Laboratorio UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN Microbiologia

IDENTIFICACIN DE HONGOS
OBJETIVOS identificar los hongos segn su gnero y estudiar su morfologa. Determinar los gneros de hongos ms frecuentes presentes en el medio ambiente.

FUNDAMENTO TEORICO Los hongos son microorganismo eucariota de mayor tamao y complejidad que las bacterias. Segn su morfologa los hongos se pueden dividir en dos grupos: mohos (hongos filamentosos) y levaduras. Las levaduras son unicelulares y generalmente presentan reproduccin asexual por gemacin. Los mohos presentan una estructura vegetativa denominada micelio, el cual est formado por una serie de tubos rgidos ramificados, dentro de los cuales se encuentra el citoplasma multinucleado. Estos tubos reciben el nombre de hifas. De esta forma a partir de una espora en germinacin se desarrolla una hifa, esta se ramifica y forma un micelio. El crecimiento del hongo se prolonga hasta que los nutrientes desaparezcan. Las hifas pueden ser de dos tipos: vegetativas que penetran el substrato con el fin de Absorber nutrientes e hifas areas que son las portadoras de las estructuras reproductoras. La clasificacin de los hongos se hace segn las caractersticas de las hifas, la formacin de esporas asexuales, las estructuras que contienen stas y la capacidad de producir esporas sexuales. Estructura general de los hongos Las hifas son elementos filamentosos cilndricos caractersticos de la mayora de los hongos. Estn constituidos por una fila de clulas alargadas envueltas por la pared celular que, reunidas, forman el micelio. Las hifas pueden ser de dos tipos. Hifas no septada: tambin llamadas hifas cenocticas que se caracterizan por la ausencia de tabiques que separan las clulas. Hifas septadas: Presentan tabiques que separan cada una de las clulas. Levaduras Hongo unicelular Redondo o elipsoidal que se reproduce por gemacin o fisin binaria. La gemacin es la protrusin externa de parte del protoplasma materno (gema o yema), que va creciendo progresivamente, hasta que se desprende produciendo un nuevo individuo. Cada uno de estos elementos se denomina blastosporo y a este tipo de divisin blastosprica. La clula progenitora queda con las cicatrices de las distintas gemaciones. Es frecuente que exista el fenmeno del "dimorfismo". Esto es, que una levadura forma parte de la evolucin morfolgica de un hongo filamentoso y al revs. Una levadura que fuese capaz de producir hifas, sera un hongo dimrfico. Las colonias que crecen en un sustrato pueden ser cremosas o mucoides, lisas o plegadas, limitadas circulares, blancas o rojas. Caractersticas generales Las levaduras se clasifican en base a sus caracteres morfolgicos, aunque para algunos

Laboratorio UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN Microbiologia microbilogos, sus propiedades fisiolgicas tienen mayor importancia. La mayora de las levaduras son hongos unicelulares sencillos microscpicos, la mayora se reproducen asexualmente por gemacin, y otras especies lo hacen por fisin mltiple. Las levaduras que pueden reproducirse sexualmente se conocen como verdaderas, este proceso implica la formacin de ascosporas, sirviendo la propia levadura como asca, de aqu que ellas se clasifican como Ascomicetos; por el contrario las falsas que no producen ascosporas, pertenecen a los hongos imperfectos. Caractersticas morfolgicas Los caracteres morfolgicos de las levaduras se determinan mediante su observacin microscpica. Adems, los criterios morfolgicos se basan en el modo de reproduccin vegetativa de la morfologa celular, de la formacin de pseudomicelio y de micelio. La forma de la levadura puede ser desde esfrica a ovoide, en forma de limn, piriforme, cilndrica, triangular, e incluso alargada formando un verdadero micelio o un falso micelio. Tambin se diferencan en cuanto a su tamao, miden de 110 um ancho por 2-3 um de longitud. Son partes observables de su estructura, la pared celular, el citoplasma, las vacuolas, los glbulos de grasa, y los grnulos, los cuales pueden ser metacromticos, de albmina o de almidn. Para poder observar el ncleo es preciso utilizar tinciones especiales. La estructura celular es de tipo eucaritico, pero sin sistema fotosinttico. La pared rgida, se caracteriza por la presencia, en su composicin, de dos polisacridos: manano y glucano. Algunas levaduras producen una cpsula constituida por fosfomanos. El ncleo est rodeado de una membrana que persiste durante la divisin celular. El nmero de cromosomas es variable de unas a otras. Las levaduras en ningn caso son mviles. Principales hongos alergnicos: Altermaria Prenicilium Cladosporium Mucor Aspergillus Rhizopus Aspergillus

Orden de caracteres para la identificacin en hongos: Aspecto macroscpico de la colonia Tipo de hifa Colocacin del o los esporforos Presencia de esterigmatas (esporangiforo o conidiforo) y el orden que presentan Forma tamao y distribucin de las esporas Presencia o no de rizoides. Slo se presentan en hongos de hifa no septada. Por ejemplo: Rihizopus, Rhizomucor, Absidia Practicar pruebas de identificacin bioqumica. I. MATERIALES Y EQUIPOS

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Microscopio compuesto con leche de inmersin. Porta-objetos Cubre-objetos Aguja de inoculacin o estilete. Lugol (liquido de montaje). Pequea cantidad de alimento atacada por hongos en bolsas de plstico. Muestra Rbano Aj Cebolla Habas Tomate Naranja Zapallo Pan Limn Apio

II.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 1. una parte del hongo (micelio, esporas) y colocarlo sobre un porta objeto Tomar limpio y desengrasado en el que se ha colocado una gota de liquido de montaje, dispersar o extender el micelio con la ayuda de una aguja y la punta del cubreobjetos, luego colocar el cubreobjetos sobre el material extendido. Observar con los lentes de inmersin 2. Cuando el hongo presenta mucho micelio areo o desarrollo superficial fino, o para estudiar las estructuras esporuladas utilizar un pedazo de cinta adhesiva que se presiona sobre el micelio, colocar la cinta con el micelio adherido en forma invertida sobre una gota de Lugol, aadir otra gota sobre la cinta y colocar el cubreobjetos. Observar con lente de inmersin.

3. Micro cultivo mtodo de Riddell Colocar en el centro de un portaobjeto estril un pequeo block de Agar (6x6x2) y en cada uno de los 4 lados sembrar el hongo en examen. Colocar el cubreobjetos estril sobre el Agar y el portaobjeto as preparado, colocar en una cmara hmeda: placa de Petri estril con papel filtro humedecido y dos varillas

Laboratorio UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN Microbiologia de vidrio para colocar el portaobjetos .incluir a temperatura ambiente por 3 a 4 das. o Fructificacin. Si es esporangio, su tamao, color forma de hifa. Si est dispuesto en conidia, si es uno o ms conidias, conidiforo, forma y arreglo del esterigma, arreglo de la conidia. Estructura especial y localizacin: estolones, rizoides, colemula, apfisis, clamidospora, etc. III. CONCLUSIONES Los hongos pueden ser de dos tipos: mohos y levaduras. Las hifas pueden ser: septadas o no septadas. Sabouraud Glucosa do Agar, medio utilizado para el cultivo de levaduras. Tres gneros principales de dermatofitos: Microsporum, Trichophyton y Epidermophyton.

IV.

BIBLIOGRAFIA es.scribd.com/.../manual-para-la-identificacin-de-hongo www.asociacionvallisoletanademicologia.com/elmundodeloshongos/. .