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FARMACIA Y BIOQUIMICA
encuentran en fase lquida. Es decir, las mezclas homogneas que se presentan en fase slida, como las aleaciones (acero, bronce, latn) o las que se hallan en fase gaseosa (aire, humo, etc.) no se les conoce como disoluciones. Las mezclas de gases, tales como la atmfera, a veces tambin se consideran como soluciones.
COLORANTES: Es una sustancia que es capaz de teir las fibras vegetales y animales. Los colorantes se han usado desde los tiempos ms remotos, emplendose para ello diversas materias procedentes de vegetales (crcuma, ndigo natural, etc.) y de animales (cochinilla, moluscos, etc.) as como distintos minerales.
OBJETIVOS: Preparar una solucin salina fisiolgica normas. Preparar un colorante vital
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PARASITOLOGA
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MATERIALES: Vaso precipitado Balanza analtica Vagueta probeta Esptula REACTIVOS: NaCl Yodo Yoduro de potasio Agua destilada
REACTIVOS A USAR
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PARASITOLOGA
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PROCEDIMIENTO: 1.- PRIMER OBJETIVO: Pesar los reactivos 9g de NaCl y Medir 50ml de agua destilada
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PARASITOLOGA
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PARASITOLOGA
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IV: Cuestionario
Solucin ringer La solucin Ringer es una solucin lquida de electrolitos en agua. Los electrolitos, tales como el sodio, se presentan naturalmente en los fluidos corporales y contribuyen a los msculos y la funcin de los nervios, as como tambin ayudan a que el cuerpo mantenga su pH y fluidos de equilibrio. La prdida de electrolitos por medio de la transpiracin y orina es normal, y estos electrolitos son reemplzados por el consumo regular de fluidos. En caso de prdidas mayores de electrolitos a causa de sangrado, vmitos o cualquier otra enfermedad, ser necesario reemplazarlos inmediatamente. Solucin buffer es una o variassustancias qumicas que afectan la concentracin de los iones de hidrgeno (ohidrogeniones) en el agua. Siendo que pH no significa otra cosa que potencialde hidrogeniones (o peso de hidrgeno), un "buffer" (o "amortiguador") lo quehace es regular el pH.Cuando un "buffer" es adicionado al agua, el primer cambio que se produce esque el pH del agua se vuelve constante.De esta manera, cidos o bases (lcalis = bases) adicionales no podrn tenerefecto alguno sobre el agua, ya que esta siempre se estabilizar de inmediato. Colorante giemsa Es un mtodo habitual para el examen de frotis sanguneos, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas.
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PARASITOLOGA
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Este mtodo tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las ricketsias localizadas dentro de la clula huspedes. La coloracin de giemsa se emplea tambin para teir frotis de sangre en el examen para protozoos. Se puede emplear, como variaciones, otras coloraciones como es la tcnica de citoconcentracin para parsitos sanguneos, la cual tiene un bajo coste y ofrece la posibilidad de aislar e identificar en el mismo sedimento el parsito principal, con excepcin de los trofozoitos jvenes y el plasmodium falciparum. Coloracin wrihght
La tincin de Wright es un tipo de tincin usada en histologa para facilitar la diferenciacin de los tipos de clulas de la sangre. Se usa principalmente para teir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al microscopio. En citogentica se usa para teir cromosomas, para facilitar el diagnstico de sndromes y enfermedades. Lleva el nombre de James Homer Wright, su descubridor, que la obtuvo modificando la tincin de Romanowsky, en 1902. Debido a que ayuda a distinguir fcilmente las clulas de la sangre se convirti en una tcnica muy usada para el conteo de los glbulos blancos, una tcnica rutinaria usada cuando hay sospecha de infecciones.
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PARASITOLOGA
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mezclas homogneas que se encuentran en fase lquida. Es decir, las mezclas homogneas que se presentan en fase slida, como las aleaciones (acero, bronce, latn) o las que se hallan en fase gaseosa (aire, humo, etc.) no se les conoce como disoluciones. Las mezclas de gases, tales como la atmfera, a veces tambin se consideran como soluciones.
COLORANTES: Es una sustancia que es capaz de teir las fibras vegetales y animales.
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PARASITOLOGA
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Los colorantes se han usado desde los tiempos ms remotos, emplendose para ello diversas materias procedentes de vegetales (crcuma, ndigo natural, etc.) y de animales (cochinilla, moluscos, etc.) as como distintos minerales.
En qumica, se llama colorante a la sustancia capaz de absorber determinadas longitudes de onda de espectro visible. Los colorantes son sustancias que se fijan en otras sustancias y las dotan de color de manera estable ante factores fsicos/qumicos como por ejemplo: luz, lavados, agentes oxidantes, etc.
II.- OBJETIVOS: Preparar el fijador formol al 10% Preparar el aclarador fenol-xilol III.- MATERIALES Y REACTIVOS: Vaso precipitado Balanza analtica Probeta Vagueta Bao mara IV.- PROCEDIMENTO: 1.- PRIMER OBJETIVO: Medir 10ml de formol
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muestra obtenida
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El alcohol polivinlico (PVOH, PVA, PVAL o) es un agua - soluble en polmero sinttico (que no debe confundirse con acetato de polivinilo , un pegamento de madera popular). Tiene la frmula idealizada [CH
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CH (OH)]
n.
Se utiliza en la fabricacin de papel, textiles, y una variedad de revestimientos. Es de color blanco y sin olor. A veces se suministra en forma de perlas o como soluciones en agua.
2.- FIJADOR MIF (modificado): Es una combinacin de preservante y tincin para los especmenes fecales muy utilizados en los estudios de campo. Los protozoarios intestinales, asi como los huevos y larvas de helmintos, pueden ser diagnosticados inmediatamente despus de fijacin o mese despus.
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PARASITOLOGA
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La duela del hgado (Fasciola hepatica) es una especie de platelminto trematodo (duela) de la subclase Digenea, caracterizado por su forma lanceolada, con dos ventosas, una bucal y otra ventral, y un ciclo biolgico con dos generaciones (digeneo) en dos hospedadores, un molusco gasterpodo anfibio y un mamfero. Es parsito de los canales biliares y la vescula biliar de herbvoros y omnvoros, incluido el hombre; es el agente causal de una de las parasitosis ms difundidas del ganado, la fascioliasis (o fasciolosis), que es considerada como una de las enfermedades parasitarias ms importantes del mundo de los rumiantes domsticos.
II.- OBJETIVOS: Fijar el platelminto fasciola heptica. Caracterizar morfolgicamente la fasciola heptica. III.- MATERIALES: Porta objetos Laminila Gotero
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observar en el microscopio.
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observacin en el microscopio
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LOS NEMATODOS: Tambin conocidos como nemtodos, nematodes y nematelmintos, son un filo de vermes pseudocelomados con ms de 25.000 especies registradas, producidos por Enfermedades de transmisin alimentaria. El cuarto del reino animal por lo que se refiere al nmero de especies, y un nmero estimado mucho mayor, tal vez 500.000. Se conocen vulgarmente como gusanos redondos debido a la forma de su cuerpo en un corte transversal.
Son organismos esencialmente acuticos, aunque proliferan tambin en ambientes terrestres. Se distinguen de otros gusanos por ser
pseudocelomados, a diferencia de los anlidos que son celomados al igual que los animales superiores. Existen especies de vida libre, marinas, en el suelo, y especies parsitas de plantas y animales, incluyendo el hombre, al que provocan enfermedades como la triquinosis, filariasis, anisakiasis,
anquilostomiasis, ascariasis, estrongiloidiasis, toxocariasis, etc. Sin embargo el nmero de especies que parasitan directamente al hombre y las que parasitan plantas (nemtodos fitoparsitos) son un grupo muy pequeo en comparacin al nmero de especies del filo Nematoda.
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Ascaris lumbricoides: Es un nematodo parsito del intestino delgado del hombre muy frecuente en pases subdesarrollados. A este gusano se le llama tambin lombriz intestinal por su forma alargada que lo asemeja a la lombriz de tierra. En el cerdo se encuentra una especie prcticamente idntica, llamada Ascaris suum.
La ascariasis constituye un problema de salud pblica en situaciones con condiciones higinicas inadecuadas del agua y alimentos. El contagio se produce por la ingestin de los huevos, que se eliminan con las heces; una vez maduran en el medio ambiente hasta formar el juvenil de tercer estadio (L3), lo que ocurre en algunas semanas, segn las condiciones climatolgicas. Los huevos son enormemente resistentes respecto al calor extremo y la desecacin, por lo que pueden sobrevivir varios aos en ambientes hmedos y templados. Posee una gran resistencia metablica y una gran capacidad de reproduccin, lo que explica la gran incidencia de casos en la que infecta al humano. Es el mayor nemtodo que parasita al hombre, llega a medir 25 cm aproximadamente. Las hembras de Ascaris son mayores que los machos y miden de 25 a 35 cm, mientras los machos mide solo de 15 a 30 cm
II.- OBJETIVOS: Fijar el nematelminto: scaris lumbricoides. Caracterizar morfolgicamente scaris lumbricoide. III.- MATERIALES: Placas petri Tubos de enzayo
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Solucin salina
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V.- RESULTADOS:
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MORFOLOGA: Los nematodos son gusanos redondos, tienen el cuerpo alargado, cilndrico y no segmentado, con simetra bilateral. Con frecuencia, el macho tiene un extremo posterior curvado o helicoidal con espculas copulatorias y, en algunas especies, una bolsa caudal denominada bursa. El extremo anterior del adulto puede tener ganchillos orales, dientes, o placas en la cpsula bucal, que sirven para la unin a tejidos, y pequeas proyecciones de la superficie corporal conocidas como cerdas o papilas, que se cree que son de naturaleza sensitiva. Se denominan anfidios, fasmidios o deiridios segn la porcin del cuerpo donde se localicen.
1: abertura bucal; 2: intestino; 3: abertura cloacal; 4: rgano excretor; 5: testculo; 6: anillo nervioso perifarngeo; 7: cordn nervioso dorsal; 8: cordn nervioso ventral; 9: poro excretor
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La superficie exterior del gusano adulto es muy resistente y se denomina cutcula, de composicin escleroproteica, normalmente lisa, aunque existen algunas especies con estriaciones o rugosidades cuticulares. Bajo la cutcula se encuentran varias capas musculares y un espacio compuesto de lquido que funciona como un esqueleto hidrosttico llamado pseudocele el cual favorece la distribucin de nutrientes y la recoleccin de productos de excrecin y en el cual tambin se encuentran las gnadas. Todos los rganos flotan dentro de este lquido. Los sistemas de rganos internos consisten en un complejo cordn nervioso (ganglios conectados alrededor del esfago) y un sistema digestivo bien desarrollado con cpsula bucal (donde se encuentran los ya mencionados ganchos, dientes, placas o papilas), esfago, intestino y ano. No tienen sistema circulatorio, de manera que para mover el lquido interno deben mover el cuerpo para hacer presin hidrosttica. Las diferentes especies varan de tamao desde unos cuantos milmetros (como el Strongyloides stercoralis hasta ms de un metro de longitud (Dracunculus medinensis por ejemplo), e incluso ms.
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Varios grupos de artrpodos estn perfectamente adaptados a la vida en el aire, igual que los vertebrados amniotas, a diferencia de todos los dems filos de animales, que son acuticos o requieren ambientes hmedos. Su anatoma, su fisiologa y su comportamiento revelan un diseo simple pero
admirablemente eficaz.
Caractersticas:
Los artrpodos constituyen una de las grandes divisiones del reino animal, subdividida en diversas clases, algunas de las cuales cuentan con gran nmero de gneros y especies. Se los denomina de esta manera por estar provistos de
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patas articuladas. En realidad no son solo las patas, sino todo el cuerpo el que est formado por varios segmentos unidos entre s por medio de articulaciones.
A pesar de su variedad y su disparidad, los artrpodos poseen en comn caractersticas morfolgicas y fisiolgicas fundamentales:
Presencia de apndices articulados que muestran una plasticidad evolutiva enorme y que han dado lugar a las estructuras ms diversas (patas, antenas), branquias, pulmones, mandbulas, quelceros, etc.
Presencia de un esqueleto externo o exoesqueleto quitinoso que mudan peridicamente. Dado que diversos filos pseudocelomados tambin mudan la cutcula, algunos autores relacionan los artrpodos con los nematodos y grupos afines, en un clado llamado ecdisozoos.4
Cuerpo constituido por segmentos repetitivos, fenmeno conocido como metamera, con lo que el cuerpo aparece construido por mdulos repetidos a lo largo del eje antero-posterior.La segmentacin va acompaada de regionalizacin o tagmatizacin, con divisin del cuerpo en dos o tres regiones en la mayora de los casos. Por este carcter se les ha relacionado tradicionalmente con los anlidos que tambin son animales metamerizados;2
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argumentan que es un caso de convergencia evolutiva (vase Articulata y Ecdysozoa, y en este mismo artculo el apartado Filogenia).
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II.- OBJETIVOS: Fijar insectos apteros y arcnidos. Caracterizar morfolgicamente un insecto y arcnido holotipico. III.- MATERIALES: Frasco Aguja de enmangar IV.- METODOLOGIA: Microscopio Porta objetos
PRIMER OBJETIVO: Colocar en insecto ptero en un recipiente que contenga un liquido fijador por 24 a 48 horas.
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El fijador de Carnoy es un fijador que contiene cloroformo. Penetra en tejidos extremadamente rpido y pude fijar piezas de tejido de pequeo tamao en minutos en vez de las horas requeridas con otros fijadores. Los tejidos delicados pueden ser daados cuando se transiferen de soluciones acuosas a este fijador, debido a la extrema hidrofobicidad del cloroformo y resultando en una deshidratacin rpida de los tejidos. Reservar el fijador de Carnoy para muestras ms fuertes. este fijador ha sido usado tradicionalmente para estructuras citolgicas.
Etanol absoluto---------60 ml Acido actico glacila----10 ml Cloroformo-------------30 ml Fija piezas de tejido de pequeo tamao aproximadamente en 1 hora, lavar varias veces en alcohol absoluto, infiltrar e incrustar.
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III.- MATERIALES: Mondadientes Microscopio ptico Porta objetos laminillas IV.- METODOLOGIA: PRIMER OBJETIVO: Muestra de heces Gotero Muestre de heces Lugol
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observar al microscopio.
V.- RESULTADOS
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VI.- CUESTIONARIO: 1.- CONSERVACION DE MATERIAS FECALES. Los fijadores habitualmente empleados para la preservacin de muestras coproparasitolgicas incluyen: formol al 5% en agua o solucin fisiolgica; alcohol polivinlico, PVA; fenol-alcohol-formol, PAF; acetato de sodio-cido
actico-formol. SAF o; merthiolate-iodo-formol, MIF) en una proporcin de 1 parte de heces por cada 3 partes de fijador (aproximadamente el volumen final no debe exceder la mitad del volumen del fijador). No debe estar mezclado con orina u otro lquido.
2.- TINCION TRICROMICA. La tincin tricrmica de Masson, al igual que otras tinciones tricrmicas, es una tcnica de coloracin especial que permite visualizar claramente las fibras de colgeno tipo I que forman fibras gruesas o haces, diseados para dar resistencia; tambin evidencia, aunque en menor intensidad, las fibras reticulares. Se emplean tres colorantes para diferenciar el ncleo celular, el citoplasma y las fibras de colgeno. 3.- TECNICA DE ZIEHL-NEELSEN MODIFICADO (TINCION ACIDORRESISTENTE)
La tincin de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una tcnica de tincin diferencial rpida y econmica, usada para la identificacin de microorganismos
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III.- MATERIALES: Mondadientes Microscopio ptico Porta objetos Laminillas IV.- METODOLOGIA: Depositar 2g de heces en el porta objetos, emulsionar la muestra con una gota de suero fisiolgico, cubrir la muestra con una laminilla, contar el nmero de huevos recorriendo toda la laminilla y el nmero total de huevos se multiplica por 500 para obtener los resultados en h.p.g. Gotero Materia fecal Suero fisiolgico
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V.- RESULTADOS:
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VI.- CUESTIONARIO: 1.- TECNICA DE GRAHAN. El test de Graham es una prueba utilizada para detectar enterobiasis. Se trata de un examen no rutinario, ya que dentro de la parasitologa es una prueba especial que consiste en colocar una tira adhesiva de papel de celofn, de unos 20 mm de ancho, en el extremo de un depresor de madera o de un porta, de tal forma que la zona engomada quede hacia el exterior y que a cada lado del extremo queden unos 5 cm de tira adhesiva. Para realizar la prueba se debe colocar la tira sobre la regin anal y perianal del paciente y luego extenderla sobre un portaobjetos, de manera que la zona engomada quede adherida al mismo. Seguidamente, observar al microscopio con pocos aumentos (10X). La toma debe hacerse por la maana, antes de que el paciente se asee o defeque. Para facilitar la observacin microscpica, entre el celofn y el portaobjetos puede colocarse una gota de lugol o de xilol. 2.- TECNICA DE KATO-KATZ. Este mtodo fue descrito por Kato y Miura en 1954 y antiguamente se denominaba como; frote grueso fue evaluada por Komiya Kobashi y Martn Beaver, quienes introdujeron la modificacin de pasar la materia fecal por una malla para evitar el paso de fibras y restos alimenticios no digeridos, lo que mejor la tcnica original. Es una tcnica muy sencilla en cuanto a materiales y reactivos a utilizar, en cuanto a los clculos para el reporte de resultados estos no representan mayor problema.
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Se usada para diagnosticar helmintiasis y cuantificar el hallazgo de huevos, los resultados nos dan la concentracin de huevos por gramos de heces. Este mtodo se fundamenta en la utilizacin de glicerina como aclarante y el verde de malaquita como colorante de contraste, adems de un cubre objeto de celofn humedecible, que es el vehculo para la solucin de Kato. En este apartado se debe considerar que a travs de este mtodo no se diagnosticaran protozoosis por el aclaracin que produce la glicerina y el verde de malaquita puede enmascarar la finas estructuras de los parsitos unicelulares. Otro dato a tener en cuenta es que cuando se tratan de parasitosis mixtas como geohelmintiasis con himenolepiosis los huevos de estos ltimos son delicados y aclaran mas rpido que los de nematelmintos. 3.- TECNICA DE STOLL-HAUSHEER. Esta tcnica fue ideada y desarrollada por Stoll en 1923, debido a sus caractersticas de accesibilidad en costo y material a utilizar es uno de los ms empleados de manera exitosa en encuestas epidemiolgicas. Este mtodo forma parte de los exmenes considerados cuantitativos, por lo que es necesario tener el antecedente de que la muestra se encuentra positiva, para su posterior cuantificacin El fundamento de este mtodo es bsicamente aritmtico, los clculos se basan en las diluciones empleadas. Debido a que la cantidad de muestra es muy pequea en comparacin con el volumen de hidrxido de sodio, las helmintiosis moderadas son ms difciles de evaluar. Por el hecho de no utilizar
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tincin temporal y debido a que los quistes se aclaran con el hidrxido es una tcnica especfica para la cuantificacin de helmintiasis. 4.- MEDICION DE PARASITOS. Para el conocimiento y estudio de los parsitos, es necesario tomar en cuenta entre otras caractersticas, las diferentes estructuras morfolgicas de las partes que los constituyen, para tal estudio, disponemos de varios recursos, entre ellos: la fotografa, la proyeccin y el dibujo. El dibujo integral tiene ventaja al reproducir en un solo plano, los diferentes detalles que tiene una preparacin relativamente gruesa, adems de reproducir la estructura y la forma de los parsitos en forma proporcional y fielmente. Para obtener una imagen del parsito, podemos disponer de varios aparatos, todos ellos con el objeto de reunir los rayos luminosos que vienen del microscopio. TCNICA PARA MEDIR PARASITOS MACROSCOPICOS. Colocar el parsito en una charola plana porcelanizada, o bien, sobre un vidrio. Colocar un regla paralela por el eje longitudinal a transversal segn lo que se quiera medir. TECNICA PARA MEDICION DE PARASITOS MICROSC0PICOS. Se coloca sobre la platina del microscopio una escala objetiva y enfocar con el objetivo de 10X las divisiones centrales de la escala. Ajustar el ocular micromtrico en el tubo del microscopio y comparar los marcos (figura No. 2.2 B).
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En seguida se hace coincidir la primera raya de la escala objetiva con la primera raya de la escala ocular, haciendo lo mismo con la escala objetiva hasta el punto donde vuelvan a coincidir las dos escalas
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V.- RESULTADOS:
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VI.- CUESTIONARIO: 1.- MEDICION DE CULTIVO BOECK Y DRBOHLAY. Para el cultivo de amebas. Se prepara con cloruro de sodio, 9 g; cloruro de calcio, 0,2 g; cloruro de potasio, 0,4 g; bicarbonato de sodio, 0,2 g; glucosa, 2,5 g; agua, 1.000 m1.
2.- MEDIO DE CULTIVO PARA STRONGYLOIDES Y UNCINARIAS. El cultivo en plato de agar (CPA) El diseo de este mtodo fue inspirado por una observacin interesante: se describi la observacin de unos"caminitos" serpentiginosos de bacterias en un coprocultivo, que fueron hechos por larvas de Strongyloides presentes en la muestra inoculada (Conway, 1994). Con esa idea se dise el mtodo de CPA, que consiste encolocar una porcin de unos 2 g de heces en el centro de una plato de agar nutritivo e incubar a 27C durante24 horas. Si no hay Strongyloides, solo se formar una gran "colonia" o masa de bacterias; pero si hay larvas,estas migrarn sobre el agar distribuyendo las bacterias, lo que al da siguiente se observa por la disposicinserpentiginosa de las colonias.
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Se observa la placa al estereoscopio y se encontrarn las larvas migrando alfinal de cada senda de bacterias, o bien, se enjuaga la placa con un poco de formalina, que luego se centrifugay se analiza al microscopio. La sensibilidad de este mtodo es similar a la del Baermann (Arakaki, 1990;Koga, 1991). Los inconvenientes son: el costo de las placas y el riesgo, recordemos que sobre el agar puedehaber larvas de tercer estado (infecciosas) capaces de penetrar la piel; por ello, se recomienda sellar la placacon cinta adhesiva, manipularla con guantes y para echarle la formalina se debe perforar un agujerito con una pinza caliente (Kaminsky, 1993).
3.- MEDIO DE CULTIVO ROBINSON. 4.- MEDIO DE CULTIVO DE INOKI, TAKADA Y NAKABAYASI.
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realizacin de exmenes directos, es suficiente la toma de 2 cc de sangre con anticoagulante. Para los exmenes indirectos se debe tomar aproximadamente 5 cm de sangre y sin anticoagulante, con el fin, de obtener suero en cantidad necesaria. El proceso de centrifugacin
permite obtener el suero en mayor cantidad y pureza. Se recomienda trabajar las muestras de suero hasta seis horas despus de la toma para evitar su contaminacin y la hemlisis de los eritrocitos. La contaminacin en sueros refrigerados se puede evitar agregando fenol en concentracin al 0.5% Los sueros obtenidos se pueden conservar a
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temperaturas de 20C por tiempo aproximado de un ao y por mas tiempo a 80C para evitar el cambio d de las protenas existentes en el suero II.- OBJETIVOS: Diagnostico de gota gruesa. III.- MATERIALES: Lanceta Algodn IV.- METODOLOGIA: Limpiamos el dedo con alcohol y algodn Microscopio Alcohol laminillas
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Obtenemos la muestra
Realizamos el extendido
Observamos en el microscopio
Resultados de la observacin
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VI.- CUESTIONARIO: 1.- METODO DE WALKER. Tcnica de precoloracin de Walker. Esta tcnica requiere del colorante azul de metileno (0,3%) y de una solucin amortiguadora (buffer fosfato). El portaobjetos se sumergi durante un segundo en azul de metileno, y se elimin el exceso del colorante; la lmina se sumergi en la solucin amortiguadora a travs de cinco inmersiones suaves tratando de obtener una superficie clara no azulada, y por ltimo se procedi al secado de la lmina a la temperatura ambiente.
1. Limpiar el pulpejo del dedo con una gota de alcohol, hacer una puncin para conseguir una gota de sangre. 2. Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien limpio. 3. Seguidamente, con el empleo de un porta de borde esmerilado se hace un frotis o extensin de sangre. 4. Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionarpara la tincin la mejor lograda.
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5. Las extensiones o frotis deben secarse al aire lo ms rpidamente posible nunca soplando o por calor. La rpida desecacin evita la deformacin de los glbulos sanguneos.
TECNICA DE TINCION:
1. Depositar el porta con la extensin de sangre encima del soporte de tinciones y ste sobre la cubeta. 2. Dejar caer sobre la extensin unas gotas de metanol y esperar que el alcohol se evapore, con lo que se consigue el fijado. 3. Depositar cubriendo toda la extensin, unas gotas de Giemsa, evitar la desecacin y dejar actuar el colorante unos cinco minutos. 4. Lavar la preparacin, hasta que arrastre todo el colorante. 5. Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy lento de la llama del mechero.
3.- RECUENTO DE PLASMODIUM. Tcnicas especiales para Plasmodium spp. RECUENTO DE PARSITOS: Por qu puede ser necesario establecer el nmero de parsitos. - Para saber cul es el grado de severidad de la malaria. - Para saber si un tratamiento antimalrico que est siendo administrado est dando el resultado esperado.
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- Los recuentos de parsitos son especialmente importantes en infecciones por P. falciparum que son potencialmente fatales. Existen dos mtodos para el recuento de parsitos en extensiones de gota gruesa. MTODO 1: parsitos por ml de sangre. El nmero de parsitos presentes en una extensin de gota gruesa se cuenta en relacin a un nmero estandarizado de leucocitos (8000). Se necesitan dos contadores, uno para los parsitos y otro para los leucocitos. Si al cabo de 200 leucocitos contados se identificaron y contaron 10 o ms parsitos, los resultados se registran como nmero de parsitos por 200 leucocitos. Si al cabo de 200 leucocitos contados se identificaron y contaron 9 o menos parsitos, se contina hasta contar 500 leucocitos y los resultados se registran como nmero de parsitos por 500 leucocitos. En cada caso, el nmero de parsitos relativo al recuento de leucocitos puede convertirse a parsitos /ml de sangre a travs de esta frmula: n de parsitos x 8000 n de leucocitos Es decir que, si se contaron 200 leucocitos, el n de parsitos se multiplica por 40 y si se contaron 500 leucocitos, el n de parsitos se multiplica por 16. Deben contarse todas las especies presentes. MTODO 2: el mtodo + = parsitos /ml de sangre
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Es menos satisfactorio. Debera utilizarse slo cuando no es posible realizar el otro tipo de recuento. Utiliza un cdigo de signos +, como sigue: + ++ =1-10 parsitos cada 100 campos examinados =11-100 parsitos cada 100 campos examinados
+++ =1-10 parsitos por 1 solo campo examinado ++++ = ms de 10 parsitos por 1 solo campo examinado
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enfermedades infecciosas el diagnstico etiolgico que confiere el Laboratorio de Microbiologa Clnica. Toda la informacin diagnstica que el laboratorio de microbiologa puede proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida. Por ello, una toma mal realizada, pobremente recogida o mal transportada determinar un posible fallo en la recuperacin de los agentes patgenos, que puede inducir a errores diagnsticos, e incluso a un tratamiento inadecuado del enfermo. Este hecho es bien conocido por los microbilogos, no obstante la mayora de las muestras son obtenidas por otros profesionales de la salud en diversos servicios
clnicos, por lo que es necesaria la educacin continua de dicho personal sanitario, al que hay que advertir del gasto intil y el error de los datos obtenidos a partir de un estudio realizado de forma inadecuada.
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II.- OBJETIVOS: Examen directo en frasco de secrecin vaginal. Examen directo en frasco de orina. III.- MATERIALES: Secrecin vaginal Orina de varon Suero fisiolgico Microscopio ptico IV.- METODOLOGIA: PRIMER OBJETIVO: Tomar la muestra de secrecin vaginal con una torunda, Centrifuga Porta objeto laminilla
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observar al microscopio.
Observacin microscopica
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se observa al microscopio.
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VI.- CUESTIONARIO:
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2.- CULTIVOS DE TRICONOMAS. Deberan prepararse cultivos cuando los microorganismos son demasiado escasos para una deteccin directa y una identificacin precisa. Normalmente es necesario el cultivo de los microorganismos porque, en la mayora de los casos, el nmero de microorganismos no es suficientemente grande para hacer un diagnstico positivo mediante un examen directo. Pueden utilizarse varios medios. Los medios elegidos son el medio CPLM (cistena/peptona/infusin de hgado y maltosa), el medio BGPS (extracto de carne/glucosa/peptona y suero), el medio de Clausen (Neopeptna-Lemco-extracto de hgado y glucosa),
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medio Diamond para tricomonas, medio Oxoid para Trichomonas y los sistemas de cultivo comerciales (11, 28, 32, 40). La inoculacin de las muestras en los medios de cultivos debera realizarse lo antes posible despus de la recogida. Es necesario procesar la muestra mediante centrifugacin en las muestras recogidas mediante lavado prepucial. Entonces se examina el sedimento y se inocula en medios de cultivo. Tambin es importante asegurarse de que los medios de cultivo se utilicen antes de la fecha establecida de caducidad, ya que muchos medios no son estables. La calidad del agua empleada es importante, y puede aadirse a los medios un antifngico para controlar el crecimiento de los hongos. 3.- METODOS DE COLORACION DE TRICOMONAS. . se a de tomar una pequea muestra del flujo sospechoso colocndose en una gota de suero ficiologico sobre un porta objeto y se cubre con uma delgada lamina de cristal. Se observa bajo el microscopio a 60 de aumento. Sin existen estos paracitos se les vera moverse gilmente de un lado a otro. Tambin se observaran que parasitan algunas clulas epiteliales, usualmente en grupos. . en la preparacin citolgica con la tincin de papanicolau. Se observan estos paracitos de forma alargada, ya sea aisladamente o agrupados en forma de corona paracitando las clulas epiteliales.
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