FACULTAD DE CIENCIAS INSTITUTO DE QUMICA CARRERA DE BIOQUMICA LABORATORIO BIOQUMICA CELULAR (BQA145) SEGUNDO SEMESTRE 2013 J.P. E.S.

Trabajo prctico N 2 Los lpidos como componentes de la membrana celular. Introduccin

Los lpidos son biomolculas orgnicas formadas bsicamente por carbono e hidrgeno y generalmente tambin oxgeno; aunque en porcentajes mucho ms bajos. En algunos casos, estos pueden contener tambin fsforo, nitrgeno y azufre. La caracterstica principal de los lpidos es el hecho de ser hidrofbicos o insolubles en agua y s en solventes orgnicos como la bencina, el benceno y el cloroformo. Los lpidos cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la de reserva energtica (triglicridos), la estructural (fosfolpidos de las bicapas) y la reguladora (esteroides). Los Lpidos tambin funcionan para el desarrollo del cerebro, el metabolismo y el crecimiento. Caractersticas Principales Una caracterstica bsica de los lpidos, y de la que derivan sus principales propiedades biolgicas es la hidrofobicidad. La baja solubilidad de los lpidos se debe a que su estructura qumica es fundamentalmente hidrocarbonada (aliftica, alicclica o aromtica), con gran cantidad de enlaces C-H y C-C. La naturaleza de estos enlaces es 100% covalente y su momento dipolar es mnimo. El agua, al ser una molcula muy polar, con gran facilidad para formar puentes de hidrgeno, no es capaz de interaccionar con estas molculas. En presencia de molculas lipdicas, el agua adopta en torno a ellas una estructura muy ordenada que maximiza las interacciones entre las propias molculas de agua, forzando a la molcula hidrofbica al interior de una estructura en forma de jaula, que tambin reduce la movilidad del lpido. Todo ello supone una configuracin de baja entropa, que resulta energticamente desfavorable. Esta disminucin de entropa es mnima si las molculas lipdicas se agregan entre s, e interaccionan mediante fuerzas de corto alcance, como las fuerzas de Van der Waals. Este fenmeno recibe el nombre de efecto hidrofbico.Constituyentes importantes de la alimentacin (aceites, manteca, yema de huevo), representan una importante fuente de energa y de almacenamiento, funcionan como aislantes trmicos, componentes estructurales de membranas biolgicas, son precursores de hormonas (sexuales, corticales), cidos biliares, vitaminas etc. Clasificacin Los lpidos son molculas orgnicas solubles en alta proporcin en disolventes no polares como, cloroformo, tetracloruro de carbono o benceno. En otras palabras, si una muestra de tejido animal o vegetal se coloca en un recipiente que contiene un solvente no polar y se tritura, los compuestos que se disuelven en el solvente no polar se clasifican como

lpidos. Estos disolventes se usan para extraer lpidos de las sales, protenas, carbohidratos y cidos nucleicos. Clasificacin de los lpidos: Por su Polaridad Lpidos No Polares: Son aquellos con pocos o ningn enlace polar. Son ejemplos las grasas y aceites, las ceras y ciertos esteroides. Lpidos Polares: Tienen enlaces tanto polares como no polares, lo cual permite una solubilidad limitada en disolventes polares y no polares. Son ejemplos los fosfo- y esfingo-lpidos. Clasificacin 2: Por Hidrlisis Lpidos Saponificables: Son aquellos que pueden sufrir hidrlisis en presencia de una base como NaOH. Las grasas, aceites y ceras, asi como los fosfo- y esfingo-lpidos, son saponificables. Lpidos No Saponificables: No se hidrolizan en presencia de base. Casi todos los esteroides son no saponificables. Clasificacin 3: Por su Estructura Lpidos Simples: Tienen estructuras relativamente poco complejas y no se pueden descomponer por procesos qumicos o se pueden descomponer en un numero limitado de compuestos sencillos. Son ejemplos las grasas, esteroides y aceites. Lpidos Complejos: Son aquellos con variantes en sus estructuras; se pueden descomponer en varios compuestos sencillos. Ejemplo, los fosfolpidos. Propiedades Qumicas de los Lpidos Hidrlisis bsica o saponificacin Los lpidos pueden ser hidrolizados fcilmente por una base fuerte en un fenmeno llamado saponificacin, que consiste en la hidrlisis de los triacilgliceroles puede efectuarse por varios procedimientos, los ms comunes utilizan lcalis o enzimas llamadas lipasas. La hidrlisis alcalina recibe el nombre de saponificacin, debido a que uno de los productos de hidrlisis es un jabn de sales de sodio (cuando se usa NaOH) de los cidos grasos. Propiedades Fsicas de los Lpidos Carcter anfiptico Ya que el cido graso esta formado por un grupo carboxilo y una cadena hidrocarbonada, esta ltima es la que posee la caracterstica hidrfoba; por lo cual es responsable de su

insolubilidad en agua. El carcter anfiptico es tanto mayor cuanto menor es la longitud de la cadena hidrocarbonada. La solubilidad en agua decrece a medida que aumenta la longitud de la cadena. Punto de fusin Es una propiedad que depende del numero de carbonos que existe en la cadena hidrocarbonada y del numero de enlaces dobles que aparecen en la cadena. Si vemos dos cidos grasos saturados, a mayor numero de carbonos mayor numero de enlaces Van der. Wals hay que romper y por lo tanto el gasto de energa es mayor y provoca un alto punto de fusin. Sin embargo, los enlaces Van der Wals son escasos por lo que la energa necesaria para romperlos ser menor, disminuyendo as el punto de fusin.

Trabajo prctico El objetivo de ste laboratorio es identificar a modo general, la presencia de lpidos mediante tincin, pruebas de solubilidad y reacciones qumicas de hidrlisis. Materiales Tubos de ensayo Pipetas pasteur Bao mara Goteros H2SO4 Aceite vegetal Manteca Agua destilada Reactivo sudan III Solucin de NaOH Cloroformo HCl Hexano
PROCEDIMIENTO 1) Solubilidad. a) Coloque en un tubo15 gotas de aceite y 30 gotas de agua. b) En otro tubo de ensayo coloque 15 gotas de aceite y 30 gotas de hexano. c) Agite los tubos, deje reposar unos minutos y observe que sucede. d) repita la experiencia para la manteca agregando una pequea cantidad (0,5 cm2).

Reactivo sudn III

2) Tincin: Reaccin con el Sudn III. a) Coloque 15 gotas de aceite en un tubo de ensayo. b) Aada 15 gotas de Sudn III y mezcle. c) Deje reposar 10 minutos y observe que sucede.

3) Saponificacin 1. a) Coloque 30 gotas de aceite en un tubo de ensayo. b) Agregue 30 gotas de la solucin de NaOH c) Caliente en bao Mara durante 20 minutos. Deje enfriar y observe que sucede.

4) Saponificacin 2. a) Coloque en un tubo de ensayo una cantidad pequea de manteca (0.5 cm2). b) Agregue 20 gotas de la solucin de NaOH. c) Caliente en bao Mara durante 1 minuto. d) Agregue 10 mL de agua. e) Caliente nuevamente en bao Mara durante 10 minutos. f) Deje enfriar y coloque cuidadosamente por la pared del tubo 4 gotas de HCl. g) Observe y anote que sucede.

5) Reconocimiento de colesterol: Prueba de Salkowsky. a) Disuelva una pequea muestra de manteca (punta de esptula) en 2 mL de cloroformo. b) Agregue 2 mL de H2SO4 lentamente por la pared del tubo, NO AGITE EL TUBO. c) Observe la aparicin de un anillo color pardo entre las dos fases formadas.

RESULTADOS Y DISCUSIN En no ms de media plana conteste las siguientes preguntas: 1. Explique en trminos fiscoqumicos el comportamiento del aceite y la manteca en el agua y en hexano. 2. Cules son los fundamentos, en trminos de interacciones qumicas, de la tincin con sudn III? Qu tiene que decir acerca de su estructura? 3. Describa la reaccin qumica de saponificacin de un triglicrido cualquiera que reacciona con NaOH. 4. Cules son los fundamentos de la prueba de Salkowski?