FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGA REA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

FAMILIA CORYNOBACTERIACEAE.

ASIGNATURA: BACTERIOLOGA. DOCENTE: FRANCIA ARANA, OLGA ALUMNO: JULON YRIGOIN WHITMAN OMAR.

Familia Corynobacteriacea

NDICE DE CONTENIDO:
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Familia Corynobacteriacea FAMILIA CORYNOBACTERIACEAE. Familia que, segn el Manual de Bergey de Bacteriologa Sistemtica 2da edicin, agrupa slo al g nero Corynebacerium! G!NERO CORYNEBACTERIUM. "l g nero Corynebacterium, en la primera edicin del Manual de Bergey de Bacteriologa Sistemtica, era #eterog neo y #ubo propuestas para di$idirlo en unos cuantos g neros! Muc#as de esas propuestas tienen a#ora aceptacin general, y en particular el patgeno aerbico de plantas que contiene cido 2,%&diaminobutrico en su pared celular 'ueron ubicados en el nue$o g nero Clavibacter. "l g nero Corynecaterium, en la segunda edicin del Manual de Bergey de Bacteriologa Sistemtica, considera que agrupa a (7 especies di'erentes! "l g nero Corynebacterium 'ue creado por )e#mann y *eumann +,-.(/ para ubicar ta0onmicamente a los bacilos de la di'teria! "l g nero 'ue de'inido basndose en caractersticas mor'olgicas1 Corynebacteria pro$iene del griego coroni +bastn nudoso/ y bacterion +bastoncillo/! ,! Caractersticas del g nero! Bacilos gramnegati$o, sin embargo algunas c lulas se ti2en de manera desigual, dando la apariencia de un collar de cuentas! 3e mor'ologa recta o ligeramente cur$ada, delgados, miden de 4!5&4!- 0 ,!6&-!4 7m8 una especie +C. matruchotii/ tiene 'orma de mango de ltigo! "n oportunidades los bacilos delgados elipsoidale u o$oides con e0tremos 'usi'ormes o en 'orma de cla$a! )as c lulas se disponen usualmente aisladas o en pares, a menudo en una 'ormacin de 9 o en empali:ada o pocas se disponen c lulas paralelas!! ;tros autores re'ieren como disposicin en <cerca= o <letras c#inas=! >rnulos metacromticos de polimeta'os'ato son comnmente 'ormados dentro de las c lulas *o m$iles, no 'ormadores de espora, no cido&alco#ol resistentes! Son anaerobios 'acultati$os, comnmente requieren medios enriquecidos como medios con suero o sangre, en los cuales las colonias son usualmente con$e0as y semi&opacas! ?uimiorgantro'os con metabolismo 'ermentati$o, muc#as especies producen cido sin gas a partir de glucosa y algunos otros carbo#idratos! @ara acidi'ica la lactosa o ra'inosa o #idroli:a la gelatina!

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Familia Corynobacteriacea ;AF de la glucosa1 F+'ermentati$os/ u ;+o0idati$os/ o inertes! Bemperatura ptima1 56&57CC Catalasa positi$os, a e0cepcin de C. pyogenes y C. haemolyticum algunas $eces reduce nitratos! *o encapsulados! )ipasa positi$os1 slo C. pseudotuberculosis y C. ulcerans. Doseen en su pared celular cido miclico en las c lulas, a e0cepcin de1 C. amycolatum, C. asperum, las especies $egetales de Corynebacterium no poseen cidos miclicos! Bambi n se encuentran peptidoglucano contiene cido meso&diaminopim lico + meso&3ED/ como el diaminocido componente, adems arabinosa y galactosa! "n membranas celulares distintos cidos menaquinonas en sus membranas celulares! grasos celulares y
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DorcentaFe molar de contenido de guanosina ms citosina +>GC/ en el espectro de 6, a (6! Berreau y col! y 3e Briel y col! demostraron que toda bacteria carente de cido miclico no puede ser clasi'icada en el g nero Corynebacterium! Si no poseen cido miclico pero presenta mor'ologa del tipo de las corinebacterias son denominadas "#$%&'(#) $*'(+&,*'-&)8 reempla:a el t rmino no di'teroide! Muc#os de ellos constituyen parte de la 'lora normal de la piel y las $as respiratorias altas, membranas mucosas o la piel de mam'eros! "stas mismas especies, as como otras especies de Corynebacterium y bacterias corine'ormes relacionadas, #an comen:ado a ser reconocidas como agentes importantes de en'ermedad #umana, sobre todo en #u spedes imnunocomprometidos! "l patgeno clsico C. diphtheriae, el agente causal de la di'teria! Elgunas especies son patgenas para mam'eros! 3os sistemas que tratan la identi'icacin de bacilos grampositi$os corine'ormes son el EDH Coryne y el @apH3 CB Dlus! 2! "specie tipo1 Corynebacterium diphtheriae EBBC 274,4.

Corynebacterium diphtheriae. Bambi n es conocido como el bacilo de Ilebs&)J''ler, ya que 'ue descubierto en ,--% por el alemn bacterilogos "dKin Ilebs +,-5% & ,.,2/ y Friedric# )J''ler +,-62 & ,.,6/!

Familia Corynobacteriacea Corynebacterium diphtheriae es el nico patgeno #umano importante dentro del grupo de las corinobacterias, que adems incluye cierto nmero de especies oportunistas y sapr'itas ino'ensi$as, mal descritas, que con 'recuencia se encuentran en la super'icie de las membranas mucosas! Dor su ta0onoma las corinebacterias se relacionan con micobacterias y con las nocardias! "0isten similitudes en los componentes de sus paredes celulares y presentan reacti$idad cru:ada! )os pepetidoglucanos de los tres g neros contienen cido meso&L, "&diaminopim lico8 los a:cares principales del polisacrido de su pared son arabinosa y galactosa! )os lpidos asociados con la en$oltura e0terna de las corinebacterias tambi n contienen cantidades considerables de cidos miclicos similares a los cidos grasos saturados M& #idro0ilados y L&rami'icados de las micobacterias, pero poseen menos tomos de carbono! C)ESHFHCECHN*! Segn el Manual de Bergey de Bacteriologa Sistemtica 2da edicin, ubica a Corynebacterium diphtheriae en el $olumen %1 Bacterias grampositi$as con alto >GC! Esignndole las siguientes categoras ta0onmicas1

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P./01- 2III S&$$(3+ 442 C0#)& I S1"$0#)& 2 O'5&+ 2 S1"*'5&+ III F#-(0(# I G6+&'* I E)7&$(& %(7*:

F('-($1%&) Ectinobacterias Ectinobacteria Ectinobacteridae Ectinomycetales Corynebacterineae Corynebacteriaceae Corynebacterium Corynebacterium diphtheriae

M;@F;);>OE! "s un microorganismo grampositi$o delgado con 'orma de bastn que no es cido&resitente y no 'orma espora! )as c lulas miden entre ,!6 y 6 7m de largo y de 4!6 a , 7m de anc#o! "n 'rotis te2ido aparecen en empali:adas o como c lulas indi$iduales que yacen en ngulos agudos unas con otras en

Familia Corynobacteriacea 'ormaciones en 9 y en )! "stas presentaciones similares a <letras c#inas= son causadas por el mo$imiento <quebrado= que se produce cuando dos c lulas se di$iden! Cuando proli'eran en medios de nutricin completos con $elocidad m0ima, los bacilos di't ricos son uni'ormes! "n cambio, cuando proli'eran en medios subptimos, como por eFemplo suero coagulado de )J''ler o medio con #ue$o coagulado de Dai, las c lulas son pleomr'icas y se ti2en de 'orma irregular con a:ul de metileno o con a:ul de toluidina! Son 'recuentes las 'ormas en cuentas y en barras, as como los engrosamientos en 'orma de palo de gol'! )os grnulos metacromticos +de Bab s&"rnst/ responsables del aspecto en cuentas representan cmulos de poli'os'atos polimeri:ados! FHSH;);>OE! Caractersticas de su culti$o! C. diphtheriae es un microorganismo aerobio y anaerobio 'acultati$o pero crece meFor en condiciones aerobias! Se requieren medio compleFos para el asilamiento primario y caracteri:acin! )a mayor parte de las cepas crecen como una pelcula c rea en la super'icie de los medios lquidos! "n medio con suero coagulado de )J''ler, til para el asilamiento primario del microorganismo, luego de ,2 a 2% #oras de incubacin a 57CC aparecen diminutas colonias brillantes, de color blanco grisceo! "l medio de )J''ler tambi n es til porque no permite el crecimiento de los estreptococos y neumococos que pueden estar presentes en la muestra clnica! Cuando se incorporan sales de telurito a los medios utili:ados para el aislamiento primario tambi n se reduce el nmero de contaminantes! "n el medio de telurito las colonias de C. diphtheriae adoptan un color negro o gris caracterstico y se puede di'erenciar tres tipos principales de colonias1 gra$is, mitis e intermedius! )as colonias de las cepas gra$is son grandes y planas, de color gris a negro y con super'icie opaca8 los microorganismos mitis producen colonias de tama2o mediano que son ms peque2as, negras, brillantes y ms con$e0as8 las colonias de cepas intermedius son muy peque2as y lisas o rugosos! "l ion telurito atra$iesa la membrana celular #acia el citoplasma, donde es reducido a telurito metlico y precipitado! *o e0iste una relacin constante entre la se$eridad de la en'ermedad y los tres tipos de colonias! @esistencia! C. diphtheriae es ms resistente a la accin de la lu:, la desecacin y el congelamiento que la mayor parte de los bacilos no 'ormadores de esporas! )os microorganismos pueden resistir por lo menos ,% semanas en 'ragmentos secos de seudomembranas! Sin embargo, los g rmenes son destruidos con 'acilidad y rapide: al ser e0puestos a ,44CC durante , minuto o a 6-Cc durante ,4 minutos! Son susceptibles a casi todos los desin'ectantes de uso #abitual! "SB@PCBP@E E*BH>Q*HCE!

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Familia Corynobacteriacea C. diphtheriae es una especie #eterog nea desde el punto de $ista antig nico! "n pruebas de aglutinacin con suspensiones de c lulas enteras se obser$a un gran nmero de tipos serolgicos! )os tres tipos principales de colonias Rgra$is, mitis e intermedius& +otros autores consideran un cuarto biotipo bel'anti, aunque otros lo consideran una cepa dentro del biotipo mitis/ re'leFan di'erencias en la super'icie celular y constituyen los principales biotipos del microorganismo! 3entro de cada uno de estos biotipos se encuentra un grupo ms o menos separado de serotipos aglutinantes! Bambi n se #an detectado di'erencias adicionales en los componentes de la super'icie celular por medio de pruebas ms sensibles de tipi'icacin con bacteri'agos y produccin de bacteriocina! *o obstante, y sin importar el tipo, todas las cepas to0ig nicas producen una to0ina que es id ntica desde los puntos de $ista biolgico e inmunolgico! Entgeno I! )os antgenos responsables de la especi'icidad de tipo de las cepas de C.diphtheriae son protenas termolbiles, los antgenos I, locali:ados en las capas super'iciales de la pared! "stos antgenos desempe2an un papel importante en la inmunidad antibacteriana y en la #ipersensibilidad, aparte de la inmunidad antit0ica! "s probable que la aparicin de tipos antig nicos di'erentes de C.diphtheriae e0plique el desarrollo de di'teria en pacientes inmuni:ados que presentan un ni$el detectable de antito0ina circulante! )os antgenos I locali:ados sobre la super'icie, Funto con el 'actor cordn glicolipdico, son los principales determinantes de la in$asi$idad y la $irulencia de los bacilos di't ricos! Entgeno ;! "l antgeno ; termoestable de C. diphtheriae es un antgeno de grupo comn a las corinebacterias parsitas del ser #umano y de los animales! Se trata de un polisacrido que contiene arabinogalactanos y es el antgeno responsable de la reacti$idad cru:ada con micobacterias y nocardias! )as c lulas de las corinebacterias y todos sus componentes subcelulares son antgenos e0celentes! Cuando se las administra a los animales con agentes inmuni:antes, tambi n actan como adyu$antes! 3"B"@MH*E*B"S 3" )E DEB;>"*HCH3E3 I+8#)(8(5#5. 3ado que tanto cepas to0ig nicas como no to0ig nicas de C. diphtheriae son capaces de coloni:ar las membranas mucosas, otros 'actores adems de la to0ina contribuyen a la in$asi$idad del microorganismo y a su #abilidad para establecerse y mantenerse en el #u sped #umano! Sin embargo, no se #a de'inido con precisin la relacin entre los rasgos mencionados y la patogenia de la en'ermedad! Edems de los antgenos I, los microorganismos tambi n contienen un ,#$%*' $*'53+ que se considera un adyu$ante necesario de $irulencia! "l 'actor cordn, un glicolpido t0ico, es un (&(S di ster de tre#alosa que contiene los cidos miclicos caractersticos de C.diphtheriae, cido corinemiclico +C52T(2;5/ y cido corinemicol nico

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Familia Corynobacteriacea +C52T(%;5/! )a acti$idad 'armacolgica del 'actor cordn de C.diphtheriae es similar a la del 'actor cordn de Mycobacterium tuberculosis! "n el ratn pro$oca la ruptura de las mitocondrias, disminucin de la respiracin y de la 'os'orilacin, y la muerte! ;tros 'actores adicionales que probablemente contribuyan al potencial in$asor de C.diphtheriaeson la neuraminidasa y la *&acetilneuraminato liasa! Dor degradacin de los residuos de cido *&acetilneuramnico cli$ados de su en$oltura mucinosa estas en:imas podran proporcionar una 'uente de energa 'cilmente accesible para las bacterias que coloni:an las membranas mucosas! E9*%*9(+#. )a mayor parte de las en'ermedades que ocurren naturalmente son demasiado compleFas a ni$el celular como para anali:ar con 0ito y de'inir con precisin la lesin bioqumica primaria! *o obstante, en la di'teria la e0oto0ina producida por C.diphtheriae es el principal determiante bioqumico de la patogenia de la in'eccin y e0plica casi todos los e'ectos patolgicos sist micos! )HS;>"*HE U D@;3PCCHN* 3" B;VH*E! )a to0ina slo es elaborada por cepas de C.diphtheriae in'ectadas con un bacteri'ago temperado que transporta el gen estructural para la produccin de to0ina! )as cepas no to0ig nicas pueden con$ertirse al estado lisgeno productor de to0ina, por in'eccin con un corinebacterio'ago tox+ adecuado! Sin embargo, la con$ersin en to0ig nicos no es una propiedad obligatoria de los corinebateri'agos! E pesar de que la mayor parte de los estudios acerca de la produccin de to0ina se #an lle$ado a cabo con un corinebacteri'ago M, el gen tox se #a detectado en cierto nmero de corinebacteri'agos que di'ieren tanto en su gen tica como en su serologa! )a produccin de to0ina por una cepa lisog nica no requiere la multiplicacin ltica del 'ago! "l gen tox puede e0presarse cuando el corinebacterio'ago M se #alla presente en C.diphtheriae como un 'ago en replicacin $egetati$a, como un pro'ago o como un e0ogenote sobrein'eccioso que no se replica en las c lulas lisog nicas inmunes! "n condiciones e0perimentales la to0ina no parece ser$ir para 'unciones $itales $irales esenciales! Sin embargo, en condiciones naturales tales como la naso'aringe #umana el gen tox proporciona $alor de super$i$encia tanto al 'ago como a su #u sped lisogeni:ado, C.diphtheriae. "l ciclo $ital del corinebacteri'ago M es similar al del coli'ago W, que crece de 'orma producti$a en la mayor parte de las c lulas in'ectadas pero lisogeni:a a pocas de ellas! )os 'agos mutantes que producen protenas antig nicamente similares pero no t0icas +protenas crm/, se #an utili:ado para construir un mapa de los genomas $egetati$os y pro'agos del 'ago M! "l mapa del pro'ago parece ser una permutacin clnica del mapa $egetati$o, con el gen tox en un e0tremo del mapa del pro'ago cerca del sitio de insercin en el cromosoma del #u sped y el gen de la inmunidad en el otro e0tremo del mapa! "l 'ago se

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Familia Corynobacteriacea inserta en el cromosoma bacteriano por un mecanismo similar al que se obser$a en el coli'ago W! )a posicin del gen tox integrado sugiere que puede #aber e$olucionado a partir de un gen bacteriano!
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@">P)ECHN* 3" )E "VD@"SHN* 3") >"* tox. )a regulacin de la sntesis de la to0ina di't rica abarca 'actores gen ticos y 'isiolgicos e in$olucra a la bacteria y el bacteri'ago! )as distintas cepas de C. diphtheriae presentan enormes $ariaciones en lo que respecta a su capacidad para producir to0inas cuando se #allan in'ectadas pro corinebacteri'agos tox+ espec'icos! Edems, algunos 'agos pueden ser no to0ig nicos para algunas de las cepas #u sped pero ser tox+ para otras C. diphtheriae. "l corinebacteri'ago W, un 'ago no con$ersor relacionado estrec#amente con el 'ago M, transporta el gen tox en una 'orma inacti$a! "n el 'ago W se encuentra un genoma de 'ago completo ms una peque2a asa adyacente de 3*E bacteriano! "s probable que este 3*E adicional represente un elemento de insercin o un transposn y que el gen tox del 'ago W #aya sido inacti$ado por su insercin! )a produccin de to0ina es muy in'luida por las condiciones de crecimiento, en especial por el contenido de #ierro inorgnico del medio! )a to0ina di't rica slo se produce en ni$eles m0imos durante la 'ase de declinacin del ciclo de crecimiento bacteriano, cuando el #ierro es el sustrato limitante de la $elocidad! "l agregado de #ierro a culti$os de C. diphtheriae lisog nica carentes de ese elemento in#ibe la produccin de to0ina casi de inmediato! "l empleo e0itoso durante muc#os a2os de la cepa DarX&Yilliams *C - para la produccin comercial de to0ina se $incula por su capacidad de crecimiento en medios que contienen ni$eles muy baFos de #ierro! "n tales condiciones el crecimiento es lento pero la to0ina puede representar casi el 6 Z del total de protena bacteriana! E ni$el molecular la regulacin de la produccin de to0ina di't rica tiene lugar de 'orma independiente de otras 'unciones del 'ago y est dirigida al ni$el de la transcripcin! 3e acuerdo con el modelo propuesto, C. diphtheriae, independientemente de su estado lisog nico, transporta un gen que codi'ica la sntesis del aporrepresor tox di't rico! "n presencia de #ierro se 'orma un compleFo represor&#ierro que se une espec'icamente al locus operador tox del 'ago M! "n condiciones de limitacin del #ierro el compleFo represor&#ierro se disocia y el gen tox di't rico se desreprime! Tasta el momento nada se sabe en relacin con la identidad y la 'uncin de la protena represora del #u sped! D@;DH"3E3"S! )a to0ina di't rica se sinteti:a como precursor en los polisomas ligados a la membrana C. diphtheriae y se secreta contraduccionalmente como una cadena polipeptdica simple con un peso molecular de 6-X3a! Pna $e: liberada la mol cula de to0ina nati$a no es t0ica #asta la e0posicin de los sitios en:imticos acti$os por e'ecto de un tratamiento le$e con tripsina! )a mol cula con acti$idad biolgica est 'ormada por dos cadenas polipeptdicas

Familia Corynobacteriacea con 'unciones di'erentes, los 'ragmentos E y B, unidos por un puente de disul'uro! Embos 'ragmentos son esenciales para la citoto0icidad! )a porcin aminoterminal de la to0ina, el 'ragmento E +2,X3a/, contiene el sitio en:imtico acti$o de la to0ina! "l 'ragmento B +57X3a/ del e0tremo cabor0iterminal de la to0ina, contiene el dominio de unin a los receptores de las c lulas eucariticas, as como tambi n dos dominios de asociacin lipdica que en apariencia son esenciales para la translocacin del 'ragmento E a tra$ s de la membrana #acia el citosol de la c lula eucaritica! H*C;@D;@ECHN* D;@ )ES CQ)P)ES "PCE@HNBHCES! Dara e0presar la to0icidad debe atra$esar la barrera de la membrana y alcan:ar su blanco en el citoplasma! E pesar de una pro'unda in$estigacin sobre el mecanismo de entrada de la to0ina di't rica a la c lula, el proceso an no se comprende en su totalidad! *o se #an identi'icado el receptor espec'ico de membrana, si bien los datos actuales indican que la unin de la to0ina se encuentra in$olucrados tanto el esqueleto peptdco de una glicoprotena como 'o'oslpidos de membrana! "0iste una #iptesis que sostiene que la to0ina es internali:ada por un proceso de endocitosis mediado por un receptor y penetra en una $escula endoctica cida, donde estimulado por el baFo pT se produce el escape #acia el citoplasma! 3e acuerdo con este modelo, en apariencia es necesario el transporte de aniones para la entrada del 'ragmento E en el citoplasma, lo que sucede a tra$ s de canales permeables a iones 'ormados por insercin del dominio #idr'obo del 'ragmento B en la membrana! "n algn punto, antes de la translocacin o en su transcurso, se requiere la reduccin del puente de disul'uro y el cli$aFe de una o ms uniones peptdicas para la separacin de los 'ragmentos E y B! M;3; 3" ECCHN*! El llegar al citoplasma el 'ragmento E altera la sntesis proteica catali:ando la trans'erencia de la 'raccin adenosina di'os'orribosa +E3D@/ del dinucletido de nicotinamida&adenina +*E3/ #acia la peptidil&t@*E& translocasa eucaritica, el 'actor de elongacin 2 +"F2/! "sta di'os'ato de adenosina +E3D/&ribosilacin del "F2 es el blanco primario de la to0ina di't rica! *E3 G "F2 E3D@&"F2 G nicotinamida G TG

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E pesar de que la reaccin es re$ersible, su equilibrio a pT 'isiolgico est despla:ado #acia la derec#a! Solamente el "F&2 soluble puede ser$ir como sustrato y una $e: 'iFado a los ribosomas no puede ser E3D&ribosilado! "l sitos espec'ico de "F2 al cual se une la E3D@ de 'orma co$alente es la di'tamida, un aminocido e0clusi$o que resulta de una modi'icacin postraduccional reciente de un residuo de #istidina! )a di'tamida no #a sido obser$ada en ninguna otra protena eucaritica! )a to0ina no tiene e'ecto sobre la elongacin de la cadena polipeptdica en sistemas procariticos o en

Familia Corynobacteriacea mitocondrias, en las cuales una protena di'erente, el 'actor de elongacin > +"F>/, reempla:a al "F2! Si bien #a sido uni$ersalmente aceptado que el mecanismo letal de la to0ina di't rica tiene estrec#a $inculacin con su capacidad para in#ibir la sntesis proteica, tambi n podras estar implicado un segundo camino citot0ico! El ser e0puestas a la to0ina di't rica las c lulas blanco #umanas muestran ampollas generali:adas a lo largo de toda la membrana y un e0tenso cli$aFe preltico del 3*E entre los nucleosomas! "l descubrimiento de esta acti$idad de nucleasa sugiere que la lisis de las c lulas inducida por la to0ina di't rica no es slo consecuencia de la in#ibicin proteica, sino que tambi n se $incula con la degradacin cromosmica! SPSC"DBHBH)H3E3 3") TPQSD"3! )a susceptibilidad de los animales a la to0ina di't rica es muy $ariable! 3osis de apenas ,(4ngAXg de peso corporal son letales para el #ombre, los coneFos, los coballos y las a$es! )as ratas y los ratones, en cambio, son muy resistente, sal$o que la to0ina se les administre por $a intracerebral! E*BHB;VH*E! )as 'racciones E y B de la to0ina contienen cierto nmero de determiantens antig nicos! Como consecuencia de ello, la antito0ina consiste en una me:cla #eterog nea de anticuerpos espec'icos para di'erentes dominios de la mol cula de to0ina! "n la to0ina o el to0oide nati$os la mayor parte de los determinantes antig nicos del 'ragmento E estn sumergidos pro'undamente y no se encuentran disponibles para estimular la produccin de anticuerpos, ni tampoco para participar en la precipitacin de stos! Edems, y a pesar de que el anticuerpo anti&E in#ibe la acti$idad en:imtica de la to0ina, no protege a los animales o alas c lulas contra la accin letal de la to0ina! *o obstante, los anticuerpos dirigidos contra el 'ragmento B neutrali:an la to0ina de 'orma muy e'ica:, lo que sustenta la teora que postula que la antito0ina acta por competencia con la to0ina por los receptores de su super'icie de las c lulas eucariticas sensibles y que el 'ragmento B es necesario para la ad#erencia inicial! @ecientemente se #a logrado la inmuni:acin acti$a contra la to0ina di't rica mediante la utili:acin de un oligop ptido sint tico! "l antgeno sint tico es un tetradecap ptido que consiste en un asa de ,% aminocidos subtendidos por el puente disul'uro ms cercano al e0tremo *&terminal de la mol cula! "ste tetradecap ptido cuando est unido de 'orma co$alente con un transportador, induce en los cobayos anticuerpos que no slo se unen de 'orma espec'ica con la to0ina sino que adems neutrali:an sus e'ectos dermonecrticos y letales! "sto representa el primer eFemplo de inmuni:acin acti$a e0itosa contra una to0ina bacteriana letal mediante el empleo de un antgeno sint tico!
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Familia Corynobacteriacea B;V;H3"! "l agregado de baFas concentraciones de 'ormalde#ido a la to0ina di't rica destruye su to0icidad y la con$ierte en to0oide! )a desto0i'icacin por 'ormalde#ido altera tanto la acti$idad en:imtica del 'ragmento E como las propiedades de unin del 'ragmento B a las c lulas! )as alteraciones pueden ser atribuibles a la modi'icacin qumica de residuos esenciales en la to0ina o a la unin intramolecular cru:ada entre lisina y tirosina por medio de puentes de metileno! )a mayor estabilidad y resistencia a la protelisis del to0oide se atribuye a los e'ectos de las uniones cru:adas! "l to0oide no puede ser cli$ados en 'ragmentos E y B! *o posee acti$idad E3D&ribosilante y no se une a las membranas de las c lulas!

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3HE>*NSBHC; 3" )EB;@EB;@H;S! CP)BH9;S! Dara el diagnstico microbiolgico de la di'teria se requiere el asilamiento del microorganismo! 3ado que es 'undamental al administracin temprana de la antito0ina! )a 'aringitis estreptococcica y la in'eccin de 9incent pueden ser con'undidas con la di'teria y siempre deben ser consideradas cuando se reali:a el diagnstico de laboratorio! )os #ispados 'arngeos y de las 'auces se pueden inocular en un tubo pico de 'lauta con medio de )J''ler o de Dai, una placa con telurito o una placa con agar sangre! *o se recomienda intentar identi'icar C. diphtheriae en 'rotis directos de muestras clnicas! )os tubos pico de 'lauta con medio de )J''ler deben ser e0aminados despu s de ,( a 2% #oras por tincin con a:ul de metileno para buscar las 'ormas pleomr'icas tpicas! )as placas con agar sangre deben ser e0aminadas en busca de estreptococos M&#emolticos y cualquier colonia griscea o negra caracterstica en medios con telurito! Se pueden trans'erir a tubos inclinados con medio de )J''ler! Dueden lle$arse a cabo reacciones bioqumicas de con'irmacin de y la patogenicidad de los microorganismos asilados en medio de )J''ler, puede ser estudiada con la prueba de $irulencia, in $i$o o con la t cnica de inmunodi'usin in $itro! D@P"BE H* 9H9;! Dara los laboratorios que rara $e: aslan C. diphtheriae se aconseFa la inoculacin en animales! Dueden utili:arse coneFos o cobayos y un solo animal es su'iciente para la prueba y como control de inoculaciones! )a prueba se lle$a a cabo inyectando por $a intrad rmica, en un animal rasurado 4!2 ml de una in'usin de caldo de culti$o de %- #oras del microorganismo en estudio! 3espu s de cinco #oras se inyectan 644 unidades de antito0ina di't rica por $a intraperitoneal en el cobayo +o en la $ena de la oreFa del coneFo/ y transcurridos 54 minutos una segunda muestra de 4!2 ml de caldo se inyecta por $a intrad rmica en el rea control opuesta al sitio de prueba! "n el sitio control slo se desarrolla un ndulo de coloracin rosada que no presenta ulceracin posterior debido a la administracin pre$ia de antito0ina!

Familia Corynobacteriacea )a prueba de di'usin en gel para la determinacin de la patogenicidad es ms rpida que el m todo in $i$o, pero a menos que las placas #ayan sido preparadas con sumo cuidado pueden obtenerse resultado 'also&negati$o! "n esta prueba se colocan tiras de papel de 'iltro embebidas en antito0ina sobre la super'icie de un medio con agar&suero y se inocula masi$amente la placa por inyeccin de una lnea de inculo perpendicular a la tira! )as placas deben leerse a diario durante tres das! Si el microorganismo es to0ig nico aparece un lnea blanca de un precipitado to0ina&antito0ina, que se e0tiende en un ngulo de %6CC desde la interseccin entre la lnea del inculo y el 'rente de antito0ina que di'unde desde el papel 'iltro! ;tros m todos muy similares es el procedimiento de "leX modi'icado, un m todo de inmunodi'usin! )a prueba utili:a agar I) 9irulence, un agar con base de proteosa peptona, con suplemento de suero est ril de coneFo y con telurito de potasio al 4!45Z! este medio se $ierte en una placa de petri est ril de ,64 mm! Entes de que medio se solidi'ique, se sumerge una tira de , cm 0 - cm de papel de 'iltro saturado con antito0ina di't rica en el medio se lo orienta cru:ando el dimetro de la placa! 3espu s del en'riado, se reali:a una estra perpendicular con la cepa por e$aluar para la produccin de to0ina en la tirita de antito0ina sumergida! "quidistante de uno de los lados de esta estra, tambi n se siembra otra estra con un cepa to0ig nica conocida de C. diphtheriae de control! )uego se incuba la placa a 56CC y se la e0amina cada 2% #oras durante 5 das! Si la cepa desconocida es to0ig nica, se 'orma lneas de precipitina en ngulos de %6C entre el inculo y la tira de antito0ina! "stas lneas sern id nticas a la cepa to0ig nica conocida de C. diphtheriae control! Bambi n se #an creado otros m todos, que incluye inmunoanlisis en:imtico y pruebas de aglutinacin de lte0 pasi$as in$ersas para la deteccin de produccin de to0ina por C. diphtheria. "l "HE rpido desarrollado por "ngler y "'stratiou utili: antito0ina policlonal equina como anticuerpo de captura, y un anticuerpo monoclonal marcado con 'os'atasa alcalina dirigido contra el 'ragmento E de la to0ina di't rica como anticuerpo de deteccin! Bambi n se #an implementado m todos moleculares para la deteccin de produccin de to0ina por C. diphtheriae. )a mayora de los m todos de DC@ #an sido dirigidos al gen tox! 9E@H"3E3"S ; BH;BHD;S C. diphtheriae puede aparecer como tres o cuatro tipos +biotipos/ de colonias distintas designadas gravis, mitis, intermedius y algunos autores la cuarta $ariedad belfanti! "stos biotipos tambi n di'ieren signi'icati$amente en la mor'ologa de la coloracin de >ram, algunas reacciones bioqumicas y, desde el punto de $ista #istrico, en la gra$edad de los procesos patolgicos que producen! )as cepas de C. diphtheriae biotipo gravis y las cepas biotipo mitis

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Familia Corynobacteriacea producen colonias con$e0as bastante grandes +,&2 mm de dimetro a las 2% #oras/, colonias con$e0as con bordes lisios, mientras que las cepas biotipo intermedius producen colinas peque2as +[, mm a las 2% #oras/, ms negras y ms densas en agar que contiene telurito! )a mayora de las cepas mitis y algunas cepas gravis son d bilmente M&#emolticos en SBE +agar sangre de carnero/! )os cuatro biotipos crecen como colinas negras rodeadas por #alos pardos en medio de Binsdale modi'icado y todos 'orman colonias blanco grisceas, lisas y no #emolticas en SBE! Bodos lso biotipos carecen de acti$idad de pira:inamidasa, no producen 'os'atasa alcalina y no #idroli:an escualina ni urea! Se produce cido a partir de glucosa y maltosa, pero no de sacarosa, manitol o 0ilosa8 se #an comunicado raras cepas que 'ermentan la sacarosa!

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OTRAS CORINEBACTERIAS Corynebacterium pseudotuberculosis! Con la e0cepcin de C. diphtheriae, Corynebacterium pseudotuberculosis es la nica especie que produce una e0oto0ina! Sin embargo, esta e0oto0ina es di'erente desde el punto de $ista antig nico de la de C. diphtheriae. "strec#amente relacionada con C. diphtheriae, C. pseudotuberculosis es susceptible a algunos de los bacteri'agos utili:ados en la tipi'icacin del bacilo de la di'teria y , cuando se lisogeni:a con un 'ago tox+, sinteti:a to0ina di't rica! C. pseudotuberculosis causa lin'arigitis ulcerosa y abcesos en o$eFas, caballos, ganado y otros animales de sangre caliente! )as in'ecciones en el #ombre se caracteri:an por ocurrir como una lin'adenitis aguda o crnica y perecen tener su origen en el contacto con animales in'ectados! Corynebacterium pseudodiphtheriticum y Corynebacterium xerosis . Son las dos especies culti$adas con mayor 'recuencia de materiales clnicos! C. pseudodiphtheriticum se encuentra en la naso'aringe del #ombre! "s un bacilo corto y bastante uni'orme que se ti2e de 'orma pareFa e0cepto por un tabique trans$ersal en la parte media que queda sin te2ir! )os grnulos metacromticos y las 'ormas en palo de gol' por lo general estn ausentes! C. xerosis $i$e en la piel y en las membranas mucosas #umanas, en particular en las conFunti$as! )as in'ecciones por estos g rmenes se dan sobre todo en pacientes inmuncomprometidos o en aquellos con de'ectos mucocutneos que 'acilitan la bacteriemia! )a endocarditis de $l$ulas prot sicas es una de las in'ecciones de mayor pre$alencia atribuidas a esta especie! Corynebacterium bovis. )a posicin ta0onmica de C. bovis es incierta, a pesar de lo cual en la actualidad contina en el g nero Corynebacterium. "s un microorganismo lip'ilo que requiere la presencia de cidos grasos insaturados de cadena larga! C. bovis es un comensal en la ubre bo$ina y puede ser causa

Familia Corynobacteriacea de mastitis en las $acas! Se #an comunicado di$ersas in'ecciones #umanas generadas por este microorganismo, pero an no se #a documentado su relacin con la 'uente animal! Se trata de la especie de Corynebacterium que con mayor 'recuencia asocia con <ne'ritis de s#unt= del S*C! Corynebacterium minutissimum. "s el microorganismo responsable del eritrasma, una en'ermedad que aparece en las reas intertriginosas y que se caracteri:a por la presencia de placas escamosas que dan una 'luorescencia de color roFo coral baFo lu: de Yood a 5(% nm! C. minutissimum es un microorganismo e0igente nutricionalmente! Cuando crece en anaerobiosis en un medio slido que contiene una base de medio de culti$o tisular y 24Z de suero 'etal bo$ino, produce una 'luorescencia roFo coral a anaranFada, similar a la de las lesiones de la piel! )as colonia que crecen en agar&sangre no producen esta 'luorescencia caracterstica! Corynebacterium haemoliticum (Arcanobacterium haemoliticum). "s distinta de todas las dems especies de Corynebacterium y Actinomyces y #a sido reclasi'icada en un nue$o g nero, Arcanobacterium. "s un bacilo grampositi$o corto e irregular, pero despu s de ,- #oras de proli'eracin en una placa de agar&sangre los microorganismos se con$ierten en granulares y se asemeFan a cocos peque2os e irregulares! "n medio de )J''ler permanecen como 'ormas bacilares y son pleomr'icos a las %- #oras! C . haemoliticum est presente sobre la piel y en la naso'aringe de las personas sanas, aunque tambi n puede ser el agente etiolgico de una 'aringitis aguda similar a la producida por estreptococos del grupo E! E di'erencia de la 'aringitis estreptococcica, la in'eccin por C. haemoliticum a'ecta sobre todo a adolescentes y adultos F$enes y en un 64Z de los casos se obser$a una erupcin escarlatini'orme! En se desconoce la causa de esa erupcin, pero se supone que su mecanismo operati$o es semeFante al de C. diphtheriae. Corynebacterium pyogenes (Arcanobacterium pyogenes). "s una anaerobio aerotolerante similar desde el punto de $ista bioqumico a C. haemoliticum, con la di'erencia de que es #emoltico y proteoltico! Droduce una amplia $ariedad de in'ecciones pigenas en cierto nmero de animales dom sticos, pero in'ormes acerca de in'ecciones #umanas no #an sido bien documentados! Corynebacterium equi (Rhodococcus equi). "s un microorganismo nocardi'orme aerobio grampositi$o que presenta un ciclo mor'ogen tico de coco&bacilo! Se encuentra en el suelo y en el esti rcol de los #erb$oros y es el agente causal de di$ersas :oonosis importantes, incluida la bronconeumona equina! Se #a in'ormado cierto nmero de in'ecciones #umanas en adultos F$enes inmunocomprometidos, con se$eros transtornos de la inmunidad celular y con antecedentes de e0posicin a animales! "n esos pacientes la en'ermedad presenta un curso subagudo y la neumona necroti:ante

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Familia Corynobacteriacea producida por C. equi se asemeFa a la in'eccin por micobacterias y por nocardias! E continuacin una Corynebacterium: lista de otros eFemplos de especies del g nero
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Corynebacterium amycolatum. C. afermentans C. accolens C. appendicis C. argentoratense C. atypicum C. aurimucosum C. auris C. confusum C. coryleae C. callunae C. cystitidis C. durum C. falsenii C. freneyi C. flavescens C. glutamicum C. glucuronolyticum C. jeikeium C. kutscheri C. kutscheri

C. matruchotii C. mycetoides C. pilosum C. renale C. striatum C. vitarumen C. aquaticum C. ulcerans C. serosus

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BIBLIOGRAFIA: B"@>"USS ME*PE) ;F 3"B"@MH*EBH9" BECB"@H;);>U! ,..%! .t# edition! F@E*CHE! ;! 24,,! Manual de prcticas de Bacteriologa&P*D@>! )ambayeque&Der! MECFE33H*, @! 2445! Druebas Bioqumicas para la identi'icacin de bacterias de importancia clnica! 5era edicin! "d! M dica Danamericana! Buenos Eires! Ergentina! ME*3H>E*, M!8 ME@BH*I;, \! y DE@I"@, \! 244-! BrocX Microbiologa de los Microorganismos! ,4ma edicin! "ditorial Dearson&Detice Tall! Madrid! "spa2a! YH**, \! et al. 244-! Ioneman 3iagnstico Microbiolgico! (ta edicin! "d! M dica Danamericana! Buenos Eires! Ergentina!

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ANE4OS:

Ene0o Coloracin >ram para Corynebacterium diphtheriae.

,1

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Ene0o 21 Coloracin >ram para Corynebacterium diphtheriae. 3onde se obser$a el

pleomor'ismo en este caso club s#ape= +<'orma de maso=/!

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Ene0o 51 Suero coagulado de )J''ler por Corynebacterium diphtheriae.

Ene0o %1 Corynebacterium diphtheriae en Egar Columbia con 6Z de sangre de carnero citratada! Culti$o de 2% #oras, 57CC en una atms'era enriquecida con 6Z de di0ido de carbono

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Ene0o 61 Corynebacterium diphtheriae gravis en Egar Columbia con 6Z de sangre de carnero citratada! Culti$o de 2% #oras, 57CC en una atms'era enriquecida con 6Z de di0ido de carbono! Elgunas cepas pueden crecer en agar sangre con M&#emlisis!

Ene0o (1 3iagrama de la to0ina di't rica y sus 'ragmentos! )a to0ina es liberada al medio de culti$o como una cadena polipeptdica nica! )a mol cula intacta contiene dos puentes disul'uro! "l asa peptdica contenida dentro del primer puente disul'uro es muy sensible al cli$aFe proteoltico y se abre luego

Familia Corynobacteriacea de la digestin sua$e con tripsina! )a reduccin posterior del enlace disul'uro produce una di$isin de la to0ina en 'ragmentos E y B!
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Ene0o 71 accin de la to0ina di't rica de Corynebacterium dphtheriae. +a/ "l 'actor 2 de elongacin +"F&2/, normalmente se une al ribosoma y transporta al aminocido en el t&E@* al ribosoma, pro$ocando la elongacin de la protena! +b/ )a to0ina di't rica se une a la membrana, donde es #idrili:ada, y el 'ragmento E es internali:ado! "l p ptido E catali:a la E3D&ribosilacin del 'actor 2 de elongacin +"F&2S/! "l 'actor modi'icado no ayuda a la e0tensin de la cadena polipeptdica, como resultado se interrumpe la sntesis proteica y la c lula muere!

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Ene0o -1 Corynebacterium diphtheriae culti$ada en Egar Binsdale +BH*/! "l cual es usado para el aislamiento primario e identi'icacin de Corynebacterium diphtheriae! contiene )&cistena y tiosul'ato sdico que son indicadores de T 2S! Belurito de potasio es el agente selecti$o +in#ibe muc#os de la 'lora normal de $as respiratorias superiors/ que cambia el medio marrn&negro como resultado de la reduccin del telurito de potasio a telurito metlico! Culti$o de 2% #oras, 57CC en una atms'era aerbico +la atms'era enriquecida con di0ido de carbono puede in#ibir su crecimiento/

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Ene0o .1 Corynebacterium diphtheriae culti$ada en Egar Binsdale +BH*/! Culti$o de 72 #oras, 57CC en una atms'era aerbico! "l #alo oscuro se intensi'ica si contina en incubacin!

Familia Corynobacteriacea Ene0o ,41 di'erenciacin de las especies de Corynebacterium que pueden causar in'ecciones en los seres #umanos, Erypelothrix rhusiopathiae y isteria monocytogenes. Segn MacFaddin!
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Familia Corynobacteriacea Ene0o ,,1 Comportamiento di'erencial de las especies de Corynebacterium! Segn Francia ;!
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Ene0o ,21 Caractersticas mor'olgicas de las colonias de Segn Francia ;!

Corynebacterium!
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Ene0o ,51 Elgoritmo para la identi'icacin de Corynebacterium diphtheriae. Segn Yinn et al.