Anlisis de Frmacos

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5. ANLISIS DE FRMACOS





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5- ANLISIS DE FRMACOS

1.- INTRODUCCIN

Fundamento

Los analgsicos son frmacos que alivian el dolor sin producir prdida de
conciencia. Se clasifican en opiceos, derivados del opio (morfina y codena) y
no opiceos (aspirina, paracetamol e ibuprofeno). La accin de estos ltimos
se basa en la inhibicin de la sntesis de prostaglandinas (mediadores del
dolor y la inflamacin) en los tejidos perifricos.
El cido acetilsaliclico, muy conocido bajo el nombre comercial de
Aspirina, es el frmaco ms utilizado frente a la fiebre, el dolor leve o
moderado y la inflamacin. Estudios recientes parecen indicar que su
ingestin moderada puede reducir el riesgo de accidentes cardiovasculares y
de cncer rectal. Sin embargo, su utilizacin no est exenta de peligro, ya que
puede irritar la mucosa gstrica y, en nios que padezcan gripe o varicela,
eleva el riesgo de padecer el sndrome de Reye.
El paracetamol acta como analgsico y antipirtico, pero no disminuye
la inflamacin como otros analgsicos. Presenta la ventaja de que no irrita la
mucosa del estmago, pero una sobredosis puede provocar graves lesiones en
el hgado.
La cafena es un compuesto que tambin se suele incluir en la
formulacin de este tipo de frmacos ya que estimula el sistema nervioso y
reduce la fatiga o debilidad.
Y la sacarina se aade principalmente por sus propiedades edulcorantes
que mejoran el sabor del frmaco y facilitan su ingestin por parte del
enfermo.
El cido acetilsaliclico y el paracetamol forman parte de muchos
analgsicos, ya sea solos o mezclados con otros componentes como la cafena.
En esta prctica se propone la determinacin de ambos compuestos en
preparados farmacuticos mediante cromatografa de lquidos con deteccin
UV. La cuantificacin se lleva a cabo por el mtodo de calibracin de la recta
externa. Aunque no se pretenda la cuantificacin de la cafena ni de la
sacarina, es conveniente inyectar un patrn de estas sustancias para poder
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identificar los picos correspondientes al paracetamol y al cido acetilsaliclico
en los preparados que contengan los cuatro compuestos.

Material
Cromatgrafo de lquidos con detector UV fijado a 280 nm y con una velocidad
de flujo de 1.5mL.min
-1

Filtros de membrana de nylon de 0,45m de dimetro de poro
Jeringuilla

Preparacin de disoluciones
Preparacin de la fase mvil
agua/metanol 62:38 (v/v)

Preparacin de patrones para determinar el tiempo de retencin de cada
compuesto
Disolucin patrn de paracetamol de 1g.L
-1
: se pesan, en granatario, 0,1g de
paracetamol, se disuelven con fase mvil y la disolucin obtenida se transfiere
a un matraz de 100mL, enrasando a ese volumen con ms fase mvil.
Disolucin patrn de cido acetilsaliclico de 1g.L
-1
: se pesan en balanza
analtica 0,1g de cido acetilsaliclico, se disuelven con fase mvil y la
disolucin obtenida se transfiere a un matraz de 100mL, enrasando a ese
volumen con ms fase mvil.
Disolucin patrn de cafena de 1g.L
-1
: se pesan en balanza analtica 0,1g de
cafena, se disuelven con fase mvil y la disolucin obtenida se transfiere a un
matraz de 100mL, enrasando a ese volumen con ms fase mvil.
Disolucin patrn de sacarina de 1g.L
-1
: se pesan en balanza analtica 0,1g de
cido acetilsaliclico, se disuelven con fase mvil y la disolucin obtenida se
transfiere a un matraz de 100mL, enrasando a ese volumen con ms fase
mvil.

Preparacin de patrn de cuantificacin, disolucin multicomponente
Se preparar una nica disolucin en la que se encuentre paracetamol de
1g.L
-1
, cido acetilsaliclico de 3g.L
-1
, cafena de 0.32g.L
-1
, sacarina de
0.2g.L
-1
. Para ello pesan, en balanza analtica, 0,1g de paracetamol, 0,3g de
cido acetilsaliclico, 32mg de cafena y analtica 20mg de sacarina, se
disuelven con fase mvil y la disolucin obtenida se transfiere a un matraz de
100mL.
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Aadir a este patrn cido benzoico, que se emplea como patrn interno, y
poder recalcular las concentraciones de cada sustancia patrn. Se emplearn
50mg de cido benzoico para 100mL.
Todo ello se enrasa a 100 mL con fase mvil.
A partir de este primer patrn se preparar un segundo y un tercero mediante
dilucin. Para ello se toman 5mL con una pipeta aforada de la primera y se
llevan a 10mL en un matraz aforado. A partir de este segundo se prepara un
tercero operando de igual manera. Se toman 5mL de la segunda disolucin
patrn y se enrasa a 10mL, siempre empleando fase mvil.

Preparacin de patrn interno
Disolucin de cido benzoico 200mg a 100mL

Preparacin de la muestra
Se pesan 3 4 comprimidos y se calcula el peso medio de un comprimido. Se
trituran en un mortero y se pesa con precisin de 0,1mg una muestra de
aproximadamente 0,1g. Se introduce la muestra en un vaso de 100mL, se
disuelve con fase mvil, se filtra si fuera necesario y se transvasa
cuantitativamente a un matraz aforado de 100mL, donde se enrasa con fase
mvil. A partir de esta disolucin se debe preparar otra, ms diluida, que se
inyectar en el cromatgrafo, para ello ser necesario conocer la cantidad
aproximada de cada compuesto por comprimido (indicado en el prospecto del
medicamento). Una vez conocida, se diluir de tal manera que la
concentracin quede entre el primer y el segundo patrn. La dilucin hay que
hacerla con fase mvil.

Procedimiento
Antes de inyectar cualquier soluto, es necesario acondicionar la columna
cromatogrfica, para lo que se hace circular la fase mvil por el sistema
durante unos 15 minutos.
A continuacin se filtra una cierta cantidad de las disoluciones patrn diluidas
a travs de una membrana de nylon de 0,45m de poro, utilizando como
sistema de filtracin una jeringuilla. Se inyectan los patrones en el
cromatgrafo y se determinan los tiempos de retencin correspondientes a
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cada sustancia. Posteriormente inyectar los patrones de distintas
concentraciones para obtener las rectas de calibrado correspondientes.

Finalmente, se filtra una pequea cantidad de la muestra a travs de la
membrana de nylon de 0,45m, se inyecta y se identifican los picos a partir de
los tiempos de retencin identificados previamente.

Cuestiones

1. Indique los tiempos de retencin caractersticos de cada uno de los
cuatro compuestos estudiados.
2. Represente las reas de pico obtenidas frente a concentracin de patrn
inyectado para cada uno de los patrones empleados. Calcule el
contenido de cada una de las sustancias estudiadas presentes en la
muestra.
3. Justifique el empleo de un compuesto, el cido benzoico, que acta
como patrn interno.
4. Justificar el empleo de un volumen de patrn de 100mL para el ms
concentrado y no de volmenes inferiores.