UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Estudio fotoqumico precedente del extracto hidroalcoholico de las hojas de Schinus molle (molle)

AUTORES. QUISPE CRISOSTOMO NICKOLAS BLACIDO PAUCAR JUDITH DURAN LLOCSE LILIA

ASESORA Dra. RODRIGUEZ VILA MARIBEL VERNICA. SECCIN: FB5M1 LIMA PER! "#$%

INTRODUCCIN
Los principios activos son sustancias que se encuentran en las distintas partes u rganos de las plantas y que alteran o modifican el funcionamiento de rganos y sistemas del cuerpo humano y animal. La investigacin cientfica ha permitido descu rir una variada gama de principios activos! de los cuales los m"s importantes desde el punto de vista de la salud! son los aceites esenciales! los alcaloides! los glucsidos o hetersidos! los muclagos y gomas! y los taninos. #$isten en las plantas otros principios activos relevantes denominados nutrientes esenciales! como las vitaminas! minerales! amino"cidos! car ohidratos y fi ras! a%&cares diversos! "cidos org"nicos! lpidos y los anti iticos. Los principios activos se clasifican! seg&n su estructura qumica! en grupos: 'roductos resultantes del meta olismo primario (procesos qumicos que intervienen en forma directa en la supervivencia! crecimiento y reproduccin): *l&cidos! lpidos! derivados de amino"cidos. Los principios activos se clasifican! seg&n su estructura qumica! en grupos: 'roductos resultantes del meta olismo primario (procesos qumicos que intervienen en forma directa en la supervivencia! crecimiento y reproduccin): *l&cidos! lpidos! derivados de amino"cidos. 'roductos derivados delmeta olismo secundario (no son esenciales para el meta olismo sino que son sinteti%adas como defensa!adaptacin! etc): son los m"s importantes como principios activos! y los que veremos a lo largo de este tema. Hetersidos. Antraquinnicos, Cardiotnicos, Ciano !nicos, Cumarnicos, "enlicos, "la#nicos, $anunculsidos, Saponsidos, Sulfurados %olifenoles. &cidos fenlicos' Cumarinas' "la#onoides' (i nanos' )aninos' *uinonas. )erpenoides. Aceites esenciales' +ridoides' (actonas' ,iterpenos' Saponinas. Alcaloides 'ara cada uno de los grupos veremos su estructura qumica "sica! su distri ucin en el reino vegetal y su inter+s en la industria. Los hetersidos! aunque pertenecen a varios grupos! los agruparemos en una categora propia. Los aceites esenciales se estudiar"n en un tema aparte! dada su importancia. #l 'er& es uno de los pases con mayor iodiversidad en el mundo! muchas de sus especies vegetales pueden ser aprovechadas de forma sosteni le por la industria! una clara alternativa es el ,chinus molle L.! un "r ol nativo con aplicaciones medicinales! cuya compocicion presenta propiedades insecticidas! anti acterianas y antif&ngicas! demostradas con un amplio espectro (-hirino et al.! .//10 1eng 2ueqin! .//3).

RESUMEN

#n la presente investigacin se evalu #studio fotoqumico precedente del e$tracto hidroalcoholico de las ho4as de ,chinus molle 5molle6a ! en diferentes prue as qumicas como para anali%ar la los meta olitos activos . ,e encontr que el e$tracto 7idroalcoholico ,chinus molle L. 5molle6! constituido principalmente por monoterpenos y sesquiterpenos! amino"cidos. Los resultados mostraron que la muestra anali%ada contenia gran parte de estos meta olitos y8o componentes0 as mismo! los practicas llevados a ca o en el la oratorio de 9uimica :rganica de la ;<=>#?,=@A@ <:?B#?B C=#<#? D Facultad de Farmacia y Bioquimica posterior a un tra a4o de investigacin mucho m"s amplio y desarrollado %ala-ras cla#e. Schinus molle (, Hidroalcoholico, fla#onoides, lactonas, squiterpenos&'()(*+r,+)(-& .(*(/01'23(

ABSTRACT

=n this research study preceding photochemical hydroalcoholic e$tract of the leaves of ,chinus molle EmolleE a! in different chemical tests to analy%e the active meta olites Fere evaluated. =t Fas found that the hydroalcoholic e$tract ,chinus molle L. EMo G lleE! consisting mainly of monoterpenes and sesquiterpenes! amino acids. Bhe results shoFed that the sample analy%ed contained much of these meta olites and 8 or components! liHeFise! the practices carried out in the la oratory of :rganic -hemistry <:?B#?B C=#<#? ;<=>#?,=B2 D Faculty of 'harmacy and Biochemistry after a long research roader and more developed K+45(r6-7 S382)0- '(99+ L& H26r(:A93(8(923& -/02*+r,+)(-& '()(*+r,+)+-& ,8(*(38+'23a9 .9a;()(26-& 9a3*()+-&

NDICE DE FIGURAS
'"gina
Fig. N 1: Distribucin geogrfica de la familia Schinus Molle (molle) Fig. N 2: Distribucin geogrfica del gnero Cyphomandra... .. Fig. N 3: Mapa de las regiones naturales del !er". #i$eles de altitud en metros sobre el ni$el del mar..... .%& Fig. N 4' (structura electrnica del o)*geno molecular (+,). %Fig. N 5: .' un par de electrones del mismo orbital con giro opuesto y $ectores magnticos antiparalelos. /' un electrn no apareado... %0 Fig. N 6: 1esumen de los cambios 2ue puede sufrir el o)*geno molecular estable.. .%3 Fig. N 7: (strs o)idati$o. .%4 Fig. N 8: Clasificacin de los antio)idantes. .,5 Fig. N 9: Clasificacin de antio)idantes basada en el sitio de su mecanismo de accin.. .,Fig. N 10: Ciclo de 6aber78eiss. . .., Fig. N 11: .terognesis y antio)idantes....5, Fig. N 12: (structura 2u*mica de la $itamina .. . ..55 Fig. N 13: #structura qumica de la vitamina #. .. .5Fig. N 14: (structura 2u*mica de la $itamina C. .. .50 Fig. N 15: Molcula del isopreno. . .53

Fig. N 16: Clasificacin de los carotenoides. ...... .59 Fig. N 17: !ropiedades f*sico 2u*micas importantes de los carotenoides. ...-% Fig. N 18: :7 caroteno. .. ...-, Fig. N 19: ;unciones o acciones atribuidas a los carotenoides. ... ...-5 Fig. N 20: <=Caroteno.........--

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA #studio de los meta olitos activos en ho4as de ,hinus Molle 5Molle6 de la localidad de -anta distrito arahuay Lima ./1I

JUSTIFICACION #l ,chinus molle L. 5molle6 es una especie vegetal muy difundida en el 'er&! siendo su desarrollo ptimo en los climas de los valles interandinos. #l uso popular medicinal u ica a las ho4as del 5molle6 desde un repelente de mosquitos hasta un analg+sico en dolores reum"ticos. ,e postul que! el principio activo (os) presente en las ho4as del 5molle6 pudiera tener efectos en+ficos en el ienestar social! cuyos resultados e$perimentales se verificaran mediante prue as preclnicas.

OBJETIVOS GENERALES =dentificar los meta olitos activos de ,hinus molle

OBJETICOSESPECIFICOS

@eterminar los falvonoides de ,hinus Molle 5molle6 @eterminar los alcaloides de ,hinus Molle 5molle6 @eterminar los amino"cidos de ,hinus Molle 5molle6

I. MARCOTERICO $. G+)+ra926a6+$.$. A-,+3*(- <(*=)23(1.1.1. -aractersticas de la familia ,olanaceae Fa'292a: Anacardiaceae N('<r+ 3('>): Falso pimentero. L0?ar 6+ (r2?+): 'er&! #cuador! Bolivia! 'araguay! sur del Brasil! ;ruguay! norte de Argentina! norte de -hile! cultivado desde antiguo y naturali%ado en otros pases americanos. E*2'(9(?1a: Schinus ! nom re griego del lentisco! otro ar olito de esta misma familia. /olle ! proviene de su nom re nativo peruano. $.$.$.$. D2-*r2<032@) ?+(?r=.23a

S. molle es originario del estado de ?o *rande del ,ur en el sur de Brasil! del ;ruguay! y de la mesopotamia argentina. #s una especie tolerante a la sequa y a las altas temperaturas! longeva! resistente y perenne! aunque no aguanta ien las heladas. 'or estas ra%ones se lo cultiva en todo el mundo. #n #uropa se lo planta en parques! paseos y avenidas. #n #spaJa es frecuente su cultivo en las provincias m"s c"lidas! especialmente en el Levante y Andaluca. 7a llegado a ser un serio pro lema en muchos lugares del mundo por su car"cter invasor! naturali%"ndose en los nuevos h" itats..

#n Kfrica del sur! por e4emplo! S. molle ha invadido savanas y pasti%ales y se ha e$pandido a lo largo de cunetas y canales de riego en am ientes semides+rticos.. Bam i+n se considera invasiva en gran parte de Australia! desde pasti%ales a osques a iertos y "reas costeras. Bam i+n en fincas a andonadas y 4unto a las vas del tren. #n Am+rica del <orte! tanto S. molle como su pariente cercano Schinus terebinthifolius son particularmente daJinos en Florida y 7aF"i! y pueden encontrarse tam i+n en el sur de Ari%ona! sur de -alifornia! Be$as! Luisiana! y 'uerto ?ico.I

$.$.$.". I',(r*a)32a +3()@'23a #l pimentero falso (Schinus molle)! originario de Am+rica tropical! es una especie muy utili%ada! so re todo en la =talia meridional! para repo lar desmontes y como planta ornamental en parques y 4ardines.

$.$.". Cara3*+r1-*23a- 6+9 ?+)+r( A)a3ar62=3+a

A)a3ar62a3+a+. La familia Anacardiaceae agrupa a plantas de pases c"lidos y templados! son "r oles o ar ustos leJosos con a undantes materiales taninos y resinas! el fruto es com&nmente drup"ceo y son representantes de la familia los g+neros Mangifera y Anacardium! este &ltimo es el que da nom re a la misma! son ampliamente conocidas en -u a las especies Mangifera indica (#l Mango) y Anacardium occidentale (MaraJn) y Spondia purpurea (-iruela)! entre otras por sus e$quisitas frutas

$.$.".$. ?+(?r=.23a

D2-*r2<032@)

Antiguamente el pimiento se encontra a en las cercanas del agua! ocupando e$tensas %onas del -entro y ,udam+rica llegando hasta el <orte de Argentina. Actualmente su distri ucin se ha e$tendido por cultivo y asilvestramiento. #n -hile crece desde la ?egin de Barapac" en el e$tremo norte! hasta la ?egin Metropolitana en la %ona central! aunque su rango de distri ucin se ha e$tendido m"s al sur de ido a su cultivo. <o forma asociaciones puras! encontr"ndose e4emplares aislados a lo largo de toda su distri ucin natural.

$.$.%.

Cara3*+r1-*23a- 6+ 9a +-,+32+ S382)0- '(99+

El aguaribay, gualeguay, o anacahuita (Schinus molle), es una especie arbrea de hojas perennes perteneciente a la familia Anacardiaceae, originaria del sur de Brasil, Uruguay, y la mesopotamia argentina puede llegar a medir alrededor de !" metros de altura. Una especie similar se distribuye desde #er$ hasta el noroeste de la Argentina y %hile, estando asil&estrada en M'(ico, es el ,chinus areira, la cual fue considerada por mucho tiempo slo como una &ariedad de esta especie, llam)ndose por lo tanto* Schinus molle &ar. areira hoy se la trata como especie plena.("i . 0) Son )rboles de tama+o pe,ue+o a mediano, ,ue alcan-an un tama+o de hasta !" m de alto y ./ cm de di)metro, ramas colgantes, corte-a e(terior caf' o gris, muy )spera, e(foliante en placas largas, tricomas erectos o cur&ados, hasta /.! mm de largo, blan,uecinos plantas dioicas. 0ojas alternas, siempre&erdes o deciduas, imparipinnadas o paripinnadas, 1234 cm de largo, !!2.15folioladas fol6olos opuestos a alternos, estrechamente lanceolados, !..2".! cm de largo y /.32/." cm de ancho, )pice agudo, obtuso o redondeado, acumen mucronado a

uncinado, base redondeada, obtusa o cuneada, oblicua, m)rgenes enteros a serrados, especialmente hacia el )pice, generalmente glabros, cart)ceos. 7nflorescencia terminal y a(ilar, pleiotirsos o fasc6culos, br)cteas frondosas, de !/23" cm de largo, glabra a escasamente pubescente, ped$nculo /2. cm de largo, pedicelos !..23 mm de largo, articulados. 8ruto globoso, de "29 mm de di)metro, e(ocarpo delgado, deciduo, rosado a rojo5rosado cuando maduro, glabro, mesocarpo carnoso y resinoso, endocarpo seo semillas comprimidas, cotiledones planos

$.$.%.$. D2-*r2<032@) G+(?r=.23a +) +9 P+r> #l MOLLE crece tanto de manera silvestre como cultivada en %onas secas de la costa! la serrana y parte de la Ama%ona! desde el nivel del mar hasta los I!5// msnm.@esarrolla con mayor eficiencia en lugares con suelos ligeros a rocosos y a4o condiciones clim"ticas tropicales y templadas.

$.$.%.". S2)@)2'(- 6+ 9a +-,+32+ Blepharocaryaceae -omocladiaceae Lulianiaceae Lentiscaceae 'istaciaceae ,chinaceae ,pondiadaceae >ernicaceae Lulianaceae

$.$.%.%. N('<r+ ;09?ar 6+ 9a +-,+32+

Mulli! "r ol de la vida! pimienta del 'er&! falsa pimienta! cullash! huigan! huiJan! maera! orcco mulli! HulaH%! aguari ay! huari ay.

$.$.%.A. U-(- 3('0)+ALIMENTO7 Las semillas molidas se usan como pimienta lanca y las enteras como pimienta rosada. -on la cu ierta dulce de las semillas se prepara chicha y la leche de molle! que es una chicha no fermentada que adelga%a sin de ilitar. La miel de molle se ela ora hirviendo el lquido de los frutos maduros hasta que toma consistencia de 4ara e. MEDICINAL: #l MOLLE es usado como antirreum"tico! purgante! cefal"lgico! cicatri%ante! depurativo de la sangre y antiespasmdico. Bam i+n com ate malestares de riJn! ve4iga e hgado! as como diversos dolores corporales y algunas afecciones respiratorias. BF2?.AC

TINTE7 Al cocer las ho4as y la corte%a de este "r ol se o tiene un lquido de color amarillo intenso! que es utili%ado como insumo para teJir diversos te4idos. ACEITES ESENCIALES7 Las ho4as del MOLLE contienen un aceite que se utili%a en perfumera y en la ela oracin de cremas dentales. Las semillas presentan un aceite que puede ser empleado como fungicida natural. Los frutos y semillas tam i+n poseen varios aceites como mirceno! felandreno! limoneno y cadinol. PESTICIDA7 -on el fin de repeler algunas plagas! se entierran ramitas de MOLLE en los surcos de los campos de cultivo. Bam i+n se sa e que las ho4as puestas entre la ropa pueden eliminar polillas. MADERA7 La madera de este "r ol es dura y resistente! por lo que suele ser usada en la ores de carpintera y e anistera.

$.".A-,+3*(- Q01'23(Las ho4as y frutos de ,. molle contienen un aceite esencial rico en mono y sesquiterpenes. #n el aceite o tenido del fruto! el me4or estudiado! se han identificado los monoterpenos alfaDcadineno! canfeno! carvacrol! paraDgimeno! utirato de geraniol! limoneno! mirceno! he$anoato de nerol! alfa y etaD felandreno! alfa y etaDpineno! sa ineno! alfa y gamaDterpineno! alfa terpineol y el +ster del "cido frmico y terpinoleno0 y los sesquiterpenes transDeneDalfaD ergamont! ou oneno! alfa! eta! y BDcadinol! alfa y gamaDcalacoreno! etaD cariofileno! alfaDcopaeno! alfaDcu eneno! eta y gamaDendesmol! germacreno @! etaDguaieno! alfaDgur4uneno! alfa y gamaDmouroleno.BDmourolol y etaD spatuleno. Bam i+n se han identificado en el fruto los triterpenos "cidos isoDmasD ticadienlico y el I epi ismero! y el alcaloide piperina. #n el aceite esencial de la ho4a se han identificado los monoterpenos carDIDene! carvacrol! alfaDfenandreno! y el liganano croFeacn. :tros componentes de este rgano son el sesquiterpeno isoDprecalamenediol! los flavonoides! quercetn y rutn y el esterol! etaDsitosterol. #n la semilla se encuentran el sesquiterpenes "cido isoDIDepiDmasticadienlico y los triterpenos "cidos etaDelemnico! isoD masticadienclico y el IDepiDismero. #n este grupo el compuesto alfaDamirina se ha detectado en toda la planta! as como el esterol etaDsitosterol. Los frutos contienen un aceite esencial! gomoresina y taninos. ,u -omposicin 9umica.D Las ho4as contienen aceite esencial! principio amargo! gomoresina o$idasa0 frutas posee compuestos de pineno! fenol! timol! felandreno0 corte%a o tronco tiene tanino! l"te$! compuesto de goma de resina! l"te$ que contiene esquino$idasa $.".$. CARBOHIDRATOS

Los car ohidratos son sustancias naturales compuestas de car ono! hidrgeno y o$geno. Antiguamente se les conoca como 5hidratos de car ono6. Los car ohidratos son los compuestos org"nicos m"s a undantes de la iosfera y a su ve% los m"s diversos. <ormalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y tam i+n en los te4idos animales! como glucosa o glucgeno. #stos sirven como fuente de energa para todas las actividades celulares vitales. Bodos los car ohidratos est"n formados por unidades estructurales de a%&cares! que se pueden clasificar seg&n el n&mero de unidades de a%&car que se com inen en una mol+cula. La glucosa! la fructosa y la galactosa son e4emplos destacados de los a%&cares constituidos por una sola unidad (de a%&car)0 dicho tipo de a%&cares se conocen tam i+n como 5monosac"ridos6. A los a%&cares constituidos por dos unidades se le denomina 5disac"ridos60 los disac"ridos m"s ampliamente conocidos son la sacarosa (5a%&car de mesa6) y la lactosa (el a%&car de la leche). BF2?.DC La ta la siguiente muestra los principales tipos de car ohidratos alimenticios. CLASIFICACIN DE LOS CARBOHIDRATOS BF2?.EC

$.".$.$ AF>3ar+La glucosa y la fructosa son monosac"ridos y se pueden encontrar en las frutas! las ayas! las verduras! la miel y los siropes de glucosaDfructosa. #l a%&car com&n o de mesa! es decir! la sacarosa! es un disac"rido compuesto por glucosa y fructosa y est" presente en la naturale%a en alimentos tales como la remolacha a%ucarera! la caJa de a%&car y las frutas. La lactosa! que es un disac"rido compuesto de glucosa y galactosa! es el principal a%&car de la leche y de los productos l"cteos0 por su parte! la maltosa! que es un disac"rido compuesto slo de glucosa (dos mol+culas de glucosa)! est" presente en la malta y en los siropes (e$tractos lquidos) derivados del almidn. Banto el a%&car de mesa (sacarosa) y los siropes de glucosaDfructosa contienen glucosa y fructosa! ien en estado li re (siropes de glucosaDfructosa) o en forma de disac"rido (sacarosa). Los polioles se denominan alcoholes de a%&car. 7ay polioles naturales! pero la mayora se fa rican mediante la transformacin de a%&cares. #l poliol utili%ado con mayor frecuencia es el sor itol0 por su parte! el $ilitol se usa frecuentemente en las gomas de mascar y en los caramelos. #l isomaltol es otro poliol! que se usa en repostera8confitera y se o tiene a partir de la sacarosa. Los polioles son dulces y se pueden utili%ar en los alimentos (aJadi+ndolos a los mismos) de

forma similar a lo que se hace con los a%&cares! aunque dichos polioles pueden tener un efecto la$ante si se ingieren en cantidades e$cesivas. $.".$.". O92?(-a3=r26(La :rgani%acin Mundial de la ,alud (:M,) define a los oligosac"ridos como car ohidratos formados por IDM unidades de a%&cares (monosac"ridos)! aunque en otras definiciones se ha la de cadenas de a%&cares ligeramente m"s largas. Los fructooligosac"ridos contienen un total de hasta M unidades de fructosa y se producen con fines comerciales mediante la hidrlisis (descomposicin en%im"tica) parcial de la inulina. La rafinosa y la estaquiosa est"n presentes! si ien en cantidades pequeJas! en determinadas legum res! cereales y verduras! as como en la miel.

$.".$.%. P(92-a3=r26(,e necesitan m"s de 1/ unidades de a%&car y a veces hasta miles de unidades para formar los polisac"ridos. #l almidn es la principal reserva de energa de las hortali%as de ra% y los cereales. #st" formado por largas cadenas de glucosa en forma de gr"nulos! cuyo tamaJo y forma varan seg&n el vegetal del que forma parte. #l equivalente de los almidones en los animales y en los seres humanos es el llamado 5glucgeno6 (ver seccin I.1). Los polisac"ridos sin almidn son los principales componentes de la fi ra alimenticia. -omprenden: celulosa! hemicelulosa! inulina! pectinas y gomas. La celulosa es el componente principal de las paredes celulares vegetales y est" formada por miles de unidades de glucosa. Los distintos componentes de la fi ra alimenticia tienen diferentes propiedades y estructuras fsicas. ;na caracterstica distintiva de la fi ra alimenticia es que no puede ser digerida por los seres humanos. ,in em argo! algunos tipos de fi ra pueden ser meta oli%ados por las acterias intestinales! dando lugar a compuestos que las c+lulas intestinales humanas s que pueden utili%ar para la produccin de energa. #n cualquier caso! por no poder ser digerida por los seres humanos! la fi ra tiene un menor contenido energ+tico medio que la mayora de los dem"s car ohidratos

$.".". FLAVONOIDES Los .9a;()(26+- son pigmentos naturales presentes en los vegetales y que protegen al organismo de los daJos producidos por sustancias o elementos o$idantes como los rayos ultravioleta! la contaminacin am iental y de sustancias nocivas presentes en los alimentos. Los .9a;()(26+- fueron descu iertos por el premio <ovel Sent :y;rgy cuando en 1MI/ aisl de la c"scara del limn una sustancia! la citrina que regula a la permea ilidad de las pequeJas arterias. A

partir de all se han identificado m"s de 5/// .9a;()(26+-! ampliamente distri uidos en plantas! frutas y verduras y en diversas e idas como el vino! la cerve%a el t+ negro y el t+ verde.F2?.G #l organismo humano no puede producir estas sustancias! por lo cual de emos o tenerlos de la alimentacin o en forma de suplementos farmacolgicos. #n nuestra cultura nutricional contamos con alimentos ricos en .9a;()(26+- tales como: la fresa! naran4a "cida! uvas negras! toron4as! espinacas! remolacha! pimientos! ce olla! aguacate! eren4ena! pl"tano! rcoli y coliflor! entre una lista astante e$tensa. $.".".$. EH*ra332@) 4 a)=92-2La e$traccin de los flavonoides se reali%a con solventes org"nicos de alta polaridad como el etanol (el acetato de etilo se usa con astante precaucin ya que por calentamiento puede reaccionar con ciertos compuestos). 'osteriormente! se reali%an e$tracciones sucesivas con solventes de polaridad creciente como: 7e$ano 8 -loroformo (para flavonoides de a4a polaridad). Acetato de etilo (para flavonoides de mediana polaridad). Butanol (para flavonoides de alta polaridad y! por lo general! los de mayor uso farmacolgico gracias a la presencia de grupos funcionales de tipo hidro$ilo y car onilo) La espectrofotometra es &til para anali%ar la concentracin de flavonoides en una sustancia. Muchas veces esa medida se reali%a acoplada a una separacin cromatografa como por e4emplo 7'L-. $.".".". C9a-2.23a32@) 6+ 9(- .9a;()(26+@e acuerdo con la nomenclatura de la Aplicada. 'ueden clasificarse! seg&n su esqueleto y va meta lica! en:

F9a;()(26+-! derivados de la estructura .DfenilcromenDNDona (.DfenilD1!ND en%opirona). I-(.9a;()(26+-! derivados de la estructura IDfenilcromenDNDona (IDfenilD 1!ND en%opirona). N+(.9a;()(26+-! derivados de la estructura NDfenilcumarina (NDfenilD1!.D en%opirona). Los isoflavonoides se forman por migracin de un anillo enc+nico de la posicin . a I del anillo central. #l grupo integra m"s de .I/ estructuras! y los dos m"s conocidos son la genistena y la daid%eina.5 ,u funcin es defender a las plantas del ataque de patgenos. @entro de los .9a;()(26+-! se reconocen 3 y qui%"s O clases principales! seg&n los grupos funcionales que posean: las chalconas! las flavonas! los flavonoles! los flavandioles! las antocianinas! los taninos condensados! y

algunos autores consideran tam i+n a las auronas! que otros integran en las chalconas. Bam i+n hay otros derivados de los flavonoides que poseen modificaciones tales que no entran dentro de ninguna de estas clases principales. #l n&mero de flavonoides diferentes que es! en teora! posi le es astronmico! si se tiene en cuenta que die% de los car onos del esqueleto del flavonoide pueden ser sustituidos por una variedad de grupos diferentes! que a su ve% pueden ser hidro$ilados! meto$ilados! metilados! isoprenilados o en%ilados. Adem"s! cada grupo hidro$ilo y algunos de los car onos pueden ser sustituidos por uno o m"s a%&cares diferentes! y a su ve%! cada uno de esos a%&cares puede ser acilado con una variedad de "cidos fenlicos o alip"ticos diferentes. ,e han identificado y aislado alrededor de M./// flavonoides! pero sin duda a&n hay muchos m"s por descu rir

$.".".% A,923a32()+- 6+ 9(- .9a;()(26+-

A,923a32()+- +) '+6232)a Los flavonoides consumidos por el hom re le protegen del daJo de los o$idantes! como los rayos ;> (cuya cantidad aumenta en verano)0 la polucin am iental (minerales t$icos como el plomo y el mercurio)0 algunas sustancias qumicas presentes en los alimentos (colorantes! conservantes! etc). -omo el organismo humano no tiene la capacidad de sinteti%ar estas sustancias qumicas! las o tiene enteramente de los alimentos que ingiere. <o son considerados vitaminas. Al limitar la accin de los radicales li res (que son o$idantes)! los flavonoides reducen el riesgo de c"ncer! me4oran los sntomas al+rgicos y de artritis! aumentan la actividad de la vitamina -! ! loquean la progresin de las cataratas y la degeneracin macular! evitan las tufaradas de calor en la menopausia ( ochornos) y com aten otros sntomas. #n general el sa or es amargo! llegando incluso a provocar sensaciones de astringencia si la concentracin de taninos condensados es muy alta. #l sa or puede variar dependiendo de las sustituciones presentadas en el esqueleto llegando incluso a usarse como edulcorantes cientos de veces m"s dulces que la glucosa. ,us efectos en los humanos pueden clasificarse en:

Pr(,2+6a6+a)*23a)3+r(-a-: muchos han demostrado ser tremendamente eficaces en el tratamiento del c"ncer. ,e sa e que muchos inhi en el crecimiento de las c+lulas cancerosas. ,e ha pro ado contra el c"ncer de hgado Pr(,2+6a6+- 3ar62(*@)23a-: tienen un efecto tnico so re el cora%n! potenciando el m&sculo cardaco y me4orando la circulacin. Atri uidas fundamentalmente al flavonoide quercetina aunque aparece en menor intensidad en otros como la genistena y la luteolina. Los flavonoides disminuyen el riesgo de enfermedades cardacas..1 .. Fra?2926a6 3a,29ar: me4oran la resistencia de los capilares y favorecen el que +stos no se rompan! por lo que resultan adecuados para prevenir el sangrado. Los flavonoides con me4ores resultados en este campo son la hesperidina! la rutina y la quercetina. Pr(,2+6a6+- a)*2*r('<@*23a-: la capacidad de estos componentes para impedir la formacin de trom os en los vasos sanguneos posi ilita una me4or circulacin y una prevencin de muchas enfermedades cardiovasculares. D2-'2)032@) 6+9 3(9+-*+r(9: poseen la capacidad de disminuir la concentracin de colesterol y de triglic+ridos. Pr(*+332@) 6+9 81?a6(: algunos flavonoides han demostrado disminuir la pro a ilidad de enfermedades en el hgado. Fue pro ado en la oratorio que la silimarina protege y regenera el hgado durante la hepatitis. Lunto con la apigenina y la quercetina! son muy &tiles para eliminar ciertas dolencias digestivas relacionadas con el hgado! como la sensacin de plenitud o los vmitos. Pr(*+332@) 6+9 +-*@'a?( : ciertos flavonoides! como la quercetina! la rutina y el Haempferol! tienen propiedades antiulc+ricas al proteger la mucosa g"strica. A)*22).9a'a*(r2(- 4 a)a9?I-23(- : la hesperidina por sus propiedades antiinflamatorias y analg+sicas! se ha utili%ado para el tratamiento de ciertas enfermedades como la artritis. Los taninos tienen propiedades astringentes! vasoconstrictoras y antiinflamatorias! pudi+ndose utili%ar en el tratamiento de las hemorroides.M A)*2'23r(<2a)(-: isoflavonoides! furanocumarinas y estil enos han demostrado tener propiedades anti acterianas! antivirales y antif&ngicas. Pr(,2+6a6+- a)*2(H26a)*+-: #n las plantas los flavonoides act&an como antio$idantes! especialmente las catequinas del t+ verde. @urante aJos se estudi su efecto en el hom re! y recientemente (5 de mar%o del .//O .I ) se ha concluido que tienen un efecto mnimo o nulo en el organismo humano como antio$idantes.

$.".". ALCALOIDES

A93a9(26+-. ,on compuestos qumicos de origen vegetal! aunque e$isten protoalcaloides de origen animal. #$isten apro$imadamente 5/// alcaloides diferentes. 'ueden ser usados como analg+sicos! anest+sicos! curativos o psicotrpicos! act&an so re el ,<- y tienen un gran poder adictivo y e$citante. #ntre los alcaloides m"s importantes se encuentran la cafena! la cocana! la herona! la morfina! la nicotina y la quinina. $.".%.$. C9a-2.23a32@)

,e clasifican teniendo en cuenta los n&cleos fundamentales de sus mol+culas! en: A93a9(26+- 6+ )>39+( ,2r1623( A este grupo pertenecen la nicotina! la pilocarpina y la epartena. La )23(*2)a se encuentra en el 4ugo del ta aco acompaJada de otros alcaloides. #s un liquido incoloro de olor seme4ante al ta aco y sa or ardiente y picante. #s muy t$icas en dosis e$tremadas. A93a9(26+- 6+ )>39+( 2-(/02)(9+23( ,e encuentran en las plantas papaver"ceas y ranuncul"ceas. #l m"s importante es la papaverina! que tiene propiedades hipnticas (aunque no tan acentuadas como las de la morfina). A93a9(26+- 6+ )>39+( .+)a)*rI)23( #l m"s importante es la morfina. ,e encuentra en el opio en forma de sal. ,e emplea en medicina en forma de clorhidrato y sulfato! como sedantes y calmantes. A93a9(26+- 6+ )>39+( *r(,=)23( 'ertenecen a este grupo la atropina y la cocana. La atropina se encuentra en el 4ugo de varias plantas como la elladona y el estramonio. La cocana se e$trae de las ho4as de coca! es de sa or amargo! insensi ili%a la lengua! y se usa en medicina en forma de clorhidrato.

7lustracin S<= 7lustracin >? A@AB7% 35<structura de la atropina A93a9(26+- 6+ )>39+( 2)6@923( Los m"s importantes son la estricnina y la rucina.

La estricnina es uno de los alcaloides m"s en+rgicos! se e$trae de diversas plantas del g+nero ,trychnos! entre ellas el 7a a de ,an =gnacio y de la nue% vmica. #s de sa or amargo muy intenso y muy t$ica. ,u ingestin produce convulsiones tet"nicas. A93a9(26+- 6+ )>39+( )( 6+.2)26( son todos aquellos alcaloides cuya constitucin no ha sido a&n esta lecida con claridad. #ntre ellos se encuentra la aconitina (veneno muy violento! utili%ado en terap+utica para com atir ciertas dolencias) y la ergotinina (uno de los principios activos del corne%uelo de centeno! que e4erce una accin especfica so re el &tero. AL-AL:=@#, '=??:L=1=@=<=-:, Las pirroli%idinas son meta olitos secundarios de una gran variedad de plantas! que incluye especies que se encuentran en todo el mundo. #stas plantas son la causa de numerosos casos de envenenamiento de ganado! y ha causado grandes p+rdidas econmicas. Bam i+n son causa de muerte en humanos! especialmente en pases poco desarrollados! como consecuencia de la contaminacin de cereales y semillas por lo que son de gran importancia en el campo de los alimentos. ,e cree que la ingestin de hier as y vegetales que contienen estos alcaloides! son causa de dolencias.

$.".%.". Pr(,2+6a6+A93a9(26+- )( (H2?+)a6(

lquidos e$trai les por destilacin! arrastre de vapor olor fuerte

A93a9(26+- (H2?+)a6(

slidos cristali%a les con punto de fusin definidos incoloros o lancos aunque puede ha er coloreados sa or amargo poseen actividad ptica

#l car"cter "sico se de e al par de electrones li res del <. 'or su car"cter "sico son sensi les a la lu% y el calor! se esta ili%an con "cidos inorg"nicos. #n la naturale%a se encuentran en forma de sales aunque tam i+n li res. #n las plantas se considera a que eran productos o tenidos durante la e$traccin y poco solu les en los disolventes tpicos de e$traccin por su polaridad. 'ueden sufrir isomeri%acin ("cido lis+rgico.... isolis+rgico)! racemi%acin (hiosciamina...atropina). La solucin es importante para la e$traccin! purificacin y formulacin. ,on insolu les en agua! e$cepto las ases nitrogeno cuaternarias! ases $"nticas! colchicina0 son solu les en disolventes org"nicos cloroformo P

etanol P metanol P acetato de etilo P eter P enceno P nDhe$ano. #n forma de sales son solu les en agua! a e$cepcin de las sales de er erina e insolu les en disolventes org"nicos. Los alcaloides tienen una serie de reacciones de precipitacin en com&n! son moleculas comple4as de alto peso molecular:

taninos reactivos "cidos de alto peso molecular ("cido fosfoFolfr"mico! "cido fosfomol dico! "cido silicoFolfr"mico) reactivos iodados! formacin de comple4os con los metales o reactivo de Marne o reactivo de Cagner o reactivo de Mayer o reactivo de >alser o reactivo de @ragendorf #n estas reacciones pueden darse falsos positivos por la presencia de proteinas! cumarinas! alfa en%opironas0 as como falsos negativos porque algunos alcaloides forman comple4os que no precipitan

precipitados critalinos o tricloruro de oro o tri romuro de oro o cloruro mercurico o teracloruro de platino o "cido pcrico o "cido picrolnico

R+a332()+- 6+ 3(9(r

,e usan como reactivos: "cido sulf&rico "cido ntrico ferrocianuro de potasio dicromato pot"sico permanganato pot"sico

7ay adem"s reacciones especficas para un grupo determinado de alcaloides0 los derivados del tropano (reaccin de >italiDmarin)0 alcaloides derivados del indol (reaccin de >an ;rH). Bodas estas reacciones pueden usarse para la determinacin de alcaloides en los e$tractos

$.".%.%. METODOS DE EJTRACCION Los m+todos de e$traccin son muy variados. <ormalmente los alcaloides se e$traen de la planta con agua si est"n en forma de sales (solu les) o con "cido clorhdrico diluido si est"n en forma insolu le. Qltimamente est" adquiriendo fuer%a la purificacin por medio de fluidos supercrticos! concretamente con di$ido de car ono. $.".%. LACTONAS ,ustancias formadas al ciclarse una mol+cula de hidro$i"cido! el e$tremo "cido R -::7 se une con el e$tremo alcohlico R:7 dando lugar a una especie de #ster cclico! en este grupo est"n las furanonas y piranonas llamadas as por la forma del anillo resultante. Aparecen en las uvas de algunas variedades: ?iesling! Merlot! ,otoln! tam i+n puede generarse en la fermentacin pero las m"s conocidas son las 5lactonas del ro le6 generadas en el proceso del tostado de la madera y transferidas al vino durante el enve4ecimiento en arrica.

$.".".$. LACTONAS SESQUITERPKNICAS ,on un tipo de compuesto qumico terpenoide presente en algunos ta$ones de plantas. ,on conocidas principalmente en las Asteraceae (donde son diversas y ta$onmicamente &tiles! ,eaman 1MS.) pero tam i+n est"n presentes en unas pocas familias m"s! como Apiaceae! Magnoliaceae y Lauraceae. Algunas lactonas sesquiterp+nicas representativas son la 9a3*0,23r2)a! la ;+r)(9+,2)a y las '+H23a)2)a-. ,ar*+)2)a! la

$.".".". PLANTAS RICAS EN ESTAS SUSTANCIAS La man%anilla alemana o matricaria! Matricaria recutita L. (-hamomilla recutita (L.) ?auschert)! es una planta her "cea perteneciente a la familia de las Asteraceae! que crece en toda #uropa y se cultiva en diversos pases. La droga! incluida en la ?eal Farmacopea #spaJola! est" constituida por los captulos florales desecados que de en contener como mnimo N ml8Hg de aceite esencial! de color a%ul reci+n destilado. @ichos captulos poseen un recept"culo cnico! hueco0 flores tu ulosas amarillas y flores liguladas lancas. #n su composicin qumica destaca un aceite esencial que contiene numerosos sesquiterpenos entre ellos los llamados a%ulenos! como el chama%uleno! que se forma durante el proceso de destilacin a partir de la matricina (lactona sesquiterp+nica). 'resenta tam i+n TD isa olol y los $idos A y B del TD isa olol. Los captulos florales contienen adem"s muclago! "cidos fenlicos! taninos! cumarinas y flavonoides como la apigenina y su glucsido en O.

II. DESARROLLO EX ERI!EN"AL 2.1. E#$i%&'( )*+,-i*.,' / -,*0+i1&' $+i.i2*3&'

MATERIAL VEGETAL

'ara la recoleccin de datos se reali% la revisin de diferentes li ros! de ah se o tuvo los datos. 2 se reali% su marcha fitoqumica para compro ar la presencia de sus diferentes componentes de la semilla de (Schinus Molle) fue recolectada En la
provincia de arahuay . (Departamento de Lima provincia Canta), el 20 de octu re del 20!". La recolecci#n de planta se dieron en la temporada de la planta con lo cual lo recolectado fue apro$imado % &ilos de (molle).

2.2. !E"ODOLOGA 4 ROCEDI!IEN"O

Morfologa del Molle El Molle mide entre !0 y !' metros de alto. Su tronco puede tener un di(metro de unos !.' metros en la ase y es muy ramificado en la parte superior. Su corte)a es de color caf* claro, li+eramente +ris(ceo y su te$tura es un tanto (spera y a+rietada. En su ,uventud, el Molle a menudo tiene tendencias de crecer como un ar usto, entonces para lo+ra un porte de (r ol, es necesario la poda de formaci#n. El folla,e del Molle es perenne, denso y sus ramas son col+antes. Las ho,as son compuestas, lanceoladas, de m(r+enes lisos o aserrados, muy arom(ticas y miden entre !,' a - cm de lar+o. Las flores del Molle son pe.ue/as, hermafroditas o unise$uales, y est(n dispuestas en pan0culas alar+adas. Los frutos del Molle tienen un color rosado1ro,i)o muy llamativo, est(n a+rupados en racimos, poseen un mesocarpio de sa or dulce y contienen con una semilla dura y picante. Estas semillas son de color ne+ro, tienen la te$tura ru+osa, una forma redondeada y su tama/o var0a entre los " y ' mm de di(metro.
2.2.1. ES"UDIO 5O"6NICO

Cap0tulo .ue es un estudio ot(nico de la especie. Se relata el ori+en e historia del ve+etal, se efect2a su clasificaci#n sistem(tica, .ue se+2n En+ler pertenece al 3rden Sapindales, familia anacardiaceas, +*nero Schinus, y se es.uemati)a su distri uci#n +eo+r(fica en el pa0s.444.1. E$tracci#n con solventes vol(tiles, m*todo con el cual se e$tra,o una esencia de inferior calidad, car+ada de impure)as5 cuyo rendimiento fue de !" . Determinaci#n de al+unas constantes f0sico .u0micas.1 Se han determinado las si+uientes6 7ravedad espec0fica, 0,%-8". 9oder rotatorio,

2.2.1.1. U5ICACI7N DE LA !UES"RA

La planta en su tatilidad se u ic# en la parte sierra de lima , en la provincia de canta distrito :rahuay u icado a !2" ;m de lima apro$imadamente - horas en el lu+ar denominado el os.ue de arahuay.

2.2.1.2. RECOLECCI7N DE LA !UES"RA

9lanta ori+inaria de 9er2, .ue est( presente en climas c(lido, semic(lido,emiseco y templado desde los <00 hasta los "<00msnm 9eriodo a+osto diciem re (periodo caracter0stico de la planta)

2.2.1.3. CLASIFICACI7N "AXON7!ICA DE LA ES ECIE EN ES"UDIO

ndice de refraccin: Real Farmacopea Espaola, 2da. Edicin. Pag. 23. Densidad: Real Farmacopea Espaola, 2da. Edicin. Pag. 23. Espectro UV: !$$% & 2$$% ED! "EF # $$% #

2.2.2. ES"UDIO 8U!ICO

C(',(32-2() Q02'23a ?+)+ra97 -ar ohidratos los frutos contienen glucosa Acidos organicos:acidos isomasticadienonico isomasticadienalico Monoterpenos ,esquiterpenos Fenoles Fitosteroles

2.2.2.1.

RE ARACI7N DE LA !UES"RA

COSECHA MOLLE KM13 CANTA

ACOPIO DE TALLOS

TRANSPORTE DE LOS TALLOS

SELECCI#N DE LAS HO!AS

SEPARACIO N TALLO HO!A MACERADO DEL MATERIAL HO!A" TALLOS

FILTRADO DEL MACERADO

TRANSPORTE DEL MACERADO A LA ESTUFA

RECO!O DE LOS RESIDUOS

La muestra se prepar de acuerdo a los estndares establecidos por estudios bibliogrficos establecidos logrando una optimo resultado ptimo para las prcticas para realizar en adelnate

2.2.2.2. SOLU5ILIDAD

DESARROLLO +H,+r2'+)*a9 #$tracto hidroalcoholico de las ho4as del molle del e$tracto a ase de las ho4as de chirimoya se reali%o la prue a de solu ilidad que consiste en e$traer con ayuda de una agueta un poco de la muestra y se coloc en 1/ tu os de ensayo y en donde se le adiciono /!5 ml de los siguientes reactivos : agua ! metanol ! utanol! acetato de etilo ! cloroformo ! acetona ! nDhe$ano ! +ter de petrleo ! +ter etlico ("A5LA N 19 FUNDAMENTO

'os res(ltados o)tenido nos dio *(e el e+tracto t()o ma,or sol()ilidad con el reacti-o metanol ,a *(e el componente ma,oritario en el molle es el ag(a , tiene cantidades importantes de .idratos de car)ono como la gl(cosa o fr(ct(osa, al reali/ar la reaccin con el t()o sol()ilidad ,a *(e el metanol , el ag(a tienen propiedades seme0antes de)ido a *(e am)os tienen gr(pos .idro+ilo *(e p(eden formar p(ente de .idrgeno *(e permita la F$g% 1 asociacin entre las mol1c(las de alco.ol. 'os p(entes de .idrogeno se forman c(ando los o+2genos (nidos al .idrogeno en los alco.oles forman (niones entre s(s mol1c(las , las del ag(a , por lo tanto es misci)le 3sol()le en todas las proporciones4 en este sol-ente. 5g(almente el metanol es m(, )(en sol-ente de s(stancias polares
2.2.2.4. IDEN"IFICACI7N DE !E"A5OLI"OS SECUNDARIOS

"eta)olitos sec(ndarios presentes en 6c.in(s molle l. 7molle8. El est(dio fito*(2mico de 6c.in(s molle '. 7molle8 indica *(e contiene taninos, alcaloides, fla-onoides, saponinas esteroidales, esteroles, terpenos , aceite esencial. (Tabla. N2)

2.2.2.5. O5"ENCI7N DE FLA:ONOIDES

MI*(6( 6+ -82)(6a #n un tu o de prue a .ml del macerado de la semilla de la uva! adicionar tiras de magnesio m"s .ml de 7cl

O<-+r;a32@) #n la muestra ocurre una reaccin qumica la cual es violenta cuando se le adiciona el 7cl! formando as un cam io de coloracin amarillo tur io a ro4i%a en la muestra y desprendimiento de gas0 d"ndonos como resultado la presencia de flavonoides MI*(6( 6+ *r239(r0r( .Irr23(. #n un tu o de prue a .ml del macerado de la semilla de la uva y adicionas .ml de tricloruro f+rrico O<-+r;a32@) #n la muestra se o serva la formacin de una solucin color amarillenta oscura los cual nos indica la presencia de flavonoides
2.2.2.6. 12)E3C+43 ,E A(CA(1+,ES A %A$)+$ ,E %$1,5C)1S 3A)5$A(ES
Son di&ersos los m'todos empleados para obtener los alcaloides en forma pura de la planta ,ue los contiene, pues los compuestos poseen diferentes grados de solubilidad, pero en todos ellos se apro&echa su car)cter b)sico, algunas t'cnicas para e(traerlos son ()a-la 360.)

2.2.2.7. IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS

MP& METANOL ' (l S$)*e(a de )ol+e,*e)- 1%' (l a.% A./*$.o gla.$al 0 1(l ag2a 0 1(l ,0 32*a,ol Re+elador- Sol2.$4, de ,$,5$dr$,a 6%'17 e, 32*a,ol M2e)*ra1- *$ro)$,a & )er$,a & arg$,$,a M2e)*ra '- 8rol$,a & le2.$,a & *r$8*4fa,o M2e)*ra 3- (olle

FUNDAMENTO-

:l revelar con la soluci#n de ninhidrina .ue es un poderoso a+ente reactivo com2n para poder visuali)ar las andas de separaci#n de amino(cidos .ue reali)amos en la cromato+raf0a dio como resultado positivo ya .ue se determin# .ue la muestra .ue revelamos (molle) se pudo o servar las caracter0sticas del color y andas de separaci#n de los amino(cidos. =eacciona con todos los amino(cidos alfa cuyo p> se encuentra entre - y %, dando una coloraci#n .ue var0a de a)ul a violeta intenso. Este productocolorido (llamado p2rpura de =uhemann) se esta ili)a por resonancia, lacoloraci#n producida por la ninhidrina es independiente de la coloraci#n ori+inaldel amino(cidoEsta prue a es positiva tanto para prote0na como para amino(cidos. Ena.uellos casos donde no da positiva la prue a de iuret y da positivo la deninhidrina, indica .ue no hay prote0nas, pero si hay amino(cidos li res. >allamos los =f correspondientes6 9laca ? 0! leucina 3%' 3%1 9 6%:; 1%1 3%' 9 6%<;

Pla.a ' - e=*ra.*o ".! "." @0.<"

*r$8)$,a !.% "." @ 0.'-

2.2.2.8. PRUEBAS GENERALES PARA LACTONAS SESQUITERPNICAS Y LACTONAS INSATURADAS

A. Pruebas generales para lactonas sesquiterpnicas: 1. Ensayo con hidroxamato frrico: La muestra vegetal se disuelve en etanol, se aade solucin de clorhidrato de hidroxilamina y KO . La me!cla se calienta hasta "ue a#are!ca una es#uma de color ro$i!o. %e enfr&a y se acidula con 'l. %e aade cloruro frrico y se forma una coloracin violeta.

Solventes a utilizar empleado para la practica

Diluir en etanol su solvente lo cual acta muy bien con la muestra de molle

Color, lo cual nos dice que ha7 presencia de lactonas saturadas.

(. Ensayo de )al$et: Las ses"uiter#enlactonas #roducen coloraciones anaran$adas o ro$o oscuro cuando se tratan con dos soluciones "ue se me!clan en iguales vol*menes antes de usarse. %olucin +: 1g. ,e -cido #&crico en 1..mL de etanol/ solucin ): 1.g. ,e hidrxido de sodio en 1..mL de agua destilada.

3. Prueba de Tollens: Las lactonas , y , insaturadas reducen el reacti!o de Tollens "Ag#$3 %#a$& % A'oniaco( )or'ando un espe*o de plata. ). Ensayo #ara lactonas insaturadas: 1. Ensayo de Legal: Las ses"uiter#enlactonas con anillos lactona, 0,1 2 insaturados #roducen coloracin rosa cuando se disuelven en #iridina, se aade nitro#rusiato de sodio y un -lcali. +un"ue tam3ien las 1, 45 insaturadas dan coloracin si no se controla 3ien el # , ya "ue estos se isomeri!an. Las metilencetonas tam3in dan coloracin. (. Ensayo de Kedde: + la muestra disuelta en alcohol se aade -cido 6,7 dinitro3en!oico y KO , se #roducen coloraciones violetas o a!ules "ue desa#arecen des#us de una hora. La #rue3a tam3in la dan #ositiva los cardenalitos.

FUNDAMENTO

Pr0+<a- ?+)+ra9+- ,ara 9a3*()a- -+-/02*+r,I)23a-7 E)-a4( 3() 826r(Ha'a*( .Irr23(7 La muestra vegetal se disuelve en etanol! se aJade solucin de clorhidrato de hidro$ilamina y U:7. La me%cla se calienta hasta que apare%ca una espuma de color ro4i%o. ,e enfra y se acidula con 7-l. ,e aJade cloruro f+rrico y se forma una coloracin violeta #sta prue a la dan positiva en general todas las sustancias con funcionalidad +ster o lactona como p.e4. las cumarinas! y se asa en la formacin de un comple4o entre el "cido hidro$"mico formado y el cloruro f+rrico. 'or lo cual se o serv un color amarillo m"s aJo amarillo no cam io de color! lo cual nos dice que hay presencia de lactonas saturadas.

1) E)-a4( 6+ Ba9L+*7 Las sesquiterpenlactonas producen coloraciones anaran4adas o ro4o oscuro cuando se tratan con dos soluciones que se me%clan en iguales vol&menes antes de usarse. ,olucin A: 1g. @e "cido pcrico en 1//mL de etanol0 solucin B: 1/g. @e hidr$ido de sodio en 1//mL de agua destilada. %on el ensayo de Baijet las ses,uiterpenlactonas producen unas coloraciones naranjas o siempre y cuando se trate con picrato de sodio o potasio

B. E)-a4( ,ara 9a3*()a- 2)-a*0ra6a-7

1. E)-a4( 6+ L+?a97 Las sesquiterpenlactonas con anillos lactona! V!W R insaturados producen coloracin rosa cuando se disuelven en piridina! se aJade nitroprusiato de sodio y un "lcali. Aunque tam i+n las W! XD insaturadas dan coloracin si no se controla ien el p7! ya que estos se isomeri%an. Las metilencetonas tam i+n dan coloracin. La prue a tam i+n la dan positiva las lactonas !gDinsaturadas cuando no se controla el p7! ya que se isomeri%an en medio alcalino. La prue a tam i+n la dan positiva las metil+ncetonas.

.. E)-a4( 6+ K+66+7 A la muestra disuelta en alcohol se aJade "cido I!5 dinitro en%oico y U:7! se producen coloraciones violetas o a%ules que desaparecen despu+s de una hora.

Se producen coloraciones &ioletas o a-ules ,ue desaparecen despu's de una hora. Aa prueba tambi'n la dan positi&a los cardenlidos
,.,.,.9. cromatogrfico..04 .nlisis

888.

1(S>?@.D+S .33

(A!(1BM(#@.?(S... ..

5.%. Determinacin de S+?>/B?BD.D.......33 5.5. Bdentificacin de metabolitos secundarios.......... ....39 5.-. .nlisis cromatogrfico 89. DBSC>SBC# D( 1(S>?@.D+S............... .....43

9.

C+#C?>SB+#(S...................... .%&,

98. 1(C+M(#D.CB+#(S............... %&5 988. 1(;(1(#CB.S .%&/B/?B+D1E;BC.S................

9888. .#(A+S........................... %%5

NDICE DE FIGURAS
'"gina

Fig. N 1: Distribucin geogrfica de la familia Solanaceae....... 0 Fig. N 2: Distribucin geogrfica del gnero Cyphomandra... .. Fig. N 3: Mapa de las regiones naturales del !er". #i$eles de altitud en metros sobre el ni$el del mar..... .%& Fig. N 4' (structura electrnica del o)*geno molecular (+ ,). %Fig. N 5: .' un par de electrones del mismo orbital con giro opuesto y $ectores magnticos antiparalelos. /' un electrn no apareado... %0 Fig. N 6: 1esumen de los cambios 2ue puede sufrir el o)*geno molecular estable.. .%3 Fig. N 7: (strs .%4 o)idati$o.

Fig. N 8: Clasificacin .,5

de

los

antio)idantes.

Fig. N 9: Clasificacin de antio)idantes basada en el sitio de su mecanismo de accin.. .,Fig. N 10: Ciclo .., de 6aber78eiss. .

Fig. N 11: .terognesis y antio)idantes....5, Fig. N 12: (structura 2u*mica ..55 de la $itamina .. .

Fig. N 13: #structura qumica de la vitamina #. .. .5Fig. N 14: (structura 2u*mica de la $itamina C. .. .50

Fig. N 15: Molcula del isopreno. . .53 Fig. N 16: Clasificacin de los carotenoides. ...... .59 Fig. N 17: !ropiedades f*sico 2u*micas importantes de los carotenoides. ...-% Fig. N 18: :7 caroteno. .. ...-, Fig. N 19: ;unciones o acciones atribuidas a los carotenoides. ... ...-5 Fig. N 20: <=Caroteno.........--

NDICE DE TABLAS
'"gina
"A5LA N 1: Solubilidad "A5LA N 2: (structuras y caracter*sticas de los carotenos en los alimentos..... .5 "A5LA N 3: (structuras .-& y caracter*sticas de las )antfilas en los alimentos.....

"A5LA N 4: !rincipales fuentes en alimentos y acti$idad biolgica de los carotenoides.... ."A5LA N 5: Concentraciones de carotenoides en algunos frutos (ugF%&&g peso fresco).......-4 "A5LA N 6: Determinacin de minerales del fruto de Cyphomandra betacea (Ca$anilles) Sendnert G@omate de rbolH...... .33 "A5LA N 7: Determinacin de constituyentes bsicos del fruto de Cyphomandra betacea (Ca$anilles) Sendtner G@omate de rbolH.... .33

"A5LA N 8: Bdentificacin de metabolitos secundarios en el e)tracto hidroalcholico del fruto de Cyphomandra betacea (Ca$anilles) Sendtner G@omate de rbolH........................ ..39 "A5LA N 9: Bdentificacin de metabolitos secundarios en la fase de #I# = dimetilformamidaI obtenida de la e)traccin de carotenoides totales del fruto de Cyphomandra betacea (Ca$anilles) Sendtner G@omate de rbol...... .3 "A5LA N 10: !igmentos identificados en las bandas del cromatograma en luJ $isible y ultra$ioleta del e)tracto purificado del G@omate de rbolH (C@KDS!)..... .9& "A5LA N 17: 1esultados espectrales por espectrofotometr*a >L7 L para la cuantificacin de carotenoides totales antes de la saponificacin (C@K.S!) en el fruto de Cyphomandra betacea (Ca$anilles) SendtnerI G@omate de rbolH.. .4%

NDICE DE ANEJOS
'"gina
ANEXO N 1' (2uiposI materiales y reacti$os..%%5 ANEXO N 2: ;otos de e2uipos utiliJados.%%0 ANEXO N 3' Constancia de la clasificacin ta)onmica de la especie en estudio... %%9 ANEXO N 4: Determinacin de minerales... %% ANEXO N 5: !reparacin de reacti$os y ensayos de reconocimiento para metabolitos secundarios.%,ANEXO N 6: Bdentificacin de metabolitos secundarios.. ..%, ANEXO N 7: ;otos de la e)traccin de carotenoides..................%,4 ANEXO N 8: ;otos de la purificacin del e)tracto de carotenoides.......................................................%5% ANEXO N 9: ;otos del anlisis cromatogrfico.....................................................................................%5, ANEXO N 10: ;ase de #I#7dimetilformamida concentrada en rota$apor.............................................%5ANEXO N 11: M)imos de absorcin de ?ute*na patrn y :7caroteno patrn. %50

ANEXO N 12: M)imos de absorcin y coeficientes de e)tincin de carotenoides en acetona.%53 ANEXO N 13: Componentes principales de algunos frutosI por cada %&& g de porcin comestible.%59 ANEXO N 14: ;otos del fruto de Cyphomandra betacea (ca$anilles) SendtnerI G@omate de rbolH...%54

>NDICE DE TA?LAS REACTIVO Ag2a CARACTER>STICAS DE LA MUESTRA A8olar SOLU?LE &

E*a,ol Me*a,ol ?2*a,ol A.e*a*o de e*$lo Clorofor(o A.e*o,a ,0 5e=a,o A*er de 8e*r4leo A*er e*l$.o

Polar Polar Polar S2(a(e,*e Polar ?a@a 8olar$dad A8olar No 8olar A8olar A8olar

&&& &&&& &&& & & && && && &

TA?LA NB SOLU?ILIDAD DEL SCHINUS MOLLE

/E)A31( HCl 8 / Cianidinas Cam-io de color

/E)A31( HCl 7 calor leucoantocianidina s @ojo ,naranja, &ioleta

/E)A31( H9so: 8la&onas Amaillo,@ojo,guind a

/E)A31( / 7 HCl 8la&onoide s Amarillo rojo guinda

/E)A31( &cido 2rico anhidro 0ido(ifla&onas Baranja o rojo

TA?LA NB' IDENTIFICACION META?OLITOS SECUNDCRIOS

/.% M.P S382)0- M(99+ M.P S382)0- M(99+ M.P S382)0- M(99+

$eacti#o S82)(6a Tr239(r0r( 6+ 82+rr( C9(r0r( 6+ a90'2)2(

Coloracin R(L( (-30r( Par6( Par6(

$esultado M : :

TA?LA NB 3 IDENTIFICACION DE FLAVONOIDES

M0+-*ra M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+

R+a3*2;( B(038ara9a* S())+-38+2)

PP (-30r( C(9(r )+?r( ,9('2-(

RESULTADO P(-2*2;( N+?a*2;(

M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+

P(,(. B+r*ra)6 Dra)?0+)6(r. Ma4+r:;a9-+r

C(9(r 'arr@) (-30r( C(9(r )ara)La (-30r( )ara)La ,ar6( )ara)La ,ar6(

N+?a*2;( N+?a*2;( P(-2*2;( P(-2*2;(

TAB A N ! "#S$ TAD%S D# &ND#T&&'A'&%N D# A 'A %&D#S

MUESTRA M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+

REACTIVO 7idro$imato ferrico Balget Bollens

COLORACIN transparente <aran4a claro formacin espe4o de plata a%ul 8morado

RESULTADO Y Y Y

TA?LA NB1 IDENTIFICACION DE LACTONAS DENTRO DE LA MUESTRA SCHINUS MOLLE

MUESTRA M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+

REVELADO CON CROMATOGRAFA 're revelado ;> 'ost revelado

COLORACIN >isi lemente lanco

R+-09*a6( Y Y Y

=nflorescencia regular <aran4a 8 amarillo claro

TA+LA #, - ./01LTA2$0 10A#2$ SOLVENTES7 CLOROFORMO $:ACETATO DE ETILO $ REVELADO7 DRANGUEDORF CROMATOGRAFA 're revelado ;> 'ost revelado COLORACIN Ligeramente lanco inflorescencia Amarillo <aran4a IDENTIFICACIN Y RESULTADO Y Y Flavonas =soflavonas Zantonas @ihidroflavonas 'or el color naran4a Y Y D Y

MUESTRA M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99

REVELADOR >apores de amoniaco >apores de amoniaco >apores de amoniaco

M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+

Bricloruro de hierro Bricloruro de aluminio Bricloruro de aluminio Bricloruro de aluminio

'ost revelado 're revelado ;> 'ost revelado

'ardo naran4a (inferior) Ligeramente lanco inflorescencia <aran4a

TA?LA NB D RESULTADOS DE IDENTIFIACACION DE FLAVONAS ISOFLAVONAS Ba'ar299(C OTROS TIPOS DE FLAVONAS B)ara)LaC

MP M.P SCHINUS M(99+ M.P SCHINUS M(99+

REACTIVO E.LEGAL E. KEDDE

COLORACION MN: MM

RESULTADO ROSADO

TA?LA NBE LACTONAS INSATURADAS

INDICE DE GRAFICOS

Fig. N 1 Composicin qumica de la madera de Schinus molle L. y proceso de

pulpeo kraft. Rev. Mex. In . !um "online#. $%%&' vol.(' n.$' pp. )*+,)*-. ISS. )//+,$(0&

Fig. N 12 oe, 6op.ie D. 39::;4, !merica<s

first c(isines, Uni-ersit, of =e+as Press, pp. 9>%#9>?, 56@A $&2:2&?99B:&C

Fig. N 3 ;++%:<<,=.>i?i%,3i*.&-g<>i?i<S0;i=$'@)&.. ,

Fig.N 4 ;++%:<<+i,=3*..*A&B;,1,*.0&)<A00161<'0;i=$'@)&..,@C*.'&@%i),=+,-&

Fig.N5 http'FFMMM.fao.orgFdocrepFfieldF&&5Fab-4,sFab-4,s&,.htm CLASE EJEMPLOS M()(-a3=r26(*lucosa! fructosa! galactosa D2-a3=r26(,acarosa! lactosa! maltosa P(92(9+=somaltol! maltitol! sor itol! $ilitol! eritritol O92?(-a3=r26(Fructooligosac"ridos! maltooligosac"ridos P(92-a3=r26(- *2,( a9'26@) Amilosa! amilopectina! maltode$trinas P(92-a3=r26(- )( -+'+La)*+- -elulosa! pectinas! a9 a9'26@) B.2<ra a92'+)*232aC hemicelulosas! gomas! inulina Fig.6

Revista mexicana de ingeniera qumica

1ersin impresa ISSN 1665-2738

Fig.77 http'FFMMM.diccionariodel$ino.comFinde).phpFfla$onoidesF

"i .< 7lustracin S<= =lustracin [\ A?AB=- 1D #structura de la epartna