Jacob, J. C. F. et al.

, 2002
109
SUSCEPTIBILIDADE ANTIMICROBIANA DE SWAB UTERINO E DA FOSSA
CLITORIANA DE GUAS COM SUBFERTILIDADE
JULIO CSAR FERRAZ JACOB
1
VERA LUCIA TEIXEIRA DE JESUS
1
HELCIMAR PALHANO BARBOSA
2
MARINA FERREIRA ZIMMERMAN
4
ANDREA GOMES DA SILVA
3
CELY MARINI MELO
3
ABSTRACT: JACOB, J. C. F.; JESUS, V. L. T. de; BARBOSA, H. P.; ZIMMERMAN, M.
F.; SILVA, A. G. da; MELO, C. M.; Antimicrobic susceptibility of uterine and clitoral
swabs of mares with endometritis. Rev. Univ. Rural, Sr. Cin. da Vida, V.22 n2,
2002 (Suplemento), p. 109-114. 15 uterine swabs and 15 clitoral fossa swabs were
examinated from Mangalarga Marchador mares with endometritis. The mares were from
Rio de Janeiro and Minas Gerais and were examinated during the 2001 breeding
season.Twenty five swabs (83,3%) had bacterial growth. The following bacteria were iso-
lated from the uterine swabs: Enterobacter sp. (30,8%), Escherichia coli (23,0%), Strepto-
coccus sp (15,4%), Proteus sp. (15,4%), Klebsiella sp (7,7%), and Citrobacter sp (7,7%).
Clitoral fossa isolated were: Escherichia coli (33,3%), Klebsiella sp (25,0%), Enterobacter
sp. (16,7%), Citrobacter sp (16,7%), and Streptococcus sp (8,3%). In vitro antimicrobial
susceptibility tests from uterine samples indicated that microrganisms were susceptible
to sulfazotrin (86,0%), enrofloxacin and florfenical (77,7%). Microrganisms isolated from
the clitoral fossa cultures were more susceptible to enrofloxacin (96,0%) and florfenical
(92,0%).13,8%were resistant to neomicin, and 16,6% were resistant to penicillin.
KEY WORDS: Antimicrobic susceptibility, mares, sub fertility, uterus, clitoral fossa.
1
Professor do Instituto de Zootecnia da UFRuralRJ;
2
Coordenador de Assistncia Tcnica Schering Plough
Coopers;
3
Aluna do Curso de Medicina Veterinria da UFRuralRJ;
4
Mdico Veterinrio Autnomo.
INTRODUO
O lmen uterino de uma gua frtil
normal bacteriologicamente estril e tem
a capaci dade de recuperar-se da
contaminao natural ocorrida aps o
acasal amento ou procedi mentos
veterinrios. A resposta natural do tero s
bactrias introduzidas nesse perodo, deve-
se a l i berao de neutrfi l os pel o
endomtrio, resultando em uma resposta
inflamatria que combate s bactrias
geralmente dentro de 24 horas. Os sub-
produtos deste evento aparecem como
fludo, naturalmente eliminado, deixando o
tero estril dentro de poucos dias
(HASSLER, 2002; PYCOCK, 1999).
Endometrite refere-se inflamao aguda
ou crnica da camada interna do tero, o
endomtrio. Como descrito acima so
normais breves episdios de endometrite
transitrias, ainda por complicaes outras
como deficincia no mecanismo de defesa
da resposta imune humoral ou celular
(WATSON & STOKES, 1990) ou pela
contrati l i dade uteri na i nadequada
(TROEDSSON & LIU, 1991) causando uma
endometrite persistente. As alteraes
uterinas em conseqncia de infeces
bacteri anas, resul tam em fal has de
concepo, resultado direto da ao dos
microrganismos que penetram no tero,
Univ. Fed. Rural do Rio de Janeiro
Revista Universidade Rural, Srie Cincias da Vida
V. 22, n. 2, p. 109-114, 2002. Suplemento
Susceptibilidade antimicrobiana de swab uterino... 110
diminuindo de forma considervel, as
chances de uma gestao a termo (GASTAL
et al . , 1989). Uma variedade de
microrganismos vem sendo considerada
causadora de infertilidade em guas, morte
fetal e infeco neonatal. Esta associao
no est bem esclarecida, muitos desses
microrganismos tm sido cultivados partir
de guas e garanhes com fertilidade normal
e sem evidncia clnica da doena. Contudo,
sabido que garanhes albergam uma
variedade de bactrias no trato genital,
principalmente na genitlia externa, as
quais so transferidas para as guas no
momento da cobertura. LANGONI et al.
(1994) de 810 amostras de swabs uterinos
colhidos de guas de diferentes raas,
isolaram Streptococcus sp. (40,6%);
Staphylococcus sp. (23,5), Escherichia coli
(12,3%), Rhodococcus equi (7,4%),
Klebsiella pneumonie (3.6%), e em menor
freqncia Cndida albicans, Pseudomonas
aeruginosa, Proteus mirabilis, Alcaligenes
fecalis e outros. Estes - quando submetidos
ao teste de susceptibilidade antimicrobiana
- demonstraram maior sensibilidade ao
cloranfenicol e gentamicina. SILVA et al.
(1999) de 206 swab uterinos e cervicais de
guas de vrias raas de diversas regies
do Estado de Minas Gerais, encontraram
em 164% swabs presena de
mi crorgani smos causadores de
endometri tes, tendo si do i sol ado
Streptococcus equi subesp. zooepidemicus
(25,7%), Escheri chi a col i (15,1%),
Staphyl ococcus aureus (9,2%),
Pseudomonas aeruginosa (3,9%), sensveis
in vitro a amicacina e gentamicina (70,2%),
ampicilina (59,5%) e cloranfenicol (59,5%).
Segundo WATSON & STOKES (1990), a
presena de Streptococcus equi subesp.
zooepidemicus est associada aos casos
de endometrites persistentes. O ambiente
vaginal bem como o lmen cervical
apresenta isolamento de microrganismos
superior ao uterino (McKINNON, 1992). A
flora bacteriana da fossa clitoriana eqina,
a qual constituda freqentemente por:
Escherichia coli, Streptococcus faecalis,
Corinebacterium spp, Staphylococcus
aureus, Streptococcus spp (b-hemoliticus),
Staphylococcus albus e Pseudomonas
aeruginosa (McKINNON, 1992), deve ser
cultivada para o diagnstico da endometrite.
O tratamento de guas com infeco
bacteriana deve-se iniciar com a eliminao
das causas predisponentes (cirurgia para
pneumovagina e/ou tcnicas de cobertura
mel horadas), al m de manej o para
minimizar contaminaes, acompanhada
pela terapia de lavagem e subseqente
infuso de antibiticos de longo espectro,
sendo i deal a i denti fi cao do
mi crorgani smo e a real i zao do
anti bi ograma (HASSLER, 2002). O
tratamento teraputico das endometrites
inclui o uso de imunoestimulantes e a
aplicao de antibiticos por via sistmica
ou por infuses uterinas (ZINGHER, 1996).
A seleo do antibitico deve ser baseada
tanto na determinao da prevalncia das
bactrias causadoras e a susceptibilidade
desses mi crorgani smos frente aos
antibiticos (SILVA et al., 1999). Em guas
tratadas com gentamicina, houve uma
melhora na taxa de concepo, segundo
HOUDERHELL & HENNESSEY, (1972).
Novos antibiticos de amplo espectro como
a enrofl oxaci na, admi ni strada
intravenosamente em guas, demonstrou
90% de sensibilidade para S.aureus, E.coli,
Salmonella sp, Klebsiella spp e Pasteurella
sp. (HAINES et al., 2000), tendo a mesma
si do uti l i zada nesse trabal ho para o
tratamento parenteral de guas com
endometrite. A lavagem uterina uma forma
de tratamento bastante citada, utilizada
tanto isoladamente quanto associada a
anti bi ti cos, porm, nenhum estudo
controlado documentou ou rejeitou sua
eficcia, a qual consiste na remoo de
microrganismos, neutrfilos afuncionais,
substncias que interfiram na potncia de
antibiticos e, neutrfilos funcionais que
estimulam a contratilidade uterina, ajudando
na limpeza fsica do tero (HASSLER,
2002). O uso i ndi scri mi nado de
antibacterianos no diminui a incidncia da
Jacob, J. C. F. et al., 2002
111
metrite ou infertilidade em guas. Em
estudo recente sobre amostras isoladas de
guas com infeco uterina, no foram
sensveis a penicilina, clorotetraciclina,
estreptomi ci na, oxi tetraci cl i na e
sulfonamidas. Em outras amostras foram
sensveis ao cloranfenicol e gentamicina;
mas em questo de tempo, devido ao seu
uso indiscriminado, tornaram-se resistentes
(LlOYD & ABBITT, 1996). A indicao da
terapia antimicrobiana, no caso de infeco
microbiana patolgica do tero, deve-se
considerar cultura positiva mais sinais
clnicos ou histrico de infertilidade, ou
ambos. O objetivo desse trabalho foi
determinar a susceptibilidade ao
antimicrobiana in vitro de antibiticos
utilizados na rotina para tratamento da
endometrite eqina.
MATERIAL E MTODOS
Durante a estao de monta de 2001,
15 guas da raa Mangalarga Marchador,
com i dade entre ci nco e dez anos,
submetidas ao processo de coleta de
embri es para a transfernci a, que
apresentam o histrico de presena de
muco sujo durante a coleta do lavado de
embries, e permaneceram vazias ao
trmino da estao. As guas examinadas
foram provenientes de trs diferentes haras,
com o mesmo manejo reprodutivo
(inseminao artificial e transferncia de
embries), situado nos municpios de Muria
e Leopoldina do Estado de Minas Gerais, e
do municpio de Seropdica do Estado do
Rio de Janeiro. Com intuito de determinar a
eficincia in vitro dos antibiticos utilizados
para o tratamento da endometrite eqina,
procedeu-se coleta bacteriolgica da fossa
clitoriana e do contedo uterino. Para tal,
as guas foram contidas adequadamente
em tronco, sua cauda envolvida com uma
bandagem e presa para cima. Para coleta
do contedo da fossa clitoriana, antes de
fazer a assepsia da regio perivulvar e vulvar,
fazia-se a inverso da regio ventral dos
lbios vulvares, e com isso exteriozava-se
o clitris. Ento, o swab era introduzido na
fossa cl i tori ana, e assepti camente
acondicionado no meio de transporte Stuart,
mantido temperatura ambiente. Em
seguida, realizou-se, ento, a higienizao
da regio perivulvar e perineal com gua e
sabo neutro, e enxuta com papel toalha
descartvel. Para a coleta do swab uterino,
utilizou-se uma luva de palpao estril e
lubrificada com KY Gel (UPHOJON). O swab
estril era seguro, protegido na palma da
mo e introduzido na vagina. Com o dedo
indicador na cervix, o swab foi guiado para
dentro do tero e movido para frente e para
trs vrias vezes enquanto estava em
contato com o endomtrio. O swab era
ento removido do tero e novamente
protegido na palma da mo retirando-a do
trato reprodutivo. Aps a retirada do swab,
era acondicionado ao meio de transporte
Stuart e mantido temperatura ambiente
por 24h, em seguida refrigerado, (swab
uterino e da fossa clitoriana) e enviado ao
laboratrio, para proceder ao isolamento
bacteriano e antibiograma. No laboratrio,
o swab coletado do tero e da fossa
clitoriana foram incubados a 37C por 24
horas e aps esse perodo, procedeu-se a
semeadura em placas de agar sangue,
acresci do de 5% de sangue bovi no
desfibrinado e incubao em aerobiose e
microaerofilia, por um perodo de 24 a 96
horas. A identificao dos microrganismos
foi realizada segundo as recomendaes de
KRIEG & HOLT (1984), e os testes de
susceptibilidade a antimicrobianos, pelo
mtodo de difuso em disco (BAUER et al.,
1966), sendo utilizado 10 antibiticos assim
discriminados: Amicacina (AM 10mcg),
Cefalotina (CFT 10mcg), Cloranfenicol (CL
30 mcg), Enrofloxacina (ENO 10mcg),
Florfenicol (FLO 30mcg), Gentamicina (GEN
10mcg), Neomicina (NO 30mcg), Penicilina
(PEN 10 UI), Sulfazotrim (SFT 25mcg) e
Tetraciclina (TT 30mcg). Os critrios de
interpretao dos halos de inibio forma
aqueles estabelecidos pelo fabricante dos
discos de antibiograma.
Univ. Fed. Rural do Rio de Janeiro
Revista Universidade Rural, Srie Cincias da Vida
V. 22, n. 2, p. 109-114, 2002. Suplemento
Susceptibilidade antimicrobiana de swab uterino... 112
RESULTADOS
Das 15 guas vazias ao trmino da
estao de monta, com a presena de
muco sujo aps coleta de embries, foram
isoladas bactrias do contedo uterino de
11 guas (73,3%) as quais apresentaram
crescimento bacteriano. Os microrganismos
isolados foram Enterobacter sp. (30,8%),
Escherichia coli (23,0%), Streptococcus sp
(15,4%), Proteus sp. (15,4%), Klebsiella sp
(7,7%), Citrobacter sp (7,7%). os quais
esto demonstrados na tab. 1.
Microrg. isolado Freq. Isolamento (%)
Escherichia coli 33,3
Klebsiella sp 25,0
Enterobacter sp 16,7
Citrobacter sp 16,7
Streptococcus sp 8,3

Tabela 1. Distribuio dos microrganismos
isolados do contedo uterino.
Quanto ao isolamento de bactrias da
fossa clitoriana, das 15 guas houve
i sol amento em 12 (80%). Foram
identificados: Escherichia coli (33,3%),
Klebsiella sp (25,0%), Enterobacter sp.
(16,7%), Ci trobacter sp (16,7%),
Streptococcus sp (8,3%), demonstrados na
tab. 2.
Nos testes de susceptibilidade diante
dos antimicrobianos utilizados, observou-se
que a maioria dos microrganismos foi
sensvel in vitro a ao da sulfazotrim
(86,0%), seguidos pelo enrofloxacina e
fl orfeni col (77,7%), gentami ci na e
cl oranfeni col (69,3%) no caso dos
isolamentos de swab uterino. Quanto
sensibilidade dos microrganismos da fossa
cl i tori ana os mai s sensvei s foram
enrofloxacina (96,0%) e florfenicol (92,0%).
E resistentes a neomicina e penicilina
(13,8% e 16,6%), para os cultivos da fossa
clitoriana e uterino, respectivamente,
demonstrados nas tabelas 3 e 4.
Microrg. isolado Freq. Isolamento (%)
Escherichia coli 33,3
Klebsiella sp 25,0
Enterobacter sp 16,7
Citrobacter sp 16,7
Streptococcus sp 8,3

Tabela 2. Distribuio dos microrganismos
isolados da fossa clitoriana.
Antib Enterobacter
%
Citrobacter
%
Proteus sp
%
Klebsiella sp.
%
Streptococcus
%
E. coli
%
sensibilidade
%
AM 25 100 100 0 100 33 59,66
CFT 0 0 0 0 100 33 22,16
CL 100 100 100 0 50 66 69,30
ENO 100 100 100 0 100 66 77,66
FLO 100 100 100 0 100 66 77,66
GEN 50 100 100 0 100 66 69,30
NO 0 0 0 0 50 33 13,83
PEN 25 0 100 0 50 0 29,16
SFT 100 100 100 100 50 66 86,00
TT 75 100 0 0 0 33 34,66

Tabela 3. Susceptibilidade antimicrobiana do contedo uterino de guas com endometrite.
Antibiticos: AM-Amicacina, CFT-Cefalotina, CL-Cloranfenicol, ENO Enrofloxacina, FLO-Florfenicol, GEN-
Gentamicina, NO-Neomicina, PEN -Penicilina, SFT-Sulfazotrim, TT-Tetraciclina.
Jacob, J. C. F. et al., 2002
113
Tabela 4. Susceptibilidade antimicrobiana da fossa clitoriana de guas com endometrite.
Antibiticos: AM-Amicacina, CFT-Cefalotina, CL-Cloranfenicol, ENO Enrofloxacina, FLO-Florfenicol, GEN-
Gentamicina, NO-Neomicina, PEN -Penicilina, SFT-Sulfazotrim, TT-Tetraciclina.
Antib E coli
%
Klebsiella
%
Enterobacter
%
Streptococcus sp
%
Citrobacter
%
sensibilidade
%
AM 20 0 100 100 50 54,00
CFT 0 33 50 100 0 36,66
CL 60 100 50 0 100 62,00
ENO 80 100 100 100 100 96,00
FLO 60 100 100 100 100 92,00
GEN 20 66 50 100 50 57,20
NO 0 33 0 100 0 26,60
PEN 0 33 0 0 50 16,60
SFT 60 100 100 0 100 72,00
TT 20 33 50 0 0 20,60

DISCUSSO
Quanto aos microrganismos isolados
tantoda fossa clitoriana, como do tero,
Enterobacter sp. , Escheri chi a col i ,
Streptococcus sp, Proteus sp.; Klebsiella
sp, Citrobacter sp., h controvrsia de sua
importncia no quadro da endometrite
eqina. Alguns autores acham que sua
presena diminui a fertilidade e outros
acham ser insignificante caso no se tenha
o acompanhamento do histrico de falha
reprodutiva ou evidncia clnica da doena.
Deve ser levado em conta tambm outro
fatores como: a idade, deformidade da rea
perineal com subseqente pneumovagina,
desequilbrio endcrino, cobertura por monta
natural, perda do potro ou falta de higiene,
que contribuem para o desenvolvimento da
infeco do trato genital em guas (LlOYD
& ABBITT, 1996). Os resultados dos
exames microbiolgicos do tero foram
positivos em 73,3% (11/15) das guas,
tendo sido isolado com maior freqncia
Enterobacter sp. (30,8%), Escherichia coli
(23,0%), Streptococcus sp (15,4%). E,
sensveis in vitro a sulfazotrim (86,0%),
enrofloxacina e florfenicol (77,7%), seguido
de gentamicina e cloranfenicol (69,3%).
Enquanto para o isolamento da fossa
clitoriana a susceptibilidade antimicrobiana
foi mais evidente para a enrofloxacina e
fl orfeni col (96,0 % e 92,0%),
respectivamente. De acordo com SILVA et
al. (1999) e LANGONI et al. (1994) esses
microrganismos so mais freqentemente
isolados em caso de endometrite eqina,
sendo responsveis pelo quadro de
subferti l i dade.Com refernci a a
sensi bi l i dade frente aos di ferentes
antimicrobianos testados, difere dos
achados de SILVA et al. (1999), que foram
mais sensveis a amicacina e gentamicina
(70,2%), ampicilina e cloranfenicol (59,5) e
dos achados de LANGONI et al. (1994),
cloranfenicol e gentamicina. Sendo os
antimicrobianos de maior sensibilidade
encontrados em nosso estudo, florfenicol e
enrofloxacina existentes no mercado h
cerca de cinco anos, o que comprova que o
uso indiscriminado de antibiticos diminui
a sua ao antimicrobiana, como ocorreu
com a gentamicina que apresentou uma
sensibilidade de (57,2%).
CONCLUSO
Pode-se concluir que a rotina de coleta
de swab bacteriolgico e a realizao do
antibiograma, permitiram a recuperao das
fmeas tratadas contra endometrite com
enrofloxacina para o programa de
transferncia de embries. Portanto houve
concordncia entre o teste in vitro e in vivo
nesse trabalho.
Univ. Fed. Rural do Rio de Janeiro
Revista Universidade Rural, Srie Cincias da Vida
V. 22, n. 2, p. 109-114, 2002. Suplemento
Susceptibilidade antimicrobiana de swab uterino... 114
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