Fecundacin in vitro

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La fecundacin in vitro (FIV o IVF por sus siglas en ingls) es una tcnica por la cual la fecundacin de los ovocitos por losespermatozoides se realiza fuera del cuerpo de la madre. La FIV es el principal tratamiento para la esterilidad cuando otros mtodos de reproduccin asistida no han tenido xito. El proceso implica el control hormonal del proceso ovulatorio, extrayendo uno o variosovocitos de los ovarios maternos, para permitir que sean fecundados por espermatozoides en un medio lquido. El ovocito fecundado (que algunos denominan como preembrin) puede entonces ser transferido al tero de la mujer, en vistas a que anide en el tero y contine su desarrollo hasta el parto.

ndice
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1 "In vitro" 2 Indicaciones 3 Mtodo

o o o o o o o o

3.1 Estimulacin ovrica 3.2 Extraccin de ovocitos 3.3 Fecundacin 3.4 Cultivo de embriones 3.5 Laboratorio de FIV 3.6 Seleccin 3.7 Evaluacin de la calidad embrionaria 3.8 Transferencia de embriones

4 Tasas de xito 5 Complicaciones 6 Defectos en los bebs 7 Criopreservacin

o o o

7.1 Criopreservacin de embriones 7.2 Criopreservacin de ovocitos 7.3 Criopreservacin del tejido ovrico

8 Intervenciones asociadas

o o o o o o

8.1 ICSI 8.2 Inyeccin intra citoplasmtica de espermatozoides morfolgicamente seleccionados (IMSI) 8.3 Eclosin Asistida (Assisted Hatching) 8.4 Transferencia intrafalopiana de cigotos 8.5 TGIF 8.6 DGP

9 Historia 10 Vase tambin 11 Referencias 12 Enlaces externos

"In vitro"[editar editar cdigo]

Artculo principal: In vitro

El trmino in vitro es un trmino en latn que significa en cristal. Se utiliza porque en los primeros experimentos biolgicos en los que se realizaban cultivos de tejidos fuera de los organismos vivos de los cuales procedan, se realizaban en contenedores de cristal, tales como tubos de ensayo, probetas o placas de Petri. En la actualidad, el trmino in vitro se refiere a cualquier procedimiento biolgico que se realiza fuera del organismo en el que tendra lugar normalmente, para distinguirlo de un experimento in vivo donde el tejido permanece dentro del organismo vivo en el que normalmente se encuentra. Coloquialmente, a los bebs concebidos a travs de FIV se les denomina bebs probeta, refirindose a contenedores de cristal o plstico denominados probetas, que se utilizan frecuentemente en los laboratorios de qumica y biologa. Sin embargo, normalmente la fecundacin in vitro se realiza en placas planas denominadasplacas de Petri; las placas de Petri utilizadas ms a menudo estn producidas en plstico, sin embargo, el nombre FIV sigue conservndose.

Indicaciones[editar editar cdigo]

Inicialmente la FIV se desarroll para superar situaciones de infertilidad debidos a problemas en las trompas de Falopio, pero posteriormente se observ que la tcnica tena xito tambin en otros casos de infertilidad. La introduccin de la inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides (ICSI) soluciona en gran medida los problemas de infertilidad masculina. Para que un tratamiento de FIV tenga xito, es necesario disponer de ovocitos sanos, espermatozoides que puedan fecundarlos y untero que pueda mantener un embarazo. Aunque en algunos pases los tratamientos de FIV estn cubiertos por los servicios sanitarios sociales, normalmente se recurre a esta tcnica cuando otras opciones han fallado, debido a que la FIV conlleva costos elevados.

La FIV puede utilizarse tambin en mujeres menopusicas, utilizando ovocitos procedentes de una donante. Asimismo es una tcnica que puede considerarse en pacientes que han sufrido una prdida total o parcial de fecundidad debido a un tratamiento agresivo frente a una patologa grave (como el cncer).

Mtodo[editar editar cdigo]

Estimulacin ovrica[editar editar cdigo]
Generalmente la fecundacin in vitro es iniciada en el tercer da de la menstruacin y consiste de un rgimen de medicacin para estimular el desarrollo de folculos mltiples en los ovarios. En la mayora de las pacientes se emplean inyecciones de gonadotropinas(generalmente anlogos de la FSH), realizando controles frecuentes de los niveles de estradiol, y del crecimiento folicular medianteultrasonografa ginecolgica. Normalmente se necesitan 10 das de inyecciones. La ovulacin espontnea durante el ciclo se previene por el uso de agonistas GnRH (aGnRH) o antagonistas GnRH (agGnRH), que bloquean el surgimiento natural de la hormona luteinizante (LH). Ambas generan, en otras palabras, lo que se conoce como un hipogonadismo hipogonadotrofo reversible. Sin embargo, los agonistas de la GnRH se diferencian de los antagonistas principalmente porque su efecto no es inmediato, sino que desencadenan en primera instancia un pico de FSH y LH (efecto flare-up), producindose un bloqueo posterior en la liberacin de gonadotropinas por el desacople de los receptores de GnRH de la cascada de activacin. Sin embargo, existen diferentes protocolos de estimulacin que varan en el da de inicio, medicamentos empleados y mtodos para prevenir e inducir el pico de la hormona luteinizante (LH). Bsicamente, si en el laboratorio el equipo se decanta por un tratamiento con aGnRH, se pueden escoger entre un protocolo corto y uno largo:

- Protocolo largo: los agonistas de la GnRH se suministran a la paciente varios das antes del nuevo ciclo y durante la administracin de las gonadotropinas exgenas. Entre sus mltiples ventajas destaca que, con l, se asegura la no liberacin prematura de LH, lo que garantiza la invalidacin de toda ovulacin precoz. A su vez, este hecho permite al embrilogo planificar sin margen de error la fecha de la captacin folicular. Por otra parte, se asegura que el desarrollo de los folculos se sincronice. Desgraciadamente, con la aplicacin de este protocolo, la probabilidad de que se produzca un sndrome de hiperestimulacin ovrica (SHO) se multiplica, y se requiere un soporte de fase ltea (administracin de progesterona), as como una mayor cantidad de gonadotropinas. - Protocolo corto: los agonistas de la GnRH comienzan a suministrarse en los primeros das del ciclo, casi al mismo tiempo que las gonadotropinas exgenas. La principal virtud de este procedimiento es que consigue mejores resultados en mujeres con baja respuesta, aunque este hecho an no ha sido completamente demostrado. Por contra, la aplicacin de este protocolo multiplica el riesgo de que se produzcan picos de LH (induciendo entonces una ovulacin precoz) y

no posibilita un desarrollo sincrnico de los folculos. En definitiva, se establece control sobre el desarrollo folicular mucho menor.

Por otra parte, cuando se emplean antagonistas de la GnRH, slo se establece un protocolo, en el cual se administra la sustancia bloqueante varios das despus del inicio del ciclo, al mismo tiempo que se suministran gonadotropinas recombinantes o purificadas de la orina. Los protocolos de estimulacin ovrica se han convertido en complejos y costosos. Por esto, parece haber una tendencia a nivel mundial dirigida a reducir la cantidad y la dosis de los medicamentos empleados durante la estimulacin con el fin de reducir los riesgos y costos asociados a estos tratamientos [7]. Ejemplo de estos esfuerzos son los tratamientos FIV con Ciclos Naturales, adems de los protocolos FIV con mnima estimulacin desarrollados por los doctores John Zhang en NY [8], el Dr. O. Kato en Tokyo [9], y el Dr. Chvez-Badiola en Mxico [10].

Extraccin de ovocitos[editar editar cdigo]

Artculo principal: Extraccin transvaginal de ovocitos

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Cuando se considera que la maduracin de los folculos es adecuada, se administra a la paciente gonadotropina corinica humana (-hCG) o algn agonista de la GnRH. La primera acta como un anlogo de la hormona luteinizante (LH); mientras que la segunda induce un disparo de la propia hormona luteinizante (LH). En cualquiera de los casos, el medicamento provocar la ovulacin alrededor de 36 horas despus de la inyeccin, pero el procedimiento de extraccin tiene lugar justo antes de que esto ocurra. La extraccin de los ovocitos se programa unas 36 horas despus de la induccin de la ovulacin y se realiza por va transvaginal, utilizando una aguja guiada por ultrasonido, que pincha la pared vaginal para alcanzar los ovarios. Un mdico aspira los folculos ayudado por un ecgrafo y recoge el lquido folicular en unos tubos que sern introducidos a un termobloque hasta que pasen al laboratorio. El lquido folicular es un fluido amarillento y seroso que contiene linfocitos y clulas de la granulosa aisladas o formando cmulos con o sin ovocitos. A medida que se punciona el ovario el lquido folicular se vuelve de color rojo (hemtico) debido a la hemorragia provocada por la puncin. La sangre es txica para el ovocito pues contiene muchos anticuerpos, por lo que una vez que se termine la puncin habr que eliminarla. Este paso se realiza en el laboratorio, donde se procesa el lquido de la puncin con el objetivo de recuperar los ovocitos contenidos en el lquido; de esta manera se obtendrn los ovocitos, se har un lavado de los mismos y se clasificarn segn su morfologa. Estos tres pasos se tienen que realizar en el menor tiempo posible para evitar el efecto

de la temperatura, a la que los ovocitos son muy sensibles, y el dao producido por el lquido hemtico.

Temperatura: el ovocito es el elemento ms sensible a la temperatura de todo el laboratorio. Si sta bajo de 34 C el huso meitico despolimerizar, y cuando se vuelva a forma puede crear anomalas cromosmicas, de forma que el ovocito ser fecundable pero no dar lugar a un embrin normal.

Se deben aislar los complejos cmulo-corona-ovocitos que se llegan a observar a simple vista (varios mm de dimetro).

Medios: durante este proceso se emplean diferentes medios de cultivo con diferente composicin:

En los tubos: 0,1ml de medio tamponado (HEPES) con heparina para evitar la formacin de cogulos.

El medio HEPES (que debe estar desde el da anterior a ser utilizado en una estufa a 37 C) acumular temporalmente los cmulos mientras se realiza la puncin. Adems ser empleado para lavar y reducir el tamao de los cmulos antes de pasar al incubador.

Placas de cultivo: con un medio simple rico en glucosa (por ejemplo HTF + HSA 10 mg/ml) para mantenerlos en el incubador al 5% dixido de carbono. El medio debe estar desde el da anterior a ser utilizado en el incubador a 37 C y 5% de dixido de corbono.

Las punciones se programan normalmente cada 30 minutos aunque la bsqueda de los ovocitos no suele durar ms de 15 minutos. En estos procesos se utiliza anestesia local, general o parcial para evitar el dolor producido por la puncin. Existen 3 estadios de maduracin en los cmulos que se extraen por puncin folicular, a saber: - Grado I (Maduracin nuclear MII): El cmulo y la corona del ovocito presentan un aspecto expandido. Es el estado en el cual el ovocito presenta una mayor maduracin y slo los de este tipo son los que se utilizan en tcnicas de reproduccin asistida ms refinadas, como el ICSI. - Grado III (Maduracin nuclear VG): El ovocito destaca por la gran compactacin del cmulo, el cual cuenta con pocas clulas, muy fijadas a la zona pelcida (ZP). - Grado II (Maduracin nuclear MI): El ovocito presenta un aspecto intermedio entre los dos estadios anteriores. Esta clasificacin trata de describir el ovocito y su estado de madurancin nuclear estando rodeado de clulas del cmulo y la corona.

Morfologa: para observar bien el ovocito habra que colocarlo en muy poca cantidad de medio para esparcir las clulas de granulosa. De forma que la ventaja de saber el estado madurativo no parta ningn beneficio frente a la manipulacin que representa el poder conocerlo.

Es por ello que actualmente esta clasificacin no tiene gran relevancia y no debe drsele mayor importancia, salvo para indicar caractersticas que se salgan especialmente de lo considerado como normalidad: cmulos o coronas de aspecto apopttico o postmaduro, presencia de sangre...

Fecundacin[editar editar cdigo]

Vase tambin: Donacin de esperma

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Una vez en el laboratorio, los complejos cmulo corona ovocito extrados se lavan en medio HEPES para mantener el pH, recortando las clulas de la granulosa que los rodean y preparndolos para la fecundacin. Los ovocitos deben permanecer al menos 4 horas en el incubador (medio simple rico en glucosa) hasta su inseminacin, es decir, aproximadamente 40 horas tras la induccin de la ovulacin que sera el momento de la ovulacin espontnea. Al mismo tiempo, el semen se prepara para la fecundacin, eliminando las clulas inactivas, el fluido seminal y se realiza su capacitado. Los parmetros adecuados de semen capacitado para realizar FIV son: 5-10 millones de espermatozoides por mililitro, ms de 75% de espermatozoides mviles progresivos y ms de 1% de formas normales. Si la muestra seminal posee valores inferiores a los anteriores, se recurre a ICSI en lugar de FIV. Si el semen proviene de un donante, probablemente habr sido preparado antes de ser congelado y puesto en cuarentena, y cuando sea descongelado estar listo para usar. Existen distintos protocolos de FIV pero todos se basan en el mismo principio: el esperma y el ovocito se incuban juntos (en un ratio de aproximadamente 75.000:1) en un medio de cultivo simple con glucosa durante unas 18 horas. Concentraciones superiores de espermatozoides pueden producir fecundaciones anmalas (poliespermia) y una menor concentracin de espermatozoides puede producir fallos de fecundacin. Trascurrido 16-18 horas se comprueba la fecundacin, que ya debera haber ocurrido. Como los ovocitos se fecundan en los primeros 20 minutos de exposicin. Hay autores que a la media hora lavan los ovocitos para evitar la exposicin a ROS, que pude formarse por la presencia de espermatozoides muertos. El cigoto humano de 15 a 20 horas tras la concepcin permanece en el estadio de proncleos (PN). Se considera que la fecundacin es correcta cuando el cigoto presenta dos PN y dos corpsculos (CP). A veces es difcil interpretar los CP y se valoran como correctamente fecundado cualquier embrin con dos PN. Cualquier otra combinacin se considera anormal y se descarta. La mayora de las veces aparece primero el PN paterno en la posicin central y el materno se acerca ms tarde. Para poder valorar correctamente la fecundacin, es necesario decumular previamente el cigoto. Es

importante que en FIV no se decumule el ovocito antes de la fecundacin, ya que conlleva alta probabilidad de polispermia. El vulo fecundado se pasa a un medio de cultivo simple (como HTF/HSA) o secuencial (G1 de Vitrolife) y se mantiene durante alrededor de 48h hasta que alcanza el estadio de 6-8 clulas.

Embrin de 8 clulas listo para ser transferido.

Hay estudios realizados que demuestran que la liofilizacin del esperma de ratn permite el desarrollo de embriones normales tras la inyeccin de ovocitos.

Cultivo de embriones[editar editar cdigo]

Una vez el vulo ha sido fecundado y se ha obtenido un cigoto, ste es cultivado para promover su divisin celular y crecimiento para dar lugar a un embrin. Este cultivo dura entre 2 y 5 das, y es muy importante que se lleve a cabo en las condiciones ptimas para el embrin, ya que de ello depender su calidad y la tasa de implantacin del mismo cuando sea transferido a un tero. Para que el crecimiento del embrin se lleve a cabo en las mejores condiciones posibles se utilizan distintos tipos de medio de cultivo: Medios simples: de composicin sencilla y fciles de preparar. La composicin de estos medios se determina a partir de la composicin terica del lquido de la trompa (medios HTF o P1) o de la composicin de medios de cultivo para el desarrollo de cigotos de ratn (medios KSOM, Earle, M16 y T6), y suelen suplementarse con suero materno o albmina srica humana (HSA). Son ptimos para el crecimiento inicial del embrin (hasta los 3 das de cultivo). A partir del da cuatro no garantizan el desarrollo ptimo debido al comienzo de la transcripcin activa del embrin, para lo que se requieren sustancias que estos medios no contienen. Los embriones suelen ser cultivados durante 3 das antes de su implantacin, periodo tras el cual alcanzaran un estadio de 6-8 clulas. Ello permite que el embrilogo pueda monitorizar su tasa de divisin celular y la activacin de genes, para asegurarse de que el embrin sea viable y de que se implantar adecuadamente. Tan slo se adelantar el momento de la implantacin, normalmente a los dos das de cultivo, cuando la pareja

sometida a FIV cuente con pocos embriones disponibles para ser transferidos o cuando los embriones se desarrollen con lentitud. Medios complejos: su composicin es ms compleja, incluye vitaminas, aminocidos, metales, suero,... Son medios comerciales que han sido diseados para el cultivo de clulas somticas en cultivo, como el medio Ham F10, de modo que aunque mejoran el desarrollo embrionario hasta blastocisto (da 5) en comparacin con los medios simples, no estn optimizados para el cultivo de embriones. Tras cinco das de cultivo el embrin alcanza el estadio de blastocisto, en el que est compuesto por 12-16 clulas y posee una alta tasa de implantacin. Suelen cultivarse hasta este estadio cuando previamente se han dado abortos o fallos de implantacin en la paciente. Medios secuenciales: tienen en cuenta el hecho de que el embrin atraviesa distintos ambientes desde que es fecundado en la trompa de Falopio hasta que alcanza el tero. Los medios secuenciales se componen de tres tipos de medios: un medio para la preparacin de los gametos (medio simple), otro para el desarrollo hasta el da 3 (medio G1) y un tercero para alcanzar la fase de blastocisto (medio G2). Estos medios s estn optimizados para el desarrollo de los embriones hasta blastocisto pero son ms sensibles a la temperatura, y por lo tanto ms inestables. Aparte de esto, tambin es muy importante controlar las condiciones de temperatura, luz y pH. En algunos casos en reproduccin asistida se opta por mantener el embrin en cultivo hasta da 5 o 6 en lugar de transferirlo en da 3. El cultivo largo presenta algunas ventajas como seleccionar mejor al embrin o aumentar la tasa de implantacin. Aunque tambin existen algunos inconvenientes como el alto riesgo de bloqueo embrionario. As, se observan una serie de cambios continuos en el embrin que se clasifican en estadios:

Mrula (M): embrin de ms de 12 clulas sin compactar del todo. Presente en da 4. Mrula compacta (MC): en da 4 5. Es un embrin con 16 clulas o ms pero en el que ya no se distinguen las clulas entre s, ni se diferencia el blastocele o clulas del trofoectodermo.

Blastocisto temprano: embrin en da 4 5 en el que se distinguen las clulas planas del trofoectodermo en la superficie del embrin y una cavidad menor del 50% del volumen del embrin.

Blastocisto cavitado: es el estadio tpico de da 5. Se distingue claramente el trofoectodermo y un blastocele que ocupa al menos la mitad del interior del embrin. El dimetro del embrin sigue siendo en torno a 140 micras. No siempre de distingue la masa celular interna.

Blastocisto expandido: se aprecia en da 5 6. Se distingue el trofoectodermo, el blastocele y la masa celular interna. El dimetro es mayor de 150 micras y la zona pelcida se afina.

Blastocisto inicando eclposin (BHi): es un blastocisto expandido en el que se distingue una hernia por donde est comenzando la eclosin.

Blastocisto eclosionado (BH): es un blastocisto totalmente fuera de la zona pelcida, con un dimetro normalmente mayor de 300 micras, ms del doble que en el estadio anterior. Es el estadio ms tardo que se puede mantener in vitro.

La morfologa de la masa celular interna y del trofoectodermo se usa como criterio de calidad del embrin. Para llevar a cabo el cultivo largo de embriones se usan medios secuenciales o el cocultivo sobre monocapa de clulas endometriales. Es el estadio ms tardo del embrin que se puede mantener in vitro. [11]

Laboratorio de FIV[editar editar cdigo]

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No existe un consenso sobre cmo debe ser un laboratorio destinado a la fecundacin in vitro. Sera apropiado que fuese una sala blanca con control absoluto de todos los parmetros y con el menor nmero posible de superficies horizontales, pero actualmente no es as debido a su alto coste. Aun as, es necesario controlar ciertos parmetros, pues aunque los embriones son fuertes y robustos, su tasa de implantacin se ve influida por las condiciones ambientales. Los parmetros ms habituales controlados en un laboratorio de FIV son: -Temperatura: los incubadores deben estar a 37 C, por lo que hay que mantenerlos siempre encendidos y evitar que las condiciones externas varen, pues el incubador tender a equilibrarse con stas; para ello ser necesario mantener encendido el termostato del laboratorio (condiciones externas) 24 horas con una temperatura estable de unos 21-24 C (consenso con el personal para ver cmo estn ms cmodos). -Partculas: habra que colocar filtros HEPA en la cabina de flujo laminar, en la climatizacin y en la salida del laboratorio para evitar la presencia de partculas (inertes o contaminantes) en el ambiente. Se considera que el ambiente es estril cuando hay menos de 100 partculas/m3 (Clase 100). -VOCs: deben reducirse al mnimo los compuestos orgnicos voltiles (VOCs), ya que podran tener efectos embriotxicos (dainos para los embriones). Algunos VOCs no son filtrables por mtodos normales, y por tanto hay que emplear filtros de carbn activo con distintas concentraciones de permanganato potsico en la entrada de cualquier gas en el laboratorio. Es necesario recalcar que estos filtros tiene una vida limitada por su capacidad de absorcin, por lo que hay que cambiarlos peridicamente.

-Presin positiva: el laboratorio de FIV debe estar ligeramente presurizado, es decir, la presin del interior debe ser mayor que la exterior, de forma que cuando se abran las puertas slo saldr el aire del interior (de una limpieza extrema), evitndose as que entre aire sucio del exterior. Al ser el aire del interior del laboratorio tan limpio, suele haber sistemas de recircularizacin. Existen tambin otros parmetros que pueden ser controlados, aunque no son tan importantes como los anteriores: -Luz: por precaucin los laboratorios de FIV suelen trabajar a bajas intensidades lumnicas, pues existen embriones que son extremadamente sensibles a la luz, como son los de hmster o conejo; sin embargo, no est demostrado que los embriones humanos tambin sean sensibles a ella. -Humedad relativa (HR): no influye directamente al trabajo, pero s al crecimiento de hongos. Al ser muy caro su control, slo los laboratorios que realmente lo necesitan (HR>90%) tienen climatizadores para ello. Por confort, la HR debera estar alrededor del 50%. En cuanto al diseo y la distribucin, estos dos parmetros influyen bastante en las tasas de xito del laboratorio. Los materiales empleados para el suelo, las paredes y el techo deben ser siempre nobles (acero inoxidable, linleo, cermica, etc.), y se debe evitar la presencia de superficies horizontales (para que no se acumule suciedad). Asimismo, debe procurarse tener una esclusa de entrada separada del resto de habitculos: la sala principal (con la zona quirrgica, incubadora y de micromanipulacin distribuidas), el laboratorio de criopreservacin, el laboratorio de preparacin, el laboratorio de androloga y el laboratorio de DPI. El equipamiento de un laboratorio destinado a la reproduccin, debe constar de una cabina de flujo laminar, un microscopio invertido con 400 aumentos y contraste de fase modular sobre una mesa antivibratoria y un incubador temporal.

Seleccin[editar editar cdigo]

Criterios de calidad embrionaria segn ASEBIR en das 2 y 3

Los laboratorios especializados en FIV han desarrollado mtodos de puntuacin para juzgar la calidad de los ovocitos y los embriones. Tpicamente, los expertos examinan la simetra del embrin, la integridad estructural de sus clulas y el crecimiento general entre dos y cinco das tras la fecundacin. Ahora los cientficos estn empezando a analizar no slo el embrin, sino tambin el medio en el que crece. Algunos centros estn utilizando anlisis qumicos y frmulas matemticas para crear una "huella metablica" de un embrin sano, que podra utilizarse como barmetro para estimar el potencial de supervivencia de un embrin. Otros estn intentando analizar las protenas secretadas por los embriones y a medir la cantidad de oxgeno consumido, que es una seal habitual de crecimiento.1 Normalmente, los embriones que han alcanzado el estadio de 6-8 clulas se transfieren 3 das despus de la extraccin. En ocasiones, sin embargo, los embriones se mantienen en cultivo por un periodo ms largo (unos 6 das), y la transferencia se realiza en el estadio de blastocisto, sobre todo si se observan muchos embriones de 3 das de buena calidad. Pero nunca superando los 14 das tras la fecundacin. Las transferencias en estadio de blastocisto muestran mejores tasas de embarazo.2 La Asociacin para el Estudio de la Biologa Reproductiva (ASEBIR) especific en 2007 una clasificacin con las que evaluar los embriones antes de su transferencia, basndose en los resultados obtenidos de estudios realizados en centros de reproduccin nacionales y en la literatura cientfica publicada. En base a ellas, las cuatro categoras que se establecen son:

Categora A: ptimos. Son los que tienen un desarrollo correcto y ninguna caracterstica de mal pronstico, por lo que sern siempre transferidos o criopreservados. En pacientes de buen pronstico (mujeres de menos de 36 aos y ninguna patologa adversa o en receptoras de ovocitos) los embriones tipo A suelen tener un 4060% de posibilidades de implantar.

Categora B: Buenos. Son embriones de buena calidad con elevada capacidad de implantacin. Lo habitual es que tengan entre un 20 y un 40% de probabilidad de implantacin.

Categora C: Subptimos. Son los embriones que presentan una serie de caractersticas que si bien van asociados a una menor

viabilidad no son completamente descartables y sern transferidos si no se dispone de otro con mejor morfologa, por eso tambin son conocidos como embriones acompaantes. Suelen tener algo menos de la mitad de posibilidades de implantar (1-20%) aunque siempre depender del tipo y extensin de las anomalas morfolgicas que presentan.

Categora D: No viables. Tienen una capacidad de implantacin del 1% o menos, incluso 0,1%. Incluyen tanto los embriones evolutivos in vitro, cuyas caractersticas estn relacionadas con una falta de potencial implantatorio, como los que estn bloqueados. No son transferidos prcticamente en ningn caso.

Evaluacin de la calidad embrionaria[editar editar

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El objetivo de la fecundacin in vitro es seleccionar y transferir un buen embrin para ello se siguen los Criterios de Valoracin Morfolgicos de Oocitos, Embriones tempranos y Blastocitos Humanos recogidos en el consenso ASEBIR. Este consenso se ha establecido estudiando caractersticas morfolgicas de los embriones y determinando su capacidad de implantacin. De esta manera, los parmetros morfolgicos que ayudan a determinar la calidad embrionaria son los siguientes: nmero de clulas, velocidad de divisin, fragmentacin, tamao y simetra de las blastmeras, multinucleacin, aspecto del citplasma y zona pelcida. Estudiando todos estos parmetros podemos determinar la calidad del embrin

Nmero de clulas: El nmero de clulas es uno de los parmetros ms importantes. El nmero de clulas ptimo en da 2 es de cuatro clulas y en da 3 es de siete u ocho clulas. Generalmente, los embriones que se encuentran dentro de estos lmites son clasificados como embriones tipo A. Los embriones que presentan entre seis y diez clulas pueden ser viables y son embriones tipo B. Los embriones con cinco clulas o ms de 10 se consideran embriones tipo C. No obstante, embriones que presentan un elevado

nmero de clulas en da 2 y da 3 pueden tener una elevada probabilidad de presentar alteraciones cromosmicas tales como aneuploidas o blastmeras multinucleadas. El potencial de implantacin de estos embriones es muy bajo por lo que se consideran embriones tipo D. Por otro lado, embriones con un bajo nmero de clulas en da 2 y da 3 se consideran bloqueados y su capacidad de implantacin es muy baja (tipo D). En la siguiente tabla se observa la calidad del embrin en funcin del nmero de clulas en da 2 y 3:

Grupo de calidad

Nmero de Clulas en da Nmero de Clulas en da 2 3

7-8

2-5

7 o ms

9 o ms

2-5

7 o ms

2-4

8 o ms

6 o ms

7 o ms

Cualquier valor

Cualquier nmero

5 o menos

Velocidad de divisin: La velocidad de divisin es otros de los parmetros ms importantes. La velocidad de divisin normal es la que se observa en un embrin que dobla su nmero de clulas en 24 horas de da 2 a da 3 y es un pronstico de viabilidad. Una velocidad mayor est asociada a anomalas cromosmicas, por lo

que la calidad del embrin es mnima. Por otro lado una velocidad menor est relacionada con el bloqueo embrionario. Un embrin se considera bloqueado cuando no incrementa su nmero de clulas despus de un periodo de 24 h. Este tipo de embriones tambin presenta una tasa de implantacin muy baja porque se considera embrin no viable. El bloqueo cromosmico podra estar originado por anomalas cromosmicas del embrin o por condiciones de laboratorio no apropiadas.

Fragmentacin: El tercer parmetro en importancia es la fragmentacin. La fragmentacin consiste en la generacin de porciones de citoplasma rodeadas por membrana sin ncleo. Las causas de aparicin de fragmentos no se conocen, se estima que pueda ser una consecuencia de las condiciones del medio de cultivo o bien una propiedad inherente del desarrollo embrionario.El tamao del fragmento, el nmero y la localizacin son elementos relativamente importantes. El tamao del fragmento se estima como un porcentaje del total del embrin. Tamaos relativamente pequeos no estn asociados con un deterioro de la capacidad de implantacin, mientras que a medida que se incrementa el tamao disminuye la calidad del embrin. Los embriones con un porcentaje de fragmentacin inferior a 11% son considerados de tipo A; entre 11-25% se consideran embriones tipo B; entre 26-35% son embriones tipo C; cuando el porcentaje de fragmentacin es mayor al 35% nos encontramos ante embriones tipo D. El nmero de fragmentos tambin es un factor importante, generalmente la presencia de fragmentos aislados no daa la capacidad de implantacin del embrin, mientras que la presencia de numerosos fragmentos puede tener un efecto perjudicial sobre la calidad del embrin.

Tamao celular y simetra: El tamao celular se considera normal cuando el tamao de todas las blastmeras es similar, aunque generalmente existe una ligera asimetra en los embriones. La presencia de una asimetra elevada, con clulas que difieren entre s un 20% del volumen total, puede considerarse de mal pronstico, reducindose la calidad del embrin hasta embrin tipo C.

Multinucleacin:La multinucleacin, es decir, presencia de uno o ms ncleos en el interior de una clula puede estar originada por un error en la divisin celular, fragmentacin del ncleo o una

migracin incorrecta de los cromosomas durante la anafase. Los embriones pueden mostrar blastmeras multinucleadas tanto en ensayos in vitro como in vivo. La ausencia de multinucleacin se correlaciona con una elevada tasa de implantacin y viceversa. De esta manera, la presencia de blastmeras multinucleadas en da 2 se asocia con baja capacidad de implantacin (embriones tipo D); la presencia de blastmeras multinucleadas en da 2 y da 3 se correlaciona con embriones subptimos (tipo C); y por ltimo, la aparicin de multinucleacin en da 3 no afecta tanto a la capacidad implantatoria. La existencia de blastmeras multinucleadas est relacionada con embriones mosaicos y aneuploides.

Aspecto del citoplasma: En el aspecto del citoplasma podemos evaluar distintos parmetros como la presencia de vesiculacin, de vacuolas y de anillos acitoplasmticos. Generalmente durante los primeros das de desarrollo el citoplasma presenta un aspecto claro, mientras que en el tercer da tiene lugar la activacin del genoma embrionario, apareciendo vesculas que originan un aspecto granulado. Este cambio determina el correcto desarrollo del embrin pero presenta una gran relevancia para distinguir la capacidad implantatoria de un embrin. Por otra parte, la aparicin de vacuolas y la contraccin del citoplasma se correlacionan con la degeneracin y lisis del embrin. Por lo que los embriones que presentan estas alteraciones en ms de dos blastmeras se consideran anormales (tipo D). Generalmente se prolonga el cultivo de estos embriones hasta blastocito para observar su evolucin.

Zona pelcida: La zona pelcida es una capa de 15 a 20 m de espesor que rodea y protege al ovocito maduro. La presencia de anomalas estructurales o funcionales en las glicoprotenas que forman la zona pelcida puede originar problemas como la disminucin de la viabilidad embrionaria y el descenso de la capacidad de implantacin. El grosor de la zona pelcida es determinante tanto para la viabilidad del embrin, como en su capacidad de eclosionar. As si la zona pelcida es delgada, el embrin puede eclosionar fcilmente, aumentndose la capacidad de implantacin. Por el contrario, si la zona pelcida es muy gruesa o presenta tabiques se dificulta la eclosin y la implantacin del embrin.

Transferencia de embriones[editar editar cdigo]

Artculo principal: Transferencia de embriones

Los embriones se puntan por el embrilogo segn el nmero de clulas, la paridad del crecimiento, el grado de fragmentacin, el estado del citoplasma... Normalmente, para mejorar las posibilidades de implantacin y embarazo, se transfieren varios embriones simultneamente. El nmero de embriones que se transfieren depende del nmero disponible, la edad de la mujer, consideraciones diagnsticas y limitaciones legales (en algunos pases, el nmero mximo se limita a dos o a tres, en Espaa se pueden transferir un mximo de 3 embriones). Los embriones que se consideran "mejores" se transfieren al tero de la mujer a travs de una cnula de plstico muy fino, que se introduce a travs de la vagina y el crvix y se controla mediante su visualizacin por ultrasonidos o ecoguiada. La cnula puede ser flexible, lo cual resulta ms cara pero es el ms recomendable ya que reduce el dao al introducirse por la vagina hasta llegar al tero. O cnula rgida, ms barata pero menos eficaz. Hay que tener cuidado con estimular el tero al realizar la transferencia. Si se punza el tero con la cnula puede dar lugar a contracciones del tero, perjudiciales para la implantacin del embrin tras la transferencia. Por lo tanto no son recomendadas la utilizacin de la pinzas Pozzi o cualquier instrumento que punce o agreda el cuello del tero ya que provoca contracciones perjudiciales para el embarazo. Para disminuir el riesgo de contracciones se le administra a la mujer receptora de los embriones progesterona, que es una hormona que relaja el msculo liso y evita las contracciones.

Blastocisto listo para ser transferido.

Tasas de xito[editar editar cdigo]

En EE.UU. la tasa de nacidos vivos va FIV es alrededor del 27% por ciclo (con una tasa de embarazo del 33%), pero las posibilidades de xito varan mucho dependiendo de la edad de la mujer (o ms concretamente, de la edad de los ovocitos que se utilizan).[12] Cuando se utilizan los propios ovocitos de la mujer (y no de donante), para mujeres por debajo de los 35 aos la tasa de embarazo es alrededor de 43% por ciclo (36,5% de nacidos vivos), mientras que para mujeres por encima de 40 la tasa cae drsticamente, hasta slo un 4% para mujeres por encima de 42 aos.[13] Otros factores que determinan la tasa de xito incluyen la calidad de los ovocitos y los espermatozoides, la salud del tero y la experiencia de la clnica. Normalmente se transfieren varios embriones simultneamente, para mejorar la tasa de xito, lo que tiene como contrapartida el riesgo de embarazo mltiple. Una tcnica reciente consiste en sumergir un embrin en un cultivo de nutrientes durante 5 das hasta que alcanza el estadio deblastocisto. Los mdicos determinan entonces qu embriones son los que tienen ms posibilidades de desarrollarse. Los de mejor calidad se transfieren al tero de la mujer. De esta manera es posible mejorar la tasa de embarazo sin aumentar el riesgo de embarazo mltiple. Esta es una tcnica relativamente nueva y est en fase de experimentacin. Las clnicas con programas de FIV generalmente publican sus tasas de embarazo. Sin embargo, es difcil hacer comparaciones entre clnicas, debido a que los resultados son la consecuencia de muchas variables. Adems, los resultados tambin dependen mucho del tipo de pacientes seleccionados. Hay muchas razones por las cuales puede no conseguirse un embarazo despus de un tratamiento de FIV y transferencia de embriones, entre las cuales se incluyen:

El momento de la ovulacin puede haberse interpretado mal, o tal vez no se pueda predecir, o puede que no ocurra.

Los intentos de obtener ovocitos que se desarrollen durante el ciclo controlado pueden no tener xito.

Los ovocitos obtenidos pueden ser anormales o pueden haber sido daados durante la extraccin.

Tal vez no se pueda disponer de una muestra de semen adecuada.

La fecundacin de los ovocitos para generar embriones puede no ocurrir.

La divisin celular de los ovocitos fecundados puede no tener lugar. El embrin puede que no se desarrolle normalmente. Puede que la implantacin no tenga lugar. Fallos con los equipos, infecciones o errores humanos u otros factores imprevistos e incontrolables, que pueden resultar en prdida o dao de los ovocitos, de la muestra de semen o de los embriones3

De acuerdo con un estudio sueco del ao 2005 publicado en la revista de Oxford "Human Reproduction",4 166 mujeres fueron controladas comenzando un mes antes de sus ciclos de FIV, y los resultados no mostraron correlacin significativa entre los resultados de la FIV y el estrs psicolgico. El estudio conclua con la recomendacin a las clnicas de que si se informaba a los pacientes de FIV de los resultados de dicho estudio, podra ser posible reducir el estrs experimentado durante el protocolo de tratamiento. Aunque tal vez el estrs psicolgico experimentado durante un ciclo puede no afectar al resultado de la FIV, es posible que la experiencia de la FIV pueda resultar en estrs que aumente las probabilidades de depresin. Slo las consecuencias econmicas de la FIV (si se recurre a una clnica privada) pueden generar ansiedad y resultar abrumadoras. Sin embargo, para muchas parejas la alternativa es la infertilidad, y la experiencia de la infertilidad en s misma tambin puede causar estrs y depresin.

Complicaciones[editar editar cdigo]

La mayor complicacin de la FIV es el riesgo de embarazo mltiple.[14] Este est relacionado directamente con la prctica de transferir embriones mltiples para aumentar la tasa de embarazo. Los embarazos mltiples estn relacionados con un incremento en el riesgo de aborto, complicaciones obsttricas, nacimiento prematuro y morbilidad neonatal con la posibilidad de dao a largo plazo. En muchos pases existen lmites estrictos al nmero mximo de embriones que pueden transferirse, para reducir el riesgo de embarazo mltiple (trillizos o ms). Tambin puede ocurrir una divisin espontnea del embrin en el tero (como en un embarazo natural), pero ste es un caso raro, que genera gemelos idnticos. Un estudio clnico randomizado doble ciego sigui los embarazos tras FIV que generaron 73 bebs (33 nios y 40 nias) y

concluy que el 8.7% de los bebs nicos y el 54.2% de los gemelos tenan un peso al nacer < 2500 gr.5 En ciclos donde se transfieren dos embriones la probabilidad de tener un embarazo gemelar es del 6%. En ciclos donde se transfieren tres embriones la probabilidad de tener un embarazo gemelar es del 12% y de tener un embarazo triple es del 3%. Otro riesgo de la estimulacin ovrica es el desarrollo del sndrome de hiperestimulacin ovrica, con un riesgo para la paciente inferior al 1%. Si el problema de infertilidad subyacente est relacionado con anormalidades en la espermatognesis, es posible que la descendencia masculina tenga mayor riesgo de presentar el mismo problema.

Defectos en los bebs[editar editar cdigo]

El tema de la presencia de defectos asociados a la tcnica de FIV permanece controvertido. La mayora de los estudios muestran que no existe un incremento significativo tras una FIV, mientras que otros no apoyan este hecho.6 Algunos investigadores consideran que manipular gametos y embriones fuera del cuerpo podra estimular la aparicin de cambios genticos (mutaciones) que se pueden manifestar como defectos congnitos en el nacimiento.7 Aunque no hay evidencia gentica que apoye esta idea, algunos estudios epidemiolgicos sugieren una posible conexin entre la reproduccin asistida y sndromes genticos poco frecuentes en recin nacidos, como el sndrome de Beckwith-Wiedemann, que se caracteriza por nacimiento prematuro, lengua ms grande de lo normal y mayor susceptibilidad a tumores y defectos respiratorios y oratorios.8 Este sndrome es raro: afecta slo a 1 de cada 12.000 recin nacidos en todo el mundo, pero algunos estudios sugieren que es ms frecuente en nios nacidos con tcnicas de reproduccin asistida.9 10 Sin embargo, el riesgo absoluto de tener un beb que presente el sndrome de Beckwith-Wiedemann es bajo, por lo que los expertos encuentran difcil aconsejar a una pareja con problemas de fertilidad no seguir adelante con las tcnicas de reproduccin asistida. Algunos investigadores sugieren que tal vez podran reducirse los riesgos potenciales si se evitan ciertos procedimientos invasivos cuando no sean estrictamente necesarios, como las biopsias de embriones implantados, el cultivo de embriones en el laboratorio por periodos superiores al

mnimo necesario y el uso de ICSI en ausencia de problemas de fertilidad masculina.

Criopreservacin[editar editar cdigo]

Artculo principal: Criopreservacin

Criopreservacin de embriones[editar editar

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Cuando se generan embriones mltiples tras la FIV, los pacientes pueden elegir congelar los embriones que no se transfieren al tero de la mujer. Esos embriones se mantienen en nitrgeno lquido congelados hasta un mximo de 5 aos. Segn se public en 2006, en EE.UU. haba cerca de 500.000 embriones congelados.[15] La ventaja es que los pacientes que no consiguen concebir tras el primer ciclo pueden reintentarlo utilizando los embriones congelados, sin tener que realizar de nuevo un ciclo de FIV completo: slo tendran que realizar la transferencia de dichos embriones, sin pasar de nuevo por la estimulacin, la extraccin y la fecundacin. O, en el caso de pacientes que consiguen un embarazo, pueden mantenerlos para un segundo embarazo posterior. Los embriones restantes procecentes de FIV pueden donarse a otras mujeres o parejas para reproduccin o para investigar con ellos. Existen diferentes tcnicas para criopreservar (congelar) embriones, cada una con diferentes posibilidades de lograr la supervivencia. En la actualidad el mtodo ms efectivo es la vitrificacin (supervivencia de hasta 98%) [16], lo que a su vez ser refleja en una posibilidad de hasta el 50% de embarazo con embriones congelados, segn reportes en la literatura mdica [17]. Si, a pesar de todo, siguen existiendo embriones criopreservados que, por el tiempo transcurrido o por otras razones, no vayan a utilizarse para su implantacin, las dos alternativas posibles (que normalmente estn reguladas por leyes estrictas) son la donacin para la investigacin y la destruccin. En el caso de donacin de embriones para investigacin, sta se debe llevarse a cabo en centros acreditados y en base a proyectos autorizados por las autoridades correspondientes. Normalmente, se establecen plazos postfecundacin para la investigacin en los embriones y, una vez terminada la investigacin, no se permite llevar a cabo una transferencia embrionaria con ellos. La

investigacin con embriones procedentes de FIV ha permitido hasta el momento la realizacin de estudios en clulas madre, de gran importancia en la comprensin del desarrollo embrionario y en el avance de las terapias regenerativas de tejidos. En cuanto a la destruccin de los embriones congelados, se considera como ltima alternativa, a peticin explcita de los progenitores, o bien cuando no los quieran para ellos y no hayan autorizado la donacin a otras parejas ni la investigacin en ellos. Tanto la utilizacin de embriones para fines de investigacin como su destruccin generan extensos debates ticos entre partidarios y oponentes, que se traducen en leyes que limitan las posibilidades existentes, muy variables dependiendo de los pases.

Criopreservacin de ovocitos[editar editar cdigo]

La criopreservacin de ovocitos maduros sin fertilizar ha sido llevada a cabo con xito, por ejemplo en mujeres que tienen alta probabilidad de perder sus reservas de ovocitos debido a que deben ser sometidas a un proceso de quimioterapia.11

Criopreservacin del tejido ovrico[editar editar

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La criopreservacin del tejido ovrico interesa a las mujeres que quieren preservar su funcin reproductora ms all del lmite natural, o cuya capacidad reproductiva est amenazada por una terapia agresiva contra el cncer, por ejemplo.12 13 La investigacin en este terreno es prometedora.

Intervenciones asociadas[editar editar cdigo]

Existen algunas variaciones o mejoras de la FIV, tales como ICSI, IMSI, ZIFT, GIFT y PGD.

Inyeccin de un ovocito durante una ICSI.

ICSI[editar editar cdigo]

Artculo principal: Inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides

La inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides (ICSI) es un desarrollo reciente asociada a la FIV que permite inyectar directamente un espermatozoide en el citoplasma del ovocito utilizando tcnicas demicromanipulacin. Se utiliza cuando los espermatozoides tienen dificultades para penetrar en el ovocito, y en ese caso se puede utilizar esperma del compaero o de donante. La ICSI tambin se utiliza cuando el recuento de espermatozoides es muy bajo.

Inyeccin intra citoplasmtica de espermatozoides morfolgicamente seleccionados (IMSI)[editar editar cdigo]

Artculo principal: Inyeccin intra citoplasmtica de espermatozoides

morfolgicamente seleccionados La IMSI o Inyeccin intra citoplasmtica de espermatozoides morfolgicamente seleccionados (del ingls: Intracytoplasmic morphologically-selected sperm injection) es una tcnica de fecundacin in vitro (FIV). Consiste en realizar una seleccin morfolgica de los espermatozoides antes de inyectarlos en los ovocitos. Se selecciona un espermatozoide utilizando un microscopio invertido con una magnificacin de ms de 6000 veces su tamao con el fin de observar con ms precisin la composicin de la cabeza de los espermatozoides, detectando posibles anomalas de las vacuolas o los daos de la cadena de ADN de los espermatozoides y escogiendo solo los que no presentan anomalas para proceder a la fertilizacin con los ovocitos.

Eclosin Asistida (Assisted Hatching)[editar editar

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Antes de la transferencia, los embriones estn envueltos por una capa de glicoproteinas y, para lograr un embarazo, los embriones deben romper y salir de esta envoltura antes de implantarse. Est envuelta se llama zona pelcida y la eclosin asistida (assisted hatching) consiste en realizar un orificio en esta zona para facilitar el proceso de eclosin del embrin y as aumentar la tasa de implantacin. La eclosin asistida(tambin llamada AHA) es una tcnica que se lleva utilizando desde los aos 80, cuando se vio que los embriones de PZD (diseccin parcial de la zona pelcida)efectivamente parecan tener una tasa de implantacin ms alta que los embriones normales. Este mtodo se puede realizar cualquier da de desarrollo, aunque normalmente se suele hacer en el tercero. Existen diferentes formas de hacer Eclosin Asistida, ya sea por el mtodo qumico, mecnico o con lser. Este ltimo es el que ha ganado ms popularidad por sus buenos resultados. Mtodo qumico: consiste en introducir cido de Tyroide, que es una solucin salina tamponada con un pH de 2,5 (con un margen de error de 0,3), en una pipeta de AHA. Al embrin, por otra parte, se le tiene sujetado con una micropioeta de sujecin y en una solucin de 20 microlitros de HEPES. Se acerca la pipeta con la solucin de Tyrode y se libera en las cercanas del embrin. La zona pelcida se va degradando, ya que al ser un pH tan bajo, se desnaturalizan las protenas que la forman, dando lugar a un orificio en esa zona.Una vez formado, se aspira con la pipeta esta solucin para que no afecte al interior del embrin, y alejamos al embrin de esta zona. La ventaja de este mtodo es que es econmico y los extremos son suaves. Los inconvenientes que tiene este mtodo son: el embrin se expone a una solucin cida incrementando el riesgo de dao de este y, adems, la apertura es permanente con lo que puede ser perjudicial por afectar al medio interno del embrin. Mtodo mecnico: este mtodo se realiza en 20 microlitros de medio con HEPES y consiste en fijar con una pipeta de sujecin el embrin, por otra parte se toma una pipeta (PZD) con la que se atraviesa tangencialmente la zona pelcida. Una vez atravesado el embrin, se suelta y se rasga la zona contra la pipeta de sujecin. En este caso como resultado final obtenemos un ojal que se mantiene cerrado y por el cual despus el embrin le ser fcil salir e implantar. El ojal puede tener unas dimensiones de 50 micras aproximadamente. Las ventajas que tiene este

mtodo son: que el embrin est ms protegido por el efecto que hace el ojal, es ms natural que los dems mtodos y adems es ms barato. En cambio su inconveniente es: que es difcil de aprender, adems de laborioso. Mtodo fsico(lser): este mtodo se realiza en un medio con HEPES en donde se encuentra el embrin. El lser de diodo infrarrojo (1,48 micras) se apunta y dispara, a travs del objetivo, cerca de donde se encuentra el embrin. Se puede variar el tiempo de accin del lser (0,1 a 50 ms). El lser calienta localmente el agua, y al aumentar la temperatura hace que las protenas que constituyen la zona pelcida cercanas al lser se desnaturalicen y as se origine un orificio. La forma del orificio del lser es un ojal abierto siempre mayor al que se ve en el plano del microscopio. La ventaja de este mtodo es que es muy rpido adems de reproducible, en cambio sus desventajas son: es muy caro, se expone al embrin a un riesgo como es el propio lser, y la abertura es permanente adems de que es ms grande de lo que parece y esto como hemos dicho antes puede afectar al embrin. Hay que decir que esta tcnica solo ofrece ventajas en los siguientes casos: -mujeres mayores de 37 aos. -Fallo de gestacin tras FIV/ICSI. y otras indicaciones propuestas pero an no demostradas: -Zona pelcida anormal. -Mala calidad embrionaria. -Baja respuesta ovrica. Por ltimo, es oportuno decir que tambin se ha intentado la eclosin total del embrin a travs del mtodo qumico o con pronasa. Slo es posible realizarlo en estadio de blastocisto, ya que si se hiciera antes se disgregara el embrin en sus blastmeras. Pero esta tcnica apenas se utiliza en el laboratorio.

Transferencia intrafalopiana de cigotos[editar editar cdigo]

Artculo principal: Transferencia intrafalopiana de cigotos

En la transferencia intrafalopiana de cigotos (ZIFT en ingls), los ovocitos se extraen de la mujer, fecundados in vitro, y los embriones se sitan en las trompas de Falopio, en lugar de en el tero.

TGIF[editar editar cdigo]

Artculo principal: Transferencia de gametos intrafalopiana

En la TGIF (GIFT en ingls), los ovocitos se extraen de la mujer, y se sitan en una de las trompas de Falopio, junto con los espermatozoides del varn. Por tanto, esta variacin es en realidad una fecundacin in vivo y no in vitro.

DGP[editar editar cdigo]

Artculo principal: Diagnstico gentico preimplantacional

El DGP puede realizarse en los embriones previamente a la transferencia. Un test similar pero ms general es el haplotipado gentico preimplantacin o HGP (PGH en ingls). Sin embargo, la tasa de xito de la DGP es baja.

Historia[editar editar cdigo]

El primer embarazo conseguido mediante FIV con un ovocito humano fue descrito por el equipo de Monash en la revista The Lancet en 1973, aunque slo dur algunos das y hoy en da se denominara un embarazo bioqumico. A continuacin se public un embarazo ectpico en las trompas por Steptoe y Edwards en 1976,14 que result en el nacimiento de Louise Brown el 25 de julio de 1978 en Oldeham and District General Hospital de Lncashire, cerca de Mnchester (Reino Unido)15 y de otro beb desconocido, los primeros bebs FIV. Robert G. Edwards recibi el Premio Nobel de Fisiologa y Medicina 2010 por el desarrollo de la fecundacin in vitro'.16 Despus tuvo lugar el nacimiento de Candice Reed en Melbourne en 1980. La utilizacin del uso de ciclos estimulados con citrato de clomifeno y el uso de gonadotropina corinica humana (hCG) para controlar el momento de la maduracin de los ovocitos, permitiendo as controlar el momento de la extraccin, convirti a la FIV de una herramienta de investigacin en un tratamiento clnico. A continuacin se produjeron 14 embarazos, seguidos de 9 nacimientos en 1981 con el equipo universitario de Monash. El equipo de Jones en Norfolk, Virginia, mejor los ciclos de estimulacin incorporando el uso de una hormona estimulante de los folculos (uHMG). Esto se dio a conocer con el nombre de hiperestimulacin ovrica controlada (HOC). Otro paso adelante fue el uso de agonistas de la hormona que libera la gonadotropina (GnRH-A), disminuyendo as la necesidad de control al prevenir la ovulacin prematura, y ms recientemente antagonistas de la hormona que libera la gonadotropina (GnRH-Ant), con una funcin

similar. El uso adicional de contraceptivos orales ha permitido la programacin de los ciclos de FIV, lo que hace el tratamiento ms fcil de realizar para los mdicos y los pacientes. En la Clnica Dexeus se realiz la primera fecundacin in vitro de Espaa el 12 de julio de 1984, por el gineclogo Pedro Barri y la biloga Anna Veiga.17 La capacidad de congelar y posteriormente descongelar y transferir embriones tambin ha mejorado significativamente la efectividad de la FIV. Otro momento significativo fue el desarrollo de la inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides (ICSI) por Gianpiero Palermo en Bruselas, en 1992. Esto ha permitido que hombres con una produccin mnima de espermatozoides consigan embarazos, a veces conjuntamente con recuperacin de esperma, utilizando una aguja testicular fina o una biopsia testicular abierta, de manera que incluso hombres con el sndrome de Klinefelter pueden a veces conseguir un embarazo. Por tanto, la FIV se ha convertido en la solucin de la mayora de los problemas de infertilidad, desde problemas en las trompas hasta factores masculinos, subfertilidad idioptica, endometriosis, edad materna avanzada y anovulacin.