Bacteriología

Generalidades > Introducción

Las bacterias o eubacterias son microorganismos
unicelulares que pertenecen al dominio Bacteria. Los
miembros de este dominio tienen diferencias con aquellos
pertenecientes a los otros dos dominios, Archaea y Eukarya.
En la Tierra, existen sólo dos tipos básicos de células que son
estructuralmente muy diferentes: las procariontes y las
eucariontes. Las bacterias son células procariontes.
Estas células poseen un único cromosoma desnudo, es
decir, que este cromosoma no se halla envuelto por una
membrana nuclear sino que se halla en el citoplasma.
Algunos investigadores se refieren a este cromosoma desnudo
como nucleoide o núcleo primitivo. Otra de las
características principales de las células procariontes es que
no poseen organelas rodeadas por membranas como
retículos endoplásmicos, mitocondrias, aparato de Golgi o
lisosomas.
Las eubacterias poseen las siguientes características:
• Presentan una pared celular, con excepción de los
Mycoplasmas, por fuera de la célula que otorga rigidez y
protección en medios osmóticamente inadecuados.
• La membrana citoplasmática posee una estructura
trilaminar típica y está formada por lípidos, proteínas y
pequeñas cantidades de hidratos de carbono.
• Se reproducen por fisión binaria o división simple.
• No poseen un núcleo verdadero sino un cromosoma de
DNA que se encuentra, más o menos libre, en el
citoplasma.
• No poseen organelas rodeadas por membranas.
• Sus ribosomas son 70s formados por las subunidades
30s y 50s.
 • Poseen gránulos citoplasmáticos que son
acumulaciones de materiales de reserva como
polisacáridos, lípidos y polifosfatos.

Ultraestructura bacteriana
Dentro de las eubacterias existen tres grupos de bacterias
que pueden ser diferenciados en relación a la estructura de
la pared celular. Para poder diferenciar a estos grupos no es
necesario utilizar complejos sistemas de identificación, y
basta con un microscopio óptico y unas cuantas soluciones de
colorantes.
La forma más sencilla de iniciar una identificación del
microorganismo que se desea estudiar es realizar una
coloración o tinción de Gram. La tinción de Gram es una
tinción diferencial porque no todas las células se tiñen de la
misma manera y permite discriminar entre dos grandes
grupos de eubacterias, las eubacterias Gram positivas y Gram
negativas.
Los microorganismos Gram positivos, como el
Staphylococcus aureus, adquieren un color violeta después de
la coloración de Gram debido a que contienen una pared
celular estructuralmente muy diferente a la de los
microorganismos Gram negativos, como la Escherichia coli,
que adquieren un color rosado.
El tercer grupo de eubacterias es el de los Bacilos Acido-
Alcohol Resistentes (BAAR) que pueden ser diferenciados
utilizando la coloración de Ziehl-Neelsen. La diferencia en la
coloración no se debe a reacciones químicas con ciertos
componentes de la pared sino a la estructura física de la
misma.

Generalidades >
Microorganismos Gram positivos
Las eubacterias Gram positivas son células con una gruesa
pared celular de peptidoglicano.
Estás células poseen una membrana citoplasmática con
fosfolípidos y proteínas. Por fuera de la membrana
citoplasmático se encuentra la pared celular que está
compuesta por una ancha capa de peptidoglicano. Este
peptidoglicano es una macromolécula gigante formada por
cadenas de un dímero compuesto por N-acetilglucosamina y
N-acetilmurámico. A su vez, estas cadenas se encuentran
unidas entre sí mediante péptidos, que son pequeñas cadenas
de aminoácidos que se entrecruzan. Estos puentes peptídicos
son característicos de las distintas bacterias y presentan
mayor rigidez cuanto más completo sea el entrecruzamiento.
El peptidoglicano es una malla porosa que otorga forma y
rigidez a la célula, y evita que la célula estalle en medios
hipotónicos. Al ser porosa permite el paso de nutrientes desde
el exterior y el movimiento de enzimas catalíticas y productos
de secreción hacia el exterior de la célula.
La pared celular Gram positiva también contien ácidos
teicoicos y ácidos lipoteicoicos. Los ácidos teicoicos son
cadenas de ribitol o glicerol unidas por fosfodiésteres, y están
unidos covalentemente al peptidoglicano por medio de grupos
fosfodiéster en el oxihidrilo del C6 del N-acetilmurámico. Los
ácidos lipoteicoicos son polímeros de glicerofosfato se
encuentran anclados en la membrana citoplasmática y no
están unidos al peptidoglicano. La función de estos
compuestos sería estructural, pero existen evidencias que
indican que también participarían en la regulación de las
enzimas hidrolíticas que renuevan la pared celular
(autolisisnas) y que serían sitios de fijación de fagos.
 Esquema de las Envolturas de una Eubacteria Gram Positiva

Generalidades >
Microorganismos Gram negativos
Las eubacterias Gram negativas son células con una delgada
capa de peptidoglicano y una segunda envoltura
denominada membrana externa.
Las células se encuentran envueltas por una membrana
citoplasmática formada por una bicapa fosfolipídica y
proteínas. Por encima de esta membrana se encuentra una
fina capa de peptidoglicano que se halla unida
covalentemente a unas lipoproteínas de anclaje que fijan la
membrana externa por medio de porciones lipofílicas. Entre
la membrana citoplasmática y la membrana externa queda
delimitado el espacio periplásmico. Este espacio es ocupado
por el periplasma que es una matriz isotónica respecto al
citoplasma, isotonicidad que es mantenida mediante los
oligosacáridos derivados de membrana (MDO), y en la que se
hallan componentes catalíticos de suma importancia para la
viabilidad celular.
La membrana externa tiene una estructura de bicapa
asimétrica en donde la cara externa esta compuesta por el
lipopolisacarido (LPS) y la cara interna por fosfolípidos.
Además, esta membrana es rica en proteínas, algunas de las
cuales se denominan porinas. La membrana externa funciona
como una barrera de permeabilidad para ciertas sustancias
como antimicrobianos y enlentece el pasaje de otros que son
inactivados en el periplasma. El LPS está formado por tres
regiones: el polisacárido O (Antígeno O), el polisacárido
del centro (KDO) y el lípido A (Endotoxina). La presencia
del LPS en la membrana externa le confiere a la célula una
efectiva protección contra enzimas digestivas y detergentes
como las sales biliares, y dota a la superficie bacteriana con
una fuerte hidrofilicidad que le permite a la célula evadir la
fagocitosis, tener cierta resistencia al complemento, evitar la
respuesta inmune específica por alteración de la superficie
antigénica y adherirse a ciertas células del hospedador.
Las porinas son poros o canales proteicos no específicos que
pueden ser atravesados por pequeñas moléculas hidrofílicas.
En la membrana externa se encuentran otras proteínas que
funcionan como canales de difusión específicos y facilitan el
paso de di, tri y oligosacáridos.
 Esquema de las envolturas de una eubacteria Gram Negativa

Generalidades > Bacilos Acido-

Alcohol Resistentes
Los microorganismos pertenecientes al género
Mycobacterium se caracterizan por tener una pared celular
completamente diferente a las restantes eubacterias. La
pared de las Mycobacterias posee un alto contenido de lípidos
que la hace impermeable a los agentes hidrofílicos, por lo
tanto estos microorganismos no se tiñen adecuadamente con
los reactivos utilizados en la coloración de Gram y no pueden
ser clasificados como Gram positivos o negativos. Las
Mycobacterias son teñidas adecuadamente por el método de
Ziehl-Neelsen (Tinción Acido-Rápida o Acid-Fast Stain)
que utiliza como solución decolorante una mezcla de etanol y
ácido clorhídrico. Estos microorganismos una vez coloreados
son resistentes a la decoloración ácido-alcohólica y por eso se
denominan Bacilos Acido Alcohol Resistentes (BAAR).
Los microorganismos del género Mycobacterium contienen
una membrana citoplasmática formada por una bicapa lipídica
similar a las restantes eubacterias. Por encima de esta
membrana se encuentra el rígido peptidoglicano que
contiene N-glucolilmurámico en lugar de N-acetilglucosamina.
Por medio de una unión fosfodiéster, el peptidoglicano se halla
unido covalentemente al arabinogalactano, un polímero de
arabinosa y galactosa. En la porción más distal y externa de
los arabinogalactanos se hallan fijados los ácidos micólicos
que tienen cadenas carbonadas largas (C60 a C90). Los
glucolípidos son un grupo de compuestos (micolatos de
trealosa, sulfolípidos, micósidos, etc.) que se encuentran
asociados no covalentemente a los ácidos micólicos y se
ubican periféricamente en la pared. Los micolatos de trealosa
(llamados factores de cordón porque su presencia produce
cultivos que tienen forma de cordones serpenteantes) y
sulfolípidos se encuentran principalmente en las cepas de
Mycobacterias más virulentas. El lipoarabinomanano (LAM)
es un compuesto que se halla anclado en la membrana
citoplasmática. El LAM es considerado como el equivalente
mycobacteriano del lipopolisacárido de las Gram negativas
debido a que provoca una importante respuesta
antimicrobiana en macrófagos. En las cepas de Mycobacterias
más virulentas la arabinosa terminal del LAM está recubierta
con residuos de manosa (manLAM) a diferencia de las cepas
no virulentas no están recubiertas (AraLAM). Además, el LAM
también podría servir como poro para el paso de los
nutrientes a través de la pared celular. En la pared celular
también se encuentran proteínas inmunoreactivas que son
utilizadas con fines diagnósticos (PPD).
El Mycobacterium tuberculosis es el agente etiológico de la
tuberculosis, una enfermedad que primariamente produce
lesiones en los pulmones y que puede causar la muerte si nos
es tratada en forma adecuada. Existen otras Mycobacterias
capaces de producir infecciones en el hombre. El M. bovis
también causa tuberculosis, mientras que las infecciones
producidas por M. avium, M. kansakii, M. fortuitum y M.
chelonei son consideradas oportunistas y no tuberculosas. La
lepra es una infección causada por el Mycobacterium leprae
que es un parásito intracelular obligado que se multiplica
lentamente en células fagocitarias mononucleares como los
histiocitos de la piel y en las células de Shwan de los nervios.
La tuberculosis es una enfermedad de distribución mundial
pero con consecuencias devastadoras en los países en
desarrollo. En el año 1993 la Organización Mundial de la Salud
(OMS-WHO World Health Organization) declaró a la
tuberculosis una "Emergencia Global". Se estima que un
tercio de la población mundial está infectada con el M.
tuberculosis, y que en la próxima década serán infectadas
más de 300 millones de personas de las cuales 90 millones
desarrollarán la enfermedad y 30 millones morirán por ella.

Esquema de las envolturas de una eubacteria Acido-Alcohol Resistente