|uvantes msturados Ad|uvante competo de Freud Estmua macrfagos e cuas T ( resposta imunolgica contra 2acinas noA2i2as )2acinas inati2adas? protenas recom3inantes? su3unidades? etc...* # muito fraca >uando no se utili0a ad4u2antes. .or isso? 2acinas no 2i2as necessariamente de2em ser formuladas com ad4u2antes? de modo a indu0irem uma resposta imunolgica eficiente. 9o entanto? a maioria dos ad4u2antes pode indu0ir defeitos colaterais comoL dor e inflamao locais? granulomas? ndulos? fe3re )de2ido aos produtos 3acterianos*? artrite e em alguns casos resposta autoAimune. Os efeitos ad2ersos dos ad4u2antes so os principais respons/2eis pelos efeitos indese4/2eis das 2acinas noA2i2as. 111 ,ipossomas Lpossomas so vescuas pdcas, onde uma fase aquosa totamente envovda por uma ou mas camadas de fosfopdeos. So mportantes para o encapsuamento e berao controada de vras mocuas bogcas, ncundo agente antvras, munomoduadores, toxnas e enzmas. Ees podem encapsuar substncas hdrofcas em seu nteror aquoso e substncas hdrofbcas em suas bcamadas. Estes sstemas tm sdo testados como transportadores de dversos medcamentos, vacnas, matera gentco e enzmas para o nteror de cuas. Apresentam baxa toxcdade e munogencdade; so bodegradves e capazes de proteger os compostos encapsuados da duo e degradao no sangue, de forma que, quando acanam os tecdos avo, podem berar doses concentradas de substncas. Os possomas so normamente preparados a partr de ectnas extradas de fontes naturas ou podem ser preparados geramente a partr de fosfopdos snttcos. Em aguns casos, so propostadamente adconados outros pdos, como coestero, para aumentar a estabdade fsca ou modfcar suas propredades. Em partcuar, o coestero no s aumenta a estabdade mecnca como reduz o vazamento de substncas que so ncorporadas nas vescuas. 112 Exstem vros tpos de possomas, cassfcados de acordo com o tamanho e o nmero de bcamadas pdcas que apresentam. As vescuas formadas por dversas bcamadas sucessvamente separadas por compartmentos fudos so chamadas de mutameares. As vescuas que apresentam apenas uma bcamada e uma rego aquosa centra so denomnadas unameares. A fgura abaxo mostra o esquema de um possoma unamear. ,antagens sstema de entrega pode ser controado So bodegradves Carream substancas aquosas e oeosas Prevnem a oxdao Soubzam protenas Tm hdratao controada So estves As paredes dos possomas possuem fosfopdos que podem se gar substncas oeosas, como ad|uvantes Des2antagens A efcnca de transfeco varve Pode ser txco cua avo "sos e propriedades de vacinas vivas e n.o5vivas 113 Embora as vacnas com vrus vvo se|am consderadas, em gera, mas efetvas do que as vacnas com agente no-vvo, exstem agumas restres ao seu uso. Da mesma forma, as vacnas no-vvas possuem agumas vantagens em reao s vvas. Em agumas crcunstncas, somente aconsehve o uso de vacnas no-vvas, pos o uso de vacnas vvas pode trazer consequncas ndese|ves. Aguns exempos em que somente vacnas no-vvas so recomendadas so: 1. Em fmeas bovnas prenhes, a vacnao com vacnas com vrus vvo BVDV e BI-IV1 pode produzr nfeco feta e abortos. Nesses casos, apenas vacnas no-vvas so recomendadas. Mutas vezes, peo rsco potenca de se vacnar nadvertdamente fmeas que esto prenhes, opta-se peo uso rotnero de vacnas no-vvas. 2. Em casos onde anda no se conseguu atenuao sufcente do agente (HIV, HBV, entre outros). Ou smpesmente no se quer utzar um agente nfeccoso vve como vacna. 3. A vacnao de pessoas munodeprmdas, vehas ou doentes contra a nfuenza s reazada com vacnas no-vvas. 4. A vacnao de pessoas e anmas com vrus vvo que estabeecem atnca (herpes) bastante controvrsa. 5. Vros pases (ncusve o Bras, at pouco tempo) mpe restres ao uso de vacnas vvas para agumas espces anmas (bovnos, sunos). Nesses casos, somente vacnas no-vvas podem ser utzadas. 6. Nos casos em que o agente fo erradcado de uma popuao, o uso de vacnas vvas traz o rsco de rentroduo. Nesses casos somente vacnas no-vvas so acetas. 5. (l#m desses casos? em muitas outras ocasi@es optaAse pelo uso de 2acinas noA2i2as? mesmo sa3endo >ue a sua efic/cia # geralmente inferior Gs 2acinas 2i2as. \rande parte das 2acinas animais e -umanas so ela3oradas com o agente inati2ado. Vacinas po!i(a!entes o mistas 114 De2ido G sua con2eniIncia? tem se tomado comum o uso de 2acinas contendo mais de um agente infeccioso em sua formulao. Essas 2acinas so c-amadas de 2acinas poli2alentes? multi2alentes ou mistas? podendo conter uma mistura de 2irus? 3act#rias ou am3os. Em alguns casos? as vacnas so dreconadas a agentes que causam agum tpo especfco de manfestao cnca. So exempos as vacnas contra darras neonatas em bovnos com rotavrus, coronavrus, E.co e C.perfrnges; ou contra enfermdades respratras contendo o BVDV, BHV-1 5 PI-3 , BRSV e Pasteurea sp. Outras vezes essas vacnas contm agentes que causam dferentes sndromes cncas. 115 Ta)e!a 1 - Comparao entre as propredades das vacnas vvas e no- vvas -------------------------------------------------------------------------------------------------------- ------- Vvas (atenuadas) No-vvas (mortas, peptdeos, subundades) -------------------------------------------------------------------------------------------------------- ------- 1. Induzem resposta humora e ceuar (CD8+) Somente resposta humora 2. Induzem mundade rpda e duradoura Imundade mtada e passagera 3. Apcao nca (geramente) Requer mtpas apcaes 4. No necesstam ad|uvante Necesstam ad|uvante 5. Ouantdade pequena de antgeno Ouantdade grande de antgeno 6. Admnstrao parentera e nasa (agumas) Admnstrao parentera 7. Custo baxo Custo ato 8. Podem nduzr mundade de mucosas No nduzem mundade de mucosas 9. Raramente efetos coateras Efetos coateras frequentes 10. Rsco de agentes contamnantes Pouco rsco de contamnantes 11. Podem reverter vrunca No revertem vrunca 12. Geramente nstves (armazenamento) Estves 13. Pode ser transmtda ao feto/outros anmas Sem rsco de transmsso 14. No deve ser admnstrada a ndvduos com Pode ser admnstrada 116 Imunodefcnca -------------------------------------------------------------------------------------------------------- ------- Agumas vacnas povaentes para ces contm at oto agentes dferentes (adenovrus canno tpo 1 e 2, vrus da cnomose, parvovrus, vrus da rava, paranfuenza canna e eptospras). Vacna trpces de humanos contm os agentes da dftera, ttano e coqueuche (DPT) ou cachumba, sarampo e ruboa (MMR). O aspecto postvo dessas vacnas que produzem mundade contra vros agentes com uma s apcao, economzando tempo e factando a munzao de grandes popuaes. Isso torna-se reevante quando grandes rebanhos devem ser mane|ados para a vacnao, ou em campanhas de vacnao humana, em que popuaes nteras, s vezes de dfc acesso, devem ser munzadas. Os aspectos negatvos reaconam-se um possve gasto desnecessro, vsto que nem sempre h a necessdade de munzao contra todos os componentes da vacna, pos o mesmo pode no estar presente na popuao. Adconamente, as ndcaes de vacnao (dade, va, etc ... nem sempre so dntcas para dferentes mcroorgansmos. Outro aspecto questonve reacona-se ao grau de proteo produzdo com essas vacnas, pos quando vros antgenos so admnstrados smutaneamente, exste competo entre os antgenos. Se h agum antgeno domnante, possve que a maor parte da resposta mune se|a dreconada a ee, em detrmento dos outros. Aguns pesqusadores questonam se o uso de vacnas muto compexas confere proteo satsfatra e se reduz o fsco de reaes adversas. No entanto, estudos de proteo no tem sdo capazes de demonstrar fahas evdentes de proteo peo uso dessas vacnas. Um mportante aspecto a ser evado em conta a presena de agentes munossupressores vves na formuao de vacnas povaentes. Peo menos dos vrus (BVDV e parvovrus canno) tm demonstrado atvdade munossupressora, devendo-se questonar a sua ncuso como agente 117 vve (vvo) nessas vacnas, pos a resposta aos outros antgenos pode fcar pre|udcada. As mesmas consderaes fetas acma apcam-se ao uso de vacnas monovaentes em combnao, o que tambm uma prtca comum em medcna humana e veternra. /ontro!e de 2a!idade Antes de seu uso, as vacnas devem ser submetdas a testes de controe de quadade que garantam a sua segurana e efcca. Em gera, esses testes dvdem-se em trs tpos: esterdade, nocudade e potnca (ou efcca). 3. 4ro(as de esteri!idade 5o de pre$a6 - Vsam pesqusar a presena de agentes contamnantes no produto pronto para a comercazao. Contamnantes comuns so mycopasma, bactras anaerbcas ou aerbcas e fungos. Esses testes devem ser reazados em todas as partdas ou otes de vacna produzdos. 1. 4ro(as de inocidade - Vsam demonstrar a segurana da partda no que refere-se reaes ocas ou mesmo sstmcas. So reazadas em anmas de aboratro ou mesmo na espce avo. Devem ser reazadas em todas as partdas. 7. 4ro(as de pot8ncia - Tm como ob|etvo demonstrar a capacdade munognca da vacna. Deveram ser obrgatoramente reazadas em todas as partdas produzdas. No entanto, na maora das vacnas so reazadas apenas no nco da produo, para obter cencamento para comercazao. Mutos nformatvos tcncos e foders de vacnas ndcam a deteco de antcorpos como um ndcatvo de proteo. Como | fo vsto, a presena de antcorpos serve apenas de ndcatvo da resposta munogca, no podendo ser consderado como ndcatvo absouto de proteo. A prova mas utzada na avaao de efcca de vacnas consste na vacnao de anmas (preferencamente da espce avo) e posteror desafo com o agente patognco. Um grupo 118 de anmas permanece sem vacnao e serve de refernca (controe). Para avaao da efcca de vacnas vras, geramente utza-se trs parmetros: mortadade ( % de controes mortos - % de vacnados mortos / % de controes mortos ), magntude e durao da doena cnca e magntude e durao da emnao vra. Para avaao e comparao da doena cnca em vacnados e controes, pode-se atrbur vaores numrcos aos parmetros cncos (ex: perda de apette +, ++,+++, ++ ++; depresso +,++,+++,++++ ). A comparao entre a soma dos vaores mdos dros (escore cnco) entre os grupos um mtodo ob|etvo de avaar-se o grau de proteo conferdo pea vacnao. Fa!has (acinais As vacnas so eaboradas para conferr uma proteo sda e duradoura na maora (seno na totadade) dos ndvduos vacnados. No entanto, sso mutas vezes no ocorre. As fahas em conferr mundade atravs da vacnao podem ser devdas vros fatores (Ouadro). Em gera, as fahas vacnas podem ser dvddas em trs tpos prncpas, de acordo com a sua orgem: Fa!has da (acina A vacna pode conter o mcroorgansmo nadequado, ou a cepa errada, ou uma varante antgnca dferente da amostra crcuante na popuao (EX. BVDV tpos 1 e 11, nfuenza, etc... Ou ento, o mtodo de produo pode ter destrudo ou aterado os antgenos mportantes para a nduo da resposta mune protetora (vacnas natvadas), ou a vacna pode conter pouco antgeno. Esses probemas podem ser mnmzados pea aquso de vacnas de aboratros dneos e pea correta estocagem da vacna at o seu uso.
Fa!has na administra%&o Vacnas admnstradas por aerosss ou adconadas na gua de beber (aves) ou na rao podem no o ser unformemente 119 dstrbudas e no munzar de manera unforme a popuao. Probemas de admnstrao parentera de vacnas em grandes anmas so tambm comuns e podem gera fahas na proteo. A admnstrao ntranasa de vacnas frequentemente probemtca pea ncerteza da nocuaro (e recebmento) da dose tota. Armazenagem por tempo excessvo ou em condes nadequadas (temperatura) pode natvar ou reduzr a vabdade do agente nfeccoso presente na vacna (no caso de vacnas vvas). Essa natvao pode tambm ocorrer pea presena de qumcos na vacna, ou na sernga utzada para admnstrao, ou anda peo excesso de antssptco utzado por ocaso da admnstrao. A vacnao de anmas que apresentem mundade passva pode nterferr com a munzao e no conferr a proteo esperada. Essa provavemente uma das prncpas causas de resutados nsatsfatros em vacnao. Da mesma forma, a vacnao de ndvduos que | esto nfestados com o agente em questo (perodo de ncubao) pode no surtr o efeto dese|ado.
FA,9A0 VA/INAI0
Fatores do anima! Mesmo consderando-se uma vacna exceente, bem conservada e bem admnstrada, a resposta esperada em uma popuao 120 Admnstrao Vacna vva Anmas com Anma | Inadequada nvve mundade passva Muto tarde Cepa Antgenos (anma | Vacna no- protetores nfectado) Errada utzados Imundade Anma Varao Stress Passva munodeprmdo ndvdua Subnutro, Admnstrao Correta Admnstrao Incorreta Anma responde Anma no responde vara de acordo com vros fatores de forma que raramente obtm-se proteo em 100% dos ndvduos. Tendo em conta que a resposta munogca depende de vros fatores gentcos, de varabdade ndvdua e ambentas, o espectro da resposta munogca em uma popuao assemeha-se a uma dstrbuo norma. Nessa dstrbuo, a maora dos ndvduos apresenta uma resposta munogca satsfatra ou mda, com poucos respondendo com efcnca exceente e poucos respondendo com efcnca menor. O grupo de ndvduos que apresentou resposta menor que a maora pode no estar protegdo contra a enfermdade ob|eto da vacnao. Portanto, vrtuamente mpossve obter-se 100% de proteo em uma popuao de ndvduos atravs da vacnao. O tamanho da parcea de ndvduos que no responde pode ser nfuencado por vros fatores. Varaes ndvduas (gentcas e reaconadas ao ambente); fraqueza, stress, subnutro, enfermdades concomtantes e munossupresso, am da presena de antcorpos adqurdos passvamente podem contrbur para o aumento da parcea de ndvduos que no respondem satsfatoramente vacnao. E-eitos ad(ersos da (acina%&o As vacnas so desenvovdas para terem efetos coateras mnmos. No entanto, mutas deas no esto vres de nduzrem efetos ndese|ves. Vrunca resdua, toxcdade devdo ao antgeno ou ad|uvante, enfermdade em ndvduos munodeprmdos, reaes argcas, compcaes neurogcas e efetos deetros sobre o feto so os rscos mas comuns assocados vacnao. Aguns snas suaves como febre passagera, fata de apette, dor no oca da n|eo so esperados, mas efetos mas graves devem ser evtados. Dependendo do tpo de vacna (vva ou no-vva), do agente nfeccoso, do ad|uvante, do anma vacnado, etc ... . os efetos podem varar e ampamente (quadro). Abaxo so menconados aguns efetos coateras observados com vacnas atuamente utzadas em humanos e anmas. 121 REA:;E0 VA/INAI0 Edema e dor no !oca! de ap!ica%&o Geramente aparecem no da aps a vacnao e podem persstr por at uma semana. Se no houver contamnao e formao de abcesso, esses snas regrdem sem maores compcaes. Vacnas natvadas geramente provocam um processo nfamatro mas ntenso e duradouro devdo reao ao ad|uvante. Bactras gram-negatvas podem provocar reao mas ntensa devdo presena de endotoxnas. Agumas vezes ocorre perda de pos ao redor do oca da n|eo. 122 Reaes Neurogcas Encefate Neurte Febre, Infamao, Dor Produo Admnstrao Contamnao Contamnao Toxcdade Vrunca Bacterana ou anorma resdua Hpersensbdade Tpos I, III, IV Fbrossarcoma Tpo IV Tpo I Granuoma Imunossupresso, Enfermdade, Morte Feta Loca Sstmca Erros Toxcdade Resposta anorma Fe)re e sintomas gerais de in-ec%&o So comumente observados em cranas e tambm em anmas vacnados com uma grande varedade de vacnas. Deve-se presena e repcaro do agente vacna (se vvas) ou reao contra componentes da vacna (endotoxnas bacteranas, por exempo). A repcaro do vrus vacna mutas vezes atnge nves em que h a manfestao de snas cncos dscretos. Em anmas munocomprometdos esses snas podem mesmo ser mas ntensos, agumas vezes embrando os snas cncos que acompanham a nfeco natura. A)ortos So frequentes em vacas vacnadas com vrus vvo modfcado (atenuado) para BVDV e BHV-1 (IBR). Vacnas temperatura-sensves apcadas va ntranasa podem ser uma aternatva. Vacnas contendo bactras gram-negatvas natvadas tambm podem causar abortos em vras espces, devdo presena de endotoxnas. Maformaes fetas em ovnos tm sdo assocadas vacnao com o vrus da Lngua Azu. Devdo ao rsco de abortos, a vacnao de fmeas prenhes deve ser reazada com muto crtro. /ontamina%&o com (rs ad(entcios A produo de vacnas vras em cutvos ceuares traz o rsco nerente de contamnao por vrus adventcos ocasonamente presentes nesses cutvos. Na dcada de 50, mhes de pessoas foram contamnadas com o vrus SV 40, um vrus de macacos que estava presente em cutvos ceuares utzados para mutpcar o vrus da poomete para ser utzado como vacna. A natvao do agente nfeccoso (vacnas natvadas) reduz esse rsco. O vrus da Darra Vra Bovna (BVDV) um contamnante comum de cuas de cutvo e de soro feta utzado como promotor de crescmento para essas cuas. Ento, a utzao de vacnas vvas contra outros vrus crescdos em cuas susceptves ao BVDV pode potencamente conter o BVDV. As consequncas dessa contamnao 123 podem ser desastrosas. Abortos em vacas, porcas e ovehas devdo presena de BVDV como contamnante em vacnas | foram reatados. Da mesma forma, vacnas humanas, cu|os vrus foram ampfcados em cuas de orgem bovna | foram contamnadas com o BVDV. Ence-a!ite p"s-(acina! Tm sdo descrta assocada vacnao de ces com vacna atenuada contra a cnomose. Encefate peo BHV- 1 em terneros vacnados com vacna vva modfcada tambm | fo descrta. Encefate por cepas vacnas de HSV uma das prncpas preocupaes reatvas ao uso de vacnas vvas contra o herpes humano. Da mesma forma, poomete em cranas devdo reverso vrunca ou natvao ncompeta do vrus vacna tem sdo descrta na Europa e Estados Undos. Imnosspress&o Vacnao com vrus vvos que so munossupressores pode ocasonar uma munossupresso passagera. Isso tem sdo demonstrado em vacnaes com agumas cepas de parvovrus canno e BVDV, entre outros. Rea%<es a!=rgicas e de hipersensi)i!idade So frequentemente observadas em uma grande varedade de vacnas. hpersensbdade tpo 1 pode ocorrer em resposta ao antgeno em s e tambm outros componentes da vacna como soro feta, protenas das cuas de cutvo, etc... Todas as formas de hpersensbdade esto assocadas mtpas apcaes da vacna e por sso tendem a ser mas comuns com vacnas natvadas. A hpersensbdade tpo 1 ocorre dentro de poucos mnutos ou horas aps a admnstrao do antgeno e medada por munogobunas do tpo IgE. Reaes que ocorrem aps duas a trs horas geramente no so do tpo 1. Os snas cncos assocados reaes anaftcas so devdos ao da hstamna e de outros medadores qumcos berados peos mastctos. A gravdade da reao depende do nmero e ocazao 124 dos mastctos estmuados, do nve de sensbzaro do anma e da quantdade e va de apcao do antgeno. Broncoespasmo, edema de gote, dfcudade respratra, hpotenso artera so snas comuns nesses casos. Anmas com snas de anafaxa grave devem ser tratados como emergncas mdcas. Admnstrao de adrenana assocada fudoterapa endovenosa geramente consttu-se na terapa nca. Granuomas no oca da n|eo, formados aps ongo tempo da n|eo, so manfestaes de hpersensbdade do tpo IV. So geramente formados em resposta aos ad|uvantes como hdrxdo de aumno ou ad|uvante oeoso. Consttuem-se em abcessos estres ou granuomas no oca da n|eo. Se a pee est su|a no oca da n|eo, pode haver contamnao e formao de abcessos contamnados. Es2emas de (acina%&o Devdo ao grande nmero de enfermdades nfecto-contagosas de nteresse veternro em que a vacnao utzada, no possve estabeecer-se regras ou esquemas comuns para todas eas. Cada enfermdade tem suas pecuardades, que devem servr de base para o estabeecmento de esquemas especfcos de vacnao. No entanto, agumas recomendaes geras podem ser apcves maora (seno todas) das vacnas. Uma deas refere-se dade mnma para vacnao. Ouando as mes possuem antcorpos(por vacnao ou nfeco natura), os anmas recm-nascdos so geramente protegdos pea mundade passva adqurda atravs da pacenta ou coostro. Nesses casos, a vacnao no resuta nos efetos esperados. Por um ado, a vacnao sera desnecessra pos os anmas | estaram protegdos, mpcando em gastos desnecessros. Por outro ado, a mundade passva nterfere com a munzao atva, no resutando em um estmuo equvaente ao que ocorrera na munzao de anmas desprovdos de mundade passva. Nesse sentdo, as vacnas natvadas so geramente mas 125 afetadas pea mundade passva do que as vacnas vvas. Em casos em que uma mundade sda necessra nas fases ncas de vda, a munzao das fmeas antes ou mesmo durante a prenhez pode ser recomendve. Incuem-se a as enfermdades vrcas e bacteranas neonatas. O tempo de durao da mundade passva muto varve, dependendo da espce, do agente nfeccoso, dos nves de antcorpos da me na poca do parto, da ngesto do coostro, do desenvovmento corpora do anma |ovem, entre outros. Em gera, para pequenos anmas, munzaes reazadas ao redor da 15-16' semana | encontram nves neggves de antcorpos passvos. Antcorpos contra o parvovrus canno, no entanto, podem persstr am da 20' semana. Para grandes anmas, esse perodo estende-se at o 6' ms de vda. No entanto, pea mpossbdade de prever-se exatamente a poca do desaparecmento desses antcorpos, ou mesmo por no saber-se se as mes eram munes, agumas vezes recomenda-se dupa vacnao, com ntervao de aguns meses. O ntervao entre vacnaes outro aspecto a ser consderado. Vacnas natvadas ou no vvas podem requerer revacnaes mtpas, a ntervaos nferores a 6 meses. Vacnas vvas, por outro ado, geramente conferem proteo proongada e quando requerem revacnaes, o ntervao raramente nferor a dos a trs anos. O ntervao entre doses tambm determnado pea enfermdade. Enfermdade estaconas, como as transmtdas por nsetos, geramente requerem revacnaes antes da temporada de maor ncdnca dos vetores. Da mesma forma, enfermdades que afetam a reproduo devem ser prevendas pea vacnao de fmeas antes da temporada de servo. O transporte de anmas para reas endmcas pode exgr vacnaes de reforo, mesmo que rotneramente no fossem necessras. 126