DIMENSIONNEMENT DUNE RAFFINERIE DE BIODIESEL

PRODUCTION A PARTIR DE DUNALIELLA SALINA SUR LE SITE DES SALINS DE GIRAUD

Projet dlve ingnieur Spcialisation Chimie Verte et Bioprocds

Montpellier SupAgro & Ecole Nationale Suprieure de Chimie de Montpellier

Septembre 2008 Mars 2009

Sujet non commandit, conu linitiative de Daniel MATHIEU (ple Trimatec) Auteurs Partie 1 : Dimensionnement et organisation spatiale des systmes de culture et de rcolte Juliette LANGLOISMontpellier SupAgro Charlotte THEVENETEcole Nationale Suprieure de Chimie de Montpellier Partie 2 : Post-traitement de la biomasse Aline BOURGE. Ecole Nationale Suprieure de Chimie de Montpellier Julie PERSONEcole Nationale Suprieure de Chimie de Montpellier Mlanie SALOMEZ...Montpellier SupAgro Tuteur cole Eric Dubreucq Personnes rencontres Informations gnrales sur les microalgues Daniel Mathieu Partie 1 Michel Lemar, Arnaud Muller-Feuga (socit Mycrophyt) Alban Mouret (responsable production de sel aux Salins) Partie 2 Franois Ren (Ifremer Palavas) Frdric Charton (CEA)

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Introduction
Dans le contexte du changement climatique, de la flambe des prix du baril de ptrole et de lpuisement des ressources fossiles, lintrt des chercheurs se porte depuis quelques annes vers la dcouverte de nouveaux carburants issus de ressources renouvelables avec un impact environnemental moins important. Lattention se porte tout particulirement sur le biodiesel. Ce carburant prsente lavantage dtre utilis dans les moteurs diesel existant sans apporter de modification. De plus, il diminue les missions de polluants gazeux par rapport au gazole dorigine fossile. La production mondiale de biodiesel actuelle utilise diffrentes source de lipides comme les huiles vgtales ou les graisses animales. En Europe par exemple, le biodiesel est principalement obtenu partir dhuile de colza et de tournesol. Cependant, lobtention de biodiesel partir dhuile vgtale requiert de lnergie et une superficie suffisante pour la culture. De mme, le biodiesel partir de graisses animales ncessite de nourrir les animaux. Dun point de vue conomique, la production de ce biocarburant est restreinte cause du cot lev des matires premires. Enfin il cre la polmique car il est en concurrence avec lalimentaire. Cest pourquoi les micro-organismes sont considrs comme la ressource alternative la plus prometteuse. Nanmoins il reste encore des verrous lever avant que les rendements et les cots esprs soient effectivement atteints et que ces technologies ne puissent voir le jour grande chelle. Dans la prsente tude, nous nous sommes intresses ce dernier type de culture : les microorganismes nous ont paru tre les plus mme de pouvoir rpondre un objectif de production de 300 000 tonnes de biocarburant sans atteindre des valeurs doccupation de lespace ou dutilisation dintrants exubrantes. Afin deffectuer le dimensionnement dune telle structure de production, nous nous sommes tout dabord intresss dans une premire partie au potentiel que prsente les microalgues, selon les diffrents modes de culture existants et selon les espces cultives. Puis dans un second temps, aprs nous tre fixs un mode de production en raceway de Dunaliella salina sur le site des salins de Giraud (13), nous avons dtermins les caractristiques structurales des bassins, les quantits dintrants injecter dans le systme, et nous avons dtaills les principaux paramtres du systme. Ces donnes ont dans tout dabord t calcules par unit de surface, puis ont t appliques lchelle globale dune exploitation de 6000 ha. Dans une troisime partie, le dtail des technologies de rcolte a t dvelopp. Une quatrime partie a consist dimensionner les structures mettre en uvre pour effectuer le fractionnement des microalgues rcoltes et lextraction des molcules dintrt, aprs stre pench sur les diffrentes voies technologiques possibles. Enfin, des lments qualitatifs de limpact environnemental de lensemble du process a t ralis.

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Partie I : Choix des micro-algues

Les carburants jouent un rle fondamental dans lconomie actuelle, principalement avec le transport. En Europe une grande partie du ptrole est importe, contribuant au dficit des Etats. Les scientifiques admettent quil est dans notre intrt de dvelopper des nergies alternatives pour rduire notre dpendance aux nergies fossiles. Introduction sur les micro-algues La biomasse est considre comme une relle alternative. Depuis 1982, des recherches ont examin le cas des micro-algues, capables de produire des lipides. Les lipides forment un groupe htrogne de composs organiques incluant les acides gras et dautres huiles vgtales, pouvant tre convertis en substitut pour le carburant diesel ou en essence. Les micro-algues, considres comme des mini usines biochimiques les plus productives au monde, se dveloppent trs rapidement, pouvant tripler voire quintupler leur poids en un jour. Pourtant la photosynthse chez les micro-algues est semblable celle des autres vgtaux. Le fait que les micro-algues sont particulirement efficaces pour transformer le CO2 et les nutriments en composs organiques sexplique entre autres de la manire suivante : elles nont pas besoin dlaborer des structures complexes de soutien et de reproduction. Aussi la culture dorganismes unicellulaires dans un environnement liquide leur permet daccder directement aux ressources (eau, CO2 et nutriments). Ainsi certaines espces se dveloppent trs vite, dautres produisent de grandes quantits dhuile, tolrent de larges variations de temprature ou sont capables de vivre dans leau sale. En plus de leau et de la lumire, les micro-algues ont besoin de grandes quantits de dioxyde de carbone pour crotre et stocker des lipides en quantits suffisantes pour une production de biocarburant lchelle conomique. Lutilisation de ce dioxyde de carbone fournit un autre avantage cette technologie, la rduction des gaz atmosphriques qui contribuent au rchauffement climatique. Les micro-algues sont les tres les plus primitifs du rgne vgtal. La plupart des espces existe sous forme unicellulaire, tandis que certaines sorganisent en colonie. On estime quil y aurait entre 200 000 et plusieurs millions despces ; 20 000 ont dj t identifies et regroupes sous plusieurs catgories. Quatre dentre elles comprennent les algues les plus cultives grande chelle pour des raisons commerciales. Les algues de la premire catgorie, les bleu-green algae (Cyanophyta), ont une organisation cellulaire proche des bactries, avec une cellule dpourvue de noyau. Les trois autres catgories sont constitues despces possdant noyau et chloroplastes. Les green algae (Chlorophyta) sont parmi les plus abondantes, surtout en eau douce ; les golden algae (Chrysophyta) dveloppent des systmes pigmentaires complexes les faisant apparatre jaune, marron ou orange. Enfin les diatomes (Bacillariophyta) ont une structure trs proche des golden algae, lexception de la silice prsente dans la paroi cellulaire. Actuellement, des micro-algues sont cultives en Isral, en Australie, au Mexique, Tawan et aux Etats-Unis pour des complments alimentaires. Par exemple, on cultive la Spiruline dans les pays en voie de dveloppement pour sa forte valeur protique et on extrait le bta-carotne de la Dunaliella salina. Certaines industries utilisent les omga-3 des acides gras de micro-algues comme complment dittique pour viter les maladies cardiaques. Lutilisation des micro-algues comme fertilisant pour le sol ou comme nourriture pour levage de crustacs est de plus en plus importante. Les micro-algues comme ressource nergtique renouvelable

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Les micro-algues fabriquent naturellement des sucres, des protines et des lipides. Les lipides ont une structure similaire aux carburants liquides, bien quils contiennent plus doxygne et sont plus visqueux que le ptrole brut. Le contenu lipidique dune cellule de micro-algue peut varier de 5 75% de matire sche selon les espces. Plus que le contenu lipidique, cest le contenu en triglycrides qui nous importe puisquau cours de la transformation en biodiesel seuls les triglycrides sont convertis.

Lide dutiliser les micro-algues comme source nergtique nest pas nouvelle. La production de mthane gazeux partir des sucres de la cellule a t propose il y a plus de 40 ans. Mais lutilisation la fraction lipidique de la cellule pour produire du biocarburant est une dcouverte plus rcente. Ce processus suit quatre grandes tapes. Tout dabord, les micro-algues sont cultives en grandes quantits dans des bassins, puis transfres dans des bassins favorisant laccumulation de lipides. Ensuite, on les rcolte et on extrait les lipides. A la fin, les lipides sont convertis en carburant. Bien que les lipides reprsentent la principale source nergtique, lnergie contenue dans le reste de la cellule peut aussi tre utilise. Nous ne prsenterons que les trois premires tapes, reprsentes sur le schma suivant, pour le dimensionnement, la transestrification tant un processus bien connu.

Figure 1 : Reprsentation des tapes dveloppes

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Partie II : La culture de Dunaliella salina 1. Le systme de culture

1.1. Choix du systme de production

Quel que soit le systme de production, la culture dalgues ncessite une source dnergie lumineuse, et un apport en dioxyde de carbone et sels inorganiques dans le milieu de culture. Pour cela, on peut soit utiliser des systmes de culture ouverts sur lenvironnement, soit des systmes ferms. Les deux principales mthodes de production utilises sont les bassins de type raceway pour les bassins ouverts et les photobioracteurs en systme ferm [1]. Nous dcrirons succinctement ces deux techniques et aborderons galement la production en fermenteurs par htrotrophie, ainsi que lutilisation de ces techniques de culture couples des programmes de phytoremdiation. Une fois ces technologies dcrites, on dterminera quels sont les systmes de production les plus intressants, du point de vue de leur efficience produire, mais en tenant galement compte des contraintes environnementales qui leur sont associes. 1.1.1 Description des diffrents systmes de culture existant Systme de production ouvert: les bassins de type raceway Les systmes de type raceway se prsentent comme des bassins ouverts en forme de champ de course, de 0,3 m de profondeur en moyenne, fonctionnant en boucle ferme ou en boucles troitement imbriques les unes contre les autres (voir figure 2). Un systme dagitation assure le brassage du volume de culture tandis que deux branchements assurent larrive de nutriments et le prlvement pour la rcolte. Ces systmes de culture en masse sont utiliss depuis les annes 1950. Le plus grand systme raceway existant occupe une surface de 440 000 m!. Il est gr par la socit amricaine Earthrise Nutritionals qui y cultive des Spirulines des fins alimentaires [1].

Figure 2 : Schma de fonctionnement dun bassin raceway [2] et photographie arienne des bassins de culture de Earthrise Nutritionals [3]

Afin de limiter la contamination, de nombreuses espces sont cultives dans des conditions extrmes, comme la Spiruline, cultive en milieu trs alcalin, ou bien la
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Dunaliella salina, cultive en milieu trs salin (Eilat, Isral). Ces systmes prsentent lavantage dtre plus productifs que les systmes ouverts classiques, du fait de loptimisation de la profondeur et de lagitation, permettant une meilleure captation de lnergie solaire, mais la biomasse ne doit pas tre trop forte afin dviter que la pntration des rayons lumineux reste limite une partie de la culture. Les photobioracteurs Afin de produire dimportants volumes de micro-algues, en solution plus concentres, diffrents modles de photobioracteurs ont t dvelopps. Ils sont conus de faon optimiser les conditions de culture et leur contrle tout en maximisant la surface dexposition la lumire. Les photobioracteurs tubulaires sont constitus de tubes transparents (verre ou plastique) dun diamtre de 0,1 m maximum. Le diamtre du tube reste limit, afin de permettre une pntration optimale de la lumire dans tout le volume de culture. Afin de palier ce problme, ces photobioracteurs se composent dune succession de ranges de tubes, aligns de manire horizontale ou verticale par rapport au sol ; ou bien enrouls en hlice (figure 3).

Figure 3 : Photographie dun Figure 4 : Schma de photobioracteur tubulaire en fonctionnement du hlice de type BIOCOIL (1000 bioracteur triangulaire litres) GreenFuel Avec ce mode de production, la culture a lieu en mode continu et Technologies la sdimentation de la biomasse est empche grce un systme de brassage du volume de culture par des pompes, gnralement injection dair plutt que mcaniques, afin dviter dabmer les algues [1]. Ces photobioracteurs peuvent tre clairs soit par lumire naturelle, soit sous lampes pour des productions intensives ou lon optimise le temps dexposition la source lumineuse.

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Les productions htrotrophes Les productions dans des fermenteurs concernent soit des micro-algues, soit dautres micro-organismes cultivs en conditions htrotrophes laide de carbone organique, par exemple des sucres. Ce type de culture reste limit, les rendements ntant pas aussi levs quen autotrophie [1]. Par ailleurs, il ne fait que dplacer le problme de la consommation de ressources : le carbone organique ncessaire ce type de culture provient dune premire culture, elle-mme potentiellement consommatrice despace, dengrais, ou en comptition avec des ressources alimentaires. Nous ne nous intresserons donc pas ce type de productions. Les cultures contrles dans des plans deau ouverts sur le modle de la phytoremdiation Sinspirant du principe de phytoremdiation, on peut envisager de cultiver des microalgues sur des sites fortement eutrophiss. Il sagirait de traiter des eaux charges en nutriments en y cultivant des micro-algues. Cette technique a pour objectif de capter les nutriments inorganiques apports par les effluents, et de crer des cotones assainies favorables la faune sauvage et laquaculture. La biomasse produite peut ensuite tre valorise dans le domaine nergtique, sous forme de biocarburant ou de biogaz, ou dans le domaine alimentaire comme la culture de Spiruline [1].
Cependant, ces plans deau eutrophiss ne sont pas des milieux de culture dont on peut contrler facilement les paramtres et les espces qui sy dveloppent.

Compte tenu de ces informations, nous cartons dfinitivement lutilisation des fermenteurs et des cultures fondes sur la phytoremdiation pour une culture de micro-algues grande chelle. Les bassins raceway et les photobioracteurs sont les deux mthodes qui nous paraissent les plus adaptes. Dans la partie suivante, nous allons comparer ces deux systmes plus prcisment. 1.1.2 Comparaison des deux systmes de culture slectionns Malgr de trs bons rsultats, les systmes artificiels prsentent linconvnient de toujours consommer de llectricit. Du fait des forts enjeux actuels concernant la consommation dnergie, il nous parat absurde de vouloir remplacer une consommation de ptrole par une consommation dlectricit, alors que lutilisation de lnergie solaire est possible, et quelle est infinie, renouvelable, et gratuite. On ne sintressera donc pas aux systmes artificiels. Le choix entre les deux mthodes de culture utilisant lnergie solaire est plus dlicat : le systme raceway ncessite des infrastructures plus simples et un investissement financier moins important que le photobioracteur. Les bassins de type raceway prsentent toutefois des points faibles non ngligeables : ces bassins tant ciel ouvert, la productivit peut tre affecte par des contaminations non dsires et la perte deau par vaporation peut jouer un rle significatif. De plus, le volume de biomasse produite y est moindre (plus de 13 fois suprieure dans un photobioracteur). La productivit tant un facteur particulirement important pour notre production (elle dterminera les surfaces ncessaires la production de nos 300 000 tonnes annuels), nous avons longuement hsiter nous tourner vers les systmes en raceway. Les systmes ouverts prsentent de nombreux dfauts en comparaison avec les systmes ferms. Nanmoins, ces contraintes peuvent tre rduites si lon souhaite cultiver une espce extrmophile, et si les conditions extrieures sont propices la culture. Les tempratures et lensoleillement du Sud de la France nous ont paru suffisamment favorables pour que ces dfauts ne se fassent pas trop ressentir. Surtout, il nous a paru intressant dutiliser un systme ncessitant peu dinfrastructures (tubes en plastique). Nous choisissons donc de nous porter vers un systme ouvert extrme, en raceway, pour lequel

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nous devrons trouver une espce extrmophile, adapte au milieu que nous choisirons, et pouvant produire une biomasse forte teneur en triglycrides. Bassin de type raceway Paramtres Risque de Fort, sauf pour les espces contamination extrmophiles Impacts des Important conditions extrieures Dimensions des Illimite racteurs Concentration en Faible biomasse Rapport S/V Faible (1 8) Refroidissement Non ncessaire (vaporation) Perte en CO2 Importantes Concentration en O2 Faible Eclairement Agitation Cot Dpendance totale aux conditions climatiques Ncessaire Elev Systmes Photobioracteur trs faible si le process est matris Faible Limite Eleve, jusqu 10 g L-1 Elev (de 20 100) Ncessaire Matrisables Eleve Possibilit dclairement en continu mais la source lumineuse est gourmande en nergie Ncessaire Faible modr

Tableau 1 : Comparaison des avantages et inconvnients des bassins de type raceway et des photobioracteurs [4]

1.1.3 Prsentation des marais salants Lors de notre rencontre avec Monsieur Daniel Mathieu, directeur de projet du ple Trimatec, ce dernier nous a informes que la socit des Salins du Midi est aujourdhui en qute de reconversion. Ils ont perdu leur client Arkema, alors que ce dernier achetait auparavant 300 000 tonnes de sel par an. Il prfre aujorudhui des sels de terre, dont les cots de production sont moindres.

Figure 5 : Photographies du sel produit sur des marais salants!

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Ainsi, sur les 14 000 ha des salins du Giraud, employant 128 personnes et produisant 770 000 tonnes de sel industriel par an, o 2000 ha ont t vendus au conservatoire du littoral (1" le m!) o 6000 ha sont conservs pour la production de sel o 6000 ha sont provisoirement en espace de gestion environnementale, et en attente de reconversion Ces marais salants sont constitus dun ensemble de bassins de faible profondeur, appels carreaux, dans lesquels est rcolt le sel, obtenu par vaporation de l'eau de mer, sous l'action combine du soleil et du vent. Le site des Salins de Giraud est en production de mars septembre seulement : de septembre fvrier, les prcipitations sont trop importantes pour pouvoir tre compenses par lvaporation de leau de mer. Il faut environ 4 mois pour saturer les eaux. Afin doptimiser la priode de production, des saumures satures sont mises en rserve au cours du mois de septembre, et seront rexploits partir de mars/avril. Les eaux suivent un cheminement complexe au travers des diffrents bassins, grce des systmes de canaux qui les conduisent au fil des mois vers les tables salantes.

Figure 6 : Dessin des marais des Salins de Giraud (sens de circulation des eaux) Figure 6 : Schma du fonctionnement des marais salants du salin de Giraud (13) La production de biocarburant tant une production de masse, la question du foncier est particulirement importante et dlicate grer (pour ne pas empiter sur des espaces de culture alimentaire, des zones dhabitation...). Nous nous sommes donc penches sur la possibilit dutiliser cet espace disponible pour la culture de micro-algues. Lexploitation de ces marais prsente de nombreux avantages : - la proximit des Salins de Giraud avec la zone industrielle de Fos-sur-Mer, grande productrice de CO2, et une zone daccs facile pour expdier nos productions et sapprovisionner en intrants (28 km du centre ville de Fos-sur-Mer au centre ville des Salins de Giraud). Il sagit dune des plus importantes plateformes portuaires dEurope.

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une technicit et un savoir-faire dans lindustrie salinire proches de ceux qui devront tre mobiliss pour la culture dalgues, notamment pour la gestion des circulations deau entre les bassins et du contrle de la salinit. Nanmoins, il convient de tenir compte de nombreux facteurs limitant, notamment dordre environnemental. La biodiversit prsente dans ces zones humides est spcifique et prcieuse. En particulier, une espce dalgue extrmophile adapte de fortes salinits se dmarque des autres : la Dunaliella Salina est prsente de faon quasiment exclusive dans ces bassins partir de 160 g de sel par litre, comme latteste la coloration rouge1 des marais. La valorisation dune partie de ce patrimoine foncier devra tre faite de manire consensuelle et compatible avec le caractre sensible de la Camargue. Figure 7 : Photographie arienne de marais salants contenant dimportantes quantits de D. salina 1.1.4. Choix de lalgue : Dunaliella salina

Comme nous lavons dj dit prcdemment, les micro-algues se trouvent en abondance dans les milieux aquatiques (ocans, rivires, lacs...). De plus, leur biodiversit est norme et constitue un rel potentiel pour la recherche et lindustrie. Des travaux en ce sens ont t initis la suite du choc ptrolier de 1973 par le National Renewable Energy Laboratory (NREL) et ont t arrts en 1996. A lpoque, les chercheurs estimaient que la production de biocarburant partir de micro-algues ne pourrait tre rentable que pour un baril de ptrole trois fois plus cher. Le baril tait alors 20$. Ces justifications ne sont plus valables lheure actuelle puisque le prix du baril est trs volatil, il est mont plus de 100$ en octobre 2008, et la prise de conscience des consquences de leffet de serre est de plus en plus forte. Le projet amricain Aquatic Species Program du laboratoire NREL avait pour objectif dtudier un aspect spcifique des micro-algues : leur capacit produire des huiles naturelles. Nanmoins, les recherches ntaient pas seulement concentres sur les algues produisant le plus dhuile, mais aussi sur les algues pouvant supporter des conditions extrmes en terme de temprature, de pH, de salinit. Aprs lavoir parcouru, il nous est apparu vident que la micro-algue runissant toutes les conditions ncessaires la production de biocarburant grande chelle nexistait pas. Mais daprs ce rapport, les espces les plus adaptes se trouvent parmi les Chlorophyces et les Bacilliarophyces. Ainsi nous avons dcid de slectionner lalgue en fonction du lieu demplacement de notre raffinerie. Comme il sagit des 6000 ha de marais salants et que ces milieux sont hypersalins, seule une algue halophile peut sy dvelopper. Nous avons slectionn la chlorophyce Dunaliella salina. Cest une algue verte unicellulaire, extrmophile, dont le milieu de vie existant est dj le marais salant. Sa taille varie entre 16 et 24 #m de long et
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couleur des marais salants varie selon la salinit et dpend des micro-organismes prsents dans l'eau. Elle peut aller du vert ple au rouge intense. Les marais dont la salinit est plutt basse auront une couleur verte du fait de la prdominance d'algues de cette couleur. Quand la salinit augmente, l'algue Dunaliella salina produit une teinte s'talant du rose au rouge. De petites crevettes voluant dans des eaux de salinit moyenne donnent une teinte orange aux marais. Des bactries comme Stichococcus contribuent galement aux teintes. Wikipdia

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entre 10 et 15 #m de large. La cellule peut tre de forme elliptique, cylindrique ou en forme de poire. Cette algue est connue pour ses proprits anti-oxydantes grce une concentration de 5% de matire sche en $-carotne. Le $-carotne est un important pigment vgtal, 10 fois plus actif que le $-carotne de synthse. Il est utilis comme colorant alimentaire, comme source de vitamine A dans lalimentation animale et humaine et comme additif en cosmtologie. Les carotnes inhibent les radicaux libres produits par les ultraviolets, grce leur potentiel antioxydant. Ils offrent ainsi une protection aux phospholipides membranaires des cellules de la peau. Ainsi pour se protger du stress oxydatif provoqu par laction conjointe dune salinit importante et dun rayonnement solaire lev, la Dunaliella salina rougit en produisant le $-carotne. La Dunaliella salina prsente plusieurs avantages, savoir un fort taux de croissance et lutilisation dune large fraction de lnergie solaire (avantages communs aux autres algues). Sa productivit est lune des meilleures par rapport aux cultures de micro-algues actuelles, en raceway ou en photobioracteur : cette productivit varie de 20 37 g/m!/j [5]. Ce qui la distingue est sa croissance dans un milieu hostile, la prsence de $-carotne qui pourra tre considr comme co-produit haute valeur ajoute du biodiesel ainsi quune quantit importante de glycrol. La rsistance au sel de la Dunaliella salina vient dailleurs de cette forte concentration en glycrol puisque le glycrol intracellulaire sert quilibrer osmotiquement le sel extracellulaire. Enfin cette algue possde une forte quantit de protines, slevant 53% de matire sche, et de sucres, 29% de matire sche. La teneur en lipides est le facteur important de notre tude, en vu de produire du biodiesel. Pour la Dunaliella salina, le pourcentage lipidique, tous lipides pris en compte, slve 15% de matire sche dont 4%2 de matire sche en triglycrides. Ce nest pas lalgue qui en produit le plus. Dunaliella tertiolecta, par exemple, possde 70% de lipides et Botryococcus Braunii, 75% [5]. Nanmoins, des tudes en laboratoire ont pu atteindre des teneurs en lipides de 67,8% de matire sche dont 56,6% de matire sche en triglycrides chez la Dunaliella salina [6]. Dautre part, il est possible daugmenter significativement la production de lipides par un stress. Les stress peuvent tre de diffrentes natures. Les conditions de carence en azote sont connues pour stimuler la production de triglycrides. En effet, la privation dazote arrte la croissance et la division cellulaire ; ainsi les cellules stockent leur nergie sous forme de triglycrides. Laugmentation soudaine de lintensit lumineuse produit un effet similaire. Enfin, un choc thermique, de mme quun choc osmotique stimule la production de lipides, mais il semble que ces deux derniers stress favorisent davantage les lipides polaires (glycolipides et phospholipides) associs aux membranes cellulaires. Ces conditions de fortes productivits ne peuvent toutefois pas tre maintenues pendant de longues dures : cela sera dtaill dans la partie concernant les conditions de culture (II.2.1). Aprs une carence en azote, on estime que notre micro-algue accumule 30% de matire sche sous forme de triglycrides contre 4% avant carence. En effet, au cours de la carence azote, ce sont principalement les triglycrides qui sont accumuls dans la plupart des algues. Bien que nous nayons pas eu accs aux diffrentes teneurs en lipides suite une carence, dans le cas particulier de D. Salina, on estime que cette algue suivra le mme schma que les autres algues sur lesquelles des tudes lipidiques ont t menes. De la mme manire que pour les triacylglycrides, la teneur de 5% de matire sche en $-carotne! augmente aprs carence 15% de matire sche.
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cf. Annexe 1 pour la justification de cette valeur.

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Avant Carence azote

Aprs

Lipides : 15% MS Lipides : 41 % MS Triacylglycrides : 4% Triacylglycrides : 30% MS MS $-carotne : 5% MS $-carotne : aprs 15% MS Figure 8 : Composition de Dunaliella salina avant et carence. Linconvnient concernant le choix de cette algue est la prdation : la Dunaliella salina est la principale cible de prdation dune microcrustace, lArtmia salina et dun palmipde, le flamant rose. Nanmoins, les prdateurs, comme lArtmia salina ou les crevettes, ne survivent pas des concentrations leves en sel, tout come les autres espces dalgues contenues dans leau de mer. 1.2. Application aux marais-salants 1.2.1. Structure des bassins Dtail de la configuration Pour les raisons voques prcdemment, nous utilisons des bassins de type raceway avec agitation mcanique pour notre production de Dunaliella salina. Il semble que lattrait pour ce type de bassin soit fond sur un compromis entre productivit et cot damnagement, plutt que sur une production optimise, mais aussi sur labsence dinnovation dans ce domaine.

Figure 9 : Bassins raceway pour la culture de Spiruline Ce bassin ouvert, lintrieur duquel leau circule une vitesse modre mais suffisante pour maintenir les cellules en suspension, ne doit pas comporter d'angles vifs, mais des formes arrondies aux extrmits.

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Figure 10 : Dessin de bassin raceway Une chicane mdiane facilite la circulation, mais il faut la complter par des chicanes d'angles (ou dflecteurs) redirigeant les flux des bords vers le centre.

Figure 11 : Photographie des chicanes Le fond doit tre aussi plan que possible. Les bords du bassin doivent tre au-dessus du niveau du terrain, pour rduire l'entre des poussires et des animaux. Dans un bassin, les algues les plus proches de la surface reoivent plus de lumire que celles au fond et si la densit cellulaire est leve, la lumire nest absorbe que sur les plus hauts centimtres ; cest pourquoi il faut maintenir des profondeurs aussi faibles que possible pour donner un maximum de lumire aux micro-algues. Cette profondeur est en fait un compromis entre latteinte dun optimum defficacit photosynthtique, les limites hydrauliques du systme dagitation et lobtention dune productivit maximale par unit daire du bassin. Nous avons donc choisi un niveau deau de 30 cm partir du fond du bassin, valeur gnralement choisie. Concernant la profondeur globale du bassin, il vaut mieux prvoir une profondeur suffisante pour encaisser les pluies et faciliter les transferts entre bassins et l'autopuration biologique du milieu de culture. La profondeur totale du bassin slvera 60 cm. 10 cm
Niveau du terrain

60 cm
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Figure 12 : coupe latrale dun bassin

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Surface de bassins Le cot d'investissement au m! dcrot quand augmentent la surface unitaire et le rapport surface/primtre des bassins. Par contre des bassins troits, dune largeur infrieure 3 m, sont plus faciles agiter. Par exemple, la surface des bassins ne dpassera pas 50 100 m! pour une production artisanale, 1000 m! pour un niveau "semi artisanal". A lchelle industrielle, la surface minimale slve 5000 m! [7]. De notre ct, nous avons valu la surface des bassins par rapport au dbit du systme de rcolte et lvaporation. Les bassins de division ont une surface de 8842 m!, tandis que le premier bassin de carence a une surface de 8171 m! et le second bassin de carence, de 8085 m! et le troisime, de 8000 m!. On est bien au-dessus de la surface minimale pour une culture industrielle vue prcdemment. Ces surfaces seront justifies ultrieurement dans la partie III. Matriaux du bassin Le bassin peut tre construit partir dune large varit de matriaux, tels des sols compacts, une fine couche de roche ou autre matriau rsistant lrosion dpos sur un sol impermable, du ciment, du bton ou des matriaux plastiques. Les diffrences entre ces matriaux concernent la rugosit, la stabilit, la permabilit, et la rsistance aux dfaillances. Le paramtre de rugosit, caractrise par le coefficient de friction de Manning, dtermine la fois la rsistance au mouvement de leau et le potentiel dagrgation des cellules. Des matriaux instables sont susceptibles de changer et de se tasser, pouvant affecter lorganisation hydraulique de lquipement. La permabilit ou les fissures peuvent entraner une perte en eau et en algue. De multiples dfauts, fissures au fond ou cassures sur les parois du bassin, conduisent des cots levs de maintenance et une perte de production [8]. Dans notre cas, nous pouvons utiliser largile des marais salants condition de garnir les rebords de tuiles, de briques cuites, ou de plastique pour viter les fissurations lors des baisses de niveau. De plus, laction du vent dans cette rgion nest pas sans effet. Selon lexprience des techniciens de marais salants, le vent fait dcoller largile du bassin peu profond et peut mme empcher momentanment la rcolte du sel. Enfin l'tanchit n'est pas complte avec largile puisque le taux dinfiltration est de 5mm/h ; nanmoins on peut lamliorer avec un film plastique mme trs mince. Nous utilisons donc largile des marais salants dans la mesure o nous recouvrons le fond et les bords des bassins dune fine couche de plastique [7]. Agitation des bassins Lagitation des bassins est ncessaire pour de multiples raisons. Elle vite lagrgation des cellules et leur dpt au fond du bassin. Lagitation empche la stratification thermique et oxygne, cest--dire la superposition de masses deau des tempratures et des teneurs en oxygne diffrentes. Enfin lagitation permet de faciliter laddition des nutriments et du CO2. Pour rsumer, lagitation amliore la productivit de micro-algues ; elle multiplie par dix la concentration maximale de Dunaliella salina atteinte dans un bassin non agit [8]. Trois outils dagitation existent : la pompe hlice, la roue aubes et la pompe air comprim. Voici un tableau comparant ces technologies sur des critres conomiques et defficacit de culture [9] :

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Pompe hlice Roue aubes Pompe air comprim Cot dinvestissement Modr Modr Modr Cot dexploitation Faible Modr Elev Dtrioration des cellules Elev Faible Faible Ncessit davoir une pompe Oui Non Oui Tableau 2 : Comparaison des diffrents modes dagitation des bassins raceway La pompe hlice dtriore les cellules, tandis que la pompe air comprim ncessite des cots opratoires levs. La roue aubes, quant elle, est un outil bon march, efficace, adapt aux bassins plus longs que larges et qui ne dtriorent pas les cellules de micro-algues. Nous avons donc choisi une agitation mcanique fonde sur lutilisation dune roue aubes motorise par bassin. Cette agitation peut tre continue avec un arrt de 15 minutes par heure ; cest ce qui est appliqu pour la culture de Spiruline. La nuit, l'agitation peut thoriquement tre arrte, mais une agitation continue nocturne (avec un arrt de 15 min/h) diminue les risques de grumeaux et amliore l'oxygnation du milieu, et ainsi son auto-puration.

Figure 13 : photographie dune roue aubes La roue aubes est installe sur un des cts entre le bord du bassin et la chicane centrale. L'axe de rotation repose sur deux roulements billes fixs sur des supports solides. Au droit de la roue la largeur du canal peut tre rtrcie sans inconvnient; au contraire cela permet de renforcer les supports et de raccourcir la roue donc de la rendre plus solide. La roue comprend 6 pales solidement maintenues sur des disques solidaires de l'axe et de diamtre voisin de 80 cm. Pour minimiser les dgts causs aux micro-algues, il est bon d'arrondir le bord d'attaque des pales. La construction de la roue aube doit se faire en plastique (PVC rigide d'paisseur 4 mm ou plus) en raison de la corrosion due la forte salinit. L'axe est gnralement mtallique ; par consquent il faut prvoir son remplacement ainsi que celui des roulements billes qui le supportent. La roue est entrane par un moteur, plac lextrieur du bassin, dune puissance utile de 1 Watt/m! de bassin. La distance entre le bas des pales et le fond du bassin doit tre faible, mais suffisante pour ne pas risquer de toucher le fond ni d'endommager les micro-algues ; 5 cm parat correct [7]. Etant donn le schma prsentant la profondeur du bassin, la hauteur des pales doit se situer autour de 40 cm.

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40 cm

Pale

10 cm

Niveau du terrain

60 cm
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5 cm Figure 14 : schma dun bassin avec les dimensions Des tudes montrent que la vitesse dagitation de la roue aubes est fonction de laire et de la profondeur du bassin. Voici un graphique reprsentant la relation entre les trois grandeurs, dfini pour un bassin ouvert avec un canal dune largeur de 6 m construit avec un matriau de rugosit gale 0,015 [8].

Figure 15 : Relation entre la vitesse dagitation appliquer au sytme et la taille des bassins Etant donn le critre prcdent concernant la largeur du canal prise pour tablir le graphique prcdent, nous fixons les dimensions de nos bassins. Chaque bassin aura une largeur de canal de 6 m, soit une largeur totale de bassin gale 12 m. De plus, le coefficient de Manning ou coefficient de rugosit dun film plastique sur un sol granuleux, comme largile atteint 0,012. Lcart par rapport au coefficient utilis pour tablir le graphique prcdent est suppos ngligeable.

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Tableau 3 : Valeur du coefficient de Manning en fonction du matriau du bassin Ainsi nous pouvons utiliser les donnes du graphique pour dterminer la vitesse dagitation. Dans le cas des bassins de division, laire est de 0,8842 ha pour un niveau deau de 30 cm ; la vitesse dagitation applique est donc de 28,0 cm.s-1. Pour le bassin de carence C1, laire est de 0,8171 ha pour un niveau deau de 30 cm ; la vitesse dagitation est de 29,5 cm.s-1. Le bassin de carence C2 a une aire de 0,8085 ha pour un niveau deau de 30 cm ; la vitesse dagitation est de 29,7 cm.s-1. Enfin le bassin de carence a une surface de 0,8000 ha pour un niveau deau de 30 cm ; la vitesse dagitation est de 30 cm.s-1. 1.2.2. Paramtres du milieu de culture. Afin dobtenir une quantit de lipides exploitable satisfaisante, il convient de fournir la culture lensemble des lments nutritifs qui lui sont ncessaires. On dtaillera dans cette partie lensemble des lments ncessaires la culture, leur nature et les quantits auxquelles ils devront tre apports. Ces quantits tant directement dpendantes de la productivit du systme, on dtaillera dans un premier temps quelles sont les quantits que lon compte produire par jour. Notre systme de production tant soumis aux variations climatiques du site, on dtaillera galement lensemble des paramtres suceptibles dinfluer sur le systme. Productivit attendue du systme ! Valeurs de productivit sur dautres sites Sur des sites de production de bta-carotne par Dunaliella Salina, il est possible dobtenir des productivits comprises entre 20 et 37 g/m!/jour Ces valeurs correspondent un site Australien, en raceway, sous climat subtropical [5]. Le climat mditerranen que lon trouve Giraud nest videmment pas aussi favorable quun climat subtropical. Nanmoins, du fait que lon apportera au systme lensemble des composants ncessaires une croissance optimale, et notamment du CO2 dissous, on considrera que lon atteindra cette productivit de 37 g/m!/jour. Nous ne possdons pas de donnes concernant les conditions de nutrition dans les bassins de ce site Australien, mais il est vraisemblable quil ny ait pas dalimentation carbone. ! Partition de la production de biomasse en deux phases de croissance, par division puis par accumulation On a vu dans la description de D. Salina ( 1.1.4), quen conditions habituelles cette algue possde des teneurs leves en sucres et en protines. Il nous est impossible de crer des conditions favorables laccumulation de lipides et de pigments par un stress jouant sur lintensit lumineuse, car elle est totalement dpendante des conditions extrieures. Comme les lipides souhaits pour la production de biodiesel sont les triglycrides, on envisage
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deffectuer une carence en azote, qui conduira une augmentation des teneurs en triglycrides et bta carotne. Il convient donc de distinguer la production en deux phases : - phase de croissance par division cellulaire, durant laquelle on fournit lensemble des ressources ncessaires la croissance (et notamment N, P et CO2), permettant dobtenir une concentration leve dalgues dans le milieu - phase de carence au cours de laquelle les bassins sont privs dazote. Laccumulation de biomasse est alors obtenue par stockage de molcules de rserve, et non plus par division des cellules. A lissue de cette phase, on estime 15% de la matire sche la teneur en btacarotne, et 30% la teneur en triglycrides Ainsi, au cours de la phase de carence, on prvoit un gain de 26% de triglycrides3 et de 12 %4 de bta-carotne, soit la production de 38 % de la biomasse par accumulation de molcules de stress. Cette partition de la production de la biomasse sera particulirement importante pour dfinir la quantit de nutriments apporter dans lune ou lautre des deux phases, et reprsente la proportion selon laquelle seront rpartis les bassins de production. La phase de carence ne doit pas durer trop longtemps, pour ne pas conduire la reconsommation des rserves lipidiques de la biomasse. Une priode denviron 2 jours est recommande [5]. ! Concentration en biomasse dans les bassins de culture Les concentrations en biomasse en bassins de culture ouverts sont gnralement de lordre de 0,1 0,5 g/L [10]. En optimisant les quantits dintrants fournis dans le systme, on peut atteindre des concentrations de lordre de 1g/L (source !). Dans notre cas, on se fixe cette dernire concentration comme objectif de production. Au premier jour de la culture, il est ncessaire quune certaine quantit dinoculum soit prsente dans le bassin afin de pouvoir atteindre la productivit de 37 g/m!/jour. Afin de dterminer cette quantit, on sest bas sur le temps de division de lalgue : tant donn quil faut 8h source !) pour doubler la population, on peut doubler 3 fois la population en 24h, do une quantit initiale ncessaire de 4,625 g de biomasse par m! au minimum5. A partir de ce premier jour o lon atteint la productivit souhaite, on estime que cette dernire peut rester constante. Il faut en thorie6 5 jours pour atteindre une concentration de 0,63 g/L7. Cette concentration reprsente bien environ 62% de notre objectif. La culture devra donc rester 5 jours en phase de croissance par division cellulaire. Sachant que 38% de la biomasse doit tre produite au cours de cette phase, nous avons choisi deffectuer une phase de carence de 3 jours, ce qui correspond une productivit8 de 37,8 g/m!, soit sensiblement la productivit que nous nous sommes fixs pour objectif. Phase de division
3

Phase daccumulation

30% de triglycrides lissue de la carence, auxquels on soustrait la part des triglycrides dans les 15% de lipides initiaux (soit 4%*15% de la MS totale) 4 15% de bta-carotne lissue de la carence, auxquels on soustrait les 3% de btacarotne dans la MS initiale 5 Quantit souhaite (g/m!) = concentration initiale dinoculum (g/m!)*2 nombre de divisions par jour, do concentration initiale dinoculum (g/m!) = 37/23=4,625 6 Cette donne nest que thorique, puisquen ralit, lvaporation intervient dans les bassins et la concentration sera donc plus leve. Ce paramtre sera pris en compte ultrieurement, lorsque la taille des bassins aura t dtermine 7 Avec une profondeur de 30 cm dans les bassins 8 Productivit en phase daccumulation (g/m!) = Concentration lissue des 5 jours de phase de division (g/m!)* ration entre accumulation et division cellulaire/nombre de jours en carence, avec la concentration lissue des 5 jours gale 5 fois la productivit journalire auxquels il faut retrancher la quantit dinoculum qui sera rinjecter dans le circuit

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Productivit (g/m!/jour) 37 37,8 Dure (jours) 5 3 Proportion dans la croissance 62% 38% Tableau 4 : Rcapitulatif des donnes culturales de base calcules Alimentation carbone et remdiation des fumes dusine ! Systme dalimentation en CO2 Le dioxyde de carbone est prsent dans latmosphre de trs faibles concentrations, savoir 0,03% en volume dair sec. Ainsi un flux passif de CO2 atmosphrique au dessus de la surface des bassins nest pas adapt pour fournir la quantit de CO2 requise pour une production intensive. Pour une productivit de 25 g/m!/j de biomasse algale sche, la culture aurait besoin chaque jour de tout le CO2 atmosphrique contenu dans les 50 mtres au dessus de la surface. Si on faisait buller de lair dans ce milieu de culture, il faudrait des centaines de mtres cube dair par m! de culture et par jour. Pour ces raisons, il faut ajouter du CO2 concentr. Nanmoins, deux facteurs limitent lefficacit avec laquelle le CO2 est fix sous forme de carbone organique par le systme de micro-algues. Le premier facteur concerne les pertes de CO2 vers latmosphre la surface du bassin. En effet, si laddition de CO2 atteint une concentration suprieure la concentration dquilibre avec latmosphre, dimportantes quantits de CO2 sont perdues. Pour limiter ce phnomne, on peut utiliser une forme dissoute du CO2, notamment des sels de bicarbonate ; mais cette possibilit semble peu probable puisque les sels de bicarbonate entranent une augmentation de lalcalinit. Le second facteur limitant est lefficacit avec laquelle le CO2 peut se dissoudre dans leau avant de schapper dans latmosphre. Par exemple, si le CO2 est ajout sous forme de bulles, de grandes quantits peuvent tre perdues lorsque les bulles clatent la surface. Une autre alternative consiste ajouter le CO2 sous forme de petites bulles dans une colonne contre-courant o le CO2 remonterait la colonne tandis que leau la descendrait. Mais cette technique utilise une pompe effet Venturi qui risque de dtriorer les cellules. Nous dcidons dajouter le CO2 concentr sous forme de bulles en estimant les pertes 50% du dbit inject. Ce coefficient de perte est choisi volontairement bas, mais pourrait tre amlior avec des techniques de dissolution sous pression. ! Les fumes de Fos-sur-Mer, source de CO2 bioremdier Un enrichissement en CO2 est indispensable pour augmenter la productivit en biomasse algale. Pour obtenir des quantits suffisantes de CO2, il est possible de coupler des bioracteurs des centrales thermiques, ou autres industries gnratrices de CO2. La proximit de la zone industrielle de Fos-sur-Mer (28 km des Salins de Giraud) permet denvisager une alimentation des bassins par des pipes provenant des chemines dusine. De plus, les centrales peuvent aussi fournir des oxydes dazote (NOx) assimilables par les microalgues pour leur nutrition. Lentreprise GreenFuel Technologies a ainsi conu voici quelques annes un photobioracteur tubulaire triangulaire pour la production dhuiles de microalgues (figure 4) : un mlange gazeux 13% de CO2 et de NOx est inject dans le bioracteur et le gaz ressort purifi. Les systmes actuels arrivent dpolluer 82,3% du CO2 12,5% par temps ensoleill, ou au pire 50% 6,5% par temps pluvieux. Pour les Nox, les taux de dpollution peuvent atteindre 86% [1].

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! Dimensionnement de lalimentation en CO2 Un kg de biomasse reprsente, en moyenne, 1,83 kg de CO2 fix9. La quantit fournir est donc directement lie la productivit10. Le systme de solubilisation dans le milieu de culture, principalement sous forme de bicarbonate et de CO2 dissous, doit tre optimis pour limiter les pertes de CO2 dans latmosphre. On apportera le CO2, une teneur de 13%, sur lexemple de lentreprise GreenFuel, en tenant compte dun coefficient de perte vers latmosphre de 0,5%, on obtient les dbits suivants : Phase de Phase division daccumulation Productivit en biomasse (g/m!/jour) Quantit de CO2 ncessaires la culture (g/m!/jour) Flux de dioxyde de carbone journalier (g/m!/jour), en tenant compte des pertes Flux de dioxyde de carbone journalier (L/m!/jour) Flux de gaz11 journalier (L/m!/jour) 37 67,71 135,42 77,38 595 37,8 69,24 138,50 79,13 608,69

Tableau 5 : Quantits de carbone ncessaires par units de surface La valeur thorique limite, correspondant un rendement photosynthtique de 9.9%, est une fixation de 164 g/m!/jour sous le climat que lon trouve Nice [5]. La quantit que nous apportons tant bien infrieure cette valeur, nous avons la confirmation que la productivit que nous avons choisi correspond effectivement une valeur envisageable sous ce climat. Le CO2 dissous tant un acide faible, son ajout dans le milieu de culture conduit une diminution de pH. Il est important de rgler le dbit de CO2 de manire rester dans des gammes de pH non inhibantes pour la croissance des cellules (optimum pH 9 [8]). Il sagira dun indicateur de la bonne croissance des algues : si le pH diminue trop, cela signifie que tout le CO2 na pas pu tre assimil par les microalgues, et donc que leur croissance est ralentie par rapport la croissance thorique.
Alimentation en sels inorganiques ! Alimentation en azote et phosphore

La culture doit tre alimente par 10 kg de phosphore et 100 kg dazote par tonne de biomasse produite. Les nutriments azots peuvent tre apports soit sous forme de nitrate, soit sous forme dammonium. Des expriences ont montr que lalimentation par des ions ammonium conduit une rallocation du carbone des hydrates de carbone vers les protines et les pigments, ce qui peut tre intressant pour favoriser la production de bta-carotne. Par
9

Il est important de garder lesprit que fixer le CO2 ne veut pas dire le piger. Il faut ensuite rutiliser, voire piger ce carbone devenu organique, avant que la biomasse se dcompose ce qui produirait CO2 et mthane, et induirait donc des rendements en terme de gaz effet de serre ngatifs lchelle du mois (le mthane a un effet de serre estim 23 fois celui du CO2 sur un horizon temporel de un sicle). Fixer le CO2 industriel implique donc une production de carbone organique dans les mmes volumes qui doivent donc tre rutiliss ou enfouis. La valorisation nergtique de la biomasse est bien videment une voie privilgie au cours de laquelle le CO 2 fix sera finalement rmis (ce procd sera donc neutre par rapport aux gaz effet de serre) aprs avoir restitu une partie de lnergie solaire accumule. 10 Quantit de CO2 ncessaire (g/m!/jour) = Quantit de biomasse produite (g/m!/jour) * 1,83*(1/taux de perte) 11 Volume massique du CO2 = 0,57 L/g

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ailleurs, lassimilation de NH4+ est plus favorable nergtiquement que celle de NO3- ; mais il faut garder lesprit quune concentration en NH4+ trop importnate peut tre nfaste pour la culture, et favorise la respiration la nuit [11]. Il est donc difficile de dterminer quelle est la source azote la plus favorable la culture des D. salina. On exprimera donc les quantits ncessaires en lment azote, sans dtailler de quelle molcule il sagit. Phase de division Besoins en azote (g/m!/jour) 3,7 Besoins en phosphore (g/m!/jour) 0,37 Tableau 6 : Quantits dazote ncessaires par unit de surface ! Carence azote Aucun apport de phosphore ni dazote ne sera effectu durant la phase de carence. Nanmoins, nous navons pas connaissance des teneurs en Nox contenues dans les fumes dusine que nous utiliserons. Du fait quil est indispensable de ne pas avoir dazote en solution au cours de la phase de carence, nous approximerons que la quantit de Nox introduite dans le systme est ngligeable par rapport aux besoins en azote des cultures. Cette information serait vrifier pralablement auprs des industriels fournissant le CO2. Si la quantit est effectivement ngligeable, il ny a alors pas de problme pour alimenter les bassins en rsidus de fumes quelle que soit la phase de croissance. Si au contraire elle ne lest pas, il faudra soit fixer un seuil maximal de teneur en Nox au-del duquel on nacceptera pas les fumes pour alimenter les bassins, soit ddoubler le systme dalimentation en fumes en un rseau forte teneur en Nox en parallle un rseau teneur en Nox ngligeable. Ce ddoublement permettrait dassurer la remdiation dune quantit importante de Nox pendant la phase de croissance, tout en rduisant la quantit de fertilisants azots apporter dans le systme pendant cette phase. Ceci ne serait faisable que dans la mesure o le taux de perte serait beaucoup plus rduit que celui que nous avons choisi ici, afin de ne pas laisser schapper 50 % des Nox prsents dans les fumes. Nanmoins, il poserait le problme dun double rseau de pipes installer. En labsence de donnes concernant les compositions des fumes remdier Fos sur Mer, on considrera dans la suite du projet que la teneur en Nox est ngligeable. Climatologie Mois Jan F Mar Avr Mai Juin Juil. v s 244 292 326 366 Aot Sept Oct. Nov Dc Total . . . ann e 327 254 204 155 143 2835

nombre moyen 150 15 215 d'heures 5 d'ensoleillement Tempratures moyennes (C)

6,5 7,5 10,4 13,0 17,0 20,7 0 47 0 42 0 27

23,6 0 13

23,2 0 29

20,1 15,8 10,7 7,3 14,6 0 46 0 77 2,1 7,1 25,8 58 55 544

nombre de jours de 9,1 5,7 1,8 gel Moyennes mensuelles 47 54 43 de prcipitations (mm)

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Tableau 7 : Relevs des prcipitations et heures d'ensoleillement Marseille-Marignane 1961-1990 [wikipdia] La productivit de la culture est directement lie lensoleillement, la source dnergie permettant de transformer les matires inorganiques en matire organique tant les photons. Il est trs irrgulier en climat mditerranen, et videmment plus important en t. La temprature joue galement un rle important, puisque le froid ralentit le mtabolisme des microorganismes. Compte tenu des jours de gel doctobre mars, du nombre dheures densoleillement faible de novembre fvrier, et des fortes prcipitations qui dilueraient les systmes de culture doctobre fvrier, on choisit une priode de production qui stale de mars octobre, soit 8 mois de production effective (240 jours). Salinit En laboratoire, les taux de croissance optimaux pour D. salina sont obtenus avec des teneurs en sel de 0,5 M (quivalent de la teneur en sel moyenne de leau de mer) [12]. Nanmoins, en systme ouvert, cette teneur ne conduit de bonnes valeurs de productivit, du fait quelle ne permette pas llimination des autres espces prsentes dans le milieu. En pratique, les teneurs pour les systmes de production les plus performants sont de lordre de 2 M, soit 12% w/v de sel dans leau (ou 116 g/L) [13] et peuvent aller jusqu 25 % [10]. Ces donnes correspondent galement ce qui est observ dans les salins, o les algues sont particulirement dveloppes pour des teneurs de lordre de 160g/L de sel. On cherchera donc rester sur une valeur de 116 g/L de NaCl. Les dbits dans les diffrents bassins seront calculs de sorte que la salinit reste stable : les entres deau de mer peu sale (29 g/L de Nacl dans leau de mer, et une teneur en sels totaux de 36 g/L) devront compenser la forte vaporation ayant lieu sur le site (fort ensoleillement et vent). Il y a 1700 mm vapors par an, contre 545 mm de prcipitations, soit une vaporation nette annuelle de 1155 mm. Cette valeur annuelle revient une augmentation journalire denviron 1,24 g/L de NaCl par mtre carr de bassin et par jour (dtail du calcul au paragraphe 3.1.3), et une partie de leau obtenue en sortie de rcolte sera rinjecte dans le systme. En cas de trs fortes chaleurs ou de forts vents, laccumulation de sels dans le systme de production ne devrait donc pas poser problme.

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2. De lorganisation dune ligne lorganisation de lexploitation de Dunaliella salina

2.1. Organisation dune ligne 2.1.1. Nombre de bassins et explication de leurs dimensions Nous nous sommes fixes 5 jours de croissance de manire obtenir une concentration raisonnable de micro-algues en sortie de culture, savoir environ 1g/L. Pour des soucis de logistique, nous dcidons dinstaller 5 bassins de division correspondant aux 5 jours de croissance ; ce qui signifie que pour un cycle dune solution dalgues donne, le temps de rsidence dans chaque bassin de division, not Di, est dune journe. Dautre part, la carence dure 3 jours ; selon le mme principe que pour la croissance, nous installons donc 3 bassins de carence, nots Ci, et le temps de rsidence dans chaque bassin est dune journe. Suit la rcolte, note R, en fin de culture. Bassin de division 1 Bassin de Bassin de Bassin de Bassin de division carence 1 carence carence 3 ...... 5 2 Figure 16 : Schma reprsentant une srie de bassins

Comme nous lavons expliqu prcdemment, la profondeur dun bassin est de 30cm. Les dimensions sont fixes partir du dbit de rcolte en fin de culture ; ce dbit slve 300m3/h. Nous dcidons de rcolter la nuit, cest--dire en moyenne pendant 8 heures. Dterminons les dimensions du bassin C3. Dbit de R Nombre dheures de rcolte 300 m3/h 8h Volume du bassin C312 Profondeur 2400 m3 0,3 m Surface de C3 8000 m!

Dsormais nous allons dterminer les dimensions des autres bassins. Pour cela, il faut tenir compte de lvaporation dans les bassins. Connaissant lvaporation annuelle des marais ainsi que les prcipitations annuelles dans la rgion, nous pouvons dterminer lvaporation nette annuelle. Nous avons dcid que la surface des 5 bassins de division serait la mme et pour simplifier les calculs de dimensionnement, elle slverait pour le moment 1 m!. Nous aurons ainsi les rapports de surface entre bassin de division et bassins de carence et connaissant dj la surface de C3, nous pourrons remonter celle de C2, de C1 et des Di. Ainsi nous pouvons calculer le volume net vapor par jour pour 1 m! de bassin de division.

12

Les cases colories correspondent aux valeurs calcules.

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Evaporation annuelle Prcipitations annuelles

1700 mm/an 545 mm/an Evaporation nette annuelle Surface hypothtique de D 1155 mm/an Volume net vapor pour 1 m! de D 0,0032 m3/jour

1 m!

Au cours des 5 jours de croissance, chaque contenu de bassin D est transfr dans le suivant dans sa globalit. Mais daprs la partie concernant la productivit (II.2.2.1), la part maximale en volume transfrer de D5 C1, au bout des 5 jours de croissance, est de 40/41. Surface hypothtique de D Profondeur 1 m! 0,3 m Volume du bassin D Volume net vapor pour 1 m! de D 0,3 m3 0,0032 m3/jour Volume de D5 aprs vaporation 0,28 m3 Proportion transfre de D5 C1 Surface de C1 Profondeur Volume net vapor pour 1 m! de D 0,924 m! 0,3 m 0,0032 m3/jour Volume de C1 initial Volume vapor en C1 0,28 m3 0,00292 m3
(0,92*0,0032)

40/41

Surfac e de C1

0,924 m!

Volume de C1 aprs vaporation

0,274 m3

Puis le bassin C2 est transfr dans sa globalit C3. Volume de C2 aprs vaporation Profondeur 0,271 m3 0,3 m Surface de C3 Profondeur Volume net vapor pour 1 m! de D 0,904 m! 0,3 m 0,0032 m3/jour Volume de C3 initial Volume vapor en C3 0,2741 m3 0,00286 m3 Volume de C3 aprs vaporation 0,269 m3

(0,904*0,0032)

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Ainsi pour 1m! de surface de Di, la surface de C1 est de 0,924 m!, la surface de C2 est de 0,914 m! et la surface de C3 est de 0,904 m!. Ces informations nous permettent de dterminer les surfaces relles des bassins partir des 8000 m! de C3. Surface de 8000 m! C3 Rapport C2/C3 pour 0,914/0,904 1m! de D

Surface de C2 Rapport C1/C2 pour 1m! de D

8085 m!

0,924/0,914

Surface de C1

8171 m!

Rapport D/C1 Surface 1/0,924 8842 m! pour 1m! de D de Di Comme nous lavons expliqu prcdemment, nous fixons la largeur dun bassin 12m. Voici les longueurs des diffrents bassins. Di C1 C2 C3 Surface 8842 m! Surface 8171 m! Surface 8085 m! Surface 8000 m! Largeur 12 m Largeur 12 m Largeur 12 m Largeur 12 m Longueur 737 m Longueur 681 m Longueur 674 m Longueur 667 m Tableau 8 : Rcapitulatif des dimensions choisies pour les diffrents bassins de culture 2.1.2. Positionnement des bassins Comme il y a 8 bassins lis entre eux, il faut transfrer chaque jour de nombreux volumes laide de vannes et de canalisations. Nous avons dcid dutiliser la pente des marais salants pour faciliter ces transferts. Par suite, le bassin D1 est le plus proche de la mer tandis que le dernier bassin C3 est le plus avanc dans les terres. Marais salants Mer D1 C2 D2 C3 Figure 17 : Positionnement des bassins par rapport la mer Le fond de tous les bassins est plan, mais la position dun bassin par rapport un autre est en tage comme suit.
10 cm

D3

D4

D5

C1

$,!-.!

$,!-.! 60 cm

Figure 18 : Positionnement de deux bassins successifs en coupe latrale

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De ce fait, le dnivel entre chaque bassin est de 30 cm ; ainsi le dnivel pour les 8 bassins slvera 2,4 m. Or daprs les longueurs de chaque bassin calcules prcdemment et sachant que les bassins sont espacs dun mtre, la longueur totale slve 5714 m. On en dduit une pente 0,04%. Cela montre que la pente pour notre installation est convenable, puisque mme si nous ne connaissons pas celle des marais salants elle reste faible. Pour dterminer le dbit des vannes permettant les transferts entre bassins, nous nous sommes fixs une dure globale de transfert de 35 minutes. Comme il y a 7 transferts raliser en 35 minutes, chacun durera 5 minutes. Connaissant les volumes des bassins, nous pouvons dterminer le dbit de chaque vanne (note Vi). V1 V5 V6 V7

D1 C3 Volume net vapor pour 1 m! de D Surface de D1

D2

D5

C1

C2

Figure 19 : Reprsentation des canalisations sur une srie de bassins 0,0032 m3/jour Volume net vapor en D1 par jour Volume de D1

8842 m!

28,0 m3 Volume de D1 aprs vaporation Temps dun transfert en minute

2653 m3

2625 m3 5 Dbit de V1 525 m3/min

Ce dbit est particulirement important, et srement non ralisable. Ce sera un point limitant de notre tude. Pour limiter la perte despace, une ligne de bassins reprsente 16 bassins, cest--dire que le bassin D1 est accol un bassin D1, le bassin D2 est accol un bassin D2, et ce jusquau bassin C3.On prendra garde de les accoler de manire ce que le moteur de la roue aubes se trouve sur chaque extrieur ; par consquent les bassins accols ont un sens de circulation de leau oppose. Marais salants D1 C3 Mer D2 D3 D4 D5 C1 C2

D1 C2
!

D2 C3

D3

D4

D5

C1

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Figure 20 : Reprsentation dune ligne de bassins On prvoit un espace de 2m entre chaque ligne de 16 bassins. 737 m ...... 737 m m 667 m Lign e1

681 m

674

2m Lign e2 1m Figure 21 : Reprsentation de 2 lignes de bassins 3.1.2. Gestion des flux. Flux deau sale ! Dtermination de la salinit dans les diffrents bassins. Le calcul de la salinit se fait partir de la relation suivante : Salinit en sortie au jour j : Sj, sortie = Sj, entre*Vj, entre (avec Vsortie =Ventre-Vvap) Vj, sortie = Sj-1, sortie* Vj-1, sortie Vj, sortie En remplaant au fur et mesure = Sj-2, sortie* Vj-2, sortie* Vj-1, sortie Vj-1, sortie * Vj, sortie On peut simplifier = .. = S0* V0 -1, avec S0 la salinit souhaite de 116g/L V0-j*Vvap La salinit augmente donc denviron 1,24 g/L/jour, quelques centimes prs qui varient du fait que les volumes vapors sont variables selon les types de bassin. A la fin de la chane de bassins, on arrive une salinit de 126,13 g/L de NaCl. Cette valeur est largement compatible avec le seuil de tolrance de lalgue. Afin de garder le systme de production une valeur de salinit stable au cours du temps, il est ncessaire de ralimenter les bassins de division avec de leau sursale. Pour ce faire, on ralise un recyclage dune partie de leau issue de la rcolteuse vers le premier bassin de division ! Recyclage de leau issue de la rcolteuse pour saliniser les eaux en entre de ligne Pour maintenir le systme S0=116 g/L, il faut dterminer quelle est la proportion deau issue de la rcolteuse rinjecter dans le systme. On sait que la salinit S0 doit tre obtenue par mlange entre de leau de mer nouvellement prleve, de leau recycle provenant de la rcolteuse et de leau provenant de linoculum prlev dans le dernier bassin de division, chacune de ces eaux tant chacune des valeurs de salinit de Smer = 29 g/L, Sfinale = 126 g/L et Ssortie du bassin de division 5 = 122 g/L. Par ailleurs, on sait que la part xi provenant de linoculum reprsente 1/41me du bassin de division quelle rensemencera. Il faut donc rsoudre le systme dquation suivant : xmer * Smer+ xrecycl * Sfinale + xi * Ssortie du bassin de division 5 = S0 xi = 1/41 * (xmer + xrecycl + xi) 12 m

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do xr = S0 40 * xi * Smer - xi * Ssortie du bassin de division 5 = 87,2 % et xmer = 10,3 % Sfinale - Smer Bien sr, cette volution de la salinit nest que thorique, et correspond des valeurs dvaporation moyennes tout au long de lanne. Il conviendra donc deffectuer un contrle en sortie de la rcolteuse pour ajuster le taux de recyclage la valeur de salinit relle. Pour pouvoir rintroduire ces eaux, il faut placer des bassins tampons assurant le stockage de leau qui sort de la rcolteuse. On a choisi dutiliser des bassins tampons cylindriques. Du fait que la largeur dun canal de bassin mesure 6 m de large, nous avons d nous limiter un rayon de 5,97 m, et nous avons choisi de les remplir sur une hauteur de 3 m, soit une capacit de contenance de 336 m3. Cette valeur nous a paru tre un bon compromis pour un bon gain de place, tout en limitant le travail exercer pour monter les volumes deau en hauteur. Les bassins tampons sont disposs en srie, avec des systmes de canalisation qui les relient, servant de systme de surverse : une fois le premier bassin tampon reli la rcolteuse rempli, leau atteint une hauteur de 3 m, et se dverse alors dans le second bassin par le biais de la canalisation, et ainsi de suite jusquau septime et dernier bassin. Ces bassins permettent de stocker lintgralit de ce qui sort de la rcolteuse (en cas de fortes pluies, on a alors une certaine rserve de salinit rinjecter dans les bassins). Le surplus sera systmatiquement rejet dans la mer. On pourrait mme envisager un systme dalimentation vers les autres bassins que le premier bassin de division, pour pallier dventuels problmes. Flux de nutriments On a vu dans le paragraphe 1.2.2 que lon doit introduire du CO2, de lazote et du phosphore dans le systme. A raison de 240 jours par an, et sur des surfaces utiles de bassin de division et de carence de 3 510 et 1925 ha, on obtient les quantits suivantes : CO2 Quantit journalire introduire par srie (kg/jour) 9350 N 164 P 16,4

7420 dont 4754 dans les bassins de Quantit journalire 130 dans les bassins 13 dans les bassins division et 2667 introduire (T/jour) de division de division dans les bassins de carence Quantit annuelle 1 780 980 31 171 1931 introduire (T/an) Tableau 9 : Rcapitulatif des quantits de fertilisants fournir sur lensemble du systme de production Ces quantits sont trs leves, dautant plus quon a considr que le CO2 schappe pour moiti des bassins de production. En ce qui concerne les engrais azots, il sagit de molcules dont la production est nergivore, et le phosphore est en voie dpuisement. On pourrait penser un potentiel recyclage des rsidus dalgues obtenus en fin de production, et potentiellement riches en N et P. Cela voudrait dire que lon nenvisage pas la production de molcules organiques azotes et phosphates dintrt, telles que des engrais pour le sol ou des complments alimentaires pour btail. Ces secteurs sont pourtant fortement demandeurs. 3.2. Organisation de lexploitation

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3.2.1. Dimension totale de lexploitation Voici un rcapitulatif des dimensions et un calcul de dimension sur lexploitation globale : Longueur Di 737 m Nombre de Di 5 Total Longueur 5Di 3685 m Longueur C1 681 m Longueur C2 674 m Longueur C3 667 m Sous-total 1 5707 Diamtre bassin tampon 12 m Nombre de bassin tampon 7 Sous-total 2 5791 m Diamtre colonne de rcolte 2 Ecarts 1m Nombre dcart 15 Total Longueur ligne 5807 m Largeur bassin 12 m Nombre de bassins sur une ligne dans le sens de la largeur 2 Largeur dune ligne 24 m Ecart entre deux lignes 2m Total Largeur ligne 26 m Surface des marais salants 6000 ha Total Longueur exploitation 5807 m Longueur de cte mer/marais salants 10332 m Total Nombre de lignes dans lexploitation 397 Tableau 10 : Rcapitulatif des dimensions lchelle de lexploitation

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3.2.2. Production totale de triglycrides Pour une srie (8 bassins de culture) : Volume de C3 aprs vaporation 0,269 m3 pour 1 m! de surface de Di Surface de Di 8842 m! Volume de C3 aprs vaporation Part du volume rcolt Concentration dalgues en sortie de culture Rcolte 2375 m3 1% Volume de solution dalgues 23,75 m3

1,075 g/L Concentratio n dalgues en entre de rcolte Taux de rcolte

100 fois

107,5 g/L Concentratio n dalgues en sortie de rcolte Volume de solution dalgues

85%

91,4 g/L 23,75 m3 Masse dalgues en sortie de rcolte par jour 2170,5 kg

Pour une ligne (16 bassins de culture): La masse dalgues en sortie de rcolte par jour correspond au double de la masse issue de la demi-ligne, soit 4341 kg. Masse dalgues en sortie de rcolte par jour et par ligne Nombre de lignes 4341,1 kg Masse dalgues en sortie de rcolte sur lexploitation par jour Nombre de jours de production 1723,4 tonnes Masse dalgues en sortie de rcolte sur lexploitation par an

397

240

413615,7 tonnes

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Enfin, on dtermine la quantit de triacylglycrides (not TAG). Masse dalgues en sortie de rcolte par jour et par ligne Taux de TAG aprs carence Masse dalgues en sortie de rcolte par jour sur lexploitation Taux de TAG aprs carence 4341,1 kg 30% Masse de TAG en sortie de rcolte par jour et par ligne 1302,3 kg

1723,4 tonnes 30% Masse de TAG en sortie de rcolte par jour sur lexploitation 517,0 tonnes

Masse dalgues en sortie de rcolte par an sur lexploitation Taux de TAG aprs carence

413615,7 tonnes 30% Masse de TAG en sortie de rcolte par an sur lexploitation 124086,7 tonnes

Ainsi la production de Dunaliella salina sur les marais salants des Salins de Giraud nous donnerait environ 125 000 tonnes de triglycrides. Il faut attendre la suite du processus de transformation pour dterminer le nombre de bioraffineries quil faudrait pour produire 300 000 tonnes de biodiesel (soit 0,9% de la consommation franaise de diesel en 2007).

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BIBLIOGRAPHIE [1] Biodiesel et micro-algues http://www.spectrosciences.com/spip.php?article26, Guillaume Calu [2] Biodiesel from microalgae,Yusuf Chisti, Biotechnology Advances 25 (2007) 294306 [3] Site internet de lentreprise Earthrise Nutritional [4] Capture biologique du CO2. Utilisation de micro-organismes photosynthtiques, Jack LEGRAND, Sminaire La biomasse vgtale pour la production dnergie , Paris, 9 novembre 2007 [5] La production de biocarburant lipidique avec des microalgues : promesses et dfis, J.-P. Cadoret et O.Bernard, Article paru dans le journal de la Socit de Biologie, 202 (3), 201-211 (2008) [6] Effect of salt concentration on intracellular accumulation of lipids and triacylglyceride in marine microalgae Dunaliella cells, M. Takagi [7] Manuel de culture artisanale pour la production de spiruline, par Jean-Paul JOURDAN [8] Algal culturing techniques, R. A. Andersen [9] Microalgae as a source of liquid fuels, J.R. Benemann, J.C. Weissman page 125 [10] Commercial production of microalgae : ponds, tanks, tubes and fermenters, Michael A. Borowitzka [11] Gas exchange and Carbon allocation in D.salina cells in response to the Nitrigen source and CO2 concentration used for growth, Mario Giordano and George Bowes, Plant Physiol. 1997 November; 115(3): 10491056 [12] Effets de la concentration en sel sur laccumulation de lipides et de triglycrides chez Dunaliella [13] A hundred years of Dunaliella research: 19052005, Aharon Oren, 2005

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